前言:想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗?我们特意为您整理了5篇爱要勇敢范文,相信会为您的写作带来帮助,发现更多的写作思路和灵感。
中医学的基本特点,一是整体观念,二是辨证论治。在治疗肝癌的医疗实践中,一方面要考虑肝癌疾病的特殊规律,同时又要抓住发病个体在疾病发生、发展过程中的某一阶段的病理本质。以此来立法更具针对性,用药更具合理性,能提高对肝癌的治疗效果。即结合肿瘤病人接受手术、化疗及放疗等治疗方法,依据应用这些治法造成或可能造成的种种生理、病理改变,适时给予相应的措施,以期获得最佳的治疗效果。由于手术、化疗、放疗等疗法对机体造成的种种生理、病理改变不同,且有一定的规律可循,故须分别对待.辨其证而治之。
2 中医药在肝癌治疗中的具体运用
2.1 手术前后的辨证论治
无论是根治性子术,抑或姑息性切除,往往都会由于手术的创伤、脏腑的缺损、阴阳失调、失血耗液、麻醉刺激、伤口疼痛等等,给机体带来不同程度的伤害,出现种种证候表现,因此需要中医中药的调理和治疗。肝癌病人在接受手术之前,调理和治疗的原则是补益气血,健脾理气,匡扶正气为主。其目的:一是通过应用补益中药以纠正患者的虚弱情况,扩大手术的适应症,增加手术的切除率,尽可能保持患者在术后较好的体质状况;二足通过健脾理气,防止因手术导致的胃肠功能失调,减少并发症及后遗症。常用方如四物汤、四君子汤、香砂六君子汤、补中益气汤、归脾汤、保元汤、十全大补汤、六味地黄丸等,药用人参(或党参)、黄芪、白术、茯苓、当归、地黄、赤白芍、陈皮、木香、砂仁等组成基本方(拟名术前方)。在补益的基础上,可适当配伍一些具有抗癌作用的药物,如山慈站、白花蛇舌草、莪术、守宫、全蝎等,以控制病情的发展,提高手术切除的效果,但抗肿瘤中药不可过量,以免损伤正气,治疗当以扶助正气为主,以利手术的顺利进行。
术后及时配合中医药治疗,可促进机体的康复,为尽早及时放、化疗创造条件,并能明显提高肿瘤患者的远期生存率。实践表明.对于早期肿瘤行根治术后,应长期予以中医药调理,根据中医理沦,辨证论治,在扶正培本的基础上配伍抗癌解毒中药,确实有助于正气恢复,从而达到扶正祛邪,防治肿瘤的复发和转移的目的。术后的中医药治疗,当根据不同的情况进行辨证论治。如术后腹部胀气,大便不通.排气减少,当治以健脾行气,代表方如香砂六君子汤,药如党参、白术、茯苓、半夏、陈皮、木香、砂仁、甘草等;若不思饮食,腹胀,大便稀溏,则用健脾益气法,方用四君子汤加减,药如黄芪、党参、白术、云苓、陈皮、甘草等;术后卫表不固,虚汗淋漓,或动则汗出,头昏乏力,可用玉屏风散加减,药如黄芪、白术、防风、五味子、浮小麦、炒山药、炙甘草等;术后气血不足,面色无华,心悸气短,失眠多梦,纳谷不香.常用八珍汤加减,药如党参、白术、茯苓、当归、白芍、熟地、川芎、阿胶、甘草等;如术后阴液亏损,低热或手足心热,心烦口渴,大便秘结,常用增液汤加减,药如生地、玄参、麦冬、石斛、知母、个栝楼、火麻仁等;若术后瘀血留滞,腹痛,舌暗紫或有瘀点瘀斑,又当采用活血化淤之法,祛瘀生新,促进伤口的修复,常用桃红四物汤或血府逐瘀汤加减,药如当归、赤芍、丹参、川芎、桃仁、黄芪、党参、穿山甲、莪术、大黄、香附、枳壳等。
2.2 化疗过程中的中医药治疗
尽管肝癌的全身化疗效果不尽人意,但栓塞化疗已被视为非手术疗法中的常选方案。不可否认,化疗药物在抑杀癌细胞的同时,也会给机体带来损伤,如骨髓抑制,消化道反应,心、肝、肾功能损害等。中医中药能扶正培本,提高免疫功能,防止或减轻化疗对机体的伤害,并能增强机体防御系统抑制癌细胞的机能,起到增效减毒的作用。中医认为,化疗药物在抗肿瘤的同时,可导致机体气血损伤、脾胃失调、肝肾亏损。 因此,在肝癌病人确定接受化疗这种治疗方法之时,便可采用补气养血、健脾和胃、滋补肝肾的治疗大法,未病先防。代表方可以六君子汤为主加减,药用黄芪、当归、党参、白术、茯苓、半夏、陈皮、鸡内金、焦六曲、熟地黄、女贞子、枸杞子、菟丝子等组成基本方(拟名抗化疗方)。在化疔前l周左右开始服用,每日l剂,一直维持到化疗疗程结束后1周左右为止。这样便能有效地预防或减轻化疗的毒副反应,使绝大多数接受化疗的患者能顺利完成疗程,同时还能增加化疗的敏感性,起到化疗增效作用。化疗出现副反应一股都有一定的规律性,最常见的副反应是消化道反应和骨髓抑制,如果反应过于严重,则往往影响化疗疗程的顺利完成,各种化疗药物均有程度不同的消化道反应,如恶心呕吐、食欲下降等。抓住这一规律,有计划地预先采取防范措施,选择合适的中药,可获得事半功倍的效果。具体应用时,报据化疗副反应出现的规律,在化疗开始前,用“抗化疗方”加降逆止呕之品:竹茹、枇杷叶、白蔻、苏梗等,侧重健脾和胃,降逆止呕,以防治或减轻消化道反应。如果化疗过程中出现呕吐较剧者.可改用旋复代赭汤加减,水煎少量多次饮服。化疗开始后2—3周是骨髓抑制出现的峰期,因此在化疗开始后即当增加滋肾填精、生血补髓之品,可在“抗化疗方”的基础上选加鸡血藤、何首乌、黄精、阿胶、龟板胶、鹿角胶、补骨脂、肉苁蓉等,以激发机体的骨髓造血功能。至于在化疗过程中出现肝功能异常、剥脱性皮炎、脱发等,又当结合具体情况,在 “抗化疗方”基础上,结合辨证论治,灵活加减,处方遣药。
常规化疗结束后,亦应长期坚持中医药调理,扶正怯邪,以扶正为主,即在扶正培本的基础上配伍抗癌解毒中药,有助于正气恢复,提高免疫功能,提高抗癌防变的能力,防治肿瘤的复发和转移。
2.3 放疗过程中的中医药治疗
放疗中的电离幅射,中医认为是一种热性外邪,会耗伤机体的阴津,进而又会影响放疗的疗效。运用中医中药配合放疗。可起到增敏、增效作用,又能减轻近期副反应,减少远期后遗症,并能巩固放疗后疗效,防止复发和转移,从而提高长期生存率。由于放射线属火热之毒,最易耗伤人体阴液,日久又可耗伤元气。故肝癌病人放疗后,常常会出现口干咽干舌燥、发热、恶心呕吐、纳呆乏力、血象下降等副反应。中医认为,这些证候的出现是由于肝癌病人在接受放射治疗后,机体内热毒过盛,阴液耗损,导致肝肾阴虚、气血损伤及脾胃失调所致。临床治疗多采用清热解毒、生津润燥、益气补血、健脾和胃、滋补肝肾的方法,药用生黄芪、生地黄、玄参、麦冬、石斛、陈皮、清半夏、白术、茯苓、竹茹、鸡内金、女贞子、枸杞子等组成基本方(拟名抗放疗方)。具体使用可在放疗前1周左右开始服用,每日1剂,一直维持到放疗疗程结束后1周左右为止。
由于放疗的部位不同,所伤器官组织不同,出现的副反应也有所差异,治疗用药亦当有所变化。肝内肿瘤(包括原发灶和转移灶)常需进行肝区或肝内放射治疗,最常见的副反应是肝功能损害,机体免疫功能下降,出现倦怠乏力、汗多头晕、胁肋胀痛、腹胀纳呆等,治疗当侧重补肝养血,健脾理气,可在 “抗放疗方”的基础上,加太子参、炒麦芽、鸡血藤、丹参等;肝癌发生肺转移,常配合胸部放疗,射线热毒,灼伤肺阴,肺失宣降,常会出现咳嗽痰少之症,治当养阴清肺化痰,可用“抗放疗方”加百合、天花粉、桔梗、芦根、杏仁等;肝癌发生骨转移,配合放射治疗常会引起骨髓抑制,出现白细胞减少、血小板数下降,严重者红细胞,血色素也相应减少,治疗当滋补肝肾,生血补髓,可加白芍、当归、鸡血藤、何首乌、黄精、阿胶、龟板胶、鹿角胶、补骨脂、肉苁蓉等;肝癌常出现腹腔淋巴结转移,又当进行腹腔及盆腔放疗,患者易表现下焦湿热之证,可加清利湿热之品如秦皮、木通、生苡仁、土获苓等。至于放疗山现一些局部(如皮肤)反应、放射性炎症(如放射性肝损害、放射性肺炎、放射性肠炎、放射性脊髓炎等)及其它一些放疗副反应,在“抗放疗方”的基础上,辨证论治,依法加减,均可获得一定的治疗效果。
2.4 疼痛的治疗
大肠癌包括结肠癌和直肠癌,是最常见的消化道肿瘤,在我国发病率和死亡率呈上升趋势。近年来,中医药以其辨证论治、整体观念的独特优势,在大肠癌及术后化疗中的减毒增效作用越来越受到重视。李国栋主任医师从事肛肠外科临床30余年,采用中药干预大肠癌术后,常能使患者症状改善,提高大肠癌术后患者的生活质量。笔者撷取李师辨治大肠癌术后的丰富经验之点滴,试述如下。
1 气阴两虚,余毒未尽是大肠癌术后的主要病机
《灵枢•五变》云:“肠中积聚者,……皮肤薄而不泽,肉不坚而淖泽。”指出了大肠癌患者的机体气阴两虚之消耗体征。《外科正宗》云:“蕴毒结于脏腑,火热流注,结而为肿,……或泻或秘,内蚀,串烂经络,污水流通大孔,无奈饮食不餐,作渴之甚,凡犯此未得见其生。”这指出了直肠癌的发病机理可因火热流注,热毒蕴久必耗气灼阴加之手术伤及气血,瘤虽切除,毒未尽清,故大肠癌术后主要病机为气阴两虚,余毒未尽。李师常说,阴血同源,气血互为依存,气为血之帅,气行则血行,气血流通,瘀血既去,新血自生,故强调以益气滋阴为主,药常用黄芪、党参、白术、麦冬、知母,视患者术后机体状态及化验指标酌加清热解毒、祛湿除瘤之药如猪苓、白英、薏苡仁、姜黄、半枝莲等。
2 补脾益肺,益气养血是化疗时的主要治法
大肠癌术后化疗过程中,患者临床多表现为气短乏力,倦怠懒言,自汗。骨髓抑制作用明显,故化疗过程中采用当归补血汤加益气健脾中药以补脾益肺,益气养血常能减轻患者化疗过程中的不适反应,使血象恢复或接近正常,使患者顺利完成化疗疗程。当归补血汤出自李东垣《内外伤辨惑论》,用于治疗血虚发热证。现代药理研究发现:黄芪、当归对造血系统均有较好的保护和促进作用。此外,还有提高机体免疫力、抗肿瘤、抗突变、抗自由基等作用。
3 适时运用攻下法,中病即止
李师临床善用增液承气汤促进大肠癌术后排气排便,防止吻合口炎症引起局部粘连,对预防大肠癌术后粘连性肠梗阻有一定作用。由于术前久病伤阴,手术使阴液耗损,胃肠传导功能重建及麻醉等使胃肠气机受阻,大肠癌术后患者常出现应排气而不排气,腹部胀满,肠鸣音减弱或消失,舌质红,苔少,脉细数。此时,单纯胃肠减压只减轻吻合口张力,且长时间胃肠减压常导致水电解质失衡,加剧津液耗损,对病人术后恢复不利。在这种情况下,李师采用增液承气汤的小剂量灌注以刺激胃肠道,促进胃肠蠕动,加快气机通畅,改善肠壁水肿,促进炎症消退,防治粘连和梗阻。增液承气汤是出自《温病条辨》,原治温病阴亏热结,燥屎不行,下之不通。一旦症状消失,梗阻缓解,即应停药以免损伤胃气。
4 健脾和胃,运化中焦是治疗大肠癌术后肠功能紊乱的关键
排便习惯改变是大肠癌的主要临床表现之一,也是大肠癌患者术后主要并发症之一。术前术后局部癌瘤、吻合口及结直肠内的炎症情况,放疗、化疗对局部和全身内分泌及免疫系统的影响等多种因素导致结直肠功能的紊乱,出现便秘、腹泻或粘液血便。“脾宜升则健,胃宜降则和”。《素问•阴阳应象大论》云:“清气在下,则生飧泄,浊气在上,则生胀。”大肠癌术后患者多脾气虚弱,升提无力则水谷精微难以输布;胃气不足则通降不能,水谷及其糟粕难以下行。故大肠癌术后无论腹泻便秘,病机的根本在于脾气虚弱,治疗当以健脾和胃为主,酌加升清降浊行气之品以运化中焦。治疗大肠癌术后便秘,常用的药物配伍有如白术与枳实,一以健运脾气,一以通泄胃浊;木香、陈皮、炒莱菔子行气醒脾除胀;肉苁蓉、白蔻仁以健脾温肾,润肠通便;对于泄泻病人用药时,党参、白术、茯苓、山药用量宜大,旨在脾旺方能腐熟水谷;泻久体虚,配用黄芪、升麻、柴胡等益气升清,鼓舞脾气。
5 中药灌肠治疗疗放射性直肠炎
临床对于大肠癌术后癌瘤切除不完全,或有转移的患者往往采用放疗以缓解局部症状,结直肠放疗因其剂量及放射疗法的特点常常引起放射性直肠炎。放射性直肠炎临床表现为排便困难,便秘与腹泻交替,腹痛腹泻,里急后重,直肠内灼痛,或便秘时坠痛感,排粘液便和血便,甚至全血便,贫血严重者可出现休克。从中医学的观点来看,放射性直肠炎病机乃火热湿毒下注肛周。李师常说:直肠的局部炎症,灌肠法作用最为直接,作用迅速,疗效好。临床采用中药灌肠配合中医中药辨证施治治疗放射性直肠炎,每获良效。李师认为,灌肠用药不宜过多,面面俱到往往疗效不著,过多的药味对直肠局部也有一定的刺激,灌肠时间不宜过长,一个疗程为15天左右就应考虑暂停灌肠3~5天,或可考虑更换灌肠药物种类,以免造成药物性直肠炎。灌肠常用中药选用黄连、黄芩、栀子清热燥湿消除局部炎症,白芍、甘草以止痛。
6 化疗药物神经毒性毒副作用从气血论治
目前,化疗是治疗大肠癌术后的主要治疗手段,能减少大肠癌的复发和转移,但化疗可引起骨髓抑制、胃肠道功能紊乱等多方面的副作用。近来,铂类药物的神经毒性毒副作用越来越引起临床医师的重视,其主要表现为四肢末梢神经感觉异常或感觉障碍,如指趾末端麻木或感觉减退,注射药物侧手臂疼痛,肢体末端强直性肌肉收缩、腿痛性痉挛等。遇冷刺激后诱发或症状加重。迟发型蓄积性外周感觉神经病变属中医学麻木、痹证、血痹范畴。《内经•痹论》云:“其不痛不仁,病久入深,荣卫之行涩,经络时疏,故不通,皮肤不营,故为不仁。”因而其病机为气血两虚,气滞血瘀,营卫失调,而致筋脉失养,络脉瘀阻,属本虚标实之证。李师善用黄芪桂枝五物汤加味治之,该方有补气养血,调和营卫,振奋中焦气血,活血通络的作用。因营血痹阻,故应加速鼓舞卫气,使气血畅通,经气条达。临床上,李师在黄芪桂枝五物汤基础上加党参、当归以补气养血活血;白术、茯苓加强补脾益肺生血,从而使卫阳充足、气血通畅。
7 注重中医药的现代研究,苓苡方干预大肠癌术后
方法:选取我院2013年3月―2014年5月期间我院因情感障碍需用药治疗患者600例,其中躁狂发作患者250例,单一用药50例,联合用药200例;抑郁发作患者350例,单一用药130例,联合用药220例,统计分析各药物使用情况、疗效以及合理性分析。
结果:躁狂发作患者两药联合使用效果明显优于单一用药(P0.05);躁狂发作用药前3位依次为碳酸锂、氯氮平和氯丙嗪,抑郁发作用药前3位依次为帕罗西汀、氟西汀和阿米替林;综合用药DUI>1分别为碳酸锂、丙戊酸钠、氟哌啶醇、舒必利、氯氮平、帕罗西汀、氟西汀、文拉法辛8种药物。
结论:我院对于情感精神障碍患者用药基本合理,用药方案在单一用药效果与联合用药效果相持平情况下尽量选择单一用药,严格避免滥用苯二氮芯卓类药物。
关键词:情感障碍 临床用药 合理性 疗效分析
Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2014.11.235
【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801(2014)11-0145-01
情感障碍又称为心境障碍,属于精神障碍疾病范畴内,主要特征为情感或心境长期而显著改变,临床可表现为患者心境高涨或低落两种极端相反的病理性情感状态,并伴有一定程度的认知和行为异常,同时可发生幻觉、妄想等精神病性症状。若治疗过程中药物使用不够合理化,既加重病情,又会延误最佳治疗时机,还有可能造成相对严重的不良反应。近年来,关于情感障碍临床用药的相关文献很多 [1,2],但仍然缺乏对于用药与临床疗效系统分析的相关数据。因此,本文就我院2013年3月―2014年5月期间情感障碍患者用药情况进行分析。
1 资料与方法
1.1 临床资料。选取我院2013年3月―2014年5月期间我院因情感障碍需用药治疗患者600例,其中躁狂发作患者250例,单一用药50例,联合用药200例;抑郁发作患者350例,单一用药130例,联合用药220例,所有患者均符合CCMD-3情感障碍诊断标准,其中男患者285例,女患者315例,年龄24―70岁,平均年龄49±5.9岁,病程4个月―3年,平均病程1.8±1.0年。
1.2 分析方法。统计分析各药物使用情况、疗效以及合理性分析。分析药物利用情况依据WHO建议的限定日剂量(DDD)值和药物利用指数(DUI),DDDs(总DDD数)是某药物总用药量与该药的DDD值的比值,DUI为DDDs与总用药天数的比值。DDD值为中国药典(2000年版)临床用药须知及临床医生常用日剂量。
1.3 统计学方法。采用SPSS16.0统计软件进行统计分析,采用X2检验,P
2 结果
2.1 用药基本情况分析。躁狂发作250例,用药前3位依次为碳酸锂115例(46%),氯氮平45例(18%),氯丙嗪27例(10.8%),其他用药包括丙戊酸钠、利培酮、氟哌啶醇、卡马西平等;抑郁发作350例,用药前3位依次为帕罗西汀99例(28.3%),氟西汀85例(24.3%),阿米替林73例(20.9%),其他用药还有文拉法辛、氯米帕明、舒必利、碳酸锂、西酞普等。
2.2 单一与联合用药效果比较。躁狂发作250例,单一用药50例(20%),其中痊愈25例(50%),显效23例(46%),进步2例(4%);两药联用200例(80%),痊愈159例(79.5%),显效35例(17.5%),进步6例(3%);两药联用效果明显优于单一用药,结果具用统计学意义(P0.05)。
2.3 用药合理性分析。综合用药DUI>1分别为碳酸锂、丙戊酸钠、氟哌啶醇、舒必利、氯氮平、帕罗西汀、氟西汀、文拉法辛8种药物。
3 讨论
情感障碍又称为心境障碍,属于精神障碍疾病范畴内,主要特征为情感或心境长期而显著改变,临床可表现为患者心境高涨或低落两种极端相反的病理性情感状态,并伴有一定程度的认知和行为异常,同时可发生幻觉、妄想等精神病性症状。若治疗过程中药物使用不够合理化,既加重病情,又会延误最佳治疗时机,还有可能造成相对严重的不良反应。躁狂发作患者两药联合使用效果明显优于单一用药(P0.05),因此,对于抑郁发作患者应尽量使用单一药物,避免联合用药带来的诸多不良反应可能。躁狂发作用药前3位依次为碳酸锂、氯氮平和氯丙嗪,抑郁发作用药前3位依次为帕罗西汀、氟西汀和阿米替林;综合用药DUI>1分别为碳酸锂、丙戊酸钠、氟哌啶醇、舒必利、氯氮平、帕罗西汀、氟西汀、文拉法辛8种药物。所有调查药物中碳酸锂是DUI较高的,通过血锂浓度测定,大部分保持在有效浓度范围内,说明我院此类药物使用基本合理,无滥用倾向。研究发现,,锂盐用于抑郁发作可以降低抑郁症的复发率 [3]。综上所述,我院对于情感精神障碍患者用药基本合理,用药方案在单一用药效果与联合用药效果相持平情况下尽量选择单一用药,严格避免滥用苯二氮芯卓类药物。
参考文献
[1] 钱东丽,杨广声,王领军.情感障碍患者临床用药合理性与疗效分析[J].中国医院药学杂志,2004,24(3):164-165
【摘要】 目的 研究化疗药物对不同株人肝癌细胞杀伤作用的敏感性。方法 采用MTT比色分析法测定多柔比星(DXRB)或米托蒽醌(DHAQ)对体外培养的4株人肝癌细胞的细胞毒作用。结果 DXRB对SMMC7721细胞的杀伤作用最强,QJY次之,HEPG2和Alexander不敏感;DHAQ对QJY细胞的杀伤作用最强,Alexander和SMMC7721次之,同样HEPG2不敏感。结论不同株人肝癌细胞对同一化疗药物可具有不同的敏感性。
【关键词】 化疗药物; 人肝癌细胞; 细胞毒作用
ABSTRACT Objective To investigate susceptibilities of four human hepatoma cell lines to chemotherapeutics. Methods MTT colorimetric assay was used to test in vitro cytotoxicities of the chemotherapeutics against human hepatoma cell lines. Results As for susceptibilities to doxorubicin (DXRB), SMMC7721 cell line was the top, QJY cell line was second, Alexander cell line and HepG2 cell line were the less. While for susceptibilities to mitoxantrone (DHAQ), QJY cell line was the top, Alexander and SMMC7721 cell lines were second, HepG2 cell lines was the less. Conclusion Different human hepatoma cell lines had different susceptibile to same chemotherapeutics.
KEY WORDS Chemotherapeutics; Human hepatoma cell line; Cytotoxicity
我国是原发性肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)的高发国家,肝癌已占我国肿瘤死亡的第二位[1]。多柔比星(DXRB,doxorubicin)等化疗药物局部化疗尤其是经肝动脉插管化疗已是肝癌非手术治疗的首选方法。临床上肝癌患者化疗有些效果较好,有些较差或者无效,其原因与肝癌的多药耐药性(multidrug resistance,MDR)有关,也可能与不同肝癌患者对化疗药物敏感性差异有关。我们采用4株人肝癌细胞,进行了DXRB或米托蒽醌(mitoxantrone,DHAQ)的体外细胞毒实验,以评价人肝癌不同细胞株对化疗药物的敏感性,现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 药品试剂
DXRB为浙江海门制药厂产品;DHAQ由四川大学药学院张志荣教授提供;噻唑蓝(MTT)为Fluka公司产品; 二甲基亚砜(DMSO)为AR,广州化学试剂厂产品。
1.2 细胞株
4株人肝癌细胞(SMMC7721、HEPG2、QJY和Alexander)均为本室保种传代。
1.3 MTT比色分析法
参照文献方法[2],在96孔板中加入细胞(0.5~1)×104/孔,待细胞贴壁后加入不同浓度的DXRB或DHAQ,于37℃,5% CO2条件下孵育一定时间,加入MTT(用PBS配成浓度5mg/ml,12μl/孔),继续孵育6~8h,吸弃上清,加入DMSO(150μl/孔),混匀后于570nm波长处测吸收光度(A570),按下式计算杀伤率:
杀伤率=1-实验孔A570对照孔A570×100%
2 结果与讨论
2.1 DXRB杀伤作用与药物浓度、作用时间的关系
DXRB对SMMC7721细胞具有较强杀伤作用,且具药物浓度依赖性(Fig.1),随作用时间延长,杀伤作用增加,表现为药物的半数抑制浓度(IC50)降低(Fig.2)。
2.2 DXRB对4株人肝癌细胞的杀伤作用
DXRB与细胞作用72h后,对SMMC7721细胞杀伤作用最强,对QJY次之,对于HEPG2和Alexander基本上无杀伤作用(Fig.3),表明DXRB对不同株肝癌细胞杀伤作用的敏感性不同。
2.3 DHAQ对4株人肝癌株的杀伤作用
Fig.1
Dosedependent cytotoxicity of DXRB to
SMMC7721 human hepatoma cells
after 48 hours coincubation
Fig.2
Time course for cytotoxicities of DXRB to
SMMC7721 humanhepatoma cells
与人肝癌细胞作用72h后,DHAQ对QJY杀伤作用最强,Alexander次之,SMMC7721较弱,而HepG2基本上无杀伤作用(Fig.4),表明DHAQ对不同株肝癌细胞杀伤作用的敏感性不同。
2.4 DXRB和DHAQ对4株人肝癌细胞杀伤作用比较
对于SMMC7721细胞,DXRB杀伤作用强于DHAQ;对于QJY细胞,DXRB、HDAQ杀伤作用接近;对于Alexander细胞,DHAQ杀伤作用强于DXRB;对于HepG2细胞,DXRB、DHAQ均无有效杀伤作用(Tab.1),表明不同株人肝癌细胞对于不同化疗药物杀伤作用的敏感性不同。
DXRB、DHAQ均为蒽环类化合物,化学结构类似。DXRB是临床上常用广谱抗癌药,是肿瘤化疗方面最重要药物之一。DHAQ是国产二类新药,临床研究中对乳腺癌和白血病等肿瘤抑制作用已得到肯定[3]。肝癌的不同株系对同一种化疗药物敏感性差异很大(Fig.3,Fig.4),提示在评价某一种化疗药物体外对某一肿瘤的药效时,应选用该种肿瘤的多株细胞来进行实验;也提示在临床用药时,一种化疗药物对同种肿瘤的不同个体疗效可能不同。
参考文献
[1] 叶胜龙. 肝癌生物治疗的研究进展[J]. 中华肝脏病杂志,1999,7(3):191~192.
[2] 刘晓波,马布仁,曾祥元. 多抗甲素对小鼠巨噬细胞功能的影响[J]. 中国药理学通报,1994,10(6):445~448.
关键词:洋甘菊;宫颈癌;Hela细胞;细胞增殖;抑制
中图分类号:R285.6文献标志码:A文章编号:1007-2349(2016)05-0054-02
德国洋甘菊(Matricaria chamomilia)又称母菊,维吾尔语称“巴木乃”,是新疆特色地产药材[1]。根据近年来的药理学研究表明,发现它有镇静、止痛及改善癌症病人症状等作用[2]。
宫颈癌是一种严重危害妇女健康和生命的恶性肿瘤[3]。本实验组采用人宫颈癌Hela细胞作为实验模型,研究洋甘菊提取物体外抗宫颈癌的抑制活性,扩展洋甘菊的临床用途。
1材料
1.1药材洋甘菊于2015年采集自新疆和田地区策勒县策勒乡,经新疆医科大学中医学院中药系中药资源教研室盛萍教授鉴定为德国洋甘菊(Matricaria chamomilia)的头状花序。
1.2仪器酶标仪;显微镜,离心机,移液枪,超净工作台(BCM-1300A);CO2培养箱(HERAcell 150i)。
1.3试剂0.25%胰酶(批号:140609,北京协和细胞资源中心);胎牛血清(批号:20130511,兰州百灵生物技术有限公司);DMEM培养液(批号:201305,Thermo Fisher公司);CCK-8(批号:JA611,DOJINDO laboratories)。
1.4细胞人宫颈癌Hela细胞株由中国医学科学院药物研究所赠予。
2方法
2.1洋甘菊提取物的提取洋甘菊干燥花序2.0kg,加10倍量95 %乙醇浸泡30 min,加热回流2次,每次60 min,过滤,合并两次滤液,干燥,得到洋甘菊提取物。
2.2洋甘菊提取物药物溶液的配制洋甘菊提取物为粗提物,以DMSO助溶,用完全培养液稀释(DMSO含量≤0.5%),配制成每mL含2 mg洋甘菊提取物的溶液,完全溶解后于离心机中离心,转速12000 rpm,离心时间5 min,上清液经0.22 μm无菌滤膜过滤,即得用于细胞给药的澄清药物溶液。
2.3细胞抑制率测定采用参考文献的方法[4],选择处于对数生长期的细胞,在96孔细胞培养板中每孔接种3000 个/100 μL细胞悬液,24 h后给药,根据前期预试结果,分别设9个浓度受试组(能反映浓度与疗效的量-效关系)、阳性对照组、细胞对照组和正常组,阳性对照组加入顺铂(浓度为20 μg/mL)。同时,考察细胞毒性试验,加入上述不含药物的DMSO溶液,作为细胞对照组;加入正常培养基,作为正常组。再培养72 h,然后在细胞培养板中每孔加入100 μL CCK-8,在37℃环境中孵育4 h,然后测定其450 nm吸光度,获取受试药物对肿瘤细胞抑制率和IC50[5]。
2.4Hela细胞形态学观察根据上述细胞增殖抑制实验,取12孔板,加入浓度为890、670 μg/mL的药物,观察药物对细胞形态的影响。参照相关文献[6],取对数生长期的Hela细胞接种于12孔细胞培养板内,每孔接种50000个/2 mL,培养24 h,实验组分别加入加入浓度为890、670 μg/mL的洋甘菊提取物,对照组加入空白培养液,培养72 h后在倒置显微镜下观察细胞的形态变化。
3结果
3.1洋甘菊提取物对Hela细胞的增殖抑制作用采用CCK-8法测定分别加入1500、1200、1000、890、670、460、330、180、95 μg/mL不同浓度药物溶液作用72 h后Hela细胞的存活率,见图1。与对照组未经处理的Hela细胞相比,药物浓度为为890 μg/mL时,Hela细胞抑制率为51.16%。当最高药物浓度达到1500 μg/mL时,Hela细胞抑制率为82.18%。相同作用时间增加给药浓度,细胞抑制率明显上升。结果表明,洋甘菊提取物对Hela细胞的增殖有显著抑制作用。其中,IC50为890 μg/mL,对Hela细胞抑制率为51.16%。同时,将DMSO以完全培养液稀释后,DMSO的含量同给药组,经实验观察,DMSO对照组各浓度对细胞无明显抑制作用,并与正常组接近。
3.2Hela细胞形态学观察参照相关文献[6],观察细胞的形态变化,见图2。
4讨论
本研究采用CCK-8法测定细胞存活率,结果表明,洋甘菊提取物可明显抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖。本实验对Hela细胞的活性进行检测,结果显示,Hela细胞的存活率随洋甘菊提取物给药浓度的增加而减小;综上所述,洋甘菊提取物能够抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖。
洋甘菊中含多种活性成分,最为重要成分的是黄酮类成分及其苷类成分,主要有芹菜素、木犀草素和槲皮素、木犀草苷等[7-8],兰卫等[9-10]测定了芹苷元-7-葡萄糖苷和总皂苷的含量。
胡继松等[11]研究了芹菜中五种成分对肝癌细胞株HepG2、白血病细胞株HL-60的抑制效果。结果表明,芹菜素(98%)和芹菜醇提物(黄酮含量40%)样品对HepG2和HL-60有一定的抑制作用,而试验中芹菜粗黄酮(黄酮含量70%)、芹菜苷(98%)、3’-甲氧基芹菜苷(98%)对HepG2和HL-60这两种肿瘤细胞均无明显抑制效果。
天然药物通过多种途径对肿瘤进行预防和治疗,抗氧化作用是途径之一[12]。韩松林等报道了洋甘菊具有抗氧化作用[13]。夏娜等报道了洋甘菊中多糖与黄酮粗提物抗氧化及抑制亚硝化作用[14]。由于洋甘菊多成分,多靶点的特点,其提取物抗肿瘤作用机制广泛,洋甘菊抑制宫颈癌Hela细胞增殖作用的物质基础和可能的作用机制还有待进一步研究,其抑制宫颈癌Hela细胞增殖作用的“药―效”对应关系有待进一步明确。
参考文献:
[1]新疆卫生厅.维吾尔药标准(上册)[S].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社,1993:255.
[2]杨彦松,潘浪胜.洋甘菊中黄酮类成分的分离与结构确定[J].应用化工,2008,37(6):696-697.
[3]陈丽春,毛建卫,龚金炎.洋甘菊中芹菜苷提取工艺研究[J].天然产物研究与开发,2013,25:986-989.
[4]许丽萍.CCK-8法检测AT#9对肿瘤细胞的生长抑制作用[J].北方药学,2012,9(1):43-44.
[5]杜文娟,陈希元,闰秀玲.山核桃果皮提取物抗肿瘤活性研究[J].安徽农业科学,2012,40(5):2912,3029.
[6]何杨,段斐,靳棉,等.山茱萸水提取物对Hela细胞体外增殖的影响[J].山东医药,2011,51(40):83-84.
[7]Martins M D,Marques M M,Bussadori S K,et parative analysis between Chamomilla recutita and corticosteroids on wound healing An in vitro and in vivo study[J].Phytother Res,2009,23(2):274-281.
[8]周伯庭,李新中.母菊的化学成分研究[J].湖南中医学院学报,2001,21:27-28.
[9]兰卫,郭玉婷,耿 直,等.洋甘菊中芹苷元-7-葡萄糖苷含量测定[J].新疆医科大学学报,2014,37(3):303-305.
[10]兰卫,郭玉婷,耿 直,等.德国洋甘序中总皂苷的含量测定[J].新疆医科大学学报,2014,37(3):315-316.
[11]胡继松,陈静萍,陈亮,等.芹菜黄酮类物质降压降脂及抗肿瘤药理活性筛选[J].湖南农业科学,2014,(11):9-12.
[12]张柯,马胜林.天然药物抗肿瘤机制的研究进展[J].中华中医药杂志,2011,26(10):342-344.