核酸检测情况

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核酸检测情况范文第1篇

【关键词】 乙型肝炎病毒；核酸；血液筛查

核酸检测（NAT）属于新型血液病毒筛查检测方法， 能够直接检测到血液中病原体的核酸[1]。核酸检测在筛查献血者乙型肝炎中具有重要作用， 本文选取无偿献血标本92432份进行分析， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取本院2009年1月～2012年12月无偿献血标本92432份， 其中应用核酸检测标本34440份。确保采集血液标本后每个献血者均及时留取4管标本；在对酶免4项、ALT予以检测时可选用分离胶促凝真空采血管；核酸测定时则选择带分离胶EDTA-K2抗凝真空采血管；对血型进行测定时选取EDTA-K2抗凝真空采血管， 将具体的采集日期、样品编码等基础信息进行准确记录。得到的标本需标准均在2 h内进行离心处理存至2～8℃冰箱内。2～3 h内送至检测中心离心保存， 24 h内血清学筛查并实施NAT检测。

1. 2 方法 ELISA检测：所得到的每份献血标本在完成HBsAg检测过程中均需予以2种ELISA试剂， 每批实验需具有室内质控品组、空白对照组、阴性对照组和阳性对照组。对结果进行判断的标准为：S/CO≥1属于阳性（此状态的血液检测结果不符合标准）， 0.5

核酸检测：以混样方法对核酸予以检测。每级混样池均有6个标本， 且均设定内对照。将混合所测定阴性定作阴性， 将混合测定呈现阳性者予以拆分检测， 当拆分检测呈现阴性时属于NAT阴性， 当拆分测定呈现阳性时则属于NAT阳性。

在所有核酸筛查时， 当标本呈现阳性时， 核酸为阳性但经“二对半”测定属阴性， 且核酸出现阴性献血者予以追踪随访， 持续2个月后重新采样， 分别予以HBV-DNA和“两对半”检测。

2 结果

在本文所选取的92432份血液标本中， 进行血清学测定， 标本属于HBsAg阴性者有92082份， 标本属于单试剂阳性者有30份， 标本属于双试剂阳性者有320份。

予以核酸测定标本共有34440份， 其中包括34430标本予以HBsAg酶免检测呈现阴性， 10份标本予以单试剂测定呈现阳性。在34440份标本中， 核酸筛查呈现阳性者52份， 通过核酸测定呈现阳性者38份， HBsAg测定呈现阳性者2份， 如表1所示， 阳性检出率与阳性确认率有15.1/万（52/34440）、11.6/万（40/34440）。在所认定的呈现阳性40份标本内， 只有10份标本经HBsAg测定呈现单阳， 予以核酸筛查呈现阳性， 对HBVELISA漏检率进行计算得到8.7/万（30/34440）。另14份标本通过核酸筛查发现其均呈现阳性， 经HBsAg筛查及乙肝“两对半”测定属于阴性。

核酸筛查呈现阳性的52份标本， 将其中符合条件的26份实施追踪检测， 其中12份通过核酸筛查显示属于阳性， 经乙肝“两对半”测定则呈现阴性， 14份标本经核酸检测呈现阴性。经追踪检测发现， 12份乙肝“两对半”起始检测呈现阴性标本， 经随访HBV-DNA（+）、HBsAg（+）8例， NAT对HBV酶免窗口期标本检出率2.32/万（8/34440）， 随访HBsAg（-）4例， 为隐匿性HBV感染（OBI）；14份核酸测定属于阴性， 随访过程中发现6例病毒载量低于20 IU/ml， 4例 HBsAg一直呈现阴性， 属于OBI。经计算发现8例OBI， NAT对OBI检出率2.32/万（8/34440）。

3 讨论

输血是否具有安全性主要风险在于被筛查病毒所处在的“窗口期”。有研究资料发现， 经NAT检测， 能够减少HBV、HCV、HIV的EIA“窗口期”， 减少率达到40%～75%， 使得病毒经输血传播风险几率大范围降低。在本文研究中， 追踪随访ELISA法检测呈现阴性但核酸阳性者， 有8例标本HBsAg ELISA测定阴性转化成阳性， 由此可知此血样于ELISA窗口期予以NAT检测时被发现的， 而且NAT测定表明有4例属于隐匿性HBV感染患者， 说明NAT检测对血液筛查具有重要意义[2]。

NAT检测在应用中， 所使用的试剂必须具有较高的灵敏性、特异性， 且实验环境具有较高要求， 和EIA检测相对比更具有严格性， 在检查中应用所需设备、试剂往往会提高血液检测成本。而且核酸筛查存在局限性， 在病毒载量较低情况下， 通常NAT难以检测出， 在本文研究中， 6标本予以核酸筛查呈现阳性， 但是应用核酸测定则属于阴性， 追踪检测过程中发现病毒载量低于20 IU/ml[3]。

总之， NAT可以缩减“窗口期”， 减少病毒通过输血途径传播风险性， 但是也会有漏检标本出现。NAT检测时所关注的是病毒核酸， 而ELISA检测则为抗原或抗体， 两者所应用的检测原理和检测方法均有差异性， 所以两个方法在检测血液标本过程中并不存在重复性， 却有一定的互补性， 属于血液筛查检测重要方法。

参考文献

[1] 何亚琴， 徐立， 杨爱龙.核酸检测在筛查献血者乙型肝炎病毒中的应用.中国输血杂志， 2013， 26（3）：147-148.

核酸检测情况范文第2篇

现在离开遵义需要核酸检测吗1月

目前看是不需要的，毕竟当下遵义是低风险区，不好过由于各地方的规定不一样，所以建议大家出行前像你要到达的目的地进行咨询。有问题的话可打目的城市公共卫生客服热线(当地区号)-12320、抑或当地市民热线电话(当地区号)-12345了解详情。

遵义现在限不限制出入

遵义现在不限制出入但前提是你是低风险区的，假使你从中高风险区域到遵义，需不需要核酸检验和隔离，就要视遵义的防控措施而定，一般情况下，可能提供7天内核酸检测阴性证明就可以通过，也可能要核酸检验还要隔离14天。假使你从低风险区去到遵义，通常能直接进入，不用核酸检验、隔离。建议打遵义公共卫生客服电话0852-12320、或当地市民热线0852-12345了解详情。

离开遵义要准备哪些

核酸检测情况范文第3篇

1.1检测方法及判定规则305912份全血标本和单采血小板标本进行常规ELISA检测。部分标本由于ELISA检测项目不合格直接被淘汰而未进入到核酸检测环节，有303616份标本分别进行混样核酸检测（191222人份）和单人份核酸检测（112394人份）。⑴混样核酸检测:按照试剂盒说明书要求，筛选ELISA检测合格标本进行8个标本混样核酸检测，无反应性pooling的8个标本视为该项目核酸检测合格，有反应性pooling进行标本的拆分单检，拆分无反应性的标本判为合格，拆分亦有反应性的标本判为该项目核酸检测不合格。⑵单人份核酸检测:采用单个标本核酸检测模式，按照试剂盒和全自动核酸检测设备要求进行检测，检测无反应性的标本视为HBVDNA、HCVRNA、HIV-1RNA项目联检合格，检测有反应性的标本则视为HBVDNA、HCVRNA、HIV-1RNA项目联检不合格。

1.2统计学处理采用x²检验,比较各项目不合格率的差异，p<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1单检模式及混检模式下的NAT结果303616人份标本进行核酸检测，其中112394人份采用单人份核酸检测系统进行检测，检出单独NAT不合格数148例，不合格率为1.32‰；191222人份标本采用另外的混样核酸检测系统进行检测，检出单独NAT不合格数63例，不合格率为0.33‰.两者不合格率比较，有显著性差异（P<0.05）。

2.2全血标本和单采血小板标本ELISA检测结果305912份全血标本和单采血小板标本中，采用ELISA方法检测全血标本278214人份，HBsAg、抗-HCV、抗-HIV-1/2三项不合格数2536例，不合格率为9.1‰；采用ELISA方法检测单采血小板标本27698人份，HBsAg、抗-HCV、抗-HIV-1/2三项不合格数78例，不合格率为2.8‰.两者不合格率比较，有显著性差异（P<0.05）。

2.3全血标本和单采血小板标本NAT检测结果NAT不合格结果包括两类，一类为NAT反应性而ELISA无反应性，即为单独NAT不合格结果,此类不合格的检出即为NAT在血液筛查中所发挥的检测效能。另一类为NAT反应性ELISA亦为反应性。303616份标本中全血标本和单采血小板标本中，276018人份全血标本的单独NAT不合格数186例，不合格率为0.67‰；27598人份单采血小板标本的单独NAT不合格数为26例，不合格率为0.94‰.两者不合格率比较，无显著性差异（P>0.05）。

3讨论

确保临床输血的血液安全是血站工作的重心。目前，国内已有多家血站采用ELISA+NAT方法进行检测的筛查策略。NAT技术具有高度特异性和敏感性，可以有效缩短ELISA检测的“窗口期”，还可以避免因病毒变异、隐匿性感染等原因造成的ELISA方法的漏检，在上世纪末，美欧日等国家血站已开展血液相关病毒核酸检测。我国卫生和计划生育委员会于2010年6月开始对献血者血液进行HIV、HBV和HCV病毒核酸检测的试点，拟定2015年国内血站全面实施核酸检测技术。由于NAT检测技术对实验操作的各个环节和实验室环境等都有很高的要求，因此NAT实验室质量管理水平的高低直接关系到这项技术的实际应用效果。如何根据自身实验室的情况建立适宜的检测模式，不断改进以提高检测效能，既防止漏检，又最大限度降低由于NAT假阳性而导致的血液淘汰是今后我们需要认真探讨的问题［9］。本中心作为首批参评的试点单位，自2010年6月对献血者血液常规开展NAT检测，在此期间我们将全血标本和单采血小板标本的血液检测模式进行了优化，将NAT检测技术应用于不同献血人群的血液筛查在一定程度上提高了检测效能。

本中心自2013年1月-2014年10月间采用单检模式进行标本的核酸检测，NAT不合格率为1.32‰，明显高于同期采用混样核酸检测系统所得到的0.33‰NAT不合格率。由于检测系统不同、检测模式的差异，导致其检测灵敏度不同、检出率也不同。对于混样核酸检测系统而言，pooling的方式势必有稀释标本的作用，其检测灵敏度也一定低于试剂说明书所提供的检测灵敏度。单人份核酸检测系统的检测灵敏度高于混样核酸检测系统，其检出率也相对较高，因此，NAT检测效能的影响因素与所采用的检测模式、检测灵敏度有关。在单采血小板的标本中，HBsAg、抗-HCV、抗-HIV1/2三项ELISA检测不合格率为2.8‰（79/27698），明显低于同期全血标本9.1‰(2536/278214)的不合格率。由于我中心单采血小板捐献者85%以上来自于重复献血者，受过更多的血液安全教育，每次献血都进行体检和检测，也就是通常所说的“低危献血人群”，传播输血传染病的危险性最小。而捐献全血的重复献血者占献血人群比例不足50%。全血和单采血小板标本均有单独NAT不合格检出，不合格率分别为0.67‰（186/276018）和0.94‰（26/27598）。由于病毒感染者“窗口期”献血，病毒变异，免疫静默感染等原因，导致单纯抗原或抗体血清学检测不能有效保障血液安全。NAT直接检测病毒核酸，能显著缩短血液感染病毒的检测“窗口期”，与ELISA方法形成互补，有效发挥其检测效能。我国已将NAT血液筛查纳入新的输血技术操作规程。国内多家采供血机构将NAT技术应用于献血者的血液筛查中，均有不同程度HBsAg阴性而HBVDNA的阳性检出，从而发挥了NAT技术应有的检测效能。

核酸检测情况范文第4篇

关键词：生物技术；食品检测；应用

中图分类号：TS207.3 文献标识码：A

1.FTA-PCR的技术

FTAR 卡属于特制的棉纤维卡片， 主要通过螯合剂与强力的变性剂共同浸泡，其纤维基质中包含化学物质，一旦FTAR捕捉细胞，石炭酸、EDTA以及SDS会自动地把细胞裂解，而聚丙烯酰胺会结合核酸，确保样品中的DNA具有稳定性，同时确保核酸不会受到紫外线、核酸以及氧化剂破坏，还有利于其他微生物以及细菌生长。该种方式不仅可以直接提取DNA，而且所提取的DNA能够于室温下保存，给PCR检测创造了条件。在食品检测中，采用FTA-PCR方法，有着明显优势。Robert使用FTA卡来提取流感病毒RNA，联合PCR的技术检测流感病毒。李伟昊使用FTA卡与PCR方式相结合，提取以及检测鲜肉中的沙门氏菌，从鸡肉、猪肉、羊肉与牛肉匀浆液中实际检出限大约70CFU/mL，能够在六小时以内结束肉中的沙门氏菌检测，现阶段主要使用先增菌PCR的检测方法可以节省时间12～24小时，和GB/T 4789.4-2003的方式比起来，用这种方式检测，所用时间与检出率效果都比较好[1]。

2.环介导的等温扩增术（LAMP）

环介导的等温扩增术属于恒温核酸的扩增方式，主要是针对基因四种特异的引物以及六个区域的设计，在常规水浴的条件下，即在65℃条件下一个小时，就能够结束核酸扩增反应；和普通PCR比起来，无需紫外观察、模板热变性以及温度循环等过程。完成扩增以后，可以按照管内的沉淀情况对结果进行评估。由于这种技术操作比较便利以及灵敏度比较高，所以广泛应用于食品检测中。闻伟刚[2]使用RT-LAMP技术构建了具有特异、快速以及灵敏特征的菜豆荚中斑驳病毒检验方式，用这种方式检测的灵敏度比病毒的稀释液高出3～10倍，与常规RT-PCR 检测方式相比，灵敏度提高1000多倍。徐芊采用LAMP技术检测水产品副溶血弧菌，只需一个小时就可以结束检测，并且检测限高达89CFU/g，与常规PCR的检测方式相比，缩短将近1/2的时间。易海华研发出志贺菌LAMP检测方式，在一个小时以内可以结束检测，每微升检测限高达200拷贝。LAMP 是恒温扩增的反应之一，可以缩短普通PCR的反应升降温耗具体时间，并且能够通过肉眼看到检测结果，通常在0.5～1小时内结束反应过程，所以在食品检测中有着明显优势。然而由于LAMP的方式对实验技术者与实验环境方面有着较高要求，未达到相关要求时容易出现假阳性问题，还需要深入研究，不断地对这种检测技术进行完善。

3.核酸探针技术

核酸探针能够促进单链核酸的配对，然后构成双链，通过标记物对信号进行释放，进而实现检测的目的。在核酸样品的基因序列检测中用核酸探针检测，由于病原体具备特异性核酸序列的片段，通过标记技术与分离手段，可以把特定片段研制为核酸探针，并用在病原体的检测以及疾病诊断中。在病原微生物中应用核酸探针，可以鉴别高相似度基因的寄生虫与毒株。Malic通过核酸探针的原味杂交方式，检测与检定球状、铜绿假单细胞、金黄色葡萄球菌与链球细菌属，经检测得知铜绿假单胞菌侵染比较明显，可以用于多项指标检测。Almeida使用核酸探针原位杂交方式检测奶粉中阪崎肠杆菌，该方式特异性高达百分之百，即便存在其他混合菌类，检出限仍达到1CFU/10g。Almeida应用同种方式拓展样品检测的范围，检测了粪便、血液与供应水中沙门氏菌，其检出限达到1 CFU/10g（mL），实际检测时间在20小时以内，与常规PCR检测方式相比，其灵敏度大大提高。曲海娜使用核酸探针方式检测动物毛皮中耐β-内酰胺病原菌，其检出限为529pgDNA，与传统的药敏实验相比采用这种检测方式可以降低检测成本，将检测周期缩短，提高食品检测效果。邹金峰研发出鸭圆环病毒核酸探针技术，同时用于检测中，最低检出量约5pgDNA，和常规PCR技术比起来，采用这种方式可以规避假阴性、假阳性发生的可能[3]。

4.基质分子的印迹技术

基质分子的印迹技术主要是应用分子印记的方式，把包含分子大小、形状识别空洞膜印记到载体或是基质上，也就是把分子与载体印记到聚合物单体上。如2-乙烯基以及甲基的丙烯酸等，建立检测靶与分子之间的链接链，使用电聚合、自组装以及分子聚合和模板分子构成相应的配合物，然后添加交联剂。例如，添加多元醇与有机二元酸交联剂，然后在载体上构成膜，再把模板的分子包裹于膜中，然后将膜内的模板分子清除，将模板分子特异性的印记留下。因为所形成印记构造和模板分子之间互补，也就是只有印记和需检测、分离分子形状匹配时，这种分子才可以占据印迹的空洞。而且因为印迹三维结构中的一维属于传导载体，所以可以把该分子识别的过程快速、直接转变为可识别信号。而开始基质分子的印记技术主要用于医学临床检验如肌红蛋白检测中，目前逐渐应用于抗生素的检测中。Wang研制出分子的印迹技术胶质晶体类模版，能够对蜂蜜与牛奶样品中的金霉素、四环素、土霉素残留进行检测，其检出限为0.04～0.24μmol/L。Shi把甲矾霉素作为模板，构建了层析法分子印迹的固相萃取方式，可以对河蟹中的残留氟苯尼考胺、氯霉素、氟苯尼考与甲矾霉素进行检测，其检出限分别为0.03μg/kg、0.02μg/kg，0.10μg/kg、0.09μg/kg，在一天以内能够结束全部检测。分子的印迹技术的检测限和色谱技术比较相似，但是其检测的成本比色谱技术低，用该技术检测产品时，既可以用在食品检测中，还可以用在食品现场的自检中，检测范围主要包含杀虫剂、真菌毒素以及细菌检测等。

5.免疫层析技术

免疫层析技术是当前兴起的诊断与鉴别技术，原理是某抗原特异性的抗体容易被荧光微粒、金粒子标记，容易吸附于固相载体点样的区域，并且同一种抗原的另一种特异性抗体会固定于固相载体另一端，一旦液体样品浸入点样的区域以后，已标记样品以及特异性的抗体容易在毛细血管的作用下沿固相的载体超前移动；如果样品之中存在待检的抗原，待检的抗原就会和已标记特异性的抗体结合，构成相应的复合物，复合物移至特异性的抗体区域时，抗原部分容易破坏此处特异性的抗体。

6.生物的传感器

生物的传感器主要是通过固定化生物活性的物质，例如生物膜、酶、DNA、蛋白质与微生物等，作为理化换能器以及敏感原件。换能器主要包括压电晶体、氧电极、场效应管以及光敏管，同时还可以构成分析检测的装置，而待测的物质经过扩散作用以后，会进入分子中，对元件进行识别，在识别的作用下，和分子识别的元件进行结合，从而产生生物、化学反应。

总而言之，生物技术具有高效、经济科学的特点，在检测食品的过程中，应用生物检测技术，能够提升检测的精度以及提高检测的速度，是现阶段食品检测领域的新型技术，因此，食品检测领域需要全面了解生物检测技术，尽可能从食品的检测细节与工作着手，在食品检测中应用各种先进检测技术，以确保食品检测的安全性。

参考文献：

[1]姜思远，郭明英，吴艳玲.生物技术在食品生产加工与检测中的应用[J].内蒙古石油化工，2014，21（22）.

核酸检测情况范文第5篇

一、工作目标

严守养老机构疫情防控工作关口，坚决做到新入住人员人人都开展核酸检测。

二、工作内容

（一）养老机构在接收新入住人员前，必须通知入住人员或其亲属到市疾控中心进行核酸检测。在办理入院手续时，养老机构必须将新入住人员24小时《核酸检测报告（阴性）》备案到《入住人员档案》，无报告或未放入档案的均视为养老机构违规，严重的将依法予以封停。

（二）市民政局将对全市养老机构开展此项工作的情况进行督查，一旦发现未按要求，私自收住人员的，无论其是何种原因，取消以后3年的各种政策性补贴，并将该养老机构存在的问题上报至市疫情防控工作领导小组，依法依规予以封停。

三、核酸检测地址及联系方式

地址：市疾病预防控制中心联系方式：