赠内人

前言：想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗？我们特意为您整理了5篇赠内人范文，相信会为您的写作带来帮助，发现更多的写作思路和灵感。

赠内人范文第1篇

关键词:增值型内审；社会责任；企业价值

中图分类号：F272 文献标志码：A 文章编号：1673-291X（2012）06-0031-02

一、社会责任与企业价值

企业社会责任研究源于20世纪20年代。1923年，英国学者欧力文·谢尔顿提出了“企业社会责任”（Corporate Social Responsibility，简称CSR）的概念，指出企业应该为其影响到其他实体、社会和环境的所有行为负有责任。现实中，企业社会责任兴起于20世纪50年代的西方发达国家，其核心思想在于企业在获取利润、履行股东受托责任的同时，还需承担起对自己员工、周边环境及其他利益相关方面的责任，如保护劳动者健康与其他合法权益、维护生产安全、节约能源资源、遵守商业道德以及履行其他社会责任等等。

诚然，企业承担社会责任需要投入大量的人力、物力和财力，企业的短视行为导致的结果是很多企业都不愿主动承担社会责任。然而，研究表明，企业主动承担并积极披露社会责任，会影响其财务绩效与企业价值，对它们产生积极作用。Rao与Hamilton（1996）、Frootman（1997）实证表明公司不承担社会责任或不合法规的表现会影响公司的市场价值。普雷斯顿和奥班农（Preston和O.Bannon）仔细分析了美国67家大公司1982—1992年的有关数据，用财富企业社会名誉调查代表社会责任水平，用总资产利润、净资产利润和投资利润作为财务绩效的代表，得出了“对美国大公司而言，企业社会表现和财务绩效之间存在正相关关系”。Hillman和Keim（2001）认为通过承担更多的社会责任，与主要利益相关者建立紧密关系。这种关系能帮助企业发展不可见的，有价值的资产。投资与利益相关者的关系，能够导致客户与供应者的忠诚，降低员工的离职率以及提高企业声誉。

就企业承担社会责任的外部性而言，可从外部效应的两个方面外部成本和外部收益进行分析。如果企业能将经济活动带来的外部成本内部化，则表现为企业自觉承担了社会责任，该外部成本的货币计量即为企业承担社会责任的成本支出。而企业承担社会责任的外部收益则表现为企业形象的提升、社会知名度的提高等，从而为企业带来直接或间接的社会收益，最终提升企业价值。这两方面共同作用的结果为企业社会责任的承担短期内会表现为外部成本高于外部收益，但长期来看，外部收益很快大于外部成本，从而使企业整体价值的增量为正值。

二、增值型内审与企业价值

1999年6月，由120多个国家参加的国际内部审计师协会（IIA）理事会通过了新的内部审计定义：“内部审计是一种独立、客观的保证和咨询活动，其目的是增加组织的价值和提高组织的运作效率。它通过系统化和规范化的方法，评价和改进风险管理、控制和治理过程的效果，帮助组织实现其目标”。在此，“为组织增加价值”第一次被列入内部审计定义，自此，内部审计进入了一个新的发展阶段——价值增值阶段。价值本来是从生产和销售过程中创造出来的，内部审计虽然不参加生产和销售活动，但它可以通过保护组织资产、减少组织风险、降低自身审计成本、提出有价值的建议、增加组织获利机会等活动来为组织增加价值，为组织带来巨大的利益。其增值活动具体表现在内部控制领域、风险管理领域和公司治理领域。

首先，在内部控制中，内部审计主要通过鉴证和咨询功能为组织增加价值。根据修订后的《内部审计实务标准》第2120.AI－1条，内部审计应该在风险评价结果的基础上，评价覆盖机构治理、运营及信息系统等内容的控制程序的充分性与有效性。通过这种对内部控制的再控制，审计师们对为组织提供增值服务和减少损失作贡献。另外，增值型内审还很重视顾客需求，会根据不同顾客需求提供多产品服务，通过增值服务使企业增值。其次，内部审计通过对质量风险管理、速度风险管理、投资成本控制风险管理等进行审计评价，提供鉴证和咨询服务，为企业增加价值，具体内容如：评价风险管理过程、评价关于关键风险的报告、检查对关键风险的管理、指导对风险的应对措施、协调企业风险管理活动、强化对风险的报告、维持和开发适合企业的风险管理框架、制定有待董事会批准的风险管理战略等等。最后，内部审计作为现代公司治理的一部分，能评价和提高公司治理的有效性。增值型内审不仅仅承担着监督者的职能，而且承担部分控制者的治理职能，主动为组织价值增值服务，是组织价值链当中重要的一个环节。

三、企业社会责任的增值型内审

增值型内审向企业社会责任审计领域延伸，是增值性内审自身谋求发展的需要，也是企业面对社会环境的现实选择。增值型内审促使企业社会责任的承担及披露为其带来更多价值增值。越来越多的企业意识到，只有履行好社会责任，才能从长远视角保障企业生产经营活动的正常进行，方可塑造良好的社会形象，维持可持续发展的生命力。社会责任已成为了企业进行价值增值必不可少的内容。另外，增值型内审以实现组织目标为自身的目标，以为组织增加价值为其目的。凡是能为组织增加价值的鉴证和咨询活动，内部审计都积极地开展。因而，企业进行社会责任的增值型内部审计是在目前社会环境倡导文化建设，强调“软控制”对企业的约束作用，在社会责任相关法律规范尚未非常完善现状下，能更好促进社会责任履行，进而提升企业价值。目前，企业自身的内部制度建设与组织结构的完备程度是企业能否很好履行社会责任的一个重要因素。而增值型内审所提倡的柔性控制恰好能较为有效地弥补很多企业在这方面的不足。尤其在诚信缺失、内部人控制现象较为普遍的情况下，社会责任的履行更需要增值型内审的推动与协助。

就增值型内审产生增值活动的主要领域：内部控制领域、风险管理领域和公司治理领域而言，能够较为全面地考虑到股东、员工、顾客、社区、政府以及社会整体的利益，考虑到企业责任对象的经济责任、法律责任、伦理责任、自发责任等责任形式。根据目前社会责任报告要求的主要内容，社会责任内审的内容主要应包括收益贡献责任、对环境的责任、对职工的责任、对消费者的责任和社会道义责任等。据调查，在企业社会责任履行方面的不作为中，公众对企业损害员工权益和消费者权益的行为最为反感。因此，增值型内审在进行操作和报告时，应特别注意结合企业特点，对公众关注事项予以特别关心，这样才能更好发挥提升企业价值的作用。增值型内审在对企业社会责任相关事宜进行审计时，还应注意需采用多种审计方法，用现代化审计手段进行辅助，关注细节，最终形成一套包括审计范围和内容、审计依据、审计方法、审计过程、发现的问题及对策建议等内容的审计报告，以利于企业管理者决策。

四、企业社会责任增值型内审应注意的两个问题

1.正确认识社会责任增值型内审的作用。虽然从必要性与可行性、相关内容与特点等方面来看，增值型内审能很好促进企业社会责任的履行，增强企业的自觉性与针对性，但增值型内审并非解决企业社会责任问题的万能药。内审部门作为企业内部组成部分，不可避免在一定程度上受到内部人影响与控制，独立性较差，不能完全摆脱内部人际关系等相关因素干扰，因而，内审效果可能与实际情况脱节。信息使用者在评价企业承担社会责任状况、进行相关决策时，不能够毫无怀疑的直接利用内审结果，需对其信息的质量进行分析，在该项审计基础上，辅以其他必要手段，如采用内部控制测试等，进一步核实并合理利用相关结论，还可结合社会责任外部调查与审计结果，使用一些外部专家、行业协会、或独立审计机构得出的报告进行最终分析。

2.考虑社会责任增值型内审的成本效益问题。增值型内审对社会责任相关问题的解决固然效果良好，但也需注意有关成本。由于企业社会责任对象较多，内容较泛，如对其面面俱到地进行审计，支出耗费太大，一旦超出该项业务带来的收益，无论从企业自身来看还是从整个社会来看，都不符合成本效益原则。所以在进行社会责任增值型内审时，一要控制好审计范围与内容，二要提高审计效率与水平。在选择审计范围与内容时，不仅要考虑企业特征、社会关注的焦点，还要考虑企业总体目标与财务目标，不可能将所有问题的一切细节都关注到，需估算相关支出，尽量用更少的钱解决更多问题。同时，切实提高内审效率，提高内审人员素质，加强相关业务培训，妥善处理好社会责任内审与经济责任内审的关系，处理好社会责任内审与社会责任国家审计、社会审计的关系，处理好企业内部各部门之间关系，真正提高内审效益。

参考文献：

[1] 刘春花.增值型内部审计研究[D].福州:福州大学，2004:5.

[2] 曲飞宇.透视企业的社会责任动机及其体系[EB/OL].网易财经，2011-01-17.

[3] Lee E.Preston and Douglas P.0.Bannon.The Corporate Social-Financial Performance Relationship:A Typology and Analysis[J].

Business and Society，1997，(4):419-429.

[4] 许叶枚.社会责任、内部审计与企业价值[J].浙江学刊,2009，(6):175.

[5] 李学柔.内部审计实务导读:修订本[M].北京:中国内部审计协会，2003.

[6] 李嘉明，赵志卫.中国企业开展社会责任内部审计的构想[J].中国软科学，2007，(4):123-126.

[7] 王蕾.增值型内部审计在中国的发展[D].北京:首都经济贸易大学硕士论文，2007:1.

赠内人范文第2篇

关键词： 高中数学教学 新增内容 算法初步

高中数学新课程在全国已经全面展开，根据现代数学的发展和吴文俊院士的建议，在这次高中数学新课程的改革中新增了“算法初步”。在教学中却存在一些令老师们感到困惑的问题。我从对《普通高中数学课程标准》“算法初步”部分的理解与把握，对“算法初步”教学中应注意的问题等方面谈谈认识。

《普通高中课程标准》提出：“算法是数学及其应用的重要组成部分，是计算机科学的重要基础。随着现代信息技术飞速发展，算法在科学技术，社会发展中发挥着越来越大的作用，并日益融入社会生活的许多方面。算法已经成为现代人应具备的一种数学素养。”新课标中将算法列为必修内容，正是为了使学生形成符合时代要求的新的“数学基础”。它既是高中数学的新增内容，又具有较强的应用性。另外，教材编写中把算法内容作为主线渗透到其他数学内容中，并与高中信息技术教材相呼应。

算法简单地说是一类问题有效的解题方法，它是由基本运算及规定的运算顺序所构成的完整的解题步骤。它强调的是通性通法，不关注问题的特殊性。机械地按照某种确定的步骤行事，通过一系列简单计算操作，完成复杂计算的过程，被人们称为“算法”过程。现代意义上的“算法”通常是指可用计算机解决的某一类问题的程序或步骤，这些程序或步骤必须是明确和有效的，且能在有限步骤内完成。描述算法可用不同的方式，可以用自然语言、基本语句描述，也可以使用程序框图直观地表示算法的整个结构。

算法教学是控制学生解题过程的一种教学方法。其代表人物为前苏联心理学家л.н.兰达。他认为使学生掌握了思考活动的一般方法就可以发展学生的智力。在高中教学中引入算法正是对兰达所提出的算法教学的最直接的应用。

算法教学过程遵循了人类逻辑推理过程――由特殊到一般的归纳过程，再由一般到特殊的演绎过程。学生在算法学习过程中要充分体会这种逻辑思维方法，这对于培养学生的逻辑思维能力和解决数学问题的程序化能力有极大的益处，使学生在解决数学问题时会有意识地寻求一种通法，在思维的锻炼中提高条理性和严密性，使学生形成合理的思考方式。

算法教学中记忆性的学习比较少，更多的是给学生一个自由探索发展个性的平台。学生在教师提出问题后有目的地探索解决问题的方法并对结果进行调试和检验。在这个过程中，学生理解知识、整合、内化，并使得思维得到进一步发展。

算法教学采用逐步渗透、逐级强化提高的螺旋式结构。在必修1中的二分法是算法最早出现的问题，在必修2中的直线与圆的方程的性质的研究中进一步渗透，在必修3第一章中正式学习，在第二章统计和第三章概率提出了算法思想的应用问题；在必修4的弧度制中进一步提出了其应用；对于文科的学生在选修系列1-2中又追加了程序框图和流程图，实际上算法已经成为高中数学的一条主线。算法除了作为数学3的内容之外，其思想还应渗透在整个高中数学课程中。比如在数学2的解析几何初步中，对利用公式计算的几何问题进行分步求解，其中就蕴涵程序化解题思想。因而在数学1、数学2中的教学中，应当注意逐步渗透算法思想，让学生逐步体会程序化解题的方法，为数学3的算法教学做好铺垫。在数学3的算法教学中，要鼓励学生尽可能运用算法知识解决接触过的相关问题，例如：设计算法求方程的近似解，让程序化思想成为学生思考问题的习惯，在往后相关内容（如制作随机数表、数列的前n项和）教学中，也要注意体现数学与算法的有机结合，有意识地引导学生体会算法思想，使其体会到掌握算法思想对提高数学能力的重要性。

新课标中算法内容的引入，是适应信息技术高速发展的需要。算法体现了通用化、机械化、程序化等特点，在算法教学中有以下几点建议：

（1）同时走好算法表示的三条路，即自然语言、程序框图、算法语句。在教学中，可以结合具体的算法实例，分析用自然语言表示算法的步骤，绘制相应算法的程序框图，并编写相应框图的算法程序。注意三条途径的目的是体会其中的算法思想。

（2）剖析清楚教材中的几例典型算法实例，例如解一元二次方程、二元一次方程组，质数的判定，按大小顺序输出三个数，1～100的累加，二分法求方程近似解，分段函数的求值等。

赠内人范文第3篇

2011年12月22日，光大银行私人银行中心（北京）正式揭牌成立，成为第12家涉足私人银行业务的商业银行。上海、杭州等地私人银行中心也将相继成立。

财富管理在中国尚不成熟，对于高净值客户群体市场来说，还是一片蓝海，在外资银行对私人银行业务领域尚不能充分涉足的情况下，中资银行抢先发展私人银行业务，无疑占有先机，多家银行都正在或正准备在这个市场发力。据《投资者报》记者了解，北京银行也有意成立私人银行，正在筹划中。

作为金字塔塔尖的高端零售客户市场，私人银行在中国已走过4个年头，但现在很多客户对私人银行的理解仍很模糊。

“私人银行就是为我们提供私密服务的银行。”一位企业主李先生这样告诉记者，他考察过招行等几家私人银行，目前已是某银行的私人银行客户，但他坦言对此还没有完全理解。

“我感觉私人银行就像证券公司的大户室，提供平台。”国民信托资产管理部负责人刘习勇评价道，在很多信托公司及PE机构眼里，私人银行最大的意义就是代销产品。

之所以有这样的看法，主要由于中国私人银行业务起步晚，未来私人银行业务将向全权委托资产管理转变。

4年成立12家

私人银行在中国出现不过是近4年的事情。

中国银行在中资行中最早推出私人银行业务，2007年3月中行私人银行部成立。同年8月，招行和中信银行也设立了私人银行部门，同年9月交行私人银行成立。

中信银行与中央财经大学联合的《中国私人银行客户特征与未来发展趋势研究报告》（下称《报告》）显示，截至2010年底，中资商业银行中有8家开设了私人银行业务，除了2007年成立的4家外，还有工行、建行、民生和农行。

2011年又有4家银行加入，除了刚成立的光大外，还有兴业、浦发和华夏。

到目前为止，合计共有12家银行成立私人银行中心或部门。

银行青睐私人银行业务主要原因有二。首先是个人财富和高净值人群迅猛增加。

《报告》显示，过去五年，全国个人可投资资产总体规模从2006年36万亿元增长到2010年底87万亿元，增幅为140%，复合年均增长率为24.5%。截至2010年底，高净值人群数量达100万，四年来平均增速为29.1%。预计未来5年年均增速将达17%，到2015年能达到219万人。

其次是中资行转型的需要。近年来，金融脱媒现象日益加剧，商业银行传统业务收入渠道及利润空间不断被压缩，财富管理平台作为金融服务平台的重要组成部分开始成为各中资行经营及业务转型的重要选择。

其实，现在是中资行发展私人银行业务的黄金时期。随着高净值人群的增多，已经产生了对私人银行服务的强烈需求，而在海外有着丰富经验的外资私人银行由于政策的限制，在中国尚不能放开手脚，无法像中资行一样提供较完整的产品线。

所以，中资行具备了占领市场、扩大客户群的先发优势。

不同于贵宾理财

经过4年的发展，客户对私人银行的认知度有一定提升。不过对于中资行来说，私人银行仍然属于新生事物，出现问题、瓶颈在所难免。

在很多客户眼中，私人银行就是贵宾理财的升级版。“周围很多朋友都反映私人银行就是比原来的贵宾理财门槛高点，产品收益率也相对更稳定，其他服务内容感觉不到太大差别。”前述李先生表示。

“不能将私人银行简单理解为比贵宾理财门槛高。私人银行和贵宾理财是截然不同的概念，两类客户性质不同，需求也不同。”光大银行零售业务部总经理张旭阳在接受《投资者报》记者采访时表示。

“我们光大定的私人银行门槛是1000万，其实这不仅是资金门槛，也是不同客户需求的门槛，这个级别的客户需要的是财富传承、财富转移、离岸金融、海外投资等，同时这类客户背后通常还有企业，他们不仅关心自身财富保值增值，也关心企业并购、上市等，与贵宾客户需求截然不同。”张旭阳说。

二者在服务上也不同，贵宾理财是一位客户经理对应一位客户，一个产品服务多个客户，向客户销售的是产品；而私人银行服务则是一群客户经理服务一位客户，向客户销售的是投资组合。“光大私人银行现在定的模式是‘1+1+N’，包括一名私人银行客户经理，一支由金融产品专家、投融资技术专家组成的投资顾问团队以及由光大银行总行支持的专家团，成员囊括总行公司部、投行部、资金部、同业部、中小企业部等部门。”张旭阳表示。

但在信托、基金、PE/VC、第三方理财等机构的眼里，私人银行像一个销售平台。“私人银行自己没有什么投资产品可直接提供给客户，那就相当于给我们提供一个地方，来销售我们的产品。”刘习勇说。

张旭阳认为之所以客户和外界有这样的误解，主要原因有二。一是中国私人银行刚起步，还没有完全达到应有标准，二是中国实行分业经营，私人银行需要打通不同金融机构的边界。

向全权委托转变

目前，中国私人银行业尚未形成明显的行业竞争格局，且私人银行的服务仍保留着传统零售银行业务的色彩。

中资私人银行业务组织模式主要有两种：大零售模式和（准）事业部制模式，其核心问题是解决私人银行同零售银行业务及私人银行业务相对独立运营与总分行体制的协同问题。两种模式既有不同又有共性。具体到每家银行，同种模式下不同银行又存在一定差异，其抉择取舍一度引发广泛讨论和争议。

前述《报告》认为中资银行在私人银行业务组织模式方面尚没有成功的、可复制的范例。

光大的私人银行模式就属于大零售模式，其组织架构方面，相关业务部门采用相对扁平化的管理，该行将其定义为“总分行联动”模式。

据张旭阳介绍，私人银行在经历了从卖产品到卖组合的转变后，下一步考虑未来要实现全权委托资产管理。

赠内人范文第4篇

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)病人颈动脉内膜增生与胰岛素抵抗及代偿性高胰岛素血症的关系。方法 对152例已确诊T2DM病人采用超声测定颈动脉内膜中层厚度（IMT），选择其中96例IMT

【关键词】 糖尿病 2型 颈动脉 内膜中层厚度 胰岛素抵抗

［ABSTRACT］ Objective To observe the relationship between carotid artery intima thickness (CAIT) and insulin resistance in pateints with type 2 diabetes. Methods CAIT was measured ultrasonographically in 152 patients with type2 diabetes， of whom， 96 patients defined as being free of plaque (CAIT

［KEY WORDS］ Diabetes mellitus， type 2; Carotid artery; Intima media thickness; Insulin resistance

胰岛素抵抗被认为是2型糖尿病及动脉粥样硬化(AS)的共同危险因素[1]。对数化的稳态模型胰岛素抵抗评估指数（lnHOMAIR）可以作为胰岛素抵抗的可靠指标[2]。颈动脉内膜中层厚度(IMT)增厚作为早期动脉粥样硬化的表现，已越来越引起人们的关注。本研究对2型糖尿病病人颈动脉IMT增厚进行了检测，旨在了解其与胰岛素抵抗和高胰岛素血症的关系， 并探讨其发生机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择符合世界卫生组织1999年诊断标准的2型糖尿病病人152例，均排除酮症酸中毒等糖尿病急症，心、肝、肾功能在正常范围，采用口服抗糖尿病药物治疗，近1个月内未使用胰岛素。采用多普勒超声探测152例病人双侧颈总动脉，排除存在动脉斑块形成者56例，入选病人96例，根据IMT分为IMT正常组(IMT≤0.9 mm)47例和IMT增厚组（0.9 mm

1.2 方法

1.2.1 IMT的测定 用惠普公司5500多普勒超声仪（7.5 Hz探头）测定，病人取仰卧位， 纵向超声显像可见相对低回声分隔的两条平行亮线，两线间距离即颈动脉IMT，取左、右颈动脉窦下1 cm处分别测量3次，取其均值即为平均颈总动脉IMT[3]。IMT＞0.9 mm为增厚，动脉壁局限回声结构突出管腔，厚度≥1.3 mm定义为斑块形成[4]。

1.2.2 生化指标测定 病人于入院当天20：00时开始禁食，次日6：00时空腹静卧抽取静脉血，离心提取血清，采用日本Olympus 640生化仪测定空腹血糖(FPG)、超敏C反应蛋白（hsCPR）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDLC）、低密度脂蛋白（LDLC）、纤维蛋白原（FIB）水平；采用美国雅培公司Axsymplus发光仪测定受试者空腹血清胰岛素(FINS)水平。计算稳态模型胰岛素抵抗评估指数（HOMAIR）。HOMAIR =（FPG×FINS）/22.5[5]。

1.3 统计学处理

结果以±s表示。HOMAIR因呈偏态分布，作对数转换后以±s表示。两样本均数比较采用t检验，相关分析采用多元逐步回归分析。

2 结果

IMT正常组、IMT增厚组病人年龄、血压、BMI和性别比例等基本资料比较，差异无显著意义（P>0.05）。见表1。

表1 两组病人一般资料比较（略）

IMT增厚组的lnHOMAIR、FINS、hsCRP和LDLC均明显高于IMT正常组，差异有统计学意义（t=2.260～3.444，P

多元逐步回归分析表明，以IMT作为应变量，年龄、FINS、FPG、lnHOMAIR、TC、TG、HDLC、LDLC、hsCRP、SBP、DBP作为变量，用多元逐步回归筛选变量，进入方程的变量为年龄、FINS、lnHOMAIR，标准化回归系数分别为0.011、0.105、0.181（P

表2 两组病人生化指标和胰岛素抵抗指标比较（略）

与IMT正常组比较，*t=2.527、2.260、3.444，P

表3 2型糖尿病颈动脉IMT作为因变量的多元逐步回归分析结果（略）

3 讨论

胰岛素抵抗在众多血管疾病的危险因素中处于核心地位，是2型糖尿病和动脉粥样硬化（AS）的共同发病基础。2型糖尿病病人多有胰岛素抵抗及高胰岛素血症。高胰岛素血症可刺激动脉平滑肌增生并由中层向内皮移位，促进动脉粥样硬化形成；同时，高胰岛素血症可刺激结缔组织增生及各种生长因子在动脉壁沉积，促进内皮细胞中内皮素1基因表达，增加内皮素受体数量和内皮素的缩血管作用。胰岛素抵抗状态下机体分泌过多的免疫原性胰岛素，使血浆纤溶酶原激活物抑制因子1 mRNA表达增加，促进血液凝固，降低纤溶酶活性，导致血管病变[6～8]。胰岛素抵抗还可以使机体处于一种亚临床的、低程度的应激状态，缓慢、轻微地启动机体的免疫系统，或促使某些细胞因子直接作用于免疫系统，从而诱发机体出现持续、轻微的慢性炎症，引起动脉粥样硬化[9]。胰岛素抵抗和高胰岛素血症促进了动脉粥样硬化的发展，并与其他因素相互作用形成恶性循环[10，11]。作为动态定量观察早期动脉粥样硬化进展或消退的指标，颈动脉IMT较斑块更有价值[12]。IMT的诊断标准不一，《欧洲高血压指南》中将IMT＞0.9 mm作为动脉粥样硬化靶器官损害的标志。

本文结果显示，2型糖尿病病人颈动脉IMT增厚主要与年龄、FINS和lnHOMAIR有关。IMT增厚组FINS、InHOMAIR高于IMT正常组，提示胰岛素抵抗和代偿性高胰岛素血症是2型糖尿病病人早期动脉粥样硬化的重要因素。另外，IMT增厚组HDL、LDL及hsCRP与IMT正常组有显著差异，提示脂质代谢紊乱及炎症可能与2型糖尿病病人早期动脉粥样硬化有关。

【参考文献】

[1]BARZILAY J I， ABRAHAM L， HECKBERT S R， et al. The relation of markers of inflammation to the development of glucose disorders in the elderly:the cardiovascular health study[J]. Diabetes， 2001，50:23842349.

[2]LANSANG M C， WILLIAMS G H， CARRLLL J S. Correlation between the glucose clamp technique and the homeostasis model assessment in hypertension[J]. Am J Hypertens， 2001，14(1):5153.

[3]许竹梅，赵值，范平. 超声测量颈动脉内膜中层厚度与颈动脉斑块的关系[J]. 中国动脉硬化杂志， 2000，8:4648．

[4]O’LEARY D H， POLAK J F， KRONMAL R A， et al. Carotid artery intima and media thickness as a risk factor for myocardial infarction and strokein older adults[J]. N Engl J Med， 1999，340:3442.

[5]HAFFNER S M， MYKKANEN L， FESTA A， et al. Insulinresistant prediabetic subjects have more atherogenic risk factors than insulinsensitive prediabetic subjects[J]. Circulation， 2000，101:975980.

[6]曹平良，葛郁芝，彭乐，等. 代谢综合征与心血管疾病的最新研究进展[J]. 临床心血管病杂志， 2005，21(7):440442.

[7]ANDERER P， SEML ITSCH H V， SAL ETU B， et al. Effect of hormone replacement therapy on perceptual and cognitive event related potentials in menopausal insomnia[J]. Psychoneuroendocrinology， 2003，28:419445.

[8]DAVID F， JAMES H. Effects of progestin dose and time since menopause on endometrial bleeding with continuous combined hormone replacement therapy[J]. Obstet Gynecol， 2002，95:1718.

[9]TRAYHURN P， WOOD I S， ADIPOKINES. Inflammation and the pleiotropic role of white adipose tissue[J]. Br J Nutr， 2004，92:347355.

[10]丁建琦. 脑梗死病人胰岛素抵抗与血脂含量的关系[J]. 青岛大学医学院学报， 2003，39:389391.

[11]姚民秀，李盈，商永芳，等. 2型糖尿病并高尿酸血症与代谢综合征相关性的初步观察[J]. 齐鲁医学杂志， 2007，22:394396.

赠内人范文第5篇

关键词：内皮前体细胞；分离；培养；诱导；表面标志; 流式细胞仪

In vitro phenotype maintenance and proliferation of induced endothelial progenitor cells derived from human peripheral blood

【Abstract】Background and Objective：The present aim is to study the isolation，inducement and identification of endothelial progenitor cells（EPCs） from peripheral blood mononuclear cells（PBMCs），and to probe into its biological activity in vitro for the angiogenesistherapy. Methods：Total mononuclear cells (MNC) were isolated from peripheral blood by Ficoll density gradient centrifugation, and then the cells were plated on fibronectin coated culture dishes，and cultured in EGM-2 MV，Which contains VEGF，bFGF，IGF，EGF. After incubation for 4days, the non-adherent cells were removed, and fresh culture medium was applied. At the same time， adherent cells which were double positive for Dil-AC-LDL-up take and lectin binding by direct fluorescent staining were observed under fluorescent and confocal laser microscope respectively .On the seventh days, Adherent cells were further identified by demonstrating the expression of CD34, and CD31 with flow cytometry.. Results：After 1d in culture , shape changed cells were observed. After 2d in culture, large cell clusters appeared.After 3d in culture, around these clusters some adherent cells were observed. After incubation for 4 days, attached cells grewto short spindle-shaped and double positive staining for Dil-AC-LDL and UEA-1 can be observed under a fluorescent microscope. On the seventh day，FACS analysis ，the adherent cells were positive for CD34 （14.13±2.79）% and CD31（54.67±3.44）%. Conclusion：EPCs exist in the peripheral blood，and can be differentiated into mature endothelial cells（ ECs） by the stimulation of VEGF，bFGF， IGF and EGF. EPCs can be an appropriate way of the angiogenesis therapy.

[Key word] EPCs；isolation；culture; inducement；surface markers

1997年Asahara 等[1]第一个描述了人外周血存在内皮前体。随后的研究表明，来自骨髓的循环内皮前体细胞（circulating endothelial progenitors CEPs）迁移到生理或病理条件下的新血管形成位点并原位分化成内皮细胞，且能快速和及时地修复损伤的血管[2-4]。血管的损伤可

诱导化学因子，如VEGF、bFGF的释放，促进骨髓来源的EPCs快速募集到损伤位点[5，6]。本文通过人外周血EPCs的分离和培养，探讨了其体外诱导分化的生长增殖规律和特性，以期作为病理条件下提供血管新生潜在源泉的治疗手段。

1 材料与方法

1.1材料:

健康成年人新鲜的外周血20ml（所有健康者都没有CAD倾向）淋巴细胞分离液（Ficoll液，天津市川页生化制品有限公司）；内皮生长介质EGM-2 MV（Clonetics）；人纤连蛋白（HumanFibronectin.Chemicon）；PE标记的CD34单克隆抗体（QIAGEN）；FITC标记的CD31单克隆抗体（DIACLONE）；PE标记的KDR单克隆抗体（Santa Cruz BIOtechnology，InC）；Dil标记的乙酰化的低密度脂蛋白（Dil-AC-LDL Biomedical Technologies Inc）；FITC标记的荆豆凝集素-1（FITC-UEA-1 Vector Laboratories Inc）； 倒置显微镜(OLYMPUS CK2)；荧光显微镜(OLYMPUS BX50))；共聚焦激光扫描显微镜（TCS-SP2）。

1.2.方法：

1.2.1 外周血单个核细胞的分离与培养：Ficoll液密度梯度离心提取单个核细胞，接种在人纤连蛋白（5ug/cm2）包被的24孔培养板上，置于37℃、5%的CO2、饱和湿度的CO2培养箱中培养。细胞培养4d后,去除未附着细胞,继续培养黏附细胞至第7d，倒置显微镜观察其生长情况。

1.2.2 EPCs的染色：单个核细胞培养4d后,去除未附着细胞，向培养孔中加入Dil-AC-LDL（2.4ug/ml），37℃避光孵育2h，加入2%的多聚甲醛固定20min,37℃的PBS冲洗3次,每次5min，再与FITC-UEA-1（10ug/ml）一起避光孵育1h,PBS冲洗3次，荧光显微镜观察细胞，每孔多个视野计数。

1.2.3 流式细胞仪检测：单个核细胞培养第7d，用0.25%的胰蛋白酶/0.02%EDTA，收集5×105个黏附细胞分别与抗人的单克隆抗体：PE标记的CD34、FITC标记的CD31，PE标记的KDR在室温孵育30min，以同种型单克隆抗体作为阴性对照，PBS冲洗，4%的多聚甲醛固定，流式细胞仪检测。

2 结果

2.1 单个核细胞的分离与培养：离心后，单个核细胞密度与分层液密度相当，密集在血浆层和分层液的界面中，呈白膜状。单个核细胞在铺有人纤连蛋白以及加入生长刺激因子的EGM-2MV培养基上培养,倒置显微镜下观察细胞的形态，1d后，一些细胞变形；2d后, 可见大量的细胞团形成，3d后,细胞团周围一些贴壁细胞开始出现;4d后去除未附着细胞，细胞贴壁生长，内皮细胞呈扁平的短梭形或多角形，大小均匀，胞核清晰，呈卵圆，有核的区域比无核的区域突出。在5d时生长最快，梭形细胞的大小和数量都明显增加，细胞呈单层鹅卵石样或铺路石样镶嵌状排列生长。大约在培养的第7d，可见长梭形细胞以细胞团为中心呈放射状生长,同时,也可见散在的长梭形细胞。（如图Fig1）。

2.2 EPCs的染色：单个核细胞培养4d后，黏附细胞与Dil-AC-LDL一起孵育，再与FITC-UEA-1一起孵育，荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜下观察，Dil-AC-LDL呈红色荧光,FITC-UEA-1呈绿色荧光,出现这种双阳性荧光的细胞即被鉴定为EPCs（如图Fig2）

2.3 流式细胞仪检测：单个核细胞培养第7d ，FACS分析，CD34和CD31阳性细胞阳性率分别为 （14.13±2.79）%、（54.67±3.44）%。（如图Fig3）

3 讨论：

从成年人的骨髓中分离到的EPCs为CD133+/CD34+/KDR+，成人外周循环血中，更成熟分化的内皮前体细胞（CEPs），其CD133表达降低，成熟黏附的ECs为CD133-/KDR+，很明显，EPCs在分化过程中失去了CD133的表达[2]。因此外周循环血中比CEPs更成熟的内皮前体是CD34+/ KDR+/CD31+/VE-cad+，并开始表达血管血友病因子vWF。目前认为CD133是区别内皮前体细胞与成熟内皮细胞的主要标志[2，7]，成人的外周血可作为EPCs的一个源泉，从外周血获取EPCs是最快捷和方便的方法，而外周血中EPCs的数量相当有限，因此，外周血中EPCs的分离、体外诱导与分化，以及适当的培养条件的探索是必要的。在本研究中，我们可以看到EPCs从外周血中被分离出来，在铺有人纤连蛋白的24孔培养板中黏附、增殖，并且分化在有VEGF、bFGF、IGF-1和EGF存在的培养液中短时间内完成。

单个核细胞培养7d后，FACS分析，CD34、CD31、KDR都有表达，说明单个核细胞在EGM-2 MV培养液中，经过7d的培养，诱导分化出了EPCs，MNCs在人纤连蛋白上培养4d后，去除未附着细胞,镜下可见大量的细胞团形成。在第5d时生长最快,梭形细胞的大小与数目都增加。大约在培养第7天,可见长梭形细胞以细胞团为中心呈放射状生长,细胞团中心为圆形细胞,周边为梭形细胞。培养中出现形态特征与胚胎发育时期血岛相类似的细胞团。呈梭形的内皮样的黏附细胞与Dil-AC-LDL一起孵育，再与FITC-UEA-1一起孵育，荧光显微镜下观察，Dil-AC-LDL呈红色荧光, FITC标记的UEA-1呈绿色荧光,双阳性荧光（黄色）的细胞即被鉴定为EPCs。

在细胞的迁移试验中[8]，MNCs培养第7d，用胰酶收集2×104个贴壁细胞,悬浮在50μl培养液注入上室,然后将25μl培养液和VEGF (50ng/ml)加入改良的Boyden小室的下室,37℃培养24h,清去滤膜上面的未迁移的细胞,用甲醛固定，Giemsa 染色,显微镜下3个随机选择视野(×400),计数迁移到下层的细胞，迁移率为48.34±1.34%。细胞的迁移试验表明，EPCs对应于VEGF具有迁移功能。目前认为VEGF是最有效的动员EPCs的外源性动员剂，能促进内皮细胞迁移，并促使其分裂、增殖和分化，从而促进新生血管的修复与生成。

本研究是从单个核细胞诱导EPCs，进行的是EPCs的短期培养，通过EPCs体外生长增殖规律的观察，旨在探讨EPCs体外诱导分化的方法，以期为EPCs的功能研究及血管生成的细胞治疗打下基础。有资料表明[4]，该培养诱导的EPCs很大一部分来源于CD14+单核细胞的转分化，在长期培养（多于2周），EPCs来源于有惊人的增殖能力的内皮克隆，作为对造，单核的EPCs的增殖较缓慢，并且在2-3周内死去。但是两种来源的（CD14-和单核CD14+细胞）细胞治疗潜能在体内都有效：两种亚群的细胞在小鼠的后肢缺血模型中都显示能渗入到血管结构中，并明显地增强了新血管化。

Fig1：倒置显微镜下,EPCs的体外生长增殖的动态观察（×200）。

（A）刚分离接种1d的MNCs 。（B）培养2d，有细胞团形成,一些细胞开始变形。

（C）培养3-4d，细胞团周围有一些贴壁细胞出现。(D) 培养5d, 贴壁细胞成

短梭形。(E) 培养6d，贴壁细胞明显增加。(F) 培养7d，贴壁细胞为长梭形。

Fig2：M NCs培养第5d，荧光显微镜下观察摄取Dil-AC-LDL（红色）、

联结FITC-UEA-1（绿色），的双阳性的黏附细胞。

Fig 3：MNCs在铺有人纤连蛋白以及EGM-2MV培养基上培养第7d，FACS分析,

CD34 、CD31阳性细胞率分别为：（14.13±2.79）%、（54.67±3.44）%。

A：CD34+细胞的阴性对照。B：培养7d后的CD34+细胞。C.CD31+细胞的阴性

对照。D.培养7d后的CD31+细胞。

参考文献

1 Asahara T，Murohara T，Sullivan A，et al. Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis[J].Science，1997，275(5302)：964-967.

2 Masuda H and Asahara T.Post-natal endothelial progenitor cells for neovascularization in tissue regeneration [J].Cardiovascular Research，2003,58(2):390-398.

3 Iwami Y, Masuda H,Asahara T. Endothelial progenitor cells:past, state of the art, and future[J]. Cell.Mol.Med,2004,8（4）：488-497.

4 Zammaretti P and Zisch AH. Adult ‘endothelial progenitor cells’:renewing vasculature[J].The International Journal of Biochemistry and Cell Biology，2005，37(3)：493-503.

5 Asahara T，Takahashi T，Masuda H，et al. VEGF contributes to postnatal progenitor cells[J].EMBO J,1999，18(14):3964-3972.

6 Rabbany SY,Heissig B,Hattori B,et al. Molecular pathways regulating mobilization of marrow-derived stem cells for tissue revascularization [J].TRENDS in Molecular Medicine，2003，9（3）：109-117.