立蛋

前言：想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗？我们特意为您整理了5篇立蛋范文，相信会为您的写作带来帮助，发现更多的写作思路和灵感。

立蛋范文第1篇

立蛋范文第2篇

立鸡蛋用生的。春分的习俗当中有一个特殊的传统习俗，就是“立蛋”，“立蛋”游戏玩法确简单易行且富有趣味，选择一个光滑匀称、刚生下四五天的新鲜鸡蛋，轻手轻脚地在桌子上将它竖起来。虽然失败者颇多，但成功者也不少。春分成了竖蛋游戏的最佳时光，故有“春分到，蛋儿俏”的说法。竖立起来的蛋儿好不风光。

根据经验，应这样春分竖蛋：鸡蛋的表面其实是高低不平的，有许多突起的小山，山高0.03毫米左右，山峰之间的距离在0.5-0.8毫米。根据三点确定一个平面的道理，只要找到三个合适的小山支点，就能使鸡蛋竖立起来了。

祖先的智慧。祖先在四千多年前就对时令节气，天体运行有了掌握判断，到今日仍然准确实用。春分是太阳直射赤道的时段，南北半球昼夜相等，就是说白天黑夜各十二小时等分，谚语说吃了春分饭，一天长一线。地球南北极的地轴与地球绕太阳公转的轨道，处于力的相对平衡状态，地心引力平稳，所以只有在春分这一天，才是鸡蛋能竖着不倒的最佳时间。对于孩子来说，立蛋的过程，也是培养做事耐心、静心、专心的好时机，虽有输赢，也不过是添了些欢笑罢了，大人也乘机在旁边教育鼓励，也是寓教于乐。

（来源：文章屋网 ）

立蛋范文第3篇

在北京密云县的6000亩有机农业示范园中养殖了13万只“特别”的北京油鸡，与其他工业化鸡场中的鸡相比，它们有点“傲慢”。它们不是鸡笼里机械性的“动物工人”，没有较高的“职业素养”，它们随心所欲，经常散步，但却不常下蛋。“供养”着这些特殊油鸡的就是北京百年栗园生态农业有限公司（以下简称为百年栗园），公司通过养殖的北京油鸡，培育出“百年栗园”有机柴鸡蛋、有机柴鸡肉等品牌。

在市面上，百年栗园的鸡蛋价格已经达到1.9元/枚，人们是否愿意多花几毛钱去吃这些“上过房、吃过虫”的北京油鸡下的蛋？

2010年5月，深圳市天图投资管理有限公司（以下简称为天图创投）、天津天图兴盛股权投资基金合伙企业完成了对百年栗园4500万元的投资。融资资金主要用于基础设施建设，包括在百年栗园的北京基地建设了一个北京油鸡的商品化种鸡场，以及一个年产7万吨全自动饲料加工厂等，同时还有一部分用于百年栗园生态园内的景观建设。显然，一向眼疾手快的资本投资者愿意为百年栗园这些有点“傲慢”的种鸡买单。

坚持从蛋入手

“有机天然”的概念在美国已经成为时尚，美国最大天然食品零售商Whole Foods Market曾在华尔街的资本市场上备受追捧。如今，有机农业的热风吹到了中国市场。但摆在超市货柜上的有机水果、有机蔬菜等商品的价格和非有机商品价格的巨大差距也让人叹为观止。百年栗园从鸡蛋入手，用几角钱的价格打开有机鸡蛋的市场。

天图创投的合伙人王岑坦言，在现代农业的投资中，找对人是关键。“投资百年栗园的原因有二，一是对事，二是对人。”王岑说道，“有机农业的行业前景明朗，同时有机鸡蛋相比于其他有机食品的价格更易被消费者接受，更易成为日常消费品；另外，因为百年栗园董事长刘成军是土生土长的密云人，又是知识分子下海经商，在创业的热情、理念和方法上都有优势。”

2005年，刘成军在他的出生地，一个叫“后栗园村”的地方注册成立了公司，旁边的村子叫“前栗园村”，刘成军就给公司起名叫做“百年栗园”。百年栗园依托密云县当地独特的生态优势，发展柴蛋鸡养殖产业，带动了整个密云县有机柴鸡蛋产业发展。

刘成军在摸索过程中，逐渐捋清了百年栗园做全产业链的产业模式。“首先，有机养殖的饲料必须是有机的，我们有1.7万亩有机玉米的种植地。其次是饲料加工厂，百年栗园建立了一个年产7万吨的饲料加工厂。接下来就是进入有机养殖阶段，这个阶段用示范基地做培训，带领农户进行有机养殖。养殖出的产品进行加工后，就进入了最后的销售阶段。从饲料到销售终端，百年栗园建立了一个完善的产业链。”刘成军介绍说。

在这一系列完整的全产业链中，百年栗园的主要盈利环节在种鸡培育、饲料加工和产品销售三部分。尽管百年栗园的定位是全面做有机农业，但刘成军深知想做大先做强的道理。他坚持从鸡蛋入手，在百年栗园的所有产品中，有机鸡蛋和有机鸡肉产品占到所有产品种类的95%，而其他产业链环节生产出的产品仅定位于特殊渠道的礼品销售，短期内没有拓展更多产品的想法。

市场对百年栗园产品的反馈让刘成军非常满意，但示范培训基地里的13万只鸡的存栏量显然供不上市场需求。百年栗园采用“公司＋合作社＋农户”的生产模式，以公司化的管理带动合作社的建立，以合作社的方式带动农户的增收。在百年栗园的示范培训基地的职能中，对其生产的要求很低，主要起科研、示范、培训的作用。在刘成军的带领下，密云县已经有500多家养殖农户、1000多家种植农户加入进来，百年栗园真正的生产在农户中。

摸清了自己的盈利模式，刘成军带着百年栗园走到今日，已经有了过亿的销售收入。

严格把关食品安全

同仁堂的抱柱对联“修合无人见，存心有天知”是刘成军最推崇的祖训。安全是食品行业的隐形炸弹，这也是投资方在投资该行业最为担忧的风险。当许多鸡蛋品牌由于苏丹红事件、三聚氰胺事件纷纷下架时，百年栗园的鸡蛋却依然能够摆在超市货架上。两次食品安全事件对百年栗园来说不仅是考验，更是机会。刘成军敢对百年栗园鸡蛋的食品安全拍胸脯，直言：“你可以不买我的鸡蛋，但是不能说我的鸡蛋不好。”

百年栗园饲养的北京油鸡品种是中国珍贵的优良地方鸡种，被《中国家禽品种志》收录。距今已有300多年的历史，曾经长时间作为宫廷御膳用鸡。相比普通肉鸡，北京油鸡必须散养不能笼养，而且饲养周期较长，同普通肉鸡相比，饲养成本高效益却不高。普通养鸡场里的海兰褐鸡种的产蛋率高达97%，即100天里产97枚蛋，而百年栗园养殖的北京油鸡产蛋率只有40%-50%。但百年栗园的有机鸡蛋的突出特色就是无化学添加的食品安全。

酒香也怕巷子深。百年栗园品牌的忠诚度大于知名度，这对刘成军来说是个问题。但他知道，一个品牌建立的过程中，要耐得住寂寞。刘成军希望百年栗园的基地建成了一个农业观光生态园，希望感兴趣的消费者到生产基地里参观、休闲，对百年栗园做全方位的了解。“有一天，我们希望把我们全程的生产过程放到网上，接受大家的监督。”所以，刘成军将一部分资金用于生态园内的景观建设，希望通过参观提升百年栗园的知名度，也希望通过生态园来倡导有机农业的概念。

在创立百年栗园之前，刘成军做过小学老师，当了10年律师，又做了7年的广告人。转了一圈之后，土生土长在密云的刘成军又回到了这块土地，开始了有机农业的创业历程。“我发现自己真正的兴趣还是在农业，做这些事情能让我有自我满足感。”刘成军真的做成了，如今百年栗园的沼气池供着全村1000多户的燃气，1500户农民也在和百年栗园的合作中获得了每年3.5万元的增收。

为了保证食品安全和品质，百年栗园和农户之间的合作非常紧密。在百年栗园内部，采取“六统一”的方针进行管理。从环境、鸡种、饲料、操作程序、防疫、销售等六方面做到统一，保证每家农户所生产的鸡蛋品质合格。随着百年栗园规模的扩大，吸引人才的需求也在增大。五年以来，百年栗园的技术服务中，大学专科以上学历的成员达30人；销售队伍的骨干人员已有50人的规模，算上分布在超市的销售人员，百年栗园的销售团队有300人的规模。加强团队的建设也是投资方的期待。

紧盯三地布局

北京、上海、深圳是百年栗园主要布局的三大市场，目前产品已进入了上述三地的600多家商超。三个一线城市中高消费者相对集中的区域，以北京为中心辐射华北地区、以上海为中心覆盖华东地区、以深圳为中心立足华南地区，为百年栗园走向二三线城市打好了市场基础。

在北京站稳脚跟后，百年栗园打入上海市场。从市场反馈来看，上海市场的增幅表现让刘成军非常满意。刘成军预计到2011年年底，三地的销量会达到均衡，可能华东地区还会超过北京的销量。

“我们2011年能达到存栏量400万只，2012年能达到700万只。但是产品仍然会处于比较紧俏的状态。”刘成军表示，今后在华东和华南地区也会建立生产基地，主要用于鸡蛋的供应。尽管比普通鸡蛋、鸡肉产品价格高一些，但刘成军认为有机鸡蛋、有机鸡肉产品已经成为日常消费品。从早餐配比来看，一般人在早餐时会选择一个鸡蛋加一块干粮，多花几角钱选择一个无化学添加、具有蛋香味的鸡蛋，在价格上没有障碍。所以决定人们消费有机食品的因素不是价格，是理念。这也是刘成军着力布局北京、上海、深圳三个市场的主要原因。

立蛋范文第4篇

近来媒体铺天盖地对李宁放弃赞助国家体操队一事，做了海量报道，对该事件的解读，也基本趋于一致，李宁差钱了，供不起了，真的吗？李宁从来不差钱，现在不差，将来也不会差，为何？且容文后再做解释。我私下，将该事件视为一个信号弹，什么信号呢？李宁吃了秤砣，铁了心，要将“李宁品牌国际化战略”执行到底了；李宁品牌国际化进程，将向纵深全速推进！用李宁的话来讲，就是：“李宁是世界的李宁，不是中国的耐克；李宁不做中国的耐克，要做世界的李宁！”此时此刻，我脑海里轰鸣着：“向前进、向前进”

无巧不成书，可巧的是，我近来受邀参加一位著名书法家举办的书法展，我临时有事，到展厅时，稍晚了些，本想上前向大书法家致歉，却发现他被众人围在中间，正在布道。据说这位大书法家能透过一个人的笔迹看出一个人的寿命，据传八九不离十，我忙将耳朵拉长，使劲听，大书法家讲道：“进”字的繁体字是“進 ”，从字形上来看，走字底上面是个“佳”，向前走越走越好的意思；可是简化后的“进”字呢，走字底上面是个“井”，向前走就掉井里去了，这个意境不好。我听了，心里却不以为然，我觉得还是简体的“进”字更佳些，它就像一盏红灯，在不断警示前进的人们：“当心，前面有井，别掉井里去了！”其实呢，这句警语，也恰好是我想送给李宁的：“当心，品牌国际化战略，可能是陷阱，千万当心，别掉进去了！”

为何说李宁的“品牌国际化战略”可能是“陷阱”呢？《李宁品牌壮语：一切为了“赢”》一文网上发表后不久，很多策划界同行给我发来贺信，表示认同我给李宁做的系统品牌规划。有位同行还批了我一下，说我文章标题中的“壮语”一词很出彩，美中不足的是，文中却漏掉了一个重要信息，李宁是“壮族”人。我趁热打铁与各路高手集思广益，对李宁困局做了诊断和分析，大家基本达成共识，李宁品牌年轻化战略，并非导致李宁困局的根本原因，本质问题可能主要出在品牌国际化战略上，因为“品牌年轻化战略”是为“品牌国际化战略”服务的，如果后者不小心掉进了井里，前者当然也跟着落井下石。

再重复一遍李宁的话：“李宁是世界的李宁，不是中国的耐克；李宁不做中国的耐克，要做世界的李宁！”李宁品牌变得年轻了，更有活力了，更有吸引力了，这本身是大好事，问题是，如果变得年轻的“世界的李宁”，相当于“世界的耐克”，相当于“世界的阿迪”，那么，李宁是不是将自己推进了同质化竞争的泥沼？是不是将自己的差异化优势给自我埋没了呢？

请注意，我说的是“相当于”，而不是“等同于”。果如此，假设李宁已经赢得梦想，那么，世界运动品牌三强位次排列，依次是耐克第一、阿迪第二、李宁第三，从品牌位势层面说，这好像是好事，其实呢，如果从消费者层面来看，却并非好事，为何？原来，消费者做选择，是二选一，或者选耐克阿迪兄弟（国际大牌），或者选李宁（中国大牌），李宁与耐克阿迪是站在同一个平台上，是并列冠军，等着消费者来颁金牌；现在呢？消费者做选择，是三选一，李宁不再与耐克阿迪俩兄弟站同一个平台上了，而是变成了由上至下站台阶，李宁不再是耐克阿迪的并列冠军了，而是成了铜牌获得者，消费者可能给耐克阿迪颁完金牌和银牌后，早就忘了给李宁颁铜牌了。

用一句话来概括：“李宁只要成为中国的李宁，自然就是世界的李宁；李宁只要做好中国的李宁，就是无与伦比的世界的李宁”！不同的是，这个“世界的李宁”，是金牌获得者，而不是可有可无、低三下四的铜牌获得者。

品牌“返轻”战略，可能，才是正确的品牌年轻化战略

大家伙一番研讨后，觉得李宁一直在谋求的“去李宁化”，可能是一个“伪命题”，李宁品牌根本就不存在“去李宁化”这回事，除非李宁品牌改姓更名叫“零零”。李宁该做、当作的不是“去李宁化”，而是“给李宁品牌定格”，目的是从根本上解决李宁品牌年轻化这个大问题！

李宁想通过换标换广告语来实现品牌年轻化，现在来看，基本是失败的，为何？动了皮毛，没有动本——“形象”，用专业术语说就是“品牌印记”！品牌年龄显然与“形象”相关，譬如肯德基爷爷、麦当劳叔叔，没做过市调，李宁品牌是让消费者脑中想到了“爷爷”|、“叔叔”，还是什么？其实，也不用市调，显然，爷爷辈、叔叔辈的成分要大一些，因为李宁的“形象”如今是“一头白发”。

如果李宁如李小龙一般英雄早逝，可能就像李小龙一样自然定格在那个年龄了，当然，李宁不必为公司和品牌献出宝贵的生命，只需要拿出一些当年夺冠时的冠军靓照，贴满店铺，贴满媒体，就可给品牌年龄定格了。我想，称之为“返轻”，应该贴切些。

当然，李宁也未必就一定要退居幕后，如果李宁把白发染成类似疯狂英语李阳的满头红发，倒立在摇滚巨星崔健的板寸头上，四只手一起弹着一把迷彩电吉他，先高歌一曲《红旗下的蛋》，再齐唱一曲《路上的摇滚》，还不把小伙伴们、大伙伴们、老伙伴们都给齐刷刷惊呆了？老巴菲特见了，兴奋过度，大手一挥，号令天下，把钱票都投给李宁，保证李宁股票立马一飞冲天！

为何要把崔健搬出来献丑？因为崔健和李宁，可谓是异曲同工的《义勇军进行曲》，也可说是催人奋进的同一首歌，对三四十岁的人来说，大概不用解释！还有另一原因，为了助力李宁尽快走出困局（弦外之音：其实，我是杞人忧天，其实，我是皇帝不急太监急，李宁是一定会、一定能走出困局的，因为李宁是“红旗下的蛋”，现在的李宁只是走在“路上”，未来“赢”是必然的，只是早一些、晚一些的问题！李宁本质上，不是“私企”，而是“央企”，所以是一盘“活棋”，更是一盘“和棋”。），我经常到一座专业体育商城去踩点，商城里汇聚了耐克、阿迪和李宁等众多运动品牌，每当我走到商城门口，都被高音喇叭里的用英文唱响的“耐克腔”、“阿迪调”刺痛，我在想，如果高音喇叭奏响的是冠军领奖时必放的雄壮的《国歌》、或者是让人踏歌寻踪的《红旗下的蛋》，那么，会不会让李宁成为消费者眼中的“唯一”和“偏爱”呢？我想，很有可能，私心人人有、偏心人人有！

立蛋范文第5篇

关键词：蛋白质，质谱分析，应用

前言：

蛋白质是生物体中含量最高，功能最重要的生物大分子，存在于所有生物细胞，约占细胞干质量的50%以上，作为生命的物质基础之一，蛋白质在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着至关重要的作用，因此蛋白质也是生命科学中极为重要的研究对象。关于蛋白质的分析研究，一直是化学家及生物学家极为关注的问题，其研究的内容主要包括分子量测定，氨基酸鉴定，蛋白质序列分析及立体化学分析等。随着生命科学的发展，仪器分析手段的更新，尤其是质谱分析技术的不断成熟，使这一领域的研究发展迅速。

自约翰.芬恩(JohnB.Fenn)和田中耕一(Koichi.Tanaka)发明了对生物大分子进行确认和结构分析的方法及发明了对生物大分子的质谱分析法以来，随着生命科学及生物技术的迅速发展，生物质谱目前已成为有机质谱中最活跃、最富生命力的前沿研究领域之一[1]。它的发展强有力地推动了人类基因组计划及其后基因组计划的提前完成和有力实施。质谱法已成为研究生物大分子特别是蛋白质研究的主要支撑技术之一，在对蛋白质结构分析的研究中占据了重要地位[2]。

1．质谱分析的特点

质谱分析用于蛋白质等生物活性分子的研究具有如下优点：很高的灵敏度能为亚微克级试样提供信息，能最有效地与色谱联用，适用于复杂体系中痕量物质的鉴定或结构测定，同时具有准确性、易操作性、快速性及很好的普适性。

2．质谱分析的方法

近年来涌现出较成功地用于生物大分子质谱分析的软电离技术主要有下列几种：1)电喷雾电离质谱；2)基质辅助激光解吸电离质谱；3)快原子轰击质谱；4)离子喷雾电离质谱；5)大气压电离质谱。在这些软电离技术中，以前面三种近年来研究得最多，应用得也最广泛[3]。

3．蛋白质的质谱分析

蛋自质是一条或多条肽链以特殊方式组合的生物大分子，复杂结构主要包括以肽链为基础的肽链线型序列[称为一级结构]及由肽链卷曲折叠而形成三维[称为二级，三级或四级]结构。目前质谱主要测定蛋自质一级结构包括分子量、肽链氨基酸排序及多肽或二硫键数目和位置。

3.1蛋白质的质谱分析原理

以往质谱(MS)仅用于小分子挥发物质的分析，由于新的离子化技术的出现，如介质辅助的激光解析/离子化、电喷雾离子化，各种新的质谱技术开始用于生物大分子的分析。其原理是：通过电离源将蛋白质分子转化为气相离子，然后利用质谱分析仪的电场、磁场将具有特定质量与电荷比值(M/Z值)的蛋白质离子分离开来，经过离子检测器收集分离的离子，确定离子的M/Z值，分析鉴定未知蛋白质。

3.2蛋白质和肽的序列分析

现代研究结果发现越来越多的小肽同蛋白质一样具有生物功能，建立具有特殊、高效的生物功能肽的肽库是现在的研究热点之一。因此需要高效率、高灵敏度的肽和蛋白质序列测定方法支持这些研究的进行。现有的肽和蛋白质测序方法包括N末端序列测定的化学方法Edman法、C末端酶解方法、C末端化学降解法等，这些方法都存在一些缺陷。例如作为肽和蛋白质序列测定标准方法的N末端氨基酸苯异硫氰酸酯(phenylisothiocyanate)PITC分析法(即Edman法，又称PTH法)，测序速度较慢(50个氨基酸残基/天)；样品用量较大(nmol级或几十pmol级)；对样品纯度要求很高；对于修饰氨基酸残基往往会错误识别，而对N末端保护的肽链则无法测序[4]。C末端化学降解测序法则由于无法找到PITC这样理想的化学探针，其发展仍面临着很大的困难。在这种背景下，质谱由于很高的灵敏度、准确性、易操作性、快速性及很好的普适性而倍受科学家的广泛注意。在质谱测序中，灵敏度及准确性随分子量增大有明显降低，所以肽的序列分析比蛋白容易许多，许多研究也都是以肽作为分析对象进行的。近年来随着电喷雾电离质谱(electrosprayionisation，ESI)及基质辅助激光解吸质谱(matrixassistedlaserdesorption/ionization，MALDI)等质谱软电离技术的发展与完善，极性肽分子的分析成为可能，检测限下降到fmol级别，可测定分子量范围则高达100000Da，目前基质辅助的激光解吸电离飞行时间质谱法(MALDITOFMS)已成为测定生物大分子尤其是蛋白质、多肽分子量和一级结构的有效工具，也是当今生命科学领域中重大课题——蛋白质组研究所必不可缺的关键技术之一[5]。目前在欧洲分子生物实验室(EMBL)及美国、瑞士等国的一些高校已建立了MALDITOFMS蛋白质一级结构(序列)谱库，能为解析FAST谱图提供极大的帮助，并为确证分析结果提供可靠的依据[6]。

3.3蛋白质的质谱分析方式

质谱用于肽和蛋白质的序列测定主要可以分为三种方法：一种方法叫蛋白图谱(proteinmapping)，即用特异性的酶解或化学水解的方法将蛋白切成小的片段，然后用质谱检测各产物肽分子量，将所得到的肽谱数据输入数据库，搜索与之相对应的已知蛋白，从而获取待测蛋白序列。将蛋白质绘制“肽图”是一重要测列方法。第二种方法是利用待测分子在电离及飞行过程中产生的亚稳离子，通过分析相邻同组类型峰的质量差，识别相应的氨基酸残基，其中亚稳离子碎裂包括“自身”碎裂及外界作用诱导碎裂.第三种方法与Edman法有相似之处，即用化学探针或酶解使蛋白或肽从N端或C端逐一降解下氨基酸残基，形成相互间差一个氨基酸残基的系列肽，名为梯状测序(laddersequencing)，经质谱检测，由相邻峰的质量差知道相应氨基酸残基。

3.3.1蛋白消化

蛋白的基团越大，质谱检测的准确率越低。因此，在质谱检测之前，须将蛋白消化成小分子的多肽，以提高质谱检测的准确率。一般而言，6-20个氨基酸的多肽最适合质谱仪的检测。现今最常用的酶为胰蛋白酶(trypsin)，它于蛋白的赖氨酸(lysine)和精氨酸(arginine)处将其切断。因此，同一蛋白经胰蛋白酶消化后，会产生相同的多肽。

3.3.2基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱测量法(MALDI-TOFMS)[7]

简而言之，基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱测量仪是将多肽成分转换成离子信号，并依据质量/电荷之比(mass/charge，m/z)来对该多肽进行分析，以判断该多肽源自哪一个蛋白。待检样品与含有在特定波长下吸光的发光团的化学基质(matrix)混合，此样品混合物随即滴于一平板或载玻片上进行挥发，样品混合物残余水份和溶剂的挥发使样品整合于格状晶体中，样品然后置于激光离子发生器(lasersource)。激光作用于样品混合物，使化学基质吸收光子而被激活。此激活产生的能量作用于多肽，使之由固态样品混合物变成气态。由于多肽分子倾向于吸收单一光子，故多肽离子带单一电荷.这些形成的多肽离子直接进入飞行时间质量分析仪(TOFmassanalyzer)。飞行时间质量分析仪用于测量多肽离子由分析仪的一端飞抵另一端探测器所需要的时间。而此飞行时间同多肽离子的质量/电荷的比值成反比，即质量/电荷之比越高，飞行时间越短。最后，由电脑软件将探测器录得的多肽质量/电荷比值同数据库中不同蛋白经蛋白酶消化后所形成的特定多肽的质量/电荷比值进行比较，以鉴定该多肽源自何种蛋白.此法称为多肽质量指纹分析(peptidemassfin-gerprinting)。基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱测量法操作简便，敏感度高，同许多蛋白分离方法相匹配，而且，现有数据库中有充足的关于多肽质量/电荷比值的数据，因此成为许多实验室的首选蛋白质谱鉴定方法。

3.3.3电子喷雾电离质谱测量法(electrosprayion-izationmassspectrometry,ESI-MS)[8]

同基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱测量法在固态下完成不同，电子喷雾电离质谱测量法是在液态下完成，而且多肽离子带有多个电荷，由高效液相层析等方法分离的液体多肽混合物，在高压下经过一细针孔。当样本由针孔射出时，喷射成雾状的细小液滴，这些细小液滴包含多肽离子及水份等其他杂质成分。去除这些杂质成分后，多肽离子进入连续质量分析仪(tan-demmassanalyzer)，连续质量分析仪选取某一特定质量/电荷比值的多肽离子，并以碰撞解离的方式将多肽离子碎裂成不同电离或非电离片段。随后，依质量/电荷比值对电离片段进行分析并汇集成离子谱(ionspectrum)，通过数据库检索，由这些离子谱得到该多肽的氨基酸序列。依据氨基酸序列进行的蛋白鉴定较依据多肽质量指纹进行的蛋白鉴定更准确、可靠。而且，氨基酸序列信息即可通过蛋白氨基酸序列数据库检索，也可通过核糖核酸数据库检索来进行蛋白鉴定。

4．蛋白质质谱分析的应用

1981年首先采用FAB双聚焦质谱测定肽分子量，分析十一肽(Mr=1318)，质谱中出现准分子离子[M+1]+=1319强峰。分子量小于6kDa肽或小蛋白质合适用FAB质谱分析，更大分子量的多肽和蛋自质可用MALDI质谱或ESI质谱分析。用MALDI-TOF质谱分析蛋自质最早一例是HillenKramp等[9]于1988年提出用紫外激光以烟酸为基质在TOF谱仪上测出质量数高达60kDa蛋白质，精确度开始只有0.5%，后改进到0.1-0.2%。质谱技术主要用于检测双向凝胶电泳或“双向”高效柱层析分离所得的蛋白质及酶解所得的多肽的质量，也可用于蛋白质高级结构及蛋白质间相互作用等方面的研究[10,11],三条肽段的精确质量数便可鉴定蛋白质。近年来，串联质谱分析仪发展迅猛，其数据采集方面的自动化程度、检测的敏感性及效率都大大提高，大规模数据库和一些分析软件(如:SEQUEST)的应用使得串联质谱分析仪可以进行更大规模的测序工作。目前，利用2D电泳及MS技术对整个酵母细胞裂解产物进行分析，已经鉴定出1484种蛋白质，包括完整的膜蛋白和低丰度的蛋白质[12]；分析肝细胞癌患者血清蛋白质组成分[13]，并利用质谱进行鉴定磷酸化蛋白研究工作[14]及采用质谱技术研究许旺细胞源神经营养蛋白(SDNP)的分子结构[15]等。

结束语：

在蛋白质的质谱分析中，质谱的准确性(accuracy)对测定结果有很大影响，因此质谱测序现在仍很难被应用于未知蛋白的序列测定。肽和蛋白的质谱序列测定方法具有快速、用量少、易操作等优点，这些都非常适合于现在科学研究的需要。我们相信，随着各种衍生化方法和酶解方法的不断改进，蛋白双向电泳的应用[16]以及质谱技术的不断完善，质谱将会成为多肽和蛋白质分析最有威力的工具之一。

参考文献

1．吴世容,李志良,李根容,等.生物质谱的研究及其应用.重庆大学学报,2004,27(1):123-127.

2．成海平,钱小红.蛋白质组研究的技术体系及其进展.生物化学与生物物理进展,2000,27:584588.

3．陈绍农,潘远江,陈耀祖.多肽及蛋白质质谱分析新进展.质谱学报,1995,16(3):15-21.

4．陈晶,付华,陈益.质谱在肽和蛋白质序列分析中的应用.有机化学,2002,22(2):81～90.

5．解建勋,蒲小平,李玉珍,等.蛋白质组分析技术进展.生物物理学报,2001,17:19-26.

6．刘慧敏,赖志辉,黎军,等.碎片结构分析在MALDITOFMS法测定多肽序列中的应用.生物化学与生物物理学报,2000,32:179-182.

7．Lay.JOJr.MALDI-TOFmassspectrometryofbacteria.[J].MassSpectromRev,2001;20(4):172-194.

8．HarveyDJ.Identificationofprotein-boundcarbohydratesbymassspectrometry[J].Proteomic,2001;1(2):311-328.

9．KARASM,HILLENKAMPF.Laserdesorptionionizationofproteinswithmolecularmassesexceeding10000daltons[J].Anal.Chem,1988,60:2299-2301.

10．龚海霞,陈荣华,郭锡熔.蛋白质组技术及其在临床医学领域的运用.国外医学儿科学分册,2001;28(6):287-289.

11．魏开华,杨松成,王红霞,等.转印到膜上的蛋白质的质谱分析.质谱学报,2000;20(3,4):89-90.

12．司英健.蛋白质组学研究的内容、方法及意义.国外医学临床生物化学与检验学分册,2003;24(3):167-168.

13．王征,阮幼冰,官阳.肝细胞癌患者血清蛋白质组成分的双向凝胶电泳-飞行时间质谱分析.中华病理学杂志,2003;32(4):333-336.

14．黄珍玉,于雁灵,方彩云,等.质谱鉴定磷酸化蛋白研究进展.质谱学报,2003;24(4):494-500.