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关键词: 寒症模型;吴茱萸;性味组分;药性
[收稿日期] 2013-06-20
[基金项目] 国家重点基础研究发展计划(973)项目(2006CB504708,2013CB531801);黑龙江省博士后项目(LBH-Z12259);黑龙江省教育厅科研课题(12531622);黑龙江省中医管理局课题(ZHY12-2070);黑龙江中医药大学优秀青年教师支持计划项目(2012RCQ16)
[通信作者] *匡海学,教授,博士生导师,Tel:(0451)87266862,E-mail:
[作者简介] 孟永海,副教授,Tel:(0451)87266862,E-mail:
性与味均是中药功能的高度概括,两者既互不相同,又关系密切,可以将其看作是同一物质基础所展示出来的不同属性的功能。从中药的发展历史来看,四气药性必然存在,然而如何用科学的方法来阐释中药的四气,有关药性归属的判断标准是什么,如何量化,如何建立客观可行的中药四气的评价方法和体系?这些一直是我国中医药学者努力奋斗的目标。基于此,本文在已往吴茱萸各化学拆分组分药味归属研究基础上[1-3],以“中药一味一性,一药X味Y性(Y≤X)”的中药性味理论新假说为中心,以中医传统性味评价结果为依据,以与能量代谢、物质代谢相关的重要神经递质和激素为指标考察吴茱萸及其各性味拆分组分的药性归属。探索药味与药性之间的关系,为揭示中药“一味一性”的客观存在提供依据。
1 材料与方法
1.1 动物 清净级Wistar大白鼠,雌雄各半,体重(200±20) g,合格证号P00102007号,饲养于本校实验动物中心SPF级屏障动物实验室。室内温度20~25 ℃,相对湿度40%~70%,12 h循环照明。动物日常护理及实验条件均符合《中华人民共和国卫生部实验动物环境及设施标准》。
1.2 药物与试剂 实验用吴茱萸各性味拆分组分由课题组自制[4],其中辛味组分为“生物碱1组分和20%乙醇洗脱组分”,苦味组分为“生物碱2组分、醇沉组分、95%乙醇洗脱组分以及吴茱萸内酯”[1]。大鼠多巴胺(DA)酶联免疫检测试剂盒、大鼠五羟色胺(5-HT)酶联免疫检测试剂盒、大鼠去甲肾上腺素(NE)酶联免疫检测试剂盒、大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)酶联免疫检测试剂盒、大鼠17-羟皮质类固醇(17-OHCS)检测试剂盒均为美国R&D公司产品。
1.3 仪器 Anthos 2010型酶标仪(奥地利Anthos Labtec公司);Eppendorff移液器(Eppendorff公司);涡旋混匀器(美堰市康健医疗器具有限公司);低温离心机(日本日立公司)。
1.4 分组 取Wistar大白鼠60只,随机分为6组,每组10只。分别设为空白组、模型组、吴茱萸水煎液组、吴茱萸辛味组分组、吴茱萸苦味组分组、挥发油组分组。
1.5 动物模型制备[5] 吴茱萸水煎液及各拆分组分按人和大鼠体表面积等效剂量折算(0.018)配成质量浓度为生药0.067 5 g・mL-1的溶液备用,灌胃量为20 mL・kg-1,相当于生药1.35 g・kg-1。各组实验动物连续给药7 d(空白组和模型组给予同体积的蒸馏水),造模前,将大鼠禁食48 h,自由饮水,末次给药30 min后,用乙醚轻麻大鼠,将动物仰卧固定于大鼠固定板上,将其下半身置于(20.0±1.0) ℃的冷水,水面齐剑突水平,7 h后将大鼠于冷水中取出并吹干(空白组不造模直接取血)。用乙醚轻麻大鼠经颈总动脉取血,血样静置1 h后高速离心分取血清;打开腹腔,剪下胃,浸泡于1.0%甲醛中20 min,沿胃大弯剪开并展平,用小棉球轻轻将黏膜上的黏液和血块擦掉,观察黏膜损伤程度,游标卡尺测定溃疡指数。
1.6 溃疡指数(UI)测定 按Guth标准[5]计算溃疡指数(UI):点状出血为1分,线状出血长度< 1 mm为2分,1~2 mm为3分,2~4 mm为4分,> 4 mm为5分,宽度> 1 mm时分值×2。
1.7 血清中多巴胺(DA)、五羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、乙酰胆碱酯酶(AChE)及17-羟皮质类固醇(17-OHCS)含量测定 分离血清,依据试剂盒使用说明书进行DA等指标的检测[6]。
1.8 统计学方法 所有数据以±s表示,组间比较用t检验。
2 结果
2.1 吴茱萸性味拆分组分对应激型胃溃疡模型大鼠胃黏膜的影响 组织形态学观察:冷水对大鼠应激刺激后,取大鼠胃肉眼观察,见图1,可见模型组大鼠胃底部黏膜大片瘀血、出血严重,溃疡面较多;吴茱萸水煎液组、吴茱萸苦味组分组和挥发油组分组大鼠胃黏膜出血明显减少,且溃疡部位面积缩小;吴茱萸辛味组对溃疡改善不显著。胃黏膜病理切片经HE染色,光学显微镜观察,见图2,可见模型组大鼠胃黏膜上皮有缺损,胃底腺上皮细胞变性、坏死,黏膜层和黏膜下层偶见红细胞及含铁血黄素颗粒,黏膜下层偶见中性白细胞浸润;吴茱萸水煎液组、吴茱萸苦味组分组和挥发油组分组,可见大鼠胃底腺上皮细胞较好,黏膜下层中性粒细胞浸润程度较轻;而吴茱萸辛味组分组呈现不同程度的黏膜充血、糜烂及炎细胞浸润。
对模型大鼠胃黏膜溃疡指数的影响:以溃疡指数为指标衡量各组分的影响效果,结果见表1,吴茱萸水煎液组(P
图1 经肉眼观察各组模型大鼠胃黏膜的损伤图
Fig.1 The original drawings visually observed of gastric mucosal injury in each model groups rats
图2 经HE染色光镜观察各组模型大鼠胃黏膜的损伤图(×400)
Fig.2 The original drawings by HE staining light microscopy observed of gastric mucosal injury in each model groups rats(×400)
2.2 吴茱萸各性味拆分组分对冷水应激实验大鼠血清中的中枢神经递质含量影响 对大鼠血清DA含量的影响[7-8]:模型组与空白组相比,模型大鼠血清DA含量呈现显著降低趋势(P
对大鼠血清5-HT含量的影响[7-9]:模型组与空白组相比,模型大鼠血清5-HT含量具有显著升高趋势(P
对大鼠血清NE含量的影响[7-9]:模型组与空白组相比,模型大鼠血清中NE含量变化趋势不明显,无显著性差异,说明冷水应激刺激不能使大鼠血清中NE含量产生明显变化。吴茱萸水煎液组、辛味组、苦味组、挥发油组与空白组和模型组相比,均无显著性差异,表明吴茱萸各性味拆分组分对大鼠血清NE影响不明显,见表2。
对大鼠血清AChE含量的影响[7-10]:模型组与空白组相比,模型大鼠血清中的AChE含量显著降低(P
2.3 吴茱萸各性味拆分组分对冷水应激实验大鼠血清中17-OHCS含量的影响[7-8,11] 模型组与空白组相比,模型大鼠血清中17-OHCS的含量显著降低(P
DA,5-HT,NE,AChE,17-OHCS等指标线性回归方程及相关系数见表3。
2.4 吴茱萸各性味拆分组分对冷水应激实验大鼠各脏器指数的影响[12] 冷水应激模型大鼠在刺激过后各脏器指数没有发生明显改变,各给药组大鼠脏器指数与空白组及模型组比较,均未见显著性差异。
3 结论与讨论
早在20世纪80年代初梁月华等[4]针对寒热证及中药寒热药性等方面进行了大量研究,后来很多学者也开展了相关领域的研究。结果表明,在寒凉药诱导的大鼠寒症模型中,中枢神经递质如NE,DA含量降低而5-HT含量增高,经温热药灌胃后可逆转以上病理变化;同时温热药如附子、肉桂、干姜等可使动物脑内去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)含量逐渐增多,并维持在较高水平,且作用缓慢而持久。
冷水应激大鼠由于受到冷水及束缚刺激,从实验动物外观(瘫软无力、几乎无活动能力)及刺激类型(20 ℃冷水浸泡,7 h)可判断为典型的寒症模型;从实验结果看,大鼠血清中DA,AChE与空白组比较,其含量明显下降,而5-HT则表现为明显上升趋势。这些结果与以往一些学者的研究结果基本一致。考察吴茱萸及其各性味拆分组分对模型大鼠血清中DA,5-HT,NE及AChE含量的影响发现:与模型组相比,大鼠血清中DA含量,吴茱萸水煎液组、辛味组分及苦味组分虽然没有显著性差异,但发现有明显的上升趋势,表明吴茱萸水煎液组、辛味组、苦味组对于冷水应激造成的大鼠血清中DA含量下降均具有一定的升高作用;在5-HT的含量指标上,与模型组相比,吴茱萸水煎液组、辛味组分及苦味组分具有显著性下降趋势,表明吴茱萸水煎液组、辛味组、苦味组对于冷水应激造成的大鼠血清中5-HT含量升高均具有较强的降低作用。这些结果同样与前人研究热性药物的变化趋势基本一致,因此,可初步判断吴茱萸及其各性味组分应归属为温性。而各给药组对模型大鼠NE及AChE含量影响均不明显,有待于进一步探讨。
寒性药和热性药可通过对自主神经功能的调整,纠正机体交感-肾上腺功能不平衡的状态。温热药(附子,肉桂,干姜为主的方药)可以纠正寒证患者低下的交感-肾上腺系统功能活动,自主神经平衡指数升高[11-12]。考察冷水刺激模型大鼠血清中17-OHCS含量的影响发现,模型大鼠血清中17-OHCS明显下降,表明冷水刺激使大鼠交感-肾上腺系统功能活动下降表现为典型的寒症模型。考察吴茱萸及其各性味拆分组分对模型大鼠血清中17-OHCS含量的影响发现,对大鼠血清中17-OHCS含量,与模型组相比,吴茱萸水煎液组、辛味组分及挥发油组分虽然没有显著性升高作用,但有明显的上升趋势,表明吴茱萸水煎液组、辛味组、挥发油组对于冷水应激造成的大鼠血清中17-OHCS含量下降均具有一定的上升作用,可在一定程度上纠正寒证大鼠低下的交感-肾上腺系统功能活动。以此亦可判断吴茱萸水煎液组、辛味组、挥发油组应归属为温性。
综上所述,吴茱萸及各性味组分可在不同程度上纠正或缓解水应激寒症大鼠血清中与中枢神经递质及能量代谢相关的递质、酶类的含量,因此,判断吴茱萸及各性味组分的药性应归属为温性。
[参考文献]
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[4] 杨志欣,孟永海,王秋红,等.吴茱萸化学拆分组分的性味药理学评价――化学拆分组分的制备及其镇痛作用的研究[J]. 中医药学报,2011,39(4):11.
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[9] 李良,刘国贞,梁月华.寒凉和温热药对大鼠脑、垂体和肾上腺内5-羟色胺及去甲肾上腺素神经元和纤维的影响[J].中国中药杂志,1999,24(6):360.
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Study on drug properties of components in Euodiae Fructus based on rat
stress gastric ulcer model with cold syndrome
MENG Yong-hai, WANG Qiu-hong, YANG Bing-you, YANG Zhi-xin, WANG Yan-yan, WANG Zhi-bin, KUANG Hai-xue(Key Laboratory of Northern Medicine Basis and Application Research at Provincial and Ministerial Levels,
Heilongjiang Key Laboratory of Pharmacodynamic Material Base of Traditional Chinese Medicines and Natural
Drugs under Ministry of Education, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China)
[Abstract] Objective: To clarify drug properties of components in Euodiae Fructus. Method: The rat cold syndrome model was induced by cold water stress method. The content of neurotransmitters sand hormones such as DA, 5-HT, NE, AChE and 17-OHCS in serum of model rats were taken as the indexes to evaluate drug properties of components in Euodiae Fructus. Result: Euodiae Fructus and its components could correct or relief the content of energy metabolism and substance metabolism-related neurotransmitters sand hormones in serum of model rats with water-stressed cold syndrome. Conclusion: Euodiae Fructus and its components are proved to show hot property.
我的家庭是一个极其普通的家庭,也是极其和谐的一个大家庭。祖孙三代十余人,凡事都是商量而行,从未发生过争执、龃龉,"兄友妹恭,尊老爱幼"是我们这个大家庭的显著标志。这些,都要归功于我的父母——这个家庭的两位"大家长".父亲是转业军人,母亲是随军家属,他们没有很高的文化水平,也讲不出深刻的做人道理,但是他们言传身教,无声胜有声,为我们晚辈们做出了榜样,教育我们健康成长,形成我们家独特的"家风".
"凡事都要有规矩".这是父亲常挂在嘴边的一句话。作为一名转业军人,他将部队的优良作风带到了家乡。刚从部队回来时我们一家五口挤在办公楼的房间里,他毫无怨言;省厅领导来视察,他带着去小饭馆吃饺子,连酒水都没有;哥哥与父亲在一个单位工作,他从不允许哥哥办私事、用私车;父亲刚刚调动单位,哥哥结婚没有婚房,他硬是让哥嫂与我和姐姐挤在家里,而把刚腾出来的三居室交给原单位……用他的话说,就是"不能占公家便宜。"
父亲也有他的缺点,性情过于耿直,在管理工作中经常得罪人。不止一次地有人去告父亲的黑状,他知道后总是一笑了之,从来不给人家"穿小鞋".有一次,一位员工因为一点小事跟父亲大吵大闹,而平时在家脾气暴躁的父亲却一直在软语劝说,给人的感觉好像怕她似的。恰好去找父亲的我看不过去,与那名员工争吵起来。但父亲立即严厉地制止了我,把我推出门外。我不服,回家继续跟他理论,父亲仅用两句话回答我,"大人不记小人过,身正不怕影子斜".
父亲外表一直保持着军人的刚硬,威严,但是只有我知道,他的心底其实很柔软。他经常资助老家的乡亲们,只要他们来找总是有求必应。每逢学校的学生有困难,他都会伸出援手,尽力帮助人家。有一个洛宁的小姑娘家境实在困难,他帮其申请减免了学费,还经常资助她衣物,为其联系实习单位。后来小姑娘跑到家里要认为干女儿,被父亲婉言拒绝。如今事情已过去几十年,每逢过年过节,女孩都会到家里来拜年,真正成了我家的一门亲戚。用父亲的话说,就是"做人要善良,谁也难保不求人".
父亲的一生过于节俭,尤其看不得铺张浪费。一件衣服他穿了几十年都不舍得扔,我们要给他买新衣,他会说柜子放不下。如今我们要给他买衣物,都是连威胁带吓唬地才能达到目的。我们兄妹从不敢在他面前说到饭店聚会、吃饭,说了肯定是挨训,即时哥哥几十岁的人也当小孩子一样训得毫无面子。就是父母亲过生日偶尔去饭店吃一次,也是需要千请万请才十分不情愿地参加,而我们从不敢跟他说花了多少钱。因为,他会心疼。
母亲是在这个家中最为温婉的一位,大字识不了几个,但是双手极巧。她自父亲当兵时就开始照顾家里,从老人、小叔、小姑到孩子,为大家操碎了心。母亲的双手从未停过,做针线,缝衣衫,织毛衣,纳鞋底,在我的印象中,没有母亲不会做的。一家老小的衣服鞋袜从未缺过,我和姐姐从小的衣裳也总是引领时尚。母亲从未教育我们"孝当先",可是她将姥姥赡养到88岁无疾而终,将脾气暴烈的奶奶赡养到103岁罹病而亡,据说她们的老衣都是母亲一针一线亲手缝制的。记得有一次父母在很晚的时候接到奶奶的电话,不顾夜深赶回孟津老家。我以为是很重大的事情,后来才知道,是因为父母给奶奶准备的常用药找不到了,奶奶以为是从我家临走前母亲藏起来了,老人家大发脾气,无人能劝得动,直到父母回去后从她的包裹里把药翻出来才了事。知道这事后,我很为母亲不平。但母亲说,已经习惯了,这已经不算是很委屈了。想奶奶一个缠足的旧社会妇女,那年轻时婆婆的威风肯定是很大的。心里为母亲感到委屈的同时,也知道现在作为子女、作为儿媳我们要怎么做了。于是就有了公公重病时我的忙前忙后,陪护服侍,公公去世后我们把婆婆接来同住,给她买衣服,带她出去散心。公婆的朋友们知道此事后都对我大加赞赏,而我却不觉得这是什么大不了的事情。因为,这都是我们应该做的。
常见饮食误区
误区一:牛奶疗法
由于牛奶营养价值高且有较好的特性,一直被广泛用于溃疡病的饮食治疗,直到后来被证明是一种强力促分泌剂后才停止使用。现已证明,牛奶刺激胃酸分泌的作用比牛奶本身可中和胃酸的作用更强,其本身并不是一种抗酸剂。所以,胃溃疡患者常饮牛奶并不利于胃溃疡愈合。然而,牛奶中的蛋白质、脂肪对胃溃疡患者有益,故每日饮用250克是不会有问题的,也可将250克牛奶分2次在餐后饮用,可起保护溃疡面的作用。而十二指肠溃疡患者可以适当多喝牛奶,但每日不应大于500克,且应分2-3次饮用。
误区二:只吃细软食物
食物中纤维素不足也是引起溃疡病的原因之一。有人对溃疡患者随访,发现饮食富含纤维素的,胃溃疡复发率为45%;饮食过分细软者,胃溃疡复发率为80%。同时细软食物在口腔中咀嚼时间较少,未能使唾液充分分泌。唾液不仅能帮助消化,还有中和胃酸、提高胃黏膜屏障作用。所以胃溃疡患者只要病情稳定,可以食用普通饮食,但应少用或不用含粗纤维多或粗糙的食物。尽可能减少对病变部位的刺激。
饮食治疗原则
养成良好的饮食习惯定时定量,少食多餐。确保营养,以适量的食物中和胃酸,减少对溃疡面的刺激,缓解疼痛。
避免或减少对病变部位的刺激避免食用粗糙食物,如粗粮、芹菜、韭菜、雪菜、竹笋类、干果等,以及生冷的、易产气的食物;少用或不用浓汤类、浓茶、咖啡、可可茶及部分调味品(如芥末、胡椒粉、醋、辣椒、咖喱)等;禁用油煎、油炸及过热的食物,一般食物的温度以45-55摄氏度为宜。
供给充足的蛋白质充足的蛋白质是促进溃疡愈合的重要因素之一。摄入量每天每千克体重不应少于1.2克。应选用易消化的蛋白质食品,如鸡蛋、牛奶、豆浆、禽类、水产类、瘦肉类等。
供给适量脂肪溃疡患者每天脂肪供给量以50-60克为宜,应选择易消化吸收的乳酪状脂肪,如牛奶、奶油、蛋黄、奶酪等,以及适量植物油。
供给充足的维生素及矿物质特别是维生素A、维生素B族和维生素c有促进溃疡愈合的作用。建议常吃水果和蔬菜,不仅可预防溃疡病,还能提供足够的矿物质。每日食盐摄入量以4~6克为宜。