香水保质期

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香水保质期范文第1篇

0前言

水是人类及一切生物赖以生存的不可缺少的重要物质，也是当今社会发展不可或缺的极其宝贵的自然资源。然而，随着社会人口的激增、工农业的迅猛发展，人们对水的需求与日俱增，我们真面临着水资源短缺的状况。同时，生活水平的提高，国家工业化也使得我们的水质开始不断恶化，造成有水不能用的局面。这就需要我们加强对水污染问题的关注，尤其是与我们日常生活密切相关的水源地水。

1水资源概况

我国水资源总量为2788km3，然而可利用量仅占总量的29%，约8140亿m3；人均占有量仅为2173m3，仅为世界人均水平的1/4，排在世界的121位。且我国水资源分布严重不均匀，南方地区水量充沛，而北方地区则严重缺水。因此我国已处于严重缺水的边缘。江苏地处中国东部沿海地区，水资源相对较丰富。省内河网密布，湖泊众多。北有淮河、洪泽湖，南有长江、太湖。而且受亚热带季风气候影响，境内雨量充足，省内各地多年的平均降水量在800~1100mm之间。不仅地表水丰富，江苏的地下水资源同样丰富。全省地下水总量在151.77亿m3。虽然江苏的水资源比较丰富，但是其水资源现状并不是很乐观。首先丰富的水资源中有很大一部分是过境水，其次水源污染情况较为严重。随着工业化和城镇化的快速发展，我省水源污染程度排在全国前列。目前我省70%以上的水低于Ⅲ类水标准，仅有少部分河段———苏北大运河扬州至淮安段等达Ⅱ类水标准。达Ⅰ类水标准的水源几乎不存在。从各项检测数据来看，我省水源污染的主要原因还是N、P超标。例如太湖，每年都会有不同程度的蓝藻爆发。尤其是2007年那次，引起自来水水质突然变化并有恶臭，无法饮用，给人们的生活带来很多的不便。其它的湖泊虽然不曾象太湖那样，但也有不同程度的富营养化。所以尽管水资源丰富，但还是一个缺水的省份———水质型缺水。

2农村水源的污染源

农村水源污染的原因主要有以下两种：

（1）日常生活污水、人和牲畜产生的粪便。由于农村人口居住较为分散，基础设施并不完善，无法对日常产生的污废水进行收集处理。因此通常情况下就是直接排放到最近的水体中，从而使水中的有机物含量上升导致水质慢慢恶化。同时粪便中存在的病菌也被带入水中，对人们的安全用水产生影响。农户家里基本上都有一口井作为其日常的水源，但是雨水会将上述的几种污染物冲入井中，这样不但污染了地下水，而且人吃了井水也会生病。

（2）农业生产。农业生产离不开农药和化肥的使用，而农村水源正是一个典型的受此污染严重的地方。下雨、农业退水将农药、化肥中的N、P带入天然水体，使得这些物质一方面在生物体内富集，间接危害人类的身体健康；另一方面导致水中的藻类大量爆发，使水质恶化，直接影响人们的使用。但是随着工业化的发展，农村水源的污染源不仅仅是以上两方面。现在，城市用地的紧张以及对环境的要求提高，使得很多企业将其工厂建立在农村。虽然给人们的收入提高带来希望，但同时也给人们带来了隐患。处理工厂生产时产生的污水是一笔不小的开支，有些企业为了利益的最大化，尽管安装了处理设备，但也只是做做样子、应付检查而已，更有甚者将废水注入地下水中。我们知道地下水的更新周期很长，一旦受到污染无疑是遭到毁灭的打击。更何况农村人们的饮用水水源主要来自地下水，因此我国很多地方都出现了癌症村，江苏也不例外。

3水样收集及化验分析[1][2][6]

3.1水样采集点

在充分考虑代表性的情况下，我们将水样的采集点分布在以农村人口比例相对较高的苏中，苏北地区；水源类型包含河流水、湖泊水、地下水及水库水，基本上攘括了江苏省内所有的水源类型。以下是我们选取江苏的四个市11个点作为水样的采集点（见表1）。

3.2水样的存储及检测设备

检测标准及方法：按照《地表水环境质量标准》（GB3838-2002），《江苏省农村集中式生活饮用水卫生监测管理办法》，《生活饮用水标准检验方法》（GB5750-200）。样品采集：采样点选择在水源地的取水口处，水样存放在聚乙烯塑料瓶中，每个采样点3*500mL/瓶。仪器及试剂：由当地质检部门提供仪器及试剂；仪器主要有原子吸收分光光度计；离子色谱仪;精密pH计等。试剂主要有高锰酸钾、草酸钠、营养琼脂、乳糖蛋白胨培养液、伊红美蓝培养基、纯水等。检测项目：水源水检测色度、浑浊度、臭和味、肉眼可见物、pH值、总硬度、铁、锰、砷、汞、镉、铅、氯化物、硫酸盐、溶解性总固体、氟化物、氨氮、硝酸盐、耗氧量、菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群共22项。

3.3分析结果

部分检测结果见表2。数据分析：通过上述表格中所列举的各项指标及参数，我们可以发现，不同地区不同类型水源的水质存在较大差异。地区差异：洪泽地区的水硬度较高，而海安地区水的色度较高，平均水平在10度左右，而其它地区均低于5度。随着水样地点纬度的增高，水中氟的含量也明显上升，徐州地区的水中氟的含量要远高于其它三个地区，其次便是洪泽地区。水源类型差异：洪泽县县城及江都市的水源主要为地表水，这些水中氮的含量明显高于地下水，还有例如硫酸盐，氯化物等含量也比较高。而其它地区的地下水水源中铁、锰、溶解性总固体的含量都比较高。结论：上述表中各项指标均达国家标准。另外我们对一些毒理性指标--铅、汞、镉等也进行了检测（未列入上表），发现所有指标均符合国家标准。故所调查地区的水源地水质是符合国家标准的。

4问题发现

在调查的过程中我们也发现了很多问题，现将列举如下：

（1）首先由我们从各水源地取出的水样检测表明，每个水源地水质是符合国家标准的。但是由于我们样品只能代表该地区某一天的水质情况，在时间上不具代表性。因此，我们向当地的疾病控制中心了解了该地区水质的总体情况。我们将了解的情况进行总结，总的来说这些地区水源地的水质指标绝大多数是符合国家标准的，仅仅存在地下水的极个别的指标有时会超标。典型的就是铁、锰超标，这是受地质条件的影响，江苏省几乎所有的地下水都存在这个问题。其次就是徐州地区的地下水氟的含量超标，如果长期饮用，轻则造成氟斑牙，重则引起氟骨症。

（2）水源地保护意识有待加强[3]，水源地保护措施还需继续完善。我国相关法律、规范规定：水域范围为取水口半径1000米范围的区域；陆域范围为取水口侧正常水位线以上陆域半径200米的陆域为一级保护区；水域范围为一级保护区外半径2000米的水域；陆域范围为二级保护区水域周边山脊线以内（一级保护区以外）的区域为二级保护区；二级保护区以外的湖库流域面积（155平方公里）为准保护区。一二级保护区内禁止存在违章建筑。且一级保护区内不得存在影响水质的运输作业，不得有养鱼的行为，不得存在对水质有影响的工厂以及生活污水的排放。我们在调查的过程中发现，有很多地方水源地保护区的工作做的还是相当不错的，在水源地保护的范围内不存在违章建筑、工厂、养殖等现象，而且在保护区的范围内做好绿化工作，因此基本上达到了国家的要求。但是同样也存在着一些问题，有些保护区内并没有严格按照要求来执行。普遍的问题就是保护区内有航道，个别的保护区内存在着船厂、水泥厂等对水源有污染的工厂。在一些地下水源保护区，由于人们的意识淡薄，管理没有到位，保护区周围不仅堆放着垃圾，还有农田的灌溉沟渠及茅厕，有害物质会随着时间的延长慢慢渗入地下，造成地下水的污染。

（3）加强监管。乡镇水厂大都采用的是地下水，因为水质良好，处理工艺简单，所以水厂的占地面积不是很大，基本上就是几间房子。而且日常的管理基本上是承包给私人的，因此在日常监管上存在着问题。有些水厂的泵房离办公区很远，平时只是将泵房的门锁上，并且时常处于无人看管的状态。厂内的员工绝大部分都不具备相关的专业知识，工作期间内经常做些别的事。还有乡镇水厂的出厂水最为普遍的一个现象就是余氯不足。一方面是因为水中氯含量高的话会对人们养的鸡鸭等造成影响；其次就是有关人员为了节省费用故意不加，我们在一些水厂的泵房里看到加氯设备，但就是管道没有与供水管相连，这些设备只是在上面检查的时候才用。

5解决方法

5.1加强立法[5][7]

我国饮用水源保护的法律主要是《环境保护法》、《水法》和《水污染防治法》。现行的法律主要针对的是城市饮用水源，对于农村的关注较少。其次，有些规定过于笼统，缺乏可操作性。农村的水源除了集中水源外主要还是以分散水源为主，然而我国在这一方面的法律存在空白。我们对地下水的污染关注还不够，有些企业为了降低排污费用，将污水灌入地下使得地下水遭受污染。某环境署官员曾表示，我们的城市地下水有近90%已受到污染。因此，我们必须完善我们的法律，加大对破坏水源的违法行为的惩处力度，建立完善的地下水评价和监测制度和饮用水源污染损害的认定和评估制度，进而使我们的生活水源得到有效的保证。

5.2完善城市管网等基础设施

随着我国城镇化的发展，农村人口已慢慢脱离以往的散居生活方式。因此我们要不断地完善我们的基础设施。（1）我们要完善我们的城市管网。城市管网的建设一来可以使我们的水源相对集中，不仅方便管理还可以使水资源得到最大的利用。同时饮用水的集中生产与运输可以方便日常管理，降低二次污染的可能性，使得人们饮水安全得到保证。（2）二来可以将居民的生活污水通过污水管网统一收集起来。我们还要兴建污水处理厂，与污水管网一道对生活污水进行处理，这样可以有效的预防我们的生活污水对水源地的污染。

5.3做好宣传工作

我国农村人口受教育的程度普遍不是很高，缺乏水源保护及饮用水安全的意识，这就需要我们做好宣传工作。我们要充分利用每一个媒介例如报纸、广播、电视等新闻媒介和乡村集市、庙会等对他们进行宣传。强化公众的资源、环境、生态意识，提高节约用水、保护水资源的自觉性。让人民群众懂得保护水源地是每个公民的义务和责任。使其明白我国水资源现状及保护饮用水水源的重要意义。这样可以让人们在日常的生活工作中自觉的去保护我们的水源地，减少我们的工作压力。

香水保质期范文第2篇

关键词：地质灾害气候

Abstract: In this paper, according to the China Meteorological Administration, "flash floods geological disaster prevention meteorological support engineering construction guidance program in conjunction with local business layout, system functions and related equipment technical indicators and give full consideration to the actual development needs of the future business of the unit.

Keywords: geological disasters, climate

中图分类号：P429 文献标识码：A 文章编码：

随着恶劣天气的增加，我县受沂蒙山区特有地形地貌和气候特征的影响，气象灾害的突发性、异常性、不可预见性日益突出，导致山洪地质灾害发生的可能性增加。山洪地质灾害防御区域的党政部门和民众迫切需要第一时间获取气象灾害预警信息，以便争取宝贵时间采取防范措施，最大限度降低人民生命财产损失。目前防治区内由于缺乏必备的预警信息手段，现有的气象灾害预警信息网络覆盖范围有限，部门间短时临近预警应急联动机制尚需完善，基层气象防灾减灾应急预案体系尚需健全。所以应尽快强化气象灾害监测、预警、预报能力建设，健全气象灾害应急体系和气象灾害联防协防机制，增强防灾减灾能力，减少气象灾害造成的社会经济损失的要求十分迫切。

沂水县气象局根据中国气象局《山洪地质灾害防治气象保障工程建设指导方案》中的相关内容，结合本地当前业务布局、系统功能及相关设备技术指标，充分考虑未来本单位业务实际发展需求。力争用五年时间内建立和完善山洪重点防治区域自动雨量站、数据处理中心、预警系统、预报服务系统、综合气象业务平台。来实现该区域由气象要素暴雨等诱发山洪地质灾害能够及时准确的监测和数据快速收集处理，提高流域灾害性、突发性天气的监测能力；通过预报业务平台和预警服务系统的建设，提升省级和县级台站的流域灾害性天气预报精细化、短时临近暴雨预报预警能力和预警信息的直通能力，将预警信息直接发送到相关决策部门和受影响人群当中。增强防御洪涝和山洪地质灾害的能力，完善防灾减灾长效机制，确保人民生命财产安全，为社会经济发展提供保障。

香水保质期范文第3篇

关键词：铁路；取弃土场；选址；防治措施

1 工程和项目区概况

新建铁路庐铜线庐江至铜陵段项目位于安徽省中南部，线路从安徽省庐江县引出，经芜湖市无为县，至铜陵市铜陵县终止，线路总长115km。设计铁路等级为国铁一级，设计时速120km/h。全线路基长72.11km；特大、大中桥梁24座，总长40.569km；全线设车站10座。工程总占地面积521.6hm2，其中永久占地427.35hm2，临时占地94.25hm2；全线土石方开挖321.32万m3，回填565.28万m3，借方278.66万m3，弃方34.7万m3；共设置取土场8处，弃土场6处。

项目区沿线具有长江中下游气候特点，属亚热带湿润季风性气候。多年平均降雨量1300mm，蒸发量900mm。土壤大致分布规律是：在冲积平原和河漫滩一带，以潮土、水稻土为主；在岗地、丘陵山地上，广泛分布红壤土类、黄棕壤、石灰土等地带性土壤。地貌以长江冲积平原和二级阶地（岗地与坳谷）为主，丘陵沿线零星分布。项目区位于南方红壤丘陵区，土壤侵蚀以轻度水力侵蚀为主，容许土壤流失量为500t/km2.a，属安徽省水土流失重点监督区，执行水土流失防治建设类二级标准。

2 取弃土场选址

2.1 取土场

取土是造成水土流失的一个重要方面，结合沿线地形、地质、环境、运输条件等，在征求有关部门意见后，经综合考虑选定取土场。取土场一般优先选择在坡前岗地、旱地。为了减小取土场占地面积，在施工方便，保证边坡稳定的前提下，适当加大取土深度。设计时考虑边坡的稳定性，结合地质情况确定取土场开挖边坡。

本项目需借方278.66万m3，规划取土场8处，分别为白兔山、油坊、张村、下冲、侯家、汉王村、松院、王圩村，占地面积26.83hm2。取土场地貌类型为山地和岗地，占地性质主要为林草地。

2.2 弃土场

弃土场选址原则：交通方便，尽量减少临时施工道路长度和弃土运距；节约用地，少占耕地和林地，尽量选择在容量大、占地少的山坳或水塘；尽量远离河岸，不侵占洪道；尽量避开公路和村庄的可视范围；避开滑坡、崩塌等地质灾害地段。

工程全线弃方总量为34.7万m3，弃方主要为清基土、拆迁弃土、围堰淤泥、钻孔弃土以及其他无法利用土方。根据沿线地形及交通情况，铁路沿线布设高头胡家、吴家院、山东村、谢家桥、奈家冲、西山岭共6处弃土场，总占地面积6.42hm2，弃土场地貌类型为凹地，占地类型为林草地。

3 取弃土场选址的合理性分析

3.1 取土场选址的合理性分析

通过对沿线设置取土场的地形地貌、植被情况、道路、高程、面积及周边水系情况进行了详细调查，沿线取土场数量8个，除桥梁外，路基共长72.11km，也就意味着每9km设1处取土场，而且取土场的选址考虑了大的填方路段及站场。取土深度根据取土场地形条件确定，岗地取土深度大多为10m，取土结束后，其与周边地面高程基本齐平，优先恢复成耕地；低山取土最大深度16m，取土深度为所选取的山坡高程至山脚，并采取边坡防护措施，取土结束后进行土地整治，恢复成林草地。

取土场选址不在县级以上人民政府划定的崩塌和滑坡危险区、泥石流易发区内，避免发生崩塌和滑坡。型式为山坡及岗地取土，占地类型主要为疏林地，满足少占耕地和林地的原则，选址符合水土保持要求。各取土场选址不在《开发建设项目水土保持技术规范》（GB50433-2008）的限制性规定之列。各取土场相对独立，新增水土流失不会造成大面积危害。根据各取土场土壤、植被条件，地表具有一定的抗侵蚀能力，为了尽量减少项目施工对当地耕地占用的影响，施工结束后对取土场施工迹地全部采取复耕或林草措施。

3.2 弃土场选址的合理性分析

通过对沿线弃土场的地形地貌、植被情况、道路、高程、面积等情况进行了勘查，弃土场的设置根据区间集中弃土情况，从分布情况看，每个县级行政区划各设置两个弃土场。弃土场基本为凹地和未利用土地，根据沿线公路及铁路建设情况，合理选择已经弃土的区域，因此可以最大限度的利用施工便道和拦挡措施。所在凹地汇水面积不大，不会因雨水造成大面积冲刷。

根据实地查勘，各弃土场选址不在《开发建设项目水土保持技术规范》（GB50433-2008）的限制性规定之列，在占地上尽量避免了占用基本农田。根据土地利用规划，弃土结束后进行覆土造地，土地利用方向主要是耕地或林业用地。

4 取弃土场水土保持防治措施

4.1 取土场防治措施

4.1.1 工程措施

表土剥离：取土前，对取土区采取表土剥离措施，剥离厚度按30cm考虑，后期用于整地复耕或植被恢复用土。

土地整治：根据取土区布设情况，岗地取土区施工结束后，其高程与周边地面基本一致，可采取土地整治措施予以恢复，优先恢复成耕地交还给当地村民。山地取土结束后，对取土场迹地进行平整，恢复植被。

边坡防护：山坡地开挖形成的边坡采用攀缘植物防护，设计栽植爬山虎。当开挖边坡高度超过6m时应设置一道马道，马道宽度2m。

截排水沟：取土场周边和开挖坡面应修建排水设施，拦截坡面上方来水及引排周边集水。为防止坡面洪水直接冲刷，导致水土流失和坡面滑坡，在取土场周边布设排洪沟与原排水系统连接，水头高差大于5.0m的陡坡地段，设置消能设施。

4.1.2 植物措施

取土结束后，对取土场形成的平面进行覆盖表土，整治后撒播狗牙根草籽；山坡地开挖形成的边坡采用攀缘植物防护，设计栽植爬山虎。

4.1.3 临时措施

取土场剥离表土临时堆放在取土场的一角，并采取袋装土拦挡，项目区降雨集中且丰沛，施工年限近3a，需在其表面撒播草籽进行防护。

取土场采取分层分级开挖，为防止施工过程中开挖土石料在雨水作用下沿山体流失，需在开挖面周边设置临时排水沟。

4.2 弃土场防治措施

4.2.1 工程措施

表土剥离：施工前剥离表土，用于弃土场后期覆土绿化。

拦挡工程：本项目弃土场容量在3.0～15.0万m3之间，弃土高度基本为8.0m，因此必须在适当位置修建挡渣墙进行拦挡，以防渣体失稳破坏。挡墙墙可充分利用当地材料，采用M10浆砌石重力式结构，其整体稳定性好。根据《开发建设项目水土保持技术规范》，需对挡渣墙抗滑、稳定进行分析验算。

排水工程：弃土场周边应修建排水设施，用以拦截坡面上方来水及引排周边集水。为防止坡面洪水直接进入弃土场，导致松散的渣场危害，在渣场周边布设截洪沟与原排水系统连接，因截洪沟与原有水系水头高差不大于5.0m，不考虑设置消能设施。

4.2.2 植物措施

弃土场堆放结束后，渣顶高程基本与现状地面高程齐平，宜采取土地整治措施，整治后土层表面撒播狗牙根草籽防护。

香水保质期范文第4篇

【摘要】目的: 观察H2O2对人低分化鼻咽癌细胞（CNE2Z）生长、增殖能力的影响，并探讨其可能机制。方法:用MTT及平板克隆形成实验、Western Blot等检测H2O2诱导CNE2Z后增殖能力、EGR1、p53、p16、Cyclin D1的表达。结果：不同浓度H2O2可不同程度地抑制CNE2Z细胞的生长增殖能力，同一时间点各实验组细胞抑制率相比差异有统计学意义，抑制率与H2O2浓度间表现出明显的剂量效应关系。平板克隆形成实验的抑制率较MTT更明显。CNE2Z无EGR1、p16蛋白表达，可见p53、Cyclin D1蛋白表达；诱导培养后EGR1、p53、 Cyclin D1蛋白表达明显增加。结论：一定浓度的H2O2能抑制CNE2Z细胞生长，其作用可能与EGR1及p53蛋白表达增强有关；Egr1基因在CNE2Z中具有可诱导性，在肿瘤治疗中有一定的应用前景。

【关键词】 人低分化鼻咽癌细胞；H2O2；肿瘤相关基因；细胞培养；肿瘤治疗

【Abstract】 Objective: To observe the effects of H2O2 on the proliferation of nasopharyngeal carcinoma cell line (CNE2Z) and study the possible mechanisms. Methods: The CNE2Z cells were treated with H2O2; the assays of MTT and plate colony formation were used to measure the ability of proliferation of CNE2Z cells; the western blot was used to detect the protein levels of Egr1， p53， p16 and cyclin D1. Results: In a dosage dependent manner， H2O2 inhibited the proliferation of CNE2Z cells， shown by both the MTT and plate colony formation assays with stronger displaying in the plate colony formation assay; without treatment of H2O2 CNE2Z cells express slight p53 and cyclin D1 proteins but no detectable Egr1 and p16 proteins; after treatment with H2O2， CNE2Z express significant higher proteins of Egr1， p53 and cyclin D1 with no detectable change p16 protein. Conclusion: H2O2 might inhibit the proliferation of CNE2Z through increasing the　expressions of Egr1 and p53 proteins; since Egr1 expression was inducible， Egr1 might be a target in the tumor therapy.

【Key words】 nasopharyngeal carcinoma; H2O2; tumor therapy; tumor proliferation

鼻咽癌（NPC）是一种具有显著种族及地理分布特点的恶性肿瘤，以我国华南及东南亚地区高发。鼻咽癌的治疗目前仍以放射治疗为主，但5　a生存率低于50%，远处转移或复发是鼻咽癌患者死亡的主要原因。H2O2可以增强放射抵抗细胞的放射敏感性，放射后细胞ROS (Reactive oxygen species) 生成减少是肿瘤细胞的放射抵抗的重要原因。本实验观察H2O2对鼻咽癌细胞生长、增殖的影响及其相关癌基因的表达。

1 材料与方法

1.1 材料

细胞系:人鼻咽低分化鳞癌细胞系CNE2Z，广东医学院病理学教研室建株保存。

1.2 主要试剂

兔抗人EGR1多抗（Santa Cruz， USA Cat:SC110）；小鼠抗人p53单抗（野生型，英国曼彻斯特Paterson癌症研究中心分子生物系提供）；小鼠抗人p16单抗（DAKO，Cat：SC245）；小鼠抗人Cyclin D1单抗(Santa Cruz，USA Cat:SC19992)；HRP标记山羊抗兔IgG(H+L)(北京中山，Cat:ZB2305)；Western Blotting Luminol Reagent (Santa Cruz， USA Cat:SC2408)；X线片(Koda，USA)；显影液、定影液(广州天朗涂料化工有限公司)。

1.3 细胞毒实验（MTT法）

取对数生长期细胞（细胞密度为1×105～2×105 /mL），接种于96孔培养板（200μL/孔）。待细胞长成单层后，换以含H2O2 的培养液使其终浓度分别为0、15、25、50　μmol/L，然后分别培养2、4、6　h，再加入MTT 15μL/孔（浓度为5 mg/mL），37　℃培养箱中放置4　h后终止培养；吸弃各培养孔内上清液，于每孔加入150μL的二甲基亚砜，震荡摇匀，37 ℃放置2 h，在全自动酶标仪上以波长490nm及570 nm测各孔吸光度，结果以各组6孔OD均值±标准差（±s）表示。计算H2O2对细胞增殖的毒性以抑制率来反映，其抑制率（IR）的计算公式为：细胞抑制率IR（%）=（对照组OD值实验组OD值）/对照组OD值×100%。

1.4 平板克隆形成实验

取对数生长期细胞以每孔300个接种于24孔培养板，观察不同浓度（15、25、50μmol/L）的H2O2 使用液，培养2、4、6 h后，继续常规培养7～10　d。计算每孔的克隆数，50个细胞以上者计为一个克隆，并按以下公式计算克隆形成率。克隆形成率（%）=平均克隆数/接种细胞数×100%；抑制率（%）=（对照组克隆数实验组克隆数）/对照组克隆数×100%。

1.5 Western Blot印迹

取对数生长期细胞分别处理后0 min、15 min、30 min、60 min、2 h、4 h、6 h收集细胞，抽提细胞总蛋白。蛋白定量按BCA试剂盒说明书进行。细胞总蛋白抽提 取对数生长期细胞接种80 mL培养瓶，置于CO2培养箱中培养20　h后，将培养液分别换成空白对照液和50μmol/L的H2O2 使用液继续培养，分别于处理后0　min、15　min、30　min、60　min、2　h、4　h、6　h抽提细胞总蛋白；SDSPAGE 按照操作手册安装BioRad公司的微型垂直板电泳槽，制备0.75　mm厚的聚丙烯酰胺凝胶，注意防止渗漏。根据目的蛋白的分子量确定所需SDSPAGE分离胶的浓度；EGR1、p53和Cyclin D1配制10% SDSPAGE分离胶；p16配制12% SDSPAGE分离胶。转膜；蛋白印迹 EGR1 1∶300，p53 1∶500，Cyclin D1 1∶300，p16 1∶1000。检测EGR1、p53和Cyclin D1蛋白表达，采用图像分析软件Scion Image(Beta 4.0.2版，Scion Corporation，USA.)，测量各蛋白的相对表达量。

1.6 统计学处理

实验数据采用统计学软件SPSS 11.0 进行统计分析，行方差分析、q检验和相关分析，以P

2.1 不同浓度H2O2对CNE2Z细胞增殖的影响

MTT及平板克隆形成实验结果表明，不同浓度H2O2可不同程度地抑制CNE2Z细胞增殖，同一时间点各实验组细胞抑制率相比差异有统计学意义（P

2.2 Western Blot 结果

CNE2Z细胞缺失EGR1、p16蛋白表达，可见p53、Cyclin D1蛋白表达；50μmol/L H2O2诱导培养后，可见EGR1迅速表达，15 min开始出现，2 h左右即达到最大值，随后表达趋于消失； p53蛋白诱导表达明显增加，与EGR1蛋白表达水平呈正相关（r = 0.883，P = 0.008），其中4　h的相对表达量较其他时间点均高，随后表达减低，差异有统计学意义（P

图1 H2O2诱导前后EGR1、p53、Cyclin D1在CNE2Z细胞中的表达

图2 H2O2诱导前后EGR1、p53、Cyclin D1在CNE2Z细胞中的表达

3 讨论

H2O2对肿瘤的发生、发展有双重影响［1］。一方面它具有抑制细胞DNA损伤后修复、形成DNA碱基加成物、影响细胞内信号转导途径、改变细胞粘附特性、促进表达VEGF等多项作用，因而能促进肿瘤的发生与发展；另一方面，H2O2具有诱导细胞凋亡及坏死、抑制细胞增殖等功能，因此又具有一定的抗肿瘤作用。放射线、紫外线及某些抗生素类的抗癌药物治疗肿瘤的机制之一即是通过氧化应激作用来实现的，研究认为肿瘤细胞的放射抵抗至少部分是由于放射后细胞ROS生成减少所致，而H2O2可以增强放射抵抗细胞的放射敏感性，因此探讨H2O2对肿瘤细胞生长、增殖的影响及其机制有一定意义。

本实验结果显示H2O2可诱导EGR1表达，2　h左右即达到最大值，随后表达趋于消失； p53蛋白表达明显增加，与EGR1蛋白表达呈正相关。Egr1是肿瘤细胞的一个抗增殖信号，可促进细胞凋亡［23］； Egr1基因启动子具有可诱导性，辐射可以诱导其蛋白表达，其表达在辐射所致的细胞生长抑制及凋亡中具有重要意义［45］。适当浓度H2O2在体外实验中能一定程度抑制肿瘤细胞生长、增殖，诱导凋亡，H2O2能抑制鼻咽癌细胞生长及凋亡可能与EGR1蛋白的诱导表达有关，其途径可能是通过依赖p53途径起作用。研究表明 NPC 中 p53 基因突变很少见，但是免疫组化证实 p53 过表达比较常见，其原因可能是负责 p53 降解的酶通路失活或是细胞、病毒基因产物干扰了某些功能的结果，而 p53 积聚对鼻咽癌细胞生长有一定优势作用。细胞周期素对维持细胞正常周期进程具有重要意义，其中 Cyclin D1 在 G1/S 期转换中发挥重要作用［6］。Cyclin D1 可与 CDK4/6 结合而使 pRb 磷酸化，高磷酸化的 pRb 随之释放转录因子E2F，使细胞由 G1 期进入 S 期，因此 Cyclin D1 可通过调节细胞周期使之始终处于旺盛分裂状态而促使细胞恶性变。已发现多种肿瘤中都有 Cyclin D1 的高表达，因此细胞增殖能力旺盛，能够不断分裂增殖而最终形成肿瘤。本实验显示H2O2能诱导Cyclin D1蛋白表达逐渐增强，60 min左右即达到最大值，最后表达趋于减弱，Cyclin D1蛋白表达趋于减弱与EGR1蛋白表达增强密切相关，H2O2能抑制细胞生长及凋亡可能与Cyclin D1表达减弱及EGR1蛋白表达增强有关。p16是目前肿瘤研究中的热点，已证实在多种肿瘤中发挥抑癌基因的作用，其编码产物通过与 Cyclin D1竞争结合 CDK4/6，阻止 pRb 磷酸化，使细胞分裂在G1 期受阻。因此 p16 的功能是通过 pRb 依赖性途径而实现的，并且在体内存在p16、CDK 及 pRb 的负反馈调节环路。当 p16 基因失活时其蛋白不能正常表达，从而增加 Cyclin D1 与 CDK4/6 的结合，进一步刺激细胞分裂、异常增殖而致肿瘤发生。

Chung等［7］研究发现在缺失野生型p53的人肺癌细胞系H1299中，H2O2可通过转录因子激活p21途径而使细胞周期阻滞于G2/M期，与我们的实验结果有所差别。由于CNE2Z细胞系中尚存在一个野生型p53等位基因，因此我们推测H2O2可以通过诱导EGR1表达并进一步激活野生型p53而致细胞周期阻滞于G1期，两者可能在H2O2所致的细胞生长抑制及凋亡中起重要作用。我们在实验中发现H2O2可以诱导CNE2Z细胞表达EGR1，EGR1表达有助于提高肿瘤细胞的放射敏感性，因此在肿瘤放射治疗中，联合应用H2O2对某些具有放射抵抗的肿瘤可能具有一定的意义。

参考文献：

［1］ MATES J M， SANCHEZJIMENEZ F M. Role of reaction oxygen species in apoptosis:implication for cancer therapy［J］. Int J Biochem Cell Biol， 2000， 32(2):157170.

［2］ WU M Y， LIANG Y R， WU XY，et al. Relationship between Egr1 gene expression and apoptosis in esophageal carcinoma and precancerous lesions［J］. World J Gastroenterol， 2002， 8(6):971975.

［3］ Pignatelli M， LunaMedina R， PerezRendon A， et al. The transcription factor early growth response factor1 (EGR1) promotes apoptosis of neuroblastoma cells［J］. Biochem J.， 2003， 373(Pt 3):739746.

［4］ Virolle T， Adamson E D， Baron V， et al. The Egr1 transcription factor directly activates PTEN during irradiationinduced signalling［J］. Nat Cell Biol， 2001， 3(12):11241128.

［5］ Das A， Chendil D， Dey S， et al. Ionizing radiation downregulates p53 protein in primary Egr1/ mouse embryonic fibroblast cells causing enhanced resistance to apoptosis［J］. J Biol Chem， 2001， 276(5):32793286.

香水保质期范文第5篇

关键词：表土；水土保持；保护

中图分类号：S157文献标识码：A

1表土资源的重要性论述

表土层是指接近地面的土层。一般厚度15～30cm，植物根系密集，有机质含量较高，生物活性强，含有较多的腐殖质，肥力较高。

据研究，形成1cm厚的表土需要100～400a，农业专家认为，在农田中，形成25cm厚的表土一般需要200～1000a，在林地或牧场，形成同等厚度的表土需时间会更长。自然表土覆被能够提高土壤发育初期的质量，而且可以促进土壤形成过程、植物生长以及农业利用。表土回填能够增加主要有机质含量、改善营养状况，还能提高新生土壤的生物多样性，并通过引入有意的土壤微生物促进植物的生长。相关研究表明表土是土地恢复的重要基础，如果在工程中能够保证充足、优质的表土，将缩短土壤的熟化期，迅速恢复重构土壤能力，达到植被恢复的目的。民间也有“一碗土、一碗粮”的谚语来说明了表土资源的重要性，但在实际操作中又由于疏于管理而被人忽略，造成表土资源的大量流失。

2鄂尔多斯市土壤特点

21独特的地理、气候条件造成鄂尔多斯良土资源有限、表土层薄鄂尔多斯深居内陆，受海洋气流的影响微弱，大陆性气候特征十分明显。各地气温日差较大，一般都在11～16℃。土壤在形成发育的过程中，寒暖季节和昼夜之间的温度剧变，岩石的“机械分化”、“崩解”作用进行强烈，而岩石经风化后的土壤母质的化学变化破坏作用极其缓慢，所以导致风沙土广泛分布占到鄂尔多斯土壤总面积的4858%；棕钙土占到全市土壤总面积的188%，栗钙土占到全市土壤总面积的118%。从全市的土壤营养来看，表土层厚度仅为0～20cm，有机质含量平均值仅为05699%，按照耕层土壤有机质含量分级指标仅为6级。对于土壤资源缺乏的鄂尔多斯来说，土壤资源十分宝贵和脆弱，表土资源在生态修复中的作用显得尤为重要。

22严重的水土流失加剧了土壤肥力的下降

全市总土地面积86752km2，其中严重水蚀面积47298km2，占总土地面积的545%，风水蚀交互作用面积5194km2，2项合计62495km2，占总面积的72%，严重的水土流失导致土壤肥力下降，据准格尔旗典型测定，每年因水土流失，坡地一般要损失表土层145cm。全市每年向黄河输沙15亿t，相当于流失氮18万t，磷225万t、钾300万t。

3鄂尔多斯市开发建设项目表土资源保护和利用现状《中华人民共和国土地管理法》规定：县级以上人民政府可以要求占用耕地的单位将所占用耕地耕作层的土壤用于新开垦耕地、劣质地或者其他耕地的土壤改良；《中华人民共和国水土保持法》中更明确规定对生产建设活动所占用土地的地表土应当进行分层剥离、保护和利用，做到土石方填挖平衡，减少地表扰动范围。在编制开发建设项目水土保持方案中也要求进行表土剥离和保护。但是实际操作过程中绝大多数开发建设项目基于成本、操作可行性等多方面因素都未按照方案的要求进行表土剥离。其中表土可自用的项目，包括管线开发、露天矿开采、道路修筑等项目占到全市开发建设项目的75%，绝大多数项目都未进行表土剥离和保护，但为了达到水土保持专项验收标准还需要从其他地方重新购买表土完成绿化工作，造成了表土资源的循环浪费。有些开发建设项目虽然进行了表土剥离，但未做好相关的防护措施造成了表土资源的流失。

4表土剥离的可操作性探索

41划分表土剥离类型

鉴于鄂尔多斯地区特殊的土壤特点及表土剥离的可操作性，划分如下类型： 表土层厚度低于10cm的土壤可不进行表土剥离； 表土层厚度大于10cm的必须进行表土剥离； 对于占用耕地的，无论表土层厚度多少都必须进行表土剥离。

42在水土保持方案中要详述土壤类型和特性

在编写开发建设项目水土保持方案第四章项目区概况中要详述项目所占土壤类型、表土层厚度、不同土层用途等进行论述，为后续表土的利用和保护设计提供客观依据。

43对于适合剥离的表土类型要进行表土剥离方案设计

设计方案中要明确剥离工艺、存放地点、保护措施、表土用途等，为建设单位提供科学、有效的方法，为水土保持监理和监测工作提供工作依据。

44加强宣传，提高建设单位保护表土资源的意识

企业不愿意进行表土保护只是单纯的从剥离、运输、保护土壤的成本来算账，根本没有考虑项目建设造成表土资源破坏、土地复垦能力下降所带来的长期危害，所以要加大宣传，使企业具有保护表土资源的主动性。

参考文献

[1]孙礼.关于保护和利用表土资源的思考[J].中国水土保持，2010（03）：4.

[2]谭文忠，韩春丽，吴次芳，等.国外剥离表土种植利用模式及对中国的启示[J].农业工程学报，2013（12）：23.

[3]伊克昭盟地方志编纂委员会.伊克昭盟志第一册[M].现代出版社，1994，8.

[4]朱先云.国外表土剥离实践及其特征[J].中国国土资源经济，2009：9.