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【摘要】
目的 :探讨乙肝表面抗原-CD40L胞外段融合蛋白设计的合理性。方法:应用Gene Construction kit 2.5、DNAStar软件和expasy.org网站提供的分析方案分析重组体的开放读框以及融合蛋白的柔性、亲水性、抗原性、表位等性质,并作了二级结构模拟分析。结果:重组体CMV启动子下游有完整的目的基因ORF,融合蛋白二级结构水平未出现新的抗原性及表位,亲水性无改变,Linker部位抗原性低,呈中性且柔性高,不影响两端的蛋白质二级结构及融合蛋白空间构象。结论:重组体设计合理,融合蛋白很大可能保留了乙肝表面抗原和CD40L胞外段的生物学活性,为进一步研究提供了理论依据。
【关键词】 乙型肝炎病毒表面抗原 CD40配体 分子结构预测
Abstract: Objective: To explore the reasonability of the design of HBsAg-ecdCD40L fusion protein. Methods: Using sequence analysis software and protocols prescribed on website expasy.com the open reading frame of the recombinant plasmid and the flexibility,hydrophilicity,antigenicity and epitope of recombinant HBsAg-ecdCD40L were analyzed and the secondary structure of HBsAg-ecdCD40L fusion protein was analyzed,too. Results: The fusion protein had correct domains of HBsAg and ecdCD40L. The linker had low antigencity and high flexibility and might not influence the secondary structure of the fusion protein. Conclusion: The design of the fusion protein is reasonable. It Keeps the maximum biological activities of HBsAg and ecdCD40L.
Key words: hepatitis B surface antigens;CD40 ligand;molecular structure prediction
目前,乙肝治疗性疫苗的研究多是在乙肝表面抗原(HBsAg)基础上进行改造,提高HBsAg的免疫原性是关键,融合适当的免疫调节因子是有效方法之一。CD40L胞外段(ecdCD40L)能与DC表面CD40分子结合,促进DC成熟,诱导特异性免疫反应,与HBsAg融合后有望提高其免疫原性。在本实验中,我们设计了HBV S-ecdCD40L融合基因,重组基因能否有效转录、表达融合蛋白,融合蛋白能否保持原有的生物活性对进一步的研究至关重要,为此,我们利用核酸、蛋白质分析软件以及互联网上提供的方案,分析重组体的开放读框及融合蛋白的生物活性,预测融合蛋白设计的合理性。
1 材料和方法
1.1 材料 ayw亚型HBV S基因序列(GeneBank编号AF280817),人CD40L胞外段基因序列(GeneralBank编号NM_000074),pcDNA3.1质粒序列,连接链(Linker)氨基酸序列为GGGGSGGGGSGGGGS。
1.2 引物设计 为避免融合蛋白中HBsAg、CD40L胞外段两个肽段互相干扰,改变两者的性质功能,在两个基因间设计一段Linker,将HBV S基因与CD40L胞外段基因序列相连,根据GeneBank中HBV S基因、CD40L基因序列以及Linker的编码序列进行引物设计,并引入酶切位点(下划线)。HBV S基因引物顺序为上游(SF):5’-GCGGGTACCATGGA
GAACATCACATCAGGATTC-3’,引入了Kpn I酶切位点,下游(SR):5’-GGAGAATTCCACCGCCCGAGCCA CCGCCACCAATGTATACCCAAAGACAAAAGAAAAT-3’,引入了EcoR I 酶切位点以及Linker上半段。CD40L胞外段引物顺序为上游(CD40LF):5’-TTAGAATTCG TGGGTCGGGTGGCGGCGGATCTCTTCATAGAAGGTTGGACAAG ATAGAA-3’,引入了EcoR I酶切位点以及Linker下半段,下游(CD40LR):5’-GCGCTCGAGTCAGA GTTTGAGTAAGCCAAAGGA-3’,引入了Xho I酶切位点。
1.3 pcDNA3.1-S-ecdCD40L真核表达载体的构建和软件分析模拟
1.3.1 pcDNA3.1-S-ecdCD40L真核表达载体的构建:PCR扩增得到S基因、CD40L胞外段基因后,两者经EcoR I酶切连接,连接后以SF和CD40LR为上下游引物进行PCR扩增,获得HBV S-ecdCD40L融合基因。融合基因通过Kpn I和Xho I双酶切与pcDNA 3.1(+)进行连接,所得重组体称为pcDNA3.1-S-ecdCD40L,表达融合蛋白称为乙肝表面抗原-CD40L胞外段融合蛋白(HBsAg-ecdCD40L)。
1.3.2 重组体读框分析:Gene Construction kit 2.5软件分析,起始密码子为ATG,终止密码子为TGA。
1.3.3 融合蛋白理化性质分析:应用expasy.org网站提供的ProtParam方案以及DNAStar软件中的Protean程序进行分析。
1.3.4 柔性分析:应用expasy.org网站提供的Protscale方案以及Protean程序进行分析,将HBsAg、CD40L胞外段及融合蛋白序列分别输入,以9个氨基酸为一组进行分析,将结果进行比较。
1.3.5 抗原性分析:应用Protean程序进行分析。
1.3.6 表位分析:应用Protean程序进行分析。
1.3.7 二级结构分析:应用expasy.org网站提供的HNN方案进行分析。
2 结果
2.1 重组体作图及读框分析结果 将HBV S-ecdCD40L融合基因插入pcDNA3.1(+)真核表达载体多克隆位点,经读框(ORF)分析证实CMV启动子下游有完整的目的基因ORF(见图1)。
2.2 理化性质分析结果 ProtParam分析显示融合蛋白分子量:50813.7 Da,等电点:8.46,负电荷残基总数(Asp+Glu):28,正电荷残基总数(Arg+Lys):34,分子式:C2304H3541N593O646S29,半衰期:30 h(哺乳动物),不稳定系数[The insta-bility index(II)]:51.23,该蛋白分类为不稳定蛋白。Protean软件分析可知,HBsAg-ecdCD40L与HBsAg、ecdCD40L比较,各自的亲水性无改变,同时Linker部位呈中性,说明两个基因连接之后的亲水性和疏水性未受影响(见图3)。
2.3 柔性分析结果 柔性区的存在可使两侧的蛋白功能区正确的折叠,从而产生正确的生物结构和空间构象。经分析证实227到243位氨基酸(linker所在部位)存在高柔性区,连接链两侧的柔性区未发生改变,说明模拟表达的HBsAg和ecdCD40L由柔性肽连接,伸展性大,可自由活动,能发挥各自的生物学效能(见图2、图3)。
2.4 抗原性分析结果 融合基因表达后新接入的Linker部位不应该产生新的抗原性,而且Linker两侧的抗原性不应发生改变,HBsAg-ecdCD40L的氨基酸序列经软件分析并与HBsAg及ecdCD40L氨基酸序列的分析结果进行比较,结果显示Linker部位抗原性低,Linker两侧序列的抗原性未发生改变(见图3)。
2.5 表位分析结果 软件分析HBsAg-ecdCD40L的表位特征并与HBsAg以及ecdCD40L的表位特征比较,结果显示HBsAg-ecdCD40L具有原来各自的表位特征,无新表位出现,Linker部位(227~243位氨基酸)表位值低,说明HBsAg和ecdCD40L连接后相互之间几乎没有影响,没有新的表位出现(见图3)。
2.6 二级结构预测结果 利用HNN方案预测HBsAg-ecdCD40L融合蛋白的结构,提示其二级结构由Alpha helix(Hh): 38.78%,Extended strand (Ee): 14.16%,Random coil (Cc):47.06%构成,linker所在部位基本为无规则卷曲,不影响两侧HBsAg和ecdCD40L的结构(见图4)。
3 讨论
乙型病毒性肝炎是世界范围内广泛传播的传染性疾病,近几年的研究表明乙型肝炎病毒(HBV)感染的控制和清除有赖于机体的免疫系统, 其感染慢性化与机体针对HBV的特异性免疫, 尤其是细胞免疫的缺陷或低下有关。DC是体内功能最强的专职抗原递呈细胞,能摄取、加工并递呈抗原,刺激未致敏T细胞的增殖和活化从而启动机体的特异性免疫应答。研究显示,慢性乙型肝炎患者存在DC功能缺陷,诱导HBV特异性T细胞反应能力受损,无法有效清除病毒,是HBV免疫逃逸机制之一[1],因此,改善DC功能,诱导和增强机体HBV特异性免疫的治疗方法有望取得良好的抗病毒效果。
CD40L属TNF超家族成员,是一种II型跨膜糖蛋白,是参与机体特异性细胞免疫应答和体液免疫应答的重要免疫共刺激分子,能与表达于DC表面的CD40分子相互作用,调节免疫反应。经CD40L刺激后的DC具有如下特性:①抗原递呈能力增强;②具有较强的T淋巴细胞趋化能力;③体外刺激T淋巴细胞增殖反应能力增强;④表面的共刺激分子(CD80、CD86等)明显上调,并能够产生较高水平的IL-12,IFN-γ,TNF-α等细胞因子,促使Th0向Th1分化[2]。研究显示,将HPV E7基因与CD40L胞外段基因融合构建HPV E7-CD40L重组腺病毒,将其导入骨髓来源的DC,24 h及48 h后,E7-CD40L载体转染的DC分泌IL-12,IFN-γ的水平明显高于转染E7载体、GFP-CD40L载体、磷酸盐缓冲液(PBS)的对照组,而且E7-CD40L载体免疫小鼠能通过活化CD8+T细胞杀伤肿瘤细胞,抑制E7+肿瘤细胞生长[3],说明E7-CD40L载体表达的融合蛋白对DC具有明显刺激作用且,CD40L与肿瘤抗原融合后可诱导强大的肿瘤抗原特异性T细胞免疫。基于上述研究基础,我们拟在传统乙肝疫苗广泛使用的HBsAg基础上,融合CD40L胞外段,增强HBsAg的免疫原性,诱导机体产生更强的HBsAg特异性T细胞免疫应答,为新型乙肝治疗性疫苗的研究奠定基础。
获得融合蛋白首先要有科学的设计,并对其空间结构和性质有较准确的预测,而对于新的基因及蛋白,应用生物信息学技术进行分析,是了解其性质、功能的一种有效方法,可为进一步研究奠定基础,使其得到广泛应用[4-5]。我们计划构建pcDNA3.1-S-ecdCD40L重组表达载体,表达HBsAg和ecdCD40L融合蛋白,经读框分析证实,读码框与设计一致,利用软件及互联网上提供方案比较分析证实连接后产物亲水性、柔性、抗原性、表位、二级结构基本无变化,Linker部位具有柔性高、中性、抗原性低、不产生新的表位等特点,理论上不改变两侧蛋白分子的空间结构和生物活性,符合重组体设计初衷,重组体设计合理,表达的蛋白生物活性在融合过程中未受影响。当然,目前的结论只是理论上的推测,需在以后的实验中进一步得到证实。
参考文献
[1] van der Molen RG, Sprengers D, Binda RS, et al.FunctionalImpairment of Myeloid and Plasmacytoid Dendritic Cellsof Patients With Chronic Hepatitis B[J]. Hepatology,2004,40(3):738-746.
[2] Van Kooten C, Banchereau J.CD40瑿D40 ligand[J].J LeukocBiol,2000,67(1):2-17.
[3] Zhang LX,Tang YC,Akbulut H, et al.An adenoviral vectorcancer vaccine that delivers a tumor-associated antigen-CD40-ligand fusion protein to dendritic cells[J].PNAS,2003,100(25):15101-15106.
一、小化角度,限定范围
在话题或命题作文前后添加词语是限定范围,小化角度的最好方法。一旦增添了词语,话题或命题就立即变成主谓短语、偏正短语或动宾短语,受到一定的限定,写作范围就缩小了。如,话题是“微笑”,就拟定“微笑与阳光”;话题是“感恩”,就拟定“要有一颗感恩的心”、“感恩微笑”;话题是“幸福”,就拟定“唱响幸福”、“幸福不是毛毛雨”。
需要说明的是,限定命题作文的构思范围,一定要在草稿完成,或成竹在胸,而不能随意改变命题,不然就会弄巧成拙。有一些半命题作文,选择词语既可决定内容题材,也可以决定写作范围,选择另一半时,既要体现出事物的个性,使题材内容更新更亮,出人意外,还要使词语范围尽量小一些。如,以“那一次,我尝到的滋味”,一般考生大多填的是“胜利”“成功”“失败”、“挫折”等,也有人填“阅读”、“人生”等,这些词语的意思宽泛且又常见,很难写出新意。也有考生结合自己的人生体验和情感精力,选择“挨打”“碰壁”,选材新颖,角度小巧。
二、舍面取点,写细写活
“化大为小”,有时也体现在构思时舍面取点,以点代面。这就是我们平常说的,“滴水见太阳”,“一粒沙里看世界,半瓣花上说人情。因为事物都是相互关联的,点和面是局部与整体、个别与一般的辩证关系。巧妙地从生活中撷取能反映生活本质的“点”,能起到以少胜多的功用。不妨欣赏精彩的片断:
其实,像陶潜、刘禹锡一样,生活简单而有所作为的人很多,如“苟全性命于乱世,不求闻达于诸侯”的孔明,“尝趋百里外,从乡之先达执经叩问”的宋濂……采撷历史长河中的几朵浪花,我们就很容易明白:简单也是一种美。
历史的车轮辘辘远去,时代的汽笛声声高鸣……“简单还适用吗?”赶潮流的年轻人发出这质疑……
其实,生活真的很简单。面对生活中的不幸,多想想“月有阴晴圆缺,此事古难全”,不就少了一份痛苦与忧愁了吗?被物欲所扰,想想“尽管我有很多,但我需要的仅仅是一颗心”,心里就会多一份坦然与豁达。
“采撷历史长河中的几朵浪花,我们明白简单也是一种美”,这正是舍面取点,写细写活的做法。将笔墨聚集到“浪花”上,可以少胜多,事半功倍。陶渊明“悠然见南山”、刘禹锡“何陋之有”都是足以代表简单生活的典范,“不求闻达于诸侯”的孔明、“尝趋百里外”拜师求学的宋濂,追求的都是虽简单却有价值的生活。如此材料,既突出文章的中心,又体现出文章的厚实,主题得到深化,提升了文章的品位。
三、彰显长处,展示亮点
“化大为小”还可以彰显长处,展示亮点。每个人对周围的事物总会有所偏爱,有些学生对音乐有着特殊的爱好且颇有研究,不少同学爱京剧,爱越剧,爱湖北大鼓……不仅自己能说会唱,并且能说出对这些艺术的感悟或见解。作文时,如果能根据文章内容或主旨的需要,恰如其分融入你对这些艺术的鉴赏,展示你独特的人生感悟,以这个点为题材,必定会有非同一般的表现。
看过中考满分作文《聆听音乐》精彩片断,相信你一定会有更多的感悟和启迪。
聆听音乐――
阿炳的一生因有了《二泉映月》不再落寞,《二泉映月》的底蕴,也因有了阿炳的执着追求不再平凡。苍穹之下,太湖边上,一位盲人正抚琴独忧,用悲戚的琴声控诉社会的黑暗,怒斥人心的冷漠。《二泉映月》让阿炳没有光彩的眼睛迸发出坚毅与力量。
聆听音乐――
梁山伯与祝英台的动人一生,也为这精彩音乐增添光彩。聆听着,叫人不禁神往那段凄美的爱情,流连那倾注了太多思念的楼台,迷恋那段幽婉的蝴蝶之舞……回环之余,《梁祝》成了不屈于封建礼教的最强音。
你看,那些耳熟能详的人物以及那些用心血谱就的音乐,在考生娴熟的笔端下缓缓流淌,展示了丰厚的音乐素养,通过音乐的风格、意境,表达独特的人生感受,让人赞叹。不少同学爱京剧,爱越剧,爱湖北大鼓……不仅自己能说会唱,并且能说出对这些艺术的感悟或见解。作文时,如果能根据文章内容或主旨的需要,恰如其分融入你对艺术的鉴赏,展示你独特的人生感悟,那你的作文该会具有怎样的魅力啊!
更为可喜的是,随着素质教育深入开展,《新课程标准》在教学中的渗透,学校对音乐、美术的重视,更有京剧走进学校,相信,会有越来越多的学生能广泛接触自己所喜爱的艺术,并且在这个天地里展示自己的才情。
四、具体而微,精描细写
“化大为小”还体现选取某个独特人物、某个特殊事件来写。如是历史人物与事件,或还原再现其历史情境,或挖掘附于其中的意蕴,甚至还可进行文学性再创造。由于写作角度小,因此便于“深耕细作”、精描细写,往往能充分展示自己的才情识见。
以“交流”为话题。当许多考生还在“学习交流”、“师生交流”、“朋友交流”、“国际文化交流”等大众化角度打转的时候,一考生慧眼独具,选中了“文成和蕃”这段民族交流的佳话,构思精巧,高人一筹。
雄鸡啼破了黑暗,迎来了拂晓,惊醒了梦中佳人。你揉揉惺松睡眼,再次掀起窗帘,你吃惊了:辽阔的草原,一望无垠,小草绿得逼你的眼。你从未看见过这样的世界,于是你知道:从此你将弃轿从骑,你将成为吐蕃一员。一只雄鹰滑过天空,一声呼啸划破宁静,你欣慰地笑了。也许,你并没有想到,你,一个民族的代表,一次义无反顾的交流,将两个民族的血液融为了一体。
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情侣健身励志短语精选1.运动是一切生命的源泉。
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3.健康不是一切,但没有健康就没有一切。
4.身体健康者常年轻。
5.健康是智慧的条件,是愉快的秘诀。
6.静止便是死亡,只有运动才能敲开永生的大门。
7.健身能长寿,不容再等候。
8.现在流的口水,将成为明天的眼泪。
9.运动是生命的滋润剂,健身是青春的美容师。
10.养生之道,常欲小劳,但莫大疲,及强所不能耳。
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独自跑步,不受羁绊,没有约束。有一天,穿上跑鞋,带上自己,有多远,跑多远。
3.器官得不到锻炼,同器官过度紧张一样都是极其有害的。
4.凡事有其自然,遇事处之泰然,得意之时淡然,失意之时坦然。
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10.一个埋头脑力劳动的人,如果不经常活动四肢,那是一件极其痛苦的事情。
11.运动是健康的源泉,也是长寿的秘诀。
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15.生命就是运动,人的生命就是运动。
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12.读书,去别人的灵魂里偷窥。
旅行,去陌生的环境里去感悟。电影,去荧屏里感受别人的生活历程。冥想,去自己内心的秘境里探寻。跑步,去享受别人到不了的世界。
13.生命像河流,运动防腐臭。
14.我荒废的今日,正是昨天殒身之人祈求的明天。
15.从锻炼角度看,躺着不如坐着,坐着不如站着,站着不如走着。
16.世界上没有比坚固的肌肉和新鲜的皮肤更漂亮的衣服。
17.运动太多和太少,同样的损伤体力;
饮食过多与过少,同样的损伤健康;唯有适度可以产生、增进、保持体力和健康。
18.思想大门洞开,情绪轻松愉快,锻炼、营养、药物,健康恢复快哉
19.跑步的真谛是越跑越痛快,跑下去,让软弱离开身体。
近四年,江苏的高考作文题都是“提示语+题目”。虽然“提示语”也得认真分析,但最终还得围绕“题目”去写,从这个意义上说,“提示语+题目”仍然算命题作文。作为“命题作文”的题目有以下情况:
(一)一个词做题目
1、用这个词的本义。如上海题《忙》、北京题《宽容》。
2、用这个词的比喻义。如辽宁题《肩膀》、福建题《季节》。
题目的字越少,可供自由发挥的空间就越大。正因为空间大,也很容易空。可以化大为小,变虚为实,这既便于落笔,也容易写得实在、集中。有个方法,不妨试一试:在这个词的前面或后面加一些字词。这样一来,也许就好些了。比如:
醒:在“醒”前加:梦醒、觉醒、警醒、猛醒……在“醒”后加:醒悟、醒世、醒后是黎明……
生活:在“生活”前加:学习生活、文化生活、多彩的生活、苦难的生活、我的精神生活……在“生活”后加:生活的瞬间、生活的磨练、生活的甜蜜、生活的感悟……
(二)一个短语做题目
1、联合短语。如江苏题《人与路》,虽然可以有所侧重,但“人”与“路”二者都必须写到。
2、偏正短语。如全国题《心灵的选择》,要注意修饰语“心灵”,说明所作的选择不是随便、轻率的,而是严肃、慎重的。
3、动宾短语。如湖南题《谈“意气”》,它规定了论述对象是“意气”,而论点可由自己确定。
(三)一个句子做题目
审题重点一般落在谓语上,如上海题《我想握住你的手》,围绕“握住”做文章:谁想“握住”,想“握住”什么,为什么想“握住”,“握住”以后怎么样。
审清题意后,怎样才能始终扣题而不至于偏题、跑题呢?第一,不要贪多求全:不能把想到的都写进作文中去,这很容易造成内容分散而使主旨不突出。第二,不要节外生枝:写了一件事后,忽然写了一个跟题目关系不大的甚至毫无关系的事,那就偏题了。第三,不要转换话题:开头能扣住题目去写,但中途改变了原先扣题的那个话题,两个话题不是同一概念。第四,不要无限联想:恰当的联想是思考深入的一种表现,但联想太多,难免会出现一些联想偏离题意的情况。
二、高考作文的取材
许多同学都说没什么东西可写,其实可写的内容是很多的。
(一)材料来源
1、心灵世界:①自己成长的经历②自己写过的文章(主要是随笔)
2、现实世界:①家庭情趣②学校生活③社会实践④城市建设⑤环境保护⑥文体活动⑦流行歌曲⑧网络信息
3、阅读世界:①语文课本(诗文名句)②政治教材(哲学原理)③中外历史(名人故事)④课外读物(人文科技)⑤报纸刊物(最新材料)
(二)取材原则
多选亲身经历的,少选道听途说的;多选贴近现实的,少选古代历史的;多选正面积极的,少选反面消极的;多选独特个性的,少选大家熟悉的;多选含有细节的小故事,少选过于浮泛的大事件。
严格审题,紧扣题目,取材鲜活,抒写真情,条理清楚,语句通畅,定能取得高考作文的好成绩。
三、高考作文如何求新
(一)取材求新
1、记叙文
从现实生活中取材,通过一个普通人的变化反映时代的新风貌。从语文课本中取材,为一个文学形象编个新故事。从中外历史中取材,为一位历史人物编个新故事。要重视细节,倾注真情,力求生动。
2、议论文
用一两个事例作论据;用一组数据作论据。论据要新鲜、恰当,还得紧扣题目对论据作理性的分析。
(二)形式求新
这里的“形式”专指文章的外部表现形态。
1、记叙文专用:①用好“三”:三个镜头、三处地点、三张照片、三次对话、三段时间……总之,不要平铺直叙。②用倒叙:先写故事结局,再写故事的经过,最好有点波澜。
2、记叙文、议论文都可用:小标题、日记体、书信体和访谈式。
(三)语言求新
这里所说的“新”是指语言包含的内容很丰富,或蕴含的意思很深刻,或形式很鲜活。要做到全文语言都新,很难;局部有新意,努力一下,还是能做到的。以下方法供选用:
1、引用诗文名句;
2、适量运用修辞;
3、局部变换句式;
4、穿插流行歌词;
5、转引大众民谣。
四、临考做些什么准备
1、继续背诵古诗文名句,不仅要背得熟,更要写得对。这不光是为了应付默写,更是为了能在作文中引用。
2、找十篇近三年的高考佳作认真看一看,不要背,主要是学学人家的构思立意和某些写法。
3、搜索一点近一个月来报刊和网络上的信息,以便作为高考作文的鲜活素材。
根据英语新课程标准,突出学生自主学习的主体地位,培养学生积极主动探究知识的欲望和运用语言的能力。倡导体验,实践,参与、合作与交流的方式和任务型的教学途径,培养学生综合运用语言的能力。
二、教材分析
本课时是《牛津初中英语》8B Unit5 Good manners中Reading部分的第一课时。本单元主要了解及学习各种好的礼仪相关的词汇,学生能够谈论公共场所应该掌握的礼仪及规则,我们应该和不应该做的事情。本课时阅读教学的第一课时,主要学习并了解英国的有关礼仪,学会入乡随俗,了解异国文化,尊重他国的风俗及礼仪。提高自身礼仪素养。从而让学生用学到的知识谈论自己的感悟,真正把英语学习投入到实践生活中,达到学以致用的目的。
三、教学目标
1.知识目标:能听懂并正确朗读本课时涉及的四会单词,掌握重要短语,理解重要句型。
2.技能目标:①能\用默读、快读、细读和研读等阅读方式阅读课文,了解英国的有关礼仪,学会入乡随俗,了解异国文化。②尊重他国的风俗及礼仪。提高自身礼仪素养。③培养学生自主学习的学习习惯,能积极参与小组合作交流,进一步巩固对文章的理解。
3.情感与态度目标:①进一步激发学生学习英语的热情,培养学生思维的发展。②培养自主学习、分组讨论、大胆开口、善于模仿的能力。③通过本课时的学习,激发学生热爱自然的情感‘感悟一个人要想在某方面取得成功与自身的兴趣、天赋、勤奋、努力是分不开的。
四、教学重点和难点
1.教学重点:通过多种形式的阅读活动与任务培养阅读策略,掌握一些阅读技能,提高阅读理解能力。
2.教学难点:帮助学生增长知识,拓宽视野,培养学生树立正确的人生观。
五、教学方法
1.直观法:运用一小段专家解读英国礼仪的小视频导入新课,课堂中运用多媒体课件展示英国礼仪的图片呈现词汇,调动学习积极性,提高教学效果。
2.任务型教学:教会学生运用不同的阅读技巧,获取有用的信息,达到理解文章的目的。
3.分层段教学:依据学生的认知规律,由浅入深。
4.小组合作探究:培养学生合作交流学习的能力和综合运用知识的能力及团结协作的精神。
六、教学过程
【目标定向】
〔A〕1.能听懂并正确朗读本课时涉及的四会单词,掌握重要短语,理解重要句型。(self-assessment:Good Not bad Bad )
〔B〕2.通过多种阅读技巧,了解英国的有关礼仪。
(self-assessment:Good Not bad Bad )
〔A〕3.学会入乡随俗,了解异国文化,尊重他国的风俗及礼仪。提高自身礼仪素养。
(self-assessment:Good Not bad Bad )
【个体自学】
读前(Pre-reading)
〔A〕1.Warm up: Enjoy a video and know something about manners in the UK.
〔A〕2.呈现有关英国礼仪的图片,同时呈现本课新单词和词组。
〔A〕3. Do Part B1 on page 68.
读中(While-reading)
(A)1. First reading .Read the interview quickly and answer the questions.
(1) What is the interview about ?
(2) Who is Daniel interviewing ? ?
〔B〕2.Second reading 将对话分为四部分。
3.Third reading .Read the conversation carefully
(A)4.Fourth reading .Read the interview carefully and then complete B2 on page 68.
5.Fifth reading. Enjoy the reading. Read after the tape.
Good manners in the UK
How to greet people
How to start a conversation
How to behave in public
How to behave at home
【同伴互导】
读后(Post-reading) If you want to go to the UK ,you need to know good manners in the UK Please make a dialogue with your partner.
A:What do people do when they meet for the first time/ How do people start a conversation/How do people behave at home?
B:They say ‘Hello” or …
A:Do they usually greet with a kiss/Do people behave politely in public?
B:Yes/No,…
【教师解难】
Enjoy some pictures find the differences in manners between the UK and China.
(1)Do we always queue?
(2)Do all Chinese people behave politely in public?
(3)Should we be kind to the elderly?
(4)Do we need to improve our manners?
【练习检测】Finish B3 on page 69.
【补充学习】