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岁岁又重阳

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岁岁又重阳范文第1篇

目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞能否分化为胆碱能样神经元。方法 分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),取2~4代MSCs,进行诱导其向胆碱能神经元分化。诱导方案:10% 胎牛血清诱导2 d; 换液为DMEM/F12培养基,加入碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、巯基乙醇(ME)、维甲酸(RA)、神经生长因子(NGF),诱导8 d;加入表皮生长因子(EGF),肝素(Heparin)继续诱导8 d。空白对照组不作任何处理。观察诱导后的形态变化。采用RTPCR检测巢蛋白(nestin),核受体相关因子(Nurr1),胆碱乙酰转移酶(ChAT)mRNA 的表达,间接免疫荧光法检测表达 nestin、ChAT、神经核蛋白(NeuN),乙酰胆碱酯酶(AchE) 的阳性细胞。结果 诱导后细胞形态逐渐由长梭形变为圆形或椭圆形,突起形成;RTPCR显示,诱导后的细胞高表达 nestin、Nurr1、ChAT,且基因表达相对强度与未诱导的MSCs比较有显著差异(P

【关键词】 间充质干细胞;胆碱能神经元;大鼠; 生长因子

【Abstract】 Objective To explore the differentiation of rat marrow mesenchymal stem cells (MSCs) into cholinergic likeneurons by inducing reagents. Methods MSCs from rat bone marrow were isolated and purified by cell culture, which were induced and differentiated into cholinergic likeneurons with 2~4 generations of MSCs by inducing reagents. The protocol was as follows: MSCs were incubated with 10% FBS for 2 days and then medium was replaced by DMEM/F12 complemented with 10 μg/L of bFGF, 0.1 mmol/L of 2ME, 1 mmol/L of RA, 10 μg/L of NGF for 8 days. And then 10 μg/L of EGF and 1 250 U/ml of heparin were added into the culture system for culture for 8 days. RTPCR and gel electrophoresis were used to detect gene expression of nestin, Nurr1, choline acetyltransferase (CHAT). Immunological fluorescent staining was used to measure nestin, CHAT, NeuN,acetylcholine esterase (AchE) positive cells. Results Induced cells gradually became from long shuttle into round or ellipse with neuronlike dendrite. RTPCR showed that the induced neuronlike cells expressed special neurocyte genes of nestin,Nurron,CHAT. Indirect immunological fluorescent staining showed positive cells with nestin,CHAT,NeuN,AchE reached 80% respectively. Conclusions MSCs from rat bone marrow can differentiate into cholinergic likeneurons.

【Key words】 Mesenchymal stem cells; Cholinergic neuron; Rat; Growth factors

骨髓间充质干细胞(MSCs) 具有向多种细胞系分化的潜能。近年来发现它还具有向神经细胞分化的潜能,为治疗神经损伤、帕金森病、早老性痴呆等神经退行性疾病带来了希望,是组织工程种子细胞〔1,2〕。就目前MSCs向神经分化研究而言,国内外大多数研究集中在MSCs在体内外分化为神经元样细胞及神经干细胞或胚胎干细胞向胆碱能神经元分化〔3,4〕,尚未见MSCs直接向特异性胆碱能神经元分化的系统报道。本实验探索MSCs能否定向诱导分化为特异胆碱能神经元,以期待MSCs最终应用于临床治疗上述多种神经系统疾病。

1 材料与方法

1.1 实验动物与试剂

8周龄SD大鼠购自广东省实验动物中心, SCXY(粤)20060015,体质量250~300 g,SPF级。DMEM/F12培养基(Gibco);胎牛血清(FBS,杭州四季青);2巯基乙醇(2ME),维甲酸(RA),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),表皮生长因子(EGF),神经生长因子(NGF)(美国 PeproTech);胆碱乙酰化转移酶(ChAT)一抗(羊抗大鼠,Chemicon);乙酰胆碱酯酶(AchE)一抗(兔抗大鼠)、巢蛋白(nestin)一抗(兔抗大鼠)、神经核蛋白(NeuN)一抗(小鼠抗大鼠)均购自武汉博士德;CY3标记二抗IgG(兔抗羊,Sigma,为易于区分记为CY3a)、 CY3标记二抗IgG(羊抗兔,Sigma,记为CY3b)、 FITC标记二抗IgG(大鼠抗小鼠,Sigma);RTPCR试剂盒(Takara)。

1.2 大鼠MSCs的分离和传代

SD大鼠颈椎脱臼处死,无菌条件下取股骨,用10%FBS冲出骨髓,以(1~2)×109/L细胞密度接种于25 cm2培养瓶中,加入10%FBS的DMEM/F12培养液,4~5 d后换液,以后每隔3~4 d换液1次。待80%~90%融合后,以0.25%的胰酶消化传代。

1.3 MSCs定向诱导分化为胆碱能神经细胞

将2~4代的MSCs,接种在铺有多聚赖氨酸盖玻片的6孔板中。实验组给予10%FBS + 10 μg/L bFGF诱导2 d后,换液为DMEM/F12后分为两步进行,先加入10 μg/L bFGF、0.1 mmol/L 2ME、1 mmol/L RA、10 μg/L NGF继续诱导8 d(Ⅰ组) 2~3 d换液1次。第二步,在上述的基础上加入10 μg/L EGF、1 250 U/ml 肝素(Heparin)继续诱导8 d(Ⅱ组),2~3 d换液1次。空白对照组不作任何处理。

1.4 目的基因mRNA表达RTPCR检测

各组于诱导5 d后取部分盖玻片,Trizol法提取mRNA,各取总RNA 约1 μg,以表1所示各自特异引物,以βactin为内参照,行RTPCR扩增;按TAKARA试剂盒说明,配成50 μl的反应体系,95℃预变性2 min,94℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸2 min,扩增40个循环,PCR产物行琼脂糖凝胶电泳分析。

表1 目的基因及内参上下游特异引物序列

1.5 分化细胞间接免疫荧光的检测

3组细胞分别于诱导5 d后取出盖玻片,以100%丙酮固定10 min,0.1% Triton X100 作用15 min,非免疫动物血清37℃孵育30 min,分别加一抗ChAT(1∶100稀释), NeuN抗(1∶50稀释),AchE一抗(1∶60稀释),nestin一抗(1∶100稀释), 4℃过夜后分别加入相对应荧光素标记的二抗CY3a、FITC、CY3b,37℃孵育30 min,核染料Hochest33258 37℃孵育5 min,于荧光显微镜下进行观察,计数ChAT阳性的分化细胞。以磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。

1.6 统计学处理

统计学处理采用SPSS13.0 软件,间接免疫荧光检测各组间的胆碱能神经细胞分化率比较使用χ2检验,结果用χ2值表示;目的基因相对表达强度使用两样本均数的独立样本t检验。

2 结果

2.1 骨髓MSCs 镜下观察

细胞接种72 h后,大部分细胞贴壁,并延伸呈现成纤维样细胞形态,呈梭形,细胞核较大、扁圆形。以后细胞逐渐增多。至第5、6天出现多个细胞组成的细胞克隆,15~20 d细胞融合成单层,排列有一定的方向性。传代的细胞迅速贴壁,融合后都呈梭形。

2.2 骨髓MSCs 向神经元样细胞分化的形态学观察

两实验组诱导1、3 d后部分梭形细胞开始变圆,伸出突起,但细胞突起小而少,大部分细胞孤立存在,细胞间隙增宽,仅少部分分化细胞通过突起连接,但团块小,分化细胞大小不一,胞浆颗粒细密;5 d后胞间紧密及突起连接增加,浆内颗粒增粗变大并可见部分囊泡颗粒聚集于突起开口或突起内,分化细胞团块聚集倾向明显,形成神经球样结构。10 d后分化细胞率增加,胞浆及突起内囊泡颗粒继续增加,突起增粗,胞外基质也可见分泌颗粒,细胞的立体感及折光性增强。

2.3 骨髓MSCs 向神经元样细胞分化基因表达分析

RTPCR和琼脂糖凝胶电泳显示,两实验组诱导5 d后均出现nestin、Nurr1、βactin的mRNA条带见图1。βactin为一管家基因,在活细胞中稳定表达,以其为参照。实验Ⅰ、Ⅱ组 Nestin的基因表达强度分别为0.927±0.103、1.065±0.096,组间比较差异有统计意义(P=0.000,t=-23.98);实验Ⅰ、Ⅱ组Nurr1的基因表达强度分别为1.383±0.166、0.958±0.012,组间比较差异有统计意义(P=0.000

,t=51.33)。见图1。

2.4 骨髓MSCs 向神经元样细胞分化的蛋白表达分析

实验组出现不同数量的神经分化细胞,胞浆及突起内同时表达神经干细胞标志nestin蛋白,胞核内可见表达成熟的神经元标记物神经特异核抗原NeuN蛋白。阴性对照组细胞的胞浆无荧光。Ⅰ组nestin、NeuN的阳性率分别为52.8%、68.6%;Ⅱ 组nestin、NeuN的阳性率分别为75.2%、65.1%。统计分析结果显示:两组间nestin、NeuN的阳性率比较均无统计学显著性差异(P>0.05)。 见图2。

2.5 诱导骨髓MSCs向胆碱能神经元样细胞定向分化

两实验组诱导5 d后均出现ChAT mRNA条带见图1。实验Ⅰ、Ⅱ组ChAT的基因表达强度分别为1.320±0.396、0.940±0.006,组间比较差异有统计意义(P=0.000,t=-22.11)。免疫荧光示:胞浆及突起内可同时表达胆碱能神经元特异标志物ChAT、乙酰胆碱分解代谢酶AchE,见图2。统计显示,空白对照组、实验Ⅰ、Ⅱ组ChAT阳性率分别为1.6%、71.4%、59.1%,三组间差异明显(P=0.000,χ2=401.7);而两实验组差异无统计意义(P>0.05),实验Ⅰ、Ⅱ组AchE阳性率分别为83%、90%,两组间也无统计学差异(P>0.05)。

3 讨论

本研究发现,在无血清的DMEM/F12中加入2ME、RA、bFGF、EGF、NGF、Heparin等试剂,可诱导间充质干细胞分化为胆碱能神经样细胞。实验还发现诱导5 d的MSCs不仅表达nestin、Nurr1、NeuN神经元标志物,而且也表达胆碱能神经元特异标志物乙酰胆碱合成的关键酶胆碱乙酰化酶及乙酰胆碱分解代谢关键酶胆碱酯酶。以上结果提示:经上述方案诱导后,MSCs已分化成为胆碱能样神经细胞。本研究显示,加入了EGF及Heparin的实验Ⅱ并没有比Ⅰ增加阳性细胞分化率,推测可能EGF主要刺激胶质前体细胞增殖〔5〕,促使NSCs(神经干细胞)存活和增殖,在NSCs增殖后期发挥作用〔6〕。而对促分化成熟作用不明显相关,基因表达强度分析示,实验Ⅱ组nestin 表达强度高于实验Ⅰ组,而Nurr1及ChAT低于实验Ⅰ组也证实了这一点,即EGF诱导组神经干细胞相对增加,而逐步趋向成熟的前体细胞及分化成熟细胞的比例相对减少。

实验发现,单用bFGF诱导1 d的MSCs也呈现大于20%的形态分化率,提示其具有不依赖其他诱导剂的单独作用。Zhang等〔7〕研究发现:bFGF与神经节苷脂(GM1)可协同促进间充质干细胞分化成神经细胞及星形胶质细胞。bFGF能促进神经元前体细胞的存活或使神经干细胞向神经元前体细胞分化增殖,从而导致NSCs分化为神经元的比例增多,许多物种的神经系统都有bFGF表达,bFGF能维持神经元的存活,刺激海马神经元的轴突生长,维持神经干细胞的自我复制能力〔8〕。Androutsell发现,通过渗透泵向正常大鼠脑内注入bFGF未见细胞分裂增加,但作者又发现向大脑中动脉栓塞皮质缺血大鼠脑内输入bFGF+Dll4可使SVZ(脑室下区)细胞分裂增加,并于45 d后改善其行为能力〔9〕,提示组织损伤可能为神经细胞分化条件之一。

抗氧化剂2ME可正性调节ChAT活性〔10〕,其可促进未成熟细胞即干祖细胞的存活,增加其分化概率,对成熟细胞无此效应,对干细胞的选择可能是非必要的,仅在前体细胞阶段发挥作用。其可能通过增加谷胱甘肽含量发挥抗氧化作用,而改善基质环境,诱导神经细胞突起形成,诱发其表型形态学发生,但并不能改变干细胞的定向分化比例,2ME+NGF对ChAT的诱导作用大于2ME〔11〕,可释为2ME增加神经前体细胞数量以便有更多的干细胞应答NGF促进其向胆碱能神经元分化。

RA是一种强诱导分化剂,可直接进入细胞内与其核受体结合作为反式作用因子调控特异基因表达;能显著提高间充质干细胞的RA受体和ICAM1(细胞间黏附因子)的表达,在体内RA对胆碱能神经系统的发生、发育起重要作用。实验中,我们发现细胞聚集现象及神经球结构形成,可能与神经前体细胞分泌合成一些黏附因子有关,钙黏蛋白,β连环蛋白,a连环蛋白在介导神经前体细胞之间的黏附过程中发挥主要作用。而Heparin,多聚赖氨酸也可能参与此进程,实验Ⅱ组(包含Heparin)神经球结构较大也验证了这一点。这些黏附因子与基质也可能参与细胞增殖分化调控过程。此外Heparin作为蛋白聚糖可结合诱导因子,可提高这些因子作用的稳定性。

总之,本研究初步证明了诱导MSCs向胆碱能神经元分化的可行性,为进一步研究提供资料。

参考文献

1 Rivera FJ,Sierralta WD,Minguell JJ,et al.Adult hippocampus derived soluble factors induce a neuronallike henotype in mesenchymal stem cells〔J〕.Neuroscience Letters,2006;406(12):4954.

2 Bianco P,Robey PG.Stem cells in tissue engineering 〔J〕.Nature,2001;414(6859):11821.

3 Shin S,Dalton S,Stice SL.Human motor neuron differentiation from human embryonic stem cells〔J〕.Stem Cells Dev,2005;14(3):2669.

4 Wang TT,Jing AH,Luo XY,et al.Neural stem cells:isolation and differentiation into cholinergic neurons〔J〕.Neuroreport,2006;17(13):14336.

5 Tarasenko YI,Yu Y,Jordan PM,et al.Effect of growth factors on proliferation and phenotypic differentiation of human fetal neural stem cells〔J〕.J Neurosci Res,2004;78(5):62536.

6 Tirassa P,Triaca V,Amendola T,et al.EGF and NGF injected into the brain of old mice enhance BDNF and ChAT in proliferating subventricular zone〔J〕.J Neurosci Res,2003;72(5):55764.

7 Zhang H,Wang JZ,Sun HY,et al.The effects of GM1 and bFGF synergisticallyinducing adult rat bone marrow stromal cells to form neural progenitor cells and their differentiation〔J〕.Chin J Traumatol,2004;7(1):36.

8 Israsena N,Hu M,Fu W,et al.The presence of FGF2 signaling determines whether betacatenin exerts effects on proliferation or neuronal differentiation of neural stem cells〔J〕.Dev Biol,2004;268(1):22031.

9 AndroutsellisTheotokis A,Leker RR,Soldner F,et al.Notch signalling regulates stem cell numbers in vitro and in vivo〔J〕.Nature,2006;442(7104):8236.

岁岁又重阳范文第2篇

【摘要】 目的 观察血管紧张素Ⅱ联合5-氮杂胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞 (BMMSCs) 定向分化为心肌样细胞的作用。方法 采用密度梯度离心法分离大鼠BMMSCs,取第3代BMMSCs进行分组诱导:血管紧张素Ⅱ组(AngⅡ,终浓度为0.1μmol/L)、5-氮胞苷组 (5-aza,终浓度为10μmol/L)、AngⅡ联合 5-aza组 (终浓度分别为0.1μmol/L与10μmol/L)、空白对照组。诱导24h后更换常规培养液继续培养 4 周。倒置相差显微镜观察细胞的形态学变化,MTT法检测细胞活性及增殖能力,免疫荧光染色法鉴定诱导后BMMSCs中心肌特异性肌钙蛋白 I (cTnI) 的表达,流式细胞计数法计算心肌样细胞诱导率, 透射电镜观察诱导后心肌样细胞的超微结构。结果 原代培养的BMMSCs14天形成集落, 传代细胞体积变大, 诱导后细胞呈长梭形,呈一致性生长, 并出现肌岛样结构。MTT法显示AngⅡ联合 5-aza组细胞增殖能力优于AngⅡ组与5-氮胞苷组。免疫荧光染色结果显示诱导后BMMSCs 表达心肌特异性蛋白cTnI。流式细胞计数法显示:AngⅡ组、5-aza 、AngⅡ联合 5-aza组心肌样细胞诱导率分别为(25.3±2.2)%、(24.6±1.9)%、(30.0±1.7)%,AngⅡ联合 5-aza组心肌样细胞诱导率高于AngⅡ组与5-氮胞苷组(P>0.05)。透射电镜可见平行排列的肌丝、Z线样物质。结论 血管紧张素Ⅱ联合5-氮杂胞苷可在体外诱导大鼠BMMSCs定向分化为心肌样细胞,其诱导分化率高于单纯5-氮杂胞苷诱导。

【关键词】 血管紧张素Ⅱ; 5-氮杂胞苷; 骨髓间充质干细胞;心肌样细胞

[Abstract] Objective To observe the effect of the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells(BMMSCs) into cardiomyocyte-like cells with 5-azacytidine and angiotensinⅡ.Methods BMMSCs were isolated from bone marrow of SD mouse by density gradient centrifugation. The third passage cells were pided into four groups:AngⅡgroup (0.1μmol/ L),5-aza group(10μmol/L),AngⅡ combined with 5-aza group (0.1μmol/L and 10μmol/L),untreated group as control. After 24h induction, the medium was changed to complete culture medium without any inductor and the cells were culture for 4 weeks. The morphological changes were observed under phase contrast microscope. The effect of AngⅡ and 5-aza on the BMMSCs proliferation was observed with methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. The cardiomyogenic cells were identified by immunofluorescence staining. The differentiation ratio was examined by flow cytometer. The ultrastructures of the induced cells were viewed with a transmission electron microscope.Results BMMSCs of primary culture formed cell colonies at 14 days. The passaged cells were larger than those of primary culture. After induction, the cells presented long spindle, aligned in parallel and formed “muscle island”- like structure. MTT assay showed that the cell proliferation in AngⅡ and 5-aza group outweighed that of in AngⅡgroup or 5-aza group. The expression of specific protein of cardiac troponin I (cTnI) in induced BMMSCs was positive. Flow cytometer showed that the differentiation ratio in AngⅡgroup,5-aza group and AngⅡ combined with 5-aza group were respectively(25.3±2.2)%,(24.6±1.9)%,(30.0 ±1.7)%, demonstrating that the differentiation ratio in AngⅡ combined with 5-aza group was higher than that of in AngⅡ group or 5-aza group(P>0.05). Transmission electron microscopy showed that the induced cells had myofilaments, Z line-like substances.Conclusion AngiotensinⅡ combined with 5-Azacytidine can induce the differentiation of BMMSCs into cardiomyocyte-like cells, and the differentiation ratio was higher than that of in 5-aza only.

[Key words] angiotensin Ⅱ;5-azacytidine;bone marrow mesenchymal stem cells;cardiomyocyte-like cells

缺血性心脏病在我国的发病率逐年升高,严重威胁着人类的生存及生活质量。近几年来,细胞移植技术发展迅速,借助此技术可以在坏死部位移植具有收缩功能的细胞,为治疗缺血性心脏病提供了新的方法,也成为治疗缺血性心脏病的研究热点课题。随着研究的深入,选用的靶细胞目前多集中于有多向分化能力的各种干细胞,其中研究的较多的是骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMMSCs)[1],有研究显示BMMSCs可以被化学物质 5-氮杂胞苷 (5-azacytidine, 5-aza)诱导为心肌样细胞[2,3]。也有研究显示,血管紧张素Ⅱ在体外可能经细胞外信号调节激酶通路诱导人BMMSCs向心肌样细胞分化[4],提示血管紧张素Ⅱ对BMMSCs的分化发挥重要作用。于是我们设想:血管紧张素Ⅱ联合5-氮杂胞苷共同诱导能否提高BMMSCs向心肌细胞的分化率 ?与单纯血管紧张素Ⅱ及单纯 5-aza的诱导作用相比又有何差别?本实验即通过联合诱导培养,观察血管紧张素Ⅱ联合5-氮杂胞苷对 BMMSCs向心肌细胞分化所起的作用,并与传统诱导分化剂 5-aza比较。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与实验动物 AngⅡ ( Sigma, USA), 5-azacytidine ( Sigma, USA),L-DMEM 培养基(Hyclone, USA),胎牛血清(杭州四季青), 胰蛋白酶(Sigma, USA), Ficoll 淋巴细胞分离液(1.077g/ml,TBD公司), MTT (Sigma,USA),DMSO (Sigma,USA),羊抗鼠cTnI抗体(Santa cruz),FITC标记的抗羊IgG (Boster),Hoechst33258 (Sigma, USA)。健康SD 大鼠,4周龄,质量80~100g,雄性,由第四军医大学动物实验中心提供。

1.2 方法

1.2.1 BMMSCs的体外分离和培养 颈椎脱臼法处死大鼠,取其四肢长骨,75%酒精浸泡5min。无菌条件下分离出胫骨和股骨,剪除两端骨骺,用不含血清的DMEM培养液冲洗骨髓腔,充分混匀。将细胞悬液缓慢加入含淋巴细胞分离液的离心管中,2000r/min, 离心20min。取中间云雾状有核细胞层, 加入L-DMEM不完全培养液,充分混匀后,1500r/min, 离心10min,弃上清,加入完全培养液,充分混匀后,调整细胞密度为1×106/ml,接种于T-25塑料培养瓶, 37℃含体积分数为0.05的CO2孵箱中饱和湿度培养。3天后首次换液, 除去不贴壁的悬浮细胞,以后每3天换液1次。待细胞长到80%融合时, 用2.5g/L胰蛋白酶进行消化,按1:2的比例进行传代。体外培养至第3代备用。

1.2.2 BMMSCs的诱导分化 将传至第3代的BMMSCs进行分组诱导,共分为4组:(1)AngⅡ组(终浓度为0.1μmol/L);(2)5-aza组(终浓度为10μmol/L);(3)AngⅡ加5-aza组(终浓度分别为0.1μmol/L、10μmol/L);(4)空白对照组, 仅用基本培养基诱导。各组诱导24h后更换完全培养基继续培养,每3天换液1次, 并观察细胞形态变化, 连续培养4周。

1.2.3 形态学鉴定 每日在倒置显微镜下观察诱导前、后细胞生长和形态变化。

1.2.4 MTT法检测细胞活性并描绘细胞增殖曲线 将第3代BMMSC以1×105/ml接种于4个96孔板中, 每块板选取24孔,分为4组,每组6孔,每孔加200μl细胞悬液。培养24h后吸弃孔内培养液,PBS洗涤2次,前3组分别加入含AngⅡ、5-aza、AngⅡ和5-aza的诱导培养液,第4组加入基本培养基作为对照组。诱导24h后各组更换完全培养基继续培养。于培养 1、3、5、7天后进行MTT 检测,每孔加入20μl MTT(5mg/ml),孵育4h后终止培养。弃孔内上清液,每孔再加入150μlDMSO, 打匀振荡10min,使结晶物充分溶解。选择490nm波长,在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值(A),并描绘细胞增殖曲线。

1.2.5 免疫荧光细胞化学检测 将诱导培养1、2、3、4 周的细胞进行爬片,4%的多聚甲醛固定,3%过氧化氢-甲醇室温孵育10min ,正常山羊血清封闭,加cTnI抗体,4℃过夜,PBS冲洗,加FITC标记的二抗,37℃孵育40min,PBS 冲洗,Hoechst33258室温孵育10min,PBS 冲洗,甘油封片,荧光显微镜观察并拍照。

1.2.6 流式细胞计数法 2.5g/L的胰蛋白酶消化收集诱导4周的细胞, PBS调整细胞悬液密度约1×106个细胞 /ml, 滴加羊抗鼠 cTnI抗体,室温 1h,再滴加 FITC标记的抗羊 IgG,室温避光 40min,40g/L多聚甲醛固定 20min。最后流式细胞仪测定 FITC阳性标记细胞占细胞总数百分比。

岁岁又重阳范文第3篇

重阳节,又称重九节、晒秋节、踏秋,中国传统节日。庆祝重阳节一般会包括出游赏秋、登高远眺、观赏、遍插茱萸、吃重阳糕、饮酒等活动。每年的农历九月初九日,与除夕、清明节、中元节三节统称中国传统四大祭祖的节日。重阳节,早在战国时期就已经形成,到了唐代被正式定为民间的节日,此后历朝历代沿袭至今。重阳与三月初三日踏春皆是家族倾室而出,重阳这天所有亲人都要一起登高避灾。

《易经》中把六定为阴数,把九定为阳数,九月九日,日月并阳,两九相重,故曰重阳,也叫重九。重阳节早在战国时期就已经形成,自魏晋重阳气氛日渐浓郁,倍受历代文人墨客吟咏,到了唐代被正式定为民间的节日,此后历朝历代沿袭至今。

1989年农历九月九日被定为老人节,倡导全社会树立尊老、敬老、爱老、助老的风气。2006年5月20日,重阳节被国务院列入首批国家级非物质文化遗产名录。 2016重阳节经典贺词

1.送你九九重阳节开心秘方:工作放一放,心事搁一搁,烦恼抛一抛,身体歇一歇,心情酿一酿,开心笑一笑,牙齿露一露,快乐好心情。祝天天开心!

2.岁岁重阳,今又重阳,日日思念,来把情传,重阳九月九,友谊就如酒,永远都会久,重阳登高日,祝福送给你,愿你重阳佳节日,开心无限期!九九重阳节祝福语

3.岁岁重阳,今又重阳,傲霜满地香;久久思量,久久难忘,九九重阳胜春光;美酒一杯,秋雁两行,福泽深厚又绵长。祝重阳快乐,永远健康!

4.岁岁重阳,今又重阳,九九相逢祥瑞降。不似春光,胜似春光,秋高气爽喜洋洋。金菊飘香,归雁成行,健康喜乐福绵长。重阳节,祝你幸福安康!

5.松柏不残四季翠,山村难老百岁人,三三令节春时松,更高九九芳辰重阳鹤添寿,愿秋风捎去我的思念和祝福,祝你越活越精神,越活越年轻!

6.思念在岁月中荡漾,南飞的大雁披上了霓裳,金菊在清风中绽放,转眼又到了重阳。看一回天高云淡,走一路山高水长,道一声幸福安康。重阳快乐!

7.说重阳,道重阳,收获季节,遍地金黄;秋风吹动,秋高气爽,稻子熟透,渐香,岁月岁岁重阳,今又重阳,不是春光,胜似春光,一根扁担,两挑箩筐,三秋雁阵,四分五行,六六大顺,七下八上,九九重阳,十月农忙,短信在此,祝你健康!

8.虽然我不能陪你品酒赏菊,但我们可以共赏同一条短信;虽然我不能陪你登高插萸,但我们可以转发同一条祝福;重阳节,总有一条短信专门送给你。

9.送一缕阳光给你,在秋日的萧瑟中为你捎去温暖,送一份祝福给你,在重阳佳节即将到来的日子里为你带来关怀,预祝重阳节快乐,天天快乐。

10.送上一支山茱萸,愿你永远愉快;送上一块重阳糕,愿你永远高兴;送上一杯酒,愿你幸福久久。重阳节到了,祝福你节日天天好心情!

11.送你清风让你心旷神怡,送你细雨洗去你疲惫的汗迹,让蓝天作封白云作信,让流星作我的特快专递,送你彩虹通向梦想之旅,祝你重阳节快乐!

12.如歌,天地变凉,思念不变,祝福奉上。重阳节快乐!

13.霜降遇重阳送你养身小方子,没事洗个鸭梨子,润润小嗓子,睡觉盖好了被子,赶走疾病的引子,打着问候的旗子,送来好运的影子,祝你快乐过日子!

14.双九重阳佳节到,短信祝福来问好:相逢总是很奇妙,生活无忧无烦恼,工作压力瞬间消,伤心失落全跑掉,锻炼身体多散步,愿你重阳更美好!2013重阳节祝词

15.双九节,出游赏景好时节;九九节,登高远眺值佳节;重阳节,观赏好季节;遍插茱萸、吃重阳糕、饮酒,可去邪,祝君重阳过好节!

16.帅哥味好纯:但得夕阳无限好,何须惆怅近黄昏,愿你拥有一个美好、快乐的节日!秋风徐徐,重阳九九,蒸上九重的粟糕,备好香醇的菊酒,等着与你分享。

17.岁岁重阳,今又重阳,又见香;不是春光,胜似春光,秋色迷人心芬芳。让我登上高处,为你送来真诚和爱的祝福:祝重阳快乐,合家康泰!

18.岁岁重阳,今又重阳,谁道秋日凉?重阳节里歌声放,祝福飞来心飞扬。九月九里共举杯,声声祝福暖心扉。短信送到你这里,祝福也能化伤悲!

岁岁又重阳范文第4篇

2、我轻呵出一团气,将满天飘舞的思绪,凝结成一朵白云,用心把它绘的五彩斑斓,载上沉淀的祝福,带去来自远方的重阳节的问候——送给永远开心的你!

3、岁岁重阳,今又重阳,不似春光,胜似春光。松柏不残四季翠,山村难老百岁人。祝您重阳节快乐!

4、佛说:重阳节又到,要相约登高,要常思故友,尤其是现在给你发短信的人!要经常请他吃饭!特别是九月九!要把你最最真诚的祝福都给他!善哉!善哉!

5、回乡的路,曲曲弯弯,辙痕深浅。回家的心,早早晚晚,冲过篱藩。故园的情,岁岁年年,月挂云端。又到重阳倍思亲,异乡客,心相近,祝吾友,多温馨!

6、

7、愿友情像秋日的红叶那样美丽,愿你心情像秋日的蓝天那样爽朗,愿爱情像秋日的果实一样丰硕,愿老朋友重阳节开心快乐!

8、一九二九,天长地久;三九四九,幸福永久;五九六九,福禄长久;七九八九,神交已久;重阳九九,相伴久久!重阳节快乐!

9、九九重阳,因为与“久久”同音,九在数字中又是数,有长久长寿的含意,况且秋季也是一年收获的黄金季节,重阳佳节,寓意深远。祝你重阳节快乐!

10、重阳节到,我向月老许愿让你幸福,他答应;我向财神许愿让你富裕,他点头;我向王母许愿。。。玉帝说:诸神放假过节,干脆祝收到短信的人心想事成吧!

11、您生命的秋天,是枫叶一般的色彩,不是春光胜似春光,时值霜天季节,却格外显得神采奕奕。祝您老重阳节快乐,健康长寿!

12、夜里开机看见,重阳佳节祝福。千万里送来问候,万千言语祝福,温暖你心扉。我的短信飞快,犹如光速传载,了却重阳开心事,赢得佳人美酒归,歌声满天飞!

13、重阳佳节到来,亲朋好友开怀,祝你心情愉快,心事统统放开。九月九,让我们一起登高望远吧,借着醇香的美酒,分享心中的忧愁与快乐,重阳节快乐!

14、九月九,重阳节。梳个鬏,换个装。拜个舅,唱个喏。喝个酒,散个心,叙个旧,念个情。好日子,年年过。重阳节,更快乐。

15、又是一年重阳时,花点小钱祝福你;秋高气爽好时节,登高赏菊最适宜;发封短信问候你,愿你事事都顺利!祝重阳节快乐!

16、九九重阳节,九个祝福送给你,一祝身体好,二祝心情妙,三祝快乐绕,四祝好运到,五祝来钞票,六祝烦恼跑,七祝永不老,八祝万事好,九祝短信告。

17、生活贫穷还是富裕,开心就好;工作辛苦还是轻松,快乐就好;朋友近邻还是远离,惦记就好;祝福简短还是冗长,真心就好!祝你九九重阳快乐一切都好!

18、千重坎万重关,愿快乐阳光伴你灿烂;千重水万重山,愿好运阳光陪在你身边;千重地万重天,愿成功阳光温暖你心间。重阳佳节,愿久久好运把你围绕!

19、九九重阳节,老人最希望健康永久,孩子最盼望快乐长久,情人最期望天长地久,上班族最渴望活力持久,在这个悠久的节日,我最想说:祝你好运更长久!

20、当国庆遇到重阳,这是盛世和传统的碰撞:是要清楚告诉我们,出游欢乐的时光,莫忘家中苍老的爹娘。陪父母登高望远赏菊香,祝愿父母快乐安康,莫忘!

21、九九重阳两九相遇,物极必反,万物凋零。我的祝福经年累月伴随你,不会断绝,不会凋零,永远年轻。重阳节祝你带着快乐迎接秋雨,带着温暖迎接严寒。

22、重阳气坏了灰太狼,不能团聚还要抓羊。对着发毒誓,一定杀尽小绵羊。他正赶着去找你,你要小心的提放。重阳节里多快乐,你这可爱的小绵羊。

23、饮一碗美酒,登一座高山,插一片茱萸,赏一坛,掬一把相思,送一份祝福,又逢重阳佳节,我祝您节日快乐,健康幸福!

24、一年一度重阳,祝福大不一样,生活喜气“阳阳”,职场“阳阳”得意,幸福身边徜“阳”,爱情沐浴阳光,心情阳光灿烂。收下祝福吧!重阳节快乐!

25、重阳节到了,翻遍《辞海》也没有找到一句值得送给你的祝福,所以只能俗气地祝你享的福气如东海泛滥,你领的薪水如南海澎湃。重阳“海皮”!

26、我用彩云编织缱绻的梦境,收集心中每一份感动,许下星空每一个祝愿,记载心头每一丝企盼,交织成一首幸福美丽的乐章,在这重阳佳节伴随你!

27、秋来天气渐转凉,不知不觉到重阳。温馨问候情意长,真诚关怀存心房。秋菊艳艳多欣赏,秋雨潇潇添衣裳。秋风送去我祝福,幸福永伴你身旁。重阳快乐!

28、岁岁重阳,今又重阳,傲霜满地香;久久思量,久久难忘,九九重阳胜春光;美酒一杯,秋雁两行,福泽深厚又绵长。祝重阳快乐,永远健康!

岁岁又重阳范文第5篇

文案一

1、送你一棵茱萸,愿你大吉大利;敬一杯酒,祝你健康又长寿;送你一架云梯,助你登高远望;送你一句祝福,重阳节快乐!

2、有些往事,即使远去也会在心头萦绕;有些人,即使不常联系也会常记在心里;就像你,只轻轻的一个短信,就是我衷心心意的快递!祝:重阳快乐!

3、蓝天作信封,白云作信纸,流星是偶的特快专递。送你清风让你心旷神怡,送你细雨洗去你疲惫的汗迹,送你彩虹通向梦想之旅重阳节!重阳节快乐!

4、九月初九重阳节,遵守传统好风俗。登高远眺金秋景,寓意吉祥步步高。饮酒祈福赏,保佑寿比南山松。尊俗重道度重阳,祝你幸福久久长。

5、朵朵迎风开,悠悠花香沁心脾;九九重阳翩翩至,喜上心头笑开怀;漫步郊外心情爽,徒步登高乐逍遥;举目远眺观美景,心旷神怡爽歪歪;朋友特来送祝福,情谊绵绵深又厚;祝你重阳好心情,生活幸福喜滋滋!

6、朵朵迎风开,悠悠花香沁心脾;九九重阳翩翩至,喜上心头笑开怀;漫步郊外心情爽,徒步登高乐逍遥;举目远眺观美景,心旷神怡爽歪歪;朋友特来送祝福,情意绵绵深又厚;祝你重阳好心情,生活幸福喜滋滋!

7、九九重阳是中国文化中最吉祥的日子,在这金风送爽,桂花飘香,争艳的日子里,我祝各位幸福久久,健康久久,更祝长辈们多福多寿。祝重阳节快乐!

8、送你一盒重阳糕,它以祝福与问候为原料,相间叠放:一层幸福粉,一层平安糖,一层开心豆,一层健康果,愿你重阳节快乐。

9、蓝天作信皮,白云作信纸,流星是我的特快专递。送你清风让你心旷神怡,送你细雨洗去你疲惫的汗迹,送你彩虹通向梦想之旅,祝你重阳节快乐!

10、重庆遇见重阳就是双重,今天祝福与问候双重,祝你工作与生活双重棒,健康与快乐双重好,幸福与甜蜜双重久,此短信你如果收到两遍,那是因为我发重了。祝重阳节快乐!

11、遍地的茱萸都想戴在你头上,长出很多的幸福吉祥,我们一起欢畅疯狂;登到最高处哪怕是你的心上,让金秋的为你飘香,九月九我们的重阳,祝你生活步步高,幸运又安康。

12、月九,送美酒,幸福酒,好运旺,快乐人生乐安康;友谊酒,情意深,久久的祝福长又长;九月九,重阳到,祝你快乐久久!

13、轻轻打开你的手机,慢慢翻看我的祝福:愿今天的你:快乐!今年的你:顺利!今生的你!健康!今世的你:幸福!恭祝您及家人重阳快乐幸福!

14、金秋时节到,空气好又好,九九重阳节,悄悄来到了,登高插茱萸,这个少不了,畅饮酒,这个最为妙,发个短信息,这个最重要,身体要健康,这个我看好。

15、可能你不知道重阳为什么要登高,不知道重阳为什么要插茱萸,不知道重阳为什么要赏,但是我知道发这条短信是为了给你带去真切的祝福!重阳节快乐!

16、我在手机的这边,你在手机的那边,中间是无形的电波,距离阻隔了相见,却阻隔不了祝福,让这条短信随着无形的电波传送到你的手机中,重阳节快乐!

17、九九重阳,好事成双,送给你双重的祝福:快乐+快乐=快快乐乐,圆满+圆满=圆圆满满,长久+长久=长长久久。祝你快快乐乐圆圆满满长长久久。

18、重阳节快乐,一句最简单的祝福送给你,希望你天天都能健康快乐,忘记心中的.烦闷,拥有一份阳光般灿烂的心情。

19、在思念的日子里,留下了如同秋叶般数不尽的美好回忆,我托秋雁把最真心的祝福送给你:愿你在重阳节里美丽如金秋菊,好运如重阳糕,甜美如重阳酒。

20、九月九日上酒楼,酒醉醉酒忘忧愁,久久凝思九九日,九九重阳想舅舅,纠结思念家中舅,久久未见离家久,带酒一瓶送舅舅,祝福永久在心中。

21、重阳节到了,祝你登高望远,事运,财运,爱情运,运运皆高,祝你把酒畅欢,人欢,心欢,情欢,事事皆欢!重阳节快乐!

22、处事秘笈:做人要像李莫愁,刮风下雨都不愁;做事要像张无忌,牛鬼蛇神都不惧;工作要像王重阳,全真七子来帮忙;生活要像韦小宝,快乐幸福没烦恼!

23、稻花香,插茱萸,登高望远喝小酒。吃花糕,又相聚,赏菊品茗会挚友。九月九,重阳日,健康开怀人长久。重阳节即将到来,短信预祝重阳快乐!

24、九九重阳,沉淀着金秋的丰硕,感受了生活的温馨。它是属于花甲卸任转折的轻松、古稀牵手连接的和睦、耄耋拐杖支撑的充实的。一句贴心的问候、一条温馨的短信,祝愿所有朋友节日快乐。

25、重阳节到了,看在我这个这么"重"量级人物在这个"阳"光灿烂的节日里给你祝福问候的份上,你怎么得也该高兴快乐吧!重阳节快乐哦!

26、正值秋高气爽,人寿花香,一条短信带来我的九九的渴望;正值彩云追月,桂花飘香,一条短信带来我的九九的衷肠,祝你开心重阳,幸福重阳!

27、重阳节,更是老人的节日,您生命的秋天,是枫叶一般的色彩,不是春光胜似春光,霜天季节,却格外神采奕奕。祝老人们重阳节快乐,健康长寿!

28、邀你一起品尝九月九的酒,能赏个脸吗?重阳节快乐!

29、九九重阳节就要到了,提前祝愿所有活跃的、沉默的、热情的、深沉的、玩酷的、耍赖的、在线的、隐身的朋友们:重阳节快乐!

30、轻风拂山岗,遍野黄,佳节到重阳,思君登高望。情意心中藏,祝福暖心房,快乐似水长,好运伴君旁。鸿雁带福至,悠闲莫匆忙,天高云淡时,愿你永安康!

31、今又重阳,祝福送上,敬老踏秋,只为安康。登高眺望,前程光芒,轻嗅菊香,心情舒畅,糕点黄黄,幸福荡漾,九九节日,祝你全家快乐流长。

32、为了让你更加开心,为了让你忘记铰单,为了让你感受到生活的美好,请大声地念出一下的祝福语:重阳节快乐。

33、酒是什么样的酒,友情长青酒;久是什么样的久,天长又地久;九是什么样的九,一四六八九,祝你丰"一"足"四",工作顺"六""八"大财。重阳快乐!

34、独在异乡过重阳,每逢佳节把你想,不知好友怎么样,编条短信送吉祥。过个重阳不容易,即使不能在一起,祝福收到笑嘻嘻:祝重阳节快乐重重!重阳节快乐!

35、双九重阳佳节到,微信祝福来问好:相逢总是很奇妙,生活无忧无烦恼,工作压力瞬间消,伤心失落全跑掉,锻炼身体多散步,愿你重阳更美好!

36、九月九,送美酒,桃花酒,姻缘到,甜蜜爱情香又香;幸福酒,好运旺,快乐人生乐安康;友谊酒,情意深,久久的祝福长又长;九月九,重阳到,祝你快乐久久,"久"是幸福哟!

37、恁个久没盯到你,重阳节我还是整条短信,假巴意思问候哈你嘛!祝愿你身体巴巴适适勒,生活得安安逸逸勒,工作得耍耍搭搭勒,日子过得撑撑抖抖勒!

38、您生命的秋天,是枫叶一般的色彩,不是春光胜似春光,时值霜天季节,却格外显得神采奕奕。祝您老重阳节健康长寿!

39、但是夕阳无限好,何须惆怅近黄昏! 苍龙日暮还行雨,老树春深更着花! 祝您越活越精神!年年重阳都快乐!

40、曾经您告诉我,三月三风筝飞上天,那是童年的快乐。现在,九月九香,是老人节,是您的节日,亲爱的爹娘,祝你们身体安康、福寿永享,重阳节快乐!

41、想念你,在每一个嫁接;祝福你,在每一个新的一天;愿快乐在你身边围绕,让美梦总是在你身边守候。重阳来临的时刻,愿你今天比昨天更快乐!

42、斟上一杯重阳酒,遥表思念牵挂长,身插茱萸祈平安,悠悠惦念在心间,又到一年重阳节,点点祝福随风传,重阳节,愿你平安幸福,重阳快乐!

43、愿你薪水多赚,奖金满满;快乐天天,幸福年年!祝我们这些表面风光内心彷徨;容颜未老,心已沧桑;成就难有,郁闷经常;比蚂蚁忙;比岳飞更忠良的兄弟姐妹们,重阳节快乐!

44、时光流逝,流不走我心中的你!将万千思念托付那吉祥鸟,带去我深深的问候;时间阻挡不了那份执著,不管未来之路多么崎岖,今天给你送上重阳祝福!祝你重阳节快乐!

45、一丝秋雨秋意浓,一缕秋风秋情动,一轮明月谁与共,一份思念遥相送,一枝茱萸情义重,一朵香入梦,一条微信你会懂,一片真情重阳祝福中。

46、心存明月,月照九州,可知人生本无常?正香,今夕昨昔相聚相离,琴瑟琵琶丝竹管弦,遍插茱萸,花中行乐月中眠,半醉半醒,谱写重阳喜庆的乐章

47、凋零的不是那季节,而是花朵;成熟的不是那果实,而是岁月;南飞的不是那大雁,而是心情;牵挂的不是那日子,而是家人。重阳节,气候变,请您注意健康!

48、九月九,重阳节,一样的季节,一样的日子,一样的牵挂,一样的思念,一样的深情,一样的心情,一样的问候,一样的祝福,愿你拥有一个愉快的重阳佳节!

49、重阳节到了,回忆起你我当初在一起的日子,那是一段永远难忘的友情岁月,当你在孤独时别忘记还有一位老朋友惦记着你,真心祝你一切顺利,天天开心。

50、岁岁重阳,今又重阳,九九相逢祥瑞降。不似春光,胜似春光,秋高气爽喜洋洋。金菊飘香,归雁成行,健康喜乐福绵长。重阳节,祝你幸福安康,和和美美!

文案二

1、秋风凉,秋菊香,秋景中迎来重阳,合家欢,兄弟聚,好日子里秉烛叙,插茱萸,齐登高,九九快乐更美好,思念深,祝福来,祝你重阳开心愉快!

2、重阳佳节忆兄弟,千言万语不足惜;有人登高去远眺,有人林中来采菊;我在这里想着你,愿你重阳好运气;幸福全都在心底,健康好梦更吉利!

3、重阳佳节团聚,亲朋好友团聚,情人恋人团聚,你我他团聚,在这个快乐的节日里!真心祝福你:事业丰收,薪水丰收,爱情丰收,快乐永相伴!

4、重阳佳节珍贵,周末不能浪费。出门旅游太累,登高望远太贵。回家孝敬父母,享受亲情安慰。尝尝妈妈手艺,美食值得回味。家庭和谐幸福,工作才不疲惫!

5、重阳佳节又来临,送你几条小建议,出游一定不要去,费钱费神又费力,登高危险系数大,一不小心就要上担架,不如发个短信,打个电话,陪我一起诉牵挂!

6、重阳将来到,快乐步步高。人间重晚晴,殷殷寸草心。霜叶红胜花,岁岁好年华。莫道桑榆晚,幸福金不换。愿你重阳享安康,吉祥伴身旁。

7、重阳佳节来相聚,亲朋好友在一起,情人恋人笑欢语,你我短信传祝福。让我们为明天美好的前程相聚吧!相聚重阳,相守未来,重阳快乐!

8、莫道重阳秋风凉,果实累累喜洋洋;莫道重阳雨霏霏,红叶挂满心头醉;莫道重阳夕阳红,阅尽风霜霞光美;莫道重阳话凄凉,登高远眺思绪飞!祝重阳节快乐!

9、飘香,秋风清凉,高望远,开心舒畅,遍插茱萸,互祝健康,重阳佳节,兄弟同堂,故人重逢,畅抒心房,亲情友情,随秋高扬,共度重阳,同庆安康。

10、重阳佳节到来,愿你心里幸福暖洋洋,开心笑声随风扬,美好心情任传扬,夫妻恩爱似鸳鸯,友情爱情齐荡漾,事业身体皆无恙,喜庆多多胜骄阳。

11、重阳佳节送你一条充满法力的短信,收到的人将会时来运转;前途平坦,兜里有款,甜长苦短,薪水翻番,好吃好穿,常有新欢,追求的路程越走越宽。

12、重阳佳节送你限量版重阳糕,祝你心情好开心程度高,工作顺办事效率高,薪水涨升级职位高,身体棒生活质量高,朋友多人气指数高,福气到运气与天齐高!

13、重阳佳节送你几颗心:早上出门舒心!路上小心!遇事耐心!做事细心!交友留心!待人诚心!对自己有信心!对情人有爱心!更重要的是重阳佳节你最开心!

14、重阳将来到,快乐步步高。人间重晚晴,殷殷寸草心。霜叶红胜花,岁岁好年华。莫道桑榆晚,幸福金不换。愿你重阳享安康,吉祥伴身旁。

15、岁岁重阳,今又重阳,九九相逢祥瑞降。不似春光,胜似春光,秋高气爽喜洋洋。金菊飘香,归雁成行,健康喜乐福绵长。重阳节,祝你幸福安康!

16、我愿化作一片云,随你漂流到天涯海角,我愿变成一首歌,寂寞时在你耳边响起,我用心编写最真挚的祝福,在这重阳佳节里送给您,愿您越活越精彩!

17、重阳佳节九月九,赠你酒,祝你平安健康久;邀你爬山观秋景,登高转运好运久;与你同享蜜花糕,事业甜蜜快乐久;送你一方茱萸佩,趋吉迎祥幸福久。

18、重阳佳节九月九,美好祝福送不够。生活甜蜜如美酒,爱情幸福到永久。工作轻松常袖手,家庭和谐福常有。诸事顺利烦恼走,一切如意喜临头。

19、思念如一叶扁舟,在岁月的长河中漂流,划过一年一年一天一天。记录点点滴滴,丝丝缕缕,到重阳节那天,一触即发!祝重阳节快乐!

20、九月九,再聚首,重阳相聚会老友;是亲友,是朋友,一切尽在杯中酒;情也深,爱也久,佳节团圆来叙旧;念今昔,盼永久,每年相聚九月九。重阳节快乐!

21、送你一盒重阳糕,它以祝福与问候为原料,相间叠放:一层幸福粉,一层平安糖,一层开心豆,一层健康果,愿你重阳节快乐。

22、重阳临,提前许九个美丽愿望送你:一愿心情好,二愿忧愁抛,三愿幸福绕,四愿收入高,五愿身体康,六愿烦恼消,七愿不变老,八愿困难少,九愿乐逍遥!

23、重阳佳节九月九,吉祥好运送朋友:事事顺心好运有,烦恼没有幸福留;亲情友情和爱情,犹如日月天长久;短信祝福送你手,美满如意到久久。重阳节快乐!

24、秋菊,倾吐悠悠清香;茱萸,环绕片片吉祥;登高,遥寄无限思念;酒杯,斟满情谊美酒;心灵,发送诚挚祝福:九九重阳,愿你开心,心情愉悦!

25、将彩云编织缱绻的梦境,收集心中每一份感动,许下星空每一个祝愿,记载心头每一丝企盼,交织成一首幸福美丽的乐章,在这重阳佳节伴随你!

26、祝福你理想幻想梦想心想事成;公事私事心事事事称心;财路运路人生路路路畅通;晴天雪天天天开心,亲情友情爱情情情似海;重阳节快乐!

27、重阳佳节秋高气爽,登高锻炼飘香,遥望远方思绪飞扬,家中亲人是否安好?发条短信道声平安,问声安好表表心愿,祝福亲友久久好运久久健康!

28、重阳佳节秋风凉,多添衣来保安康,时节好做茶,泻火安神心清爽,天渐干多多喝水,夜渐长作息如常,饮食注意规律,锻炼适当加强,愿重阳再添安康。

29、有你相伴,黄金不换,有我祝福,身体舒服,快乐重阳,天天吉祥,短信字少,情意却多,在这美好的节日里祝你永远幸福,重阳节快乐!

30、重阳节,登高行。鲜花旁,笑脸映。空气朗,伴清风。吉祥茶,如意饼。邀亲朋,相思情。若怀念,望荧屏。问候语,表心声。遥祝愿,笑不停。祝重阳快乐!

31、岁岁重阳,今又重阳,又见香;不是春光,胜似春光,秋色迷人心芬芳。让我登上高处,为你送来真诚和爱的祝福:祝重阳快乐,合家康泰!

32、岁岁重阳,今又重阳,谁道秋日凉?重阳节里歌声放,祝福飞来心飞扬。九月九里共举杯,声声祝福暖心扉。短信送到你这里,祝福也能化伤悲!

33、重阳节到了,也没啥好送你的,就送你一束吧。可别小看它,你可以用它酿成酒,饮后无忧愁;还可制成糕,吃后乐逍遥。重阳节快乐!

34、岁岁重阳,今又重阳,不是春光,胜似春光,一根扁担,两挑箩筐,三秋雁阵,四分五行,六六大顺,七下八上,九九重阳,十月农忙,短信在此,祝你健康!

35、虽然我不能陪你品酒赏菊,但我们可以共赏同一条短信;虽然我不能陪你登高插萸,但我们可以转发同一条祝福;重阳节,总有一条短信专门送给你。

36、重阳佳节翩然到,尊长敬老尽孝道,登高祈福好运临,家人同食重阳糕。金黄富贵临,茱萸悬门福气绕,踏秋田野赏美景,举杯美酒吉祥兆。愿你重阳心情好,家人团聚乐逍遥,健康常在迎祥瑞,福气临门好运到!

37、重阳佳节到来,亲朋好友开怀,祝你心情愉快,心事统统放开。九月九,让我们一起登高望远吧,借着醇香的美酒,分享心中的忧愁与快乐,重阳节快乐!

38、重阳佳节到来了,亲朋好友开怀笑,心情愉快外出游,心事统统来丢掉。九月初九好日子,登高望远吉祥拥,醇香美酒举杯饮,分享心中忧与乐。祝愿朋友重阳节快乐!

39、空气中弥漫着欢乐,树梢上飘落着祝福,重阳的温馨在招手,节日的激情在喷薄。偶愿化作清风、阳光、白云,给你载来如意、健康、财富。重阳节快乐重阳节来历!

40、带一颗心去登高,让一双眼去望远,携一份情怀去思念,寄一缕清风去相见,托一个好梦去连线,送一声祝福去你身边。重阳节,愿你步步高,天天好。

41、送一缕阳光给你,在秋日的萧瑟中为你捎去温暖,送一份祝福给你,在重阳佳节即将到来的日子里为你带来关怀,预祝重阳节快乐,天天快乐。

42、送上一支山茱萸,愿你永远愉快;送上一块重阳糕,愿你永远高兴;送上一杯酒,愿你幸福久久。重阳节到了,祝福你节日天天好心情!

43、送你清风让你心旷神怡,送你细雨洗去你疲惫的汗迹,让蓝天作封白云作信,让流星作我的特快专递,送你彩虹通向梦想之旅,祝你重阳节快乐!

44、重阳敬请歇一歇,又是一个传统节;南方飘雨北方雪,朋友还是我俩铁;人生相逢皆缘起,日月轮转点点滴;祝福就是送给你,祝你快乐又如意!

45、九九芳辰重阳鹤添寿,愿秋风捎去我的思念和祝福,祝你越活越精神,越活越年轻!

46、借此佳节之际我感谢你,你的笑颜似灿烂的阳光照亮了我的'世界,你给予我的安慰和鼓励支持我度过一切艰苦,言语不能表达我对你的情谊,你是一位了不起的人。祝你重阳节快乐!

47、江涵秋影雁初飞,与客携壶上翠微。尘世难逢开口笑,须插满头归。但将酩酊酬佳节,不作登临恨落晖。古往今来只如此,牛山何必独沾衣。

48、红颜未虚伏虎降龙,白发带笑铺金叠翠!天高气爽,人寿花香!

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