有核细胞计数

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有核细胞计数范文第1篇

【关键词】 幼儿急疹;中性粒细胞;淋巴细胞;动态变化

【Abstract】 Objective To investigate the characteristics of WBC count and its assortment in peripheral bloodin childrenwho suffered fromexanthema subitumat different stage, and to provide data for diagnosis and treatment. Methods From 2002 retrospective studyabout clinical data, hemogram, treatment and prognosis was done on 532 cases ofexanthema subitum. Results The counts of WBC and neutrophilic granulocytewere higher or normal at day 1 of fever,but they were considerably lower at day 4. Levels increased gradually when the patients condition improving. The counts of WBC rised to normal level and neutrophilic granulocyte also increased apparentlyat day 8. Neutrophilic granulocyterised to normal level at day 14. Conclusion ①In the initial stage of exanthema subitum,an elevated or normal WBC andneutrophilic granulocyte count is usually present. In the acute stage,they decrease apparently,but neutrophilic granulocyte rise slowlier than WBC.②Dynamic viewing hemogram is helpful for differential diagnosis for exanthema subitum and other exanthematous disease.③Decreasetypeof WBC and neutrophilic granulocyte isrelevant to the proportion of lymphocyte. The increase of lymphocytes proportionis perhapsa kind of protective cell immunity.

【Key words】 Exanthema subitum;Neutrophilic granulocyte;Lymphocyte;Dynamic viewing

幼儿急疹亦称婴儿玫瑰疹，是儿科临床常见的发热性出疹性疾病，常见于 6~18个月，3岁以后发病少见，无性别差异，多发生于春秋季。它的特征是发热 3~4 d,热退后全身出现红疹，并很快消退。皮疹出现以前高热不退，症状和体征方面缺少典型的阳性发现，早期难以确诊［1］。它是病毒引起的急性传染病， 1988年Yamanislfi等首先证实了人类疱疹病毒6型(HHV-6)是幼儿急疹的病原体。一般认为，病毒感染时外周血白细胞大多正常或减少。但并非所有病毒感染引起的血象变化规律一致，在此就近8年来我们临床观察的532例幼儿急疹患儿不同病程血象变化特点归纳如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 532例患儿均为2002年7月至2010年6月在深圳市妇幼保健院儿科因发热来就诊的而确诊为幼儿急疹的病例，男281例，女251例，年龄1个月至2.5岁。既往无粒细胞减少史及遗传病史；除外急性白血病、再生障碍性贫血及恶性肿瘤引起的粒细胞减少症。

1.2 诊断标准 典型的幼儿急疹具有以下特点：①发热1~5 d， 体温高达39℃~40℃或更高。②热退后面部及躯干出现红色斑丘疹，持续 3~4 d，部分患儿软腭可出现特征性红斑。③其他症状包括眼睑水肿、前囟膨隆、咳嗽、腹泻、 惊厥等。④多数患儿颈部及枕部淋巴结增大。⑤外周血白细胞计数降低，淋巴细胞增高［2］。

1.3 检验方法 患儿发热1 d内取末梢血20 μl，采用5DFF全自动分析仪计数外周血细胞及分类，如发现血象有明显异常，再人工复检一次。第4天、第8天、第14天各复查 1次血常规。

1.4 治疗方法 ①确诊前予抗病毒药或抗病毒药+抗生素以及解热镇痛药。② 确诊后予维生素B4+鲨肝醇口服治疗。

1.5 统计学方法 采用SPSS 11.0统计软件，

计量资料采用t检验，P

2 结果

病程第1天大部分患儿白细胞数、粒细胞数正常或稍高，病程第4天白细胞数、粒细胞数明显下降，与第1天相比有极显著性统计学差异；随病情恢复，白细胞数和粒细胞数数逐渐上升，第8天白细胞数与第1天比无显著性统计学差异，与第4天比有极显著性统计学差异；但粒细胞数恢复稍慢，与第4天比有极显著性统计学差异，与第1天比较差异有统计学意义，到第14天粒细胞完全恢复正常，与第1天比差异无统计学意义，与第4天比差异有统计学意义；1周内白细胞总数恢复正常的占86％， 而1周内中性粒细胞恢复正常的仅占60 ％， 提示白细胞总数较中性粒细胞先恢复。

3 讨论

1988年 Ya ma n i s h i 等首先证实 了HHV-6的原发感染多见于 6个月至2岁的婴幼儿，感染后大多无临床症状，少数可引起幼儿急疹。幼儿急疹是幼儿常见的热性发疹性疾病，在因发热性疾病而到医院就诊的儿童中占 10％~45 ％。HHV-6最早是从淋巴系统增生性疾病患者的外周血中分离出来的，起初认为HHV仅感染B淋巴细胞,随后发现其具有广泛的细胞侵噬范围，可感染B、T细胞及单核巨噬细胞［3］,抑制骨髓,继而影响血象。李其等认为病毒感染引起的白细胞减少大多为真性粒细胞减少，包括粒细胞生成减少或破坏增多以及骨髓的无效增生等，并非粒细胞成熟停滞［4］。这是机体在对抗病原体过程中的一种免疫反应，是机体的一种保护机制，并非病情严重的表现。本组资料中白细胞及中性粒细胞减少患者病情恢复快，预后良好的表现也进一步支持上述观点。白细胞数和中性粒细胞数减少不完全同时出现，有一部分病例仅是白细胞总数或中性粒细胞数单独减少，这与外周血淋巴细胞的比值有很大关系，但中性粒细胞减少与淋巴细胞增高之间究竟通过何种机制来相互影响，有待于进一步研究。

一般认为，细菌感染时外周血白细胞总数大多增加，中性粒细胞亦经常增加，淋巴细胞相对减少；病毒感染时外周血白细胞大多正常或减少。但这只是个笼统的观点，临床应根据具体情况来分析，诸如重症细菌感染在疾病极期亦可出现白细胞和粒细胞低，而病毒感染在早期白细胞和粒细胞可升高。幼儿急疹时由于存在感染、发热等原因，机体经常处于应激状态。应激状态时外周血多形核白细胞数目增多，核左移［5］。故感染的早期中性粒细胞经常增加。体温越高，应激反映越强，因此中性粒细胞的增加也就更明显。应激由开始的警觉期逐渐向抵抗期过度，以交感一肾匕腺髓质兴奋为主的-些反应将逐步消退,因此中性细胞逐渐减少。正常情况下，婴幼儿的淋巴细胞约占0.60,年龄越小，白细胞的总数越高，淋巴细胞的绝对数值越大。如果应激反应的程度相同，中性粒细胞增加的程度也相同，那么年龄越小，由于应激反应前淋巴细胞较多，所以应激反应发生后中性胞所占的比例相对较小。

幼儿急疹的早期，由于中性粒细胞经常增高，故以白细胞计数和分类来鉴别病毒或细菌感染是困难的，以中性粒细胞的绝对或相对增高作为使用抗菌药物的依据是不可取的。疾病极期白细胞和粒细胞明显减少，这为幼儿急疹的诊断提供了参考依据，因此，临床医师应动态观察患儿血象变化，以避免误诊。我们的体会是，婴幼儿第一次发热并伴血象异常时，应在排除幼儿急疹后考虑其他血液系统的疾病，避免过度治疗。

参 考 文 献

［1］ 诸福棠，吴瑞萍，胡亚美.诸福棠实用儿科学.第4版.北京：人民卫生出版社,1994:13.

［2］ 照日,乔海平.人类疱疹病毒 6、7、8型感染(包括幼儿急疹)//胡亚美，江载芳.诸福堂实用儿科学:上册.第7版.北京:人民卫生出版社,2002:736-741.

［3］ 刘军连,徐志凯,闫庆国,等.人类疱疹病6型感染与淋巴瘤关系的初步研究.细胞与分子免疫学杂志,2003,19(6)：565-56.

［4］ 李其，高红英.小儿感染性疾病与粒细胞减少症.天津医科大学报，1999, 5(3)：79-80.

有核细胞计数范文第2篇

【关键词】煤矿作业工人；尘肺患者；诱导痰

尘肺病是一种慢性病，也是我国较常见的职业病，其发病与工作性质有关，煤矿作业工人是此病的多发人群.我国对这项疾病的监测手段缺乏，诱导痰技术正好弥补了这项不足，为检测和确诊尘肺病提供了依据[1-2]。本文进行了细致的分析比较，具体情况如下。

1资料与方法

1.1临床资料选取10例健康人群和20例尘肺患者，全部为男性。将20例尘肺患者按相关文献[3]标准接尘工龄划分为l、3、5、8及10a组，组间平均年龄相差不超过5岁，5组分别有4、3、5、3和5名工人，其中I期13例，II期7例，平均年龄（62.5±6.4）岁，标记为观察组。10例健康人群检查均无心肺功能疾病，年龄43-75岁，平均年龄（63.4±7.6）岁，标记为对照组。两组患者一般情况等方面均无显著性差异（P>0.05），具有可比性。

1.2诱导痰方法及分类计数对象先漱口三次，应用超声雾化器分别吸入30、40和50g/L生理盐水，待有痰时用力咳出，收集的痰液要多于2ml，并在2小时内处理痰标本。在痰液中加入3倍体积的lOg/L二硫苏糖醇震荡混匀，置于37℃水浴中振荡lOmin，涡旋振荡5min，最后2000r/min离心10min，分离痰液中的液体及细胞成分。将离心后的痰液放在玻片上自然风干，做染色，使用单盲法计数。

1.3观察指标对M、N、L和Eo细胞计数情况和细胞总数计数。

1.4统计学方法采用SPSS13.0统计软件进行统计分析，采用LSD-t、t检验，P

2结果

2.1不同工龄尘肺患者痰细胞计数及分类计数情况工作超过10年以上的工人，M的值都比其他组的数值高，结果具有统计学意义（P

2.2尘肺患者与健康人群痰细胞计数及分类计数比较尘肺患者与健康人群的细胞总数和细胞分类计数比较，结果不具有统计学意义（P>0.05），见表2。

3讨论

诱导痰因为是直接对痰标本进行分析处理，而且分析处理必须是在取得痰标本的2个小时内，结果的准确性较高。它也是一种无创方法[4-5]，提高了患者的舒适度。尘肺病是一种常见的职业病，因为工作性质关系多发于煤矿作业工人，尤其是挖掘工等需在井下直接接触尘粉的工人，对煤矿作业工人的身体健康带来极大的威胁，也带来了沉重的心理负担和经济压力。本文针对尘肺患者和健康人群进行诱导谈细胞计数分析，汇总各项数据后结果显示：在10年以上工龄中，巨噬细胞（M）的值都比其他组的数值高，结果具有统计学意义（P0.05）。可见，巨噬细胞（M）可以作为早期预防和检测尘肺病的指标，诱导痰方法安全可靠、痛苦少、费用低，可以成为定期监测煤矿作业工人身体健康状况的手段。

参考文献

[1]陈卫红.尘肺防治的研究进展与展望[J].中华劳动卫生职业病杂志，2006，24（9）：512-513.

[2]乔俊华.大鼠煤工尘肺动物模型的研究[D].长春：吉林大学，2009.

[3]高衍新，王瑞.痰液诱导技术及其应用研究[J].中国职业医学，2007，5（34）：426-428.

有核细胞计数范文第3篇

关键词：数字化变电站；继电保护系统；信息流；可靠性；

Abstract: This paper is based on the analysis of system components of digital substation relay protection based on the protection system, information analysis of the topological structure of all kinds of information flow loop is possible. The path connectivity using two terminal network set algorithm for reliability calculation of the information flow, and series parallel model will be redundant configuration in the system of relay protection, consideration, and eventually establish a reliability evaluation model and method of the digital protection system of the general. Finally introduces the model and method of reliability evaluation software, and uses the actual protection scheme to validate the model and methods of reliability evaluation.

Keywords: digital substation; protection system; information flow; reliability;

中图分类号：TM713文献标识码：A文章编号：

1 数字化变电站继电保护系统的组成

信息的数字化和通信的网络化是数字化变电站的特点，因此继电保护系统不同于传统变电站由互感器、保护单元和断路器通过点对点方式连接的简单结构，会有更多的元件加入其中。合并单元用于汇集和合并多个互感器的采样数据并以一定的格式编制成数据帧上传给交换机。智能终端作为断路器等一次设备侧的数字化智能组件，在保护系统中主要用于接收保护单元发来的跳合闸和闭锁信息去控制断路器的动作，以及负责采集断路器的开关位置等信息并上传给保护单元。交换机组成的网络取代了传统的二次电缆，成为合并单元与二次设备之间信息传递的平台，有利于各设备之间信息的共享。由于继电保护对各种事件发生的时间序列有严格的准确性要求，各设备在输出信息时需要附加精准的时标信息，这就需要全站的同步时钟源进行统一对时。

2 数字继电保护系统的信息流与拓扑结构

同步对时信息、以SV 报文形式传输的采样信息、以GOOSE 报文形式传输的断路器控制及状态信息是数字化继电保护系统中的三类重要信息。

2.1 同步对时信息

同步对时信息回路的起点是同步时钟源，其主要用来接收GPS 或北斗系统的时钟信号，然后以固定的时间间隔向合并单元、保护单元和智能终端等设备发送对时信息。现有的变电站对时方式主要有脉冲对时、编码对时和网络对时三种，其中在过程层最常用的是编码对时中的IRIG-B 码对时和网络对时中的PTP（IEEE 1588）对时。当对时方式不同时，其拓扑结构也会有所变化。脉冲对时和编码对时需要专用的对时网络，由

同步时钟源直接通过传输介质与需要对时的设备相连，一般为星型结构或分级星型结构，图1 所示为星型结构。

图1 脉冲对时和编码对时的对时回路结构图

络对时的方式如图2 所示。它需要借助支持网络对时的交换机以及由其组成的以太网，可以单独组网也可以与SV、GOOSE 等报文共用一个通信网，当采用后者时可以有效的减少交换机和光纤的使用。网络对时的拓扑一般为树状路径，对时信息由同步时钟源出发经过交换机组成的网络到达需要对时的设备，冗余度较高。

图2 网络对时的对时回路结构图

2.2 SV 报文信息

SV 报文信息回路起始于互感器，经由合并单元和交换机网络后，最终到达保护单元，如图3 所示，其中交换机网络用虚线表示，是由于采样值传输可采用不同的规约，有些规约只支持点对点传输，不需要交换机网络。目前常用的采样值传输规约有IEC 60044-7/8、IEC 61850-9-1 和IEC 61850-9-2。

图3 SV 报文信息回路结构图

IEC 60044-7/8 采用FT3 帧格式，不支持以太网组网，只能通过串行口实现点对点传输，传输介质一般为光纤或是电缆，由于是非以太网传输方式，其数据传送的延时是恒定不变的，因而采用此规约的合并单元不需要外部对时，同时也省去了交换机的环节，结构较为简单，然而点对点的传输方式将使传输介质的使用量增加，对可靠性产生影响。

IEC 61850-9-1 是为兼容IEC 60044-7/8 而制定的规约，数据内容与后者相同均为固定格式，通讯方式为逻辑点对点的单向广播方式，所以通常也可以不使用交换机，由合并单元通过专用的线路与保护单元相连。然而由于是以太网的传输方式，其CSMA/CD 的介质访问控制方法将造成传输延时的不确定，所以要求合并单元对发出的信息附以精确的时标信息，这就要求外部的对时网络对合并单元的时钟进行对时。

IEC 61850-9-2 报文所传送的数据是可以灵活配置组合的，采用以太网络方式，可以使用点对点方式，也可以采用交换机组网，从而减少接口和传输光纤的数量，与9-1 相同，由于以太网传输延时的不固定，所以需要同步对时。

2.3 GOOSE 报文信息

GOOSE 报文采用者/订阅者的方式，实现装置间一点对多点数据的快速传递。在继电保护系统中，GOOSE 报文一般作为跳合闸信号、开关位置信息和闭锁信号等信息的载体，在保护单元和智能终端之间传输，并最终达到控制断路器的目的，

如图4 所示。

图4 GOOSE 报文信息回路结构图

与SV 报文相同，GOOSE 可以采用点对点的方式连接，也可以采用组网的方式。前者不需要交换机，但在每个保护单元和智能终端之间都要用专用的光纤连接，后者更符合IEC 61850 的标准和信息共享的原则，但在网络流量过大时会对跳合闸的实时性产生影响，因此一般赋予GOOSE 报文较高的优先级，从而保证其可靠传输。

3 数字化继电保护系统的可靠性分析

如果将传输介质看作节点间的线段，而其他元件看作节点，数字化继电保护系统可以看作一个连通网络系统，各类信息回路的可靠性可以运用最小路集法计算二端网络连通率。

1）对时回路的可靠性计算。对于需要对时的合并单元、保护单元和智能终端等元件，只有对时回路保持连通，这些元件才有可能正确工作，因此可以将对时回路的可靠性加入设备本身的可靠性，形成修正后的元件可靠性，如式（1）~式（3）所示。

(1)

(2)

(3)

式中：、、分别表示修正后的合并单元、保护单元和智能终端的可靠度； 、 和 分别表示同步时钟源分别到合并单元、保护单元和智能终端的第i 条最小路径；n 表示最小路径的数量。

对于图1 所示星型结构的对时回路，L 只包括1 条从同步时钟源经传输介质到对时元件路径，以合并单元为例此时的修正元件可靠度为

(4)

式中，、 和分别表示同步时钟源、传输介质和合并单元的可靠度。对于网络对时，由于有交换机网络的加入，对时回路拓扑结构将变得复杂，最小路径数量n 也相应增多，但其可靠性计算处理方法同式（1）~式（3）。

2）SV 回路和GOOSE 回路的可靠性计算。这两个回路的区别是待计算的二端网络起始节点与终端节点不同，具体计算表达式如式（5）~式（6）。

(5)

(6)

式中：和分别表示SV 和GOOSE 回路的可靠性； 和分别表示互感器到保护单元和保护单元到断路器的第i 条最小路径。

式（5）为一套保护对应一个互感器的情况，当一套保护对应n 个互感器时，如果这些互感器不是冗余配置，则每条互感器的SV 回路都应保持畅通，其之间应为串联关系，即

（7）

式中，表示第i 个互感器对应的SV 回路的可靠性。

如果是冗余配置，则只要一条SV 回路保持畅通，保护就能正常工作，此时应为并联关系，即

（8）

同样，式（6）为一套保护对应一个断路器的情况，一般断路器很少会进行冗余配置，当一套保护控制n 台断路器时，其之间的GOOSE 回路应为串联关系，即

（9）

式中，表示第 i 个断路器对应的GOOSE 回路的可靠性。

需注意的是，上述路集计算中，合并单元、保护单元和智能终端的可靠度要用式（1）~式（3）对时回路修正后的可靠度所代替。

3）系统整体可靠性计算。由于一套保护需要SV 回路和GOOSE 回路同时正常工作，因此对于继电保护系统的可靠性来说两者之间为串联关系，由式（8）、式（9）得

(10)

式中，表示整个保护系统的可靠性。当保护单元冗余配置时，应分别计算每套保护对应的SV 回路和GOOSE 回路的可靠性，最终各套保护之间并联就是整个保护系统的可靠性，即

有核细胞计数范文第4篇

关键词 眼睑基底细胞癌 手术切除 游离皮片 整形

基底细胞癌是皮肤常见的一种恶性肿瘤，眼睑是其好发部位，发病率高，占眼睑恶性肿瘤的第1位。基底细胞癌恶性程度较低，一般局限性生长，很少发生转移。眼睑基底细胞癌需大范围切除皮肤，造成大范围眼部皮肤缺损，以前大多采用带蒂全厚皮瓣转移，但其设计复杂，转移带蒂全厚皮瓣局限，眼睑、面部瘢痕明显，2000～2010年行基底细胞癌切除联合游离全厚皮片移植术患者35例，取得了良好的效果，现报告如下。

资料与方法

本组眼睑基底细胞癌患者32例，男19例，女16例，年龄65～82岁，平均75岁。发病至就医的时间：0.5～3个月，眼睑基底细胞癌的部位：下眼睑29例，上眼睑5例，内眦部1例。所有病例都经术前活检，病理切片均为基底细胞癌，眼眶CT：肿瘤未侵犯眼眶。全身检查未见肺、骨、淋巴结、肝、脾和肾上腺等转移。术前检查：血常规、尿常规、心电图、出凝血试验、肝常规功能、肾常规未见异常，3例糖尿病患者经内科控制血糖后正常。

治疗方法：①局部仅用0.3%妥布霉素滴眼液眼，手术当日早晨备皮，用肥皂水清洁左上臂内侧皮肤，75%酒精消毒，用干净纱布包扎备用。②手术方法［1］：麻醉方法：局部浸润麻醉。距肿瘤边缘5mm，深达睑板面(本组病例肿瘤未侵犯睑板)切除，充分的压迫止血。术中冰冻切片检测标本的边缘，确定肿瘤完全切除。然后分别用直尺或圆规测量出眼睑皮肤缺损大小，并充分压迫止血。换手套和器械后，在上臂内侧切取超过创面大小的全厚皮片，供皮片区四周作皮下潜行分离，拉拢缝合，包扎。睑缘牵引线拉开创面，皮片与创缘缝合，并预留打包线。缝合完毕后植皮区包堆固定，结扎打包线，其外敷料、绷带包扎。③术后处理：术后静脉给予抗生素3～5天，3例糖尿病患者继续控制血糖。2天后首次换药，并除去绷带减压，抗生素液滴眼。10天后打开包堆拆线，同时拆除供皮片区缝线。病员出院。

结 果

35例(35眼)游离全厚皮片完全存活，眼睑无畸形、功能良好，无术后感染，无移植皮片坏死现象。随访6个月～10年，未见基底细胞癌复发和转移。有3例死亡，2例死于心脑血管疾病，1例死于糖尿病并发症，都不是死于基底细胞癌复发和转移。

讨 论

基底细胞癌是人类最常见的恶性肿瘤，90%病例发生在头颈部，其中10%波及眼睑。基底细胞癌是迄今为止眼睑最常见的恶性肿瘤，占所有病例的90%［2］。基底细胞癌多发生于下睑，约占全部病例的65%，内眦部和上眼睑各约为15%，外眦部最少，约5%［3］。临床上常见的基底细胞癌有结节型、结节-溃疡型、硬化型三种类型，其中结节型、结节-溃疡型最为常见。手术切除是眼睑基底细胞癌的主要方法，手术切除范围应足够大，应去除所有肿瘤组织，同时尽可能保留正常眼睑组织。本组病例发病至就医的时间短，未见侵犯睑板和眼眶，未见全身转移。

游离皮片移植是指通过手术的方法，切取部分厚度或全层厚度的皮肤，它与身体(供皮区)完全分离，移植到身体另一处(受皮区)，重新建立血液循环，并继续保持活力，从而达到修复皮肤缺损和整形的目的。全厚皮片包含皮肤的全层组织，但不包括皮下脂肪组织。全厚皮片是游离植皮效果最好的一种皮片，也是眼睑皮肤缺损修复中最常用的皮片。皮片具有成活后挛缩程度最小，能耐受较大外力的压迫和摩擦，皮片质地柔软，活动度好，色泽变化少等许多优点。我们所有病例均采用在上臂内侧处取皮片，色泽与眼部皮肤基本一致，操作方便。游离皮片移植设计简单、可取大范围皮片，克服了滑行、旋转、交错皮瓣设计复杂、取材局限、眼睑面部瘢痕明显等缺点，本组病例游离全厚皮片完全存活。

参考文献

1 孟利娟,张爱武.全厚皮片移植术在眼科的应用体会［J］.中原医刊,2006,33(5):55.

有核细胞计数范文第5篇

【关键词】细粒棘球蚴；TGF-β1；cyclin E；肝损伤

包虫病（hydatidosis）是一种古老的人畜共患性寄生虫病，又称棘球蚴病（Echinococcosis），分布遍及世界各国，在我国中西部地区高发。细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus，Eg）引起的囊型包虫病（Cystic Echinococcosis， CE）发病率较高，严重危害人民健康[1]。Eg感染宿主后，虫体对其实质性脏器产生物理占位作用，挤压肝脏等重要器官，继发产生炎性细胞浸润，成纤维细胞增生导致严重的纤维化，形成纤维性囊壁[2]。

而目前对TGF-β1在Eg感染的小鼠肝脏内发挥的作用尚不明确，本研究以囊型包虫病小鼠动物模型为对象，通过Western blot来检测肝脏组织中TGF-β1、cyclin E的表达情况，来初步分析Eg感染对宿主肝脏功能的影响，为临床包虫病的早期诊治奠定基础。

材料与方法

1. 动物模型的制备：20只雌性Balb/c小鼠（新疆医科大学实验动物中心提供，体重16-20g），随机分为实验组（10只）和对照组（10只）。实验组予10%水合氯醛麻醉，开腹直视下肝脏左叶注射0.1ml细粒棘球蚴混悬液。对照组注射无菌PBS液。90天后无菌条件下解剖小鼠。实验组每只小鼠根据病灶和病灶近旁采集肝脏标本，冻存于-80℃冰箱中保存。对照组保存使用方法同实验组。所有小鼠手术取标本前均留取静脉血1mL装于EP管中待检。

2. 材料：抗TGF-β1、cyclin E抗体及抗β-Tubulin抗体均购自武汉博士德生物工程有限公司；ALT和AST测定试剂盒购于上海复旦张江生物医药股份有限公司。

3. 肝功能检测： 所制备的血清利用美国Abbott公司AEROSET2000型全自动生化分析仪检测ALT和AST，以确定小鼠肝脏受损情况。

4. Western blot检测TGF-β1、cyclin E蛋白表达

取100mg肝脏组织，用BCA蛋白定量试剂盒检测蛋白浓度。各样品分别按照50μg上样进行SDS-PAGE凝胶电泳，然后电转至PVDF膜，用TBST配制浓度为50g/L脱脂奶粉37℃封闭1h后，分别加入兔来源多克隆抗体TGF-β1（1：200）、cyclin E（1：200）、β-Tubulin（1：700）4℃孵育过夜，碱性磷酸酶标记的羊抗兔IgG（1：2000）杂交，洗膜后显色。利用凝胶成像仪采集图像得到最终结果。

5.统计学处理

采用SPSS17.0统计学软件对数据进行处理。计量资料以均数±标准差（ ±s）表示，采用两独立样本t检验进行统计分析，P

结果

1. 小鼠肝功能结果：

造模90天后，实验组小鼠血清ALT和AST分别比对照组增高4.58%、9.14%，结果无统计学差异（P>0.05）。

2.. Western blot检测TGF-β1、cyclin E蛋白表达

Western blot检测结果经BIO-RAD凝胶成像仪灰度扫描后与内参β-Tubulin比较分析显示：实验组Balb/c小鼠肝脏TGF-β1、cyclin E蛋白表达量分别是对照组的1.32倍、1.13倍，其中TGF-β1的表达差异有统计学意义（P0.05）。

讨论

本研究利用Balb/c小鼠继发感染囊型包虫病动物模型，发现虽然Eg感染后所形成包囊的角质层较厚，对宿主肝脏的侵蚀不及Em那样剧烈，但是仍有多种细胞活性物质可以穿过Eg囊壁进入周围组织，干扰宿主正常的细胞活动，对肝脏造成损伤。Eg感染肝组织90天后，实验组血清中，ALT和AST略有增高，分别为4.58%、9.14%，表明Eg的寄生对小鼠肝脏已产生较明显的损害作用。

本研究中的Western blot结果提示，Eg寄生宿主后引起TGF-β1表达的增加。实验组的TGF-β1蛋白表达为对照组的1.32倍，显著增高（P=0.042）。现有的研究已证实TGF-β1可促进基质与胶原形成，是肝纤维化最重要的始动因素之一[3]。而我们的结果也证实了在Eg感染的过程中，可溶性的Eg抗原也刺激宿主淋巴细胞产生TGF-β1等细胞因子，进一步引起肝脏细胞外基质的合成/降解紊乱，加剧了肝纤维化的进程。

本研究通过蛋白表达的证据证明，宿主在Eg寄生过程中，通过激活TGF-β1等细胞因子，从而引发肝脏细胞纤维化为主的肝损伤。此次研究为阐明囊型包虫病的致病机理，及为探索囊型包虫病新的治疗途径奠定基础。

参考文献

[1] 余森海. 棘球蚴病防治研究的国际现状和对我们的启示. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志，

2008，26：241-244.