液相色谱仪

前言：想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗？我们特意为您整理了5篇液相色谱仪范文，相信会为您的写作带来帮助，发现更多的写作思路和灵感。

液相色谱仪范文第1篇

关键词：液相色谱技术；高效液相色谱仪；检定；气相色谱

中图分类号：O657文献标识码：A文章编号：1009-2374（2009）16-0168-02

高效液相色谱法具有分离速度快，分离效能高，检测灵敏度高，选择性能高的特点，而且液相色谱对样品使用范围广，只要求样品能制成溶液，流动相可选择的范围也很宽，因此现在液相色谱在许多领域得到了广泛的应用。其中高效液相色谱仪是分析实验室的常用分析仪器之一，它担负着食品、劳卫等诸多指标的检测，仪器条件经常变化，色谱柱经常拆卸，因此需要对色谱仪经常检定以发现仪器性能的变化。但从我国目前的实际情况看，不少使用分析仪器的工作者常因为不熟悉仪器的结构原理，不甚了解仪器的技术指标对分析测定结果的影响，而不能将仪器调整到最佳状态，从而直接影响到所测定数据的准确性。因此笔者从高效液相色谱仪的组成与基本原理概述出发，探讨了检定液相色谱仪应注意的几个问题。

一、高效液相色谱仪的组成与原理

高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解析的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分并依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

二、高效液相色谱仪的主要检定项目

对气相色谱仪的检定，应依据国家计量检定规程（JJG 700-1999）《气相色谱仪》，主要检定项目有柱温性能、基线噪音、基线漂移、采集系统、检测器等。

（一）柱温性能、基线噪音、基线漂移的检定

对于工厂中使用的某些液相色谱仪，许多色谱柱温的控制只有恒温操作或者只使用恒温操作，从不使用程序升温控制，此时，可只检定恒温的控温精度和稳定性，对程序升温控制的重复性指标可暂不检定。某些气相色谱仪只承担气体样品的分析任务，且只使用低柱温，有的甚至在室温下操作，此时，检定柱温时，只能在其使用的色谱柱温度或者低于老化温度的状态下测定柱温的控温精度和稳定性，以及基线噪音和基线漂移等指标。否则，柱系统内长期滞留的重组分或杂质将会随温度的升高而流出，这将会给基线的稳定带来极大的影响，甚至会造成低温固定相的流失或失效。某些承担组成复杂的样品分析的气相色谱仪，配置有多色谱柱、多切换阀的多维色谱分析系统，而且，所配置的数据处理程序和柱切换程序都是专用的。由于柱系统连接复杂，拆换色谱柱困难，且生产控制分析要求不许轻易更改程序和拆换色谱柱，所以，只能在其使用的柱温条件下检定柱温的控温精度等指标。

（二）色谱数据采集系统的检定

在检测过程中，色谱峰面积的记录一般由原色谱仪所配用的记录仪、积分仪或色谱数据工作站完成，然后根据所采集的色谱图或峰面积数据对基线噪音、基线漂移、检测器的灵敏度或检测限等指标进行计算。在实际工作中发现，由于积分仪和色谱数据工作站的制造厂家、型号的不同，所得到的峰面积也有所差别，由此计算的检测器灵敏度或检测限的差别也较大，有的甚至相差几倍或十几倍。为此，我们采用了不同的积分仪和色谱数据工作站对同一台色谱仪的同一信号进行了采集，并进行了部分数据比较，结果发现所采集的峰积分面积的大小差别较大。试验表明，HP3392积分仪积分峰面积是C-R6A积分仪积分峰面积的7.95倍（约8倍）；SP4290M积分仪积分峰面积是C－R6A积分仪积分峰面积的2倍。所以，在使用数据处理系统时，应特别注意不同的色谱数据处理系统的积分峰面积的差别，并在计算时加以校正。

（三）检测器的检定

检测器的种类很多，应根据所测物质的特性，选择适当的检测器。在高效液相色谱仪中使用最广泛的为紫外吸收检测器。它分为固定波长、可变波长和二极管阵列检测器三种。固定波长紫外吸收检测器仅由低压汞灯提供固定波长254nm或280nm的紫外光。可变波长紫外吸收检测器（UVD），由氘灯和钨灯作为光源分别提供紫外光和可见光。由于可选择的波长范围很大，既提高了检测器的选择性，又可选用组分的高灵敏吸收波长进行测定，从而提高了检测的灵敏度。二极管阵列检测器（PDAD）是后来发展起来的一种新型紫外吸收检测器，其可获得吸收度随时间与波长的变化的三维空间的立体色谱图，用于被测组分的定性分析和定量测定。蒸发激光散射检测器（ELSD）与紫外吸收检测器相比较，它消除了溶剂的干扰和由于温度变化引起的基线漂移。值得注意的是，实验完毕冲洗色谱柱时，首先要关掉检测器，目的是为了节约光源，保证灯的有效使用，此外，尽量断开色谱柱与检测器的连接，防止污染检测池。

三、高效液相色谱仪检定应注意的问题

用于工业应用的液相色谱仪大部分项目可按规程要求检定，但在检定检测限这一项技术指标时，常遇到一些困难。比如用于白酒分析的液相色谱仪的检测器是氢火焰离子化（FID）检测器，色谱柱主要是DNP-TW填充柱或毛细管柱，规程中规定用标准色谱柱和浓度为100 mg/L的正十六烷-异辛烷标准溶进行检定，尽管我们把色谱仪的各种气体流速、柱箱温度、汽化室温度、检测室温度、仪器衰减等条件一一考虑进去，也不容易得到理想的色谱图，即使得到符合要求的色谱图，也花去很多时间，影响企业使用。遇到的问题与检定方法如下：（1）峰面积重复性差。由于进样阀漏液或加样针不到位会影响到峰面积的重复性。检定方法：进样阀漏液应更换进样阀垫圈：并且保证加样针插到底，注射样品溶液后需快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态，以保证进样量的准确。（2）主峰不佳或峰分叉。长期使用后的色谱柱，由于有杂质进入，会使色谱柱入口处的固定相“板结”并在流动相所产生的高压作用下，形成柱头的塌陷，色谱柱被污染。检定方法：先用纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇：异丙醇冲洗柱子，再用甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，最后甲醇冲洗正向柱子30min以上。

总之，液相色谱仪检定过程中，每项检定项目的检定结果独立给出，因此，进行检定结果来源分析及其评定时要针对每项进行。其中仪器型号不同、所使用计量器具不同，其评定结果也不同，应根据实际情况进行分析评定。比如当仪器性能发生变化时，用不同的色谱柱、不同的标准品分别检定仪器，判定色谱柱和检测器性能的改变，从而找出引起仪器性能变化的根本原因。

参考文献

[1]伍音茵．高效液相色谱仪的故障分析及处理对策[J]．精细化工中间体，2003，33（2）．

[2]陆森林，张虎军．高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养[J]．医院学报，2002，4（3）．

[3]杨进，冯念伦．高效液相色谱原理、临床应用及常见故障处理[J]．医疗设备信息，2001，16（1）．

[4]刘珍．化验员读本[M]．北京：化学工业出版社，2004．

液相色谱仪范文第2篇

关键词：液相色谱仪；最小检测浓度；测量不确定；标准溶液；评定

中图分类号：TS736+.2 文献标识码：A文章编号：

对液相色谱仪测量准确值的检测标准是按照相关的国家计量检定标准进行检测的。在使用液相色谱仪进行测量应用中，液相色谱仪的最小检测浓度的测量不确定情况可以充分反应出液相色谱仪检测反应的灵敏度，而作为一个测量仪器，液相色谱仪在测量应用中的灵敏度对于测量结果的准确性有着重要的影响。对于液相色谱仪的最小检测浓度的测量不确定度评定中是通过使用萘或者甲醇作为检定使用的标准物质进行评定操作的。在应用液相色谱仪进行检测的过程中，液相色谱仪最小检测浓度的测量不确定度的影响因素主要有液相色谱仪最小检测浓度测量过程中的基线噪声以及重复性测量误差、检测使用标准溶液的浓度情况等。本文主要通过液相色谱仪最小检测浓度的测量试验与最小检测浓度不确定度的计算，对液相色谱仪最小检测浓度的测量不确定度进行评定。在液相色谱仪最小检测浓度的测量试验中，主要是通过应用标准物质溶液使用液相色谱仪进行最小浓度检测操作，并且在检测操作过程中，根据试验操作情况在检测仪器稳定的情况下，进行一定时间段的基线情况采集并进行噪声值的计算，同时在检测使用的标准溶液中取一定数量标准的溶液，进行重复的进样，并且测量出标准溶液样品的最小检测浓度。

1、液相色谱仪最小检测浓度计算的数学模型

在应用相关数学原理进行液相色谱仪最小检测浓度的结果计算中，对于液相色谱仪的最小检测浓度的计算是通过基线噪声情况与检测使用标准溶液的浓度、重复检测过程中标准溶液的峰高值情况、检测过程中进入检测应用的标准溶液样品的体积等之间的相互关系，从而计算出液相色谱仪最小检测浓度的情况。如下公式关系所示。

上述公式中，CL表示液相色谱仪的最小检测浓度值，Nd表示的是液相色谱仪最小检测浓度过程中的基线噪声值，c表示的是液相色谱仪最小检测浓度过程中使用的标准溶液的浓度情况。最后，H表示在液相色谱仪最小检测浓度过程中标准溶液的峰高值，V则表示液相色谱仪最小检测浓度检测中标准溶液的进样体积值。

2、液相色谱仪输入量标准的不确定度评定

对于液相色谱仪最小检测浓度测量过程中输入量的标准不确定度的评定主要包括进行液相色谱仪最小检测浓度的测量过程中的对于基线噪声以及检测使用标准溶液峰高、标准溶液的浓度、标准溶液在进行液相色谱仪最小检测浓度的测量中进样体积等测量的不确定度的评定。

2.1 液相色谱仪测量中基线噪声测量不确定情况

在进行液相色谱仪最小检测浓度的测量过程中，对于液相色谱仪最小检测浓度测量过程中的基线噪声值的测量，最开始使用的是积分仪或者使用卡尺进行液相色谱仪最小检测浓度检测过程中的基线噪声值的测定的，使用这种基线噪声测量仪器进行液相色谱仪最小检测浓度测量过程中的基线噪声值的测量，一般情况下，对于基线噪声值的测量结果的不确定性在0.02左右。现在对于液相色谱仪最小检测浓度的测量中的基线噪声的测量使用的是色谱工作站进行测量应用的。使用色谱工作站进行液相色谱仪最小检测浓度测量中的基线噪声情况的测量要比最开始使用的测量仪器进行基线噪声值测量的不确定度结果要相对好一些，使用色谱工作站进行基线噪声情况的测量，其测量过程中的不确定度一般要小于0.01。如果在对基线噪声测量的过程中，基线噪声是一个均匀分布的状态，那么使用色谱工作站进行基线噪声值的测量应用，那么基线噪声的测量不确定度为0.006，并且这种不确定度在液相色谱仪最小检测浓度测量中，其基线噪声的测量不确定度的还具有一定的可靠性和自由变化值。如下所示。

自由变化情况为

2.2 标准溶液的峰高值不确定情况

在液相色谱仪最小检测浓度的测量不确定度中就有测量使用标准溶液的峰高值的不确定度造成的。对于液相色谱仪最小检测浓度过程中测量使用标准溶液的峰高值的不确定误差主要是在进行检测过程中由于人为操作或者定量环体积、环境因素、色谱数据处理系统等情况原因造成的。假设进行检测使用的标准溶液是萘，现在对于萘的峰高值不确定度进行评定。假设进行液相色谱仪最小检测浓度的测量不确定度评定的试验应用的是特定型号的液相色谱仪，并配备有专门进行基线噪声监测的色谱工作站，那么取有一定标准量的萘溶液进行定量的循环进样，那么，每次进样循环的萘溶液峰高值结果如下表1所示。

表1 萘溶液进样峰高值

根据上表中的萘峰高值结果情况就可以计算出萘的平均峰高值结果为0.820，同样对于液相色谱仪最小检测浓度测量不确定度评定试验中每次实验萘峰高值的误差也可以通过相关公式关系计算得出，那么，萘溶液的峰高值不确定情况就如下所示。

2.3 检测试验中标准溶液的浓度不确定情况

在进行液相色谱仪最小检测浓度的测量不确定度评定试验中，检测使用的标准溶液的浓度情况也是对于检测测量不确定产生影响的因素之一。因此，对于液相色谱仪最小检测浓度测量不确定度的评定也需要对于使用标准溶液的浓度不确定情况进行评定计算。在对于标准溶液的不确定度的评定中是根据国家相关中心单位给定的单位标准溶液的浓度不确定值进行实验使用标准溶液的数量进行浓度不确定情况的评定的。

2.4 应用标准溶液的进样体积不确定情况

根据上文中对于液相色谱仪最小检测浓度值的计算公式可以知道，要想得出最终的液相色谱仪最小检测浓度情况，还需要有检测应用标准溶液的进样体积值。同样液相色谱仪最小检测浓度的测量不确定情况也是与应用标准溶液进样体积的不确定情况有关的。根据相关关系，标准溶液的进样体积的不确定情况为0.01，其中自由变化情况是

3、液相色谱仪最小检测浓度测量不确定度的评定

根据上述液相色谱仪最小检测浓度情况的数学公式以及对于液相色谱仪最小检测浓度的测量不确定度产生影响的基线噪声不确定度、标准溶液浓度不确定度以及标准溶液进样体积不确定度等，在综合液相色谱仪最小检测浓度检测标准不确定度和合成标准不确定度的评定、对扩展不确定度的评定等情况，液相色谱仪最小检测浓度的测量不确定度为0.046，有效自由度为50。

4、结束语

总之，液相色谱仪最小检测浓度的测量不确定度情况受到基线噪声的不确定度、标准溶液浓度的不确定度以及标准溶液进样体积的不确定度等的影响，因此，对于液相色谱仪最小检测浓度的测量不确定度中应注意从这些影响因素中进行综合考虑评定。

参考文献：

[1] 徐靖，汪欢晃，刘娟. 超高效液相色谱法测定化妆品中孕激素的不确定度[J]. 化学分析计量. 2009(3): 11-14.

[2] 张清华，杨劲，贺英，等. 对液相色谱-串联质谱测定曲克芦丁血药浓度的不确定度评价[J]. 中国临床药理学杂志. 2010(1): 68-70.

[3] 张清华，杨劲，贺英，等. 对液相色谱-串联质谱测定曲克芦丁血药浓度的不确定度评价[J]. 中国临床药理学杂志. 2010(1): 68-70.

[4] 孔国强. 高效液相色谱法在氯氮平血药浓度监测中的质控评价[Z]. 中国广东广州: 2011399.

[5] 魏大伟，程江山，郑玉芝. 液相色谱法测定饼干中日落黄含量的测量不确定度评定[J]. 食品工业科技. 2011(6): 414-417.

液相色谱仪范文第3篇

论文关键词：高效液相色谱仪；水环境；监测；前景

一、高效液相色谱仪及其技术简介

高效液相色谱（HPLC)也叫高压液相色谱、高速液相色谱、高分离度液相色谱等。是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。

高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器(能检测色谱柱流出组分及其量的变化的器件。指机械的、电子的或化学器件，用于区分、记录或指示环境中某一变量的变化，如温度、压力、电荷、电磁辐射、核辐射、粒子或分子等。)时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

二、高效液相色谱仪的应用

高效液相色谱仪在水环境监测中的应用主要分为三个方面：一方面是对传统监测项目指标的监测；一方面是针对水体中的有机物进行监测；另一方面是利用其高效分离的技术特点在对水体中污染物质总量的监测的基础之上对不同价态及其形态的污染物进行分类定量监测。

（一）对传统污染物的监测

对传统污染物的监测主要是针对日常水体中常见污染物的重点监测。根据国家的相关要求及其本站的实际监测条件，对水体中主要污染物的监测包括了重金属元素（铜、锌、砷、汞、镉、铬等）、营养元素（氮、磷、钾等）、特殊元素（硒、氯、硫等）。通过如上监测对水体的日常污染状况进行把握与评价。同时，传统污染物的监测还包括了对特定企业排污点的污水监测，作为其环保达标的重要依据。

（二）对水体中的有机物

在传统的污染物的基础之上工业以及农业淋容等多方面因素会对水体中造成一定的有机物污染，在针对有机物的污染监测过程中传统的监测方法无法在精度与效率方面达到要求。在此方面应用高效液相色谱仪在对有机物进行定型的同时进行定量的监测。主要监测的项目包括了，工业有机污染物（氰化物、）挥发酚、石油类、总有机物等）、农业有机物（如杀虫剂、除草剂、消化抑制剂）、特殊有机物（微生物代谢物、医疗污染物、生活污水等）。针对如上的有机物监测一方面能够对水体中有机污染现状进行评价，另一方面可以鉴别污染物种类进而对排查污染源提供一定的帮助。

（三）对不同价态及其形态的污染物的监测

同种化学元素的不同存在价态以及形态对其生物毒性的影响至关重要。比如铬元素在水体中存在三价与六价之分，其中三价铬毒性较小且对在较大浓度范围内对人体有益，而六价铬则表现为较强的生物毒性，在较低浓度下对人体造成较大危害。在水环境的监测过程中传统的六价铬的监测方法是利用六价铬与二苯碳酰二肼的显色反映进行检测的。这种检测方式由于收到氧化还原条件的影响容易造成较大误差，进而使得对水体环境的判断失准。采用高效液相色谱仪能够同时监测同种元素的不同价态进而对水体的污染物及其毒性进行更好的定量分析，为后续的环境评价与治理奠定基础。

三、高效液相色谱仪的特点

（一）高效液相色谱仪的准确性

与传统的检测方法相比较，高效液相色谱仪具有更高的准确性，这种准确性主要表现在两个方面：一方面高效液相色谱仪为全自动检测仪器，在避免了人为误差出现的同时降低了机械误差。而机械误差经过标准物质的校订之后可以得到很好的控制，这就决定了高效液相色谱仪在监测过程中误差较小。同时，在另一方面高效液相色谱仪在监测原理上同样优于传统的监测方法，以火焰原子吸收测量水体中的重金属浓度为例，其以火焰原子激发的峰值为测定浓度结果，在测定过程中的波动式消耗会使得测量结果较实际浓度偏低的现象。而采用高效液相色谱仪则是利用全部曲线的面积来代替相对体积内的总量，在计算优化方面更具备准确性。

（二）高效液相色谱仪的高效性

高效液相色谱仪的高效性主要表现为三个方面：

1、高效液相色谱仪的检测效率本身，样品从进样到出结果仅需要30秒作用的时间对于单向测定，此时间还具有一定的下降空间。

2、高效液相色谱仪的多重测定效率。在针对多项目的测定过程中。利用高效液相色谱仪进行测定可以单次进样多指标共同检测的效果，大大的降低了进样的重复性工作，提高了整体的工作效率。 　3、高效液相色谱仪的连续进样机制，在前一样品转移到检测室后，后一样品既可以做进样处理，在监测相同的项目指标的情况下，连续进样与单独进样的监测效率提高越30%。

此外，通过高效液相色谱仪与质谱仪的连用可以实现在定量分析的基础之上进行定性的监测。一方面省略了定性检测的二次步骤，另一方面降低了样品前处理的难度与过程。进而，降低了监测的时间。

（三）高效液相色谱仪的广泛性

高效液相色谱仪的广泛性主要表现为对监测物质的广泛性，其监测项目几乎涵盖了水体环境监测的所有基础项目。包括了重金属的测定、营养元素的测定、其他离子的测定、不同价态的测定、有机物的测定等等诸多方面。尤其是其针对有机物的测定方面还可以细致划分为多环芳烃类化合物的测定、酚类化合物的测定、苯胺类化合物的测定、邻苯二甲酸酯类化合物的测定、氯联苯和卤代化合物的测定、苯基脲类化合物的测定、酞酸酯类化合物的测定等等。几乎涵盖了所有类别的污染物种类，使得在实际的操作过程中可以根据不同的监测目标与监测目的进行合适的项目选择。

四、高效液相色谱仪的应用前景

（一）与评价软件连用

高效液相色谱仪与评价软件连用主要是利用高效液相色谱仪的数据收集功能以及数据计算功能。在高效液相色谱仪对数据计算的基础上结合电脑的评价软件对获得数据进行进一步处理的过程。通过与评价软件的连用可以达到在监测的过程中根据不同的监测目的进行合理的评价结果输出的方式。进一步使得环境监测具有高效化与准确性。

在具体的操作层面其可能应用主要分为两个方面：一方面是利用评价软件的评价功能对超标样品进行筛选。在测定前利用标准物质对环境标准进行测定。而在测定的过程中利用评价软件的筛选功能自动对超标样品进行报警或者标红处理，而对于未超标样品则可以采用忽略的处理方式。最终的数据输出结果为超标样品编号与浓度。这样能够有效的降低环境监测站的工作强度。

另一方面是利用预设的国家标准以及不同污染物的环境效应权重针对同一样品的权指标测定项目进行评价报告的生成。在测定的过程中自动的对比国家环境标准，进而生成科学的环境评价报告，为后续的环境治理提供一定的依据。

（二）与质谱仪连用

高效液相色谱仪只能够定性的分析被监测物质，或者通过对吸收光谱的设定来测定特定物质的浓度，而对于未知物质的监测则存在一定的不足。此方面的缺陷使得其在使用的过程中测定项目具有一定的盲目性。通过高效液相色谱仪与质谱仪的连用可以在同一样品测定的情况下测定未知样品中的特定物质种类以及物质浓度。方便并拓宽了水环境监测的广度。

（三）与连续进样装置的连用

高效液相色谱仪具有一定的连续进样能力。但是，此种进样依旧采用手动的模式进行。在手动模式下，一方面对进样效率的提高程度不显著。另一方面则表现为对进样的准确程度不精确。因此，采用高效液相色谱仪与连续进样装置的连用在进一步提高工作效率的同时，保障了进样的准确性与测定的自动化程度。在效率与精度方面对高效液相色谱仪的检测均是一种提高。

液相色谱仪范文第4篇

关键词：医药院校；高效液相色谱；管理

高效液相色谱法是仪器分析的一种重要方法[1]，是医药院校中医学类、药学类及其相关专业必需的实验课内容，是实践性操作性专业性很强的一种分析方法，在教学和科研方面为培养技能型医药专才发挥着重要作用。高效液相色谱适用于分析受热不稳定易分解的、高沸点、不易挥发的、分子量较大、不同极性的天然和合成有机化合物，应用范围十分广泛，具有高效率、高分辨率、高灵敏度、高速度的特点。而且，仪器十分昂贵，并要经常维护，因而，对于高效液相的管理提出了很高的要求。

1制度管理

建立和完善高效液相色谱相关管理制度，使管理制度科学化合理化规范化，在学校和学院层面建立《高效液相色谱使用、维护管理制度》，加强管理。由于使用人员较多，要实行提前预约制度，按照预约时间排队。仪器使用前要熟悉仪器操作规程，不得做与实验无关的参数设置；不得拆卸仪器，有问题要及时汇报。因实验人员使用不当造成的仪器或软件损坏由实验者或其负责人负责尽快维修。实验数据存放建立的文件夹，以实验者名字命名，数据拷贝用专用U盘，不得擅自在电脑里安装软件，确实需要安装需经过管理者同意。使用者要经过专业的操作培训，合格后方可单独操作仪器。通过规范化的制度管理，不但能提高仪器的使用率，还能延长仪器的寿命。

2规范化操作管理

进行高效液相色谱实验时，每个环节的操作，直接影响实验的成败，有些失误甚至会造成仪器不同零部件的损坏，因而每个操作都要严谨和细致，因此有必要规范化操作，制定标准的操作流程。以普通的高效液相色谱仪为例，具体步骤要有严格的先后操作顺序：（1）过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。（2）对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。（3）打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。（4）进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。（5）有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10ml/min。（6）调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。（7）设计走样方法。点击file，选取selectusersandmethods，可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击newmethod。选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2~5分钟；b.基线归零；c.进样阀的loading-inject转换；d.走样时间，随不同的样品而不同。（8）进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过滤。方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。（9）关机时，先关计算机，再关液相色谱。只有规范具体的操作流程，才能更好地进行分析实验，获得准确真实科学的实验数据，才能更好地维护好高效液相色谱仪器。

3维护管理

在使用高效液相色谱色谱仪器后一定要做好维护管理，一般来说最好的维护就是经常规范性使用，在操作使用时充分了解仪器的注意事项，做到科学分析合理使用。流动相需采用色谱纯溶剂，水须为超纯水，准备所需的流动相，以满足仪器要求，避免损坏色谱柱;超纯水须当天配当天用；进样或溶剂进入色谱柱前须经彻底的排气，严禁气泡进入色谱柱;流动相进入色谱柱后要检查流路有没漏液，特别是色谱柱的接头；严禁100%水进入反相色谱柱，需有一定的有机溶剂比例；严禁使用没经滤膜过滤的溶剂冲洗色谱柱，避免将互不相溶的溶剂一同进入泵内；流动相需经过滤、除气后方可使用，用适合的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20~30min；待分析的样品必须彻底溶解澄清、过滤，配制样品和标准溶液，用合适的0.45μm滤膜过滤，以避免堵塞、损坏色谱柱，所有通过色谱柱的液体须经严格过滤；流动相的比例须逐步过渡，不能跨度太大；流速不论是由慢到快还是由快到慢也须逐步过渡，最大流速一般不超过10ml/min；分析完成后，须及时清洗色谱柱和检测器的比色池，原则上先用流动相冲洗30min，再逐步过渡到100%有机溶剂（甲醇或乙腈）冲洗30min，严禁由一种溶剂马上变换另一种溶剂，酸碱盐类须先由90%水:10%甲醇冲洗30~60min，再逐步过渡到100%甲醇冲洗。长时间不用色谱柱，要冲洗好后，用纯甲醇或乙腈封存普通；C18柱尽量避免在40℃以上的温度下分析，定期测柱效，有下降，可以用10％异丙醇甲醇冲洗色谱柱。每次实验后要做好登记使用记录，长时间不用时，管理人员应该定期检查高效液相色谱各个部件的状况，做好相关的维护措施。

液相色谱仪范文第5篇

【关键词】 元胡止痛片；，，延胡索乙素；，，高效液相色谱

摘要：目的建立元胡止痛片中延胡索乙素的含量测定方法。方法C18ODS色谱柱 (4.6 mm×250 mm， 20 μm) ； 流动相：甲醇0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH值至6.0）(55∶45)；检测波长：280 nm；流速：1.0 ml・min1。结果延胡索乙素对照品在0.153 2~0.766 0 μg范围内，进样量与峰面积间呈良好的线性关系，r=0.999 99，平均回收率为99.53%。结论该方法操作简便，结果准确，重现性好，可用于控制该制剂的质量。

关键词：元胡止痛片； 延胡索乙素； 高效液相色谱

元胡止痛片是2005版《中国药典》［1］收载品种，由延胡索（醋制）、白芷2味中药组成。具有理气、活血、止痛功能，用于气滞血淤的胃痛、胁痛、头痛及痛经等。是中药止痛著名方剂。现代研究表明，延胡索乙素具有较强的镇痛，镇静，催眠等药理作用［2］。因此，该成分是元胡止痛片中的有效活性成分之一。2005版《中国药典》［1］收载的元胡止痛片中延胡索乙素的含量测定方法为薄层色谱扫描法，操作比较复杂。本实验采用HPLC法改进延胡索乙素的含量方法，并对测定方法学进行了研究。

1 仪器与试剂

仪器：高效液相色谱仪(日本岛津CLASSVP 10AVP)；C18ODS色谱柱 (4.6 mm×250 mm， 20μm) (大连依利特) ；HP1050/3D化学工作站；样品：元胡止痛片，自制；对照品：延胡索乙素对照品，批号：110726200208，供含量测定用（中国药品生物制品检定所提供）； 试剂：所用试剂均为分析纯、色谱纯；水为重蒸馏水(自制)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性实验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH值至6.0）(55∶45)为流动相；流速1.0 ml・min1，检测波长280 nm；理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于3 000。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每毫升含46 μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备取本品10片，除去糖衣，研细，取细粉0.50 g，精密称定，置平底烧瓶中，精密加入浓氨试液甲醇(1∶20)混合溶液50 ml，称定重量，冷浸1 h后加热回流1 h，放冷，再称定重量， 用浓氨试液甲醇(1∶20)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25 ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5 ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 线性关系考察 精密称取延胡索乙素对照品3.83 mg至25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得混合对照品原液（153.2 μg/ml）。精密吸取对照品原液1，2，3，4，5 ml，分别至10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，分别精密吸取10 μl，注入液相色谱仪，记录峰面积。以进样量(X)对峰面积(Y)作图，得到其标准曲线图。得回归方程Y=3.94×107 X+0.027 51，r=0.999 99， n=5。延胡索乙素对照品在在0.153 2~0.766 0 μg范围内，进样量与峰面积间呈良好的线性关系。

2.5 精密度实验 准确吸取上述对照品溶液10.0 μl，注入液相色谱仪，测定峰面积值，重复进样6次，RSD为0.42%。结果表明，本法精密度较好。

2.6 稳定性实验 取同一供试品溶液，分别于1，2，3，4，5，6 h测定延胡索乙素的峰面积值， RSD为0.78%，结果显示供试品溶液在6 h内稳定。

2.7 重复性实验 对同一批样品平行制备5份供试液，分别取10.0μl，注入液相色谱仪，进行含量测定， RSD为1.96%。表明本法重现性较好。

2.8 阴性对照实验 取缺延胡索的处方药材，按工艺制备制成缺延胡索的阴性制剂，照供试品溶液制备方法制成阴性溶液，分别吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性溶液各10.0μl，注入液相色谱仪，按上述条件进行测定，记录色谱图，从色谱图中可以看出，方中其它成分在本测定条件下，对延胡索乙素的含量测定无干扰。见图1~3。

图1 对照品色谱图（略）

图2 样品色谱图 （略）

图3 阴性样品色谱图（略）

2.9 加样回收率实验精密称取已知含量的同一批号样品（延胡索乙素含量为0.45 mg/g）9份，分为3个浓度组，称样量分别为0.17，0.25，0.32 g，每组3份，均精密称定，3个浓度组分别精密加入对照品原液（延胡索乙素含量为0.1532 mg/ml）0.9，0.7，0.5 ml，按供试品溶液制备方法及上述色谱条件测定，计算加样回收率。结果见表1。

2.10 供试样品的含量测定 分别取不同批号的样品，按本方法的测定条件，分别测定各样品中延胡索乙素的含量。结果见表2。

表1 延胡索乙素加样回收率实验（略）

表2 3批样品中延胡索乙素含量测定结果（略）

3 讨论

3.1 延胡索是元胡止痛片处方中的君药，延胡索乙素是延胡索的主要活性成分之一，因此建立元胡止痛片中延胡索乙素的含量指标具有一定的实际意义。本文的HPLC测定条件不受方中其它成分的干扰，专属性较强，测试结果比较准确，可用于该制剂的质量控制。

3.2 在供试品溶液的制备方法中，我们曾选用甲醇超声处理30 min，乙醇超声处理30 min，氯仿超声处理30 min，浓氨试液甲醇(1∶20)混合溶液超声处理30 min，浓氨试液甲醇(1∶20)混合溶液加热回流提取等方法，结果以浓氨试液甲醇(1∶20)混合溶液冷浸1 h后，加热回流提取1 h，供试液测定值最高，故确定以浓氨试液甲醇(1∶20)混合溶液加热回流提取制备供试液。

参考文献