七夕表达爱

前言：想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗？我们特意为您整理了5篇七夕表达爱范文，相信会为您的写作带来帮助，发现更多的写作思路和灵感。

七夕表达爱范文第1篇

2、心儿为你而沉醉，此生独爱你的美；心儿为你而高飞，尝尽爱情好滋味；心儿为你而劳累，不愿让你太疲惫；心儿

3、七夕节快到了，是每对恋人期盼了一年的日子，也是感情萌芽和释放的绝好日子。很多蠢蠢欲动的心会在这天表白

4、这一生遇上你是我最大的幸福，我的宝贝，你好吗？我想，我除了很想你，还是想你，我很爱很爱你！！！这特别的

5、雨滴会变成咖啡，种子会开出玫瑰，旅行是一种约会，不是没人陪，只怪咖啡喝不醉，雨一碰就碎，只有你依然完

6、悠悠银河人尽望，牛郎织女情满膛。千里鹊桥来相会，葡萄架下诉忠肠。我劝天下有情人，忙碌莫把祝福忘。祝七

7、从见你的第一眼开始，我就发现终于找到我的另一半了！我要给她一生的幸福！从未动摇过！我坚信一生不动摇！

8、给爱一张不老的容颜，让相爱过都终身不变；给爱一个不悔的誓言，让相爱过都彼此思念；给爱一片辽阔的蓝天，

9、再好的东西都有失去的一天。再深的记忆也有淡忘的一天。再爱的人也有远走的一天。再美的梦，也有苏醒的一天

10、人生就像坐火车，爱情停停走走，朋友去去留留，有人中途下车有人半路上车，多少人在你生命列车与你擦肩而过

11、即使有一天，你的步履变得蹒跚，青丝变成白发，红润的脸上爬满了皱纹，但我仍要携着你的手，漫步在夕阳的余

12、我向上天许了一个愿望，希望能把我一天的快乐平均放到你今年生活的每一天，这样，在你今年生活的每一天里都

13、我不会爱你一万年，我会爱你每一天；我不会爱你总浪漫，我会爱你到永远；我不会爱你常新鲜，我会爱你手相挽

14、我愿用上世五百次回眸换来与你插肩而过，我愿用一万年的等待换来与你相守今生！！！

15、爱你的每一刻，心总是为你而跳动。你的每个笑容、你的每一个动作都带着缠绵的爱意。白天黑夜总是为你的情意

16、对你，爱可爱，十分爱；看你，美可美，十分美。庆幸在茫茫人海，遇到光芒四射的你，为我的爱指引了方向。愿

17、若你流泪，湿的是我的脸，若你难过，苦的是我的心，若你开心，幸福快乐属你我！

18、千里相思信息牵，你我恩爱复年年；比翼双飞共连理，不羡鸳鸯不羡仙。

19、我用那 K歌之王 的歌声唱着 你是未来 ，我 那么爱你为什么 ？原来是 我不够爱你 ，请让我继续 爱下

20、想你的心就像是蛀牙，时不时的想你，时不时的疼。我疼着，却舍不得从心里拔去对你的思念，宁愿就这么疼着。

21、也许我不太会讨你欢心，可是我真的很用心。也许我不太懂得浪漫，可是我却从不给你任何羁绊。也许我对你的爱

22、可爱的你，偷走了我的情，盗走了我的心，我决定告上法庭，该判你什么罪呢？法官翻遍所有的犯罪和案例，最后

23、就算时间停止变换，我仍不能和你分散；就算海水不再蔚蓝，我仍不能和你分开。爱你的心，永不摇摆。哪怕花草

24、岁岁年年月东升，牛郎伴着织女星，万千里路心图腾，郎耕女织为相逢，期盼花好月圆夜，遥寄银河诉衷情，沉舟

25、牛郎钞票没几个，房子堪称是草窝，时而少吃又没喝，织女依然会执着，真爱千古来传说，七夕心情多快乐，学习

26、流不尽的是甜蜜的泪，唱不够的是爱恋的歌，品不够的相爱的酒，看不够的是你的美。七夕节，酒不醉人人自醉，

27、君可见银河之水隔情侣，绵绵情思似江水；君可见鹊桥两岸照相思，牛郎织女长相守；人生得意需爱情，莫使七夕

28、爱需要时间，一点点成长；爱需要空间，一点点距离。爱是找到一个平衡点，紧相拥，但又能喘得过气；在一起，

29、七夕，几许相思泪；七夕，佳人心相随。七夕，天地唱团圆，七夕，爱情是最美，祝天下有情之人把手牵，无情之

30、天上牛郎会织女，地上七夕又一年。喜鹊搭桥星满天，真情总被相思扰。眼前若有珍惜人，切莫错过悔终生。有情

31、七夕到了，送你份精美礼品：一条七 喜 短信，祝你心喜情喜事喜业喜生活喜感情喜一切都喜，笑如晨曦，乐如

32、佳节又到，短信一条，祝工作顺利，快乐每秒，开心常笑，心情愉快身体好，大把大把赚钞票，没爱的爱情快来到

33、这是一条王母娘娘赐予的短信，凡是读到它的人将终生幸福，恋爱中的情侣将一生相爱，单身男女将遇美满爱情，

34、我把问候准备好，它却给风吹去；我把祝福准备好，它却被水冲走；今天为了把祝愿顺利给你，我把它交给了牛郎

35、七夕了，愿有情人的给爱情加密，情感保鲜，永远幸福；没情人的，积极进取，奋发图强，早日甜蜜，祝天下痴情

36、七夕不偷懒，爱你是必然，吻吻你的脸，投掷感情弹，悄悄把手牵，释放浪漫烟，爱意来侵犯，霸占你心田，七夕

37、假如真的有鹊桥。我要跟你走到桥的尽头，然后把桥拆了，毫不让你走。愿意吗？

38、点点飞星传情，片片纤云弄巧，脉脉月华如练，悠悠又见鹊桥。天淡银河垂地，相思无计回避。纵然千山万里，寄

39、天边漂浮的是白云，人间普撒的是关爱；鹊桥相约的是情侣，树下共度的是恋人；有你，有我，就有真爱，美丽的

40、鹊桥是银河的传奇，你是我心中的传奇。浪漫缘分是上天的安排，爱情神话是永恒的未来。许多的奇迹只有相信才

41、喜悦是因为你，悲伤也是因为你。无论黑夜白昼，思念里从未忘却的就是你。你掌管着我世界的美丽，这一生爱的

42、七夕将至，送你一支七色花：红色是吉祥，蓝色是如意，绿色是生机，黄色是幸运，橙色是甜蜜，粉色是快乐，紫

43、做你自己，说出你的感受。因为那些对你重要的人不会介意，而那些介意的人对你并不重要。

44、花儿有个希望，希望天空给它阳光；白云有个希望，希望风带它一起飞翔；蜜蜂有个希望，希望四季都有花香；我

45、红色花儿表吉祥，橙色花儿表甜蜜，黄色花儿表幸运，绿色花儿表生机，青色花儿表幸福，蓝色花儿表如意，紫色

46、七夕老公准则：收入全部上交，家务主动承包，事事请示汇报，处处去向明了，应酬统统推掉，加班全部取消，礼

47、七夕来临之际，送你一棵枝繁叶茂的爱情树，上面结满开心果幸运梅富贵枣温馨李幸福桃美满梨兴旺菊快乐糖吉祥

48、你的照片放在我的办公桌上，清晨看着你，上午看着你，中午看着你，下午看着你，傍晚看着你，晚上看着你。咕

七夕表达爱范文第2篇

关键词 大肠癌；病理学；外科；PD-ECGF；免疫组织化学；巨噬细胞

中图分类号：R574 文献标识码：A 文章编号：1005-0515（2013）4-011-03

目前研究认为血小板源内皮细胞生长因子（PD-ECGF）是内皮细胞分裂素，参与血管生成活力[1]。国外文献对PD-ECGF在乳癌、胃癌、宫颈癌等有相关报道，但对结肠癌的研究甚少[2]。国内尚无对PD-ECGF的研究报告。本研究选择86例进展期大肠癌病例，采用免疫组化方法，探讨PD-ECGF的产生及其与血管新生、肿瘤转移的关系。

资料和方法

1、标本：取自1998年1月至2001年1月，在施行大肠癌根治术的病人中选择86例进展期大肠癌，标本经病理证实肿瘤浸润深度均至肠壁固有肌层（pm）或浆膜下肌层（sm）。

2、试剂：免疫组化染色试剂盒、抗PD-ECGF单克隆抗体、抗CD31单克隆抗体、抗CD68单克隆抗体均购自美国DAKO公司。

3、方法：PD-ECGF免疫组化染色：将手术切除的大肠癌标本用10%福尔马林固定的石蜡标本制成3um的连续切片，在微波炉内加热5分钟2次（500W）以使抗原复活，用生物素阻断试剂盒以阻断内源性生物素活性，用3%牛奶表层物孵化标本阻断非特异性反应，稀释200倍抗PD-ECGF单克隆抗体孵化标本在4°下充分反应一夜，次日用PBS缓冲液冲洗标本3分钟3次，滴加PBS稀释100倍的生物素化的抗鼠lgG并在室温下孵化30分钟，PBS冲洗，3分钟3次。PBS液冲洗，PAB显影，蒸馏水漂洗，苏木素反染固定，封片。CD31和CD68免疫组化染色过程同上。

4、免疫组织化学评估：

按照免疫组织化学评价PD-ECGF和CD31表达用计算机影像分析系统（Olympus自动解析装置SP500）进行评价，将病人分成PD-ECGF高表达组和低表达组，高血管密度组和低血管密度组。为表达PD-ECGF特征，即为探讨间质内什么细胞分泌产生PD-ECGF，用人体巨噬细胞标记物CD68抗体对连续切片进行免疫染色。

5、统计与分析：患者临床病理特点与PD-ECGF表达及血管计数相关性用X2检验。生存曲线按Kaplan-meier方法计算并用Wiloxon检验。

结果：

1、PD-ECGF与CD68免疫组织化学染色

86例大肠癌标本中，除了2例癌细胞中有PD-ECGF染色以外，癌细胞中未发现PD-ECGF染色。正常粘膜细胞中亦未发现PD-ECGF染色。PD-ECGF染色阳性细胞主要存在于肿瘤间质组织内。对连续切片进行CD68免疫组化染色，结果发现PD-ECGF阳性细胞主要存在于肿瘤间质内的巨噬细胞内，其中高PD-ECGF表达56例（65.1%），低表达30例（34.9%）。

2、CD31免疫组织化学染色

CD31单克隆抗体用于肿瘤间质血管生成状况研究。其结果高血管密度组31例（36.0%），低血管密度组55例（64.0%）。

3、PD-ECGF表达与临床背景和临床病理学特点的关系。

PD-ECGF表达与病人年龄、性别、肿瘤部位、组织分化程度、浸润深度、淋巴管浸润无关（P>0.05），与淋巴结转移呈逆相关（P

4、PD-ECGF表达与血行转移及5年生存率的关系。本组高PD-ECGF表达与低PD-ECGF表达相比具有低血行转移发生率及良好的生存率（P

5、血管密度与PD-ECGF表达及临床病理之间的关系。

86例进展期大肠癌PD-ECGF表达与血管密度无关。血管密度与浸润深度、淋巴管浸润、静脉浸润及淋巴结转移无特殊关系（见表2）。血管密度与血行转移无特殊关系（见图2）。

讨论：

国外文献报道依肿瘤种类不同，PD-ECGF表达亦不相同。在乳癌、膀胱癌、卵巢癌、胃癌、食管癌、肺癌和胰腺癌、PD-ECGF染色阳性的细胞存在于癌肿细胞中[3]。Takebayashi等在肠癌的研究中发现强PD-ECGF表达在许多肿瘤细胞的细胞质中，也发现在巨噬细胞和肿瘤间质组织的成纤维细胞中[4]。在我们的研究中，强PD-ECGF表达被发现存在于肿瘤间质的基质细胞中，同一标本的CD68免疫染色证实是巨噬细胞。我们得出的结论是进展期大肠癌间质内浸润的巨噬细胞分泌产生PD-ECGF而不是癌细胞分泌产生PD-ECGF。这与Takehashi在结肠癌和胃癌的研究结果基本相同。

据国外文献报道[5]PD-ECGF在乳癌、结肠癌、胃癌、卵巢癌、子宫内膜癌及宫颈癌与微血管密度相关，表明PD-ECGF对肿瘤的脉管系统和肿瘤血管发生的形成及发展起重要作用。PD-ECGF表达可做为大肠癌和胃癌预后不良的判定指标。这种与预后的相关性与肿瘤血管发生的作用有关。在大肠癌病人的研究中发现，PD-ECGF表达与肿瘤大小、浸润程度、淋巴结转移、淋巴管浸润和静脉浸润有密切关系，高PD-ECGF水平与广泛的肿瘤血管新生密切相关。然而，经仔细分析该研究报道，发现许多早期癌病例，即限于粘膜和粘膜下层的早期癌被包括在内。众所周知，早期癌有良好的预后，在日本东京大学肛肠外科武滕彻一郎教授对早期大肠癌的研究中发现PD-ECGF表达在早期大肠癌中很低。因此，在本次研究中为排除早期癌病例去证实PD-ECGF的精确作用与血管发生及预后的关系，将研究对象集中在浸润固有肌层和浆膜下肌层的进展期癌，以判定PD-ECGF表达对大肠癌生物学特性及预后影响的正确关系。本研究的统计学分析结果表明PD-ECGF表达与新生血管密度、浸润深度、淋巴管及静脉浸润之间无特殊关系，与淋巴结转移及血行转移呈逆相关，即这些高PD-ECGF表达的病例与低PD-ECGF表达的病例相比，具有低的淋巴结及血液转移发生率，具有相对高的存活率及较好的临床预后。这与以前的研究结论不同。

从本研究结果可以看出巨噬细胞浸润肿瘤细胞的间质并分泌产生PD-ECGF，PD-ECGF表达与血管新生无特殊关系，但其表达与淋巴结及血行转移呈逆相关，并具有较好的临床预后。目前PD-ECGF在大肠癌中的作用机制尚不清楚，从我们的研究结果推断肿瘤间质中的巨噬细胞分泌产生PD-ECGF可能是抗肿瘤免疫反应的一部分。

巨噬细胞浸润肿瘤间质和炎性组织，其重要作用在于免疫反应。巨噬细胞是对抗原刺激反应较强的辅细胞，由抗原诱导的辅助T细胞及缺氧介导其活性，并参与激活细胞毒性反应T淋巴细胞（CTL）的免疫过程。在肿瘤组织中，肿瘤特定的和相关抗原刺激传递细胞免疫反应，巨噬细胞被淋巴细胞因子激活并很可能在这个过程中发挥作用。巨噬细胞浸润到肿瘤细胞间质的可能过程是被肿瘤分泌的化学激活作用产物（chemokine）刺激的结果。尽管没有报道关于大肠癌化学激活作用，有报道在肺癌组织中产生的MIP-1α，是一种C-C化学激活因子（chemokine）为化学诱导剂和单核细胞活化剂。虽然巨噬细胞能浸润至肿瘤间质，但他们并不都处于激活状态。最近的研究[6]表明同时活动转移的存在与沿大肠癌浸润边界分布的巨噬细胞的数目呈逆相关。在另外的研究中[7]，在肿瘤间质的巨噬细胞表示不显著的B7-1（CD80）和B7-2（CD86）表达，分子均被T淋巴细胞激活，表明肿瘤间质内浸润的巨噬细胞处在非激活状态。如果巨噬细胞被癌细胞分泌的化学介质激活则迅速释放血管新生因子诱导肿瘤血管新生的发生和发展，随着肿瘤的浸润进展，PD-ECGF高达表的肿瘤与PD-ECGF低表达的肿瘤相比显示具有较高的肿瘤新生血管密度，并且预后不良。本研究中，具有高PD-ECGF表达的大肠癌与低PD-ECGF表达的大肠癌比较，高表达者具有大量巨噬细胞浸润于间质中，具有较好的预后。表明在抗癌免疫反应的发展过程中巨噬细胞起关键作用，进展期大肠癌PD-ECGF表达可能是肿瘤免疫诱导的结果。

肿瘤间质浸润的巨噬细胞其精确作用如何？是否有PD-ECGF阳性和阴性巨噬细胞而且在功能上发挥不同作用，均有待于进一步研究。

参考文献

1 Griffithls L et al.Cancer Res 1997：57 0-572.

2.Takahashi Y，et al.PD-CEGF in human colon Cancer angiogenesis role of infiltrating cells[J].Natl Cancer Tnst 1996：88（16）1146-51.

3.Takebayashi Y，Yamada K，et al.The activity and expression of thymidire phosphorylase in human solid tumours.Eur J comcer 1996：32A（7）1277-32.

4.Takebayashi Y，et al.Expression of thymidine phosphorylase in human gastric carcinoma Jpn [J] Cancer Res 1996：87（3）288-95.

5.Toi M，et al.Expression of PD-CEGF/thymidine phosphorylase in human breast cancer. Int[J] cancer 1995：64（2）79-82.

6.Moghaddam A，et al.Thymidine phosphorylase is angiogenic and promotes tumor growth . Proc Natl Acad Sci USA 1995：92（4）998-1002.

7.Reynolds K，et al.Association of ovanan malignancy with expression of PD-CEGF. [J] Natl Cancer Inst 1994：86（16）1234-8.

七夕表达爱范文第3篇

【摘要】 目的 探讨RhoA基因与肝细胞癌的发生、发展和侵袭、转移的关系。方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）在半定量水平检测42例肝细胞癌及其相对应的癌旁肝组织中RhoA mRNA的表达，同时采用PCR产物单链构象多态性（PCR-SSCP）银染法检测RhoA基因的突变情况。结果 本组42例肝癌组织中RhoA mRNA光密度相对值明显高于癌旁肝组织（P

【关键词】 肝癌；RhoA；基因表达；RT-PCR

【Abstract】 Objective To investigate the expression of RhoA gene in hepatocellular carcinoma and to evaluate the relationship between RhoA gene expression and invasion of hepatocellular carcinoma.Methods The mRNA expression of RhoA gene was examined by RT-PCR in 42 cases of hepatocellular carcinoma and adjacent non-cancerous tissue.In addition，the mutation of RhoA gene was examined by PCR-SSCP.Results The opacity density (OD) of RhoA mRNA expression in hepatocellular carcinoma tissues was significantly higher than that in adjacent non-cancerous tissues (P

【Key words】 hepatocellular carcinoma；RhoA；gene expression；RT-PCR

原发性肝癌发生率高，手术切除是目前最主要的治疗方法。尽管随着影像诊断和外科技术的进步，尤其是肝移植在肝癌中的运用，肝癌的预后已经有所改善，但肝脏的特殊解剖结构和功能决定着肝癌术后复发率高，术后复发已成为影响患者预后的主要问题。肝癌侵袭转移是主要的影响因素之一，深入研究肝癌侵袭转移机制对于改善肝癌患者的总体预后有重要作用。Rho蛋白和肿瘤发生有密切的关系，参与肿瘤的浸润和转移过程。Rho家族属于Ras超家族，是重要的细胞内信号分子，在细胞的许多基础生命活动中起关键的作用［1］。目前研究证实，Rho蛋白特别是RhoA在肿瘤发生、发展中起重要作用，在结肠癌、乳腺癌、肺癌、头颈癌等均报道有RhoA表达的异常增高［2］。本研究利用RT-PCR技术及分子定量成像系统分析42例肝细胞肝癌（HCC）病人的肝癌组织及癌旁肝组织中RhoA mRNA的表达，并探讨其临床意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂及仪器 RT-PCR试剂盒购自MBI公司；dNTP及DNAmarker购自Promega公司；琼脂糖、TRIzol试剂及DEPC购于Gibco公司。凝胶成像系统购自美国Genesis公司；UV-3000型紫外分析仪购自上海天能科技有限公司；PE-2400TMPCR仪购自美国Perkin。

1.1.2 标本来源 42例患者的原发性肝癌组织及相对应的癌旁肝组织来自第四军医大学附属第一医院2004年8月～2005年3月的新鲜手术标本，离体后30min内分装保存于液氮罐中，所有病例均附癌旁肝组织作为对照，分别伴有慢性炎症、纤维化和肝硬化，全部标本均经病理科医师切片确诊。

1.2 方法

1.2.1 扩增引物设计 以GenBank中人RhoA基因全长序列为模板，按引物设计原则予以设计，采用Primer premier 5.0软件设计，其序列如下（U，D分别表示上游和下游引物）：RhoA U1 5’CTGGTGATTGTTGTTGGTGATGG3’，U2 5’GATTCGTTGCCTGAGCAATG3’，D 5’GCGATCATAATCTT-CCTGCC3’。Bactin引物序列：上游引物，5’CGGGAAATC-GTGAT3’；下游引物，5’GAACTTTGGGGG ATGCTCGC3’。其中U1、U2为RhoA上游引物，分别用于定量RT-PCR和PCR-SSCP，D为下游引物。RhoA产物分别为183bp和221bp。

1.2.2 总RNA提取 组织总RNA的抽提取：0.5g组织块，加入Trizol试剂1ml，在电动玻璃匀浆器中，充分匀浆。将全部匀浆液转入1ml离心管中，加0.25ml氯仿，充分振荡混匀，冰浴15min。低温 13000r/min离心15min。小心吸取上层水相至另一1.5ml离心管中，注意不要吸到蛋白层或有机相，加等体积异丙醇，摇匀，室温放置10min，低温13000r/min离心15min，沉淀RNA。加70%酒精漂洗沉淀，5000r/min，离心10min，小心弃去酒精，空气中干燥10min。经电泳证实有两条明显的18S及28S条带，用紫外可见分光光度仪检测RNA的纯度及含量。

1.2.3 RT-PCR扩增RhoA mRNA及鉴定 cDNA制备：应用逆转录试剂盒，总RNA投入量为2μg，使用随机引物。第一链cDNA合成后终体积10μm，具体方法按说明操作。RhoA与Bactin反应同管进行，反应终体积为50μl，反应条件为94℃ 30s，57℃ 30s，72℃ 40s，共25个循环。PCR产物在含0.5g/ml溴化乙锭的1.0%琼脂糖凝胶上电泳，应用凝胶成像系统对条带进行扫描分析。利用分析软件计算并比较每一对样品中RhoA mRNA与B-actin的光密度的相对比值，从而获得每对样品中肝癌组织及癌旁肝组织RhoA mRNA表达的相对含量。

1.2.4 PCR-SSCP分析 PCR反应试剂基本同前，仍用cDNA模板，改用U2和D引物扩增RhoA基因，反应条件为94℃ 1min，57℃ 2min，72℃ 1min，共扩增30个循环。扩增产物变性后行聚丙烯酰胺凝胶电泳，观察泳动条带是否异位以判断突变情况。

1.3 统计学方法 所有数据以均数±标准差（x±s）表示，用SPSS10.0进行分析，组间比较用Student’s t检验，P

2 结果

将各样品RT-PCR产物经分子定量成像系统分析，以Bactin条带为内参照，其光密度值设定为1.000，计算RhoA mRNA表达的相对丰度。肝癌组织中RhoA mRNA光密度相对值为（0.276±0.069）；癌旁肝组织中为（0.137±0.058）；两者差异有非常显著性（P

转贴于

为探讨RhoA基因突变在肝癌发生发展中可能的作用，我们采用了PCR-SSCP的方法检测RhoA基因中结构改变可能影响RhoA功能的总长为221bp的片段，结果在检测的42例肝癌组织中均未发现异常泳动条带，提示肝癌的发生发展与RhoA基因突变无关。

3 讨论

Rho家族属小G蛋白超家族成员，有GDP结合的活性态和GTP结合的非活性态，两种活性形式之间的转换使他们能够发挥一种类似“分子开关”的作用。活性态的小G蛋白能激活下游的信号传导通路，行使其功能。与Ras基因突变导致其持续激活相似，Rho基因若发生结构改变，使GTP水解发生障碍，而处于持续GTP结合的激活状态，可致其多种功能增强，称为组成型激活突变体，如RhoA(G14V)、RhA(Q63L)等。

Rho家族蛋白参与调节了细胞的多种生命过程，包括肌动蛋白的细胞骨架重组、细胞黏附、细胞运动、细胞周期进展、细胞分裂以及基因转录等，Rho家族分子功能的多样性与其下游效应分子的多样性有关，以RhoA为例，已经发现的RhoA的下游效应分子包括ROCK、PKN、Citron、PI-3K等，这些分子介导了RhoA的作用［3］。越来越多的证据表明，Rho家族蛋白与肿瘤发生发展的各个方面均有联系，包括肿瘤的生长和增殖、侵袭和转移、细胞周期进展、细胞凋亡、肿瘤新生血管的形成等。近年来研究发现，Rho家族成员在多种肿瘤组织中表达增加并和肿瘤恶性程度相关，即在恶性程度高的肿瘤表达更多，提示其在肿瘤发生和转移中具有重要作用。

尽管Rho家族与肿瘤相关的基础研究已有大量报道，但Rho家族与临床肿瘤发生发展关系的研究仍然较少。已有的研究发现，RhoA和RhoB在乳腺癌中的表达增高，且与乳腺癌的恶性表型相关；RhoC主要与有侵袭能力的炎性乳癌有关；Rac1、Rac3和Cdc42在乳腺癌中也有高表达，但与乳腺癌的分期和增殖无关。另外还发现，RhoA在精原细胞瘤和上尿道肿瘤中的转录水平升高，RhoA和Rac1b在大肠癌中的表达升高，Rac2在头颈部肿瘤中和RhoC在胰腺癌中的表达也是升高的［4］。这些研究提示，尽管Rho家族分子的同源性较高，但它们在不同的肿瘤中可能起不同的作用。Fritz在对乳腺肿瘤的研究中发现，乳腺癌组织较正常组织高表达RhoA，RhoB，Racl，Cdc42蛋白，且RhoA，RhoB，RhoC蛋白表达水平与组织学分级及增殖指数呈明显正相关；而Rho mRNA的表达与正常组织无显著差异［5］。另外，正常乳腺组织、囊性变、非典型增生、导管原位癌均不表达RhoC，其表达与肿瘤组织学分级显著相关。有研究表明乳腺癌组织中RhoA蛋白表达增加，且和乳腺癌的WHO分级相关，即第三级乳癌表达RhoA蛋白较第一级乳癌显著增多。Kamai T用RT-PCR方法检测了精细胞瘤中RhoA的mRNA表达水平，发现其表达和肿瘤分期相关，恶性程度越高RhoA表达水平也越高，笔者进一步检测精细胞瘤中RhoA的一种效应器Rho激酶ROCK的mRNA表达水平，也发现肿瘤组织中ROCK表达明显高于相应正常组织，而且RhoA和ROCK的mRNA表达水平呈正相关。该研究提示RhoA基因和精细胞瘤发生发展有关，且可能通过ROCK起作用［6］。

RhoA与肝癌转移的关系，目前尚未见报道。本研究检测了肝癌组织中RhoA mRNA的表达，发现有门静脉癌栓者RhoA mRNA表达明显高于无癌栓者（P

结果表明，RhoA在肝癌组织中高表达，肝癌组织RhoA表达高于相应癌旁肝组织，高侵袭肝癌组织表达高于低侵袭性肝癌组织，二者差别显著。因此Rho家族成员可能成为一种新的肿瘤标志物，用于判断良恶性及判断肿瘤转移能力和估计预后，具有潜在的重要临床价值。

1 Mori K， Hata M， Neya S， et al. Common semiopen conformations of Mg2+-free Ras，Rho，Rab，Arf，and Ran proteins combined with GDP and their similarity with GEF-bound forms.J Am Chem Soc，2005，127(43)：15127-15137.

2 Hall A. Rho GTPases and the control of cell behaviour. Biochem Soc Trans，2005，33(5)：891-895.

3 Fujisawa K， Madaule P， Ishizaki T， et al. Different regions of Rho determine Rho-selective binding of different classes of Rho target molecules. J Biol Chem，1998，273(30)：18943-18949.

4 Matos P， Skaug J， Marques B， et al. Small GTPase Racl：structure，localization，and expression of the human gene. Biochem Biophys Res Commun，2000，277(3)：741-751.

七夕表达爱范文第4篇

【摘要】 目的：探讨Ezrin在大肠癌中的表达特点及其与临床病理参数的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测100例大肠癌组织及11例癌旁正常黏膜中Ezrin的表达情况。结果：Ezrin阳性表达率在大肠正常粘膜、大肠癌组织中分别为36.4%、75%，差异有统计学意义(P

【关键词】 肠肿瘤;肿瘤转移;免疫组织化学;膜细胞骨架连接蛋白

Ezrin，a member of the ezrinradixinmoesin(ERM)family in speciesconserved protein，is a membrane cytoskeleton linker and is involved in cellular functions，including epithelial cell morphogenesis and adhesion[1].It is encode by vil2(6q25.2～q26)and its functional domain is FERM domain.The inactivation of Ezrin causes a massive cell retraction and leads to the destruction of both cellcell and cellsubstrate adhesion，whereas the overexpression of Ezrin in insect cells results in enhanced cell adhesion[2，3].The expression of Ezrin in a series of patients with colorectal carcinoma was studied，using immunohistochemistry to elucidate its functional importance and clinical significance.

1 Materials and methods

1.1 Materials

Between March 2005 and May 2006，100 colorectal carcinoma samples were obtained from the archives of the First Affiliated Hospital，Hebei North University Zhangjiakou，which were all surgically resected without chemotherapy and radiotherapy before operation.There were 41 men(41%)and 59 women(59%)with a median age of 58.3 years(range，30～78 years).Fortysix patients with colon tumors and fiftyfour patients in rectum.Fortyeight patients(48%)had histologically confirmed lymph node metastasis，whereas the remaining 52 patients(52%)were found to have no clinical or histopathologic evidence of lymph node involvement.According to current World Health Organization classification，52 patients were well differentiated，26 patients were moderately differentiated，11 patients were poorly differentiated and 11 patients were Mucous.Immunohistochemistry.

1.2 Methods

The samples were fixed in 10% neutrally buffered formalin and paraffin embedded，processed and stained with HE.All H&E sections were reviewed to confirm the diagosis.One paraffin block with the maximum bulk of tumor was chosen from each case for immunohistochemical studies.All slides showed the non neoplastic colorectal tissuecarcinoma junction.Serial sections of 4 μm thickness were cut from the paraffin blocks.The sections were deparaffinized with xylene and rehydrated with ethanol.Nonenzymatic antigen retrieval was performed on each slide and washed with phosphatebuffered saline(PBS).Heat induced epitope retrieval techniques were used for antigen retrieval as follow:citrate buffer(pH6.0)and a water bath at 95～98 ℃ for 30 min.Sections were incubated for 10 min in 3% hydrogen peroxide to quench endogenous tissue peroxidase.The sections were immunostained for mono clonal antibody against Ezrin(mouse mAbIgG1，3C12;Lab Vision Neomarker Corp)at a dilution of 1:50 and incubated at 4 ℃ whole night.This antibody didnt crossreact with other ERM family proteins.After washing with phosphatebuffered saline，a secondary antibody was used in 37℃ for 30min.And also after washing with phosphatebuffered saline，SP were used in 37℃ for 30 min.Then，DAB was used.

1.3 Evaluation of immunohistochemical staining

Histological and immunohistochemical evaluation was performed by one pathologist.Sometimes，Ezrin expression was located in cytoplasm，and the other was in membrane [4].Each stained slide was assessed and given a score，in which the intensity of the staining(no staining=0，weak staining=1，medium staining=2，and strong staining=3)and the percent of stained cells(0%=0，1%～10%=1，11%～50%=2，50%～74%=3 and greater than 75%=4)were multiplied.With the applied system，the maxi mum score≥3 was positive staining，the maximum score

1.4 Statistical analysis

SPSS for Windows version 11.0 was used for statistical analysis.The correlateion of each score according to the intensity and percentage of labeled cells or intercellular substance with relevant clinical data were statistically analyzed.Generally，P

2 Results

2.1 Ezrin expression in adjacent normal colorectal mucosa and colorectal carcinoma

Ezrin staining was mainly located in cytoplasm of tumor cells in colorectal carcinoma.The abnomal positive expressing rates of Ezrin in groups of colorectal adjacent normal mucosa and colorectal carcinoma were separately 36.4% and 75%，the differences had significant statistical significance(P

Table 1 The expression of Ezrin in colorectal carcinoma and normalcolorectal mucosa n(%)

GroupnEzrin expression+-P valueCC10075(75.0)25(25.0)NM114(36.4)7(63.6)

CC：colorectal carcinoma，NM：normalcolorectal mucosa

2.2 Ezrin expression in metastatic group and nonmetastatic group of colorectal carcinoma

The percentage of Ezrin expression in metastatic group was 89.6%(43/48)，and the percentage in nonmetastatic group was 61.5%(32/52).Respectively so the expression rate in metastatic group was significant higher than that in nonmetastatic group(P

2.3 Correlation between Ezrin expression and clinical pathological characteristics

The percentage of expression in colorectal carcinoma was compared in patients age，sexal，tumor location and degree of differentiation.Statistical significance was not observed(P>0.05;Table 2)　Table 2 The ralationship between clinical pathological parameters of CC and Ezrin expression n

3 Discussion

To metastasize successfully into a clinically relevant mass，tumor cells must overcome a series of challenges.These include invasion into the surrounding tissue，extravasation into the lymphovascular space，arriving at a distant side，and intravasation into a new environment.This study aims were to assess staining patterns in metastatic and nonmetastatic colorectal carcinoma.At the same time，to investigate possible correlations between Ezrin expression in colorectal carcinoma and histopathological and prognostic data were also important in this study.

The expression rate of Ezrin was significantly higher in colorectal carcinoma tissues than that in colorectal normal mucosa，and significantly correlated with lymph node metastasis.The higher expression of Ezrin contributed to the metastasis of colorectal carcinoma，and might be useful for colorectal carcinoma prognosis estimation.The results showed gradual increase in Ezrin expression following tumor carcinogenesis，progression and metastasis.No significant correlation was found between Ezrin expression with patients age，sexal，location and degree of differentiation.

Ezrin is a member of ERM(Ezrinradixinmoesin)family.The proteins Ezrin，moesin，and radixin act as linkers between the plasma membrane and the actin cytoskeleton.The carboxyl termini of Ezrin binds to actin filaments，whereas the amino termini binds to plasma membranes via a binding partner，such as CD43，CD44 or ICAM1.CD44 was regarded to be closely related to tumor metastasis，especially in SCRC [5].CD44 and Ezrin and their respective complex have properties suggesting that they may be important in the process of tumorendothelium interactions，cell migrations，cell adhesion，tumor progression and metastasis.One of the functions of ezrin is to participate in the formation of cellsurface complexes，such as Ecadherin，integrin that mediates cellcell and cellextracellular matrix attachments [69].

In conclusion，Ezrin may play an important role in the carcinogenesis，progression and metastasis of colorectal carcinoma.Ezrin protein has hopes to become a new therapy target to evaluate the tumor prognosis.

参考文献

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七夕表达爱范文第5篇

［目的］探讨口腔鳞状细胞癌（OSCC）发生、发展过程中基质金属蛋白酶9（MMP9）对微血管生成的意义。［方法］采用免疫组化SP法对65例OSCC、40例非典型增生、22例正常口腔黏膜进行MMP9、CD34免疫组化染色。检测OSCC、非典型增生、正常口腔黏膜中MMP9的表达和微血管密度（MVD），并分析MMP9的表达与MVD之间，以及它们与OSCC临床病理特征之间的关系。［结果］OSCC组中MMP9的表达与MVD值均高于非典型增生组，在非典型增生组中均高于正常口腔黏膜组；OSCC组、非典型增生组和正常口腔黏膜组中MMP9表达与MVD有正相关趋势；MMP9的表达与肿瘤大小、淋巴结转移密切相关，MVD与淋巴结转移密切相关。［结论］MMP9可能是OSCC的重要促血管生成因子之一。

【关键词】 口腔鳞状细胞癌　免疫组织化学　基质金属蛋白酶9　CD34

Correlation between Expression of Matrix Metalloproteinase9 and Angiogenesis in Oral Squamous Cell Carcinoma

Abstract: ［Purpose］ To study the significance of matrix metalloproteinases9 (MMP9) on micro angiogenesisin carcinogenesis and progression of oral squamous cell carcinoma (OSCC). ［Methods］MMP9 and CD34 were detected by immunohistochemistry SP method in 22 cases of normal oral mucosa， 40 cases of atypical hyperlasia and 65 cases with OSCC. The expression of MMP9 and microvessel density (MVD) were detected in the three groups and the relationship between expression of MMP9 and MVD and its relationship with OSCC clinicpathological characteristics were reviewed.［Results］ The expression of MMP9 and the level of MVD in OSCC were significantly higher than that in atypical hyperlasia. The expression of MMP9 and the level of MVD in the group of atypical hyperlasia were significantly higher than that in normal oral mucosa. The expression of MMP9 were closely related with MVD in the tumor group， atypical hyperlasia group and normal oral mucosa group. MMP9 expression in OSCC was significantly associated with lymph node metastasis and tumor size. MVD in OSCC was significantly associated with lymph node metastasis. ［Conclusion］ MMP9 may be one of important factors in angiogenesis ofOSCC.

Key words: oral squamous cell carcinoma; immunohistochemistry; matrix metalloproteinases9; CD34

肿瘤内新生血管的生成是影响肿瘤增殖和转移的重要因素，近年来的研究表明[1]基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases， MMPs）在肿瘤血管生成中有重要作用，明胶酶是MMPs的一个亚类，包括基质金属蛋白酶2（MMP2）和基质金属蛋白酶9（MMP9），其中MMP9与肿瘤血管生成的关系研究较少，研究结果也不一致，有关口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）组织中MMP9与肿瘤血管生成的关系，更少见报道。本研究通过免疫组织化学技术检测口腔鳞状细胞癌组织中MMP9和CD34的表达，并对MMP9的表达与微血管密度（MVD）做定量分析，探讨口腔鳞状细胞癌组织中MMP9对血管生成的作用及其临床意义。

1 材料与方法

1.1 资料来源

本研究所用石蜡包埋组织标本选自安徽医科大学第一附属医院1998年1月至2001年12月的手术患者。口腔鳞状细胞癌患者65例，均为作口腔鳞状细胞癌根治性手术的患者，术前未作放疗或化疗，术后经病理诊断确诊为口腔鳞状细胞癌，男性35例，女性30例，中位年龄45.5岁；肿瘤最大直径≤3cm者35例，>3cm者30例；有淋巴结转移者31例，无淋巴结转移者34例；临床分期为Ⅰ期15例，Ⅱ期28例，Ⅲ期15例，Ⅳ期7例；其中高分化鳞癌18例，中分化鳞癌24例，低分化鳞癌23例。口腔非典型增生病例40例，来自其他口腔疾患手术标本，正常口腔黏膜22例，取自活检标本，均未做过任何治疗。

1.2 方 法

鼠抗人MMP9多克隆抗体和CD34单克隆抗体，免疫组化SP试剂盒及DAB显色试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司。 所有组织均经10%甲醛液固定，常规石蜡包埋， 包埋组织标本作4μm连续切片，免疫组化SP法染色参照试剂说明书进行， MMP9、CD34均采用高温直接煮沸法修复抗原。用已知的阳性切片作阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判定

⑴MMP9以实质细胞胞膜或胞质出现明显的黄色或棕黄色颗粒判断为阳性着色。定量及图像分析采用同济医大千屏影像公司HPLAS1000病理图像分析系统，将切片上的阳性染色信号转为灰度进行分析。

⑵MVD计数，参照Weinder[2]报道的方法进行微血管计数，先在低倍镜（×100）下观察确定血管密度最高处，在（×200）视野下选择3个高血管密度区，计算单位视野（×200）平均血管数。单个内皮细胞或内皮细胞簇，均作为一个血管计数，而直径大于约8个红细胞的血管，有厚肌壁的血管以及硬化区的血管不在计数范围内。

1.4 统计学处理

运用SPSS 10.0统计软件包进行统计分析，采用t检验和F检验。

2 结 果

2.1 MMP9在正常口腔黏膜组织、非典型增生、OSCC中的表达和分布

MMP9阳性细胞胞浆或胞膜呈棕黄色，偶尔可见细胞核着色，阳性颗粒多呈团块状。MMP9在癌组织中于肿瘤细胞(见图1)、增生上皮细胞和间质细胞均有阳性表达，在血管平滑肌细胞，血管内皮细胞上也有明显阳性表达(见图2)，MMP9阳性分布呈异质性，阳性细胞多位于癌巢边缘和管腔周围，其中基底膜附近的肿瘤细胞染色尤为明显。MMP9在非典型增生的表达主要位于增生上皮细胞的胞质中，在间质细胞中偶见染色。MMP9在正常口腔黏膜组织表达微弱，仅见于少数上皮细胞的胞质中。对切片的MMP9染色进行灰度分析，结果显示从正常口腔黏膜，非典型增生到OSCC， MMP9的表达逐渐增高，OSCC组中MMP9表达显著高于非典型增生组织（P

2.2 正常口腔黏膜组织、非典型增生、OSCC中MVD的分布

CD34标记的微血管呈点状分布，血管内皮细胞膜被染成褐色。肿瘤组织中的微血管形态不规则，部分血管呈现发芽状，血管分布不均匀，在肿瘤的边缘区域最为密集，呈簇状(见图3)。非典型增生组织中微血管形态较规则，但分布不均，血管簇偶见。正常口腔黏膜组织内的微血管形态规则，分布均匀。OSCC组中MVD显著高于非典型增生组织（P

2.3 OSCC中MMP9表达与OSCC血管生成的关系

OSCC中MMP9表达与MVD显著高于非典型增生组（P

3 讨 论

肿瘤的侵袭和转移是多步骤过程。实验表明[3]肿瘤组织中微血管密度越大，肿瘤细胞进入血循环及淋巴循环的机会越多，淋巴结及邻近脏器转移的机会也增大。MMP9由结缔组织细胞、巨噬细胞或肿瘤细胞分泌，是降解Ⅳ型胶原最主要的酶，在生理情况下维持细胞外基质，在胚胎发育、组织塑形中起着不可替代的作用。在病理情况下，MMP9通过降解细胞外基质成分中的Ⅳ型胶原使得肿瘤细胞突破原发部位正常的基底膜而发生浸润，突破脉管周围的基底膜进入脉管系统，即发生转移。近来研究表明[1，4]，MMP9不仅是降解基底膜和ECM的关键酶，而且在肿瘤间质血管生成中起重要作用。

本研究结果显示从正常口腔黏膜，非典型增生到OSCC，MMP9的表达逐渐增高，在非典型增生MMP9的表达主要位于增生上皮细胞的胞质中，在癌组织中MMP9在肿瘤细胞，增生上皮细胞和间质细胞均有阳性表达，在表达的强度、阳性细胞的种类、数量上均高于非典型增生组，提示MMP9可能在OSCC发生中发挥作用。同时观察到并非所有肿瘤细胞均能表达MMP9，具有MMP9表达能力的肿瘤细胞多位于这部分细胞多位于肿瘤的外周部分和毛细血管淋巴管腔周围，呈片状、灶状分布，提示表达MMP9的细胞具有更强的侵袭能力，符合肿瘤细胞的侵袭规律。在本实验中还观察到，在毛细血管腔和淋巴管腔周围及管腔内部可见聚集成团状并深度着色的癌细胞，可能为迁移到该处的高转移性癌细胞克隆增殖而成。另外表达MMP9的肿瘤细胞附近的血管平滑肌细胞、血管内皮细胞上也有明显阳性表达，提示该区域的血管平滑肌细胞，血管内皮细胞与肿瘤细胞在MMP9的表达上存在着联系，分析结果显示MMP9在瘤径>3cm组中的表达高于瘤径≤3cm组，在有淋巴结转移组中的表达高于无淋巴结转移组，提示MMP9可能是OSCC侵袭和转移的重要促进因素。

本实验中显示从正常组织非典型增生OSCC，组织中的MVD有逐渐增加趋势，非典型增生组中的MVD显著高于正常组，提示细胞在未发生恶性转化之前已有血管生成增多，这一现象是否为OSCC血管生成的启动阶段有待于作进一步研究。Eisma等[5]对头颈部鳞癌研究发现MVD每增加10个，淋巴结转移的危险度就增加1.32倍，在本研究中显示OSCC淋巴结转移组中MVD显著高于无淋巴结转移组，由于在OSCC中发生淋巴结转移的机会远高于血行转移，提示对OSCC原发灶MVD检测有利于作出转移和预后优劣的判断，但是否能作为OSCC的一个独立预后因素尚需要做进一步研究。

大量研究显示MMPs与肿瘤血管生成关系密切，在本实验中我们观察发现MMP9的表达部位与MVD高密度区具有一致性，均位于肿瘤细胞生长活跃的癌巢边缘地区，提示：①肿瘤在局外浸润生长的过程中，新生血管化是同步进行的；②MMP9的表达与肿瘤血管形成有关。在本实验中我们还观察到MMP9不仅在肿瘤细胞和间质细胞中表达，在肿瘤组织的血管内皮细胞上MMP9也有表达，这与MMP9参与肿瘤新生血管形成的观点一致。有研究显示[6]肿瘤的新生血管内皮细胞可以通过分泌MMP9降解周围基质，调节内皮细胞的迁移，使自身的血管条索延长和扩大，也有研究显示[7，8]血管生成因子VEGF在促进肿瘤内新生血管形成的同时，可以通过不同的信号途径，促进MMP9的表达并对TIMP1的表达进行抑制。 这些研究说明MMP9通过多种途径对肿瘤新生血管形成起作用，总体上表现出促进作用。本研究结果表明 OSCC中MMP9的表达显著高于非典型增生，其MVD也显著高于非典型增生 ，MMP9的表达与MVD具有一致性，MMP9与肿瘤新生血管形成关系密切。

本研究结果表明MMP9、新生血管形成与OSCC发生和侵袭转移有密切关系，MMP9可能是OSCC的重要促血管生成因子之一。阻断MMP9的表达，抑制MMP9的活化可能具有抑制OSCC转移和血管生成的双重意义。

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