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进口啤酒的天然优势
来自宁波保税区海关的数据显示,2013年1至4月,保税区共进口啤酒19.7万升,同比增长了26.9倍。
海关的数据直接的反应就是终端销售。从《酒世界》记者在多个城市观察并反馈的综合信息来看,商超在进口啤酒的渠道中已经越来越重要,越来越多的进口啤酒被摆在了重要的位置,而销售情况也非常可观。
“高档啤酒也会越来越受到消费者的青睐。”啤酒营销专家方刚对记者表示,近几年,随着居民收入和消费者生活水平的持续提高,以及消费者观念和需求的变化,未来我国的啤酒消费还有很大的上升空间。
“国际品牌在高端产品领域具有传统优势,”方刚认为,近年来,国内食品质量安全问题频发,使得不少具备消费能力的中产阶级家庭开始选择进口食品,其中包括进口葡萄酒和进口啤酒——非官方的数据显示,在一线城市,进口啤酒市场已经开始占到三成左右的市场份额。
“在进口葡萄酒暂时处于低谷的情况下,进口啤酒可能会迎来爆发式的增长。”李博认为,促成进口啤酒高速增长的要素有多种,除了外在因素,啤酒行业自身渠道发展的变化趋势也导致进口啤酒的增长。
新渠道关注进口啤酒
我国啤酒消费主要可分为两种,即现饮消费和非现饮消费。其中,现饮消费所占整个啤酒销量的60%,是重中之重,也是啤酒企业争夺的重点。近年来,现饮市场费用越来越高,逐步沦为大企业、大品牌的天下,而一些有特色的中高档进口啤酒商开始瞄准非现饮市场进行发力。这些厂家以桶装和易拉罐装啤酒为主,主打家庭消费,注重产品品质和消费者感受,逐步培养了一批自己的忠实顾客。
非现饮市场以前以商超为主,现在,随着电子商务的快速发展,高端进口啤酒开始瞄准这一渠道进行发力。5月5日,酒仙网启动啤酒板块,以德国进口品牌为主的几十款国内外知名啤酒已作为第一批试水产品,进入酒仙网官网及天猫、京东、苏宁等十余个合作平台上进行销售。
另一个新兴渠道,酒类连锁专卖店也有意进行了啤酒品类的延伸。记者在浙江采访时,在久加久连锁专卖店看到其进口啤酒已经占据了不小的店内面积,该店营业人员告诉记者:“比过去好卖多了,尤其是这款5升桶装德国天使黑啤酒,今年春节卖得很火。”另据记者了解,名品世家酒类连锁专卖店也在今年4月与天津可利客商贸的德国啤酒品牌别格啤酒进行了独家战略合作,这意味着德国皇室御用啤酒品牌别格将正式进驻名品世家全国的700多家连锁店,名品世家产品体系得到进一步加强。
中小品牌的机会
新世纪的前十年,中国啤酒市场按美国模式进行整合,留下了青岛、燕京和雪花三强,地方区域品牌几乎消失殆尽。国外的啤酒品牌也从世纪初百花齐放的局面演变成了大玩家的游戏,没有实力按中国市场游戏规则进行市场拓展的厂商几乎都退出了竞争,只留下百威、嘉士伯、喜力等这种国际一流品牌在高端市场角力。
随着消费结构的升级及80后,90后新生消费群体的成长,时尚、个性化的高端啤酒越来越受欢迎,尤其是进口啤酒。调查显示:未来5年高档啤酒消费量将逐步增长,啤酒市场平均价格将增长17%,中高端产品比例迅速放大。百威英博集团华北事业部总裁徐嘉宏表示:“目前在啤酒市场中,已经能看到消费升级的趋势,即随着消费者收入的增长、对生活形态与口味多元化的需求,他们愿意支付更高的费用去享受更地道的啤酒,这种增长趋势比其他品类要来得明显。”
这对一些中小啤酒品牌是一个明显的好机会。
科学的进展就是不断超越现有的知识
丁肇中(世界著名科学家、美国科学院院士、诺贝尔物理学奖获得者):科学最主要的是兴趣,其他都是次要的。只有拥有兴趣,才能成为一个好的科学家。创新研究最主要的动力是好奇心,不是谁逼着你去做,如果为了拿奖而研究,肯定会失望。做基础研究要有信心,做你认为正确的事,不要畏惧困难,不要因为多数人的反对而改变。科学不是由投票决定,少数人服从多数人。只有少数人把多数人的观念以后,科学才能向前发展。少数人多数人的观念后,科学就进步、创新了。因此,专家评审并不是绝对有用的,因为专家评审是依靠现有的知识,而科学的进展是不断超越现有的知识,在不断否定自我中超越自我,在不断超越自我中创新前行。我每做一个实验都受到许多科学家的反对,正是这些反对意见,才使我不断修正思路和方法,使得每一个实验不断完善获得成功。我们要原谅别人的错误,更要大胆证实自己的假设。实验可以理论,但理论不可能实验。最开始年轻的时候确实比较困难,过了这么多年以后,因为从来没有做过一个错的实验,而且每一个实验对科学界都有贡献,所以反对我的人比较少。
记者思问:理念引导思路,思路决定出路。丁肇中教授的观点,启迪我们思考,我们还有多少旧有的观念制约束缚着科学创新?我们应该怎样破旧立新,敢于否定自我,勇于超越自我?尤其是面对多数人反对的时候,如何持有坚定的信念和果敢的态度,不怕反对、不怕质疑、不怕失败,解放思想,解放人才,解放科技生产力,以创新的精神力量推动科学进步?
大学教育的本质是培育创新型人才
詹姆斯·莫里斯(英国著名经济学家、诺贝尔经济学奖获得者):大学的教育是综合性的,但其本质是培育创新型的人才。大学是一个新思维、新点子原创性的集散地。作为一名大学教授,不仅要教授学生最前沿的专业知识,更要培养他们发现问题和解决问题的应用技能。要使大学真正成为培育创新人才的基地,最重要的措施是积极营造鼓励独立思考、自由探索、勇于创新的良好环境,通过建立有效的创新奖励机制,加强学生创新的内生动力;同时完善创新评估机制,加大对原创性创新的鼓励。当前中国大部分的创新是非原创性的创新,即主要是仿造改进性、综合归纳性的创新。另外,还可以通过引入竞争机制,使大学校园的创新活力在积极竞争的良性循环中得到激发。
记者思问:东方教育重在知识传承,西方教育重在知识探究。莫里斯的观点启迪人们,创新型人才应该怎样培养?钱学森之问“为什么我们的学校总是培养不出杰出人才”,我们的大学如何按照培养科学技术发明创造人才的模式去办学?如何改变填鸭式的教学扼杀学生原创热情的现状,激发学生创新的激情和灵感,使大学真正成为培养创新型人才的摇篮。这是我们值得深思的时代课题。
以创新的力量突破转型的瓶颈
埃德蒙顿·菲尔普斯(美国著名经济学蒙、诺贝尔经济学奖获得者):回溯西方经济的漫漫发展历程,追寻创新的足迹,证明经济转型的关键时刻都有重要的创新。正是借助创新的力量,德国、法国在科技革命中崛起。20世纪的西方经济渐渐减弱了这种创新劲头,特别是到了70年代,德国和法国的经济活力也开始出现消减的迹象。欧洲对于社会的保护已经过度,如果不削弱过强的社会福利体系的保护,那么欧洲的经济发展动力就会大大减弱。从上世纪80年代以来,中国经济保持了强劲的发展势头,但是目前也面临着转折点。经济的放缓显示着中国经济发展面临新的门槛。只有通过创新这一途径,既要重视物力资本投入,更要重视科技投入和人力资本投入,确保资本积累的过程伴随足够的技术进步,才能提高劳动生产率,降低成本,获取更高的投资回报率,实现经济可持续发展。要通过创新提高产品质量,以此来提高市场的竞争力,这就需要一系列科技创新以及新技术的推广应用,实现科技与经济的紧密结合,特别要注重人力资本和人才资本的投入,增加经济增长的后劲和可持续性。要进一步创新现有的金融体系。特别是信用评级和配置体系,防范金融风险。要加强市场体制创新,规范市场秩序,创造企业公平竞争的发展环境。中国已成功地进行了经济体制改革,提高了发展的动力,但是改革道路还没有走完,应该注重风险管理体系改革,降低改革创新的风险程度。同时,协调好市场“无形”之手和行政“有形”之手的关系,发挥市场在创新中的主导作用,最大限度地释放创新的力量。
记者思问:国际金融危机爆发以来,国内外经济形势发生了深刻变化,世界经济复苏的复杂性与艰难性十分凸显。受外部需求大幅收缩的影响,我国经济增长面临严峻的困难与挑战,经济下行压力加大。菲尔普斯的观点启迪人们,越是在经济困难的时候,越是在经济转折的节点上,越要更加注重体制机制创新,注重科技创新,向创新要发展的空间,向创新要增长的动力,向创新要竞争的优势,向创新要运行的质量,确保资本积累的过程伴随足够的技术进步,实现稳定增长与创新发展的有机统一。
贯通多领域 创新无极限
爱德华·普雷斯科特(美国著名经济学家、诺贝尔经济学奖获得者):当今社会重大科技问题的突破、创新人才的成长和培养,已越来越离不开多领域的贯通和跨学科的协作,多领域研究已成为当代科学技术活动的重要特征。多领域研究创新,一方面,是科学技术发展的内在要求,必须加强多领域科技知识相互协调和科学技术系统自我整合;另一方面是科学技术与国民经济协同发展的现实需要,必须顺应自然、科技、社会协同发展的规律。只有多领域、跨学科的创新,才能在关键领域实现原创性重大突破,带动若干领域创新发展,强化科技资源开放共享,把科技成果转化为现实生产力。
记者思问:突破领域,创新无限。面对世界性的创新潮流,任何领域、任何学科、任何技术都要把创新的重要性提高到前所未有的高度。普雷斯科特的观点,向人们提出了创新的思维、方法和路径。创新只有从单学科转向跨学科,从单领域转向多领域,从单兵作战转向团队协同,增强创新的集成优势,才能攀越连绵起伏的创新山峦,到达一个又一个创新的峰巅。
技术与工程的创新促进人类社会的进步
同学们,作为新世纪的小主人,我们是祖国的未来和希望。我们应该像先辈那样,从小就立下为国为民服务的壮志,好好学习,掌握各种本领,为新世纪的祖国带上耀眼的光环。
1990年,祖国北京举办了第十一届亚洲运动会,要开好这样大规模的运动会,光靠国家拨款还不够,要靠社会各界力量大力支持。在捐款本上,第一个捐款人竟是个小姑娘。她叫颜海霞,是江苏省建湖镇湖中小学的学生。她家里并不富裕,可她为了支持亚运会,把自己仅有的1元6角钱寄给了亚运组委会。钱虽少,可表达了一名少先队员对祖国的热爱。
有很多少先队员懂得学习的重要,科学的重要,爱动脑筋。山西线县的小女孩李珍,从8岁起就注意观察生活,动手动脑,有了30几项小发明。在国际奥林匹克各学科竞赛中,我国选手多次获得了团体总分第一名,夺得许多金牌、银牌、铜牌。他们努力学习,不仅是为了 给祖国争光,更重要的是他们知道,现在成绩的好坏,关系到将来国家的发展和命运。
如果同学们个个品德好,身体律,脑筋灵,知识丰富,那么几十年后,对会将会更加文明,科技将会飞速发展,祖国就会进步更快,更富强。所以我们要从现在做起,当一名合格的学生。在新千年为祖国献上一份厚礼,真正做一个新世纪的小主人。
《西游记》应是国人最熟知的故事之一,无论是传说、原著还是由它改编的动画、电影电视剧等。在民间它有着广泛的群众基础,随着故事陆续地荧屏再现,孙悟空师徒四人的形象也渐渐深入人心。在上世纪四十年代中国就开始了对《西游记》故事的动画改编,如1941年万籁鸣等人制作的《铁扇公主》,但它对孙悟空形象的设计明显类似于初期米老鼠的风格,受迪士尼影响颇大,而故事则基本上照搬西游记上的情节,处在以再现为目的的阶段。到1961年上海美术电影制片厂推出了被誉为中国动画史上最经典的一部动画电影《大闹天宫》,影片公映后获得了国内外的一致好评,也获得了众多奖项,反响巨大。《大闹天宫》对故事改动之处主要在结局部分,影片中,猴王在大闹天宫之后并没有被如来佛祖压在五行山下,而是返回了花果山,继续当齐天大圣。对于这部影片笔者观影后的感受是大圣神通广大无所不能,没有缺点,但是它却离我们很远,我们只能以仰望的姿态去崇拜他,能明显的感X和自身生活隔着一层,虽然从中我们也能多少体味到猴王不畏强权反抗精神,这在现实生活中我们也是同样需要,但我们总会陷入到猴王它是神而我们是人的思想对立中,从而发出影片缺少人间烟火气的感慨。1984年版的电视剧《西游记》,基本是原著的再现,人物形象也复杂了许多,性格有变化,自身有缺点,堪称改编的经典。孙悟空的形象本是人,神,猴三体合一,但剧中大圣的形象更多的仍是偏向于猴性和神性,猴性如孙悟空抓耳挠腮,蹦蹦跳跳,神性主要在72般变化和法术上,而猴性和神性再做比较则可发现,猴性是附带在神性之上的,重点仍在神性。对于人性的表现则基本上被忽略了,同样会对受众产生隔的感觉,因为你怎么也无法想象你就是孙大圣,你会经历和他一样的奇幻历程。
时代在不断变化,与之相应,人们的趣味和审美取向也在发生变化。对于高高在上的风格人们早已不习惯,切近时代,切近自身,切近生活渐渐成为人们的新追求,这就要求制作者改变旧有的观念,创作更多接地气,更具普世性的作品。好莱坞对这一点可谓是深得其要,其无论是什么题材的电影,总是把人作为最重要的表现对象,无论是明显的还是潜在的,即使是在动画片中亦是如此,可以说好莱坞动画中的动物就是披着兽皮的人,他们所做所想完全是人的方式,甚至有些动画片就改编自以人类为主角的名著,如《狮子王》改编自《哈姆雷特》,只不过把人置换成狮子而已。人性在很多地方都是共通的,紧紧抓住这一点并不遗余力地去在创新中表现,自然会得到人们共鸣。因此他们生产的影片能够以强大的气势席卷全世界。动画电影《大圣归来》的成功就在于很好的实践了这一点。《大圣归来》中,孙悟空的神性明显淡化,影片绝大部分时间里他并未显示什么神通,而是从一开始就被封印着,山神的一句:“孙悟空,有法印在,你只不过是个普通的臭猴子罢了”,更是在提醒观众,孙悟空现在很普通,从而给受众以亲切感,这种对神性的有意剥离,拉近了影片角色与观众的距离,因为普通这一根纽带令大多数平凡人找到了和影片中角色的共通处,从而更易联想到自身,融入影片。除了神性大大淡化,猴性也淡化了,如片中孙悟空走路不再蹦蹦跳跳和抓耳挠腮,完全是甩开手臂大步流星的人的走法,这就是把它明显人化,他的所思所想也全是人的角度,从而高昂了人性。另外,影片接地气的地方还在于江流儿的童年设置,它跟着大圣身边问这问那,还拔了一根大圣身上的毫毛,这样的设置其实更贴近我们的童心,一反以往大圣高高在上形象,也在一定程度上满足了我们内心靠近大圣的愿望。
突出人性,淡化神性,贴近大众,有更多的人间烟火气,是《大神归来》取得巨大票房成绩的因素之一,我们学了好莱坞那么多年,始终未窥得门径,《大圣归来》则打开了突破口,中国动画界对此应沿着打开的路径进一步拓进。
二、英雄复归:好莱坞经典模式的再述
对于任何的艺术而言,总会有着自己的相应的模式,这种模式的形成可以说是经验的总结,可以说是艺术的成熟,也可以说成僵化和取巧。不管怎样,从对一种模式的研究和应用开始,我们可以借鉴到很多东西,并在学习中结合自身,进一步形成自己的创新,一方面我们进入它,但另一方面我们最终目的还是摆脱它。好莱坞作为一种全球商业片的典型,它的成功影响是深远的,好莱坞的叙事模式也作为一种商业化操作成熟的标志为学者们所研究,如博德维尔的《好莱坞叙事方法》和克莱斯汀.汤普森的《新好莱坞的故事讲述》等。
[关键词] 半夏曲; 发酵; 优势菌种; 16S rDNA和26S rDNA; 系统发育树; 菌种鉴定
半夏曲是临床上常用的中药炮制品之一,为清半夏、六神曲、生姜汁、面粉、白矾发酵而成。半夏曲含有酵素等, 具有祛湿化痰、降逆止呕、健脾温胃的功能, 用于治疗心下痞满, 不欲饮食, 倦怠乏力, 大便不调[1]。半夏曲的现代研究侧重处方筛选、化学成分等,对于半夏曲炮制中起重要作用的微生物研究甚少。目前,仅蔡清宇等[2]初步表明生半夏曲中含较多杂菌,在血平板培养基中培养出革兰氏阳性杆菌、革兰氏阴性杆菌及球菌,在沙氏培养基中未培养出真菌。本实验对半夏曲发酵炮制过程中不同时间点的微生物菌群种类和数量变化进行初步研究,并分离鉴定优势菌种,研究结果将为揭示半夏曲炮制机制奠定基础。
1 材料
1.1 仪器
MILLIQ超纯水仪(美国Millipore公司);培养箱(上海一恒科技有限公司);PTC200 PCR仪、电泳仪、凝胶成像分析仪(美国伯乐公司);I16K高速低温离心机 (Sigma公司)。
1.2 试剂
硫酸链霉素、琼脂粉、溶菌酶购自北京索莱宝;脑心浸液肉汤培养基、马铃薯葡糖糖琼脂购自青岛海博,酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(自配);植物基因组DNA提取试剂盒、细菌基因组DNA提取试剂盒、酵母菌基因组DNA提取试剂盒、2×Taq PCR master Mix购自北京天根;溶菌酶缓冲液、PCR引物购自上海生工;琼脂糖购自Innvitrogen公司;DM2000 Marker购自康为世纪公司。
1.3 供试样品
半夏曲炮制过程中不同时间点样品由成都中医药大学提供。
1.4 引物
细菌16S rDNA基因通用引物序列,27F:5′AGAGTTTGATCMTGGCTCAG3′;1492R:5′GGTTACCTTGTTACGACTT3′。真菌26S rDNA基因通用引物序列[3],NL1: 5′GCATATCAATAAGCGGAGGAAAA G3′;NL4: 5′GGTCCGTGTTTCAAGACGG3′。由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。
2 方法
2.1 半夏曲的制备(由成都中医药大学制备)
参照中药部颁标准。清半夏 160 g、白矾 10 g、 六神曲 5 g、生姜汁20 g、面粉 32 g,除生姜汁、面粉外,其余3味粉成细粉;生姜汁加水适量,与面粉及上述细粉搅匀,制成粗粒软硬适宜的小块或颗粒,发酵,干燥。分别取发酵0,18,36,54,72 h的样品于无菌的密封袋中4 ℃保存,并在3 d内完成不同种微生物的培养计数。
2.2 微生物的培养及菌落计数
取5个炮制时间点的样品各1 g于无菌的小锥形瓶中,加入9 mL的无菌生理盐水在水平摇床摇匀,取配好的样液1 mL加入9 mL的无菌生理盐水,依次进行梯度稀释为1×10-2,1×10-3,1×10-4,1×10-5,1×10-6,1×10-7,1×10-8,1×10-9,根据不同取样点的样品菌落数选取合适的3个稀释梯度(1×10-1,1×10-2,1×10-3)。取100 μL稀释液注入平皿固体培养基上,用涂布器涂布均匀,每个稀释度做3个重复。细菌培养皿置于37 ℃培养箱培养1~2 d。霉菌和酵母菌培养皿置于28 ℃培养箱培养3~4 d。菌落的计数公式:每1 mL原菌液活菌数=同一稀释度3个平皿菌落平均数×稀释倍数×10。
2.3 优势菌种的分离纯化
挑选各样品培养皿中的细菌、霉菌、酵母菌菌落,取菌落形态相似且出现频率多的微生物作为优势菌种进行分离纯化(尽可能多挑出形态不同的菌落)及形态学观察。将纯化后的单一菌落置于无菌EP管中保藏于4 ℃ 冰箱并尽快进行分子生物学的鉴定。
2.4 优势菌种的鉴定
2.4.1 优势细菌的鉴定 将保存的优势细菌传代培养,刮取菌苔用细菌基因组DNA提取试剂盒进行DNA的提取,采用细菌16SrDNA的通用引物27F/1492R进行扩增。PCR反应体系:模板DNA 2 μL,上下游引物各1 μL,2×Taq PCR master Mix 2 μL,补充ddH2O至25 μL。反应程序:95 ℃ 3 min;94 ℃ 30 s,56 ℃ 30 s,72 ℃ 1.5 s,30个循环;72 ℃ 10 min。取2 μL的扩增产物在1%的琼脂糖上进行凝胶电泳,使用琼脂糖凝胶拍照系统检测扩增产物。将扩增产物送至上海生工进行测序。测序结果使用Biodit软件打开,将测序结果复制于NCBI网站上使用Blast进行同源性比较,下载同源性较高的序列采用MEGA 4.0软件的NeighborJoining方法,1 000 次 Bootstrap检验后构建系统发育树。
2.4.2 优势真菌的鉴定 将保存的优势真菌菌株传代培养,刮取菌苔,分别用酵母菌基因组DNA、植物基因组DNA提取试剂盒提取不同发酵时间点的优势酵母菌和霉菌的DNA,采用真菌26S rDNA的通用引物NL1/NL4进行扩增。PCR反应体系:模板DNA 2 μL,上下游引物各1 μL,2×Taq PCR master Mix 2 μL,补充ddH2O至25 μL。反应程序:94 ℃ 1 min;94 ℃ 30 s,54 ℃ 1 min,72 ℃ 2 min,30个循环;72 ℃ 10 min。其他同2.4.1。
3 结果与分析
3.1 半夏曲发酵过程中微生物种类、数量变化及优势菌种形态学观察
在半夏曲炮制过程中,从发酵0 h至发酵72 h,细菌数量少且呈缓慢增长趋势;酵母菌在发酵前期数量偏少且变化不明显,发酵至54 h时数量急剧增加,至发酵结束时达1×107.78 CFU・mL-1,在发酵前期并未出现霉菌,然而发酵至54 h时霉菌数量迅速升高1×106.91 CFU・mL-1,至发酵结束时与酵母菌数量相差无几(表1,图1)。5个不同发酵时间点样品共挑选出27株优势菌,其中细菌11株,酵母菌9株,霉菌7株,菌落颜色为白色和黄色,对优势细菌进行形态学观察及革兰氏染色,大多为革兰氏阳性杆菌;对优势酵母菌镜检可观察到明显的出芽,对优势霉菌镜检可观察到菌丝和孢子。
3.2 优势菌种的分子生物学鉴定
从半夏曲发酵过程中的5个不同时间点共分出27株优势菌株,采用16S rDNA,26S rDNA序列分析、相似性比对及构建系统发育树分别对优势细菌、真菌进行鉴定。AaX1为Streptomyces sp.(链霉属);AaX2为Staphylococcus epidermidis(表皮葡萄球菌);AaX3,DdX2为Bacillus pumilus(短小芽孢杆菌);AaX4,BbX2,BbX4,EeX1为Bacillus sp.(芽孢杆菌属);BbX1,DdX1为B. subtilis(枯草芽孢杆菌);BbX3为B. aryabhattai(阿氏芽孢杆菌)。AaJ1,AaJ2,AaJ3,BbJ1,BbJ2,DdJ1,DdJ2,DdJ3,DdJ4为Meyerozyma guilliermondii(季也蒙毕赤酵母菌);375J,375M为Paecilomyces variotii(宛氏拟青霉);3100J,3100M为Byssochlamys spectabilis(丝衣霉菌);EeX2,FfX1,FfX3为Aspergillus niger(黑曲霉)(表2,图2,3)。
4 讨论
目前关于半夏曲发酵过程中的微生物研究极少,对于菌种的鉴定也只是粗略的归类。本文首次研究半夏曲发酵过程中不同时间点的微生物种类和数量变化及其优势菌种进行分子生物学鉴定。研究发现半夏曲发酵过程中细菌数量少、变化平缓,而酵母菌和霉菌数量发酵至54 h时迅速增加,至发酵结束时达1×107 CFU・mL-1以上;优势菌株的鉴定为优势细菌Streptomyces sp.,B. pumilus,B. subtilis,B. aryabhattai以及其他的Bacillus sp.,优势酵母菌M. guilliermondii,优势霉菌P. variotii, B. spectabilis, A. niger。结合菌落计数与分子生物学鉴定结果,推测发酵54, 72 h时酵母菌的选择性培养皿上分离出的是霉菌,可能在发酵前期酵母菌利用面粉中的淀粉质迅速繁殖,中后期淀粉质减少酵母菌的数量也逐渐减少。
霉菌在发酵中能产生各种蛋白质酶以及α淀粉酶,A.niger还能产酸性脂肪酶和有机酸[45]。A.niger,M.guilliermondii能产生菊粉酶,菊粉酶是一种微生物酶。现在已知的能产菊粉酶的微生物主要有A.niger,A.ficuum,A.Phoenicis,Pichia sp.,Debaryomyces cantarellii,Athrobacter sp.,Clostridium acetobutylicum[67]。菊粉酶的水解产物低聚果糖是双歧杆菌的增殖因子,它能抑制有害菌的增长,调节胃肠道的功能;降低胆固醇和血脂,改善脂质的代谢,促进矿物质的吸收以及纤维素的合成等[8]。P.variotii能产木聚糖酶,木聚糖酶能促进蛋白酶、淀粉酶等水解酶的释放,提高发酵效率,广泛用于酒类的酿造[910]。Bacillus sp.具有很强的脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶活性,它能产生纤维素酶将半夏曲中的植物类原料细胞的细胞壁破坏,促使细胞中的营养物质释放出来。B.spectabilis在发酵中的相关研究较少,对于其具体的酶学性质还有待进一步的研究。将半夏曲与生半夏、法半夏、姜半夏比较时发现只有半夏曲具有消食化积的作用,这可能与半夏曲发酵过程中微生物产生的蛋白质酶、淀粉酶、脂肪酶、菊粉酶等有关。本研究首次对传统曲类中药半夏曲不同发酵时间点的优势菌株进行了分离鉴定,为揭示半夏曲的炮制机制奠定了基础。
[参考文献]
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