九牛二虎

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九牛二虎范文第1篇

【关键词】 对苯二酚

蛋白质是生物体的基本组成成分，如酶、抗体、转运蛋白等在生物体内发挥着重要功能。人血清白蛋白存在于血液中，分子量为66241，等电点为47〔1〕，主要维持血浆的胶体渗透压，其另一功能是与许多微溶于水的物质结合为易溶于水的复合物。酚类化合物对DNA有不同程度的损害〔2-5〕，对苯二酚在环境中容易氧化为对苯二醌，对苯二酚与对苯二醌可以和DNA碱基形成加合物〔6-8〕，对人体危害极大。对苯二酚与对苯二醌是通过人血清白蛋白转运进入人体各器官。因此，研究血清白蛋白与对苯二酚与对苯二醌的相互作用具有重要意义。本文利用循环伏安法研究了对苯二酚在L半胱氨酸修饰金电极上的电化学行为，并初步探讨了在L半胱氨酸上牛血清白蛋白与对苯二酚及对苯二醌相互作用的机制。

1 材料与方法

11 仪器与试剂 缓冲液：005mol/L Na2HPO4-005mol/L NaH2PO4-010mol/L NaCl缓冲溶液(用NaOH调pH)；005g/L L半胱氨酸；01mol/LH2SO4；20000g/L对苯二酚。200000g/L牛血清白蛋白。MEC-12B型多功能微机电化学分析仪(江苏电分析仪器厂)；金电极(直径1mm)为工作电极，铂电极为对电极，饱和甘汞电极为参比电极。

12 实验方法

121 L半胱氨酸在金电极上组装 将金电极在置于005μmAl2O3粉末中反复抛光至镜面，用Microcloth抛光布抛光光亮，再用丙酮冲洗，用亚沸水超声波清洗。将金电极置于01mol/LH2SO4中于2V氧化5s，-035～15V于1V/s循环扫描5次，取出金电极，用蒸馏水冲洗干净，用磁力搅拌器在蒸馏水中清洗5min，将清洁后的金电极置于50g/L L半胱氨酸浸泡24h，取出金电极，用蒸馏水冲洗干净，用磁力搅拌器在蒸馏水中清洗5min，即得L半胱氨酸修饰金电极。所用水为3次亚沸蒸馏水。

122 电化学行为 在500ml容量瓶中，加入010ml对苯二酚，500ml 005mol/L Na2HPO4-015mol/L NaCl缓冲溶液，混匀，作循环伏安扫描。

13 量子化学计算 对苯二酚与对苯二醌用半经验方法(AM1)进行分子几何构型初始优化，然后用密度泛函理论(DFT)在6-31G(d)水平进行全优化分子结构，在相同水平计算分子的分子前线轨道能量及静电荷。用Gaussian03软件完成所有计算。

2 结果

21 L半胱氨酸修饰电极的电化学行为特征(图1) 由修饰电极于-060～08V范围内的循环伏安图可见，裸金电极上未见氧化还原峰存在；L半胱氨酸修饰电极在高电位的电流增大，溶液pH=730时，在-0068V产生一个氧化峰，这可能是羧基在较低的电位下被还原为羟基所致。

22 对苯二酚在L半胱氨酸修饰金电极上的电化学行为(图2，表1) 从表1可见，在L半胱氨酸修饰金电极上，当溶液pH=730时，氧化峰(Epa)比裸金电极负移了0169V，还原峰(Epc)比裸金电极负移了0061V，对苯二酚在L半胱氨酸修饰金电极可逆性变好，峰电流变大，对对苯二酚的氧化还原具有催化作用。结果与杜丹等人研究对苯二酚在L半胱氨酸修饰金电极上的电化学行为一致〔9〕。当溶液pH=1100时，在L胱氨酸修饰金电极上的氧化峰比裸金电极正移了0090V，还原峰比裸金电极负移了0010V，说明在pH-1100时，对苯二酚在L半胱氨酸修饰金电极可逆性变坏，峰电流变小，对对苯二酚的氧化还原不具有催化作用。

表1 对苯二酚在L半胱氨酸修饰金电极及裸金电极上的电化学参数（略）

23 扫速对对苯二酚峰电流和峰电位的影响 对苯二酚在裸金电极上的氧化还原峰电位随着扫速的增大氧化峰电位发生正移，还原峰负移，峰电流(ip)与扫速的平方根(V1/2)成正比，说明峰电流受扩散控制；对苯二酚在L半胱氨酸修饰金电极上的氧化还原峰电位受扫速的影响与裸金电极相似，峰电流(ip)与扫速的平方根(V1/2)成正比，说明峰电流也受扩散控制。

a，a`:裸金电极；b，b`:L半胱氨酸修饰电极；扫描速度：100mv/s

图1 L半胱氨酸修饰金电极上的循环伏安图（略）

a，a`:00400g/L对苯二酚在裸金电极上；b，b`:00400g/L对苯二酚在L半胱氨酸修饰电极上；扫描速度：100mv/s

图2 对苯二酚在L半胱氨酸修饰金电极上和裸金电极上的循环伏安图（略）

24 牛血清白蛋白对峰电位与电流的影响(图3) 由于牛血清白蛋白容易吸附到金电极上，故在修饰电极上研究了牛血清白蛋白在pH=730溶液中对对苯二酚氧化还原电位及电流的影响。从图3可见，牛血清白蛋白加入到对苯二酚溶液时，其氧化峰电位发生负移，但峰电流改变不大，说明牛血清白蛋白对对苯二酚向电极扩散的影响较小；而对其氧化产物对苯二醌，其氧化峰电位发生负移，峰电流变小，说明牛血清白蛋白对对苯二醌的扩散的影响较大。当牛血清白蛋白的浓度达到05000g/L时，峰电位不再改变，说明牛血清白蛋白与对苯二酚结合达到饱和状态。当牛血清白蛋白的浓度达到12000g/L时，峰电流不再改变，说明牛血清白蛋白与对苯二醌结合达到饱和状态。根据苯二酚和对苯二醌可以和血清白蛋白结合的饱和度及血清白蛋白的分子量，计算苯二酚和对苯二醌和血清白蛋白结合比分别为48：1和16：1。

转贴于

a:00400g/L对苯二酚;b:00400g/L(15800g/L)牛血清白蛋白；pH=730；扫描速度：100mv/s

图3 牛血清白蛋白对苯二氧化还原电位及电流的影响（略）

25 对苯二酚现对苯二醌的量子化学计算结果 对苯二酚与对苯二醌所有原子都在一个平面内，对苯二醌的最大净电荷为043，最小的负电荷为-045，最低空轨道和最高占有轨道能量分别为-012999和-027059Hartree，分子的偶极距为0，为非极性分子；分子的净电荷反映了分子间净电吸引的能力；最低空轨道能量越低，越容易接受电子，最高占有轨道能量越高越容易提供电子，分子的前线轨道反映了形成分子氢键的能力，故对苯二酚较对苯二醌容易提供电子，而对苯二醌较对苯二酚容易接受电子。由此来看，对苯二醌比对苯二酚具有较大的净电吸引的能力和形成分子氢键的能力，因而在电极上峰电位和峰电流改变较大。

3 讨论

结果表明，在pH1100时主要以NH2-C(R)OO存在。具有较好催化活性的基团为NH3-C(R)OO-。苯酚的pKa1=1000时，主要以苯酚分子的形式存在，而对苯二酚的羟基是供电子基团，故pKa1

参考文献

〔1〕 张昌颖.生物化学［M］.2版.北京：人民卫生出版社，1985：432.

〔2〕 宋远志.对苯二酚与脱氧核糖核酸的相互作用［J］.中国公共卫生，2006，22(2)：192-194.

〔3〕 宋远志.苯酚与脱氧核糖核酸的相互作用［J］.中国公共卫生，2005，21(12)：113-114.

〔4〕 宋远志.对硝基苯酚与杂交中DNA的相互作用［J］.中国公共卫生，2005，21(1)：33-35.

〔5〕 宋远志.邻氨基酚与脱氧核糖核酸的相互作用［J］.中国公共卫生，2005，21(9)：94-96.

〔6〕 Krisztina Pongracz，William J.Bodell.Detection of 3'-Hydroxy-1，N6-benzetheno-2'-deoxyadenosine 3'Phosphate by 32P Postlabeling of DNA Reacted with pBenzoquinone［J］.Chem Res Toxicol，1991，4:199-202.

〔7〕 Margaret Gaskell，Rebekah Jukes，Donald J.L.Jones.Identification and Characterization of(3，4-Dihydroxy)-1，N2-benzetheno-2-deoxyguanosine 3-Monophosphate，a Novel DNA Adduct Formed by Benzene Metabolites［J］.Chem Res Toxicol，2002，15:1088-1095.

〔8〕 Margaret Gaskell，Keith I E McLuckie，Peter B.Farmer.Genotoxicity of the benzene metabolites para-benzoquinone and hydroquinone［J］.Chemico-Biological Interactions，2005，153(1):267-270.

九牛二虎范文第2篇

我们已经学习正方体了。数学老师为了加深我们对圆柱体的印象，便叫我们每人用硬纸做一个正方体。

回到家，我找来硬纸，花了九牛二虎之力，终于做好了一个。但当我早晨起床准备上学时，却发现我做的正方体不见了。翻箱倒柜，却还是一无所获。我的胸口开始剧烈地跳动，我心想；正方体是我费了九牛二虎之力才做成的如果不带到学校去，一定被老师批评，而最近正要评选中队长那一定会对评选造成影响。我冷静了一下，迅速地脑子里搜索着。“是忘在妈妈的服装店里了！我大叫道。我赶忙推醒熟睡中的妈妈，让她给我去拿正方体。妈妈揉了揉眼睛，问什么。我把事情简要说了一下，妈妈二话不说开始穿衣服。这时，被惊醒的爸爸对我说；“妈妈身体不好，你到学校再一个吧！”妈妈毫不犹豫骑着车子走了。

看着妈妈远去的身影，泪水模糊了我的双眼。为了我……妈妈辛辛苦苦把我拉扯大， 每天到凌晨两三点才睡觉，有时进货，早晨六七点就起来……

不一会儿，妈妈把正方体送回来了，我接过它，泪水滴到了正方体上面，仿佛千斤重。

九牛二虎范文第3篇

春光明媚，我张开朦胧的眼睛发现我旁边是一个软软又巨大的墙壁，把我吓了一跳，我想了很久终于明白这是每日陪我进入梦境的枕头。天啊，我居然缩小了。我睁大了眼睛发现我前面还有一个庞然大物——被子，我又费了九牛二虎之力爬过了又大又长的“山”这时的我已经满头大汗了，流下的汗水快要成一条河了。

没有办法，虽然我很想休息，但是我还得背上“战甲”去战斗——刷牙去。我纵身一跃从床上跳下来，差点没摔个半身不遂，我环顾四周突然，觉得这里好像一个城堡，大的不知道怎么形容。平时几步就可以到达的地方，今天好像怎么都走不完。好不容易我到了门口，爬上椅子跳到平时洗漱的地方，现在一看大得像一个游泳池，缩小的我都可以在里面游泳，我用九牛二虎之力打开了水龙头，水如长江一样滔滔不绝地涌出来了，差点把我给冲下去，吓得我气都不敢呼。突然，我的耳边想起了一阵急促的闹铃声，我被惊醒了，我恍然大悟——原来我一直在睡觉，我细细回味地刚刚的梦，迟迟不肯离开亲爱的床。

我是一个爱幻想的女孩，每天想着不一样的故事，每天问一些奇怪的问题，每天对着天空发呆……

哎，我明天又会想些什么呢？我好期待啊！

六年级:郑会晟

九牛二虎范文第4篇

关键词：美术教学；洪泽湖；乡土资源

洪泽湖地区的自然资源及水产品丰富，历史文化悠久，是著名的江南水乡，是众多美术爱好者及画家采风创作的灵感来源地区之一。洪泽湖地区的美术教学要积极利用好乡土资源，引导学生更多地关注家乡美，积极做好洪泽湖乡土资源的开发与利用工作。

一、以本地自然景观为素材进行美术教学

利用洪泽湖的自然美景开展美术教学活动，引导孩子对身边美景及灵感的捕捉，通过室外美术采风积极引导小学生走出家门，用心体会洪泽湖的美景。感受洪泽湖的万顷碧波、水鸟栖居，碧波中白帆点点，丰富的水产等；还可以来到拥有1800多年历史的防洪屏障――百里长提，感受恢弘的防洪堤坝，厚重的石墙，堤岸边青葱的绿柳，感受“杨柳岸晓风残月”的诗情画意；来到港坞帆樯，感受港坞外，浪花飞雪腾湖面，百里狂涛撼大千的诗情画意；还有奠淮犀牛、泄洪大闸等自然人文景观，对小学美术启蒙教育都是非常好的自然景色感知的实体。

美术老师在小学美术启蒙教育阶段要充分利用当地的自然景观、人文景观，引导学生建立观察自然、感受自然的习惯。同时，在参观本地自然与人文美景的同时，可结合实地摄影拍照的方式，培养画面角度选取、光线色彩的美学知识；在参观自然风光时，结合文学中相关背景及诗词歌赋等资料，使得学生在景色中领略文字表达的美，为学生未来的创作灵感积极储备知识。

二、以本地特产为素材开展美术教学

洪泽湖地区水产资源丰富闻名全国，其大闸蟹远销国内外。同时，湖内盛产鱼类近百种，芦苇荡遍布全湖，湖内的莲藕、芡实、菱角等当地特产等久负盛名。

在美术教学过程中，可以组织学生以生态旅游的方式，将美术课堂迁移至洪泽湖中，实地观看螃蟹、鱼类等水产的生活状态，观察其习性及生物特性；同时，通过近距离地游览芦苇荡、莲花种植区域，了解水生植物的生长习性及给人类带来的经济价值、营养价值及药用价值，不断增长知识；另外，美术老师可以给学生布置相关的作业，要求学生撰写旅游及写生日记，并选取给自己留下最深印象的事物进行创造性绘画，用图画表述感情，发挥学生的想象力及主观观察能力，培养学生对生活中的事物观察及独立思考的能力。

三、以当地民俗文化为资源开展美术教学

洪泽湖地区的历史文化悠久，民间传说丰富多彩。在美术教学过程中可结合洪泽湖地区当地的民俗传说开展美术教学活动。具体来说，民间俗语中有“九牛二虎之力”这一说法，在洪泽湖可以找到说法的原型，即“九牛二虎一只鸡”，美术课与语文课可以联合教学，在语文课学习这一俗语之后，可带领学生到博物馆参观当年为赈水而铸造的铁牛的原型，现仍然保存完好，但是老虎与鸡已经找不到，可以引导学生在参观完后，结合所学知识发挥想象力，画出自己心中的“九牛二虎一只鸡”的图案，感受家乡的文化遗产的魅力。同时，在洪泽湖地区每年大年初一一过，渔民会将渔船装饰一新，并将自己的女儿带回家中，团圆喜庆。在美术教学过程中，可结合这一独特的文化现象，带领学生参观并参与这一独特的文化风俗习惯，引导学生思考并追溯了解文化民俗的来源，通过参与过程中感官的刺激，陶冶情操，增强乡土情怀，增加对家乡的了解。

四、利用校内资源丰富美术教学手段

在做好上述的美术引导与启蒙工作后，学校要积极开展相关的美术创作实践。学校要定期通过艺术展、板报文化、现场绘画比赛或剪纸、手绘等不同艺术形式，让学生更多地参与创作实践，通过手中的画笔结合自身参观了解的风景名胜、文化民俗，发挥自身的想象力，进行绘画创作，将自身学习积累的知识与技巧通过绘画来表达，将自身对洪泽湖家乡的热爱通过作品来阐释，通过作品来展示心中洪泽湖辽阔的湖面、丰富的资源、悠久的历史文化及自身对家乡的热爱之情等。

我国俗语中有“一方水土养育一方人”的说法，每一地域都具有自身特色的自然资源、人文民俗，都蕴藏着丰富的美术课程与创作资源，这需要热爱美术创作的人亲身去体会。小学美术老师作为学生了解与感受美的启蒙者，要积极结合当地的文化与自然资源，通过乡土资源的开发、实践来培养学生学习美术的热情。

参考文献：

九牛二虎范文第5篇

“你、们、都、给、我、起、床！！”-我

“雪，你怎么啦？怎么像吃了鞭炮似的- -我们昨天那么晚才睡诶…zzzz”晓又想躺下去睡。

“鞭炮？！”我把刚刚睡下去的晓又拉起来，“你以为我们在这里放鞭炮过小年啊！！快起来！”

不一会儿，和我一样正常（因为晓和凌很火星=-=）的菲也起来了，她费了九牛二虎之力才把睡的像死猪一样的晓搞定。

我更是费了拉100头牛都不止的劲，凌竟然以为我要把“善良可爱”（引用她自己说的话）给卖了= =

问题是——

就算我卖，也没人愿意买这么笨蛋的丫头吧？=____,=

于是，街道上便出现了这样一副景象：

两个拉着女孩的冷酷少女像拖猪一样“艰难”的前进着= =（晓、凌：我们是猪么？）（作者：……）

第二天早晨。

“你、们、都、给、我、起、床！！”-我

“雪，你怎么啦？怎么像吃了鞭炮似的- -我们昨天那么晚才睡诶…zzzz”晓又想躺下去睡。

“鞭炮？！”我把刚刚睡下去的晓又拉起来，“你以为我们在这里放鞭炮过小年啊！！快起来！”

不一会儿，和我一样正常（因为晓和凌很火星=-=）的菲也起来了，她费了九牛二虎之力才把睡的像死猪一样的晓搞定。

我更是费了拉100头牛都不止的劲，凌竟然以为我要把“善良可爱”（引用她自己说的话）给卖了= =

问题是——

就算我卖，也没人愿意买这么笨蛋的丫头吧？=____,=

于是，街道上便出现了这样一副景象：

两个冷酷少女像拖猪一样分别拉着2个女孩“艰难”的前进着= =（晓、凌：我们是猪么？）（作者：很难说^__,^）

就这样,我们一路上又遭到了无数人一副"肯定是群神经病"的神情,来到了一个村子.

"翻译村?!"-我

说这话时是惊喜加高兴加泪水的T^T.

因为总算找到了与我们语言相同的村落,能不高兴么.

菲已经哭得眼睛肿的像红包子了,多么懂得感恩的孩子!(现在应该不是歌颂菲的时候吧>.<)

凌呢,还以为我们都要被卖了,写那个什么…….

"遗书?!"噢,我现在觉得自己终于明白什么是真正的火星人了= =

晓则找了一堆烟花和老鼠说要做一顿美食庆祝,天那,她该不会想做"火药老鼠肉"吧-_-^

那我还不如让上帝赐我一死…