方法学
前言：想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗？我们特意为您整理了5篇方法学范文，相信会为您的写作带来帮助，发现更多的写作思路和灵感。
方法学范文第1篇
毕业于北京市翠微中学，参加2004年海淀区中考，以502分的成绩考入首都师范大学附属中学。
要学好物理，一定要听好课。这是老生常谈，也是我经过一段时间的摸索后得出的结论。
原来，我也曾严格按照预习――听课――作业――复习的模式学习，可是收效甚微，并且出现了很多让我感到烦恼的问题，比如在预习上花了很多时间，自以为弄懂了的问题其实并没有理解；上课时总想着预习时碰到的问题，自己的思路与老师的思路总是打架，听课效果不好；回家后由于要预习新课，做习题和复习的时间明显减少，复习效果不佳……总结起来只有一句话：什么都做了，却什么都没做好。于是我决定改变学习方法。
我认为预习还是很有必要的，但只要大概看一下，画画概念即可，10分钟的时间足够。要在课后作业上下工夫，除了老师布置的作业，应争取再多做一些题。我把这种学习方法叫做“前轻后重学习法”。即前面的预习少花点时间，要轻；后面的作业、复习要多花点时间，要重。
其实，听课也应“前轻后重”。老师在上课时往往先回顾上节课的内容，再讲解新知识。我的经验是：在“温故”部分不必太集中注意力，将主要精力放在接下来的重头戏――“知新”上。据我所知，大多数同学恰恰相反，刚上课时注意力十分集中，听着听着就松弛下来了。人的注意力是有限度的，很少有人能够做到在一堂课上自始至终保持高度兴奋，反正我是做不到。
“前轻后重”的学习模式可是我的“九阳真经”哦！下面再传授几招具体的方法。
很多同学都觉得物理难学，因为与其他学科相比，物理的概念太多了。无概念则无物理，因此理解并掌握物理概念是学好物理的关键。在学习物理概念的过程中，我的绝招是――将物理概念层次化。
例如“匀变速直线运动”，可从以下几个层次进行理解：
第一层：物体作直线运动（体现“直”字）；
第二层：物体的速度是变化的（体现“变”字）；
第三层：物体的速度是均匀变化的（体现“匀”字）。
综合以上三个层次，很容易得出定义：物体沿直线运动，如果在任何相等的时间间隔内速度的变化均相等，这样的运动叫做匀变速直线运动。
不管概念分几个层次，也不管各层次之间是平行关系还是层层递进关系，只要将每一层的含义弄清即可。
另外，概念的内容有轻有重，分层也应该有主次。应抓住本质的内容，区别非本质、容易混淆的部分。
例如“力是改变物体运动状态的原因”，可分以下几个层次：
第一层：力能改变物体速度的大小（如汽车静止运动运动中止的过程中，速度由小变大再由大变小）；
第二层：力能改变物体的运动方向（如汽车左转弯、右转弯）；
第三层：力不是产生运动的原因，也不是维持运动的原因。
显然第一层和第二层是这个概念的本质内容，而第三层则是容易混淆的部分。
最后再传一招：“捧听”与“追问”法。
所谓“捧听”，就是上课时多回答问题，多提问。有时候，老师就像演员，然而，没有一个演员希望观众对自己的作品毫无反应。上课时多提问，多回答，就相当于给老师捧场，老师肯定高兴，对你的印象也加深了，何乐而不为呢？
所谓“追问”，就是有问题要追着老师问，别指望老师来找你。我就经常对老师进行疯狂的“围追堵截”，在办公室围着老师问，在走廊上追着老师问，在校门口堵着老师问，在路上拦住老师问……总之，一定不能让问题累积成灾！
最后，祝即将参加中考的同学考试顺利，我在重点高中先替你占座了！
方法学范文第2篇
【关键词】视觉传达 方法学
设计是把设想、构思通过艺术化的手段表现出来，它是为实现某个目标而进行设计，在设计的过程中一直是目标导向的推理过程。视觉传达也同样是为成功传递某类信息而进行设计的，虽然对于海报、招贴、标志、包装而言可能更加注重形式美感，特别是商业类的相关设计，但是它们同样也需要成功地帮助人们传递一定的思想。那么视觉传达所传递的信息，就是我们研究的第一步。
1 分解需要传递的信息
我们在进行任何视觉传达设计前，都会获得一定的信息，例如为“节约用水”设计公益海报，这条信息看起来很简单。但是我们需要对其进行分解：（1）海报设计的目的是让浪费水的现象减少。（2）人们看到海报能认可并欣然接受其传递的观点。（3）此海报设计应该符合一类人的文化心理。（4）这一海报风格须和恰当的空间风格相统一。根据第一条命题得出结论：海报最好体现浪费水源所产生的恶劣后果，用以惊醒人们；根据第二条命题得出结论：海报内容最好贴近实事，避免人们认为海报过度夸张，产生不信任的心理；根据第三条命题得出结论：海报的设计风格最好贴近一类人群的文化心理；根据第四条命题得出结论：海报最终要摆放在特定的场合，最好能和这些场所的整体风格相一致。这个例子既体现了对信息的分解，也是设计师逻辑思维进行的过程，这需要在掌握大量感性材料的基础上进行，通过推理认识事物的本质，除了以上这点，我们还需要对好的设计进行归纳整理。
2 归纳成功案例的优点
成功案例必然有它的可取之处，如果我们能善于总结和吸取成功设计的优点，就能踩在巨人的肩膀上前行。例如，孟谢尔在浏览了大量成功的色彩设计后，提出了互为补色的一对色彩关系，如何搭配才会比较漂亮的公式，即（A的明度×纯度）：（B的明度×纯度）=B的面积：A的面积，也就是明度和纯度越高，面积就越小；明度和纯度越低，面积就越大。
一些搜索引擎的记录资料也可以给我们提供有用的信息，例如哪些海报、标志、包装用户点击最多，评论最好？它们有没有共同的优点？哪些点击又最少，评论最差？
3 设计创意
创意不会凭空而来，它必然是在锁定了目标以后，经过大量思索而来的。创意的产生需要通过观看、体验大量的设计作品，以一定的信息内容为基础。创意出现的瞬间，设计师需要把它记录下来，如果听之任之、无动于衷，那好的创意必将离你远去。因此，设计师最好随身携带笔记本，以便能够随时捕捉灵感。也正像刚才所谈，灵感的出现必然是经历了由量变到质变的一个飞跃，量变发展到一定程度必然引起质变，只是人们在量变的过程中，大多被繁琐的思考吓退了，没有等到质变那一刻。所以我们会听说很多伟大的人物在冥思苦想的时候，会做出一些让人啼笑皆非的事情。而这也恰恰是过量思考的体现，一个伟大的人物尚且如此过量思考，废寝忘食。我们这些普通人要想产生创意就需要前期进行更长时间的思索，那么灵感最终会在你的脑海中出现。
4 缺点列举法
缺点的提出，就像“良药苦口利于病，忠言逆耳利于行”，虽然痛苦，但却又提高。设计师对于自己亲手设计的作品，往往由于投入了大量的时间和精力，产生了深厚的感情。如果此时要求继续挑毛病的话，设计师往往很难理解和接受。但是必须挑出毛病，作品才能进一步完善，作品才会呈现得更加完美。缺点列举法是改进和提升设计的有效方法。
5 特性列举法
问题越复杂，就越需要对其进行分解，缩小问题才能产生创造性地构思。在设计过程中，有时我们面对的设计对象比较复杂，如果不对其进行分解，很难找出改进的落脚点。例如，一个包装设计，需要解决材料、色彩、字体、图形、造型等多方面的问题。如果你没有在最初设计时就划分不同的设计方向，那么你在之后的设计中往往会陷入思维混乱的局面。化整为零、各个击破才是解决复杂问题的有效途径。
6 包装设计中的行为模拟
包装设计在使用过程中会涉及到消费者的操作，当一些新型的包装投入市场前，应该先进行相应的消费者行为模拟测试。在模拟测试中，设计师要注意几个问题：（1）设计师预期的消费者行为是否出现？（2）在实际操作中，碰到什么问题？（3）预期的包装创新设计是否发挥作用？如果测试结果和最初的预期不一致，就应该进行修正。
方法学范文第3篇
[关键词]脚气散；含量测定；硼酸
脚气散由水杨酸、苯甲酸、硼酸等原料制成，具有抗真菌功效，用于脚癣所致的趾间糜烂、奇痒等症，临床使用多年，反映效果良好，几无毒副作用。长久以来，由于属于医院制剂，应用范围有限，质量标准中没有建立有效成分的含量测定方法，根据目前我国对医院制剂的新要求，笔者对处方中的水杨酸等有效成分的含量测定进行了方法学研究，现简要介绍如下。
1仪器、试药与样品
BS210S电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）；硼酸含量为：99.5%（自贡鸿鹤制药有限公司、批号：100311）、苯甲酸含量为：99.1%（镇江前进化工有限公司、批号：100210）、水杨酸含量为：99.6%（镇江前进化工有限公司、批号：100405）均为合格药用原料；其余试剂均为分析纯。由达州市中心医院提供脚气散3批，批号分别为：091113、091218、100220；达州市中西医结合医院提供脚气散3批，批号分别为：100618、100628、100716；规格：均为每袋装28g；包装：药品包装用复合膜，4袋/盒。
2方法拟定
2.1原理：苯甲酸、水杨酸与硼酸是脚气散的有效成分，虽有文献【1】【2】【3】记载采用中和法测定单一成分的含量，但三种成分混合状态下的含量测定还未查阅到相关的文献报道，由于水杨酸、苯甲酸溶解性能非常近似，不能进行有效分离，故采用氢氧化钠滴定液滴定测定二者总量，硼酸能与前二者进行有效分离，可单独测定含量，方法简便，结果快速、准确。具体原理如下。
水杨酸、苯甲酸乙醚层加水，加酚酞指示液，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，生成苯甲酸钠及水杨酸钠；微过量的氢氧化钠溶液显淡红色为终点。
反应式C7H6O3+NaOHC7H5O3Na+H2O
C7H6O2+NaOHC7H5O2Na+H2O
硼酸（H3BO3）是一种极弱的酸（Ka1=7.3×10-10），因CaKa
反应式H3BO3+2C3H8O3[C3H6O3BC3H6O3]-H++3H2O
H++OH-H2O
2.2苯甲酸和水杨酸总量取本品5包研匀，精密称取约0.3g，置分液漏斗中，加乙醚20ml、新沸过的冷水20ml，振摇使溶。静置，分取乙醚层，加新沸过的冷水20ml，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定至水层显淡红色。每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于12.81mg的C7H6O2及C7H6O3总量。
2.3硼酸含量取上述项下的水层加中性甘油20ml，加新沸过的冷水20ml，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显淡红色。每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于6.183mg的H3BO3。
3验证试验
3.1样品前处理研究：
3.1.1萃取溶剂的考察
有文献【1】【2】记载，水杨酸及苯甲酸在乙醚中易溶，硼酸在水中溶解。故本实验采用乙醚振摇萃取，可使水杨酸及苯甲酸与硼酸得到良好的分离。因水杨酸、苯甲酸溶解性能相近似，不能得到分离，故测定总量。
3.1.2萃取时间的考察
实验结果见下表
萃取时间（分钟 1 2 8
硼酸含量 98.5% 98.7% 98.9%
水杨酸及苯甲酸总量 98.6% 98.7% 98.5%
以上实验结果表明，萃取时间对结果的影响不大，故以充分溶解为度。
3.2、方法学验证
3.2.1样品测定
3.2.1.1硼酸取样品5包研匀，精密称取约0.3g，置分液漏斗中，加乙醚20ml、新沸过的冷水20ml，振摇使溶解，分取水层，加中性甘油20ml、新沸过的冷水20ml，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显淡红色。按每1ml氢氧化钠液（0.1mol/L）相当于6.183mg的硼酸（H3BO3）计算，其结果（见表1）。
表1样品测定结果
序号 样品批号 样品取用量（mg） 样品硼酸标示含量（mg） 测得硼酸实际含量（mg） 标示百分含量 RSD
001 100618 300.8 129.0 126.5 98.0%
002 100618 300.2 128.8 127.1 98.7% 0.5%
003 100618 301.1 129.2 127.7 98.9%
004 100628 303.5 130.2 128.5 98.7%
005 100628 298.5 128.1 125.5 98.0% 0.4%
006 100628 299.9 128.7 126.1 98.0%
007 100716 300.2 128.8 127.1 98.7%
008
009 100716
100716 301.0
302.2 129.1
129.6 127.8
128.6 99.0%
99.2% 0.3%
3.2.1.2加样回收
精密称取在装有五氧化二磷为干燥剂的干燥器中干燥24h的硼酸，加入样品中同前法平行测定，按下列公式计算回收率，其结果（见表2）。
表2加样回收
序号 加入量
（mg） 测出量
（mg） 回收率
（%） 平均回收率（%） RSD
001 108.9 107.8 99.0% 99.2% 0.3%
002 106.5 105.3 98.9%
003 151.2 150.7 99.7%
004 150.3 149.0 99.1%
005 201.1 200.3 99.6%
006 200.5 198.5 99.0%
3.2.1.3空白实验精密称取在装有五氧化二磷为干燥剂的干燥器中干燥24h的水杨酸、苯甲酸，按处方比例混合均匀后，同前法平行测定，其结果（见表3）。
表3空白实验
序号 加入量
（mg） 测出量
（mg） 测出量
（%） 平均值
（%）
001 102.0 1.1 1.1% 0.9%
002 151.5 1.4 0.9%
003 201.2 1.6 0.8%
3.2.2样品测定
3.2.2.1苯甲酸和水杨酸总量分取2.1项下乙醚层，加新沸过的冷水20ml，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定至水层显淡红色。每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于12.81mg的C7H6O2及C7H6O3总量。其结果（见表4）。
表4样品测定结果
序号 样品批号 样品取用量（mg） 样品总量标示含量（mg） 测得总量实际含量（mg） 标示百分含量 RSD
001 100618 300.8 171.8 169.9 98.9% 0.4%
002 100618 300.2 171.4 170.2 99.3%
003 100618 301.1 171.9 169.3 98.5%
004 100628 303.5 173.3 172.5 99.5% 0.4%
005 100628 298.5 170.4 169.3 99.3%
006 100628 299.9 171.2 169.2 98.8%
007 100716 300.2 171.4 169.0 98.6% 0.4%
008 100716 301.0 171.9 169.0 98.3%
009 100716 302.2 172.6 168.8 97.8%
3.2.2.2加样回收精密称取在装有五氧化二磷为干燥剂的干燥器中干燥24h的水杨酸、苯甲酸，按处方比例混合均匀后，加入样品中同前法平行测定，其结果（见表5）。
表5加样回收
序号 加入量
（mg） 测出量
（mg） 回收率
（%） 平均回收率（%） RSD
001 106.1 104.6 98.6% 99.0% 0.3%
002 105.5 104.5 99.0%
003 150.2 148.9 99.1%
004 150.9 148.9 98.7%
005 201.2 200.0 99.4%
006 200.9 199.5 99.3%
3.2.2.3空白实验精密称取在装有五氧化二磷为干燥剂的干燥器中干燥24h的硼酸，同前法平行测定，其结果（见表6）
表6空白实验
序号 加入量
（mg） 测出量
（mg） 回收率
（%） 平均值
（%）
001 108.9 1.0 1.0% 0.9%
002 125.9 1.1 0.9%
003 131.2 1.1 0.8%
3.3样品测定值与标示量比较值
苯甲酸及水杨酸总量和硼酸测定结果按标示量%计算，结果见下表（表7）
批号 091113 091218 100220 100614 100628 100716
硼酸含量 94.9% 92.5% 98.9% 98.4% 98.3% 98.9%
水杨酸及苯甲酸总量 98.2% 102.2% 92.3% 98.9% 99.1% 98.2%
3.4含量限度的确定
根据上述测定结果，含量测定限度订为标示量的90.0%～110.0%，收入标准正文。
3.5样品取用量经过实验得到以下结果：
样品量（克） 消耗NaOH滴定液（0.1mol/L）体积（ml）
苯甲酸和水杨酸总量 硼酸
0.2506 11.20 17.40
0.3020 13.50 21.00
0.3511 15.70 24.40
根据上述测定结果，确定样品取用量约为0.3克较为合理。
4讨论
苯甲酸及水杨酸总量滴定度的说明：分别按处方量比例计算得到，（13.81×214÷571）+（12.21×357÷571）=12.81。
5其他
处方组成：水杨酸适量苯甲酸适量硼酸适量，制成1000g
参考文献：
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[M].2005年版.北京：化学工业出版社，2005，2：64.321.813.
方法学范文第4篇
【关键词】 血氨；方法学；光密度
正常人体内游离血氨（blood ammonia，BA）含量极低（正常值20～60 μmol/L）［1］，其主要来源于体内蛋白质在代谢过程中产生的氨基酸，以及经脱氨作用分解而来的内源性氨，正常情况这种氨可形成酰胺及合成其他含氮化合物而不断地被转化；另一来源是蛋白质类食物在肠道内经细菌分解而成的外源性氨，正常情况下此氨经门静脉进入肝脏被合成为脲，经肾脏排出体外。然而在发生代谢障碍性疾病，如肝性昏迷、肝性脑病、重型肝炎、尿毒症等由于氨不能正常代谢排出体外而引起BA升高。肝功能极度衰竭或血液不能正常地流经肝脏转换等严重肝脏疾病，氨不能从循环中及时清除均可使血氨增高［1］。高BA有神经毒性，BA的测定对于肝硬化门脉高压、肝昏迷、Reve’s综合征及儿科的一些先天性代谢紊乱等病的诊断、观察和预后判断有着重要意义［2］。BA的测定方法有微量扩散法、比色法、离子交换法、氨电极法、酶法等。笔者在结合本实验室现有条件，参考国内外有关文献建立快速、准确的检测BA方法，为临床该类疾病的诊断、治疗提供参考。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
电子天平 COBS120型（朝鲜COBS公司），紫外分光光度仪HP8453（美国惠普），离心沉淀器800型（上海手术仪器厂），YKHI型液体快速混匀器（江西医疗器械厂），DHW420三用电热恒温水箱（北京东霞科学仪器厂）。
1.2 试药
钨酸钠（天津市大茂化学试剂厂，批号030906），硫酸铵（重庆北碚化学试剂厂，批号050329），亚硝基铁氰化钠（上海三爱思试剂公司，批号20020204），苯酚（重庆北碚化学试剂厂，批号：20000924），氢氧化钠（重庆川江化学试剂厂，批号20000312），次氯酸钠（重庆川东化工集团化学试剂厂，批号20040904），硫酸铵（重庆北碚化学试剂厂，批号050329），硫酸（重庆川江化学试剂厂，批号20000105），所用试药均为分析纯，水为新制无氨蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 储备溶液的配制［2］
无氨水的制备：参照文献［3］取重蒸水1 000 mL，加稀硫酸1 mL与高锰酸钾试液1 mL，蒸馏即得备用。
酚显色剂：精取亚硝基铁氰化钠25.00 mg，与适量苯酚混合后加无氨水至100 mL，过滤即得。
碱性次氯酸钠溶液：精取250 mg次氯酸钠，氢氧化钠2 500 mg，溶于100 mL无氨水中即得。
0.5 mol/L硫酸溶液、5 mmol/L硫酸铵溶液参照文献方法［3］配制。
2.2 标准溶液的配制
分别精取“2.1”项的硫酸铵储备液20、200、500、1 000、1 500、2 000、4 000 μL置于50 mL容量瓶，立即加无氨水至刻度即得10、20、50、100、150、200、400 μmol/L的硫酸铵系列标准溶液。
2.3 标准曲线的制备
取“2.2”项的硫酸铵系列标准溶液各1 mL，分别加入10 %的钨酸钠溶液、0.5 mol/L硫酸溶液各0.5 mL，涡旋震荡1 min，4 000 r/min离心5 min，分取上清液1 mL，依次加入酚显色剂和碱性次氯酸钠溶液各1 mL，涡旋1 min后置37 ℃水浴20 min，以空白管校正后于630 nm处测定OD值；将所测得的吸收度OD值对浓度进行线性回归处理得回归方程：OD=0.0017C+0.23，相关系数r=0.9964，根据(NH4)2SO4与游离氨的定量关系，即得游离氨浓度在5～200μmol/L的定量线性范围（见图1）。
2.4 临床样本的测定
参考国内外有关文献，经优化后测定BA的方法为：离体血液立即加入过量定量的10%钨酸钠及0.5 mol/L硫酸溶液，使蛋白沉淀的同时，血液中的氨与硫酸形成硫酸铵而存留于血滤液中，再以酚次氯酸钠显色剂显色后于波长630 nm处测定OD值，即可定量测定BA。
2.5 方法的回收试验
按“2.2”项的方法分别配制高、中、低（400、200、40 μmol/L）的硫酸铵标准溶液适量，各取1mL分别加入1 mL无氨正常血浆，混匀后精密量取1 mL按2.4项下的方法分别精密加入0.5 mL 10 %钨酸钠和0.5 mol/L硫酸溶液各0.5 mL，以下按准曲线项下相应的方法处理并分别测定其OD值，将测得的OD值代入标准曲线计算测得量与回收率，结果见表1。表1 血氨回收试验（略）
2.6 精密度试验
配制低、中、高（25、50、75 μmol/L）3个浓度含无氨正常血浆的硫酸铵溶液各3份，日内4 ℃冷藏保存，每间隔1 h按2.3标准曲线项下的方法测定1次，连续测定5次。另取相同样品18 ℃冷冻保存，每日测定1次，连续测定5日。所得OD值代入标准曲线方程计算得游离氨浓度，结果见表2。表2 血氨精密度试验（略）
2.7 稳定性试验
取硫酸铵溶液适量配制成75 μmol/L含无氨正常血浆的硫酸铵溶液，分别置于4 ℃冰水浴和18 ℃条件下储藏保存，每次平衡5 min后各取1 mL样品，按“2.6”精密度试验项下的测定方法，4 ℃下保存的标本在1 d内每间隔2 h测定1次，每次平行测定5份，直至14 h共测定8次；18 ℃条件下保存的标本每天定时测定1次，每次平行测定5份，连续测定7 d，将测得的OD值通过标准曲线方程计算游离氨的实际含量，结果见表3。由表可知新鲜血中游离氨极不稳定，常温和4 ℃冷藏保存均不稳定，宜在2 h内测定，在18 ℃下保存也宜在24 h内测定。表3 血氨稳定性试验（略）
2.6 临床应用
选择我院近2年来的住院患者，除外肝、胆、肾疾病患者。脑梗塞患者28例，其中男16例，女12例，平均年龄（55.8±10.5）岁；脑溢血患者25例，其中男15例，女10例，平均年龄（60.4±15.4）岁；脑炎患者10例，其中男6例，女4例，平均年龄（39.8±13.5）岁。全部病例均经临床及CT和（或）MRI检查。对照组25例，经检查全部健康正常，其中男13例，女12例，平均年龄（57.2±14.3）岁。全部患者均在昏迷期及恢复期各采取肘静脉血1～2 mL，肝素抗凝，立即用上述方法测定血氨，对照组也同时采血测定血氨。
结果对照组血氨含量为（56.53±29.15）μmol/L，脑梗塞组昏迷期血氨含量为（179.00±108.59）μmol/L，恢复期为（66.89±26.67）μmol/L，昏迷期与对照组经χ2检验差异有统计学意义（χ2=12.68，P0.05）。脑溢血组昏迷期血氨含量为（146.97±72.41）μmol/L，恢复期为（60.46±24.39）μmol/L，昏迷期与和对照组比较差异有统计学意义（χ2=11.78，P0.05）。脑炎组昏迷期血氨含量为（197.17±62.10） μmol/L，恢复期为（59.83±39.59）μmol/L，昏迷期与对照组显著增高（χ2=9.72，P0.05）。
3 讨论
由表3结果表明：标本放置时间越长，其血氨浓度越高，主要原因可能是血液细胞自身代谢或部分微生物代谢后产生氨致使其血氨浓度升高。为保证测定结果的准确应注明标本的采集时间并立即送检，送检标本迅速测定（30 min内），同时进行平行质控监测。病人标本采集后如不能立即测试，应在2～8 ℃冷藏最多3 h测定，18 ℃冷冻保存最多24 h测定。
正常情况下，体内大部分氨经过尿素循环形成尿素自尿中排出，部分为机体再利用，不会产生蓄积，而在尿素循环障碍疾病时则将出现血氨蓄积，在新生儿当血氨大于150 μmol/L、婴幼儿大于80 μmol/L、成人大于70 μmol/L可确定为高氨血症［45］。血氨可干扰脑的能量代谢，脑组织在氨的生成中需消耗某些辅酶、高能磷酸及大量α酮戊二酸，引起高能磷酸化合物浓度的降低，过量氨还可能抑制丙酮酸脱氢酶活力而影响乙酰CoA的生成和乙酰胆碱的合成，干扰三羧酸循环，氨还可抑制Na+K+ATP酶，直接影响钾、钠在神经细胞膜上的正常分布，干扰神经传导活动，当脑组织炎症、缺血、缺氧时就影响了氨的代谢使氨增高。脑缺血后可导致生化代谢方面的变化，影响氨的平衡，脑组织内氨水平增高。有实验表明，大鼠在脑循环中断5 min后，其缺血的皮层氨含量从对照值的0.28 mmol/L升高到1.12 mmol/L。在脑组织内，氨的解毒主要靠α酮戊二酸的氨化作用以及氨与谷氨酸结合生成谷氨酰胺，但后者的反应需要消耗ATP，在缺血情况下α酮戊二酸的氨化起主要作用。同时昏迷患者常常禁食，致使液体摄入减少或用脱水剂过量，从而致使血氨显著增高。此外，由于感染、高热等增加机体代谢，也使内源性血氨增高。国外学者KanamoriK等研究了小鼠体内的氨、谷氨酰胺以及谷氨酰胺合成酶与脑病的关系，表明脑病与氨相关［6］。国内李英杰等［7］测定22例脑梗塞患者的血氨和CSF氨含量，结果表明急性期血氨和CSF氨显著高于对照组（P
参考文献
［1］李影林. 临床医学检验手册［M］. 第1版. 吉林: 吉林科学技术出版社， 1990: 503.
［2］孔祥云， 徐勉忠. 实用临床医学检验［M］. 第1版. 武汉: 湖北科学技术出版社， 1984: 1121.
［3］中华人民共和国药典委员会. 中华人民共和国药典(二部)［S］. 2005年版. 2005， 附录: 134.
［4］Nyhan WL， Ozand PT. Atlas of metabolic diseases［M］. London: Chapman Hill Medical， 1998: 167187.
［5］顾学范， 叶 军. 新生儿疾病筛查［M］. 第1版. 上海: 上海科学技术文献出版社， 2003: 227233.
方法学范文第5篇
【关键词】 金标法；乙肝表面抗原
乙肝表面抗原（HBsAg）是乙型肝炎病毒外壳蛋白中的主要成分阳性是感染乙肝病毒的标志，是检查乙肝血清标志物中较重要的一项［1］。近年来发展的金标法检测HBsAg，与传统的酶免疫法（EIA）相比，具有简便、快速、准确，不需要仪器设备等优点，能满足临床急诊快速出结果的需要，且较适合使用于流行病学调查，应用前景非常宽广。
1 材料与方法
1.1 材料 （1）金标试纸条：上海洪泰生物技术发展有限公司产品。（2）HBsAg灵敏度标准参比品：中国药品生物制品检定所产品。（3）HBsAg酶免疫诊断试剂盒，HBsAg、HBcAg、HBeAg阳性对照血清：中外合资上海实业科华生物技术有限公司产品。（4）血清标本：1200份体检及临床血清标本，其中乙型肝炎患者血清172份，健康人血清1028份。
1.2 方法 （1）5ng/ml标准参比品 用生理盐水分别稀释成4ng/ml，3ng/ml，2ng/ml，1ng/ml几种浓度，各取0.1～0.2ml置于洁净试管中，用金标法试纸条进行检测，严格按照说明书所述，将测试条有金标抗体端插入血清内，放置一定时间后观察结果。（2）HBsAg、HBcAg、HBeAg阳性对照血清各取3份，每份为0.1～0.2ml加入已备好洁净试管中，用金标法对各份血清进行检测。（3）分别用金标法、EIA法对1200份体检及临床血清标本进行检测。（4）将金标试纸条各10条分置于37℃、室温（25℃）保存5天，做热稳定试验。
2 结果
（1）用金标法对5种浓度的HBsAg阳性标准参比品进行检测。结果确定时间：强阳性参比品（4～5ng/ml）在2min内即可在检测线见到红色胶体金颗粒聚集；阳性参比品（3mg/ml）在5min内即可出现两条紫红色线条，弱阳性标本（1～2ng/ml）约需20min确定结果。说明了金标法敏感性较强，灵敏度可达1ng/ml，可以满足临床要求。（2）将金标试纸条分别插入HBsAg、HBcAg、HBeAg阳性对照血清各3份中，结果只有HBsAg阳性对照血清管中试纸条出现两条红色线，说明该试纸条只与HBsAg有特异性反应，特异性强，不易出现假阳性。（3）分别用金标法、EIA法对1200份体检及临床血清标本进行检测，所得结果显示：金标法与EIA法所做结果有162例阳性结果一致，有1026例阴性结果一致，有12份血清两法检测结果不符，比较两法检测HBsAg的一致性，符合率为99.0%。12份两法结果不符的血清中，有5例（乙肝组3份，健康组2份）金标法呈弱阳性，而EIA阴性，但这5份血清EIA吸光度值均接近临界值。另7例（均为乙肝组血清）金标法阴性，EIA为HBsAg弱阳性。通过计算，可得出金标法临床灵敏度为95.9%，临床特异性为99.8%，临床准确度为99.2%，阳性预测率为98.8%。（4）将金标法试纸于37℃、25℃各10条放置5天后，测定10份不同血清标本（乙肝组与健康组各5例），所得结果与放置4℃的试纸检测结果无明显差别。说明金标法试纸条性质较稳定，易保存。
3 讨论
HBsAg的检测可作为乙型肝炎病毒感染的一个重要指标，目前多采用EIA或EIA一步法，由于其试剂盒中酶标试剂不易保存，操作中需通过加样、加试剂、孵育、洗板等一系列过程，延时长，且易引起标本间交叉污染或阳性标本对人体的污染，给实验室检测工作带来一些不便，不能满足临床急诊快速出结果的要求。
近年来，随着现代免疫化学技术的发展，出现了胶体金免疫层析法［2］。该法是将羊抗HBs、羊抗鼠IgG分别固定在特制的纤维素试带上并呈两条线上下排列，羊抗鼠IgG线在试带条上方为阴性对照，抗HBs在下方为测定。试带条中含均匀分布的胶体金-抗HBs和无关的金标记鼠IgG。检测时血清沿试带上行，其中HBsAg在上行过程中与胶体金-抗HBs结合，待行至羊抗HBs线时，形成金标记抗HBs-HBsAg-抗HBs复合物而在试带上显红色线，试带上无关的金标鼠IgG随血清继续上行至羊抗鼠IgG处时形成红色金标复合物为阴性对照。判断结果时，出现两条红色线时为阳性，只在对照线出现红色线时为阴性，如对照线未出现红色，则表明该试纸条失效。该法集免疫反应与免疫层析的特点，灵敏度高，特异性强，且试纸条轻便易带易保存、易操作，无需仪器设备，病人标本可随来随查，20min内即可发出结果，适合于大批健康体检、流行病学调查及门诊急诊标本的应用。
当然，该法与EIA相比，只能作定性检查，灵敏度稍差，易将少数弱阳性标本忽视，出现假阴性，具体原因及改善办法，有待进一步探讨。
【参考文献】
