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化学发光

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化学发光

化学发光范文第1篇

1 化学发光免疫分析技术的研究历史背景

免疫分析的发展伴随着抗体制备技术的改进而不断提高。美国科学家Yalow等人首先将标记技术引入免疫分析,他们首先用放射免疫分析法(RIA)进行测定胰岛素。由于这种试验方法限制了试剂的寿命,难以获得长期稳定的检测标准,同时由于存在同位素的使用,不仅会损害操作人员身体健康,也会带来污物处理困难的问题。为了找到更为合理的免疫分析法成为以后20年来研究的热点。直到70年代末,国外有学者将免疫反应与化学发光测定技术相结合,这种集高灵敏度和高特异性的技术称之为化学发光免疫分析法,化学发光免疫技术优势比较明显,主要有以下几点:第一,灵敏度高,检测限范围更精准;第二,自动化程度高,并且没有放射性辐射危害;第三,发光标记物稳定,有效期长,同时应用范围宽,对于分子大小不同的抗原、半抗原及抗体都可检测。因此,化学发光免疫分析在临床、卫生、食品、环保和军事等领域正被越来越多地用于激素、蛋白质、肿瘤、毒物、病毒等成分检测。

2 免疫分析基本原理

由免疫反应系统和化学发光分析系统两个关键部分组成了化学发光免疫分析的基本原理,化学发光分析系统主要氧化以及催化的作用于化学发光物质,产生一个激发态的中间体,在处于稳定状态时,发射出光子,然后通过测量仪器测量光量子。通过标记物与发光强度的关系,进而测出被测物质含量。而免疫反应系统是将发光物质在抗原或抗体上直接标记。

3 化学免疫分析分类

化学发光免疫分析法主要以标记法的不同来进行分类,目前习惯上将免疫分析法主要分为两类,第一主要是标记免疫分析法,其次是酶免疫分析法,前者是以化学发光标记,后者是以酶标记,以化学发光底物作为信号试剂来进行发光,其原理是不相同的。除此之外,包括荧光免疫分析法以及电化学发光免疫分析法也是目前存在的化学免疫法分析方法。

3.1 化学发光标记免疫分析

将化学发光剂如吖啶酯类化合物,直接标记在抗原上或抗体上,其基本原理是启动发光剂发光,快速闪烁。这种标记物其化学反应简单、快速、无须催化剂;夹心法用于大分子抗原,竞争法主要用于检测小分子抗原,另外本底低,非特异性结合相对较少光量不会因为分子大小而受影响,因此能增加灵敏度,一般常用的化学发光物质主要是通过启动发光试剂NaOH-H2O2作用而发光,其发光非常迅速,小分子物质多采用竞争法,夹心法主要用于大分子物质。

3.2 化学发光酶免疫分析

通过酶标记生物活性物质,再作用于发光底物,在信号剂的作用下发光,然后用发光测定仪进行测定。化学发光酶免疫分析酶反应的底物是发光剂,按照标记免疫分析,应属酶免疫分析,其操作步骤与酶免分析完全相同。目前常用的标记酶为碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶,它们有各自的发光底物。化学发光酶免疫分析法种类大致有三种,首先是HRP标记CLEIA,一般常用3-氨基邻苯二甲酰肼作为底物,也即是鲁米诺或者用其衍生物4-氨基邻苯二甲酰肼也是可以的,这两种都是重要的发光试剂。需要注意的是该底物需要在碱性缓冲溶液中进行氧化反应,生成激发态中间体,当然这需要在过氧化物酶及活性氧存在的条件下进行,中间体回到基态时就可以发光,此时的波长一般在425nm。曾经先前有人用该标记底物标记抗原或抗体,但后来发现其发光强度多受灵敏度的影响。目前用过氧化物酶进行标记,其发光强度主要依赖酶免疫反应中的酶的浓度大小;其次增强发光酶免疫分析也是化学发光酶免疫分析的一种,它主要是在将增强的发光剂加入到发光系统中,加强发光的信号强度,并且能够保持长时间的稳定性,在一定程度上提高了该分析方法的准确性和灵敏度,便于多次测定。目前在一些现代化的设备上,还可以由计算机进行精确控制操作,比如,往系统中加入发光试剂以及混合、温育、洗涤等,甚至后期的数据处理,进而绘制标准曲线,最终完成患者血清样品的分析并打印出结果;最后一种就是用ALP标记的CLEIA,这种分析方法一般多用环-1,22-二氧乙烷衍生物作为发光底物,它的发光原理主要是其用化学发光酶免疫分析底物而设计的分子结构稳固,其中的芳香基作为发光基团和酶作用,在发光试剂的作用下发光,该底物在碱性磷酸酶的作用下,磷酸酯基发生水解而脱去一个磷酸基,就会产生一个稳定的中间体,然后中间体发生裂解会产生金刚烷酮和激发态的物质,这种常见底物是AMPPD,其作为磷酸酯酶的直接化学发光底物,多用来检测碱性磷酸酯酶和一些配基的结合物。

4 应用

4.1 激素、蛋白质和肿瘤检测

该系统使反应物形成均相混悬液,顺磁微粒作为固定相,增大反应面积,加速免疫反应,快速分离,自动洗涤,减少酶和催化剂的使用,pH调整即可,避免了许多影响因素,广泛应用于甲状腺功能、药物检测、肿瘤标志物及心血管等项目。

4.2 病毒、毒物检测

杨秀岑等用ABEI标记兔抗大肠杆菌lgG,试样温育、离心、沉淀峰值用luminol-H2O2-NaOH 发光体系测定;章竹君等测定了粪样中的轮状病毒以HRP酶标记;为研究TNT对人体的毒害作用提供方法,张丽民等以HRP标记免疫测定了血清中4-氨基-2,6-二硝基甲苯,效果非常显著。

4.3 其他方面的应用

被越来越多地用于免疫测定中的HRP酶标记生成核酸探针,主要采用两种形式,一种是靶DNA杂交,将HRP直接标记在探针上,同时增强的鲁米诺试剂检测加入分离后的杂交体。另外一种是将DNA探针标记在生物素及地高辛上,然后与靶DNA杂交,再用HRP标记的亲和素和抗地高辛与分离后的杂交体结合,最后加入鲁米诺试剂氧化发光。

化学发光范文第2篇

【摘要】化学发光分析是根据化学反应产生的光辐射强度确定物质含量的一种痕量分析方法,这种技术日益得到重视,它灵敏度高,线性范围宽,不需要外来光源,仪器设备简单,操作方便,分析快速快,易实现自动化,价格便宜,选择性强。常用的化学发光技术有电化学发光、化学发光免疫分析、微粒子化学发光等。本文主要探析此技术在临床检验中的应用。

【关键词】化学发光 分类 临床应用

化学发光(chemiluminescence,CL)早在19世纪80年代就得到证实,即在化学反应过程中瞬间以释放光子的形式放出能量。化学发光法因其灵敏度高、线性范围宽和分析速度快等优点,已在医学检验中得到广泛地应用。

一 化学发光的基本内涵

化学发光分析法是近30年来发展起来的一种高灵敏的微量及痕量分析法,化学发光分析具有灵敏度高、线性范围宽、不需要外来光源、分析速度快、仪器设备相对简单、便宜等优点。化学发光分析测定物质的方式可分为直接法和间接法。化学发光分析反应类型可分为酶促反应和非酶促反应两类。此外化学发光分析法可以与其他分析技术联用,如流动注射分析、电化学分析、免疫分析、固定化试剂技术、传感器技术等分析技术相结合。

二 常用的化学发光技术

首先,电化学发光。该技术是通过对电极施加一定的电压进行电化学反应而发光,通过测量化学发光光谱和强度来测定物质含量的一种痕量分析方法。它将电分析化学手段和化学发光方法相结合,具有独特的优点,如重现性和灵敏度进一步提高,在多种组份同时存在时,可施加不同波形、不同电压的信号进行选择性测量等,是潜在的分析手段之一。

第二, 化学发光免疫分析是以标记发光剂为示踪物信号建立起来的一种非放射标记免疫分析法,具有灵敏度高、线性范围宽、仪器设备简单、操作方便、分析速度快和容易实现自动化等优点。鲁米诺、异鲁米诺及其衍生物、吖啶酯衍生物、辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶是目前化学发光免疫分析中使用最多的标记物。

第三,微粒子化学发光是化学发光免疫分析的特殊形式,是以化学发光剂为底物的酶免疫技术,同时应用了磁性微珠做固相载体,增加了吸附面积,使抗原抗体最大限度的结合。微粒子化学发光技术所需标本量极少,孵育时间大大缩减,同时因其选择性吸附抗原,从而提高了特异性、灵敏性,使测定结果准确、可靠,并减少污染。

第四,化学发光生物传感器是通过非创伤或非损伤性的办法,连续、实时、动态地检测生物体内的某一种或几种物质浓度的技术。特别是化学发光免疫传感器是将具有分子识别作用的抗原或抗体以适当的方式固定化而制成,它结合了化学发光高灵敏度和抗原抗体特异性结合的高度专一性以及无污染等特点,是替代放射免疫分析的重要分析工具,已日益受到重视。

三 化学发光分析在临床实验室中的应用

第一,化学发光法与血液系统疾病,化学发光免疫分析在测定G一CSF上是敏感的,可用于测定正常人或疑有G一CSF减少疾病的患者血清G一CSF,对于预测免疫抑制剂治疗再障的效果有一定的作用。例如,慢性骨髓增生性疾病,如慢性髓性白血病和真性红细胞增多症(Pv)是与中性白细胞功能失常有关的。Pv的PMN在用趋化肤(fMLP)刺激后化学发光值及丁量减少.这与磷醋酶D活性受损有关。而没有或用PMA刺激的化学发光值及了量是正常的。慢性髓性白血病患者也可观察到这个现象,但程度更小。

第二,化学发光法与消化系统疾病。幽门螺杆菌(HP)在慢性胃炎和消化性溃疡的发病中起着重要作用。病理组织学研究显示已感染HP的胃粘膜具有吸引中性白细胞积聚的特点。在鲁米诺增强的化学发光反应土表现为增强;溃疡性结肠炎患者结肠粘膜面虽然有中性白细胞浸润.但有人发现溃疡性结肠炎患者和正常人相比,在发光的峰值、峰时、斜率方面无明显差异。仅27%具有活动性溃疡性结肠炎患者刺激物有增高的化学发光。可能的原因是在这些患者中性白细泡不起主要作用或者不呈高活动性。慢性肝病(特别是肝癌时)0:的产生和HZOZ一MPO一CL一系统是抑制的。依赖Cypridina虫荧光素类的化学发光及依赖鲁米诺的化学发光均是降低的。但是慢性肝炎由于体内免疫复合物含量的增高而诱导发光增强,与正常组相比基础化学发光增强。急性肝炎由于体内免疫复合物增加不明显,吞噬细胞应答能力及血清调理活性均未明显受损。因此,急性肝炎的基础发光、峰时、斜率与正常人相比变化不明显,但单位PMN峰值低于正常,说明急性肝炎中性粒细胞的吞噬功能也降低;

第三,化学发光法可以准确检测心血管疾病。例如,急性心肌梗时,中性粒细胞的化学发光值逐渐升高且与CK山条高度相关。因此,可通过患者PMN一CL的变化估计病情。冠心病心绞痛时化学发光值是升高的。

第四,化学发光法与内分泌疾病。首先,甲状腺疾病。甲状腺激素是临床许多疾病(尤其是甲状腺疾病)诊断常用的指标。甲状腺激素(TH)具有抗氧化作用,这种作用可能是由于中性白细胞特异的受体一配体相互作用引起的。TH的抗氧化作用可通过鲁米诺增强的化学发光法测定,化学发光值表现为抑制。第二,糖尿病。患者由于可溶性或颗粒性因素激活多形核白细胞(PMN)膜上的NADPH氧化酶产生超氧阴离子自由基,然后转变为过氧化氢和轻自由基。糖尿病患者分离的PMN的基础化学发光值与正常人相比明显升高。但当NADPH氧化酶被抑制或磷酸己糖旁路被阻断,则糖尿病组及正常组的化学发光值均受到不同程度的抑制。NO可用多种方法测定,但化学发光法是其中最为理想的一种。NO本身不产生化学发光,当它与超氧阴离子反应时可产生很强的光,外源的精氨酸加入反应系统中,化学发光值会更显著地提高。糖尿病患者的化学发光值还可体现循环免疫复合物的水平。具有高循环免疫复合物的患者,化学发光值也高。

参考文献

[1] 何建文.中国实验临床免疫学杂志,1991年第6期。

[2] 游利.化学发光在临床检验中的应用[J].国外医学临床生物化学与检验学分册,1998年第3期。

[3] StephenAreher.FasebJb.1993,7(2):349一360

[4] 刘庆艳.化学发光在疾病检测中的应用[J].国际医药卫生导报,2003年第8期

化学发光范文第3篇

【关键词】 胰岛素(IRI);光量子数;前胰岛素原;胰岛素原;化学发光免疫法

【Abstract】 Objective To explore a reliable method for the determination of insulin.Methods Gather fasting agglutinating blood, centrifugalize them respectively to get the serum,which were directly set on instrument to determine.Results Linear rang: 0~335.0mIU/L,senitivity: the mean quantum of 0mIU/L IRI,10.1mIU/L IRI, 152.0mIU/L IRI and 335.0 mIU/L IRI were 3808,30350,357399 and 684567.Specificity:when the control serum was determined,the measure vlalue was within the standard deviation (SD),95%-105%.Precision:N=60 CV≤5%.Conclusion Chemiluminescence is a reliable,stable measurement method for determination of insulin with high sensitivity,precision and specificity.

【Key words】 insulin;quantum;preproinsulin;proinsulin;chemiluminescence

胰岛素(IRI)是一种蛋白质激素,这是由胰岛中的β细胞所合成、储存和分泌的。IRI的功能是调节血液中葡萄糖的浓度水平。IRI初期是在β细胞中,以一种大分子量(分子量为1200)前胰岛素原的形式存在。前胰岛素原是一条由110氨基酸组成的单链前体。前胰岛素原被切除掉24个氨基酸序列后形成胰岛素原(分子量为9000),胰岛素原是胰岛素和C-肽的前体[1]。IRI是由两条氨基酸链组成的。最初,IRI A链是由21个氨基酸组成,B链是由30个氨基酸组成;而C-肽是由31个氨基酸组成。IRI是随餐后血液中葡萄糖的浓度高低而产生应答的。

IRI水平虽然不是糖尿病患者常规诊断方法,但是IRI水平的检测对于空腹低血糖患者、普通人群中的胰岛素耐受患者、β细胞分泌功能异常患者的意义非常大[2,3]。

1 材料与方法

1.1 原理

IRI的测定是一种直接化学发光技术和双抗体两点夹心免疫分析法相结合的测定方法。第一种抗体称为标识抗体,是由单克隆抗胰岛素抗体标记吖啶酯形成的;第二种抗体称为固相化抗体,是由单克隆抗胰岛素抗体以共价键的方式与顺磁性颗粒相结合形成的。血清中的胰岛素与相应抗体发生免疫反应后产生光量子,其光量子数的多少与血清中胰岛素的浓度成正比,经标准曲线计算即可求得血清IRI的浓度水平。

1.2 仪器与试剂 仪器:BAER ACS-180型全自动化学发光免疫分析仪。试剂(双试剂)及标准液由广州宝迪有限公司提供。

1.3 方法 取血清于样品杯中,置全自动化学发光免疫分析仪上,调整好检测参数:血清25μl+第一试剂50μl于37℃孵育5min,加第二试剂250μl于37℃孵育2.5min,用蒸馏水对反应杯进行分离、抽吸、清洗,最后分别加300μl酸试剂和碱试剂到反应系统中进行反应发光,读取光量子数,再根据标准曲线,计算出结果。

1.4 标准曲线制备 采用两点定标法,将标准血清0.0mIU/L和138.0mIU/L安放于仪器的定标位置上,编入测定程序,上机测定自动打印出标准曲线。

2 结果

2.1 精密度 取混合血清分成两份,一份当天测定60次,结果IRI的值为22±0.8mIU/L,其对应的CV值为1.8%;另一份做批间试验,测定10次,测定统计值为21±1.2mIU/L,其对应的CV值为2.8%。

2.2 灵敏度 0mIU/L的IRI,其平均光量子数为3808,10.1mIU/L的IRI,其平均光量子数为30350,152.0mIU/L的IRI,其平均光量子数为357399,335.0mIU/L的IRI,其平均光量子数为684567。IRI测定的范围为0~335.0mIU/L。

2.3 回收试验 在IRI为25mIU/L的血清中分别加入浓度为1mg/L的胰岛素原、浓度为500μg/L的C-肽、浓度为1mg/L的胃泌素、浓度为1mg/L的胰高血糖素、浓度为1mg/L的胰泌素进行回收试验,分别测得其回收率为:100.8%,95.1%,96.6%,100.2%,101.6%。

2.4 线性分析 对一份定值血清稀释不同浓度,观察测定体系光量子数的变化量,即为IRI与光量子数的关系。结果显示:IRI在本法的测定范围是0~335.0mIU/L。当IRI大于335.0mIU/L时,开始偏离线性。因此对浓度高的标本必须先进行适当的稀释,然后测定。

2.5 干扰试验 当溶血(Hb>5g/L)、黄疸(胆红素>0.2g/L)时,对结果干扰甚微。

2.6 正常参考值 取100份经我院体检合格者的血清,其中男50份,女50份,年龄19~55岁,平均37岁。检测结果IRI:20.5±17.5mIU/L。男女之间差异无显著性(P>0.05)。

3 讨论

目前定量测定IRI的方法不多,过去一般用放射免疫法,该法测定步骤繁琐,为半自动化操作,测定时间长达3天,测定范围窄,且使用试剂具有放射性,对操作人员造成身体伤害及对周围环境形成污染。现在基本已被化学发光免疫法所代替,该法测定步骤简单,为全自动化操作,测定时间短,全过程最短为半小时即可完成,而它使用的试剂安全无放射性,为一般化学试剂,对操作人员无伤害,对周围环境污染甚微。不过它也有缺点:其试剂为抗体试剂,有效期短,容易失效,定标周期短,一般为2周。在试剂的有效期内和定标周期内,对血清标本进行测定,其结果非常准确可靠。综上所述,化学发光免疫法测定胰岛素(IRI)是目前首选的方法。

参考文献

1 康格非,巫向前.临床生物化学和生物化学检验,第2版.北京:人民卫生出版社,2001,256.

2 Chevenne D,Trivin F,Porquet D.Insulin assays and reference values.Diabetes Metab,1999,25(6):459-476.

化学发光范文第4篇

2月来笔者所在医院接受体检的60例乙型肝炎病毒感染患者的血液标本,分离血清后保存待测,分别采用光激化学发光法(LICA)和化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)检测60例乙型肝炎病毒感染患者的五项血清学标志。结果:两种检测方法检测乙型肝炎病毒感染患者血清学标志HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe的阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。但化学发光微粒子免疫分析法检测抗HBc的阳性率明显高于光激化学发光法,两者比较差异有统计学意义(P

【关键词】 光激化学发光法; 化学发光微粒子免疫分析法; 乙型肝炎病毒; 血清学标志; 性能

中图分类号 R512.6 文献标识码 B 文章编号 1674-6805(2016)3-0060-02

doi:10.14033/ki.cfmr.2016.3.032

乙型肝炎病毒属于嗜肝DNA病毒科,是一种DAN病毒,易感染群体为人类和大猩猩,是引发乙型病毒性肝炎的主要病毒[1]。相关临床数据调查显示我国乙型肝炎感染率为60%~70%,约有7%的人口携带乙肝表面抗原,照此计算,我国约有9300万人携带乙型肝炎病毒[2]。早期我国临床多采用酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志,检测准确性较低。随着医学技术的不断进步,近年来化学发光技术被广泛应用于乙型肝炎病毒感染血清学标志检测中,笔者所在医院本次针对光激化学发光法在乙型肝炎病毒感染血清学标志检测中的应用性能进行了研究和评价,现做出以下整理报道。

1 资料与方法

1.1 一般资料

纳入2014年9月-2015年2月来笔者所在医院接受体检的60例乙型肝炎病毒感染患者参与本次研究,60例患者中,男32例,女28例,年龄19~71岁,平均(42.4±1.5)岁。60例患者均在参与研究前详细知晓笔者所在医院本次研究内容,为自愿性参与本次研究,且在参与研究前均已签署临床研究知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 血液样本 于清晨采集60例患者的空腹静脉血,使用离心机以3000 r/min的速度分离血清,并保存在零下4 ℃的冰箱中待测。乙型肝炎病毒五项血清学标志包括HBsAg(乙型肝炎表面抗原)、抗HBs(乙型肝炎表面抗体)、HBeAg(乙型肝炎e抗原)、抗HBe(乙型肝炎e抗体)和抗HBc(乙肝核心抗体)。

1.2.2 仪器及试剂 光激化学发光法所使用的检测仪器为博阳生物科技(上海)有限公司生产的高通量免疫分析仪、仪器配套试剂和全自动移液器。化学发光微粒子免疫分析法所使用的检测仪器为美国雅培制药有限公司诊断产品部生产的i2000SR免疫发光检测仪和仪器配套试剂。分别使用上述两种仪器检测

60例乙型肝炎病毒感染患者的五项血清学标志。

1.3 阳性判定标准

1.3.1 光激化学方光 抗HBc:>5.3 PEIU/ml;HBsAg:>0.2 IU/ml;抗HBs:>10 mIU/ml;HBeAg:>1 PEIU/ml;抗HBe:>2 PEIU/ml。

1.3.2 化学发光微粒子免疫分析法 抗HBc:>1 S/CO;HBsAg:抗>0.5 IU/ml;抗HBs:>10 mIU/ml;HBeAg:>1 S/CO;抗HBe:

1.4 统计学处理

采用SPSS 22.0软件对所得数据进行统计分析,计数资料以率(%)表示,比较采用字2检验,P

2 结果

检测发现光激化学发光法检测乙型肝炎病毒感染患者血清学标志HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe的阳性率分别为91.7%、88.3%、93.3%和86.7%,与采用化学发光微粒子免疫分析法检测的93.0%、85.0%、90.0%和91.7%比较差异均无统计学意义(P>0.05),但检测抗HBc的阳性率为63.3%,明显低于化学发光微粒子免疫分析法的85.0%,两者比较差异有统计学意义(P

3 讨论

酶联免疫吸附法为我国临床检测乙型肝炎病毒感染血清学标志的常用方法,该种检测方法所具有的临床优势主要表现为可以最大程度的避免对环境和患者机体的危害、操作简单、试剂有效期长,但因其灵敏度重复性较化学发光法差,酶纯度和反应过程易受到环境的影响,假阳性检出率和漏检率较高,现阶段逐渐被化学发光法所取代[3]。目前临床上比较常用的化学发光法主要为光激化学发光法[4]。光激化学发光法的检测原理为单线态氧分子能量传递发光免疫分析技术,并在此技术上应用了纳米级颗粒,不仅可以有效增加生物分子的包被面积,同时纳米级颗粒可在液相中保持稳定的悬浮状态,能够借助结合发光原理进行免清洗和均相检测。此外,该种检测技术还应用了链霉亲和素-生物素放大系统,该系统的作用是促使单位体积中的生物分子浓度提高,以实现提高检测物质敏感性,减少试剂用量的目标[5]。

总结光激化学发光法的应用优势主要包括以下几点,(1)均相反应:酶联免疫吸附法和化学发光微粒子免疫分析法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志均为非均相反应,该种反应方法存在的缺点为反应时间长、反应体系温度欠均匀和反应不充分。而光激化学发光法检测过程中的反应过程均为均相反应,与非均相反应相反具有反应时间短、反应体系温度均匀、反应充分等优势,可有效提高检测结果的准确性[6]。(2)可免清洗:由于光激化学发光法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志的均相反应过程中应用了结合发光原理,因此无需进行清洗分离,即可有效避免均相反应过程中的交叉污染和随机误差。(3)使用试剂量少:实践应用发现,光激化学发光法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志时,每个检测指标仅需使用25 μl试剂,在一定程度上提高了小样本检测小型化、芯片化和高通量的可能性[7]。(4)敏感性:光激化学发光法应用了纳米级颗粒,不仅增加了均相反应的表面积,同时还有效提高了检测过程的敏感性,缩短了检测时间[8]。

分析光激化学发光法在检测乙型肝炎病毒感染血清学标志抗HBc时存在应用局限性的原因主要为以下几点:(1)光激化学发光法与化学发光微粒子免疫分析法选择HBc原材料和溯源选择存在一定程度的差异;(2)光激化学发光法与化学发光微粒子免疫分析法的检测原理不同,光激化学发光法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志抗HBc的原理为竞争法,化学发光微粒子免疫分析法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志抗HBc的原理为夹心法,当两种检测方法的检测结果出现差异时,检验者可采用第三种检测方法进行验证。笔者所在医院本次研究因检测样本数量有限,未能进行第三方验证。(3)本次研究发现,光激化学发光法乙型肝炎病毒感染血清学标志抗HBc的检出能力不足,还有待进一步提高,但在检测其他乙型肝炎病毒感染血清学标志时符合率很高。

笔者所在医院本次对光激化学发光法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志的性能进行研究发现采用光激化学发光法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe的阳性率与化学发光微粒子免疫分析法比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但检测抗HBc的阳性率却明显低于化学发光微粒子免疫分析法(P

参考文献

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化学发光范文第5篇

关键词:人类绒毛膜促性腺激素;全自动化学发光仪;异位妊娠;葡萄胎

人类绒毛膜促性腺激素(HCG)是由胎盘滋养层细胞分泌一种具有促进腺发育的一种糖蛋白,临床上常用于诊断妊娠、异位妊娠、葡萄胎等疾病的诊断和治疗。全自动化学发光仪是由西门子采用ADVIA Centaur Cp系统直接检测化学发光强度。ADVIA Centaur cp检测在标记试剂中采用吖啶酯作为标记物采用顺磁微粒作为固相。系统采用多种检测反应类型来检测抗原或抗体。笔者采用该方法检测妊娠期及患者血清HCG的变化程度进行分析,现报告如下。

1 资料与方法

1.1  一般资料:选取78例与妊娠相关的疾病患者,年龄25~35岁,停经均在35 d~10周;妊娠期30例,异位妊娠30例,葡萄胎18例,均作B超、手术及病理检查已确诊。

1.2  仪器与试剂:西门子全自动化学发光分析仪及配套的血清HCG试剂,均由西门子公司出产。

1.3  检测方法:抽取受检者静脉血2 ml,分离血清。严格按照全自动化学发光仪的操作步骤进行操作。

1.4  结果判别:非妊娠妇女血清HCG参考值为0~10 mIU/ml,妊娠妇女血清HCG参考值为>10 mIU/ml葡萄胎、异位妊娠患者血清HCG参考>1 000 mIU/ml。

2  结果

各组血清HCG检测结果:见表1。全自动化学发光仪在妊娠初期就能快速、准确提早的检测到妊娠期、异位妊娠、葡萄胎血清中血HCG的含量,有效的给临床提出了诊断方案。

表1  各组血清HCG检测结果(mIU/ml)

名称

35 d检测血HCG均值

8~10周检测血HCG均值

10周以后检测血HCG均值

妊娠期

400

2 345

1 022

异位妊娠

1 345

4 890

2 345

葡萄胎

3 845

1 235

68 266.5

3 讨论

在妊娠期,血清HCG是呈倍数增长的。在正常情况,妊娠35~40 d血清HCG的数值仅高于参考值的2倍左右,8~10周可以出现最高峰值,1~2周后可以下降,利用全自动化学发光仪测定妊娠期的血HCG在35 d就可以测到。在我院就诊的妊娠期30位孕妇中,有两位35 d未来月经,测的尿中HCG呈阴性反应,但用全自动化学发光测的血清HCG数值就>20 mIU/ml。在医生建议指导下,1周后来实验室检查血清HCG,这时测的血清HCG就开始上升到几千,随后2 d复查一次血清HCG就成倍增长[1-3]。

在异位妊娠期,用全自动化学发光仪测定血HCG,35~40 d就可以测得血HCG数值在两千以上,经过治疗或手术后,明显可看到血清HCG下降到几百,在经过1周的治疗血清HCG可以降到几十。在我院就诊的30位异位妊娠患者中,有1例患者阴道流血半个月,B超提示异位妊娠,但尿HCG呈阴性,全自动化学发光仪测的血HCG数值为941 mIU/ml,隔2 d复查血清HCG为1 200 mIU/ml,提示缓慢增长,医生诊断为异位妊娠。

用全自动化学发光仪检测葡萄胎患者血清HCG,测的血清HCG数值可高达682 665.6的高数值。在检测葡萄胎患者血清HCG时,先用HCG金标条测一下血清中的HCG如果测定线比质控线深的多,就要手工倍比稀释,方法:加患者血清100 μl再加全自动化学发光仪专用血清HCG稀释液200 μl,上机再点击1:200倍稀释这样出来的结果乘以3,就能测到葡萄胎患者血清HCG的最高值。葡萄胎患者在医生给与清宫治疗后,测的血清HCG是下降的数值为2 000 mIU/ml。在1个月的治疗过程中,血清HCG可降至100 mIU/ml以下。在我院就诊的18例葡萄胎患者中,其中有1例葡萄胎患者复发了,刚到我院就诊时,2个月未来月经,B超提示葡萄胎,用全自动化学发光仪测得血清HCG数值为634 502 mIU/ml,随后经过复查治疗可以使血清HCG降到120 mIU/ml。但在3个月回访检查中,再次妊娠葡萄胎停经45 d测的血清HCG数值为6 482 mIU/ml,根据B超提示、病理检查,医生诊断为复发的葡萄胎患者,给与治疗1周后测的血HCG数值为125 mIU/ml。

全自动化学发光仪检测血清HCG具有提早、快速、准确、可靠、灵敏的特点。因此全自动化学发光仪检测血清HCG得到临床医生的认可与应用。我希望在今后的工作中能进一步研究全自动化学发光对各个学科的应用,为临床提供准确、无误、快速的试验结果。

4 参考文献

[1] 乐  杰.妇产科学[M].第7版.北京:人民卫生出版社,2008:243.

[2] 李  萍.生物化学检验[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2008:22.