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【关键词】 hiv?1; hiv血清阴性; t淋巴细胞亚群
study on the expression and activation of t lymphocyte subsets in highly exposed hiv?1 but persistently seronegative individuals by sexual transmission wang yue?yun1,2, wang xiao?hui3, cheng jin?quan3, peng ji4, chen lin3, shi xiang?dong3, nie shao?fa1. 1.department of epidemiology and statistics, school of public health, tongji medical college, huazhong university of science and technology, wuhan 430030, china; 2.medical college of yangtze university, jingzhou 434000, china; 3.shenzhen center for disease control and prevention, shenzhen 518020, china; 4.shenzhen municipal chronic disease hospital, shenzhen 518020, china
【abstract】 objective to understand the distribution and immune activation status of t lymphocyte subsets in highly exposed hiv?1 and persistently seronegative (heps) individuals, and explore the immunologic mechanism of non?susceptibility to hiv?1 by sexual transmission in heps individuals. methods fresh peripheral venous blood was collected from 37 heps, 65 hiv?1?infected individuals and 128 healthy controls. four colors flow cytometry was used to detect the distribution of t lymphocyte subsets and expression of hla?dr, cd38 on cd4+ t cells. results cd4+ counts, cd4/cd8 ratio were higher in heps individuals and healthy controls than those in hiv?1?infected individuals (p<0.001), but cd8+ counts were significantly lower in the two groups than those in hiv?1?infected individuals (p<0.001); percentages of cd38+/cd4+, hla?dr+ cd38+/cd4+ were significantly lower in heps and healthy controls than those in hiv?1?infected individuals (p<0.001). meanwhile, the percentage of hla?dr+ cd38+/cd4+ in heps individuals was lower than that in healthy controls (p<0.05). the percentage of hla?dr+/cd4+ in heps individuals was significantly lower than that in hiv?1?infected individuals and healthy controls (p<0.001). conclusions the expression of activation antigen marker hla?dr on cd4+ t cells is at a low level, which probably is correlated with non?susceptibility to hiv?1 in heps individuals by sexual transmission.
【key words】 hiv?1; hiv seronegativity; t?lymphocyte subsets
我国新发现hiv感染人数呈现明显上升趋势,近几年艾滋病疫情每年以30%左右的幅度增长,阻止艾滋病在我国蔓延的形势十分严峻。传染病预防最有效的措施是对人群接种疫苗,但艾滋病疫苗研发虽然投入巨大,短期似乎看不到很大希望,其中一个重要原因就是对hiv对人体免疫系统相互作用的规律等问题缺乏真正意义上的了解[1]。近年来,由于艾滋病疫情控制效果远未达到预期目标,艾滋病疫苗研究亦未取得明显进展,一些学者开始将注意力集中到两类特殊人群,一类人群是较高频率暴露于hiv但未感染,hiv抗体呈阴性反应,该类人群被称为hiv暴露后未感染者(hiv?exposed seronegative subjects,esns or es人群)[2]或hiv高暴露持续血清阴性者(highly exposed and persistently seronegative, heps人群)[3];另一类人群为感染hiv后长期不进展者(long?term no?progressors,ltnp)。目前,对hiv不易感性的影响因素和机理尚不明确,国内外对heps人群不易感hiv的研究并不多见。
经性接触传播是目前全球主要的hiv?1感染传播途径。全球大约70%~80%感染者是通过性接触感染上hiv?1,其中异性间性接触传播占70%以上,而男性同性恋性接触传播占5%~10%。近年来,随着我国hiv感染人群由高危人群向普通人群传播的流行趋势的出现,性接触传播hiv起了较重要的影响作用。
人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,hiv)主要侵犯在免疫调节中起重要作用的cd4+ t淋巴细胞,引起其数量减少和功能缺陷,使机体免疫功能低下,导致各种机会感染和肿瘤的发生,最后引发获得性免疫缺陷综合征(aids,艾滋病)[4,5]。
cd8+ t细胞是特异性细胞免疫的效应细胞,通过分泌各种细胞因子,杀死被病毒感染的靶细胞,它是机体抗hiv最主要的免疫细胞,随着hiv病毒量的增加,cd8+ t细胞增加,cd4+ t细胞减少,引起cd4/cd8比例倒置。
人类主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,mhc)分布在人体所有核细胞的表面,但由于该抗原首先在白细胞表面被发现,故被称为人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,hla),hla?dr是hla?ii类分子的重要抗原之一。正常情况下,hla?dr仅分布于b细胞、活化的t细胞、巨噬细胞、树突状细胞和等[6]。hla?dr在免疫应答中的主要作用是与t细胞表面的cd4分子和/或抗原结合,促进抗原传递,hla?dr表达是t细胞活化的标志[7]。
人的cd38分子是分子量为45kd的单链跨膜糖蛋白,胞外决定簇(羧基端)为功能区,是一种多功能酶,在细胞的信号转导中起作用,其细胞外功能区上点突变可抑制信号转导。在成人,cd38蛋白主要表达于大多数的nk细胞、t细胞、b细胞和单核巨噬细胞。cd38分子通过对激活信号的转导,促进t细胞激活,因而,cd38分子可作为细胞活化的标志[8]。
hiv感染者免疫系统活化使得淋巴细胞表面标志活化的抗原表达发生改变,其中hla?dr的上调即为淋巴细胞活化的主要标志之一[9~11]。hiv?1感染导致淋巴细胞活化使外周血t淋巴细胞表面活化标志物hla?dr、cd38等表达发生改变。其中hla?dr的增高与t细胞功能缺失相关,且随疾病进展呈线性增高[12]。cd4+ t细胞作为hiv感染的主要靶细胞,其活化性增加为hiv?1的复制创造了有利的环境[9]。
本文将选择性传播途径heps人群作为研究对象,选择经性传播途径hiv+人群及无任何高危行为暴露的hc人群作为对照,了解经性传播途径heps人群淋巴细胞亚群表达及其免疫活化状态,探讨经性传播途径高暴露hiv不易感的免疫基础,对识别hiv?1感染的高危人群,保护易感者,以及艾滋病的预防控制、临床治疗和疫苗研究等具有重要的理论和现实意义。
1 材料和方法
1.1 研究对象 本文选择的37例经性传播途径高暴露hiv?1持续血清阴性者来自于hiv?1阳性感染者的配偶或固定性伴,在没有采取安全套保护措施发生达半年以上,每周频率约2~3次及以上,且最后一次无保护性性接触12周后,hiv抗体检测持续阴性,其中男性20例,女性17例,平均年龄(33.1±7.4)岁; hiv?1阳性感染者65例,系经性传播途径感染hiv?1,其中男性35例,女性30例,平均年龄(31.6±5.6)岁;128例健康对照人群无任何hiv?1高危行为暴露史,并排除hiv、hbv、hcv及梅毒感染,其中男性69例,女性59例,平均年龄(30.9±6.2)岁;该三类人群在性别和年龄构成方面差异无统计学意义,组间均衡性较好。三类人群来自于深圳市疾病预防控制中心2006年1月~2007年12月的艾滋病自愿咨询检测人群和常规健康体检人群,均填写知情同意书。
1.2 主要设备及试剂 主要实验设备及试剂均购自becton dickinson公司,包括流式细胞仪(facs?calibur);edta抗凝管;鞘液(coulter sheath liquid);cd4绝对计数管;溶血素及下列各种抗体:cd4/cd8/cd3抗体,fitc标记的抗cd4、抗cd8,pe标记的抗cd38单抗及percp标记的抗cd3、apc标记的抗hla?dr单抗。
1.3 方法 cd4/cd8/cd3绝对值计数,依据1997年美国疾病预防控制中心关于hiv感染者cd4+ t细胞检测指导方法[4]:采用微量全血直接双标记免疫荧光染色,edta(k3)抗凝管收集外周静脉血。加相应的荧光标记抗体各20 μl于50 μl全血中,室温避光孵育15 min。加入红细胞裂解液450 μl,震荡混匀后室温避光孵育15 min直接上机观察,应用bd公司multiset软件检测自动分析。
cd38+/cd4+、hla?dr+cd38+/cd4+细胞百分比分析:染色、溶血步骤同上,溶血孵育15 min后,800 r/min离心5 min,去上清,加入鞘液2 ml振荡、混匀,800 r/min离心5 min后去上清。加入鞘液500 μl后上机检测。以cd3?percp、侧向散射光(ssc)确定t淋巴细胞群,以cd4?apc区分出cd4+ t淋巴细胞和cd8+ t淋巴细胞。再以cd38+?pe、hla?dr+?apc进行分析。应用bd公司cellquest软件对进行检测与分析。
1.4 统计学处理 cd3、cd4、cd8绝对数直接以均数±标准差表示;cd4/cd8比值、cd38+/cd4+、hla?dr+cd38+/cd4+等百分比经平方根反正弦变换后以均数±标准差表示,三组人群间均数比较采用方差分析,p<0.05为有统计学意义,所有统计处理采用spss 13.0专业统计软件完成。
2 结果
2.1 不同人群组外周血t淋巴细胞亚群表达的比较 heps人群cd3绝对值计数与hiv+人群和hc人群差异无统计学意义,但hiv+人群cd3绝对值计数低于hc人群;heps人群和hc人群的cd4、cd4/cd8比值均高于hiv+人群,见表1。表1 不同人群组间外周血t淋巴细胞亚群的数量或比值的比较
2.2 不同人群组cd38+/cd4+、hla?dr+/cd4+、hla?dr+ cd38+/cd4+细胞百分比(%)比较 heps人群和hc人群的cd38+/cd4+百分比低于hiv+人群,但heps人群和hc人群的cd38+/cd4+百分比差异无统计学意义;heps人群的hla?dr+/cd4+百分比低于hiv+人群和hc人群;heps人群和hc人群的hla?dr+ cd38+/cd4+百分比低于hiv+人群,同时heps人群的hla?dr+ cd38+/cd4+百分比低于hc人群,见表2。表2 不同人群组cd38+/cd4+、hla?dr+/cd4+、hla?dr+cd38+/cd4+细胞百分比(%)
3 讨论
本研究结果显示,heps人群和hc人群的cd4+ t细胞、cd4+/cd8+比值均高于hiv+人群(p<0.001),cd8+ t细胞低于hiv+人群(p<0.001);heps人群和hc人群的cd4+ t细胞、cd8+ t细胞和cd4/cd8比值差异无统计学意义,说明heps人群与hc人群比较,在淋巴细胞亚群表达方面并无特别之处。
heps人群和hc人群的cd38+/cd4+、hla?dr+/cd4+、hla?dr+ cd38+/cd4+百分比均低于hiv+人群,机体感染hiv?1后,cd4+ t细胞的活化性增加,与有关报道一致[9,10]。heps人群的hla?dr+/cd4+及hla?dr+ cd38+/cd4+百分比除了低于hiv+人群外,还低于hc人群,这也许意味着heps人群经性传播途径高暴露hiv?1持续血清阴性,是和其hla?dr+/cd4+、hla?dr+ cd38+/cd4+的表达处于显著性低水平状态有着密切的联系,进而对hiv?1呈现不易感状态。关于heps人群hla?dr+/cd4+、hla?dr+ cd38+/cd4+的表达处于显著性低水平状态的原因目前尚不清楚,将有待今后进一步深入研究。
综上所述,本研究中经性传播途径高暴露hiv?1持续血清阴性者,即heps人群对hiv?1的不易感性可能与其t淋巴细胞表面标志活化抗原表达水平处于较稳定的低水平状态有关。
【参考文献】
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“性感”服装占满6岁伢衣柜
暑期一个多月来,6岁小女生甜甜,每天都会听到妈妈与奶奶的争吵声,她们争吵内容只有一个:到底能不能让甜甜穿得太暴露?原来,吊带、抹胸、提臀裤、露背装、露脐装……这些成人款的“性感”服装,占满了甜甜的专属衣柜。
对此,华中师范大学社会学家梅志罡教授认为,孩子追求“早熟”的童装,可能会扭曲儿童审美观。为孩子挑选夏装,应该以美观大方、舒适健康为主,要符合儿童心理特征和审美意识。
从甜甜5岁时起,家住武胜路的徐女士就开始为女儿精心包装,打扮得像个小大人。甜甜现在6岁了,她的专属衣柜被吊带、抹胸、提臀裤、露背装……这些成人款的“性感”服装占满。而且这些衣服的价格都不低,最便宜的提臀裤也要200多元,而一件品牌吊带裙则高达1000多元。
对于漂亮的衣服,甜甜非常喜欢,这个夏天,她每天穿着暴露装在外玩耍,小区里的几个同龄小男生都成了跟屁虫,每天与甜甜形影不离。
如此情形,让奶奶陈婆婆看了直皱眉。“这么小就穿成这样子,长大还得了?”为此,陈婆婆每天都要与媳妇徐女士沟通四五次,甚至为此争吵,但都没有丝毫成效。
徐女士表示,甜甜班上许多同学都这样穿,“婆婆思想太保守,现在都什么年代了,何必大惊小怪,成人化的着装可以让孩子更漂亮,更自信。”
【调查】
约两成小女生着装暴露
周末两天,记者在江汉路、市青少年宫、王家湾摩尔城等儿童较集中的地方,观察了80位身高1米以下的小女孩,其中18位小女生打扮时髦,或露背装、或吊带装、或紧身短裤……
在王家湾摩尔城门前,送女儿上舞蹈课的王女士穿着一件低胸吊带衫配热裤,6岁的女儿则身着一条后背的吊带裙。
对女儿的“性感”穿着,王女士不以为然,“女儿幼儿园的同学都这样穿,如果女儿穿得不如别人‘体面’,肯定对孩子交朋友有影响,也显得当家长的没面子。”
记者随机采访了崇仁路幼儿园、汉阳钟家村幼儿园等多所幼儿园的负责人。一家不愿透露姓名的幼儿园负责人称,夏天穿着吊带、抹胸、露背的小女孩越来越多,“穿着暴露的小女孩大约能占到两成,而且越到大班越明显,个别孩子还出现严重的攀比心理。”
据介绍,现在幼儿园不提倡穿园服,以免抹杀孩子的个性发展,但一些家长购买的衣服,显然不适合孩子们日常穿着。有的童装和成人服装一样性感,为了显露曲线,都是紧紧地裹在身上,使孩子很不方便做出摆动幅度较大的动作。
对此,记者走访了武广、大洋等多个销售童装的商场。一位销售人员介绍,今年吊带裙、超短裙特别流行,购买者几乎都是80后妈妈,而且孩子们也嫌弃卡通图案的童装太“孩子气”。
多个童装品牌的湖北福童童装有限公司负责人刘先生说,小孩儿的衣服,其实就是做给大人看的。
九成老人反对孩子衣着暴露
年轻的妈妈,都主张把孩子打扮得时尚成熟。但在奶奶和外婆们的眼中,对此做法很难认同。
昨天在武广一童装专柜,陪女儿、外孙女一起买衣服的王老太,就坚决反对4岁的外孙女穿得太暴露。王老太说:“有的裙子短得刚盖得住内裤,有的吊带都露出胸了,虽然孩子还没有形成性别意识,但终归不雅。”在她的坚持下,女儿只好买了一款有领有袖的裙子。
记者随机采访了20位奶奶和外婆。其中,18位老人表示,不支持孩子从小就穿得太成熟。一位65岁退休老师赵婆婆说,孩子的审美和价值观应该从小培养,让她们穿得过分“暴露”,家长看似有“面子”,其实剥夺了孩子的“童真”。
【专家】
“早熟”童装扭曲儿童审美观
“儿童的衣着不宜过于暴露,尤其在夏季,要穿透气、柔软面料的衣服,最好是有防护效果的童装。”省妇幼保健院儿保科主任医师杨勤说,低龄儿童皮肤娇嫩,对太阳光线的防御能力差,穿太过“暴露”的服装,会对皮肤造成伤害。
2、肩膀宽的女孩最好也不要穿挂脖的衣服,挂脖的衣服是将你的肩膀完全暴露出来的,会比一字领的衣服更加暴露肩膀宽的缺点。
3、肩膀宽的女孩子在选择衣服的时候可以尽量要弱化肩膀的存在感,所以不要选择一些在肩膀上有设计的服饰。
4、肩膀宽的女孩在选择衣服的时候可以选择肩膀处有面料的衣服,搭配上高腰修身的设计还可以凸显自己的身材优势。
5、上身服装以合身为主。颜色选择以收缩色为主,冷色和偏蓝色印象的其他颜色;面料多考虑挺扩不太服帖的。可以穿着成两件套式的服装,外衫敞开穿着,里外的服装色彩成一定的对比,采用视错觉的方法产生纵向的拉升的效果,会显得瘦些窄些。
6、下身服装不能太贴、太紧,避免有弹力纤维面料,以平衡较宽的上半身。可以大胆选择自己喜欢的颜色。但尽量选择简洁样式裁剪的裙和裤。身高过1.6m,裙长及膝或过膝都没问题。
1、面试适宜化清爽自然、明快轻松的淡妆,会使面色看起来红润、朝气蓬勃,显得人更有亲和力!勿浓妆艳抹。
2、发型要中规中矩,如果是长头发最好束起来,如果散开一定要干净,最好不要烫发。 3、不宜擦拭过多的香水。
4、不要染指甲,指甲一定要保持整洁。
饰品:
1、结婚戒指、订婚戒指总是合适的,但要避免戴好几个戒指。同时,小巧的耳环十分令人接受。身体的其他部位千万不可佩带珠宝。
2、面试时带公文包还是大钱包呢 可以带一个,不能两个都带。公文包要比钱包更显威信。
3、戴一个好项链来突出你的套装没有什么不对的,但不要戴假珍珠或者华而不实的珠宝。手镯也是这样。不要佩戴刻有自己姓名的的手镯和珠宝。许多考官发现的手镯太"吸引人"或太幼稚。
衣着:
1、在选择衣服上,套装和连衣裙是比较正式的。女式套装在选配方面较男士西装更为讲究,也更为繁复。但不论什么季节和地区,如果只买一件套装,深色套装是最稳妥、最保险的。
2、过短的裙子、暴露的上衣出席正式场合会让人觉得不礼貌。裙装长度应在膝盖左右或以下,太短有失庄重。
3、在夏天里,一些女士都会穿着丝袜,不可避免的是丝袜很容易剐破,所以在面试时要多带一双,避免穿着破洞的丝袜的尴尬。
心里,无端地悲凉起来。为她。
她,该是最早的谋女郎了。凭一部《红高粱》获国际大奖,此后拍片无数。但在我的记忆里,始终记得她更早的一部片子:《古今大战秦俑情》,在里面,她扮演时空轮回中那个秦俑心爱的女子,而张艺谋扮演那个复活的兵马俑。现在想来,这部片子的情节太过简单老套,但结尾的一个镜头却让我记忆深刻:她穿着白色的宽袍大袖,衣袂飞扬奔向熊熊烈火。火光映衬着她的脸与身体,回眸之际,几千年的爱恨情仇,尽在眼神流转之间。那一刻的美,只有她才能体现,也只有张艺谋才能用自己独特的视角来发现,来拍摄。
她与张艺谋的感情在很长一段时间里极为暧昧又极为扑朔迷离。终于,劳燕分飞。但这段感情,却分别成就了他与她的事业。后来,她嫁了,英皇烟草公司的副总裁,听起来名头挺大,可却不是什么真正的大款有钱人,因为金融危机,副总裁居然也下岗了。本想洗尽铅华做个温柔体贴小女人的她,不得不再次出山,挣钱养家,为此,她打消了生孩子的愿望。