心中的玫瑰
前言：想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗？我们特意为您整理了5篇心中的玫瑰范文，相信会为您的写作带来帮助，发现更多的写作思路和灵感。
心中的玫瑰范文第1篇
没和母亲结婚前,父亲有一个很相爱的恋人。这是个秘密,除了父亲和那个女孩彼此心照不宣,其他人谁都不知道,包括爷爷奶奶。那个女孩的太爷爷是我奶奶的远房表哥,论辈分她该叫我父亲“叔叔”,可她从没叫过,她爱我父亲,她要做他的妻子。这个秘密是我8岁那年从母亲口中得知的。直到大学毕业,我才从父亲那里知道了故事的全部。
“我们打小一块儿玩,她是我的玩伴中唯一的女孩子。任性的她从小就特别黏人,我的‘队伍’只要被她瞄见,就摆脱不掉了,她会很快进入‘副总’角色,甩也甩不掉……”
说这话时,父亲脸上洋溢着一个收藏家谈及自己的稀世珍品时才有的表情――迷醉的眼神、微微上扬的嘴角。我仿佛看到了夕阳西下时,一个扎着羊角辫的小女孩扯着一个男孩的衣角欢呼雀跃,拖着长长的影子欢快地结伴回家。
“你们什么时候开始的?”
父亲好像没有听到我的发问,自顾自地说下去:“不知不觉我们就到了对性别很敏感的年龄。她粲然显露的美,让我既自豪,又自卑。说不清什么时候开始的。是我得了胸膜炎,她以借东西的名义探头探脑时?还是那帮小子起哄时?抑或是家人开玩笑说给我找媳妇,她投来羞涩又幽怨的眼神时?或者我没考上大学回家当了会计,她放弃了城里姨妈给她安排好的工作,回家告诉我时?我真不知道。”
“那段日子,我的心总被一种莫名的希冀撞击着,我自己也不清楚那是什么。我只知道,当别人提到她的名字时,我会立刻竖起耳朵,表面上却装得漫不经心。一想到现实问题,我就会陷入痛苦焦灼的矛盾之中。但该来的还是来了,我必须得相亲了。24岁的我没有任何理由再去拒绝父母的要求。你爷爷奶奶是很传统的人,他们接受不了,更无法理解我和她的关系。我的心能顶住世俗的目光,却无法抗拒老人的眼泪。”说到这里,父亲深深地埋下了头,像一个丢失糖果的孩子。
“你相亲的人就是我妈妈吧?”
也许我不该在这个时候提到母亲,可我忍不住为母亲难过,我不甘心母亲是父亲生命中的第二。至今我依然记得8岁那年的事。童年的我喜欢极了隔壁的那个长得像花儿一样的蓝姐姐。我想回家问妈妈,那个姐姐喜不喜欢我,是否抱过我?来不及把气儿喘匀,我就竹筒倒豆子般对着正在做饭的妈妈稀里哗啦说了一通。妈妈半天没吭声,像是要哭了。我小心地走过去拉母亲的手,我感觉到母亲的眼泪扑簌簌落在我的发间。母亲突然开口了:“就是她,是她逼问你爸爸后不后悔,她有什么资格?”8岁的我断然是听不明白母亲的话的,可我还是从母亲反常的行为里感到了一些不和谐的东西。母亲也许不知道那件事在我幼小的心灵上留下的痕迹。回想起母亲那天包的饺子,一定是放了很多的葱和姜,全是辣的。
“你妈妈是个很称职的妻子,比我小两届,是学校里的才女。见面那天,你妈妈穿的是白色的确良衬衫,淡蓝色的裤子,两条不长不短的麻花辫儿垂在胸前,静静地站着。她的眼睛很漂亮,还有一张电影明星般的瓜子脸,我心想就是她了!”
“你就那么自信我妈一定会看上你?”
“这点儿自信还是有的,我觉得我都帅呆了!”“哈哈……”父亲大笑起来,我也大笑起来。
“就在我和你妈相亲的头天晚上,她找过我,问我能不能带她走?我没回答她,更没法答应她。她哭着跑了,我的心像被刀子剜了一样。这辈子注定给她幸福的人不是我。那时你爷爷奶奶都老了,我想是该为他们活着了,我要给他们幸福,他们需要我,未来的家庭也需要我。你妈妈贤淑温顺,家里的一切都被她打理得井井有条。婚后的生活虽然波澜不惊,但我却能感受到实实在在的幸福。一年后你出生了,家里更是笑声不断,你就是我们的‘开心果’。”
“那你爱我妈妈吗?”
心中的玫瑰范文第2篇
最近一段时间，我明显地感觉到，老公在床上有些心不在焉，每个月的那几次，往往是草草收兵，一副例行公事的样子。
记得刚结婚那阵子，每天，我们都会有一个美好的夜晚。
婚前，我对书刊上的一些夫妻的描绘表示怀疑，等结了婚才知道，原来男女间的事情竟然如此美妙。
爱如潮水般散去后，老公都会温柔地对我说：“丫头，我是不是位高超的舵手？”当老公用那种亲亲的柔柔的眼神看着我说这句话时，我都会用我的拳头不住地捶打着他那宽厚的肩膀，嘴里说着你坏你坏，心里却幸福得要死。我想，虽然我只是芸芸众生中一个普通得不能再普通的女人，可我却是这世界上最最幸福的小女人。
我无数次地憧憬着，我和老公的这艘爱情航船会永远这样驶往幸福的彼岸，可我没想到，在我和老公结婚七年后，我们这艘婚姻的航船竟在险滩上搁浅了。也不知道从什么时候开始，老公这个舵手时常“开小差”，我们的不再琴瑟和谐。每逢我有那个要求，他常常以累了困了为由婉言拒绝我。
可是我发现，老公的身体并没有病！他只不过对我失去了兴趣而已。
老公，你这是怎么了？难道，真应了“七年之痒”这句话了吗？
症结出在哪里呢？我是个遇事较真的人，我决定找出老公对我丧失兴趣的原因。
（2）
夫妻间的这种事情毕竟属于难言之隐，我决定先从自身查找原因。
我知道，熟悉的地方没景色，再好吃的食物要是顿顿吃，用不了多久就会腻了。在男人面前，女人就是风景就是食物。结婚几年，老公对我熟悉得不能再熟悉了，我决定悄悄“包装”一下自己，给老公焕然一新的感觉。
老公不止一次对我说，虽然男人更多的时候喜欢文静的淑女，但女人在穿着上有时也要学会一点点“野性”，可我对此并没有上心。我反驳他说，居家过日子，哪来的那些浪漫？可这次，为了取悦老公，我只好“改头换面”了。
那天，我穿了一身远远望去有点夸张的艳丽裙子，化了比平时稍重的妆。我这样做，就是想吸引老公的注意。然后，我给老公打了电话，让他陪我逛公园。老公开始有些迟疑，但最后还是答应了。
等见了面，老公用非常惊讶的眼神看着我，然后拉过我的手笑着说：“我发现，其实，你有一副很漂亮的身材，按当今流行的标准来说，你属于那种宽肩、蜂腰、圆臀、长腿的体型。你今天的这身打扮，看上去要比实际年龄小一些，我第一眼看到你的时候，以为哪来的明星呢！”
那天，一直到离开公园，我们的手也没分开过。老公说：“我们好久没这么开心过了，我好像又回到我们相恋的日子。”
我知道，我“包装”自己的预期效果达到了，甚至比想象的还要好。
到了晚上，我将卧室布置得温馨浪漫。有人说，朦胧的粉红色的灯光，最能唤起夫妻对性生活的感觉。我将床头灯悄悄换成了柔和的粉红色灯，晚上，在洗完澡后换上新买的性感内衣，洒上老公喜欢闻的香水，先上了床，准备给他一个惊喜。
老公在微微惊愣之后，很快，就将我拥在怀中。
那天晚上，老公又成了浪尖儿上勇猛的舵手，带领我冲上一个又一个快乐汹涌的巅峰。我依偎在老公的怀里，庆幸自己找到了久违的感觉。
我知道，老公之所以“性”趣大减，一定是我对老公造成了审美疲劳的缘故。
我本以为老公会因此回到从前，可没过多久，即便我将自己打扮得再漂亮性感，再怎样调他胃口，老公又对我爱搭不理了。我明白了，虽然我将自己包装了一下，可换皮没换瓤，我只不过是稍稍刺激了一下老公的激情。
难道，老公在外头有了别的女人或者精神背叛了我？我知道，精神的背叛有时候比肉体的背叛更为可怕……
（3）
我真真切切地感觉到，在我和老公中间，一定有那么一个女人，就是这个女人抓走了老公的心。现在，老公虽然没有跟我提出离婚，可他的心已经走了。
我开始格外留心老公的一言一行，并将可能跟老公有“亲密接触”的女性像过筛子似的筛了筛，可我并没有发现老公移情别恋的蛛丝马迹。
难道是我多疑了？
就在我为自己的判断丧失耐心的时候，我忽然有了新的发现。这天，我竟然在卫生间的垃圾筒内发现了一只用过的安全套。现在，老公正和我打着身体的冷战，即便偶尔有的那么一次，也没用过安全套啊！
我当时就晕了。尽管我料到老公会移情别恋，可那只是我的推测，当事情真正摆在面前的时候，我还是受不了。我当时就想拿着这只肮脏的东西冲到老公面前质问他，可我想了想，还是忍住了。
就在我满腹狐疑的时候，终于发现了老公的秘密。
这天晚上，都十点多钟了，老公还在书房里。我悄悄下床，想为老公做点夜宵。隔着玻璃，我见老公坐在转椅里，正在浏览网上的美女图片。让我怎么也想不到的是，老公竟然在！
看着老公陶醉的神情，我只好悄悄回到卧室。我终于明白，老公之所以对我不感兴趣，是因为他用的方式在想象中感受着和那些网上的美女欢爱时给他带来的。
第二天一早，我果然又在垃圾筒的底部发现一只用过的安全套。
我终于明白：夹在我和老公之间的“那个女人”，其实就是这些网络上的。
我不禁在心底涌起一缕悲哀。我没想到，网上的居然成了我的“情敌”！我想不通，再好，毕竟是没有生命的，也不及我这个大活人具备真实感吧！可现在，我居然败给了这些虚幻飘渺的。我怕老公难堪，没有将这件事情揭穿。
我在一本杂志上看过这样一句话，夫妻是这条钢丝绳上的两个演员，谁先掉下来就意味着夫妻生活的失败。即便我们谁都不是赢家，但率先失败的却是我。
我再一次陷入困惑和迷茫之中。
（4）
有一天晚上，因为一点琐事，我们吵过后，老公对我说：“我们离婚吧！”我惊呆了。我怎么也没想到，他会对我说出这种话来！
“为什么？”我强忍着，不使眼中的泪水落下来。
老公叹息了一声，说：“不为什么，就是过够了。”
在我的心中，老公就是天空，我从没想过有一天我们会分开。尽管我一再追问老公为什么，可他最终还是没有说出来。
尽管我和老公的婚姻没有因此终结，可老公比以前更孤独了，每日回到家就将自己关在书房里，我们之间的交流越来越少，枕席间的交流更趋于零。我想，如果没有女儿，他真的会义无反顾地离开我。现在，维系我们的仅仅是道义和责任。
就在我近乎绝望的时候，忽然想到了一位开心理诊所的朋友。听了我的讲述，朋友说：“你每天在他面前晃来晃去，甚至寸步不离，深层的原因就是你不再创新自己，甘于为丈夫作陪衬，这种行为最初还能被丈夫接受，但久而久之，夫妻间的思想距离、观念距离、生活方式距离随着时代的变化而越拉越大，丈夫不再愿意像从前那样厮守一个观念落伍、整日以家庭居室为乐的妻子。还有，造成夫妻处于困惑和迷茫之中的原因还有一个，那就是工作压力过大。现在生活节奏日益加快，尤其是男人。他们肩上担负着养家糊口的重任，很容易造成生理和心理上的失衡。所以，他在网络上寻找宣泄也在情理之中。”
最后，朋友坦言，对于上述夫妻失调者，抢救的办法只有一个，就是提高自身素质，提高生活质量，为老公减压，才能找回“性”福。
朋友一言中的。
老公是做售后的，收入虽丰但不稳定，老公常叹息说要改行，可又舍不得他深爱的专业。现在，我闲在家里，身为一家之主的他，一定感到了肩上沉重的压力。谁不渴望有个宽松的生活环境呢？
于是瞒着老公，我应聘到了一家医药公司上班。上班时，我兢兢业业；下班后，我对老公温言软语，不时地还撒个娇。我惊喜地发现，老公看我的眼神也从最初的惊讶到欣赏直至后来的亲切。
让我感到温馨的是，每天下班后，只要有时间，老公竟然将饭菜做好等着我回来。以前，他可是从不做家务的。老公对我越来越体贴了。当听说我被提为药房店面经理，老公说：“老婆，你真是越来越能干了！这下，我就没后顾之忧了，可以放手大干一场了。两年内，咱们换房，买车。老婆，我不会让你失望的！”见我静静地听着，老公突然搂着我的腰说：“其实，你是个挺有味道的女人。”说罢，温柔地拥我入怀。听着老公的夸奖，我激动得想哭。
那天晚上，老公又成了一个勇猛的舵手，一次次把我带上爱潮的巅峰……
打那儿以后，我和老公的终于峰回路转，我们又远航了，我再也没有在垃圾筒内发现安全套。一次激情过后，老公对我说：“有件事情其实我很对不住你。在咱们冷战的日子，我迷上了网络图片。有一次我实在没控制住，竟然了，从此，一发不可收，在的时候用了安全套，咱们家床头柜里的安全套差不多都让我用光了。”
我喜欢老公的真诚。看着他孩子般羞红的脸，我一乐：“傻瓜，网络中的美人再好，也比不上我这个大活人吧？”
在我的戏谑下，老公诡笑：“男人嘛，要么征战在沙场，要么驰骋在床上。”我点着他的额头，说：“瞧你那没出息的样儿。”心里却像被蜜浸过一般的甜。
心中的玫瑰范文第3篇
我紧蹙眉毛，深吸一口气，刚要张开嘴训斥……
“又看见你了，玫瑰花一样的老师！”坐在最前排的宇突然站起来冲我大声地说。看着他红扑扑的小脸，我张开的嘴顿时没了声音。教室里依然嘈杂，他的声音却很清晰地传进了我的耳朵。
玫瑰花一样的老师，多美的称呼啊！瞬间，我心里的不快消失了一半。我走到他面前俯身问道：“怎么把老师和玫瑰花联系到一起了？”
“老师今天穿的衣服上有朵小小的玫瑰花，我就想到了你的笑脸。你笑起来的时候也像朵玫瑰花。”他很认真地说。
他的话，让我的心情豁然开朗。
这个小家伙，不止一次地对我说过很多让我开心的话。每次去他们班上课，他都会早早地等在教室外的走廊上，看见我拿着教具走来，立刻欢天喜地地跑到我面前，接下我手上的东西，并且跟我说话。有趣的是，他多数时候不会按我的姓来称呼我，而是用一些形容词来代替我的姓。比如，他会说“漂亮的老师”“充满阳光的老师”“可爱的老师”“笑眯眯的老师”“激情洋溢的老师”……他的小脑袋瓜里似乎有着说不完的形容词。
每次听他对我说这些话的时候，我都非常开心，心情也变得异常愉快。其实，除了宇，还有很多学生都是喜欢我的，只不过，宇更敢于把他对我的感受直接地表达出来。我不想辜负他们对我的喜爱！因为这样，我在课堂上更加注意自己的言行举止，更加投入和充满激情。学生们也在我的感染下，愉快而积极地和我进行课堂互动，一节课往往是在其乐融融的氛围中结束。甚至于在课后，我还会和学生谈论一些他们喜欢的话题，帮助他们解决彼此间的小矛盾，教他们与人为善，助人为乐。我在努力把自己最美好的一面展示给学生的同时，也享受着学生们对我的爱戴。
但是，前段时间，我对学生做了一次教学效果测试，结果和我所期望的目标相差甚远。那些我精心设计的教学游戏，花费不少时间制作的单词卡片，以及每一次的激情操练，到最后却似乎只是走了一个过场。想到我付出的努力和热情换来的却是令人失望的结果，我不禁有些泄气。连续几日，我没有了上课的激情。我机械地按照教学步骤上课，不要他们说话，不要他们随便发言，也不再跟他们做游戏。如果学生认读单词不到位，我就会失去耐心，就会生气。学生们眼里笑眯眯的老师变成了不拘言笑、凶巴巴的老师。
可是宇对我说，我是个像玫瑰花一样的老师啊！玫瑰是美丽和爱的象征，而我这段时间的表现美吗？有爱心吗？仅仅因为他们没有达到我所期望的目标就对自己失去信心，对他们失去耐心甚至迁怒于他们，可我平时不是常常教育他们要勇于接受挫折、不怕失败吗？那些鼓励他们要自信、要奋发、要努力的话，到我这里怎么就失去了意义呢？
我突然感到很羞愧！
老师的职责是教书育人，“教书”是向学生传授知识的过程，我们只需要利用一定的教学技巧和教学手段就能达到目的。而“育人”，却需要用我们自身的道德魅力言传身教。所谓“其身正，不令则行。其身不正，虽令不从。”我们的一举一动、一言一行都会在无形中影响学生。也只有一个仪表整洁、谈吐优雅、和蔼可亲、胸怀宽广、平易近人的老师才会让学生“亲其师，信其道”。作为老师的我，深知其中的道理，却很难时刻注意到自己的言行。
是那个小男孩用美好的称呼在告诉他们喜欢的老师：“你笑起来的时候像朵玫瑰花！”他在提醒我，他们喜欢那个漂亮的、阳光的、充满爱心和激情的老师！
心中的玫瑰范文第4篇
关键词：煤矿井下轨道；运输新技术
一、延长蓄电池电机车在煤矿井下的使用寿命
煤矿井下采区的平巷运输多采用蓄电池式电机车运输。由于各单位管理和使用方法有较大区别，蓄电池的使用寿命也存在较大差异。
管理方法不同。有些煤矿在采区使用地点就地充电，由机车的使用人员代管。机车上使用一块电池，将备用电池充电。其缺点是充电机的利用率低；蓄电池中的电解液蒸发后得不到及时的补充；充电点不能保证建在总回风巷附近；充电时间没有保证。有的煤矿在井下充电室按《煤矿安全规程》规定使充电室内的回风流直接进入总回风巷，并安装多台充电机同时对多组蓄电池进行充电，为井下所有的蓄电池电机车提供足够的电源，在机车使用地点设换电点。其缺点是须提前指定运输地点。
充电方式不同。分散充电―随掘进工作地点的变更随之移动充电机的位置，多数单位对一台充电机充电过程中产生的有毒气体不如对待瓦斯那样重视，违反了《煤矿安全规程》中的规定，含有氢气的风流对现场人员身体健康有伤害。集中充电―充电室位置设计符合《煤矿安全规程》的规定，充电过程产生的有毒有害气体能直接进入到总回风巷中，对现场人员身体健康没有伤害。
电解液配制。电解液密度过大或过小都影响到蓄电池容量和使用寿命。蓄电池初充电。电解液的高度在单只蓄电池中以高出极板15mm为宜。液面过高，初充电过程中由于产生热量而膨胀溢出箱体外，腐蚀箱体和地面；液面过低，因发热蒸发露出极板，使蓄电池容量降低。初充电完毕停电24h后再调整单组蓄电池中的电解液密度。如果电解液密度高于1.26kg/L则补充蒸馏水；如电解液密度低于1.23kg/L则补充密度为1.30kg/L的电解液。
二、变频调速技术在电机车电动机的应用
电机车是矿井轨道运输的主要牵引设备。其中，架线式牵引机车多年来一直沿用结构复杂、故障率高和维修费用大的直流电动机，且目前国内绝大多数矿山牵引机车还在使用触头电阻调速方式，处于耗电量与维修量大的状态。由于变频调速牵引机车采用了故障率低和性能可靠的三相异步交流鼠笼式电动机，结合技术先进与节电效果显著的变频调速器，取代直流电机车比较落后的驱动技术，达到了当代世界先进技术水平。由于工作环境特点所致，矿用电机车调速系统处于频繁的启动、制动和加减速等状态，还要适应负荷上下坡和颠簸路况等情况，因此要求电动机启动转矩大、过载能力强。另外，调速系统不但要能四象限运行，还要能再生制动到低速。这样，当负载转矩增大时，转速就能迅速下降，而电动机输出功率基本不变，从而使电动机不易因负载增大而引起过载。反之，当负载变小时，电动机转速能自然上升，以利于提高生产效率。此外，为防止主轮打滑，调速系统还应考虑具有最大转矩限幅功能。由于逆变器和电动机都安装在电机车上，所以整个调速系统应尽可能设计得体积小、重量轻、硬件结构简单和控制方便。对于直接转矩控制而言，在高速运行阶段，除了电动机定子电阻不需知道其它参数，所以直接转矩控制对电动机参数的依赖性比矢量控制要低许多。其产品包括5t、8t和10t隔爆型电动机斩波调速控制装置，目前已广泛应用于以电池为动力源的交流电动机牵引驱动矿山电机车上。
三、煤矿工作面移动变电站运输安全制动系统
我国煤矿机械化水平不断提高，设备向重型化、复杂化发展，井下采煤工作面综采设备被广泛使用，与其相配套的采煤工作面移动变电站设备庞大。一个大型煤矿工作面移动变电站使用的设备往往要几十辆平板车装载运输，但采煤工作面巷道起伏坡度大、地质条件复杂，且变电站随工作面推进而频繁移动，尤其在坡道上由于断绳、断销、断连杆等原因有时会形成跑车事故，给人员和设备安全带来很多隐患，同时可能造成工作面水、电、液和部分设备供应中断，给煤矿生产造成直接或间接经济损失。为解决这个问题，对工作面移动变电站运输安全制动系统进行研究，设计一种自带制动的平板车与其它车辆配套使用，设备安装在制动平板车上，确保设备运行安全，是完全必要的。
新研制的工作面移动变电站运输安全制动系统设计为多台制动平板车串联联接，通过液压系统实现同时快速制动。这种制动平板车主要由车架、制动器、轮对、快速释放阀、液压系统等组成。制动器采用了提闸式抱轨制动，制动力由碟形弹簧产生，属失效安全型。制动器在制动平板车运行过程中抬离轨面，故可适于普通道岔的巷道，并与其它辅助设备配套使用。
四、制动平板车
顺槽移动变电站是综采工作面水、电、液和部分备件的临时供应中心，通过绞车的双向牵引，实现同综采工作面的同步移动，极大提高了工作效率。在绞车牵引过程中，由于断绳、断销、断连杆等原因，有时会发生跑车事故，给人员、设备等造成威胁，同时可能造成综采面的供应中断。
新研制的制动平板车在正常工作时可以自由牵引；遇到断绳等事故发生时，可推动手动紧急释放阀，实现紧急制动；还可以根据需要实现慢速工作制动。紧急制动闸由闸块、闸钳、缸体、弹簧等组成。正常工作时，制动缸体A腔内的液压力把弹簧压紧，带动闸钳转动，把闸块抬离轨面，从而保证制动平板车行走、移动时能正常通过轨道和道岔。当需要制动时，释放制动缸体A腔的液压力，弹簧便压紧活塞并带动缸体一起移动，通过闸钳使闸块压紧轨道，实现制动功能。闸块是制动平板车的关键部件之一，由基体和粉末冶金烧结而成。粉末冶金属脆性材料，故正常停车制动时要求采用慢速停车制动，防止闸块同轨道的冲击而降低闸块的使用寿命。
试验中发现多台车联动的响应速度偏低，原因是紧急制动时联动管路内的乳化液压力难以瞬时降低，从而导致快速释放阀阀芯不能迅速移动，致使快速释放失败。后来对液压系统进行了改进，并增设了先导阀。由于联动先导阀口的管路乳化液少且无任何补充，所以压力释放快，又因为各车压力释放系统相对独立，故各联动车辆能实现真正的快速反应。
五、斜巷常闭挡车栏自动控制装置研究应用
其工作原理如下：当列车正常下行的时候，只要行驶至测速区AB（传感器）处，传感器A接收到矿车下行的指令对其进行检测。传感器B发出信号传递给可编程自动化控制器，由可编程自动化控制器判定矿车是否在正常行驶速度范围内。若矿车正常运行，可编程自动化控制器触发电磁气控阀动作，挡车栏抬起，指示灯变为红色；若矿车超速运行，则常闭挡车栏不动作并且发出报警信号，将信息反馈给轿车司机，预防事故的发生；当矿车下行并通过传感器C的时候，传感器C发出信号给可编程自动化控制器，可编程自动化控制器触发电磁气控阀动作，挡车栏常闭，指示灯变为绿色。矿车上行时首先经过传感器C处，传感器C接收到矿车上行的指令，传感器C发出信号传递给可编程自动化控制器，可编程自动化控制器判定矿车是否在正常行驶速度范围内。若矿车正常运行，可编程自动化控制器触发电磁气控阀动作，挡车栏抬起，指示灯变为红色；若矿车超速运行，则常闭挡车栏不动作并发出报警信号；当矿车上行行并通过传感器B的时候，传感器B发出信号给可编程自动化控制器，可编程自动化控制器触发电磁气控阀动作，挡车栏常闭，指示灯变为绿色。操作系统还具有电手动操作和气手动操作。
心中的玫瑰范文第5篇
【摘要】 建立氯霉素，克伦特罗和雌二醇 3种兽药残留同时检测的悬浮芯片法。通过将3种兽药的BSA蛋白结合物偶联于悬浮芯片的固相载体——聚苯乙烯荧光微球上作为检测探针，采用间接竞争法，在液相反应体系中，3种小分子兽药抗原和微球上的兽药结合物共同竞争液相中各自特异性的生物素化单抗，再加入藻红蛋白标记的链霉亲和素，反应后检测获得荧光信号，绘制出3种兽药残留检测的标准曲线。同时进行3种兽药的常规酶联免疫吸附法标准曲线的测定。在检测技术、检出限、检测区间、特异性、盲样测定和多元分析等方面对两种方法进行比较。除了特异性外的其它指标的比较中，悬浮芯片法均具有明显优势。两种方法的特异性检测具有良好的一致性。高通量悬浮芯片技术，具有操作简单、灵敏快速和成本低廉等优点，为多种兽药残留的快速检测提供了新方法。
【关键词】 悬浮芯片， 酶联免疫吸附法， 残留， 微球， 中位荧光强度值
Abstract A novel suspension array technology was established for the detection of three kinds of veterinary drug residues: chloramphenicol， clenbuterol and 17βestradiol. The three conjugates in which veterinary drugs coupled with BSA were immobilized on the solid carrier of the suspension microarraypolystyrene fluorescent microspheres/beads as detective probes. Indirect competitive technology was employed. Competitive reactions between the veterinary drugs in the aqueous phase and the veterinary drugsBSA conjugates on the beads for coupling with their complimentary specific biotinylated monoclonal antibodies were carried out. And then， straptavidinphycoerythrin was added for coupling and the fluorescent signals were captured. Afterwards the detective standard curves were plotted. The regular ELISA standard curves of the three veterinary drugs were also plotted. Comparison between suspension array and regular enzymelinked immunosorbent assay(ELISA) was in the respects of the detective technology， the detection limits， the detective ranges， the samples detection and the multianalysis. Suspension array technology is distinct advantageous except for specificity. There was well consistent performance between the two methods. The highthroughput suspension array provides a novel method for multianalysis of veterinary drugs with simple operation， sensitive， rapid and low costing.
Keywords Suspension microarray， Enzymelinked immunosorbent assay， residue， microspheres beads， median fluorescent intensity
1 引 言
近年来，食品安全已成为社会共同关注的公共卫生问题，而兽药残留成为食品安全监管的重要问题。兽药残留如克伦特罗 (clenbuterol， CL)、氯霉素(chloramphenicol， CAP)和雌二醇 (17βestradiol， E2)的滥用和食用可导致多种健康损害[1～6]。加强兽药残留检测分析是监管和控制兽药残留的重要手段。因此，简单、快速和灵敏的微痕量检测技术的研究和创新尤为重要。目前，酶联免疫吸附测定法(enzymelinked immunosorbent assay， ELISA)[7，8]是兽药残留的主要检测方法之一具有简单、快速、灵敏度高和特异性强等诸多优点[9]。悬浮芯片技术是一种多功能的液相芯片分析平台，既具有固态片膜芯片的高通量特性，又具有操作简便、重复性好、灵敏度高等优点。目前，对该技术的研究多集中于大分子蛋白质和核酸的检测[10～12]，并未见应用悬浮芯片同时检测多种兽药CAP、CL和E2的报道。本研究采用悬浮芯片法和常规ELISA法对3种兽药进行同时检测，并在灵敏度、特异性、检出限等方面进行比较。
2 实验部分
2.1 仪器和试剂
BioPlex悬浮系统，Model 680型酶标仪(美国BioRad公司)；MALDITOFMS REFLEXⅢ型质谱仪(德国Bruker公司)，DU530型紫外可见分光光度计 (美国Beckman公司);6930型冷冻离心机(日本Kubota公司)；MS3型旋涡混匀器(德国IKA公司)，YM10过滤柱 (孔径1.2 μm，美国Millipore公司)，Costar96孔酶标板 (美国Corning公司)； 日立S4500型扫描电镜 (日本Hitachi公司)。
3种不同编码的荧光微球(beads，Φ=5.6 μm)和蛋白氨基偶联试剂盒（包括激活缓冲液和储备缓冲液）购自美国BioRad公司;CAP单克隆抗体和E2单克隆抗体(美国Biodesign公司)；CL单克隆抗体 (英国Abcam公司)；3种单抗的生物素化由本实验室完成；CAP、CL、E2、EDC、SulfoNHS、沙丁胺醇、莱克多巴胺、N，N二甲基甲酰胺 (DMF)、邻苯二胺(OPD)和E2BSA结合物(美国Sigma公司)；链霉亲和素藻红蛋白(Straptavidinphycoerythrin， SAPE，美国Invitrogen公司)；BSA(德国Roche公司)； CAPBSA和CLBSA为本实验室合成。其它试剂均为国产分析纯。
2.2 实验方法
2.2.1 悬浮芯片检测微球的制备
参照试剂盒说明书，取3种荧光微球 (1.25×107 个/mL)，磷酸盐缓冲液 (PBS) 重悬后，加入到激活缓冲液中，并立即加入新鲜配制的偶联试剂EDC和SulfoNHS(浓度均为50 g/L)，室温下搅拌20 min使其活化；活化后，分别加入3种兽药的BSA结合物5 μg，并用PBS缓冲液（pH 7.4）定容至500 μL，室温下中速旋涡振荡混匀2 h，14000 g离心4 min，弃去上清液，封闭，清洗，加入储备缓冲液， 4 ℃储存。上机进行偶联确证，以便用于下一步测试。
2.2.2 3种兽药的悬浮芯片多元分析标准曲线的测定
实验采用间接竞争法，在96孔反应板的每个反应孔中分别加入优化后的3种靶标物对应的生物素化单抗5、1和16 ng，分别将CAP、CL和E2的标准品(以下涉及到3种兽药均按此顺序)按照5×、5×和3×梯度分别稀释成7个梯度加入。将3种荧光微球等比例混合，每孔加入3种荧光微球各2000个，并用PBS补足至50 μL/孔，同时再各准备一个不加标准品的阳性对照孔。37 ℃中速漩涡振荡2 h，使荧光微球上的兽药BSA结合物与溶液中相应的标准品共同竞争生物素化的单抗，然后加入1∶100的SAPE 50 mL/孔，37 ℃中速振荡反应30 min。悬浮芯片读取每孔100个荧光微球，获得中位荧光强度值(MFI)。以各种靶标标准品的浓度为X轴，以检测得到的MFIs为Y轴，绘制3种兽药小分子的悬浮芯片检测标准曲线。
2.2.3 3种兽药的常规ELISA标准曲线的测定
采用间接竞争法[13～15]，在酶标板上包被小分子兽药的BSA结合物，以方阵滴定法筛选和优化3种兽药常规ELISA的包被原量(分别是2、0.2和0.25 μg)和单抗工作浓度 (稀释度分别为1∶80000、1∶20000和1∶80000)，确定反应条件后，选择3种兽药标准品的浓度，绘制各自的标准曲线。
2.2.4 两种方法对3种兽药残留的特异性测试
准备3组沙丁胺醇、莱克多巴胺、庆大霉素和红霉素测试品，终浓度达到50、 1250和31250 ng/L，每个浓度平行做3个样，同时准备一个阳性对照样，悬浮芯片读数并与阳性对照样比较。以交叉反应率(CR%)测试常规ELISA检测的特异性。
2.2.5 3种兽药盲样的检测比较
准备3个浓度的3种兽药盲样，交由测试者进行检测，每个盲样平行测试3次。根据得到的标准曲线计算盲样的浓度，并与实际浓度进行比对。
3 结果与讨论
3.1 悬浮芯片法对3种兽药检测标准曲线的测定
按优化的比例加入相应的抗体和SAPE，使反应充分进行，可省去真正的悬浮芯片反应所需的抽滤步骤。因此，检测更加简单快速。在优化条件下，绘制标准曲线方程（见图1和表1）。
由于每次检测取100个荧光微球，每个荧光微球都有1个独立的检测值，也即每个样品 (包括标准品)被重复测试了100次，样本量有足够的代表性。由于E2难溶于水，加入少量DMF可增加其溶解度，实验发现，抗体活性并未受影响。CAP、CL和E2悬浮芯片的检测区间分别为50～6.25×105 ng/L， 56～7.81×105 ng/L和1×103～7.29×105 ng/L; 它们的检出限分别为50、56和1000 ng/L，检测范围跨2～4个数量级。在这些范围内，可对这3种兽药同时进行快速的定量测定，全部检测过程只需约2.5 h。检测标准曲线的这些指标和荧光微球上的抗原结合物的偶联量、抗体的亲和力、单抗的生物素化程度都有密切关系。
3.2 ELISA法对3种兽药检测标准曲线的测定
按照棋盘滴定所获得的最佳抗原结合物包被量和最适抗体稀释度，对CAP、CL和E2残留进行标准曲线的测定和绘制，结果如图2所示。标准曲线方程、检出限和检测区间等各参数见表1。比较悬浮芯片法和常规ELISA法可见：在 CAP的检测中，常规ELISA法的检测区间略比悬浮芯片法稍宽，但不存在绝对的优势；而在CL和E2的检测中，悬浮芯片法的检出限明显低于常规ELISA法，检测区间比ELISA法宽，这在实际检测中占有较大优势。悬浮芯片法主要应用于多元靶标物的分析检测，而常规ELISA每次只能检测一个目标物，在多元分析中处于劣势。表1 悬浮芯片法和ELISA法检测3种兽药残留的比较（略）
3.3 悬浮芯片法和常规ELISA法在检测技术上的比较
悬浮芯片法使用的检测原理同常规ELISA法一样，同为间接竞争法，所用试剂略有不同。但在检测的灵敏度和检测区间上悬浮芯片法明显优于常规ELISA法。两种方法存在性能差异的主要原因如下：
(1)悬浮芯片抗原以化学键进行偶联，而ELISA法利用一种物理性的非特异性吸附，其连接的牢固程度和稳定性比悬浮芯片的抗原偶联方式差很多。(2)悬浮芯片激光检测器的分辨率明显高于ELISA法采用的普通酶标仪，检测更加灵敏。(3)悬浮芯片技术使用主要试剂是生物素亲和素，其亲和力高达1015L/mol[16，17]，比抗体亲和力高10000倍以上。悬浮芯片技术信号放大更灵敏，更稳定，受环境干扰较小。(4)悬浮芯片的抗原抗体反应在液相中进行，有效地保证了试剂的活性；而且检测微球的比表面积远大于酶标板的底部，使反应更加充分；而ELISA法反应在固相中进行。(5)悬浮芯片的标准曲线是多元参数的Logistic回归曲线，检测范围宽；而常规ELISA法多用直线方程，使用曲线方程在一定程度上可增加其检测范围。
3.4 两种方法检测的特异性测定
由表2可知，不同浓度下的沙丁胺醇莱克多巴胺的MFI和阴性对照组无显著性差异，P>0.05；加入不同浓度庆大霉素和红霉素对检测无明显干扰，P>0.05。因此，悬浮芯片检测的特异性良好，与其它药物无明显交叉反应。同时，用ELISA对表2中药物的CR进行测定，CR均
3. 5 盲样的测定
测试结果和实际浓度值的比对见表3。由表3可见，悬浮芯片检测浓度值与实际浓度偏差为8.09%～17.03%，可认为偏差相对较小。由于多种靶标物盲样的浓度低于ELISA的检出限，并未能对其进行检测。在其检测区间内，ELISA与实际浓度偏差为9.19%～17.74%，偏差也相对较小。悬浮芯片法对盲样测定的检测区间较宽，与ELISA法相比，有较大的优势。
表3 3种兽药残留盲样的检测（略）
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