淋巴细胞

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淋巴细胞范文第1篇

关键词: 吸烟;免疫系统;T细胞

摘 要:目的 探讨长期吸烟对免疫系统影响的机制. 方法 分别于3mo和9mo对吸烟组及对照组大鼠行抗体形成细胞（AFC）试验和抗CD3 抗体诱导的T细胞增殖试验以测定其体液和细胞免疫. 结果 9mo后，吸烟组大鼠对绵羊红细胞的抗体形成细胞反应及抗CD3 抗体诱导的增殖反应均较对照组显著降低，而3mo时无显著差异. 结论 长期吸烟所引起的免疫抑制是与抗原刺激T细胞后，T细胞不能有效地活化、增殖和分化有关，T细胞自身的细胞免疫受到损伤，也使得它不能有效地辅助B细胞进行增殖及产生抗体，从而使体液免疫也变得无能.

Keywords:smoking;immunization system;T cells

Abstract:AIM To investigate the mechanism of how cigarette smoke affects the immunization system.METHODS Antibody-forming cell response and assay for anti-CD3 -in-duced proliferation were performed to determine the cellular and humoral immunity after3and9months’smoking.RESULTS Compared to those of the control group，the an-tibody-forming cell response and anti-CD3 -induced prolifera-tion of smoking group reduced significantly after9months，while there was no significant difference between the two groups after3months.CONCLUSION Immunosuppression caused by chronic exposure to cigarette smoke is related with the impairment of antigen mediated signaling in T cells.The impairment leads to the significant reduction of activation and　proliferation of T cells，which in turn causes the impairment of the cellular immunity and thereby the disability to help the B cells to produce antibodies.Therefore，the humoral immu-nity is anergy as a result.

0 引言

吸烟是影响身体健康的一个重要因素，可以显著升高心脏病、肿瘤、急慢性呼吸道感染的发病率.有人认为就是因为吸烟所引起的免疫系统的损害才导致了人体对这些疾病的易感性［1］ .吸烟可影响广泛的包括体液的和细胞介导的免疫反应功能［2］ .尽管人们了解到长期吸烟会影响兔子、猴和人类的T细胞反应，但其确切的分子机制却尚未阐明.大鼠若长期暴露于烟草的主要毒性成分尼古丁，抗体形成细胞的反应就会受到影响.其原因可能是T细胞的反应性增殖降低，也可能是T细胞依赖的抗体反应降低.然而，吸烟对T细胞功能影响的机制人们尚未清楚，这种免疫抑制有可能与T细胞内抗原介导的信号转导受损有关［3］ .除尼古丁之外，烟草中含有成千上万种其他毒性物质.为研究吸烟引起的免疫抑制的分子机制，我们给SD大鼠每日持续吸烟数小时，持续9mo，然后观察其免疫功能的改变.

1 材料和方法

1.1 材料 ①动物:4～5wk龄的SD雄性大鼠共50只购自本校实验动物中心，到6wk龄时按质量随机分为对照组和吸烟组，3，9mo时分别处死10，15只.②抗CD3 抗体购自北京中山公司.

1.2 方法 ①烟卷点燃后通过与饲养笼相通的进气管吹入，吸烟组每日暴露6h，对照组暴露于正常饲养环境.②免疫:大鼠在处死之前4d给予iv5×108 绵羊红细胞.③淋巴细胞的准备:取大鼠脾脏后将之研碎，经不锈钢滤网过滤后用NH4 Cl溶液将红细胞溶解，将脾细胞过nylon wool柱，不结合nylon wool柱的细胞为T淋巴细胞，从而将T淋巴细胞分离出来，然后再用流式细胞仪分析;经不锈钢滤网过滤的脾细胞用小鼠抗大鼠CD3 单克隆抗体，再在用抗小鼠IgG抗体包被的板上孵育，CD3+ 的细胞被除去，非结合细胞为B淋巴细胞，用流式细胞仪分析.④抗体形成细胞（AFC）试验［4］ :不同浓度的脾细胞与20μmol・mL-1 的绵羊红细胞、25μL豚鼠补体混合，再用含100μmol・mL-1 胎牛血清的RPMI1640将液体总量加到150μL，37℃培养45min，然后记数抗体形成细胞.⑤抗CD3 抗体诱导的T细胞的增殖试验:在96孔板中加入含2×105 个细胞的培养液0.2mL，一组加入5μg・mL

-1 的抗CD3 抗体，另一组不加，37℃培养3d后掺入3 H（0.5μCi/孔），测定.

2 结果

2.1 长期吸烟对抗体形成细胞反应的影响 3，9mo后，与对照组相比，吸烟大鼠脾细胞的T，B淋巴细胞所占比例无明显差异.经绵羊红细胞免疫4d后，对两组大鼠的抗体形成细胞反应进行了测定，结果表明9mo时吸烟组大鼠对绵羊红细胞的抗体形成细胞反应较对照组显著降低（P

图1 略

2.2 吸烟对TCR介导的T细胞增殖的影响 有研究表明，长期吸烟可以减低T细胞对其有丝分裂原的反应［5］ .我们用抗CD3 抗体直接连接TCR，诱导T细胞的增殖，结果发现，吸烟9mo时的大鼠对抗CD3 抗体诱导的增殖反应较对照组显著性降低（P

图2 略

3 讨论

有报道表明，长期吸烟可以降低机体的免疫力，而且很可能是同时抑制了体液和细胞免疫反应［6］ .作为烟草中的主要毒性成分，尼古丁可以导致T细胞的反应无能，而且很可能是与抗原介导的信号转导系统的损伤及细胞内Ca2+ 反应抑制相关［3］ .

从本研究结果看，吸烟早期（3mo）并不引起显著的免疫力降低，而长期吸烟不仅会导致体液的，而且会导致细胞免疫的损伤，说明免疫力的降低是一个损伤逐渐积累的过程.吸烟若能在早期及时戒烟，对机体免疫力的损伤是不会很大的.长期吸烟并不引起淋巴细胞数量和比例的改变，这说明吸烟引起的免疫抑制并不是由于淋巴细胞数量和比例的改变引起的，而是T、B淋巴细胞的功能障碍.长期吸烟者的T细胞在接受了外源性抗原刺激后，并不能够被有效激活、增殖和分化，细胞免疫受到损伤，也使得它不能有效地辅助B细胞进行增殖和分化，这很可能是体液免疫降低的一个重要原因.作为烟草中的主要毒性成分，尼古丁可以导致T细胞的反应无能，而且很可能是与抗原介导的信号转导系统的损伤及细胞内Ca2+ 反应抑制相关［3］ .

蛋白磷酸化是细胞调节过程中一个主要的作用方式.抗原刺激T细胞后，蛋白酪氨酸激酶被活化，这就会通过酪氨酸依赖的机制激活磷脂酶C-γ1（PLC-γ1）及产生IP3［7］ .而IP3是人们所熟知的引起细胞内Ca2+ 迅速、持久上升的重要介质.IP3的产生和细胞内Ca2+ 的蓄积是T细胞发挥其功能的基本条件，因而，长期吸烟所引起的T细胞的功能障碍很可能是由IP3产生或Ca2+ 蓄积障碍所引起的信号转导途径受损引起的.

参考文献

［1］Holt PG，Keast D.Enviromentally-induced changes in immuno-logical function:Acute and chronic effects of inhalation of tobac-co smoke and other atmospheric contaminants in man and experi-mental animals ［J］.Bacteriol Rev，1997;41（2）:205-216.

［2］Sopori ML，Geng Y，Savage SM，Soszynski D，Kluger MG，Perryman EK，Snow GE.Effect of nicotine on the immune sys-tem:Possible regulation of immune responsese by central and peripheral mechanisms ［J］.Psychoneuroendocrinology，1998;23（2）:189-204.

［3］Geng Y，Savage SM，Razani-Boroujerdi S，Sopori ML.Effects of nicotine on the immune response.Chronic nicotine treatment induces T cell anergy ［J］.J Immunol，1996;156（12）:2384-

2390.

［4］Sopori ML.Cigarette smoke causes inhibition of immune re-sponse to intratrachealy administered antigens ［J］.Toxicol Appl Pharmacol，1997;97（4）:489-499.

［5］Sopori ML，Goud N，Kaplan AM.Effects of tobacco smoke on the immune system，in immunotoxicology and immnopharma-cology ［M］.2nd end.New York:Albuquerque Publishers，1995:413-434.

淋巴细胞范文第2篇

关键词：淋巴细胞计数末梢血临床各科疾病关系

末梢血淋巴细胞计数国内医疗单位尚未开展，其与临床各科疾病的关系并不十分清楚，在疾病诊治中的意义国内杂志报道甚少。为了探讨末梢血淋巴细胞数量的变化与各科常见疾病的关系，我们对各科常见病种住院患者逐例采末梢血做淋巴细胞计数，现将结果报告如下。

一、对象和方法

1.1对象;诊断明确的各科（内、外、妇、儿、产科）常见疾病。年龄性别随机选择，逐例询问病史并登记，重复病例总结时只算一人次结果，两种或两种以上疾病同时存在于一患者时剔除。

1.2对照组:选37例健康体检者为对照。

1.3方法：取观察组及对照组人员末梢血40uL，用9%EDTA2K25ul抗凝，用ABXMICROS60—OT全自动血细胞计数仪，由专人操作，并在标本留取后0.5—1h内完成测定。其溶血剂、稀释液为原配试剂，抗凝剂按厂家提供的配方自配，并做全血指控。

二、结果

内科常见6种疾病中以病毒性肝炎末梢血淋巴细胞计数最低，较健康人群的1.76658х10/LDI低42.5%，两者相比t值为6.5563，P<0.01，具有显著性差异。降低幅度最小的是糖尿病患者，降低幅度为对照组的23.4%,l两者相比无统计学意义(t=1.8175,P>0.05)。其它几种疾病均有不同程度的下降，与对照组比均有显著差异，其显著水平见表1。

表1临床各科不同疾病淋巴细胞计数结果

科别病种疾病例数STP

内科脑血管病221.12550.40114.44<0.01

心血管病171.14120.38863.93<0.01

糖尿病81.35320.48861.82>0.05

肝炎231.01570.29506.556<0.01

肺炎71.22000.54452.26<0.05

肾炎51.16800.24452.20<0.01

外科外伤481.19660.37215.90<0.01

腰间盘突出121.14250.29373.47<0.01

癌症71.16290.55632.40<0.05

儿科上感232.69741.13954.10<0.01

肠炎61.99330.66520.90>0.05

妇科恶葡111.29270.27372.50<0.05

癌症9

1.05780.43743.30<0.01

产科产后141.3.430.40362.60<0.01

对照体检371.76650.5874

外科、妇科、产科住院病例亦有不同程度的下降，其下降幅度与正常人比较均有显著差异。儿科病例比较特殊，两组病例与对照组比较均有不同程度的升高，可能与年龄因素有关。外科癌症病人检测7例、妇科癌症病人检测9例，两组与对照组比较下降均有显著意义。另外，检测例较少的甲状腺机能减退，其值0.54X10/L,较正常对照亦明显为低，发烧待诊各科病例病情不同。其降低幅.度差别较大，未做分析。末梢血淋巴细胞计数与年龄的关系，因检测例数偏少，只做粗略分析，见表2。

表2临床各科病例淋巴细胞计数年龄分布

科别病种疾病例数年龄均数S细胞均数

内科脑血管科2157.910.81.1255

心血管科1755.315.01.1412

糖尿病856.913.81.3325

肝炎2336.512.81.0167

肺炎752.521.21.2200

肾炎529.67.01.1680

外科外伤4813.817.31.1966

腰间盘突出1243.213.01.1425

癌症750.916.01.1629

儿科上感234.83.82.6974

肠炎66.51.41.9933

妇科恶葡1125.69.31.2927

癌症936.715.21.0578

产科产后1424.73.41.3043

对照体检3744.911.51.7665

从本次检测临床各科的患者年龄状况分析，出儿科外，均以中老年为主。根据其末梢血淋巴细胞数可以得出：中老年组其数量的变化与年龄关系不密切，而与疾病的种类及病变程度有关。见表1.儿科病例除与病种病情有关外，与年龄亦有较大关系。说明儿科末梢血淋巴细胞计数较成人为高。

三、讨论

本次检测临床各科病人212例，结果表明：不论患那种疾病，末梢血中淋巴细胞的数量均有不同程度的下降，与正常组比较多有显著差异，而且有些病种下降幅度很大，例如病毒性肝炎病人，下降幅度为对照组的42.5%，说明末梢血淋巴细胞的变化与某些疾病的病理变化关系密切。

本次检测对照组37例，其均数为1.7665×10/L与文献（1）1.684×10/L,文献（2）1.800×10/L,结果相近，故正常对照组抽样合乎实际情况。

淋巴细胞计数与年龄存在一定关系，但不是相关关系。与国内文献（1）(儿童正常值为3.527±0.727×10/L，成人为1.684±0.404×10/L）相吻合，并与血常规儿童白细胞总数和淋巴细胞分类较成人高吻合。本次检测儿科病例组淋巴细胞数虽较对照组为高，而且具有显著意义，但与儿童正常组比较，其下降幅度仍很大,t检测上感组为3.94；肠炎组t值为5.64，P值均小于0.01，其结论与中老年组比对照组相同。:

末梢血淋巴细胞计数是否还受其它因素（药物、气候、性别及生理状况等）的影响，有待进一步的研究。

参考文献

淋巴细胞范文第3篇

【关键词】 自然流产;死胎;封闭抗体;淋巴细胞免疫治疗

自然流产的发生与母体缺乏封闭抗体有关,流产次数越多的患者,其体内封闭抗体缺乏的可能性越大,80%～90%封闭抗体阴性,封闭抗体的产生不足,母体对胎儿产生强烈的排斥现象,发生于孕早期可出现反复自然流产,孕晚期则可出现妊娠高血压疾病、胎儿宫内生长受限、甚至出现胎死宫内。淋巴细胞免疫治疗亦称淋巴细胞主动免疫,是从丈夫或无血缘关系的健康第三者血液中提取少量淋巴细胞,注射给妻子,这种异体血液制品可刺激妻子体内产生一种保护性抗体,保护胎儿免受母体的免疫攻击。广东省茂名市妇幼保健院妇产科自2009年6月至2010年2月共收治封闭抗体阴性,曾有自然流产史或死胎史患者49例,其中19例已妊娠,均给予淋巴细胞免疫治疗,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2009年6月至2010年2月在本院就诊,月经规则,夫妻双方染色体核型分析正常,夫妻身体健康,乙肝表面抗原阴性,肝功能正常,没有血液传染性疾病,妻子内分泌检查正常,无生殖器畸形,没有妇科合并症,无感染,妻子封闭抗体阴性,血液IgG抗体正常,封闭抗体检测阴性有自然流产或死胎,未怀孕30例,早孕19例;年龄20～41岁,平均28.1岁。

1.2 方法

1.2.1 一般情况了解 详细询问患者过去史,现病史,月经生育史,家族史及配偶的一般情况。

1.2.2 常规检查 行夫妻双方染色体妇科,妻子盆腔B型超声,宫腔镜检查,丈夫检查未见异常。RT、BC,细菌培养+药敏,支原体培养+药敏,衣原体检查,淋病奈瑟氏菌PCR,性激素六项及甲状腺功能测定等,排除原因明确流产或死胎。

1.2.3 49例患者均在实施免疫治疗前及27例未妊娠患者治疗后1疗程或2疗程后2周,各行1次封闭抗体检测,观察并记录妊娠情况,新生儿出生时情况,(如孕周,体质量,有无畸形等)

1.2.4 免疫治疗 采用无菌法,取丈夫或(若丈夫血液不适宜,无血源关系,无血液性传染病的健康第三者)静脉血20 ml加入肝素钠抗凝,按1:1取淋巴分离液20 ml,将分离液放于试管下,将血液置于淋巴分离液上方,第一次离心,2000 r/min,离心30 min,离心后离心管由上至下细胞分四层: 一层:血浆或浆液层;二层为环状棉絮样乳白色细胞层;三层为透明分离液层;四层为红细胞层。用无菌吸管吸出第二层细胞,置入另一管,加入0.9% 氯化钠注射液至12 ml,用无菌吸管混匀,第二次离心,1800 r/min,离心20 min,离心后倒掉上清液,加入0.9%氯化钠注射液12 ml用无菌吸管混匀,第三次离心,1800 r/min,离心10 min,离心后倒掉上清液,加入0.9%氯化钠注射液12 ml用无菌吸管混匀,第四次离心,1800 r/min,离心10 min,离心后倒掉上清液,加入0.9%氯化钠注射液2 ml洗涤,分别注入1 ml注射器2个,于妻子两侧上臂皮下注射,每侧注射三个点,每4周1次,连续3次,2周后复查封闭抗体,若封闭抗体仍阴性,再重复1个疗程(为每4周1次,共3次),阳性后怀孕,妊娠后再同法免疫治疗3次。

1.3 统计方法 所有资料均采用χ2检验

2 结果

2.1 免疫治疗后封闭抗体阳性情况 30例未怀孕者,26例阳性,3例无复查;19例妊娠者无复查,阳性率80%。

2.2 30例未妊娠患者免疫治疗后, 8例再次妊娠,现无流产征象,继续免疫治疗。

2.3 19例妊娠者,免疫治疗后,16例妊娠成功,3例自然流产,3例已孕足月顺产,新生儿体质量正常,无畸形,13例继续妊娠,定期产检,无早产征象,B超监测胎儿无异常,妊娠成功率84.2%,无妊娠并发症。

2.4 免疫治疗后49例均无不良反应。

3 讨论

未行免疫治疗前,患者由于封闭抗体阴性,使胎儿易受母体细胞免疫应答,发生母体免疫系统排斥胎儿的反应,导致流产,用丈夫或健康第三者的淋巴细胞抗原,对妻子进行主动免疫治疗3个月后,患者封闭抗体阳性率明显提高,使胎儿不易受母体免疫系统排斥,胎儿形成耐受,因而可在母体环境中存活下来,使妊娠成功率提高,主动免疫治疗后无FGR,无低出生体质量儿及畸形儿,母亲亦无因治疗后发生一些新的免疫系统方面及传染病方面的疾病,副反应小。已有大量临床资料证实,淋巴细胞免疫治疗可减少流产率及免疫排斥反应,提高妊娠成功率,此法安全可行。免疫治疗技术安全、痛苦小、疗效确切,有效地避免了传统淋巴免疫治疗母亲对输入的红细胞或血小板抗原致敏感的危险,减少了并发症。成功受孕率可以达95%以上。自1981年Taytor和Beer等创立了自然流产淋巴细胞主动免疫疗法,经过20余年的临床研究表明,免疫治疗确能有效阻止封闭抗体缺乏性自然流产。国内外不同学者对原因不明性反复自然流产患者进行淋巴细胞免疫治疗后,妊娠成功率达72.73%～86.2%,且未发现对母、儿的副反应,封闭抗体的阳性率明显高于治疗前,而封闭抗体阳性者再次妊娠的成功率明显高于阴性者。大量研究证实淋巴细胞免疫治疗自然流产有效安全,并且封闭抗体对再次妊娠结局有良好价值。

参 考 文 献

[1] 乐杰.自然流产,妇产科学.人民卫生出版社,2008:83.

[2] 廖丹,李凤英,谭秋慧.淋巴细胞免疫治疗反复早期自然流产53例.临床医学院,2009,29(1):75-76.

[3] 孟庆勇,林萍,王鸣,等.配偶淋巴细胞免疫治疗反复自然流产91例分析.中国优生与遗传杂志,2005(12).

[4] 徐岚,张新能,张永凤,郑燕銮 .细胞免疫功能的变化与原因不明习惯性流产的关系.中国实用妇科与产科杂志,2006(5).

淋巴细胞范文第4篇

关键词： 淋巴细胞计数  末梢血  临床各科疾病  关系

末梢血淋巴细胞计数国内医疗单位尚未开展，其与临床各科疾病的关系并不十分清楚，在疾病诊治中的意义国内杂志报道甚少。为了探讨末梢血淋巴细胞数量的变化与各科常见疾病的关系，我们对各科常见病种住院患者逐例采末梢血做淋巴细胞计数，现将结果报告如下。

1 对象和方法

1.1 对象; 诊断明确的各科（内、外、妇、儿、产科）常见疾病。年龄性别随机选择，逐例询问病史并登记，重复病例总结时只算一人次结果，两种或两种以上疾病同时存在于一患者时剔除。

1.2 对照组: 选37例健康体检者为对照。

1.3 方法：取观察组及对照组人员末梢血40uL，用9%EDTA2K25ul抗凝，用ABX MICROS60—OT全自动血细胞计数仪，由专人操作，并在标本留取后0.5—1h内完成测定。其溶血剂、稀释液为原配试剂，抗凝剂按厂家提供的配方自配，并做全血指控。

2  结果 

内科常见6种疾病中以病毒性肝炎末梢血淋巴细胞计数最低，较健康人群的1.76658х10/LDI低42.5%，两者相比t值为6.5563，P<0.01，具有显著性差异。降低幅度最小的是糖尿病患者，降低幅度为对照组的23.4%,l两者相比无统计学意义(t=1.8175, P>0.05)。其它几种疾病均有不同程度的下降，与对照组比均有显著差异，其显著水平见表1。

表1  临床各科不同疾病淋巴细胞计数结果

科别    病种   疾病例数             S      T       P

内科  脑血管病   22     1.1255   0.4011   4.44   <0.01 

      心血管病   17     1.1412   0.3886   3.93   <0.01

      糖 尿 病    8     1.3532   0.4886   1.82   >0.05 

      肝    炎   23     1.0157   0.2950   6.556  <0.01

      肺    炎    7     1.2200   0.5445   2.26   <0.05 

      肾    炎    5     1.1680   0.2445   2.20   <0.01

外科  外    伤   48     1.1966   0.3721   5.90   <0.01

      腰间盘突出  12     1.1425   0.2937   3.47   <0.01

      癌    症    7     1.1629   0.5563   2.40   <0.05

儿科  上    感   23     2.6974   1.1395   4.10   <0.01

      肠    炎    6     1.9933   0.6652   0.90   >0.05

淋巴细胞范文第5篇

一、材料和方法

1.被检对象： 标本来源于我院近10个月住院和门诊280例拟做肾移植待诊病人和其他器官移植待诊病人，采静脉血2 ml不抗凝待测。

2.试剂： 免疫磁珠、荧光染液由美国O L公司提供，抗全淋巴细胞抗体试剂购自武汉生物制品研究所。

3.方法：(1)改良一步法：采用免疫磁珠3～5 μl分离出淋巴细胞，在Terasaki板上每孔加入无菌矿物油5 μl，每排第1孔加生理盐水1 μl做阴性对照，第2孔加抗全淋巴细胞抗体1 μl做阳性对照，第3～6孔各加受者血清1 μl(即重复4孔试验)，每孔各加供者淋巴细胞1 μl(细胞浓度为2 000个/μl)，每孔各加补体1 μl，置22～25℃室温下反应45 min左右，每孔加荧光染液5 μl，倒置荧光显微镜下观察细胞毒性反应，分析判断结果。(2)传统常规法见参考文献［1］。

二、结果

采用改良一步法进行了400次淋巴细胞毒交叉试验，有9次检出阳性(阳性率为2.25%)。其中1例患者反复多次CDC阳性，后进行HLA抗体检测， 特定细胞群反应抗体 (Panel Reactive Antibody， PRA) 阳性率为53.5%， 提示抗HLA-A2抗体增多，故放弃移植。

一步法与传统法试验比较：样本用量一步法1 μl，传统法40 μl；试验全过程一步法1.5 h内完成，传统法需2.5～4 h；补体用量一步法1 μl，传统法40 μl；30例标本用双盲法同时试验，结果一致。

三、讨论

改良一步法CDC缩短和简化了试验时间、操作步骤，整个试验过程在1.5 h内完成。大量标本还可同时输入计算机分析。免疫磁珠分离淋巴细胞纯度高且时间短，用荧光染色的结果容易观察，倒置荧光显微镜下死细胞呈红色，活细胞呈绿色，对比分明，易于识别。而传统常规法的伊红染色，在镜下观察判断细胞死活结果有很大的难度，经30例样本用2种方法进行双盲试验，其结果一致，可以证明改良法在样本用量上、淋巴细胞分离、交叉反应时间及判断结果上均表现出优于传统法的特点。同时改良法可节省抗全淋巴细胞抗体、补体等试剂用量，降低试验成本。