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的贯彻落实提供相应的参考帮助。
面对如今的发展形势,环境问题让人堪忧,尽管我国在整个工业化的发展过程中不断地提出严厉的监管处罚政策,但是在一些地区仍旧存在着偷奸耍滑的不法厂商,在法律角度上看待这个问题,这些厂商的行为已经严重触犯了我国的法律,在道德行为的角度上分析,这些不法厂商为了自身的利益,严重危害到了人民群众的生命财产安全,由此看来,我国不仅要加大政策的落实力度,更应该强化安全环保监督管理部门的执行力度,只有如此,才能够保证我国的工业社会向着绿色发展的方向前行,进而带动我国整体的可持续发展。
安全环保管理现状
现今的安全环保管理随着我国相关政策的出台已经逐渐的趋向于完善,并且得到了相当多的成效,例如:经济型绿色汽车酒精燃油主要追求人与自然健康稳定的合写发展,二者之间共同进步,将环保理念和技术与化学、自然科学还有机械学相结合,营造有利于发展的新型汽车燃油类型,更好的用降低污染的方式来保护自然,使生态平衡系统更加完善,用科学的理论方法打造出优良的自然环境,进而推动化学实验的人性化思考,使得汽车燃油的研制生产与使用过程中能够减少对环境的影响。尽管现在已经有着相应的治理改革成效,但是在这个过程中,依旧存在着相当多方面的制约因素,例如:工业化进程的加快影响着安全环保工作的实施,现今的社会是工业化的社会,越来越多的工业企业如同雨后春笋一样逐渐的出现在工业化市场上,这些企业其自身的生产制造已经对整个环境造成了一定的影响,有些企业更是不顾环保监管单位的相关政策制度,对环境造成了大肆的破坏,为整个安全环保管理带来了极大的难度。
安全环保监督措施
制定安全环保监督制度。安全环保监督制度建设的目的就是帮助安全环保监管部门自身保证在正确的轨道上进行环境的监督治理。安全环保监管部门要全面加强安全环保监督制度建设,满足信息时展的需要,对安全环保监督制度进行不断更新,通过技术等多种手段对外部的风险进行有效防控;制度的建设不应当仅仅沦为一种形式,要想保证制度的有效性,就要全面加强执行力,确保所有制度的高效落实,因此,各安全环保监管部门应当从上到下,由管理者带头,强化制度的执行;在做好安全环保监督制度建设的同时,全面提升各基层的风险控制意识,唯有全员参与内部控制建设,才能保证内部控制的有效执行。
加大法律惩处力度。当前的法律约束力相对来说不强,虽然对于发展工业破坏环境行为有法可依,但显然无法形成有效的约束力。国外的一些发达国家对于发展工业破坏环境有着较为严厉的处罚力度,相比之下,我国的法律要轻得多,出现了这样的情况并未受到多么严肃的处理,甚至不了了之,这样的情况无疑助长了其他企业的效仿气势,使得发展工业破坏环境案件层出不穷。因此,只有在现有的法律基础上,完善相关的条例,扩大打击范围,加强处罚力度,真正落实法律的权威,起到有力的作用,只有这样,才能够在一定程度上,真正杜绝发展工业破坏环境行为的发生,保证我国的环保事业能够正常的运行,并且还能够为我国的社会经济的建设,打下良好的发展基础。
环保隐患治理方案
优化安全环保监管部门的内部管理。首先,国家应该积极健全和完善与对于安全环保监管部门内部管理和控制方面的相关法律和政策,出台一些法律和政策对安全环保监管部门的内部管理和控制进行有效监督和规范,使安全环保监管部门的内部管理和控制得以真实的反映安全环保监管部门的经营状况,进而使得安全环保监管部门的财务管理越来越好,从而可以在一定程度上防止安全环保监管部门运行中的风险,进而使得安全环保监管部门的财务管理走上健全发展的道路。所以国家要想使得安全环保监管部门的财务和会计信息更加真实可靠,就必须出台切实有效的法律法规加以规范,这样安全环保监管部门内部问题才能得到有效的解决,才能真实的反映安全环保监管部门当前管理状况,这样才能使得安全环保监管部门的安全环保管理质量进一步提高,进而方便安全环保监管部门上层做出正确的决策,从而进一步促进国家安全环保方面的治理内容更加健全,进而整个工业及相关企业的内部环境也可以得到可持续发展,才不会在发展中破坏社会和环境的发展。
规定环保隐患治理执行标准。关于安全环保的预期执行标准《环境保护法》虽然未能作出相关的规定,但是通常情况下,对于安全环保的购买价格和安全环保的维修安全环保监管部门都同样对待。这样安全安环保监管部门在执行安全环保管理措施时要具备一定的职业道德精神,过高估算安全环保监管部门的安全环保管理措施方式往往不利于管理措施的实行。因此在执行安全环保管理措施时要满足安全环保管理措施的标准要求,但是有些安全环保监管部门可以适当的改革安全环保执行标准,可是这种方式相对于具有着执行力的安全环保监管部门而言。只有安全环保监管部门适当增强安全环保执行标准,这样才可以促进安全环保措施的有效进行,安全环保监管部门在进行安全环保隐患治理时要注重满足安全环保监管部门财务制度和相关的法律要求,不能擅自更改安全环保的执行标准。
发展绿色环保工业。所谓的绿色环保工业,是指在研制工业产品的全过程中以及在工业产品的性能上,在最大程度上的减少污染、保护环境和节约资源,为人们提供一种实用的、健康的和具有高效性并且促进人与与自然和谐发展的工业产品。对于绿色环保工业产品理念的概念理解主要分三个部分:第一部分,绿色环保工业产品理念对于研制的过程更加关注,既要高效利用生活中的各种可用资源,又要对环境尽可能地降低破坏。第二部分,绿色环保工业产品理念对于工业产品的功能性更加注重,要将工业产品的环保、健康和高效作为首要任务。第三部分,绿色环保工业产品理念对生态系统的影响更加重视,希望通过绿色环保理念在工业产品研制设计中的应用与结合,让整个生态系统与试验创造得到和谐稳定的发展。
环保问题应急管理策略
突发环保安全事件的策略制定。对于应急事件的策略制定需要做到损益合理,对突发环保安全事件的处理所实施的方案,需要与突发环保安全事件对环境或者是社会造成损害的性质,危害程度以及阶段相协调;对突发环保安全事件有多种策略能够选择,需要选取有利于公众整体利益的策略,对自身危害或者是社会整体利益更少危害的策略,要限定在人们的能够进行消除或者是控制的突发环保安全事件给人们或者是社会造成的损害所必要的范围内,而且还对公众产生的损失的相关利益进行适当合理的补偿;在此基础上,不断地对突发环保安全事件的进展进行实时的把控,掌握到突发环保安全事件的事态发展,进而科学合理的提出突发环保安全事件的应急策略。
突发环保安全事件的策略实施。在对突发环保安全事件的策略进行制定后,环保安全监督管理各个部门需要形成联动处理关系,通过各个部门的相互共同和协调,将突发环保安全事件的策略按照预定的步骤进行实施,例如:环保安全监督管理部门需要实时的对突发环保安全事件进行监控,环保安全治理部门需要根据监控得到的相关情况进行具体策略的制定与实施,在整个策略实施的过程中需要对相关法律政策进行正确的运用,通过突发环保安全事件环境治理法律政策工具进行合理的运用,进而对整个突发环保安全事件进行解决,并且在解决的过程中,需要对整个突发环保安全事件的事件起因、解决方案、方案实施过程以及突发环保安全事件的解决结果进行具体的记录,并计入电子档案库,为以后的突发环保安全事件的解决提供相应的参考帮助。
综上所述,随着绿色环保知识的普及,绿色环保的概念已经逐渐的深入人心,人们期望有更好的生活环境,在此之前,我国已经提出了可持续发展观政策,期望人与自然和谐发展,只有这样才能够保证整个社会稳定的长久进步,因此,对于安全环保问题我国的相关部门应该加大监督力度,合理制定隐患治理方案,并且要有相应的应急管理措施,除此之外,所采取的管理对策还需要与国家的具体政策相结合,优化安全环保管理部门的内部管理体系,进而促进我国的整体化发展。
关键词:糖尿病;中医体质;生存质量
我国糖尿病的发病率日益上升,已成为严重危害人民健康的疾病。中医体质学说对于糖尿病的防治具有重要意义,而延长患者生命、提高生存质量则是糖尿病临床治疗的主要目标。为提高患者生存质量,就应当了解生存质量与体质之间的关系。本研究以保山市2型糖尿病患者为研究对象,主要调查糖尿病患者不同中医体质的生存质量水平,探讨中医体质与生存质量的关系,为临床防治糖尿病及提高患者生存质量提供依据。
1 资料与方法
1.1 研究对象:本课题选择2012年1月~2013年6月期间保山市人民医院门诊及住院的2型糖尿病患者。
1.2 诊断标准
1.2.1按照1999年中华医学会糖尿病学分会建议的WHO 糖尿病诊断标准。①糖尿病症状+任意时间血浆葡萄糖水平≥11.1mmol/L(200mg/dL);②空腹血浆葡萄糖(FPG)水平≥7.0mmol/L(126mg/dL);③口服葡萄糖耐量试验(OGTT)中,2hPG水平≥11.1mmol/L(200mg/dL)。满足3个条件其中一项即可确定诊断。
1.2.2 纳入标准:符合糖尿病诊断标准;年龄大于18岁。
1.2.3 排除标准:继发性糖尿病等;糖尿病急性并发症等。
1.3研究方法
1.3.1 中医体质类型判断标准:参考中华中医药学会2009年的中医体质分类与判定标准[1]。
1.3.2生存质量的评价:采用有很高的信度与效度的SF-36量表[2]进行调查,该量表由美国波士顿健康研究所研制。
1.3.3统计方法:应用Microsoft Excel建立数据库;使用SPSS13.0统计软件分析。计数资料采用卡方检验及对应分析法。
2 结果
2.1中医体质类型分布特点:痰湿质、血瘀质、阴虚质与其它类型体质有显著性差异(P
表1患者中医体质类型分布表 [n(%)]
2.2 由于其他五种体质例数较少,所以只选取痰湿质、血瘀质、阴虚质这三种的生存质量数据进行统计:见表2
表2 中医体质及生存质量均值
2.3通过两个独立样本的非参数检验,分别统计这三种主要体质各维度生存质量与整个样本的差异:见表3
表3三种体质生存质量与整个样本的差异
3 讨论
从本次研究可以发现,保山市糖尿病患者的主要体质类型是痰湿质、血瘀质和阴虚质。这可能与保山的地理环境、饮食习惯等有一定的关系。
本次研究虽未设立非糖尿病人对照组做比较,但从表2中的数据可看出调查者的生存质量在各维度的均值较低。通过对比统计分析发现中医体质与生存质量的存在一定的关系:痰湿质在PF、BP、VT、SF、MH几项低于整个样本;血瘀质在PF、RP、BP、GH、SF、MH几项低于整个样本;阴虚质在RP、GH、MH几项低于整个样本。
根据调查研究结果可知糖尿病患者中医体质与生存质量之间存在一定的关系。因此在对糖尿病的防治中,应结合中医体质学说,对患者个体进行综合分析,判别患者中医体质类型,制定相应的饮食、运动及情志干预计划,调节患者的中医体质,提高患者的生存质量。
参考文献:
当前,科学技术飞速发展,信息技术的进步和网络的发展更是日新月异,影响日渐扩大。网络改变了人们的生活,网络改变了世界。网络已经成为重要的思想舆论和国际舆论斗争的新领域,也成为思想政治工作的一个新的重要阵地。大学生是最先接触和最先接受互联网络的群体之一,因而,他们所受到互联网络的影响也就最早、最普遍的,对此,我们必须给予重视和研究。为了今后能更好地发挥网络的积极作用,消除其负面的影响,切实增强高校思想政治教育的实效性,我们在我院开展了题为“大学生与互联网”的基本情况、网络素养以及高校思想政治教育进网络情况,分析所存在的问题,进而提出进一步加强和改进网络环境下大学生思想政治教育的建议和对策。
二、研究方法
(一)研究对象。
调查对象为我院的大一至大三的220名学生。
(二)调查问卷。
本次调查采用自编问卷形式,问卷内容主要涉及三个方面:1.大学生上网的基本情况;2.大学生网络素养的现状;3.高校思想政治教育进网络情况,共计50道题目。问卷经过多次修改和完善,以保证其信度。除了发放调查问卷,还对部分个案进行了访谈,以增进对网络环境下大学生思想道德状况的了解。
(三)调查方法。
采取统一问卷、随机抽样的方式,共发放问卷220份,回收有效问卷200份,回收率95.4%。
三、结果与分析
(一)大学生上网情况的基本调查。
调查显示,目前在校的大学生都有上网的经历,上网已成为大学生生活的重要组成部分。在对网络的关注程度方面,28,5% 的学生选择了非常关注;38.7%的同学选择了比较关注,这表明在校大学生对网络的关注程度是较高的。在上网频率的选择上,22.5% 的学生每天都上网;46.4% 的学生每隔2―3天上一次网;20.7% 的学生每周上一次网。每次上网的时间半小时以内的占l2.2% ;1小时左右的占41.4% ;2―3小时的占36.7% ;5个小时以上的占9.7% 。在个案访谈过程中,发现许多同学对网络喜爱有加,有的同学将这种喜欢形容为“爱不释手”,甚至是不能自拔。从上网的目的来看,排在前三位的依次是:娱乐消遣,占59.3% ;享受网站提供的各种便捷服务,占51.3% ;了解国内外时事政治,占49.7% ;还有36.3% 的学生选择为获取更多的学习信息;l5.5%的学生选择向外信息。以上信息表明,大多数学生将上网作为一项娱乐和消遣的手段,部分同学是为了开阔视野来获取更多的信息。在调查中我们发现,网络不仅正在日益改变着当代大学生的学习、生活,而且对其思想道德观念、心理性格也都有不可忽视的影响。在问及“网络对大学生的影响”时,有23.4% 的学生回答有重要影响,46.3%的学生回答有一些影响。其中,大多数的同学认为网络开阔了视野,增长了见识,丰富了学生的业余生活,改变了人际交往的模式,有利于个人的成长。同时,网络的负面影响也是不可低估的。对于“周围同学身上你可看到网络带来的负面影响”的回答,11.0% 的学生非常同意;45.6% 的学生比较同意;面对“你身边有无因网络上瘾而经常逃课或彻夜不归的同学”的问题,25.6%的同学回答有。在笔者接触的一个案例中,一位大学生就发展到了不能自拔的程度,一个学期出现几次通宵上网的现象,结果性格变得越发的古怪:网上“龙腾虎跃”,热情大方,滔滔不绝;网下哑口无言,冷如冰霜.,对现实一切持怀疑态度,我行我素。一学期下来,几门课不及格,面临退学的危险。显然,网络成瘾会给青年大学生的健康成长带来不良的影响。
(二)大学生上网基本情况的分析。
1.有相当数量的大学生并未确立正确的学术观,学术伦理道德意识淡薄。
调查显示,43.8%的大学生认同“访问不是一件见不得人的事”的观点。对网上不文明现象(谩骂、恐吓、欺诈等),23.4% 的同学称偶尔遇到,33.7% 的同学称有时遇到,l2.5%经常遇到,这说明网上的不文明现象还是比较普遍的。更值得注意的是大学生对待网络黑客的态度,27.4% 的大学生对网络黑客表示崇拜,认为黑客都是电脑和网络方面的高手;此外,有36.9% 的大学生表示有机会也想试一试。这表明大学生对黑客行为的伦理性质了解不够,更多的是从猎奇的心理出发考虑网络问题,说明当代大学生的网络伦理道德还有待进一步提升。对于“你是否有过在网上下载文章完成作业(论文)的经历”的问题回答,9.2% 承认经常有;27.4% 承认有时会;40.3% 承认只是偶尔;23.1% 从未有过。
2.大学生的网络交往安全意识总体上较为薄弱。
调查发现,绝大多数的大学生都有自己的网友,但在对待网友的态度上却呈现出不同的特点:有的互相信任,有的互相提防,有的模棱两可。19.4%的大学生认为“只要谈得来就可以在现实生活中交往”,31.2% 的大学生认为“可以在现实生活中接触但需提防”,17.2% 的大学生认为“不能在现实生活中交往”,28.2% 的大学生则认为“说不清楚”。网络的虚拟性使得网络交往具有不确定性和危险性。
3.对网络接触行为的自我管理能力较低。
大学生网络接触行为的自我管理能力是大学生网络素养的核心能力,大学生能否驾驭自己在网络上的言行是直接反映大学生网络素养高低的一个风向标。调查显示:55.6% 的大学生表示“上网时间超过自己预计的时间”,23.8%的大学生表示“上网时接连打开网页浏览各种信息而忘记最初的打算”,还有4.8% 的大学生承认自己上网成瘾,甚至到了难以自拔的程度。
四、网络时代大学生思想政治教育工作面临的挑战
(一)网络文化的多元性对高校传统思想政治教育模式的挑战。
互联网的产生源于美国,所使用的语言技术都来自于美国,面对互联网上滚滚而来的、以美国为代表的西方文化的冲击,我们的大学生一方面缺少理论根基与人生阅历,世界观、价值观还没有完全形成;另一方面我国现在正处于市场经济体制的建立时期,大学生的思想价值观念也正处于激烈的动荡和交锋之中,长期接触互联网,易于被表面现象所迷惑而出现思想上的混乱和动荡,很容易受到网上内容所隐含的意识形态的影响,不同程度地消解我们民族的文化影响力,在价值观上产生倾斜,甚至会盲目地认为“西方的一切就是比中国好”。
多元网络环境的存在,加大了大学生思想政治教育工作中舆论导向的难度,削弱了传统思想政治教育的功效,使传统的教育模式也受到挑战。网络环境中,全球各种不同的文化形态、思想观念均在此汇集碰撞,大学生由于人生阅历、认识水平、辨别能力所限,因而面对多元的思想、价值观念难以做出正确的选择,这就需要思想教育工作者加强舆论引导。网络发展所形成的新的教育环境,使得在传统教育中独享的教师权威受到了挑战,教师将不得不和网络分享权威的境地。网络文化的多元性迫使高校的思想教育工作者必须改变传统教育模式,代之以灵活多样、内容丰富的春风化雨式的、平等对话式的交流。
(二)网络沉迷对高职院校教育和管理工作的挑战。
随着高校校园网建设速度的加快,网络占用了高职在校学生的主要业余时间,越来越多的大学生开始习惯并热衷于这种网络生活并且沉迷其中不能自拔。网络沉迷使大学生在思想意识上处于一种游离状态。青年大学生很容易因迷恋网络而变得孤僻或封闭,这种行为会导致他们交往方式变得单一,不愿与外界交流,讨厌与人面对面的碰撞接触,“人机关系”很好,人际关系淡漠,人际距离疏远,阻碍了对社会角色的获得,延缓了他们的社会化,使其社会交往领域日趋狭窄,不利于发展健康的个性,铸造完美的人格,并因此而慢慢的脱离现实社会或因受到网络文化的影响而引发对现实的不满。如何让沉迷网络的大学生走出“泥潭”,恢复健康、积极向上的生活方式,学会妥善处理与他人的人际交往,这是当今科技进步对高校思想教育工作提出的新挑战。
(三)网络信息时代对思想政治教育工作者的素质提出了更高的要求。
在网络时代,随着网络资源利用的方便和快捷,学生通过网络可以方便、及时地查到各种公开或内部、真的或假的信息,而教育者有时候却由于网络意识淡薄、计算机操作和网络技术水平差、缺乏接受新鲜事物的敏锐性、观念更新不够等不足之处,而处于信息劣势的境地。因此,为了全面、及时地了解大学生的思想动态、价值取向并对之做出正确的分析、判断以调整工作思路和方法,思想政治教育工作者必须尽快熟悉网络、更新知识、提高素质,这是迎接网络时代挑战的必然要求。思想政治教育工作者对网络这一新的校园信息化平台的掌握、熟悉和运用的好坏,决定了对思想教育工作网的使用和发展程度,并进而决定了思想政治教育工作的质量高低。
五、建议与对策
通过上面的调查和分析,更加凸现了当前加强网络环境下大学生思想政治教育的重要性和紧迫性。网络思想政治教育是一项系统工程,涉及理论创新和实践操作等各个层面,需要不断加以研究和探索。笔者认为,网络环境下大学生思想政治教育的着力点是:加强网络道德教育,以增强大学生的网络道德意识,提高大学生的道德判断、选择能力,培养大学生良好的网络行为习惯;开展网络心理健康教育,培养大学生的自我保护意识和自我控制能力,全面提高大学生的网络素养。主要通过以下举措来实施。
(一)建立具有正确政治导向的网站,占领网络阵地。
鉴于当代社会高度信息化的发展趋势及高大学生对信息的强烈要求,高校应根据实际建立自己的“校园信息网”,显得非常迫切和需要。这既可以监控、过滤、消除可能侵入学校的消极信息,更可以充分利用现代各种信息,通讯手段为学生提供全面、完整的信息,引导学生在分析和评判中选择并吸收正确信息。
(二)加强对大学生的思想政治教育,提高其网络道德素养。
在我国上网人群中,大学生占了多数,网络上的自由言论将对他们产生的影响,必须引起重视。在这个以平等为口号的自由交互空间,如果社会主义价值观和信念不去占领,资产阶级自由化的思潮就会乘虚而入,因此,重视网络空间的大学生思想政治教育,提高其自身的免疫力和抵抗力则显得尤为必要。
(三)建立和健全网络监管机制。
面对网络信息的大潮,我们必须尽快建立对高职学生网络行为的监控机制和完善的管理制度,加强对网络的监控和管理。这单靠思想政治教育工作者的努力是不够的,还需要政府和社会的高度重视和有力保障。一方面要推进网络信息领域的立法执法,加快网络法规建设,加强网络法制教育,约束网络行为,防止网上不良行为等问题出现;另一方面要加强对网络信息的监督和管理,及时了解网上信息,强制性地检查并过滤信息,对网上的一些有害信息进行“解毒”、“消毒”工作,从源头上净化网络,为大学生思想政治工作提供一个健康的网络环境。通过建立网络监管机制,及时发现学生中存在的思想问题并及时进行有针对性的教育,防患于未然,从而在高校校园营建健康的网络环境。
1.要有效地控制疼痛。患者在手术完毕回到病房后,当其体内的消耗到一定程度时,就会出现手术创伤所带来的疼痛。有效地控制疼痛,是术后进行康复锻炼和功能锻炼的基础。有条件的患者可以使用镇痛泵(或自控镇痛装置)进行镇痛。镇痛泵的使用时间一般为3天,其优点是能连续有效地镇痛。但在使用期间患者的排便和排尿功能会受到抑制。过去常用肌肉注射杜冷丁或口服曲马多的方法进行术后镇痛。但杜冷丁只能短期镇痛,而且易使患者成瘾,曲马多镇痛效果差,而且对患者胃肠道的副作用大。
2.应坚持仰卧位。患者在术后应坚持仰卧位,可在两腿中间夹一个梯形枕头,以保持手术一侧的下肢外展15度至30度,这样可以防止患肢跟部的坏疽。
3.要保持良好的睡眠。患者在经历了手术后,其体力和心理都很疲劳,加上麻醉性镇痛药的作用,会使其一回到病房就呼呼大睡。当他们一觉醒来,发现自己被迫仰卧在床上,手上打着静脉针、髋部留着引流管、鼻子里插着氧气管、下身插着尿管时,会顿时感到很不舒服,便再也难以入睡了。这时,可为患者变换一下,在其后背垫上1―2个枕头,让他坐一会儿,然后再让其恢复仰卧位。这样适当地改变其,有利于患者更好地休息。睡眠障碍严重者可为其口服些安眠药。
4.要合理地安排饮食。患者在手术6小时后,可以吃些流质或半流质食物。手术后第二天就可以正常进食了。患者的饮食应以易消化、高营养、富含纤维素的食物为主。
5.要保持大小便通畅。实施人工髋关节置换术的患者多为老年人。他们在术后大小便要使用便盆或便壶。这使他们感到很不习惯,加上他们在使用以后麻醉性镇痛药对其膀胱逼尿肌有抑制作用,他们又多半患有前列腺肥大等疾病,所以他们在术后常会发生尿潴留或张力性尿失禁等情况,此时最有效的解决办法是为他们插上导尿管。与此同时,由于老年人胃肠功能较弱,在使用抗生素和麻醉性镇痛药以后其肠蠕动的功能受到抑制,加之进食过少、不能活动等因素的影响,他们很容易发生便秘。此时,应该为他们做腹部按摩或让他们多吃些蜂蜜、香蕉及蔬菜等食物,帮助他们排便。只有保持大小便通畅,才能保持其机体的活力使其尽快康复。这里需要指出的是此时想使用泻药,必须请示医生。
6.应坚持进行肌肉及各关节的锻炼
(1)应进行股四头肌锻炼:肌四头肌是大腿前面的一组肌肉,是活动膝关节、维持站立的重要肌肉。在术后第一天就应锻炼该组肌肉。具体方法是:把膝关节背面贴在床上并绷紧大腿肌肉,起初绷紧肌肉的时间为2秒钟,以后可逐渐增至5秒钟。每天可进行数次此项活动。
(2)应进行臀肌锻炼:术后第一天可开始进行此项锻炼。具体方法是:收缩臀部两侧的肌肉,使臀部轻微上升,并持续片刻。起初练习的时间为每次几秒钟,以后可逐渐增至几十秒钟。每天可进行数次此项运动。
【摘要】 :目的 观察青藤碱对体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖以及基质金属蛋白酶-3(MMP-3)mRNA含量的影响。方法 培养人成纤维样滑膜细胞,分为青藤碱高、中、低剂量组和空白对照组,经青藤碱干预后,用四甲基偶氮唑蓝法测定细胞增殖情况,用半定量RT-PCR方法检测成纤维细胞中MMP-3 mRNA的表达。结果 经青藤碱干预后的人成纤维样滑膜细胞的增殖率受到显著抑制(P
【关键词】 类风湿关节炎 青藤碱 成纤维样滑膜细胞 基质金属蛋白酶-3
Abstract:Objective To observe the effect of sinomenine on the proliferation of fibroblast-like synoviocytes (FLS) and expression level of MMP-3 secreted by FLS in rheumatoid arthritis in vitro. Methods FLS were obtained by digesting synovial tissues with collagens and were pided into four groups:sinomenine high, middle, low concentration and control group. The proliferation of FLS was assessed by methyl- thiazolyl-tetrazolium (MTT) assay and the mRNA expression of MMP-3 was measured by semi-quantitative RT-PCR respectively after treated by sinomenine. Results The rate of FLS proliferation was significantly reduced in groups treated by sinomenine. Compared with control group, the mRNA expression of MMP-3 markly decreased in sinomenine groups (P
key words:rheumatoid arthritis;sinomenine;fibroblast-like synoviocytes;MMP-3
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种常见的以关节组织慢性炎症为主要表现的自身免疫性疾病。病变关节主要表现为炎性细胞浸润、滑膜增生、血管翳形成以及由此引发的软骨、骨和关节囊的损伤,最终可以导致关节的畸形和功能丧失。成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes, FLS)是一种可以在RA的发病中引起关节损害的主要效应细胞。FLS分泌的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMPs)是一族锌离子依赖性的内源性蛋白水解酶,可以直接降解软骨和骨质从而对关节造成破坏。由于许多外来信息都必须首先激活MMP-3后才能活化其它MMPs,所以,FLS分泌的MMP-3在关节破坏过程中所起的作用非常重要[1]。研究表明,青藤碱(sinomenine,SIN)治疗RA具有较明确的疗效,具有抗炎、免疫抑制、镇痛等药理作用,且毒副作用较小,临床上得到了广泛的应用[2]。但是,SIN对于RA患者FLS分泌的MMP-3作用尚不清楚。本实验就SIN对RA患者FLS的增殖以及其MMP-3的mRNA表达进行研究。
1 材料与方法
1.1 标本取材
RA滑膜均取材于南方医院脊柱骨科因RA行全膝关节置换术或关节镜滑膜切除术患者的关节滑膜组织,所有患者均符合1987年美国风湿病学会修订的RA分类标准[3],患者对取材均知情同意。
1.2 主要材料和仪器
超净工作台、普通离心机、CO2培养箱、荧光倒置显微镜、酶联仪(BIO-RAD Model 550)、PCR仪(Perkin Elmer公司)。SIN干粉(含量98%,性状为白色粉末)由湖南正清公司提供;高糖DMEM培养基、胰蛋白酶均购自GIBICO公司;胎牛血清(FBS)、胶原蛋白酶、EDTA、四甲基偶氮唑蓝(MTT)均购自Sigma公司;Trizol试剂、引物(上海生物工程技术服务有限公司);RT-PCR试剂盒[宝生物工程(大连)有限公司]。
1.3 人成纤维样滑膜细胞的分离培养
手术中获得的滑膜组织,在无菌条件下用D-Hanks液洗涤3~4次,剔除脂肪组织后获得白色滑膜组织,修剪收集的滑膜组织的滑膜层,充分剪碎,加入胶原酶消化,用含10% FBS的DMEM,直接分散贴附于培养瓶底部,置CO2培养箱(5% CO2、37 ℃)培养。3~4 d更换培养基,去除未贴壁的组织块,以后2~3 d更换1次培养基。利用光学显微镜对人FLS进行鉴定,待长满培养瓶底后,用0.25% 胰酶-0.02% EDTA混合消化液消化,传代分瓶培养,以第2~5代FLS进行实验。
1.4 人成纤维样滑膜细胞的药物干预及分组
将SIN溶于DMEM基础培养基中,按照参考文献[4]方法设立高、中、低剂量组,配制成浓度分别为0.3、0.1、0.05 mmol/L的SIN溶液。在传代后培养的第3天分别按照高、中、低浓度加入SIN溶液,对照组加入等量DMEM培养液,于培养第8天收获。采用光镜观察鉴定滑膜细胞。
1.5 MTT法检测细胞增殖
取处于对数生长期的FLS,用含有0.25%胰蛋白酶-0.02% EDTA的消化液反复吹打,制成细胞悬液,用锥虫蓝拒染法检测细胞活力>95%。将细胞悬液1 000 r/min、离心5 min后弃上清,各组细胞用含有血清的DMEM培养基分别稀释至5×106/L。细胞悬液接种于24孔板,每孔加入800 μL,12 h后换液,用按照0.3、0.1、0.05 mmol/L配制好的含有高、中、低不同浓度SIN的DMEM培养液对各组细胞进行培养,空白对照组加入等量的DMEM培养基,37 ℃、5% CO2进行培养。按照文献[5]方法,在第8天用MTT比色法测定各组的A值均值,记录并计算不同浓度组和空白对照组对FLS的抑制率[抑制率(%)=1-试验组A值/对照组A值均值×100%]。
1.6 细胞总RNA提取
采用Trizol一步法提取人滑膜细胞的总RNA,经紫外分光光度计测量260 nm和280 nm吸光度,二者比值在1.7~1.9之间。
1.7 逆转录聚合酶链式反应
取2 μg总RNA,42 ℃ 30 min,99 ℃ 5 min;进行30个周期的PCR逆转录后,进行PCR扩增,以β-肌动蛋白(β- actin)作为内对照。采用DNAman软件设计引物,引物序列及扩增产物长度见表1。表1 MMP-3与β-actin引物序列(略)
按照宝生物工程(大连)有限公司RT-PCR试剂盒(AMV)说明进行PCR扩增。扩增参数设置如下:94 ℃ 2 min预变性1个循环,每个周期为94 ℃变性30 s,55 ℃退火30 s,72 ℃延伸2 min。取PCR产物置于2% 琼脂糖凝胶中电泳,溴化乙锭染色,电泳条带经Hema凝胶图像分析系统作条带密度扫描,结果以MMP-3与β-actin密度比值作为MMP-3表达参数,对MMP-3 PCR产物相对定量。
1.8 统计学方法
采用SPSS10.0统计软件进行数据分析,结果以x±s表示,各组数据经过正态检验和方差齐性检验后,进行单因素方差分析,P
2 结果
2.1 人成纤维样滑膜细胞的培养鉴定
胶原酶消化法培养的人FLS在培养1周后在倒置显微镜下可见组织块周围呈放射状生长,10 d见细胞开始脱离组织块呈梭形生长且连成网状,2周左右细胞成片生长,3周细胞长满瓶底,且细胞排列整齐,呈现明显的方向性;传代后的细胞在12 h内完全贴壁,初期呈网状分布生长,以后随细胞数量的增长逐渐紊乱无明显的方向性,细胞形态以梭形为主,交织成网,网间散布有较多多边形细胞。在光镜下可观察到:细胞呈卵圆形、梭形或柱形,有短突起, 核呈卵圆形位于细胞中央,有时可见多核巨噬细胞样细胞,生长良好,纯度高,细胞形态无改变。
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2.2 青藤碱对人成纤维样滑膜细胞体外增殖的影响
实验结果显示,较之于空白对照组,不同浓度试验组的细胞增殖均受到明显抑制(P
P
2.3 RT-PCR检测的结果
MMP-3的mRNA经逆转录聚合酶链式反应扩增后的扩增产物大小与预期一致。Hema凝胶图像分析系统作条带密度扫描显示,MMP-3与β-actin产物的OD比值,SIN高剂量组与空白对照组之间存在显著差异(P
3 讨论
RA以持续存在的滑膜炎为特点,其慢性滑膜增生主要表现为滑膜衬里层细胞增生、炎性细胞浸润以及滑膜下层血管生成,进而导致关节组织包括肌腱、关节囊、软骨和骨进行性和不可逆性破坏以及功能障碍。FLS是关节滑膜细胞中的一种主要细胞,可以根据环境的变化发生演变,存在异常的增殖与分泌。研究证实,在体外分离和培养的情况下,滑膜各层的FLS和血管翳细胞几乎没有区别[3]。FLS不但参与滑膜组织对关节软骨及关节周围骨组织的破坏,而且还分泌多种细胞因子,如肿瘤坏死因子α、白细胞介素-1等,相互作用,构成细胞因子网络,持续刺激滑膜细胞,使得关节软骨过度增殖,刺激炎症反应,间接导致关节软骨的破坏[1]。这些都提示FLS是一种可以引起关节损害的主要效应细胞。RA的关节组织破坏主要是结缔组织的细胞间质降解以及溶解的结果。而结缔组织细胞间质以及软骨的降解和溶解长期以来被认为与细胞因子刺激下软骨和滑膜细胞产生的MMPs有关[6]。MMPs是一组在结构上具有极大同源性、能降解细胞外基质蛋白的内肽酶的总称。MMPs对RA的关节破坏作用可以概括为两个途径,一是直接降解软骨和骨质,二是在血管生成方面具有重要作用,这是RA的显著特征[7]。在RA的早期,增生的滑膜组织在向关节软骨面生长的同时侵蚀关节软骨,形成血管翳,血管翳中含有大量的成纤维细胞,可以释放胶原蛋白酶、MMP-3等[8];同时,FLS在一些细胞因子的刺激下也可以分泌MMP-3,进而激活胶原蛋白酶,通过滑液作用于无血管翳附着的软骨进而引起骨组织的破坏。这种分泌的MMP-3也是一种对基质起广泛作用的蛋白酶,被认为是导致软骨降解的最重要的蛋白酶,它对RA关节的破坏作用主要在于软骨和骨质[8]。有研究证实,滑膜细胞、成纤维细胞、软骨细胞都可以分泌MMP-3,其活化可以导致软骨连接蛋白、纤维连接素以及多种胶原酶等蛋白酶的降解,被认为是降解关节软骨最为关键的蛋白酶[7]。所以,MMP-3在RA中的研究近年来也得到了越来越多学者的重视。
研究发现,RA患者血清中的MMP-3水平显著高于正常对照组,而且其水平的升高与RA的活动性有关[9]。同时还发现,RA患者关节滑液中MMP-3含量明显增高而且其滑膜中的MMP-3蛋白和基因均处于过度表达状态[10]。所以,抑制FLS增殖已成为治疗RA的重要手段之一。在对RA患者关节滑膜液中的糖蛋白降解产物进行进一步的分析中发现,其核心蛋白成分都是在对MMP-3易感的位点处被裂解[11]。这些也都提示,MMP-3在RA关节的破坏中起着极为重要的作用。
我们研究发现,RA患者滑膜组织是大量增生的,SIN可以显著抑制FLS的增殖,同时,SIN还可以显著抑制MMP-3的mRNA表达,且实验初步表明,高剂量组较之低、中剂量组的抑制效果更加明显(P
参考文献
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