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一、遵循认知规律,发挥主体作用,培养创新思维
思维是大脑对客观事物间接概括的反映,创新思维不仅能揭示客观事物的本质和内在联系,而更重要的是能产生出新颖的、前所未有的成果。对中学生来说,头脑中旧的表象很少,展现书本知识发生发展的教学过程,就是学生创新思维的培养过程。在目前中学物理教学中仍存在注入式教学模式,教师在教学中只注重学习的结果,而忽视学习的过程。学生缺少自主学习的思维空间,就很难谈得上创新思维的培养。要真正培养学生的创新思维。教师在教学中就要重视设计引导学生的学习活动,以相应的创新思维的熏陶,发展学生的创新意识。教师要不断激励学生通过观察、比较、实验、归纳、类比等手段提出种种假设或猜想,使学生逐步学会运用假设或猜想的方法解决问题,同时重视在教学中再现前人是如何创造、发明的,让学生在前人走过的轨迹上,经历失败的磨砺,体会创造成功的喜悦。例如牛顿在伽利略等科学家研究的基础上建立牛顿三大定律,各种原子模型的建立和不断完善的过程等内容中突出科学创新思维的教育。并逐步渗透如理想化的方法、模型的方法、极限的方法、控制变量的方法等,使学生知道为什么要建立物理模型,学会根据现象或事实进行科学推理的方法,这不仅有助于学生加深对基本知识的理解,还有助于加深对研究方法的领悟,提高学生对科学的认识和自身的创造能力。
在重视学生创造性思维能力培养的同时,也必须重视对学生创造性人格的培养。例如在物理教学中穿插介绍伽利略敢于怀疑、不盲从权威的思想;介绍布鲁诺为坚持真理而献身的精神;学习牛顿的勤于思考、善于总结;学习居里夫人的刻苦钻研、勇于实践;结合我国当代的物理学家为祖国的强大而奋发拼搏的生动事迹,激发学生勇于探索、积极进取的科学热情。这对学生创新能力的培养起着极其重要的作用。
二、改革实验教学,营造创新氛围,培养创新能力
实验教学是物理教学实施创新教育的重要基础和手段,实验不仅对激发学生学习兴趣,提高实践能力具有不可替代的作用,而且也是为学生创设创新氛围,培养创新意识、创新思维、创新能力,提高科学素质的有效途径。
当前实验教学普遍存在着只重视简单的操作练习的现象。教材中的演示实验和学生实验,从器材、方法到表格设计都是按照规定好的步骤和方法进行实验,教师很少去引导学生思考和探索,有些学生在实验中只是依葫芦画瓢,根本不能领会实验的原理和思想,不利于学生创新思维的培养。因此必须改革实验教学的方法。
例如,在验证机械能守恒的实验中,可以启发学生思考,你能否利用现有装置测定当地的重力加速度?你还能设计几种测定当地重力加速度的方法?在学生电学分组实验中,在掌握实验原理的基础上,允许学生用不同的器材、不同的实验步骤进行操作实验,可以极大地提高学生学习物理的兴趣,发展学生的个性,活跃学生的创新思维。在实验中学生需要在各种因素中取舍。对所得的信息进行筛选,这就要求学生在追求既定目标的过程中应变、思考和探索,使学生的分析、抽象、综合、表达的能力都得到训练和发挥。
在演示实验中,教师可以不拘泥于教材或教参的安排,进行一些创新设计,如可以将一些演示实验改为学生探索性实验。让学生选择器材、设计实验方法,在实验中发现问题和寻找解决问题的方法等等。通过创设条件,让学生充分地动脑、动手、动口,发挥学生学习的主动性,从而激发学生的创造性思维,对学生创新能力的培养起着潜移默化的作用。在实验教学中,教师不失时机地对学生中的标新立异的方法给予肯定、支持和帮助,鼓励学生大胆地猜想和独立地思考,并通过实验否定错误的假设或修正不完善的猜想,从而使学生解决问题的勇气、信心、毅力、科学的批判精神和创造力得到有效的培养。
三、开展研究性学习活动,促进学生创新能力的进一步发展
创新教学的构成要素是研究性、主体性、发现性、归纳性等,这就要求在实施教学方法创新的同时,用“创造性的教”为学生“创造性的学”创造环境和条件。研究性学习就是根据这一需要设置的新的课程计划,具有典型的创新教育功能。
研究性学习是学生在教师的指导下,从周围生活和社会生活中选择和确定研究课题,以类似于科学研究的方法主动地获取知识、应用知识、解决问题的学习活动。通常有:查阅资料、实验操作、走访专家、社会调查、问题讨论、现场观察等。
关键词:嬴得值法大金水库 施工管理应用
中图分类号:TV62文献标识码:A 文章编号:
武穴市大金水库位于武穴市大金镇,大坝建在华阳水系大金河上游,水库承雨面积为29.6km2,总库容3159万m3,是一座以灌溉为主,兼有防洪、养殖、供水等综合利用的中型水库,水库设计灌溉面积为7.0万亩,有效灌溉面积为5.75万亩,养殖面积达1900亩,防洪保护面积为2万亩,人口1万人。水库大坝下游3.5km处为京九铁路,2.5km处是泸蓉高速公路。
武穴市大金水库正常溢洪道包括进水渠、控制段、一、二、三级泄槽及消力池段。在施工过程中分别采用表格法、横道图法及曲线对溢洪道一、二、三级泄槽及消力池段的费用、进度综合分析控制。
(1)表格法在一级泄槽及消力池段中的应用
从上表中可以看出一级泄槽及消力池段底板C25砼均超过计划预算费用、工期,经分析,主要是一级泄槽陡坡段底板仅有单层钢筋网,浇筑砼时钢筋网容易上浮,经设计单位同意后增加锚杆固定。砼浇筑速度、质量均有很大提高。
(2)横道图法在二级泄槽及消力池段中的应用
从上图中可以看出二级泄槽及消力池段除基础凿毛均按计划预算费用、工期完工外,其余项目均超过计划预算费用、工期。经分析主要是由于施工时雨水天气较多,严重影响了施工进度,并增加了防水措施费用。
为了保证工程能够尽快脱险,工地召开会议确定采取以下措施:(1)发挥大禹“铁军”的精神,所有施工作业人员做到小雨、阵雨照常作业,施工管理人员跟班管理;(2)调整施工进度计划,针对2月、3月份雨水天多的特点,重点部位搭彩条布棚遮雨,抢浇溢洪道二级泄槽边墙,溢洪道底板排到4月份浇筑;(3)根据天气预报情况及时调整施工部位,做到晴天露天作业,雨天施工隧洞;雨天扎钢筋、立模板,晴天浇筑砼。
(3)曲线法在三级泄槽及消力池段中的应用
从上图中可以看出三级泄槽及消力池段费用偏差CV、进度偏差均为正值,项目运行节支、工期进度提前。
结论:在项目的费用、进度综合控制中引入嬴得值法,可以克服过去进度、费用分开控制的缺点,可定量地地判断进度、费用的执行效果。
参考文献
【关键词】宏基因组学;微生物群落;遗传物质;口腔
【中图分类号】Q781
【文献标志码】A
宏基因组学认为,生命研究的对象应是生物环境中全部微小生物的基因组,即特定环境下所有生物遗传物质的总和。它包含了可培养的和不可培养的微生物的基因总和,微生物主要包括环境样品中的细菌和真菌;因此,宏基因组学就是一种以环境样品中的微生物群体基因组为研究对象,以功能基因筛选和测序分析为研究手段,以微生物多样性、种群结构、进化关系、功能活性、相互协作关系以及与环境之间的关系等为研究目的的新的微生物群落研究方法,也称为微生物环境基因组学、元基因组学或生态基因组学。
利用宏基因组学技术研究口腔微生物,无需单一分离培养某一种类的微生物,即可直接在基因水平上研究口腔微生物,包括可培养和不可培养微生物。宏基因组学应用于口腔微生物的研究,主要包括两个方面:一方面进行微生物生态学研究,从整体微生物群落水平来研究口腔微生物,揭示口腔微生物群落多样性及其变化;另一方面是进行口腔微生物及其基因的研究,从中筛选到新的功能基因及其产物。通过这两方面的研究,较全面地了解口腔微生物的群落结构和功能基因组,为深入探索口腔微生物的代谢活动,最大限度地发掘口腔微生物资源提供可能。
1 宏基因组学的研究方法
宏基因组学是从特定环境中直接分离所有微生物的DNA,选择合适的载体用于克隆DN段,将DN段克隆到宿主细胞中进行表达,根据某些生物活或基因序列筛选有价值的克隆并进行其功能分析。
1.1宏基因组文库的构建
1.1.1环境微生物DNA的提取 环境样品DNA的提取是基因组文库构建中最重要的一步,不仅要尽可能地将环境中所有微生物的DNA提取出来,而且还要保证一定的DN段长度和完整性。根据提取样品总DNA前是否需要分离细胞,可将其提取方法分为原位裂解法和异位裂解法。原位裂解法可直接破碎样品中的微生物细胞而使其DNA得以释放。原位裂解法无需对样品微生物进行复苏,黏附颗粒上的微生物细胞亦能被裂解,所得DNA能更好地代表微生物的多样性。由于原位裂解法所提取的DN段仅为1~50kb,故其通常用于构建小片段插入文库(以质粒或入噬菌体为载体)的DNA提取。异位裂解法则先采用物理方法将微生物从样品中分离出来,然后以较温和的方法抽提其DNA。此法提取可以获得长度为20~500kb的大片段DNA,而且纯度高,但却容易丢失微生物物种信息。该方法适用于构建大片段插入文库(以黏粒或细菌人工载体为载体)的DNA提取。
1.1.2载体选择 目的基因能否有效地转入宿主细胞并在其中高表达,在很大程度上取决于载体。通常用于DNA克隆的载体包括质粒、黏粒和细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)等。质粒一般用于克隆小于10kb的DN段,适用于单基因的克隆与表达。黏粒又称柯斯质粒或柯斯载体,用于克隆大片段的DNA分子,其克隆外源DN段的极限高达350kb,远远超过质粒载体的克隆能力。BAC用于克隆150kb左右大小的DN段,最多可保存300kb个碱基对,转化率高,而且其以环状结构存在于细菌体内,易于分辨和分离纯化。另外,构建能容纳40kb外源DNA插入片段的fosmid文库也有报道。
1.1.3宿主选择 目前,常用的宿主主要有大肠埃希菌以及链霉菌属或假单胞菌属。一些缺陷型突变体细菌也可以作为宿主进行宏基因组文库的功能筛选。宿主的选择主要应考虑其转化率和宏基因表达以及重组载体在宿主细胞中的稳定性和目标性状的筛选等。对于任何宏基因组来源的基因来说,大肠埃希菌依然是最理想的克隆和表达宿主。也可以用其他宿主菌,例如被用来鉴定与新抗生素生物合成相关基因的浅青紫链霉菌和一些革兰阴性细菌。也可以用穿梭黏粒或BAC载体将构建于大肠埃希菌的文库转入其他宿主,如链霉菌属或假单胞菌属中。根据不同微生物产生活性物质的差异和研究目标的不同,选择不同的宿主。随着技术的成熟和新宿主的选择,基因筛选率和功能基因检测率得以提高,进而宏基因组文库的目标基因的表达也得以提高。
1.2宏基因组文库的筛选
根据研究目的,宏基因组文库的筛选通常有功能筛选和序列筛选两种方法。功能筛选最常用方法是根据重组克隆产生一些酶蛋白功能活性,采用各种检测手段,挑选活性克隆子,得到完整的功能基因和带有目的基因的基因簇,发现全新的基因或活性物质。功能筛选首先要求功能基因或带有目的的基因簇在宿主中表达,但因其受到检测手段的限制,往往是在数千个甚至数百万个重组克隆子中才能检测到有用的活性克隆。序列筛选是依赖于目的基因的保守DNA序列,以序列相似性为基础,执行某类功能的酶可能具有相似的基因序列,根据已有的序列信息设计引物,进行PCR扩增或杂交筛选阳性克隆子。序列筛选一般只能获得结构基因的片段,而不能获得完整的功能基因;但是,它可以将扩增产物进行标志并将其作为探针筛选宏基因文库,以获得完整的功能基因。用这种方法有可能筛选到某一类结构或功能的蛋白质中的新分子。
宏基因组文库的筛选除了功能筛选和序列筛选法外,还可以采用底物诱导基因表达法(sub-strate-induced gene expression,SIGEX)。SIGEX是以代谢相关基因或酶基因往往有底物存在的条件下才表达,反之则不表达的原理来筛选目的代谢基因的。SIGEX的优点在于它为高通量筛选提供了保障,而且不需要对底物进行修饰。
2 宏基因组学在口腔微生物研究领域中的应用
2.1口腔微生物群落结构分析
口腔是一个由大量微生物组成的复杂的生态系统,人类口腔中寄居着大约700多种细菌。人类口腔适宜的温度、湿度,丰富的营养来源,结构的复杂性和理化性质的不同,为口腔内各种微生物的生长、繁殖和定居提供了非常适宜的环境,因而也就造就了口腔微生物群的多样性。口腔微生物大部分可以相互关联并形成生物膜,抵抗机械清除力或抗生素治疗,但是在环境变化或其他口腔情况(如个人口腔卫生质量)变化触发时,它们也可成为致病微生物。
菌斑指示剂和传统培养方法以及常规的PCR特异性扩增的分子生物学方法在某种程度上都不能完整地反映整个微生物群落的组成和动态变化,不适合用其研究复杂的口腔微生物群落。此外,在难培养或不可培养的微生物当中,可能也有致病菌匿藏其中,因而也不能有效地用其研究与病程相关的微生物。
随着分子生物学和分子遗传学技术的发展,在基因组学的基础上诞生了宏基因组学这一门崭新的交叉学科。宏基因组学是继发明显微镜以来研究微生物最重要的进展,将为微生物世界带来革命性的突破。Turnbaugh等利用16S rRNA基因测序发现:胖人和瘦人的内脏中有着不同的微生物菌群;当胖人减肥的时候,他们内脏中的细菌群基因也同样发生变化,更加接近瘦人内脏中的细菌群。
基于常规的口腔细菌培养方法和细胞学显微镜检查,目前公认变异链球菌和乳酸杆菌等是引起龋病的主要致病菌;但是,随着宏基因组学在微生物的种类和多样性研究中的应用,有关龋病是由单一细菌引起或是由生物膜中的多种细菌引起的定论面临质疑。目前普遍认为,龋病并不是仅由变异链球菌或其他任何一种菌斑中的细菌单独引起的,而是由各种产酸菌相互作用的结果。
Aas等在对51名龋患者的1285个菌斑细菌的16S rRNA序列进行分析后发现,50%的细菌不能识别,一些新的细菌菌种与龋病的发生有关。Keijser等在用焦磷酸测序法分析健康人涎液和牙菌斑中细菌群时发现,口腔微生物具有多样性。即他们从98名健康成人口腔中取得的牙菌斑就由1万个微生物表型组成,其种族数远远超过之前报道的通过培养或者传统克隆和测序技术定义的700种口腔微生物表型。
Zaura等在利用焦磷酸测序技术检测了3名健康高加索人口腔内5个部位的微生物组后发现,在健康人的口腔中微生物有3600种独特物序列,超过500种不同的分类单元或“物种级”表型和88~104种高级分类群,每个单独的样品平均藏匿有266种分类单元。从这3名个体微生物组的测序结果分析可知,高级分类群、分类单元和独特序列都有一个较大的重叠,即84%的高级分类群、75%的分类单元和65%的独特序列至少在这3个微生物组中的2个组中存在。这3名个体的总共6315个独特序列中有1660个相同序列,这1660个相同序列,即“核心微生物组”贡献了66%的测序内容,重叠的分类单元贡献了94%的内容,而几乎所有的内容(99.8%)都属于共享的高级分类群。
研究证实,在不同的健康人的口腔微生物中,大部分微生物组是相同的,提示可能存在健康口腔核心微生物组。Kanasi等在对80名患龋和无龋婴幼儿牙菌斑微生物的16S rRNA序列克隆分析中发现,两者之间存在着139种不同微生物。Gross等通过酶促法测序技术对无龋和患龋年轻恒牙牙菌斑微生物的16S rRNA序列进行分析后认为,龋齿中产酸菌除了变异链球菌和乳酸杆菌外,月形单胞菌、奈瑟菌和缓症链球菌同样是潜在的产酸细菌。Willner等等在利用高通量测序技术检测了19名健康人口腔咽部的病毒宏基因组序列后发现,口腔咽部是一个潜在的被噬菌体T3侵蚀的肠道菌储存库。另外,他们还发现了编码血小板凝集因子PblA和PblB的两个寄生于变异链球菌中的噬菌体sm-1基因,而之前有研究称在心内膜上发现了变异链球菌。这说明,口腔中的病毒与心脏疾病存在潜在的联系。
宏基因组学技术可以避开传统的培养方法,在DNA水平来探讨口腔微生物群落结构及其与环境微生物的关系。微生物多样性在基因水平上主要表现为基因组大小和基因数目的多样性,遗传物质化学组成的多样性和某些特异性序列的差异。宏基因组技术为研究口腔微生物复杂群落和多样性提供了重要的技术手段,通过快速可靠地获得口腔微生物中各种微生物的菌落指纹和特征性核苷酸序列,以系统分析口腔微生物的多样性及其分类地位,发掘丰富的口腔微生物资源。
2.2口腔微生物宏基因组文库中的新型基因筛选及其功能
宏基因组学除了研究微生物群落结构及其功能外,还可用于发现新的基因和开发新的微生物活性物质。Jiang等构建土壤宏基因文库,成功地克隆和鉴定出一种新型的β-葡萄糖苷酶基因,该基因包含一个由151个氨基酸编码组成的多肽。该研究对深入挖掘土壤未培养微生物的β-葡萄糖苷酶基因资源和该基因功能具有的重要意义。陈春岚等从富集培养物宏基因组文库中筛选出一个表达木聚糖酶基因umxyn10B,该基因大小为999bp,编码产物的氨基酸序列具有较好的同源性。对其功能进行研究发现,该酶具有优良的理化特性,可广泛应用于食品、能源、造纸和纺织等行业。Yu等利用宏基因功能筛选发现的两个新型低温活性酶脂EstM-N1和EstM-N2,属于细菌脂肪分解酶Ⅷ家族成员。这一发现将推动生物催化剂的应用。
当前,宏基因组学技术已经在微生物学研究的诸多领域,尤其是在发现具有潜在应用价值的次生代谢产物方面显示出了无穷的魅力,但是,利用宏基因组技术探索口腔微生物的新的功能基因尚处于起步阶段。Warburton等对口腔细菌群体中的耐药基因进行了分析,结果发现一个新的耐四环素基因tet32能够使四环素失活。虽然对口腔微生物新的功能基因及其功能研究还太少,但依然可以借助宏基因组学技术发掘新基因,以利用这些新基因在口腔医学行业发挥应有的作用。
原告:蒲学良,男,1979年1月出生。
被告:洪江市黔城建材厂。
原告蒲学良之父蒲才金在当地长期从事房屋检漏工作,并以此作为生活的重要收入来源。1998年9月,蒲才金与被告洪江市黔城建材厂达成口头协议,由蒲才金为该厂的进、出车车间屋顶进行检漏,报酬为280元。但双方对检修中有关安全问题未作明确约定。同年9月26日,蒲才金邀约另外二人一起为被告车间屋顶检漏,当天即检修完进车车间屋顶。第二天早上,蒲才金按习惯喝了些酒后,又与其他二人为被告出车车间屋顶检漏,检漏完两槽瓦后,蒲才金便问被告一职工潘××,旁边的石棉瓦要不要检漏,潘说检一下也可以。稍事休息后,蒲才金即准备为石棉瓦检漏,因石棉瓦无缘壁(即无纵向垫板),蒲才金不小心踩在石棉瓦上,石棉瓦断裂,蒲才金从屋顶上掉落下来,头部着地,当即昏迷不省人事约5分钟,其亲属将蒲才金送往黔城医院抢救,后急转怀化市第二人民医院,终因伤势严重,经救治无效而死亡。死者家属共花医疗费6755.47元,丧葬费3000元。被告为原告方垫付包括医药费在内的各种费用8400元。
原告蒲学良向湖南省洪江市人民法院起诉称:其父蒲才金为被告房屋检漏过程中不幸死亡,属因公死亡事故,应享受有关政策范围的福利待遇,要求被告支付抚恤费、医疗费、丧葬费等。
被告洪江市黔城建材厂答辩称:蒲才金检修车间屋顶是加工承揽行为,且酒后高空作业,自己不小心出了事故。我厂在出事后采取了积极态度,已垫付有关费用8400余元。故我方不应承担任何责任。
「审判
洪江市人民法院经开庭审理后认为:原告之父蒲才金与被告达成房屋检漏口头协议是一种加工承揽合同关系,承揽人应对履行承揽义务的行为承担风险责任。故蒲才金在承揽活动中发生事故的后果应由自己承担。原告要求被告承担责任的诉讼请求不予支持。依照《中华人民共和国民法通则》第一百零六条之规定,该院于1999年5月25日判决如下:
驳回原告要求被告支付抚恤费、医疗费、丧葬费的诉讼请求。
宣告判决后,双方当事人均未提起上诉,该判决已发生法律效力。
「评析
一、本案加工承揽合同关系是否成立?加工承揽是指承揽人以自己的设备、技术和劳力,根据定作人提出的品名、项目、质量要求为定作人进行某种加工、定作和修缮的行为。本案死者蒲才金与被告间达成的房屋修缮口头协议,从内容上来讲是符合加工承揽合同要求的,双方依习惯实际履行了口头协议。据此能推断蒲才金与被告的加工承揽合同关系成立,不是一种雇佣关系(劳动法律关系)。无疑,本案也有很多与临时雇佣关系极其相似的行为特征,因此本案涉及到加工承揽与临时雇佣劳动的区分问题。本案中有一个事实,即蒲才金长期在当地从事房屋检漏工作,并以此作为生活的重要收入来源。有了这一点,本案定性为加工承揽合同关系是比较恰当的。同时,重要的一点是,加工承揽关系中承揽人是以自己的名义来履行加工承揽义务的,而雇佣关系劳动者是以雇佣方的名义来从事劳动的。所以,本案争议的法律关系难能认定为雇佣劳动关系。
关键期喂食扬色饲料,通体血红
血鹦鹉是由红魔鬼(Cichlasoma synspilum)父亲和紫红火口(Cichlasoma citrinellum)母亲所得的第一子代(F1)。但每一只血鹦鹉依嘴型、头背部和体色来区分,没有一只是完全相同的。
在小血鹦鹉苗出生后,没有任何血鹦鹉的特色,反而像是一般中南美洲的慈鲷鱼种。
经过约20天的养育,小血鹦鹉的外型会慢慢转变,头背部肌肉渐渐地隆起,厚度也开始增加,体色也由条纹黑慢慢变成银灰色。此时血鹦鹉体内的红素已经开始有累积增生的趋势,但是体长约3公分的小血鹦鹉体色不是红的。大约在出生后50天、体长约5公分时,身体才会显现出红色。建议饲主在此时以“扬色饲料”喂食,不但能充分的提供小血鹦鹉营养所需,还可以加速血鹦鹉及早转成火红的红色。这段时间,血鹦鹉在营养上如不充足,体色就不会变红,此时是决定它一生体色的关键期。
血鹦鹉另一个特色是浑身圆滚滚的可爱造型,但这并不是因为它吃了过多饲料造成的。想培养成浑圆饱满的血鹦鹉,应该从两大方面着手:一是在小鱼苗阶段,提供充足的食物供其发育;二是饲料的选择,应取蛋白质含量在32上下的高蛋白饲料(一般产品外包装皆会注明成份),使血鹦鹉身材圆滚。
血鹦鹉的等级和寿命
一般市场上的血鹦鹉大致分为特A级、A级、B级三级。随着等级的不同而有不同的价差。血鹦鹉的寿命可长达4~5年之久。四、五年的血鹦鹉体长大约15至20公分,随之而来将出现鱼只衰老的各种症状,如体色褪色、脊椎骨弯曲、鱼鳞脱落、活动力降低等等。
水含氧量不足 血鹦鹉第一个喊救命