乳铁蛋白

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乳铁蛋白范文第1篇

关键词 乳铁蛋白；高效液相色谱法；肝素亲和柱

中图分类号 TS252.7 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）16-0291-02

乳铁蛋白是近年来国内外开发研究速度最快的一种营养添加剂，由于其具有广谱抗菌、抗病毒感染、调节体内铁平衡、调解骨髓细胞的生成、抑制人体肿瘤细胞、同多种抗生素及抗真菌制剂协同有效治疗疾病等功效，使其产品在国内外乳制品加工中的应用范围日益广泛[1-3]。我国《食品营养强化剂使用标准（GB14880-2012）》中规定婴幼儿配方食品中乳铁蛋白的最大允许使用量为1.0 g/kg，而目前国内外未建立与乳制品中乳铁蛋白测定相关的国家标准。为保证乳铁蛋白的安全生产和使用，该文建立了乳制品中乳铁蛋白的检测方法，最大限度地保证市场中乳铁蛋白添加型产品的安全和质量水平，以保证乳制品安全，促进行业健康发展[4]。

1 材料与方法

1.1 供试材料、试剂与仪器

1.1.1 供试材料。供试材料为婴幼儿配方奶粉、婴幼儿配方米粉、成人配方奶粉。

1.1.2 试剂与仪器。Agilent 1200 高效液相色谱仪，配有二极管阵列检测器。肝素亲和柱（美国通用医药有限公司）。乙腈（色谱纯，美国Sigma公司产品），无水乙醇、氯化钠、磷酸、磷酸氢二钠、三氟乙酸（分析级，国药集团化学试剂有限公司产品）。超纯水Nanopure Life Science（赛默飞世尔科技有限公司）。离心机Jouan Ceterifuge MR23i（赛默飞世尔科技有限公司）。

1.2 试验方法

1.2.1 提取试剂的选择。在相同试验条件下分别以水和磷酸缓冲液作为提取试剂，测定样品加标回收率，比较水和磷酸缓冲液对样品中乳铁蛋白的提取效果。

1.2.2 提取温度的选择。乳铁蛋白分子量为80 kDa，是具有大约700个氨基酸残基序列的单体糖蛋白，并连接1～2个配糖体。对于这一类大分子量的蛋白质，提取溶剂温度过高会造成乳铁蛋白结构的变化，致使检测结果偏离实际值。研究分别选取25、50、60、70、80、90 ℃进行比较。准确吸取1 mL 200 μg/mL的标准溶液于EP管中，分别于25、50、60、70、80、90 ℃下恒温水浴1 h，上机测定[5-6]。

1.2.3 肝素亲和柱的选择。肝素（Heparin）是一种含硫酸酯的酸性多糖，有文献报道乳铁蛋白可与这类多负电荷分子糖胺多糖结合。故在该文中采用HiTrapTM Heparin HP（1 mL）肝素亲和柱作为目标化合物纯化和浓缩的前处理步骤。通过经过和未经过肝素亲和柱纯化的样品比较图，分析其对乳铁蛋白检测应用的可行性[7]。

1.3 液相色谱条件

色谱柱：C4，5μm，300A（孔径），250 mm×4.6 mm（内径）；检测波长：280 nm；柱温：30 ℃；进样体积：50 μL；流速：1.0 mL/min；流动相：0.1%三氟乙酸溶液和乙腈，梯度洗脱参数如表1所示。

1.4 样品前处理

1.4.1 提取。准确称取1 g试样（试样中含乳铁蛋白0.1～10.0 mg）于50 mL烧杯中，加入5 mL温热的磷酸氢二钠溶液（温度不超过50 ℃），搅拌使样品完全溶解，将样品全部转入50 mL具塞塑料离心管中，再向原烧杯中加入5 mL磷酸氢二钠溶液，合并2次液体。漩涡振荡器振荡2 min，于室温下3 000 r/min离心10 min。将上层脂肪层和下层沉淀层之间的液体小心转移到另一个50 mL离心管中，再向原离心管中加入5 mL磷酸氢二钠溶液重复操作1次，合并2次液体作为样品提取液备用。

1.4.2 净化。肝素亲和层析柱先用5 mL磷酸氢二钠溶液平衡，处理完毕后加入样品提取液，待样品液体完全流出后，再用10 mL磷酸氢二钠溶液淋洗，弃去全部流出液。最后用3 mL磷酸氢二钠-氯化钠溶液洗脱，收集全部流出液，用磷酸氢二钠-氯化钠溶液定容至3 mL。将收集溶液过0.45 μm水相滤膜，供液相色谱-DAD检测分析用。

2 结果与分析

2.1 提取试剂的选择

试验证明，在同样的试验条件下用磷酸缓冲液作为提取试剂的回收率比水作为提取试剂高50%。另外，样品中含有比较高浓度的蛋白类物质时，乳铁蛋白在磷酸盐缓冲液中的溶解度优于水中；后续试验采用肝素亲和的活化需要磷酸盐缓冲液；采用缓冲液作为提取试剂可以保证样品上柱前的pH值在试验要求范围。

2.2 提取温度的选择

试验数据表明，随着温度的上升，乳铁蛋白的结构发生了变化。从表2可知，目标峰的峰高由25 ℃的76.9降低至90 ℃的22.2。因此得出结论，为了保证试验结果的准确性，在乳铁蛋白提取过程中必须控制提取缓冲液的温度在50 ℃以下。

2.3 肝素亲和柱的选择

从图1可知，未经过肝素亲和柱纯化的样品成分比较复杂，给乳铁蛋白的检测造成了相当大的难度，经过肝素亲和柱纯化的样品，杂质就比较少，峰形比较好，符合检测的要求。

2.4 线性关系及方法检出限

用液相色谱法测定不同浓度的乳铁蛋白标准溶液，其测定结果表明乳铁蛋白的标准溶液与峰面积响应值之间存在着较好的线性关系，从表3、图2可知，相关系数R2为0.999 1，回归方程分别为y=2.540 7x-13.275。

根据限量检测要求，对婴幼儿配方奶粉、婴幼儿配方米粉、成人配方奶粉等几类样品中乳铁蛋白进行了加标回收重复试验。根据信噪比S/N=3，试验结果表明，该方法检出限均达到20 mg/100 g。

2.5 回收率的测定

应用该方法，添加标准物质，对婴幼儿配方奶粉、婴幼儿配方米粉、成人配方奶粉3类样品中进行乳铁蛋白回收率的测定，从表4可知，按已确定的样品提取条件和色谱条件测定添加回收量，试验表明平均回收率达到75%～100%，相对标准偏差

3 结论与讨论

采用高效液相色谱法（HPLC）的方法测定乳制品中乳铁蛋白含量的测定。试样中的乳铁蛋白经磷酸盐缓冲液提取，提取液经HiTrapTM Heparin HP柱或相当者净化浓缩后，用反相高效液相色谱柱分离，于紫外检测器280 nm处检测，外标法定量。该方法与文献中报道的方法相比，具有操作方便简单、耗时较短、重复性好、回收率高、灵敏度高的优势。

4 参考文献

[1] LEVAY P F，VILJOEN M.Lactoferrin：a general review[J].Haemtologica，1995，80（3）：252-267.

[2] PUDDU P，BORGHI P，GESSANI S，et al.Antiviral effect of bovine lacto-ferrin saturated with metal ions on early steps of human immunodef-iciency virus type 1 infection.Int J Biochem Cell Biol 1998，30（9）：1055-1063.

[3] VORLAND L H.Lactoferrin：a multifunctional glycoprotein.APMIS.1999， 107（7-12）：971-981.

[4] ZHANG G H，MANN D M，TSAI C M.Neutralization of endotoxin in vitro and in vivo by a human lactoferrin derived peptide[J].Infect Immun，1999，67（3）：1353-1358.

[5] 徐峥奎.乳铁蛋白的开发现状与前景[J].中国保健食品，2013（4）：16-17.

乳铁蛋白范文第2篇

关键词：酶联免疫法；婴幼儿配方奶粉；乳铁蛋白；进口奶粉；研究

中图分类号：TB

文献标识码：A

doi：10.19311/ki.16723198.2016.31.090

母乳是婴儿获取营养最好的方式，母乳中含有一定量的乳铁蛋白可以确保婴幼儿健康。但就现状而言，母乳匮乏。因此奶粉喂养就成为主流，婴幼儿奶粉的市场巨大。但由于国内奶粉频频出现问题，国人购买进口奶粉的欲望强烈。但进口奶粉是否真的安全，还需要数据来证明。以母乳为标准，婴幼儿奶粉的主要成为应为乳铁蛋白。调查显示，很多进口奶粉中的乳铁蛋白含量较低，无法满足婴儿的营养的需求。酶联免疫法是检测奶粉中营养成分的主要方法，因此文章采用这一方法对一定数量的奶粉进行了检查，并公布了乳铁蛋白含量。

1 乳铁蛋白的特征以及酶联免疫法

乳铁蛋白是婴幼儿哺乳中不可缺少的一种元素，主要成分为非血红素和天然蛋白糖。人类第一次用固相和液相色谱法分离乳铁蛋白是在1959年，乳铁蛋白对婴儿的免疫系统强化具体积极意义，同时能够抗病毒和促进婴儿吸收。母乳中乳铁蛋白的含量丰富，用于赖以生存的营养元素。但是随着母乳哺乳水平的降低，奶粉应运而生。检验奶粉中乳铁蛋白含量是十分重要的，一般要求，乳铁蛋白的含量要在1-7ml以上才符合要求。随着社会对于乳铁蛋白的认可，在奶粉中添加乳铁蛋白已经成为一种趋势，食品中添加乳铁蛋白也得到法律的支持。我国在法律上也将乳铁蛋白定位为奶粉等食物中营养的强化剂，并对含量做出基本要求。我国主要奶粉进口国包括澳大利亚、新西兰、荷兰和瑞士等，这些国家的奶制品质量较高，但由于对乳铁蛋白的含量要求不同，因此对进口乳铁蛋白的检测是必要的。目前，我国应用较为广泛的乳铁蛋白检测方法为免疫扩散检测法或者酶联免疫法。我国对于国外奶粉的检测较为严格，对由于缺乏对数量合理性的认定，检测结果还存在一定的疑问。至2012年起，我国相关部门就开始对婴幼儿奶粉质量上提高可关注，通过定期试验的方法来检测进口婴幼儿奶粉中的乳铁蛋白含量，并形成报告，但唯一的缺陷是，虽然民众对于乳铁蛋白的作用以及进口奶粉中乳铁蛋白含量的要求尚不明确，因此我们以文献的形式研究检测结果。

2 酶联免疫法使用的准备阶段

酶联免疫法是目前婴幼儿配方奶粉营养成分检测的主要手段，具有较好的效果。检测中所使用的样品为16种市面上热销的婴儿奶粉，本次检测主要检测奶粉中乳铁蛋白的含量。产品来自美国、新西兰等16个国家，其中奶粉的罐体上都有具体的含量标识，范围在5～100mg/100g之间，我们通过该方法检测其真实性。所选的检测仪器为全自动酶仪包被有抗牛乳铁蛋白（LT）的特异性多克隆抗体96孔微孔板，配合洗涤液和缓冲溶液，乳铁蛋白标准品和乳铁蛋白-过氧化物酶结合物，另外还包括1mol/L磷酸终止液，目的就是检验出进口婴幼儿配方奶粉中乳铁蛋白的含量。将溶液稀释后冷藏于2～8℃之间。稀释溶液的配置选择1ml浓缩洗液和4ml蒸馏水，同样冷藏于2～8℃环境中。取适量实验所需的元素，包括氯化钠、氯化钾、磷酸钠等。将其溶于蒸馏水中，并将其调整微碱性，最后配置成1L的该浓度溶液备用。将奶粉样品称好后放于准备好的容器中，本次实验称取质量为1.00g的奶粉样本，将其按照标准稀释之后进行检测，检测后将乳蛋白的含量公布，尤其是对不符合规定的产品进行惩罚。

3 酶联免疫法检测方法的实施

在本次检测中，我们采用平行检测的方法，将各自100升的溶液加入到微孔中，在不接触两种样品的同时添加100l酶的结合物，1h避光孵育后，进行3次洗板，在每孔中加入底物100lTMB，室温控制在（21℃±3℃，孵育时避光进行10min，在每孔中加入终止液50l后，采取酶标仪在450nm条件下读取吸光值。取选取的6种进口奶粉各1.0g作为样品。使用PBS溶液300ml稀释到要求浓度。本次检验中的结果采用标准的曲线显示，显示结果中，有近三成进口婴幼儿配方奶粉的乳铁蛋白的含量不达标，提醒国民要注意选取。

4 酶联免疫法检测进口婴幼儿配方奶粉中乳铁蛋白含量研究

本次研究我们采取标准曲线法对16种进口奶粉中的乳铁蛋白进行研究和报告。采用方法为液相色谱法与电泳法相结合。并以4-参数法绘制标准曲线。

在检测过程中，我们在本次实验过程中，发现不同品牌的奶粉乳铁蛋白含量具有较大的区别，即使在同一种产品中，同样存在不同的乳铁蛋白含量，因此国家要加大对进口奶粉的监管，要求奶粉罐体必须进行产品的标注才能上市销售，并且含量的标注必须要真实。一般稀释倍数为400～600倍，将最终标注在产品的曲线范围内，若不在范围内，将其再次调试后再进行测试。本地实验所采取的方法使常用的方法，由于酶联免疫法具有操作简单、敏感性高、测试效果好等特点，但是对于操作人员的技术能力具有较高的要求。另外，在婴幼儿奶粉的测试过程中，由于测试影响因素较多，要正确测试奶粉中乳铁蛋白的含量，还要正确配置浓度，采用相应的标准对照，测试过程要及时记录数据，对进口奶粉做出最客观的评价。其主要原理是借助了乳铁蛋白在非酸性条件下受热或导致失活，通^测试过程中乳铁蛋白的变化。当然，婴幼儿对于乳铁蛋白的需求会随着年龄的增长而减少，因此要进口不同种类的奶粉产品，并且制定有关的规定。我国对婴幼儿阶段奶粉中营养成分的含量规定为不得低于80%。这要求相关部门加强对进口奶粉的管理，尤其是对其中主要成分乳铁蛋白含量的测试，营养成分符合才能进口。乳铁蛋白是婴幼儿奶粉中必备的元素，由于民众信任这一点，因此近年来成为主要的卖点。一般进口奶粉将含有乳铁蛋白的婴幼儿奶粉视为高级产品，价格较高。但在这一过程中，很多产品借助这一特征打虚假广告。购买此类产品不仅浪费钱财，而且对婴儿的健康造成影响，对现代人而言，要正确认识婴幼儿奶粉的营养成分，对相关部门而言，要进一步的进行检测。

5 总结

乳铁蛋白是奶粉中的主要成分，是奶粉的强化剂之一。在购买过程中，很容易按照乳铁蛋白来判断产品的优劣。但在这一过程中，很多顾客并不能清楚的认识这一点，盲目的购买国外产品。不仅造成经济损失，所购买的产品质量较低。因此，笔者通过具体的实验方式来检验婴幼儿配方奶粉中乳铁蛋白的含量，使民众能够了解奶粉中乳铁蛋白的真正含量，从而正确选择奶粉，确保婴儿的应用安全。正确测试乳铁蛋白并将之公之于众是保证我国公民权利和安全的主要手段。因此我们对16种在销的并且是购买量较大的进口婴儿奶粉进行了检测。检测结果显示，部分进口奶粉中的乳铁蛋白含量并不在规定范围之内，我国目前对于进口奶粉的检测相对严格，但国际上对乳铁蛋白含量的要求与我国要求有一定的差别，这就要求我国进一步明确食品中，婴幼儿奶粉中乳铁蛋白的含量要求，并且增加科研力量，对中国婴儿营养成分需求进行试验和剖析，并将其公布，要求进口奶粉必须标注乳铁蛋白含量，满足国人需求。

参考文献

[1]聂炎炎，刘冬虹，吴环等.婴幼儿配方奶粉中生物素含量的快速微生物检测方法研究[J].检验检疫学刊，2014，（06）.

乳铁蛋白范文第3篇

关键词：肝癌；介入治疗；血清铁蛋白；预后

The Relationship Hepatic Carcinoma Double Interventional Treatment Serum Ferritin Levels and Prognosis

YUAN Ke-hua， ZHENG Jian-ping， ZHANG Pei-xian， DENG Lei， LONG Yi

（Kunming City Yan'an Hospital， Department of Oncology， Kunming Yunnan 650051， China）

Abstract：Objective：to analyze the joint TACE and RFA liver cancer after treatment with conventional serum ferritin level and prognosis，the relationship between. Methods：40 patients with terminal-stage liver cancer，not randomly divided into two groups，group A conventional TACE+RAF therapy，group B，intravenous chemotherapy or best palliative care，including male 16 group A，B group of four people，women，A group of 12 people，B group of eight people，median age group A 63-year-old，group B at the age of 61.Respectively，before treatment，1 month，3 months after treatment to determine serum ferritin，comparing the two groups. Results：A/B group of serum ferritin levels significantly decreased after treatment，but 1 month，3 months after treatment group A drop is more obvious. Conclusion：the serum ferritin level changes have correlation with the progress of the liver cancer or improved，after treatment serum ferritin declined more，the better the prognosis.

原发性肝癌是指肝细胞或肝内胆管细胞发生的恶性肿瘤，是世界上最常见的恶性肿瘤之一，以亚洲和非洲多见。目前，手术仍是治疗早期肝癌的首选方法。但由于肝癌本身的病理特点，绝大部分患者仅能采用非手术治疗。

1 资料与方法

1.1一般资料 本研究通过选取中晚期肝癌患者40例，非随机分为两组，A组采用TACE+RAF治疗，B组采用静脉化疗或最佳姑息治疗，其中男性A组16，B组4例，女性A组12例，B组8例，中位年龄A组63岁，B组61岁。分别在治疗前，治疗后1月、3月测定血清铁蛋白，两组比较，以分析治疗后血清铁蛋白的水平与预后的关系。

1.2方法 A组TACE化疗药物为：5-氟尿嘧啶（750～1000mg）、顺铂（50～100mg）、多柔比星（20～40mg）3种药物同时给药或交替使用。几种药物的联合应用考虑到药物作用于肿瘤细胞的不同周期，药物剂量要视药物毒性反应而定，患者个体反应差异较大。碘油为油剂，抗癌药多为水溶性，混合时将两者同时盛入小杯内，用注射针筒反复抽吸和注出可使其乳化，制成乳剂，再经导管注入。超声监测微气泡形成，也可作为确认消融过程的另一种手段。对较大的肿瘤需重叠布针消融，方法是依次将电极针插入到肿瘤中心以外的各处，然后进行消融。B组化疗方案为5-氟尿嘧啶（1000mg/m2）、顺铂（50～100mg/m2）、多柔比星（20～40mg/m2）。

1.3标本的准备 空腹抽取静脉血3ml，3000r/min离心10min，分离血清。

1.4测定方法 电化学发光免疫测定法，仪器：CHEMCLIN600全自动电化学发光免疫分析仪，北京科美生物公司提供，并配用其试剂盒，参考范围：男16～220（ng/ml），女10～124（ng/ml），血清铁蛋白以≥172（ng/ml）为判断异常临界值。操作步骤严格按照说明书进行。

2 结果

A/B组治疗后血清铁蛋白水平明显下降，但A组治疗后1月、3月的下降更明显，统计学P值=0.06，看似无统计学意义，但其值接近

3讨论

原发性肝癌的血供大部分来自肝动脉，少量由门静脉供血。故肝动脉栓塞后可以阻断或减少肿瘤的主要血供使肿瘤发生坏死、缩小以至消失，正常肝组织不会受到严重影响[1]。肝动脉灌注化疗、栓塞治疗肝癌，肝脏局部药物浓度是全身浓度的100～400倍，而瘤区药物浓度高于正常肝组织5～20倍，对药物发挥抗癌作用极为有利，再加上大剂量灌注化疗药物集中于靶部位而提高抗癌疗效，并可降低化疗药物的体循环浓度，减少全身化疗毒性。手术或TACE联合应用，可以进一步提高疗效。RFA的消融缘通常只有0.5～lcm而残留癌组织，最近的cooled-wet技术可能提高RFA的效果。TACE联合RFA治疗恶性肿瘤将有利于发挥各自的优点，增加治疗效果：①在对肿瘤加热时，瘤内及瘤周的血液循环可起到冷却作用，TACE可以减少肿瘤组织的血供，增加肿瘤热消融的坏死体积[2]； ②热效应可以增加肿瘤组织对化疗药物的摄取和肿瘤细胞对药物的敏感性；③RFA可增强机体局部和全身的细胞免疫功能，预防肿瘤复发；④TACE可对肿瘤内潜在的病灶起到治疗作用。

4 结论

铁蛋白是一种分子量较大的含铁蛋白，由24个非共价键连接成亚单位，分子量大约为460000，为机体内一种贮存铁的可溶性组织蛋白，它由一个蛋白质外壳和一个铁核心构成。血清铁蛋白是检查体内铁缺乏的最灵敏的指标。铁蛋白也是恶性肿瘤的标志物之一。肝癌患者的SF水平均较正常人高，提示肿瘤患者机体普遍存在着铁超载。证据表明，许多致癌理化因子可直接或间接干扰动物和人体铁代谢，使铁排出减少，积蓄增加。有20～30%甲胎蛋白阴性的肝癌，目前没有很好的肿瘤标志物参考，血清铁蛋白也许是比较敏感的指标之一。

参考文献：

[1]王茂强，张金山，崔志鹏，等.联合应用肝动脉栓塞与经肝静脉逆行栓塞治疗肝癌的临床初步应用[J].中国医学影像学杂志，1997，5（3）：155-157.

乳铁蛋白范文第4篇

1　铁蛋白的分布

铁蛋白可溶于水、胞浆和血浆，在细胞内液和外液中均较稳定。铁蛋白在脾脏、肝脏、骨髓中含量最高，在其他组织、血清、血细胞中含量相对较少，双壳类动物(如合浦珠母贝)的外套膜、消化腺和肌肉中的含量比较高。细胞内的铁蛋白主要是存在于细胞质中，脊椎动物的线粒体和细胞核也含有少量铁蛋白。昆虫还能向外分泌铁蛋白。

2　铁蛋白的结构

不同来源(如人、马、牛蛙和细菌等)的铁蛋白在一级结构上差异很大(氨基酸序列相似性有时只达到14％)，但都有相同的结构体系，都是由24个亚基以高度对称性方式组成的内空腔的蛋白壳，空心直径约为8 nm，外径12-13 nm，分子量为500 kDa，空腔中可积累多达4 500个铁原子。

不同生物铁蛋白的24个亚基相差也较大，在脊椎动物中，这24个亚基分为两种：H亚基(氧化酶活性位点)和L亚基(氧化酶非活性位点)。H亚基含有一个氧化Fe2+的氧化中心，L亚基负责铁蛋白“空腔”的形成，它们在贮存铁和调节铁分布中起重要作用。在哺乳动物中，不同铁蛋白(H24L0、H22L2、HOL24)的H亚基和L亚基的比例不同，铁蛋白对金属的亲和力依赖于蛋白壳中这两个亚基的组成比例，这个比例在不同发育时期、不同组织、不同细胞是不同的，这就满足了各种细胞对铁的不同的需求。在牛蛙、鲑鱼、伯氏肩孔南极鱼和纽氏肩孔南极鱼等鱼的铁蛋白中还有第三种亚基――M亚基，牛蛙中重组M-铁蛋白比重组H－铁蛋白有更高的亚铁氧化酶活性，在伯氏肩孔南极鱼和纽氏肩孔南极鱼中只有H和M亚基，且亚基的组成具有组织特异性，脾脏中为M-均聚物，肝脏中为H／M杂聚物。昆虫分泌的铁蛋白的24个亚基共有4种，分子量分别为24 kDa、26 kDa、28 kDa、30 kDa。24kDa和26kDa亚基有相同的基因编码并且具有亚铁氧化酶活性，28 kDa亚基没有亚铁氧化酶活性位点且由不同的基因编码，30kDa亚基的序列还不清楚。

3　铁蛋白的功能

3.1　储存铁离子

铁蛋白可储存细胞中多余的铁，当外源可利用的铁不足时，铁蛋白可释放铁被细胞利用。铁蛋白储存铁分为4个步骤：Fe2+的进入及氧化、Fe3+的迁移、铁核形成以及铁核的增大，铁的氧化发生在蛋白壳中，将Fe2+绑定在亚铁氧化酶中心，Fe2+和氧反应生成了Fe3+，Fe3+移向空腔表面，继而成核，矿化形成铁核。当细胞缺铁时，铁蛋白中的Fe3+被还原为Fe2+，Fe2+与运铁蛋白结合，被氧化为Fe3+再运至需要代谢的场所，其过程可用图1表示。

过量铁有“毒”的原因是：过量的二价铁与过氧化氢反应产生活性自由基(Fe3++H2O2Fe3+OH-+HO)，引起蛋白质、脂肪、DNA的氧化，从而引起细胞损伤甚至死亡。而铁蛋白可以在有氧条件下与二价铁离子反应，将铁离子螯合在内部的空心结构中，抑制了铁的氧化反应，减少自由基的产生，从而保护细胞不受铁过量引起的氧化损害。铁过量导致了肝脏的损害，主要是因为过量铁增加了细胞膜脂肪的氧化，而由此引起的保护效应，即是细胞增加了铁蛋白的合成，并以无毒的形式来沉积大量的铁。

3.3　其他作用

铁蛋白不仅是主要的铁调节蛋白，而且在其他方面也有重要作用，可作为应激反应时的反应蛋白，对粒细胞和巨噬细胞产生过程起到调节作用，对骨髓起源细胞有抑制作用，具有抑制造血系统细胞增生和淋巴细胞增殖的作用。

4　铁蛋白合成的调控

4.1　翻译水平的调节

铁调控蛋白(IRP)和铁反应元件(IRE)相互作用的铁依赖性调节体制是调节铁蛋白表达的典型体系。铁反应元件是位于铁蛋白5’非翻译区的一个特定序列，它与铁调节蛋白有很高的亲和力，IRE／IRP复合物的形成阻止了核糖体的组装和翻译，IRE与IRP的结合受细胞中游离铁浓度的调节，当细胞内铁离子浓度较低时，IRP／IRE阻止了核糖体组装，从而抑制了铁蛋白的翻译；当铁离子浓度升高时，IRP／IRE减少，从而增强了铁蛋白的翻译，IRE／IRP体系同时调节H-亚基和L-亚基。

4.2　转录水平的调节

铁调节铁蛋白的生物合成主要是在翻译水平，但是也会在转录水平上调节铁蛋白的表达。如给雄性大鼠喂食含过量铁的饲料，其肝脏中的铁蛋白H-亚基mRNA及其单体蛋白分别是正常组的8倍和2倍；在大鼠的腹腔中注射0.5 mL柠檬酸铁铵溶液(10 mg／mL)后，肝脏中的L-链mRNA增加了2倍；对罗氏沼虾进行肌肉注射FeCl3溶液，3 h后，肌肉中铁蛋白mRNA增加了61倍，卵巢中铁蛋白mRNA增加近4倍，24h后，心脏铁蛋白mRNA增加了8倍，且48 h内一直维持在较高水平。以上这些实例都说明了铁也会在转录水平上调节铁蛋白的表达，但具体调控机制仍在进一步的研究中。

4.3　其他因素对铁蛋白基因表达的调控

除了铁离子对铁蛋白的合成有调节作用之外，还有许多因素调节着铁蛋白的合成，如氧化应激、其他的金属离子、细胞因子、NO等都影响铁蛋白基因的表达。氧化应激可直接调节铁蛋白基因表达；Zn2+、Cd2+能调节铁蛋白mRNA的合成；白细胞介素IL-1(急性反应因子)会优先调节H-亚基的合成，提高了H：L亚基的比例；NO通过作用于胞浆中的IRP，调节IRP与IRE的亲和性实现铁蛋白合成的调节，当NO合成增加时，活化IRP，使之与IRE结合，降低铁蛋白的合成，导致细胞内铁浓度上升；氧化亚氮(NO+)会引起IRP2的降解，从而导致铁蛋白合成增加。

乳铁蛋白范文第5篇

[关键词] 鉴别；良恶性；胸腔积液

中图分类号：R446 文献标识码：A 文章编号：2095-5200（2017）01-098-02

DOI：10.11876/mimt201701039

胸腔积液是因血液循环障碍引起胸腔内液体积聚[1]。胸腔积液通过超声波检查、胸腔穿刺、X线检查结合常规叩诊等可明确诊断[2]。结核性及非结核性良性胸腔积液一般预后良好[3]。恶性肿瘤引起的恶性胸腔积液治疗难度较大，预后较差[4-5]。本研究探讨胆固醇、C-反应蛋白、铁蛋白、癌胚抗原、β2微球蛋白、乳酸脱氢酶、腺苷脱氨酶等指标在良恶性胸腔积液快速鉴别诊断中的价值。

1 资料和方法

1.1 一般资料

166例于我院就诊明确诊断的胸腔积液患者病程1个月～3年，其中结核性胸腔积液46例、非结核性良性胸腔积液80例、恶性胸腔积液40例，三组患者性别、年龄、病程等一般资料差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 检测仪器、试剂 生化检测的仪器为北京中西远大科技有限公司生产的M401542全自动生化分析仪及其配套试剂，安徽赫尔生物医学检验科技有限公司提供的相关试剂。

1.2.2 检测方法 使用一次性胸腔积液采集装置抽取患者10mL胸腔积液，分离上清液。癌胚抗原采用化学发光法检测；乳酸脱氢酶、腺苷脱氨酶采用酶联吸附法检测；β2微球蛋白、C-反应蛋白运用免疫投射比浊法检测；结核抗体运用斑点免疫胶体金渗滤法进行检测；铁蛋白、胆固醇采用化学发光法检测。

1.3 统计学方法

采用统计学软件spss13.00处理数据，x±s表示计量资料，用t检验，以（P

2 结果

检测结果显示，恶性胸腔积液患者的胆固醇、铁蛋白、癌胚抗原、乳酸脱氢酶水平明显高于结核性、非结核性良性胸腔积液患者；结核性胸腔积液患者的腺苷脱氨酶水平明显高于其他良性、恶性胸腔积液患者；良性胸腔积液患者的C-反应蛋白、β2微球蛋白水平明显高于结核性、恶性胸腔积液患者，差异均有统计学意义P

3 讨论

胸腔积液是心脏疾病、全身性疾病慢性发展过程中常见并发症[6]，寻找特异性高的检测指标对该病的诊治具有重要作用。

正常人体内的铁蛋白含量在30～130μg/L，主要分布在肝脏、脾脏[7-8]。机体长期处于贫血状态或有脏器损伤时，会加速铁蛋白的合成速度，使铁蛋白水平明显升高。恶性肿瘤可导致铁蛋白明显升高[9]。癌胚抗原水平越高，说明恶性肿瘤发展程度越严重，预后越差[10-11]。所以，本组恶性胸腔积液患者的癌胚抗原水平（52.7±29.9）μg/L明显高于其他类型胸腔积液，癌胚抗原水平可以作为良恶性胸腔积液的鉴别指标。腺苷脱氨酶是一种巯基酶，广泛分布在机体内各组织，是细胞免疫活性的重要组成部分[12-13]。其对肝脏疾病、胸腔积液、肿瘤、血液疾病具有重要的诊断价值。国外学者的一项荟萃分析显示腺苷脱氨酶是诊断结核性胸膜炎的良好指标[14]。本研究中结核性胸腔积液组的腺苷脱氨酶水平同样明显高于其他两组。胆固醇水平在炎性因子刺激下会明显增高，特别是低密度胆固醇活性明显升高[15]，因此恶性胸腔积液患者的胆固醇水平明显升高。C-反应蛋白是机体出现炎性反应的特异性标志。非结核性良性胸腔积液患者主要缘于急性感染，所以炎性指标C-反应蛋白活跃[16]。β2微球蛋白主要由淋巴细胞生成，机体发生感染时激活了免疫反应，加速β2微球蛋白的分泌，使其水平明显升高，因此本研究中结核性、非结核性良性胸腔积液患者的β2微球蛋白水平明显高于恶性胸腔积液患者。乳酸脱氢酶是一种氧化还原酶，分子质量较大，主要分布在骨骼肌、心脏、肝肾等组织[17]，有报道其对漏出液和渗出液的鉴别具有一定价值[18]。本研究中结核性胸腔积液组、恶性胸腔积液组乳酸脱氢酶均明显升高。上述各指标联合检测可能提高鉴别的灵敏度。

参 考 文 献

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