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木瓜蛋白酶

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木瓜蛋白酶

木瓜蛋白酶范文第1篇

关键词:木瓜蛋白酶;黄粉虫;水解;蛋白质

中图分类号:Q517文献标识码:A文章编号:1672-979X(2007)08-0005-03

黄粉虫又称大黄粉虫、黄粉甲,俗称面包虫,属昆虫纲,鞘翅目,拟步行虫科,粉虫属,广泛分布于我国的黑龙江、辽宁、甘肃、四川、山东、湖北等省。黄粉虫具有丰富的营养成分,味道鲜美,是值得开发利用的一种昆虫。但由于对其缺乏系统的研究,开发利用较少,相当一部分作为饲料,使大量的营养资源浪费。

以蛋白质为原料水解制取氨基酸的方法有酸水解法、碱水解法、酶水解法3种。酸水解法水解虽彻底,但条件剧烈,色氨酸全被破坏,丝氨酸、酪氨酸和苏氨酸被部分破坏;水解液需经过中和及脱盐处理,工艺路线长,能耗高,设备腐蚀大,营养成分损失多。碱水解只能得到消旋化的氨基酸,羟基氨基酸、巯基氨基酸全被破坏;且造价高,设备腐蚀严重,营养成分损失也大。随着我国酶工业的迅速发展,蛋白酶生产成本大幅下降,用酶水解蛋白质制取氨基酸有可行性。酶水解法反应条件温和,操作简单,能保留更多的营养成分,且水解过程易控制,不会造成大的环境污染。

本实验研究了木瓜蛋白酶水解黄粉虫蛋白的工艺条件,为生产营养丰富、氨基酸种类齐全的天然保健氨基酸口服液打下工艺基础。

1材料与方法

1.1材料

黄粉虫幼虫(山东农业大学植物保护学院昆虫实验室提供);木瓜蛋白酶(美国Sigma公司);甲醛、氢氧化钠、盐酸均为国产分析纯试剂。

1.2主要仪器

PB203-N电子精密天平,DECTA 320 pH计(梅特勒-托利多仪器公司);HH-6数显恒温水浴锅(国华电器公司);SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城仪器厂);80-2B台式离心机(上海安亭科学仪器厂);WD850CMG-5578MTW微波炉(乐金电子有限公司);88-1型定时恒温磁力搅拌器(上海司乐仪器厂)。

1.3检验方法

氨基氮含量:甲醛滴定法;粗蛋白含量:凯氏定氮法[1]

1.4实验方法

鲜黄粉虫――挑选――洗涤――微波烘烤――磨粉――酶解――灭酶――粗滤――离心――氨基氮测定。

2水解工艺的优化

2.1木瓜蛋白酶最佳水解工艺参数的确定

本实验每次取黄粉虫质量均为10 g。

2.1.1酶用量对酶解反应的影响酶解条件:固液比1:3,pH值6.5,水解温度55 ℃,水解时间5 h。酶用量分别为1.5%,2.0%,2.5%,3.0%,3.5% 5个水平处理,结果见图1。

由图1可见,酶用量在2.5%以前氨基氮增长比较显著,在2.5 %以后增长缓慢。从经济角度看,选择2.5%的酶用量较为适宜。

2.1.2固液比对酶解反应的影响酶解条件:酶用量2.5%,pH值6.5,水解温度55 ℃,水解时间5 h。分别选取固液比1:2,1:3,1:4,1:5,1:65个水平处理,结果见图2、图3。

由图2可见,氨基氮含量随固液比减小而减少,固液比1:2时氨基氮含量最高,但氨基氮的总量少,表明水量少不利于水解,水解率低。由图3可见,固液比1:3时,水解液中氨基酸总量最高。综合图2、图3我们选择固液比为1:3作为水解最佳固液比条件。

2.1.3酶解时间对酶解反应的影响酶解条件:酶用量2.5%,固液比1:3,pH值6.5,水解温度55 ℃。水解时间分别为4,5,6,7,8 h。结果见图4。

从图4可见,随着水解时间增加,氨基氮含量增加,6 h时氨基氮含量最高,继续延长酶解时间,氨基氮含量又呈降低趋势,具体原因不详[2],有待进一步研究。根据以上分析确定6 h为最佳作用时间。

2.1.4酶解温度对酶解反应的影响酶解条件:酶用量2.5%,固液比1:3,pH值6.5,水解时间6 h。木瓜蛋白酶的最适反应温度为45~60 ℃,因此分别选取温度为45,50,55,60,65 ℃ 5个水平进行处理,结果见图5。

由图5可见,温度由40 ℃升至50 ℃,氨基氮溶出增加明显。温度进一步升高时,增加不明显并随温度增加有下降的趋势。这是因为适当加热,使蛋白质结构疏松,暴露出更多的酶作用位点,同时酶活性也达到了最佳作用状态,随着温度继续升高酶活性逐渐降低,导致氨基氮含量亦降低。因此,我们选择50 ℃为水解的最佳作用温度。

2.1.5酶解pH对酶解反应的影响水解条件:酶用量2.5%,固液比1:3,时间6 h,水解温度50 ℃。据有关资料得知,木瓜蛋白酶的最适pH值在6.7左右,因此,选取了6.25,6.5,6.75,7,7.255个水平。结果见图6。

由图6可见,水解液中氨基氮含量在6.25~6.75时逐渐增大,过了6.75后逐渐呈降低趋势。pH值在6.75时氨基氮含量最高,因此,选用最适的酶解pH值为6.75。

2.2提高蛋白质水解率方法的探讨

黄粉虫粉碎后经脱脂处理,内部的蛋白质不再受脂肪包裹,减少了脂肪的束缚,易被酶作用从而提高蛋白质水解率[3]。黄粉虫粉经浸泡后,由于水的作用,维系黄粉虫蛋白质结构的较弱的盐键、氢键及疏水作用被破坏,蛋白质分子结构舒张开,肽键部位暴露,所以易受酶的作用[3]。蛋白水解前采用浸提预处理不仅能提高氨基氮溶出率,而且使水解液中的离子强度增大,能起到一定的防腐作用[4,5]。由于酶的专一性,采用单酶水解时它只能从几个固定的氨基酸残基进行水解,所以水解率不高,双酶水解或者酶-酸水解则能提高其水解率。因为蛋白质先经酶解后,生成的肽片断已大大减小,削弱了其侧链集团对肽的屏蔽保护作用,减小了它们之间的空间阻挡效应。再用另一种酶或者稀酸水解就能使水解较为彻底[3, 6]。

4结果与分析

本实验选用木瓜蛋白酶水解黄粉虫。实验表明,最佳水解条件为酶用量2.5%,固液比1:3,水解时间 6 h,水解温度50 ℃,水解最佳pH值6.75。酶解后的黄粉虫蛋白液具有特殊的香气。水解液中存有的异味可加适量蜂蜜掩盖、β-环糊精包埋或发酵剂发酵等方法处理[4]。进一步加工可制成具有保健功能的复合氨基酸口服液,开发前景非常广阔。

参考文献

[1]大连轻工业学院,华南理工大学等合编[M]. 食品分析,北京:中国轻工业出版社,1999:214-216.

[2]崔蕊静,林学岷,周丽艳. 黄粉虫蛹水解蛋白发酵营养液的研制[J]. 食品科学,1999,(1):42-44.

[3]周爱梅,彭凯文,张桂珍,等. 酶解蚕蛹蛋白及其应用研究[J]. 广州食品工业科技,1995,(2):11-14.

[4]林学岷,崔蕊静,徐金祥,等. 黄粉虫氨基酸水解液的研制[J]. 河北农业技术师范学院学报,1997,(3):16-20.

木瓜蛋白酶范文第2篇

关键词:酸浆(Physalis alkekengi)宿萼;可溶性膳食纤维;提取工艺;酶用量

中图分类号:S641.4;Q-31 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2014)05-1142-03

酸浆(Physalis alkekengi)俗名红姑娘、灯笼草等,为茄科植物,具有耐寒、抗病等特点,是一种野生性极强的植物,具有独特的药用价值和丰富的营养价值[1]。

膳食纤维是一种复杂混合物,主要包括纤维素、半纤维素、果胶及亲水胶体物质,还包括木质素、抗性淀粉、抗性糊精、改性纤维素、黏质、寡糖以及少量蜡质、角质和软木脂等[2]。膳食纤维分为水溶性膳食纤维和水不溶性膳食纤维两大类,其中水溶性膳食纤维主要由一些胶类等亲水胶体物质和部分半纤维素组成。水溶性膳食纤维的主要功能是减少血液中的胆固醇,调节血糖,从而降低心脏病的发生机率,改善并治疗糖尿病以及肥胖症等[2]。目前,水溶性膳食纤维的应用越来越受到重视,被广泛运用于食品行业。有关酸浆宿萼中可溶性膳食纤维的提取报道的较少,赵成萍等[1]利用碱法提取了酸浆宿萼中可溶性膳食纤维,碱法操作简单,成本较低,但腐蚀性大,不利于保护环境。而周静峰等[3]对浒苔中可溶性膳食纤维进行提取,发现酶法较化学法提取的可溶性膳食纤维产出量高,且产物的持水力、膨胀力都优于碱法。进一步研究发现,酶法提取的浒苔可溶性膳食纤维可作为高品质膳食纤维及理想的食品添加剂[4]。目前,有关酶法提取酸浆宿萼中可溶性膳食纤维的研究鲜见报道,本研究利用酶法提取酸浆宿萼中的可溶性膳食纤维,采用正交试验优化提取工艺,以期为酸浆中可溶性膳食纤维的推广应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

酸浆宿萼购自山东省烟台市万民阳光药店;α-淀粉酶(10×103 U/g)、纤维素酶(5×104 U/g)、木瓜蛋白酶(8×105 U/g)、脂肪酶(2×104 U/g)均购自江苏锐阳生物科技有限公司;95%乙醇(分析纯)购自大连宝生物工程有限公司。

HH-4型数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)、DGL-2004型电热鼓风干燥箱(烟台先科仪器有限公司)、5810R型高速冷冻离心机(Eppendorf公司)、微型电动粉碎机、AL104型电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)、LMQ-2360B型灭菌器(山东新华医疗器械股份有限公司)。

1.2 方法

干燥酸浆宿萼样品经清洗、烘干、粉碎后称取1 g,加入去离子水浸泡(37 ℃恒温),将溶液pH调至6.5,按一定比例加入纤维素酶、α-淀粉酶和木瓜蛋白酶,升温至50 ℃酶解12 h,100 ℃条件下灭活酶活性30 min,3 000 r/min离心5 min,取上清液,过滤,加入4倍体积95%乙醇醇沉30 min后,3 000 r/min离心5 min,保留滤渣,60 ℃烘干得到可溶性膳食纤维。

提取率=(提取的可溶性膳食纤维质量/原料质量)×100%

1.3 单因素试验

按以下比例分别在原料中添加不同种类的酶,研究其对酸浆宿萼可溶性膳食纤维提取率的影响。①脂肪酶添加量:0.6×102、1.2×103、1.8×103、2.4×103、3.0×103、3.6×103 U/g,纤维素酶添加量为4×104 U/g,α-淀粉酶为5×102 U/g,木瓜蛋白酶为1.2×103 U/g;②纤维素酶添加量:0、1×104、2×104、3×104、4×104、5×104、6×104 U/g,脂肪酶添加量参照优化后结果设定,α-淀粉酶添加量为5×102 U/g,木瓜蛋白酶为1.2×103 U/g;③α-淀粉酶添加量:0、1×102、2×102、3×102、4×102、5×102、6×102 U/g,脂肪酶和纤维素酶添加量参照优化后的结果设定,木瓜蛋白酶添加量为1.2×103 U/g;④木瓜蛋白酶添加量:0、1.2×103、2.4×103、3.6×103、4.8×103、6.0×103、7.2×103 U/g,其他酶添加量参照优化后的结果设定。

1.4 正交试验

在单因素试验的基础上,采用纤维素酶、α-淀粉酶、木瓜蛋白酶3个因素进行正交试验L9(33)优化提取工艺,每个因素3个水平。正交试验因素和水平见表1。

2 结果与分析

2.1 单因素试验结果

2.1.1 脂肪酶添加量对酸浆宿萼中可溶性膳食纤维提取率的影响 试验结果表明,脂肪酶添加量对酸浆宿萼中可溶性膳食纤维的提取率无明显影响,随着脂肪酶添加量的增加,可溶性膳食纤维的提取率变化不大(提取率均在5.3%左右)。

2.1.2 纤维素酶添加量对酸浆宿萼中可溶性膳食纤维提取率的影响 由图1可知,随纤维素酶添加量的增加,酸浆宿萼中可溶性膳食纤维的提取率逐渐增加,在添加量为5×104 U/g时,提取率达到最大,为6.70%,之后随着纤维素添加量的增加,提取率反而下降。因此,选择纤维素酶添加量5×104 U/g为宜。

2.1.3 α-淀粉酶量添加量对酸浆宿萼中可溶性膳食纤维提取率的影响 在一定范围内,α-淀粉酶的添加量与酸浆宿萼中可溶性膳食纤维的提取率呈正相关,当添加量为5×102 U/g时,提取率最高,为6.70%;之后随着α-淀粉酶添加量的增加,提取率反而降低(图2)。因此,选择α-淀粉酶的最佳添加量为5×102 U/g。

2.1.4 木瓜蛋白酶添加量对酸浆宿萼中可溶性膳食纤维提取率的影响 木瓜蛋白酶的添加量对酸浆宿萼中可溶性纤维素提取率的影响如图3所示。当木瓜蛋白酶的添加量为0时,可溶性纤维素提取率较高,之后随木瓜蛋白酶添加量的增加,提取率呈下降趋势。当木瓜蛋白酶加入量为2.4×103 U/g时,提取率达到最低,继续添加酶提取率变化不大。考虑到提取物的纯度,木瓜蛋白酶的添加量选择1.2×103、2.4×103、3.6×103 U/g 3个水平较为合适。

2.2 正交试验结果

从表2的方差分析可知,3个因素对酸浆宿萼中可溶性膳食纤维的提取率影响大小依次为纤维素酶(A)、木瓜蛋白酶(C)、α-淀粉酶(B),最佳提取工艺组合应为A2B2C1。在此最佳工艺条件下进行验证试验,得到的酸浆宿萼中可溶性膳食纤维提取率为6.5%。

3 小结与讨论

本试验中纤维素酶的添加量在一定范围内与提取率成正比,但当添加量超过一定量后,提取率反而下降。幸宏伟等[5]对酶法提取红薯渣中可溶性膳食纤维的研究也发现纤维素的过量添加会导致提取率下降,认为纤维素酶在适量时可以将不溶性膳食纤维水解生成可溶性膳食纤维。李应彪等[6]认为在膳食纤维提取中,淀粉酶的添加量要适中,淀粉酶过多地加入会导致半纤维素等活性物质溶出,造成提取率降低。而本研究中α-淀粉酶的过多加入也使可溶性膳食纤维提取率降低,可能因为可溶性纤维中有关活性物质的析出,造成提取率下降。

单因素试验结果显示,木瓜蛋白酶添加的量为0时,酸浆宿萼中可溶性膳食纤维提取率相对较高,可能此时产物中存在一定的杂质,在控制成本的情况下,适度的增加木瓜蛋白酶,可提高可溶性膳食纤维产物的纯度。

酶法提取可溶性膳食纤维时往往需要脂肪酶,本试验结果表明,脂肪酶的添加与否对可溶性膳食纤维的提取率无明显影响,可能是酸浆宿萼中脂肪含量较低。张辉[7]对酸浆干燥宿萼成分的研究中发现,其脂肪含量很少,仅为1.8%左右。因此,酶法提取酸浆干燥宿萼中可溶性膳食纤维时,可以不加脂肪酶,以优化生产工艺,节省成本。

本试验结果表明,在综合考虑产物提取率、纯度和成本的前提下,酶法提取酸浆宿萼中可溶性膳食纤维的最佳工艺为在酶解温度50 ℃、反应体系pH 6.5,酶解12 h条件下,原料中添加纤维素酶5×104 U/g,α-淀粉酶5×102 U/g,木瓜蛋白酶1.2×103 U/g。

参考文献:

[1] 赵成萍,张晓娟,王晓闻,等.红姑娘宿萼中可溶性膳食纤维的提取工艺[J].贵州农业科学,2012,40(4):170-181.

[2] 李逸鹤.膳食纤维研究现状及发展趋势[J].现代农业科技,2010(6):349-351.

[3] 周静峰,何 雄,张煜炯,等.不同方法提取浒苔膳食纤维的效果比较[J].食品工业科技,2010,31(5):274-276.

[4] 周静峰,何 雄,师邱毅.酶法提取高品质浒苔膳食纤维工艺[J].食品开发与研究,2011,32(3):148-152.

[5] 幸宏伟,程 琳.酶法提高红薯渣可溶性膳食纤维得率的研究[J].食品科技,2011,36(10):153-156.

木瓜蛋白酶范文第3篇

事实上,木瓜能够丰胸纯属谣传。

有的人说木瓜能够丰胸,是因为木瓜中含有木瓜蛋白酶和可以在体内转化成维生素A的类胡萝卜素,在体内可以起到刺激雌激素分泌的作用,帮助丰胸。而且还说木瓜蛋白酶可以分解蛋白质,能够促进身体对蛋白质的吸收利用,也就是帮助减肥。

但是,我们吃到嘴里的木瓜会被嚼碎,然后经过食管到达胃部。而胃中含有大量的胃蛋白酶。进入胃部的木瓜蛋白酶就会被分解,活性自然就会降低,根本达不到丰胸的效果。如果将木瓜熬成汤之后再食用,烹饪的温度就会令木瓜蛋白酶受热失去活性。丰胸之效更无从谈起了。

究竟吃什么可以丰胸呢?

食物吃到肚里其实只能改变我们胸部的脂肪组织,但改变不了腺体组织或肌肉组织。胸部脂肪堆积虽然可以增加胸围,但是并不会使挺拔增大。也就是,变胖了,但不能变美。

因此,单纯依靠吃某种食物或保健品来丰胸,实现增加高度和体积的目的,是不可能的。除非这些食品中人工添加了激素。

在这里建议广大女同胞,自然美才是真的美,没有必要后天玩命去折腾自己。平常多吃一些优质蛋白――鱼、禽、肉、蛋、豆类食物,比如新鲜的海鲜、品种丰富的蔬菜水果,多摄取一些维生素,可以促进蛋白|的合成,从而起到美白肌肤、抵抗衰老的作用。

虽然木瓜不能丰胸,但必须承认木瓜确实是一种营养价值很高的水果。在成熟的木瓜中,每100克含维生素C30毫克,和大多数人爱吃的橙子差不多;每100克当中含胡萝卜素870微克,和柑橘差不多。木瓜的果肉厚实细致,容易消化。

成熟的木瓜可以和银耳、南瓜等一起做甜品。而未熟的青木瓜,烹调的方法就更多了:凉拌、渍酸菜、炒肉片、煲汤等都是不错的选择。

在这里向大家介绍一道美食――排骨木瓜汤。

主料:排骨、木瓜、山药。

配料:姜、盐、枸杞、红枣。

木瓜蛋白酶范文第4篇

木瓜的营养功效:

1、木瓜富含17种以上蛋白质及氨基酸:如糖分、齐墩果、有机酸、苹果酸、酒石酸、枸橼酸、皂甙、黄酮类、氧化氢酶、脂肪酶。

2、木瓜还含有木瓜蛋白酶、番木瓜碱、膳食纤维以及多种维生素及钙、铁等。木瓜中维生素C的含量是苹果的48倍,半个中等大小的木瓜足够供成人整天所需的维生素C。

3、木瓜有健脾消食的作用,木瓜中的木瓜蛋白酶,可将脂肪分解为脂肪酸。木瓜中含有一种酵素,能消化蛋白质,有利于人体对食物进行消化和吸收。

木瓜蛋白酶范文第5篇

瓜鲩鱼尾汤。用料:番木瓜1个,鲩鱼尾100克。制法:木瓜削皮切块,鲩鱼尾入油镬煎片刻,加木瓜及生姜片少许,放适量水,共煮1小时左右。功用:滋养、消食。对食积不化、胸腹胀满有辅助疗效。食物功效:番木瓜的木瓜蛋白酶,有助于食物的消化吸收,对消化不良、痢疾、胃痛、胃溃疡、十二指肠溃疡等均有疗效。番木瓜的脂肪酶,可分解脂肪成脂肪酸,有利于对食物中的脂肪消化吸收。木瓜蛋白酶还能够促进和调节胰液的分泌,对胰腺功能不全引起的消化不良有治疗作用。

淮山蜂蜜煎。用料:淮山30克,鸡内金9克,蜂蜜15克。制法:淮山、鸡内金水煎取汁,调入蜂蜜,搅匀。日1剂,分两次温服。功用:健脾消食。用于脾胃虚弱,运化不健之食积不化、食欲不振等。食物功效:淮山能健脾补肺,固肾益精。用于消化不良,小儿厌食症。淮山所含消化酶,能促进蛋白质和淀粉的分解,故有增进食欲的作用。蜂蜜能补中益气,润肠通便,对创面有收敛、营养和促进愈合作用。

桑椹三明治。用料:切片面包若干(无味或咸味)、桑椹罐头1瓶。制法:1、将桑椹罐头打开,舀出3~4粒桑椹粒放在面包上。2、再舀几勺桑椹汁,均匀地浇在面包片上,将面包片对折即可。功效:不仅养胃,还具有明目、清肝及健脑的作用。

(来源:文章屋网 )

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