冬至的文案

前言：想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗？我们特意为您整理了5篇冬至的文案范文，相信会为您的写作带来帮助，发现更多的写作思路和灵感。

冬至的文案范文第1篇

2.冬，见影如晤，愿你我，温如春熙。

3.冬至，古城如旧，恰好是雪落长街，与你初逢。

4.妆白之冬，愿负暄食暖，心素如初。

5.每个日子都值得庆祝，星星，飞雪和你。

6.世界再大，大不过一盘饺子。

7.今夜最长，今夜最漫长。

8.白天最是时光短，花饺入汤暖夜长。

9.太阳公公要从南半球回来啦。

10.时光静谧无声，冬至悄然而至；指尖白露凝霜，流年安然无恙。

11.捡拾一路暖香，装点岁月情长；诗酒年华过往，依旧惜君如常。

12.吃点饺子，喝点羊汤，终结这靠抖腿发热的冬天。

13.岁末将至，敬颂冬绥。 煮酒温茶，满饮此杯。大雪将至，万事胜意。

14.祝眉目舒展，顺问冬安。

15.我托人间寄讯，邀雪称庆，为你捎来清佳冬令。

16.小雪落旧檐，新炉烫陈酿，山头月落，故人当归。

17.昼短夜长，好汤圆。

18.太阳从南半球回归，温暖也在不远之日。

19.冬至吃了这碗饺子，快乐就会时常绕你身边。

20.在最长的冬夜里，等春的照面。

21.冬至问安！再忙，也要吃饺子哦～。

22.眉眼舒展，未来可期。

23.踏破十二月碎寒的孤勇，折尽腊梅枝头的墨梅，是风雪臣，亦是惊鸿客。

24.愿所得皆所期，所失皆无碍，用温暖迎接整个冬日。

25.白天最是时光短，花饺入汤暖夜长。

26.我不怪你春夏秋没来，但冬至到了，你总该来了。

27.春去秋来，立夏冬至，周而复始，年年有余。

28.家家捣米做汤圆，知是明朝冬至天。

29.遇见冬至，世界渐寒;遇见你，我心渐暖。

冬至的文案范文第2篇

一、加强对排球运动员的文化、技能教育，提高排球运动员的文化素质及从业技能

排球退役运动员的文化素质及从业技能关系着运动员退役后能否找到理想的工作以及对工作的满意程度，因此努力提高运动员的文化素质和从业技能就显得很重要。在役运动员大多是很小就进入体校进行训练，没有接受过科学、全面、系统的教育，因此，体育主管部门和运动队应努力与相关教育部门协调配合，积极邀请高校文化课教师对在役运动员进行授课。而排球专业运动队，也可充分借助高校办学力量联合办学，弥补体育系统自办教育水平不高的缺陷。排球专业运动队除与郑州大学体育学院进行合作办学外，还应该与河南大学、郑州大学等综合类院校进行合作办学，做到学分互认。排球运动员既可以在体育学院进行专业训练和专业知识的学习，同时又可以在综合类院校丰富学习内容。与此同时，排球运动员自身也应该对当前的就业形势有一个充分的认识。随着退役补偿资金安置政策的实施，自主择业成了大部分排球退役运动员的主要选择方式，只有全面提高自身综合文化素质和从业技能，才能在退役后找到较为理想的工作，得到工作单位领导及同事的认可，以寻求退役后的优化发展。

二、创造排球运动员与社会接触的机会，提高其与人沟通、协调的能力

运动员长期处于封闭式训练环境中，与社会接触的机会较少，其社会经验缺乏，与人沟通、协调能力差，所以要尽可能地创造排球运动员与社会接触的机会，提高他们与人沟通、协调的能力，需做好以下几点：

第一，运动员应积极主动地与教练员进行交流，及时向教练员汇报自己的思想和对问题的看法，教练员也应把自己的训练理念、训练内容、训练方法和手段与运动员进行沟通和交流。第二，加强排球专业运动队与高校排球运动队之间的交流与合作，场上切磋球技、场下交流感情。第三，积极鼓励排球运动员在训练间隙进入社区，与社区参与体育锻炼的人进行球技的交流和感情的沟通。第四，要加强文化知识的学习，因为知识的获取能帮助运动员树立正确的价值观念，开阔他们的视野，让他们站在更高的境界审视人生。第五，提高运动员的文化素养。这样不仅可以促进他们竞技水平的提高，还可以提高他们与人沟通、协调的能力。

三、拓宽排球退役运动员就业渠道，促进运动员就业多元化发展

河南省体育主管部门一定要根据社会主义市场经济的发展规律和劳动人事制度改革的要求，结合退役运动员的就业趋向，合理、科学地制定新的就业安置政策，不能只限于国有企事业单位等单一渠道，应努力拓展其他事业单位、三资和乡镇企业、私人公司、公安武警系统单位甚至国际市场等多元化安置渠道。

在安置政策方面，首先，要优先考虑退役运动员到体育行业新增加的就业岗位去工作，积极帮助退役运动员从事社会体育指导员、基层体校教练和社区体育服务工作等。其次，要建立退役运动员相关信息工作部门，为退役运动员的就业提供及时、可靠的信息。再次，要专门建立体育人才市场，帮助河南省排球退役运动员联系其他省市的运动队甚至国外运动队，推荐他们在其他省市从事运动员或教练员的职业。以上安置渠道是国家安置政策的良好补充，可以在目前退役运动员就业安置难度增大的环境下，开展用人单位和退役运动员之间的双向选择，尽最大可能做到人尽其才。

四、积极组织运动员职业管理，强化排球运动员职业前期教育

运动员职业生涯管理有助于运动员明确退役后的发展方向和目标。而运动员职业生涯管理除依靠运动员自身努力外，还需要得到组织上的支持和帮助。

冬至的文案范文第3篇

 

 

志愿者日活动方案1

   一、活动主题：奉献爱心，美化校园

   二、活动目的：为了通过参加志愿者组织为更多人提供一个锻炼自我，服务他人的机会。引导学生融入学校，了解同学，弘扬奉献、友爱、互助、进步的志愿精神。构建谐社会，营造校园文明新风尚，推动志愿服务事业的发展。

   三、活动背景：12月5日是国际志愿者日，全世界的志愿者将在这一天开展丰富多彩的志愿服务活动，进一步倡导志愿精神。培养志愿服务理念，以实际行动迎接自己的节日，今年的志愿者日，为了扩大青年志愿者协会在社会和同学间的影响及认同感，特此举行本次活动。

   四、活动流程

   (一)活动准备流程：

   1、由协会行政部、组织部进行策划工作，并由秘书部来协助收集与国际青年志愿者，国内青年志愿者有关的发展史，以及本协会近期的活动及取得的成绩和相关的图文资料。

   2、由宣传部做出本次活动的宣传海报，宣传方式以横幅、传单、问卷调查等方式均可。

   3、需用物资包括：请柬(作邀请相关重要与会人员用)，板报(供宣传部宣传用)，签字横幅、签字笔(供有兴趣的人签名留念用)，彩带(没位志愿者左手臂系一条作为志愿者表志)，宣传图片(展示、宣传校青年志愿者协会)

   (二)活动流程：

   1、所有协会成员在校田径场八点准时集合，由协会会长发表活动前讲话并由组织部部长分配任务。

   2、秘书部负责活动登记、记录工作。

   3、开始活动，并由秘书部向各负责人分发问卷调查表、宣传单等需用品。

   4、各负责人分配具体任务

   5、全体集合，进行活动总结。

   五、活动地点：x小区。

   六、活动时间：20XX年12月5日

志愿者日活动方案2

   一、活动背景：

   12月5日世界志愿者日

   二、活动目的：

   通过此次宣誓仪式,使青年志愿者们树立强烈的责任感 及无私的奉献精神,在未来的日子里以实际行动诠释志愿者精神,履行志愿者义务,将“奉献、友爱、互助、进步”的志愿者精神带到社会每个角落。

   三、活动主题

   “这个冬天 用我热情温暖你我

   四、活动形式 （三大服务）

   ㈠“一杯热水 温暖你也温暖我”为在等车的乘客免费送上一杯热水

   ㈡“我们的热情 捧在怀里 暖在心底”为在等车的乘客送上一个自制暖手瓶

   ㈢“这个季节 有我与你同行”为在进出火车站和汽车站的乘客提行李拿包裹

   五·活动时间：xx年12月5日下午4：30

   六.活动地点：㈠块活动场所 火车南站

   ㈡面活动场所 市客运中心站 汽车北站

   ㈢点活动场所 灵桥西公交车站 天一东门公交车站

   万达北门公交车站 城隍庙公交车站 邱隘公交车站

   七、具体活动内容安排

   总要求

   ①每一支志愿者队伍必须带一面志愿者旗帜，内容为“浙江万里学院商学院青年志愿者协会”

   ②每一位志愿者必需手挂五色微笑丝带

   ③每一支队伍都必需配备一个记录员，负责拍照和记录活动过程

   八.活动参与人员：全院青年志愿者

   九、前期准备

   1、召开浙江万里学院商学院青年志愿者协会全体会议，讨论并拟定活动计划，明确项目内容和项目分工。

   2、会长组织相关人员到各活动场所采点

   3、有外联部联系活动场所主要负责人，待其许可，协商本次活动的各项具体安排及相关细节。

   4、取得学院团委的批准，并开出本次活动的许可证明。

   5、活动宣传（海报、横幅等），招募志愿者，并由活动部负责采购活动必备品。

   6、确定参加活动的志愿者人数，向其再次补充介绍情况，积极动员他们到时候通力协作，圆满完成既定服务项目。

   7、准备活动设备（相机、旗帜、横幅、五色彩带、桌子、纸杯等）

   十、注意事项：

   1、11：45在学校后门集合准时出发，出发前集中志愿者，清点人数，交代细节。

   2、志愿者要秉持“文明礼貌，优质服务”的原则，以平等亲善的态度对待每位行人，不得与任何行人发生争执。且与行人说话时要有爱心、信心和耐心。

   3、所带东西必须要在安全范围之内，不可以是易燃易爆，具有腐蚀性、放射性的危险物品。

   4、进行劳动时，所有志愿者必须认真负责，不可自行到处闲逛，开小差。全体参与者必须遵守学院的工作纪律和规章制度。

   5、志愿者要自觉遵照场地工作人员的指导和帮助完成工作，切不可不听指挥，蛮干乱干，扰乱工作计划，一切均需按照既定计划严格执行。

   6、参加人员要注意安全，要有团队意识，决不可单独行动，不听指挥。遇到突发问题要及时上报学院领导。

   7、参加劳动时需要小心翼翼，切忌碰到行人，且不允许对行人有任何危险动作，以免对他们的身体造成伤害。

   8、注意天气变化，做好下雨、刮风等不利天气的应对方案。

   9、各活动项目在具体执行时可以根据情况实施灵活创新的做法，争取在往年经验的基础上更上一层楼。

   10、活动结束后，召集志愿者并清点人数。

   11、收集各分活动场所的图片文字资料经行总结。

   十一、活动物品

   志愿者招募海报

   活动横幅

   一次性纸杯

   桶装矿泉水

   五色丝带

   志愿者旗帜

   桌子

   饮水机

   热水瓶

   已消毒塑料空瓶

   青年志愿者协会

志愿者日活动方案3

   一、活动背景： 12月5日世界志愿者日

   二、活动目的： 通过此次志愿服务活动，使志愿者们树立强烈的责任感 及无私的奉献精神，在未来的日子里以实际行动诠释志愿者精神，履行志愿者义务，将“奉献、友爱、互助、进步”的志愿者精神发扬光大。从而 扩大志愿者的号召力，让更多的人认识志愿者，了解我们的爱心活动，共同携 手让我们的世界变得更加温馨，更加和谐而美好!

   三、活动主题 “传递爱心 助飞希望 创造未来”

   四、活动口号：“我志愿、我奉献、我快乐!”

   五、活动时间： 20XX年12月4日

   六，活动地点： XXXX广场(西湖口)

   七、主办单位：XX志愿者协会

   承办单位：XX志愿者协会

   八、活动内容：义卖、义捐、义诊、义剪。通过溆浦志愿队的宣传发动，号召社会爱心人士捐赠个人爱心物品，收集并筛选后进行现场公开义卖;组织大型募捐，接受企业、单位和个人的捐赠，并将所得与义卖收入统一交至溆浦志愿者慈善会转发给贫困群体。(注意：爱心人士所捐赠的义卖物品，必须是全新书籍，文具用品、玩具、饮料、食品等，)

   九、具体安排：

   XX志愿者协会成立"20XX传递爱心 助飞希望”爱心义卖项目组，负责活动的整体策划和协调;志愿队及社会爱心人士成立各行动小组，配合项目组具体展开活动。

   十、活动组织：

   1、义卖外联

   负责义卖场地的联系及爱心商家的联系。

   2、现场协调：

   主要负责各组工作的协调，两处义卖点间人员、物质调配。

   3、义卖宣传：

   主要负责义卖活动的横幅和义工宣传资料、音响准备以及活动拍照等工作。

   4、义卖物资采购：

   负责义卖物品的准备、采购、物品定价。

   5、义卖财务：

   义卖现场收费以及账目结算。

   6、现场义卖(人员不限)：

   主要负责义卖时物品的保管及售卖工作，义卖时要做好物品发放的登记工作，同时负责记录义卖情况。

   7、后勤安保组 ：

   主要负责义卖活动现场桌椅、雨棚、横幅、音响等搬运、义卖场地布置及义卖结束后物品清理，义卖期间的秩序维持，同时协助宣传组做好现场宣传布置工作。特别是人员安全保护工作、防盗、防哄抢、防挤压，协助义卖组做好义卖物品、音响器材等的保管工作及其它后勤服务工作。

志愿者日活动方案4

 

   一、活动背景

   志愿服务是一项高尚的事业，志愿者所体现和倡导的“奉献，友爱，互助，进步”的精神是中华民族助人为乐、扶贫济困的传统美德和雷锋精神的继承、创新和发展。2009年12月5日是第24届国际志愿者日，全球的志愿者将在这一天开展丰富多彩的志愿服务活动，进一步倡导志愿精神，培育志愿服务理念，以实际行动迎接自己的节日。根据《**学院管理学院与**共建文明和谐社区实施方案》，我院青年志愿者服务队将用国际志愿者日这一天，在社区开展以丰富社区文化为主题的社区志愿服务，努力发展社区群众文化活动，丰富群众性业余文化生活，提高居民的思想文化水平，推动社区文化活动健康有序进行，共建文明社区。

   二、活动目的

   1、丰富社区文化生活，共建“团结，互助，丰富”的社区文化，让居民积极参与到共建和谐社区的活动中。

   2、为了有效动员和组织青年以志愿服务方式参与公益活动，发挥青年人在促进社会和谐方面的重要作用。

   3、进一步增强我校大学生的社会责任意识，展现当代大学生的精神风貌，也让我们提高志愿者服务能力。

   4、发扬志愿者“奉献，友爱，互助，进步”志愿者精神。把志愿者乐于助人的优秀品德带进居民社区。

   三、活动主题

   “丰富社区文化，共建和谐社区”

   四、活动意义

   通过此活动为丰富社区文化贡献力量，培养青年志愿者“服务社会，奉献爱心”的观念，倡导志愿者精神，全面发展和提高大学生的综合素质，增强我校学生的社会责任意识，同时进一步丰富了社区居民的文化生活，大力倡导社会文明新风，让更多的居民参与到共建和谐社区的队伍中。

   五、活动时间

   2009年12月5日

   六、活动地点

   ****

   七、前期准备

   1、12月1日：组织服务队人员到**社区熟悉环境

   2、12月1日：晚上回来后组织召开青年志愿者会议根据实地考察情况计划活动并拟定方案，明确项目、内容

   3、12月1日—12月5日：进行活动宣传和物资准备（海报、横幅、宣传材料由指定人员制作购买）

   4、12月2日：联系本校社团***，邀请他们参与我们的活动；同时与**居委协商本次活动的各项具体安排及相关细节

   5、12月3日：

   （1）及时将宣传海报贴到社区，把邀请函送到社区，让社区居

   民了解我们的志愿者日活动。

   （2）服务队志愿者分组到**社区居民区（**市场周围）和市政府广场，向社区居民宣传我们活动，鼓励并邀请社区群众参与，并统计需要我们义务劳动的孤寡老人。

   5、12月3日：晚上再次组织青年志愿者会议确定参加活动的志愿者人数，并确定各志愿者分工安排。

   6、12月1日—12月5日：进行活动宣传（海报、横幅、宣传材料由指定人员制作购买）

   7、12月4日：准备活动设备（卡纸、五子棋、相机、桌椅、音响、小礼品、海报、卫生工具等）

   备注：三条横幅，分别写

   ①“丰富社区文化，共建和谐社区”

   ②“12·5国际志愿者日‘和谐社区服务队’主题活动” ③“**学院管理学院与**共建文明和谐社区”（三幅海报一条以宣传国际志愿者日为主，另外两条以宣传丰富社区文化为主。）

   八、活动开展 （12月5日）

   上午：

   方案一（**集贸市场志愿者服务）

   1.7：20 所有服务队志愿者在宿舍楼下集合，带好劳动工具，并清点人数，统一到中心参加“国际志愿者日启动仪式”。

   2.10：00 出征仪式结束后，服务队所有成员带到**社区。

   3.10：30 达到**社区后，布置会场，准备活动使用的工具和材料，并分配到每一部分的活动上。

   4.11：00—12：00 志愿者根据社区情况，分成不同小组进入孤寡老人家，帮助他们打扫卫生，并了解他们的在生活上的困难和需要。

   5.12：00 志愿者集合，收拾好卫生工具，清点人数，午休。方案二（市政府广场志愿者活动）

   1.7：20 部分服务队志愿者成员和我校**社团会员在宿舍楼下集合，清点人数，准备好活动材料、音响等设备和材料，统一带到市政府广场（市政府广场喷泉前方）。

   2.7：40 所有人员到达市政府广场，准备设备电源连接及调试，并把活动材料布置到位。

   3.8：00—10：30 社区文化节舞会开始，由舞当派会员指导，按照我校每周的校园舞会，教不同种类的舞步，让感兴趣的社区群众前来学习舞步，让我们大学生与社区群众在舞蹈中互动，让他们感受我们的校园文化气氛。

   4.10：30 舞会结束时，给大家介绍我们的志愿者活动，鼓励大家参与到志愿者服务当中，并邀请他们参加我们的其他社区活动。

   5.10：50—11：30 整理设备，部分成员带回设备，志愿者开展“**广场美化活动”，除清扫活动地点外，将**广场活动地环境美化。

   6.11：30 清点人数，收拾工具，统一带回学校。

   下午：(和谐社区文化节活动）

   14：30—17：30

   1.猜谜活动（准备已经编好号的数十个谜语、脑筋急转弯，猜中者得小礼品一份，猜完为止，共一人）

   2.五子棋擂台赛（一人守擂，一人挑战，守擂三次成功者有奖品，共三人）

   3.生活小窍门竞答（准备10份题目，每份三个关于生活小窍门的问题，答对2题送棒棒糖一个，连对三题送洗衣粉一包，共两人）

   17：30—18：00，活动结束，打扫卫生，清点人数，统一带回。 晚上：组织志愿者到**体育馆观看“国际志愿者日晚会”

   九、经费预算

   1、宣传海报数量：2 张金额：40元

   2、横幅数量：3条金额：200元

   3、洗衣皂数量：10块金额：20元

   4、洗衣粉数量：10包金额：20元

   5、五子棋数量：3副金额：45元

   6、中性笔数量：15只金额：30元

   7、棒棒糖数量：20个金额：10元

   8、牙膏数量：10个金额：30元

   9、材料费金额：20元

   10、其他金额：50元

   总计：465元

   十、注意事项

   1.参加活动的人员注意安全，特别是在带去带回的途中要注意交通安全。要有团队意识，不可擅自单独行动，听从统一安排调动。

   2.注意天气变化，做好应急措施。

   3.在活动中不能对老弱病残有任何危险动作，注意说话语气和态度，注意礼貌问题。

   4.两个游戏同时进行时，每个游戏由一到两个人负责，要求参与者遵守游戏规则。

   5.活动过程中要求每个参与者不能破坏社区的公共设施，不得影响社区正常生活秩序。

   6.舞会电源准备要注意避免漏电，用电要严格且安全。要保证舞会带去的音响等设备安全带回，不能有遗失。

   6.横幅要在12月3号之前做好，12月4日挂于**社区和**广场。

   7.活动结束后与社区负责人联系，反馈本次活动效果，总结经验。 十

   一、活动负责人及参与者：

   活动负责人：**\\\\**

冬至的文案范文第4篇

【摘要】 目的 研究健脾止动汤对多发性抽动症(TS)模型鼠纹状体多巴胺通路的影响，为健脾止动汤干预小儿TS提供神经生化学依据。方法 90只雄性ICR小鼠随机分成6组，即空白组、模型组、泰必利组、健脾止动汤组、六君子汤组、泻青汤组。除空白组外，其余5组小鼠腹腔注射亚氨基二丙腈建立TS小鼠模型。除空白组和模型组给予生理盐水外，其余4组分别灌胃给予相应药物。4周后采用高效液相色谱电化学法测定TS模型鼠脑纹状体单胺类递质的含量。结果 TS模型鼠表现出抽动症特征性的运动行为和刻板行为。小鼠脑纹状体单胺类递质含量，模型组较空白组脑多巴胺(DA)、二羟苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)含量无明显变化(P＞0.05)；泻青汤组较模型组DA、DOPAC含量降低(P＜0.05)，泻青汤组较泰必利组脑DA、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、NE含量降低(P＜0.01或P＜0.05)，泻青汤组较六君子汤组脑DA、5-HIAA、NE含量降低(P＜0.01或P＜0.05)。结论 健脾止动汤的主要作用组分为泻青汤，其抗抽动作用可能与兴奋脑纹状体多巴胺间接通路、降低DA含量有关。

【关键词】 多发性抽动症；纹状体；多巴胺通路；健脾止动汤；小鼠

Abstract：Objective To study the effects of Jianpizhidong decoction on dopamine pathway in TS model mice striatum， and provide neural biochemical proof for Jianpizhidong decoction in treating children Tourette syndrome (TS). Methods 90 male ICR mice were randomly pided into 6 groups， namely blank control group， model group， Tiapride group， Jianpizhidong decoction group， Liujunzi group， Xieqing group. Except blank control group， other 5 groups mice were made to TS models by intraperitoneal injection of 3， 3’-Iminodipropionitrile (IDPN). With the exception of blank and model groups， other 4 groups were given corresponding drugs by intragastric administration respectively. 4 weeks later， the levels of monoamine neurotransmitter in brain striatum of TS model mice were detected by high performance liquid chromatography and electrochemical detection. Results TS model mice appeared characteristic locomotion behavior and stereotypy behavior. The levels of monoamine neurotransmitters with the exception of 5-HIAA had no difference in striatum of mice between TS model group and blank control group (P＞0.05). Compared with model group， levels of DA and DOPAC in striatum reduced in Xieqing group (P＜0.05). Compared with Tiapride group， levels of DA， 5-HIAA， NE in striatum reduced in Xieqing group (P＜0.01， P＜0.01， P＜0.05). Compared with Liujunzi group， levels of DA， 5-HIAA， NE in striatum reduced in xieqing group (P＜0.01， P＜0.01， P＜0.05). Conclusions The mainly component of Jianpizhidong decoction is Xieqing decoction， the function of improving symptoms of TS maybe relate to activate indirect dopamine pathway and decrease levels of DA in TS model mice striatum.

Key words：TS model mice；striatum；dopamine pathway；Jianpizhidong decoction；mice

小儿多发性抽动症(Tourette syndrome，TS)是一种慢性神经精神障碍性疾病，以运动性抽动和发声性抽动为主要表现，病因和发病机制尚未阐明，目前多数学者认为可能与多巴胺(DA)、5羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)等单胺类递质异常有关[1-2]。目前临床上治疗TS主要以药物和心理干预为主，其中西药治疗以多巴胺受体阻滞剂(氟哌啶醇、泰必利等)为首选，但由于不良反应大、疗程长、停药后易复发，患儿依从性较差。北京中医药大学东方医院儿科王素梅主任医师在多年临床经验基础上，以健脾疏肝、化痰熄风立法，创制健脾止动汤，治疗小儿脾虚肝亢夹痰型TS，取得较好疗效，且复发少，无明显不良反应[3]。本研究拟通过建立TS小鼠模型，以泰必利做为阳性对照药，以健脾止动汤的拆方六君子汤、泻青汤作为对照中药，测定TS模型鼠脑纹状体单胺类递质的含量，探讨健脾止动汤对TS模型鼠纹状体多巴胺通路的影响，揭示健脾止动汤治疗TS的可能神经生化学机制，为其在临床进一步推广应用提供理论依据。

1 实验材料

1.1 动物

雄性健康ICR小鼠，体重(18±2)g，清洁级，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2007-0001。分笼喂养，自由采食，温度(23±3)℃，通风，日光灯照明(8 am～5 pm)。

1.2 药物、试剂与仪器

盐酸泰必利片(泰必利片，江苏恩华)，中药配方颗粒(江阴天江)，标准品DA、NE、高香草酸(HVA)、5-HT、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、二羟苯乙酸(DOPAC)及DHBA(内标物)均购自Sigma，乙二胺四乙酸二钠(EDTA·Na2)、高氯酸、偏重亚硫酸钠、柠檬酸、柠檬酸三钠均为国产分析纯，1-庚烷磺酸钠(HPLC Grade)，甲醇(高效液相色谱淋洗液)，超纯水，液氮。美国ESA 5600A高效液相色谱8通道库仑阵列电化学分析系统，SIGMA 3K15台式低温高速冷冻离心机，过滤膜(孔径0.22 μm)，玻璃匀浆器。

2 实验方法

2.1 分组及造模

ICR雄性小鼠90只，随机分成6组，分别为空白组、模型组、泰必利组、健脾止动汤组、六君子汤组、泻青汤组，每组15只。分笼适应性喂养1周后开始造模。参照神经毒素全身用药法[1]，除空白组外，其余5组小鼠在灌胃给药后立即进行腹腔注射IDPN，为获得更明显的TS模型鼠的特征性行为改变(运动行为和刻板行为[1])，剂量由原文献报道的150 mg/(kg·d)增至300 mg/(kg·d)，空白组腹腔注射等体积的生理盐水，每日1次，连续7 d。造模7 d后模型鼠均出现不同程度的运动行为(探究活动[4-5]增加)和刻板行为(头部抽动、旋转)[1]，且该行为表现不需特殊处理可一直持续2个月。

2.2 给药

造模当天同时进行灌胃给药，以相当于儿童临床用药的5倍剂量[20 mL/(kg·d)]，空白组和模型组给予生理盐水，其余4组分别给予泰必利(按25 mg/kg配成混悬液)、健脾止动汤(太子参、炒白术、茯苓、羌活、防风、龙胆草等，1 mL含1 g原药材)、六君子汤(太子参、炒白术、茯苓、法半夏、陈皮，1 mL含0.35 g原药材)、泻青汤(羌活、防风、栀子、龙胆草、川芎、当归、酒大黄，1 mL含0.45 g原药材)，每日1次，连续4周。

2.3 指标测定

2.3.1 色谱条件

参照文献[4]方法，美国ESA 5600A高效液相色谱8通道库仑阵列电化学分析系统，色谱柱：ESA HR-80 (4.6 mm×8 cm)，流动相：71 mmol/L一水柠檬酸、75.8 mmol/L柠檬酸三钠、0.13 mmol/L乙二胺四乙酸二钠、0.42 mmol/L 1-庚烷磺酸钠、6%甲醇，0.22 μm滤膜过滤，超声脱气10 min。柱温30 ℃，流速0.6 mL/min，电势设置-50、100、300、500 mV，进样量20 μL。

2.3.2 纹状体单胺类递质检测

灌胃4周，末次给药24 h后，断头取脑，冰盒上快速剥离小鼠脑纹状体，电子天平称重，铝箔包好，按组分装入纱布袋，置液氮罐待测。

将脑纹状体放到玻璃匀浆器中，每50 mg纹状体加入预冷的500 μL脑组织递质工作液[4](EDTA-Na2 200 mg，偏重亚硫酸钠200 mg，含0.1 mg/mL DHBA的内标液100 μL，加0.2 mol/L高氯酸溶液定容至500 mL)，冰上快速匀浆，吸取匀浆液，4 ℃、 14 000 g 离心15 min，取上清进样检测DA、5-HT、NE、DOPAC、HVA、5-HIAA含量。

3 统计学方法

定量资料用x±s表示，采用SPSS15.0软件包，对正态分布数据，采用单因素方差分析，方差齐，采用LSD检验(P＜0.05)，方差不齐，采用Games-Howell检验(P＜0.05)。对偏态分布数据，采用非参数检验。

4 结果

(见表1)表1 药物对TS小鼠脑纹状体单胺类递质含量的影响(略)注：与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01；与泰必利组比较，P＜0.05，P＜0.01；与六君子汤组比较，P＜0.05，P＜0.01； 与健脾止动汤组比较，P＜0.05

5 讨论

TS发病可能与遗传因素、神经生理、生化代谢(如神经递质失衡)、心理因素、环境因素等相互作用有关[6]。多数学者认为主要与DA、5-HT、NE等单胺类递质异常有关。可能病机为TS患儿DA突触后受体超敏感，负反馈调节机制启动，代偿以突触前DA释放减少以维持DA能系统平衡，当DA失代偿时，5-HT和NE能系统参与调节平衡，此时患儿不发病或抽动症状轻微，若5-HT和NE能系统失代偿，患儿则出现明显的抽动症状[2]。

DA由其前体酪氨酸经过一系列酶促反应在脑DA能神经元中合成，释放到神经突触间隙，与DA受体结合，发挥调节躯体运动和精神活动等生理作用[1，7]，HVA、DOPAC是DA的主要代谢产物[1]。DA能神经元主要位于黑质纹状体多巴胺通路，该神经环路有二：直接通路和间接通路，作用相反[8]。直接通路中黑质致密部合成DA，与D1受体(多巴胺受体亚型)结合，Gs(兴奋性G蛋白)介导，激活AC(腺苷酸环化酶)，兴奋运动；间接通路中黑质合成的DA与D2受体结合，Gi(抑制性G蛋白)介导，抑制AC，抑制运动[7-8]。分布在DA神经元胞体-树突上的D2受体作为DA自身受体，负反馈调节DA神经元的放电活动；分布在DA神经元末梢的D2受体成为突触前DA受体，导致DA合成的限速酶TH(酪氨酸羟化酶)磷酸化受抑制，DA合成减少[7]。

关于DA在TS模型中的变化报道不一[9-10]。实验中模型鼠脑纹状体中DA含量与空白组比较无明显变化，支持TS发病是突触后受体超敏感的功能性改变。泻青汤组DA含量较模型组下降，提示泻青汤可能兴奋间接通路，促使内源性DA与突触前DA受体结合，启动负反馈调节，减少神经元胞体DA合成，对抗突触后超敏感的受体。泻青汤组DA含量较泰必利组下降，泰必利组DA含量较模型组无明显变化，提示DA受体阻滞剂泰必利与泻青汤可能从不同的环节干预TS，推测泰必利可能兴奋间接通路中分布在DA神经元胞体-树突上的D2受体，抑制DA神经元电活动，从而发挥抗抽动作用。上述关于药物与DA受体相互作用的推论，需在下一步的实验中，通过放射配体结合、自显影技术进一步证实。模型组与空白组比较，DA的代谢产物之一HVA在纹状体中的含量无明显变化。DA代谢产物DOPAC在泻青汤组下降，与泻青汤组DA的变化一致，与文献报道的模型鼠脑纹状体中递质变化趋势一致[9，11]。泻青汤组DA含量较六君子汤组下降，较健脾止动汤组变化不明显，提示泻青汤为健脾止动汤的主要作用组分。健脾止动汤加入六君子汤组分，一为复方中苦寒药物容易损伤小儿娇嫩的脾胃，用六君子汤补益中焦，体现顾护小儿脾胃的思想；二为扶土抑木法的体现；三为根据“见肝之病，知肝传脾，当先实脾”理论，既病防变。

5-HT主要存在于消化道细胞，中枢神经系统含量少，5-HT由前体色氨酸经过酶促反应在5-HT能神经元合成[7]，5-HIAA是5-HT的主要代谢产物[1]。5-HT受体分7类10亚型，其中5-HT1B、5-HT4受体分布在基底神经节等与DA功能相关的脑区，作为自身受体或异种受体，调节中枢5-HT、DA、Ach(乙酰胆碱)等神经递质的释放[7]。实验中六君子汤组5-HIAA含量较泻青汤组升高，5-HT含量较泻青汤组有升高趋势，推测可能为健脾止动汤、六君子汤兴奋5-HT1B受体和5-HT4受体，促进DA、Ach释放，以平衡泻青汤降低DA合成所可能导致的影响。因此，健脾止动汤不是泻青汤和六君子汤的简单相加，不能由泻青汤或六君子汤直接代替。

NE的前体是DA，主要存在于蓝斑的NE能神经元，可能与情绪反应有关[8]。实验中泻青汤组NE含量较泰必利组、六君子汤组降低，可能与其前体DA减少有关。

因此，健脾止动汤的主要作用组分为拆方泻青汤，其抗抽动作用可能与兴奋脑纹状体DA间接通路、降低DA含量有关。

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冬至的文案范文第5篇

关键词：暗纹东方鲀（Takifugu obscurus）；维氏气单胞菌（Aeromonas veronii）；致病性；分离；鉴定

中图分类号：S941.42 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）03-0629-04

2010年10月，江苏某特种水产养殖场养殖的暗纹东方鲀（Takifugu obscurus）发生死亡。病鱼主要表现为腹部极度膨大，红肿，体表及胸鳍、腹鳍和臀鳍残缺，鳍条基部充血、出血。解剖发现腹腔内有大量淡黄色带血的腹水流出；肝脏肿大，呈土黄色，有大小不一的出血斑块；胆囊膨大；肠道无食，充满泡沫状黏液，肠黏膜出血。取症状典型的濒死暗纹东方鲀心脏、肝脏病灶进行细菌分离培养，获得一株优势菌株。本研究通过对分离菌进行形态观察、生理生化试验、16 S rDNA序列分析，初步鉴定该菌为维氏气单胞菌（Aeromonas veronii），命名为NT-HV，同时对其毒力及药物敏感性进行试验，旨在分析该菌的分类地位、致病因素、筛选敏感药物，为有效防治暗纹东方鲀维氏气单胞菌病提供依据。

1 材料与方法

1.1 病料

病料取自江苏某特种水产养殖场，濒死暗纹东方鲀体表出血，鳍条缺失、出血，红肿、突出。解剖后发现，腹腔极度积水，肝脏肿大、出血。

1.2 实验动物

清洁级6周龄成年雄性ICR小鼠，体重（25±2） g，由南通大学实验动物中心提供。暗纹东方鲀购自水产市场，每尾重80～100 g，试验前在持续流水的水泥池（500 L）中驯养2周，证实健康无病后用于试验。试验期间水温控制在25 ℃左右，投喂暗纹东方鲀专用配合饲料。

1.3 试剂

Taq DNA酶和DNA Marker（DL 2000）购自TaKaRa公司；细菌微量生化鉴定管、药敏试纸购于杭州天和微生物试剂有限公司，小量细菌基因组DNA抽提试剂盒购自生工生物工程（上海）股份有限公司（批号SK8255），其他试剂均为分析纯。

1.4 病原分离

选择具有典型症状、濒死的暗纹东方鲀，无菌操作取其心脏、肝脏，大豆酪蛋白琼脂培养基（Tryptose soya agar，TSA）平板划线分离细菌，30 ℃培养24 h，选取优势菌在TSA平板上纯培养，挑取单个菌落进行革兰氏染色，光学显微镜下观察。将分离菌株用斜面保存。

1.5 生化试验

取斜面保藏菌株进行动力试验及微量生化管试验。动力试验用半固体营养琼脂穿刺培养。微量生化管试验按产品使用说明操作。

1.6 溶血活性检测

将分离菌接种至血液琼脂（含7%家兔脱纤血的营养琼脂）培养基，30 ℃培养24 h，观察菌落周围是否出现溶血圈。

1.7 毒力试验

将分离菌接种至胰酪胨大豆肉汤（TSB）培养基，30 ℃ 静置培养36 h，5 000 r/min离心10 min，收集菌体，0.15 mol/L NaCl稀释菌体，用活菌计数法[1]测定菌液浓度，并将菌液稀释为1.8×108、0.9×108、1.8 ×107、0.9×107、1.8 ×106、0.9×106、1.8 ×105、0.9×105 CFU/mL共8个浓度梯度，每个浓度接种6只ICR小鼠（腹腔注射，0.2 mL/只）和10尾健康暗纹东方鲀（鳍背注射，0.2 mL/只），对照组注射等量的无菌生理盐水。连续观察7 d并记录小鼠和暗纹东方鲀的死亡时间和数量。按Reed-Muench法计算分离菌的半数致死量（LD50）。

1.8 16 S rDNA基因序列测定与系统发育学分析

1）PCR模板DNA的制备。将分离菌株接种于TSB培养基，30 ℃ 培养16 h，小量细菌基因组DNA抽提试剂盒提取菌体DNA作为PCR模板。

2）16 S rDNA基因序列的PCR扩增与测序。设计16 S rDNA基因的2条通用引物：27F（正向引物）：5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′；1492R（反向引物）：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′，引物由上海英俊生物技术有限公司合成，-20 ℃保存备用。50 μL反应体系：无菌超纯水36 μL，10×PCR Buffer 5 μL，1.5 mmol/L MgCl2 4 μL，4×dNTPs 1.0 μL，引物各0.5 μL ，2.5 U/μL 的Taq DNA聚合酶1.0 μL，模板DNA 1 μL。PCR反应条件为：95 ℃预变性3 min；94 ℃变性1 min，55 ℃复性1 min，72 ℃延伸2 min，30个循环；72 ℃温育6 min。PCR扩增产物由生工生物工程（上海）股份有限公司进行基因序列测定。

3）16 S rDNA基因序列同源性分析及系统发育树构建。通过NCBI的BLAST检索系统（http：//ncbi.nlm.nih.gov/Blast/）对供试菌株的16 S rDNA基因序列进行同源性分析后，从结果中获取相似的23种气单胞菌菌株16 S rDNA基因序列，并利用Mega 4软件构建系统发育树。

1.9 药敏试验

根据第一批正式转为国家标准的渔药目录[2]，选取复方新诺明、新霉素、氟苯尼考、氧哌嗪青霉素、四环素、强力霉素、羧苄青霉素、氨苄青霉素药敏试纸，按试纸说明进行试验，并用保藏的Escherichia coil BL21作为对照菌，30 ℃培养16 h观察结果。

2 结果与分析

2.1 分离菌的形态及培养特性

光学显微镜下观察，分离菌为革兰氏染色阴性、散在、两端钝圆、无芽孢的小杆菌。经30 ℃培养24 h，菌落在TSA平板上为不透明、表面光滑、略凸、直径3～4 mm、边缘整齐的乳白色菌落；在血液琼脂培养基上（含7%家免脱纤血的营养琼脂）培养24 h呈β-溶血。

2.2 分离菌的生理生化特性

取斜面保藏菌株进行动力试验及微量生化管试验，结果显示该菌具有动力性，不发酵木糖、鼠李糖、山梨醇等，不产硫化氢，尿素试验阴性，半乳糖和枸橼酸盐试验阳性，其他生化特性见表1。通过细菌生化试验，初步确认该菌为维氏气单胞菌，命名为NT-HV。

2.3 毒力试验结果

用不同浓度的分离菌NT-HV菌液分别接种ICR小鼠和健康暗纹东方鲀，小鼠每组6只，暗纹东方鲀每组10尾，接种后观察并记录每组的死亡情况，结果如表2所示。分离菌NT-HV对小鼠和暗纹东方鲀均具毒力。按Reed-Muench法计算该菌对小鼠和暗纹东方鲀的LD50分别为2.26×106 CFU/mL、5.96×104 CFU/mL。小鼠人工感染后主要临床症状为精神萎靡，食欲不振，脚趾、鼻尖出血；解剖症状为腹膜充血，肝脏坏死，肠道臌气，脾肿大。暗纹东方鲀人工感染后主要临床症状为红肿，体表及胸鳍、腹鳍和臀鳍基部充血、出血；解剖发现其肝脏肿大，有大小不一的出血斑块，肠黏膜出血。

2.4 16 S rDNA基因的测定及分析

以菌株NT-HV的基因组DNA为模板，PCR扩增16 S rDNA 片段，测序结果显示克隆片段长1 444 bp。将其基因序列用BLAST进行同源性比较，依据同源性检索结果，选取不同气单胞菌种属的代表株构建系统发育树，其与维氏气单胞菌16 S rDNA基因序列相似性为99%（图3）。因而，从分子水平上进一步证实分离菌株NT-HV为维氏气单胞菌。

2.5 药敏试验结果

药敏试验结果显示氟苯尼考、复方新诺明、新霉素、氧哌嗪青霉素为该菌的敏感药物，四环素、强力霉素、羧苄青霉素、氨苄青霉素对该菌无作用，对照菌E. coil BL21对上述药物均有敏感性。

3 讨论

维氏气单胞菌又称凡隆气单胞菌、维罗纳气单胞菌，1983年美国疾病预防与控制中心为纪念法国微生物学家Veron在弧菌和气单胞菌研究中的贡献而命名。该菌普遍存在于淡水、污水、土壤乃至海水中，其中一部分菌株在微生态环境中正常存在，而另一些菌株具有致病性，主要感染变温动物，如中华绒螯蟹、框镜鲤、中国大鲵、锦鲤、西伯利亚鲟等[3-7]，可引起大量死亡；维氏气单胞菌对恒温动物是一种条件致病菌，但有人认为免疫功能健全者也可被感染[8]，通常患者发生急性腹泻，也可能引起菌血症、脑膜炎和心内膜炎等[9，10]。近年来，日益增多的病例表明维氏气单胞菌已成为一种重要的人-鱼共患致病菌，在食品安全上有重要的研究意义，部分国家已经将其规定为食品安全的检疫对象。

暗纹东方鲀俗称河豚，是具有极高经济价值的特种水产养殖对象，随着暗纹东方鲀人工繁殖、营养及无毒人工养殖等综合养殖技术的不断完善，暗纹东方鲀高密度、集约化养殖规模不断扩大，病害已成为制约该行业发展的主要因素之一。维氏气单胞菌引起的暗纹东方鲀疾病在生产实践中已经出现并在同一养殖场连年发生，造成一定的经济损失。本研究对暗纹东方鲀病变组织进行细菌分离纯化，获得一株致病性维氏气单胞菌，在国内外首次报道暗纹东方鲀相关疾病，为暗纹东方鲀维氏气单胞菌病的防控提供参考。

本研究将分离菌株NT-HV分别人工感染ICR小鼠和健康暗纹东方鲀，引起小鼠和暗纹东方鲀发生死亡，半数致死量都很小，证实分离株具有较强的致病性，这一结果和Sung等[11]报道的对虾的半数致死量相当。通过三个养殖周期的记录分析，每年10月份气温逐渐下降，露天养殖的暗纹东方鲀进入温室，环境变化、鱼体在转运过程中的应激反应等因素是导致疾病发生的原因，在该种疾病的防治过程中应引起重视。

抗菌药物的使用是动物生产和疫病防治的重要措施，但抗菌药物的不科学使用，致使药物残留、环境污染和细菌耐药已经成为一个世界关注的兽医公共卫生问题。本研究药敏试验选取的药物是中国水产养殖中允许使用的常用药物，其中四环类素药物耐药性的产生原因值得关注，通过对养殖现场的调研发现土霉素是该场常用药，这可能是产生耐药性的主要原因之一，同时提示在药物的使用中应注意药物的浓度和合理轮换。虽然本研究选取敏感药物有效控制了暗纹东方鲀的发病，但该菌的耐药性正逐渐形成，应予以高度重视。

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