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望尘莫及

前言:想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗?我们特意为您整理了5篇望尘莫及范文,相信会为您的写作带来帮助,发现更多的写作思路和灵感。

望尘莫及范文第1篇

这样一个潮湿又有些阴冷的下午,莫尘一个人在爱房间里无所事事。房间内很暗,莫尘喜欢这样。房间的窗帘是拉上的,因为她不喜欢看看到窗外才潮湿和氤氲。那些潮湿会夹杂着些许落寞,悄悄从窗口爬进来,然后慢慢的漫延整个空间。莫尘会感觉窒息。空气是潮湿的,心也变的潮湿。莫尘的心情会变的很糟糕,所以,她选择拉上窗帘,在暗黑中,静静地待着。

电脑开着,孤独地在角落里演绎着繁华,电脑旁的咖啡,还冒着热气,莫尘刚刚从网络中出来。静水告诉莫尘她要结婚了,她要过常人的日子,不再忧伤。不再做编辑。静水说,即使没有好的结局,我也要享受暂时的温暖,因为我已经30岁了,30岁的女人,是要找个归宿了。莫尘在屏幕前发了一会呆,静水说了很多他们的事,莫尘只是回了一个笑脸,然后就下了线。莫尘的心,被什么刺痛了,非常的痛。

点燃一支烟,莫尘吐出一个很圆的烟圈,她觉得自己的姿态很优雅,与静水相识,就是因为,她们是这样的女人,咖啡,采访,文字,香烟。静水竟然愿意相信爱情了。可是莫尘的心依然冰冷,爱情,只不过是彼岸的花朵,看着很美,却无法采摘。因为她有着孤独的灵魂,和许多爱情留下的伤口。无法相信美好!

小时候,莫尘和奶奶一起生活在农村,莫尘最喜欢走长长的铁路。固定的轨道,每一步都是同样的距离。莫尘觉得那样走不费劲,可以什么都不用想,只管走。到转弯处,脚下的枕木会提示:向后望。莫尘每次只要看到,就会回头望,虽然有时候自己知道,并没有火车,可是她就是一直会回头望。回头的时候,就看见奶奶在路旁望着自己,奶奶总是不放心她一个人走。莫尘挥挥手,继续往前走,再回头望。

似乎已经成为一种定势,这么多年的路,莫尘总是很固执地走自己的路,总是不停地回头张望,记忆力的每个人,每件事,以至于有人说过的话,她都会记得很清楚。一个人的时候,她就默默地细数过往,那些美好和伤害,那些落拓和不羁,那些结束了却未曾散去的爱情,当变的似乎模糊的时候,莫尘会固执地翻箱倒柜努力将他们变的清晰,看到伤口,莫尘会异常的满足和清醒,就像蝙蝠一样,莫尘是靠吸取黑暗和残酷来生存的。

莫尘的身边,一直有男人追随,但她,一直是很冷的态度。她宁愿躲在咖啡馆喝咖啡,上网。也不愿意和关心她到人在一起。他和林成分手之后,莫尘对男人已经没有了感觉,不是不想爱,而是没有能量,有时候,也想试着体验一下温暖的感觉,试着像个孩子一样,在街上让男人给她买冰糖葫芦,然后在大街上毫无顾及的吃,但是,心依旧是冰凉的。莫尘会突然不说话了,然后再找个机会逃走了。

有一个男人对莫尘非常好,是莫尘喜欢的那种很绅士的男人。他的每一个细节,每一个动作,都很小心。他也很健谈。莫尘和他在咖啡馆度过很多个夜晚。可是,当某天晚上分别时他的一个拥抱的动作,所有的一切,在莫尘眼里都边成了虚假。莫尘想起周董的一句话“每个人都带着面具说谎,动机只有一个,叫做欲望”莫尘不喜欢这样,她不喜欢有动机的男人,这个社会,爱情,似乎已经成了性的掩饰。莫尘宁愿孤独,也不要沉沦。

也许这一切,源于林成。林成是莫尘高中时的学长,不英俊,也不优秀。他抽烟,赌博,打群架,多次被学校记过,莫尘做为优秀的尖子生,却无可救药地爱上了他。朋友,老师,家长全都劝说莫尘,莫尘就是一如既往地倔强,和林成住在一起。后来,林成被学校开除,当莫尘决定要随他走天涯时,林成却独自南下,后来再没有了消息。几年以后,当莫尘大学毕业时,她看到他带着一个很妖艳的女人回了一趟家。莫尘就像高中时看林成打架时一样,躲在远处,看着林成消瘦的脸颊和他冷冷的神情。他只是逃走了,而莫尘从高中到大学,独自承受着嘲笑和忧伤。莫尘的美丽,带着高贵的忧伤,让别的男人望尘莫及

大学毕业之后,因为要照顾奶奶,莫尘继续留在这个城市。她除了自己的房子,租下了高中时林成住的房子,很多时候,她都默默地在那个小房子里抽烟,回忆。只是,她不再相信爱情,不再轻易相信一个人。

雪生,是在一个下着雪花的晚上在上和她说话的。雪生在莫尘里很久了,只是从来都不说话。莫尘的上有很多这样的朋友。每天他们都在线,但是从来都不说话,但是都能感受地彼此的落寞和充盈。偶尔会到彼此空间里看一看,只字不留。都是很喜欢安静的人。

雪生突然问“感冒好了吗?”“没有,谢谢”“你们那边下雪了没有?”“下了,不大”“这边雪很大,非常美丽。”“呵呵”“开心一点好吗?我在杂志上看过许多你写的东西,都是那么忧伤,看的让我心痛”“我也想,可是,做不到”……那天,很少和陌生人聊天的莫尘,和雪生聊了许多。

雪生是哈尔滨一个大学的心理学教师,他说他的城市冬天很美,他喜欢在下雪天漫无目地的走,莫尘也喜欢。但是莫尘在西南的一个城市,这里很少有机会见到雪花,莫尘已经两年没有见到雪了。雪生打电话说,“有机会你一定要来哈尔滨,我带你看雪,看冰灯”莫尘微笑着说“我的家乡也很美,不太冷”她的预期变的很轻,放下电话,她觉得他们都很傻,他们都习惯了自己的环境和生活方式,明明是没有机会的,却还是在虚假地安慰彼此。她注定离不开这个地方,也注定不能到那么寒冷的地方。她答应过奶奶,不离开。也答应自己,等到林成回来问他为什么自己离开。

雪生和莫尘一直联系近两年,他经常打电话给她,嘘寒问暖,和她聊天,劝她不要再忧伤。莫尘会发信息告诉他她的生活,她遇到的趣事,和她神经质的感悟。雪生会给她寄很多调节情绪的,心理学方面的书。莫尘也常常在房间里,给雪生写信,闲散的生活,淡淡的伤感,一些琐碎的心事,但是,他们从来不提感情。

越是陷入,越是无望,彼此都明了,却无法停止。

亲戚打来电话,说奶奶病重。莫尘泪如雨下。她回去看奶奶,奶奶已经像个被风干的人,瘦的让人心疼。奶奶说,希望在走之前看见莫尘成家,这些年,她一直都太孤独。没有完整的家庭给我完整的爱。莫尘需要一个疼爱她的男人。莫尘说“你已经给我许许多多的爱”但是奶奶告诉她,当年是她劝走了林成。

莫尘想起高中时奶奶为了不让她找林成把她锁在家里的情形,那时候,她恨过奶奶。许多年前,奶奶站在铁路旁,一直观望着小莫尘走铁路,直到看不见了,才回去。莫尘一直都是记得的。

接下来,所有的亲戚都在为莫尘的事操心,莫尘会去相亲,和别人喝茶,吃饭,看电影,带回去给奶奶看。

望尘莫及范文第2篇

谁回眸时不经意的惊鸿一瞥,牵动着一颗心到支离破碎。执笔书绪,洒墨成殇,又一次用凌乱的语句祭奠着那些翩然轻擦的过往,于那苍白的文字,我始终没有放下。

——序

一曲离殇,唤不回你素笔浅描的妆容。烟花易冷,细雨纷纷,遗落在心底某个角落的那道身影,依旧是如此清晰,原来于你,我从未曾忘记。

熟悉的调子回荡在耳边,低沉而哀伤,但还是喜欢重复着去听,一遍一遍,直到双眼朦胧。雨丝淅淅沥沥的落在城市布满灰尘的大地上,尘土飘飘洒洒,孤单了谁惨淡的流年,唯留那些斑驳的回忆凋零在此夜里,辗转成歌。

宿命讽刺了等待,轮回苍老了流年。于茫茫人海那瞬间的凝望,浅妆淡雅的笑妍,转身回首时深情的眼眸,定格了灵魂深处几生几世的记忆。

夜雨似演绎着凄伤的古调,织成一曲无字的挽歌。眼角滑过的泪书写了怎样的哀伤,于泛黄的纸页,沉寂绽放着惆怅,孤独麻醉了愁绪。那些盘旋着的记忆,残缺了此生的眷恋,纵是一生繁华也抵不过你转身前的红颜一笑。

黑暗迷离了我的双眼,雨滴落在脸上,却冲不淡心中的思念,寂寞如梦魇般缠绕心间,嘲讽着过往的希冀。

于莽莽沧海,苦等一生,为了谁?

于荒芜尘世,痴迷一世,为了谁?

烟花易冷,人事易分,不知伽蓝寺的钟声是否依旧,当又一次倾听伽蓝雨声时,而你却已成过往。

望尘莫及范文第3篇

【摘要】 目的 应用RNAi技术沉默胰腺癌细胞株中survivin基因对肿瘤细胞凋亡、细胞周期和增殖的变化。方法 靶向survivin的RNAi载体转染胰腺癌细胞,Western印迹检测基因沉默效果,MTT法和流式细胞术检测细胞增殖、凋亡及细胞周期。结果 survivin基因沉默效率可达85%;MTT检测显示,干扰组survivin沉默细胞增殖抑制与非特异性质粒对照组相比显著增高(P

【关键词】 RNAi;survivin;细胞凋亡;细胞周期;胰腺癌

胰腺癌的发生、发展以及侵袭、转移是多基因参与、多步骤发生的过程,其中生存素(survivin)是一类在胰腺癌的发生、发展中起非常重要作用的癌基因〔1〕,其参与细胞多种重要生物学过程,包括基因转录调控、胚胎发生、细胞分化、肿瘤形成和转移等〔1,2〕。survivin在胚胎期表达丰富,而在成熟组织中则表达极少或缺失,但在病理情况下,包括胰腺癌的很多恶性肿瘤组织中均发现有survivin的高水平表达,并且其表达量与肿瘤恶性程度及转移能力呈正相关〔1,3〕。survivin的过表达和激活不仅与预后不良密切相关,而且能影响肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,是胰腺癌基因治疗的潜在靶点之一〔4,5〕。本研究选择survivin分子作为干扰靶点,检测沉默该基因后对胰腺癌细胞凋亡和细胞周期的影响,为进一步研究survivin基因在肿瘤细胞生物学特性及免疫抑制中的作用构建技术平台。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

人胰腺癌细胞株PC3购自中国科学院上海生物研究所细胞库,以含10%胎牛血清(Hyclone公司)的DMEM(Gibco公司)培养基,37℃,5%CO2孵箱(SANYO)培养。转染试剂LipofectamineTM 2000(美国Gibco公司),ECL化学发光试剂盒(美国Pierce公司),小鼠抗人单克隆survivin抗体(Santa Cruz公司)。干扰质粒pGenesil2、非特异性siRNA(武汉市晶赛生物工程技术有限公司),pGensilsiRNAsurvivin质粒由本室构建。AnnexinV凋亡检测试剂盒购自美国BD公司。

1.2 细胞培养与细胞转染

转染前1 d将对数生长期的胰腺癌细胞株PC3以2×105个/孔接种于6孔培养板,细胞铺板在2 ml含血清、不含抗生素的DMEM培养基中,24 h内、细胞融合达40%~60%时进行转染,将siRNA LipofectamineTM2000复合体加到培养板中(转染方法按试剂盒说明书操作),转染体系为500 μl,siRNAs终浓度为100 nmol/L。

1.3 Western印迹检测基因沉默效果

收集细胞,用PBS缓冲液漂洗3次,加入200 μl 细胞裂解液混匀、冰浴30 min。15 000 r/min离心10 min,以Lowry′s 法行总蛋白定量分析。制备12%分离胶、5%积层胶,上样,在8 V/era电压条件下行SDS聚丙烯酰胺电泳,待溴酚蓝进入分离胶时,将电压提高到15 V/era。电泳结束后,将分离出的蛋白质转至硝酸纤维素膜上(Millipore,USA),5%脱脂奶粉的TBS溶液封闭2 h,鼠抗人单克隆一抗和βactin室温孵育2 h,二抗室温孵育1.5 h,ECL 试剂盒显色,拍照,比较各组灰度变化。分为siRNA干扰组、siRNA干扰对照组(用非特异siRNA LipofectamineTM 2000复合体转染)、空载体组(以空白载体复合体转染)、未转染对照组(以等量培养基处理)作为对照,观察各组干扰效果。

1.4 MTT法检测细胞增殖

将各组细胞以2 000个/孔的密度接种于96孔板,体积200 μl/孔。分别于转染后24、48、72 h进行MTT检测,酶标仪测定570 μm处OD值,连续测定3 d。每个时间点设5个复孔,根据吸光度值绘制曲线,比较各组细胞生长速度变化。分为siRNA干扰组和非特异性转染对照组。

1.5 流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡

分别于转染后24、48、72 h收集细胞,冷PBS洗涤2次,-20℃预冷的70%乙醇固定48 h,1 200 r/min离心10 min弃上清,1 000 μl PBS重悬加10 mg/ml RNase 20 μl混匀,37℃水浴45 min,PBS洗Rnase,100 μl PBS重悬,100 μl PI 4℃避光染色1 h。流式细胞仪测定荧光强度,CellQuest分析软件进行细胞周期DNA含量分析,确定细胞周期分布。细胞凋亡的检测采用Annexin V细胞凋亡检测试剂盒,实验操作按说明书进行。每组细胞重复3个样本,分为siRNA干扰组和非特异性转染对照组。

1.6 统计学分析

数据均以x±s表示,采用统计软件SPSS 16.0分析。

2 结 果

2.1 Western印迹检测siRNA抑制survivin基因的效果

空载体组及siRNA干扰对照组survivin表达未受抑制,与未转染对照组比较无显著差异;而干扰组survivin表达与对照组相比则明显受到抑制,干扰效率达到85%以上,说明RNAi载体构建有效,能够有效地抑制转染细胞中survivin的表达(图1)。

2.2 survivin基因沉默对PC3细胞增殖的影响

MTT检测结果显示,PC3细胞行survivin基因干扰后0~72 h,较相同时间点对照组细胞吸光度A值降低;其中24、48 h干扰组PC3细胞吸光度A值明显低于对照组(P

2.3 survivin基因沉默对PC3细胞凋亡和细胞周期的影响

流式细胞术结果显示,与对照组比较,各时点干扰组细胞在G1期前均出现显著的凋亡现象,以48 h最为显著,24、48、72 h凋亡细胞百分率分别为(33.67±4.24)%、(42.12±5.88)%、(38.37±7.91)%,与同时点对照组〔(2.01±0.42)%、(3.13±0.69)%、(3.74±0.9)%〕比较均具有显著性差异(P

3 讨 论

survivin是用EPR1的cDNA在人类基因组文库中杂交、筛选出的凋亡抑制蛋白(IAP)家族新成员〔1,6〕。survivin蛋白半衰期为30 min,其表达具有明显的周期依赖性。在G0/G1期检测不到survivin蛋白表达,S期表达量升高,G2/M期可升高40倍〔7〕。survivin表达也具有明显的组织选择性,生理状态下,在正常成熟组织中检测不到survivin表达,但其显著高表达于14~21周龄的胚胎组织中,因此推测survivin可能与组织器官的发育、成熟密切相关〔8〕。有研究证实,胸腺中survivin蛋白的高表达对于T细胞的分化、成熟有着重要意义。由于survivin蛋白在诸多肿瘤组织中(如肝癌、乳腺癌、白血病等)高表达,因此有人将survivin蛋白称作是肿瘤的通用抗原。由于survivin具有抑制凋亡、调控细胞周期、影响有丝分裂过程、促进血管生成等生物学作用,其高表达必然会对肿瘤细胞的生长与增殖产生影响——肿瘤细胞凋亡耐受、肿瘤血管的生成及向周围组织浸润能力的增强,并且随着survivin蛋白表达的增加,肿瘤细胞也表现一定的辐射耐受性及化学药物耐受性〔9,10〕。因此,survivin成为具有潜在价值的胰腺癌治疗的新靶点,沉默该基因可能对胰腺癌细胞生物学行为产生重要影响。

本研究MTT结果显示,survivin基因沉默后肿瘤细胞生长速度显著低于对照组细胞,说明survivin基因抑制直接导致了肿瘤增殖的抑制;流式细胞术结果显示,G2/M期细胞百分率显著高于对照组,S期细胞百分率显著低于对照组,说明survivin基因的沉默导致了细胞周期的阻滞,也进一步提示survivin可能参与胰腺癌细胞的周期调控;流式细胞术结果显示,G1期前有凋亡峰存在,且凋亡细胞百分数显著高于对照组,说明survivin基因沉默促进了胰腺癌细胞的凋亡,同时也提示survivin可能与胰腺癌细胞的凋亡密切相关。

参考文献

1 Lopes RB,Gangeswaran R,McNeish IA,et al.Expression of the IAP protein family is dysregulated in pancreatic cancer cells and is important for resistance to chemotherapy〔J〕.Int J Cancer,2007;120(11):234452.

2 Jhala N,Jhala D,Vickers SM,et al.Biomarkers in diagnosis of pancreatic carcinoma in fineneedle aspirates〔J〕.Am J Clin Pathol,2006;126(4):5729.

3 Guan HT,Xue XH,Wang XJ,et al.Knockdown of survivin expression by small interfering RNA suppresses proliferation of two human cancer cell lines〔J〕.Chin Med Sci J,2006;21(2):1159.

4 Zhu K,Qin H,Cha SC,et al.Survivin DNA vaccine generated specific antitumor effects in pancreatic carcinoma and lymphoma mouse models〔J〕.Vaccine,2007;25(46):795561.

5 Watanabe T,Totoki Y,Toyoda A,et al.Endogenous siRNAs from naturally formed dsRNAs regulate transcripts in mouse oocytes〔J〕.Nature,2008;453(7194):53943.

6 Marioni G,Dalessandro E,Bertolin A,et al.Survivin multifaceted activity in head and neck carcinoma:current evidence and future therapeutic challenges〔J〕.Acta Otolaryngol,2009;25:16.

7 Li F,Ambrosini G,Chu EY,et al.Control of apoptosis and mitotic spindle checkpoint by survivin〔J〕.Nature,1998;396(6711):5804.

8 Zamparese R,Pannone G,Santoro A,et al.Survivin expression in renal cell carcinoma〔J〕.Cancer Invest,2008;26(9):92935.

望尘莫及范文第4篇

我愿化作一只飞燕,率先登上顶峰去寻找金银铜牌的踪迹。

我愿化作一只飞燕,来体会那刹那“一览众山小”的辉煌。

南山,我的高中。

在这么一个汇聚着四川各地英才的地方,我发觉我是如沙粒般如此微不足道,一个个精英才子在我身边闪现,仿佛我这颗黯然的连名字都叫不出来的小星是为了衬托他们的辉煌而存在。

每一年,南山中学全国奥数第一,第二层出不穷,甚至让人有了一种理所当然的感觉,而我啦,每当看到学校光荣榜上的名字,照片,心中除了自卑就只剩下失落。

因为,我连普通数学考试也一直挂科。

这对我来说,实实在在是个讽刺,同样的学校,看着同样的花草树木,呼吸着同样的空气。为什么,这差距竟让我有了一种望尘莫及的感觉?

可悲,可笑。

是什么造成了如此的天壤之别?

习惯,是习惯。

一切的事物都以习惯为自然,没有一个好的习惯,即使你是比爱因斯坦还天才的人,你的天赋也只会是昙花一现,而最后被无数个不是天才,却拥有好习惯的人,甩在后面。

数数指头,2012年也已经不远了,这意味着什么?意味着我的机会来了,上帝网开一面给了我重新来过的机会,我难道会任由他错过。

不,不会。

2012年,等着我,我会以良好的习惯为开端,去征服这一年,去尝试触摸那些如今我只能仰视的东西。

也许你不相信,但是365天之后,你一定会发现,我已经化作一只飞燕,飞在你上空。

望尘莫及范文第5篇

青春是一场没有硝烟的战争

它的残酷让人望尘莫及

逝去的青春已埋葬在时间里

而我们如傀儡一般,机械向前

青春是一条不归路

我们踏上征程

幻想着绝美的画面

得到的却是眼泪与伤痕

我们幻想着美好的未来,憧憬着未来

但理想是丰满的,现实却是残酷的

我们换来的是谩骂与迷茫

别人的轻视,亦或者被打入十八层地狱后的绝望

谁又了解单薄背影下那无助的人