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转身的微笑

前言:想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗?我们特意为您整理了5篇转身的微笑范文,相信会为您的写作带来帮助,发现更多的写作思路和灵感。

转身的微笑

转身的微笑范文第1篇

一.要善于抓住民生热门话题。

兴趣是最好的老师,我们在及时更新自己的微博的内容时,先要懂得去看看别人都对什么感兴趣的,抓住问题的细节,在采用合适的方法融合到我们的营销中,这样你的网站的内容就会与众不同的,被被人搜索到的机会就会大些,你的营销的目的就达到了,举个来自我们在发广播的时候,加上一个双井号如:#站长百科#。

二.标签设置要适当鲜明

你的微博更新好了之后,下一步需要做的工作就是设置标签。要根据你的微博的内容来设置你的标签,比如说你发的微博是网站推广类的,你就要设置一个推广类的标签,这样的好处是容易被人关注。否则的话,你设置了一个不对的标签或者不合适的标签,别人在浏览你的微博时就不会看到你更新的内容。

三.更新内容要有规律性

你的微博注册好了之后不要一直不去更新,放置一边不去管不去问,同样你的微博一天发了一百条广播,也是不适当的。微博的更新要有规律性,只要我们平均每天发送20条广播就可以了,需要注意的是内容一定要看新颖有看头的。

转身的微笑范文第2篇

但随着市场向纵深发展,不少制造商直接参与并控制分销渠道,掌控终端、渠道扁平化发展趋势、大型商超卖场的迅速崛起使经销商的地位日益尴尬。渠道变革正向深度分销、现代物流配送方向发展,经销商的辉煌将要走向分化或黯淡。“利润越来越薄,已经沦为厂家的高级搬运工”“大型商超进入门槛越来越高、费用越来越大,结算越来越难”“资金周转越来越慢现金流越做越小”已成为越来越多的经销商的感慨。

笔者从事十多年的快速消费品营销管理,也曾为多家知名企业进行营销管理咨询服务,曾和数百家各行业的经销商打交道,对经销商的成长、发展和面临的问题具有很深的感受:

什么因素限制了经销商的现金周转?

一、选择经销产品失误,出现推广失败或滞销:由于大多数经销都是私营或合伙经营,经营管理处于家族管理或靠感性决策的初级阶段,选择经销品牌时靠感觉、感情、拍脑袋来作出选择,经销品牌失败和滞销的可能大大增加。 每一次选择的失误都会为自己造成不可想象的经济损失和资金占压。笔者认识的山东的一位做百货经销的朋友,因为早年供职于国营百货站供销科,积累了丰富的百货行业经验和营销资源,在国营百货站解体后,自己经营做经销商,靠经营宝洁、大宝、丁家宜、索芙特等知名畅销化妆品年营业额迅速上升,短短几年积累了丰富的资金和网络资源,一度成为山东百货行业的龙头经销商。但是由于近几年连续引进了几个没有推广成功品牌,造成大量的库存积压,资金流动迅速减慢,经营也出现了很大困难,不得不收缩经营范围。几次交流都感慨万分,“千万要慎重引进品牌,我引进的三个失败的品牌,每个都为我造成了近百万的亏损,现在仓库里还有几百万的库存垃圾还要我不断负担仓储费用”。经销品牌的选择失误已经成为侵蚀经销商利润和造成资金困难的一大杀手。

二、坏帐、呆帐的比例上升:笔者接触的经销商大多没有严格规范的帐目管理规范和财务分析制度。曾经在江西见过几个做百货经销的客户基本没有帐目管理,所有的收货、欠款收据都保存在随身携带的公文包里,不可想象如果不慎公文包遗失,他靠什么去与客户进行结算。还有一位经销商朋友主要为几家大型连锁超市长期供货,由于平时没有认真去分析和管理,在一家超市出现经营亏损倒闭时,自己在里面的几十万货款成了泡影,用他自己的话说,“几年的经营利润又给收回去了”。由于没有完善的客户管理体系和规范财务分析系统和有力货款回笼措施,使得经销商的应收款、呆帐、死帐远远超出企业的正常标准,从而造成资金周转困难。

三、零售终端结算期的延长;大型商超、买场、商业连锁的迅速崛起,其零售额已占绝对高的比例,使得零售终端的谈判主动性大大提升。加上各生产厂家推广产品时“占领终端,决胜终端”的趋势,经销商面临厂家深度分销、终端建设的压力,不得不面对占主导地位的零售终端提出的苛刻的进场、陈列、结算政策。具了解绝大多数的零售终端与经销商的货款结算期在45—60天以上,并且还要在关系良好、公关能力强的基础上。很多经销商都面临不愿做大场又不得不做大场的局面,很多经销的现金流也被大型终端所累。

经销商如何突破资金困境

选择品牌失误、呆帐死帐率升高、下游客户结算期长已经成为经销商资金周转,现金流困难的三大主要因素。要突破资金压力造成的经营困境,必须从选择品牌、规范经营管理等方面进行改善和提升:

一、制定合理科学产品选择评估流程,杜绝靠感觉、拍脑袋决策。根据对行业发展趋势的把握分析和自身资源的评估,制定严谨的发展规划和产品引进规划,在引进经营产品时,充分考察和评估其发展前景,减少产品引进失误。如在浙江的一家百货经销商,经营十多个世界知名百货品牌,年销售额上亿,他成功的关键用它们自己的话说就是“我们选好了产品,我们经营的产品每个都必须也正在给我们带来回报”;

转身的微笑范文第3篇

关键词:糖耐康;转化生长因子-β1;人肾小管上皮细胞;结缔组织生长因子;纤溶酶原激活物抑制物-1;基质金属蛋白酶-9

DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2013.06.011

中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2013)06-0029-03

糖尿病肾病(DN)是糖尿病最为常见的慢性微血管并发症之一,严重威胁着糖尿病患者的生活质量和生命健康。DN的发病机制目前尚未明确。既往认为DN的早期病变部位在肾小球,

基金项目:国家自然科学基金面上项目(30973909);北京中医药大学创新团队项目(2011-CXTD-19)

通讯作者:刘铜华,E-mail:

近年来研究发现肾小管病变及肾间质纤维化的程度与肾功能的相关性更为密切,故肾间质纤维化的机制在DN的发展中越来越受到人们的重视[1]。调节纤维化细胞因子的正常表达在一定程度上能够抑制纤维化的发展。人肾小管上皮细胞(HK-2)的结缔组织生长因子(CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物-1 (PAI-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)等纤维化细胞因子mRNA表达的影响,进一步探讨其对肾间质纤维化的作用,为其防治DN肾间质纤维化提供实验依据。

1 实验材料

1.1 细胞株

HK-2购自兰州大学实验中心。

1.2 动物

Wistar大鼠24只,雄性,体质量(200±20)g,SPF级,甘肃中医学院动物中心提供,许可证号:SCXK(甘)2004-0006。

1.3 药物与试剂

DMEM/F12(1∶1)细胞培养基,Gibco公司;胎牛血清,Hyclon公司;EDTA、胰蛋白酶,Amresco公司。人重组TGF-β1,R&D System公司生产,根据说明书,用含1 mg/mL牛血清白蛋白的无菌弱盐酸(4 mmol/L)配制为1 ?g/mL的储存液,无菌EP管-70 ℃储存,用时配成10 ng/mL浓度[2]。人CTGF、PAI-1、MMP-9 mRNA引物均由北京奥科生物技术有限责任公司合成。糖耐康颗粒,北京中医药大学提供,主要由人参、女贞子、夏枯草、三白草、番石榴叶等组成。每克粉剂相当于3.61 g原药材,临床成人用量为每日54.15 g原药材,相当于0.902 5 g原药材/kg。

1.4 仪器

CO2培养箱,HEAL CELL HL90,LIKANG;超净生物安全柜,ESCD CLASSⅡBSC,Airstream;倒置显微镜,Olympus X-71, Olympus,JAPAN;PCR仪,型号ABI7300,ABI公司;紫外可见分光光度计,UV1100 5970019,上海天美科学有限公司。

2 实验方法

2.1 糖耐康药物血清制备

SPF级Wistar雄性大鼠24只饲养于中国人民总医院屏障级动物实验室[许可证号:SYXK-(军) 2007-022],普通饲料喂养。随机分为空白组、中药组,每组12只。中药组按成人临床用量的10倍灌胃,空白组灌服同体积生理盐水。每次1 mL/100 g体质量,上下午各1次,间隔12 h,连续灌胃3 d。于末次灌胃前8 h禁食不禁水;30 min后,大鼠股动脉无菌采血;静置2 h,3000 r/min冷冻离心20 min,取上清,将同组血清混合;56 ℃水浴灭活30 min,-20 ℃低温保存备用。

2.2 细胞培养

HK-2 细胞用含10%胎牛血清、100 U/mL 青霉素、100 ?g/mL链霉素 DMEM/F12(1∶1)完全培养基,于37 ℃、5%CO2细胞培养箱中培养。每隔2~3 d换新鲜培养基1次,培养融合至80% 以上,用含0.25%胰蛋白酶、0.05% EDTA的消化液消化,用完全培养基终止消化后,1000 r/min离心5 min。用新鲜培养基将细胞重悬后进行传代培养。实验前先用无血清培养基培养24 h使细胞同步化,实验重复3次。

2.3 分组

传代培养的HK-2细胞分为6组。空白对照组:DMEM/F12培养液;单纯TGF-β1诱导组:DMEM/F12培养液+10 ng/mL TGF-β1;空白血清对照组:DMEM/F12培养液+10 ng/mL TGF-β1+10%空白血清;干预1组:DMEM/F12 培养液+10 ng/mL TGF-β1+5%糖耐康药物血清;干预2组:DMEM/F12培养液+10 ng/mL TGF-β1+10%糖耐康药物血清;干预3组:DMEM/F12 培养液+10 ng/mL TGF-β1+20%糖耐康药物血清。

2.4 人肾小管上皮细胞结缔组织生长因子、纤溶酶原激活物抑制物-1及基质金属蛋白酶-9 mRNA表达检测

细胞以6000个/孔的密度接种于96孔板中,每孔200 ?L,每组设3个复孔,培养过夜。吸弃细胞上清,加入无血清培养基同步化24 h。再次弃细胞上清,按照分组加入相应药物的培养液200 ?L,继续培养24 h。提取RNA进行PCR实验操作。

总RNA抽提:①用枪头吸尽培养基,向各孔中加入125 ?L×2的Washing Buffer。②用枪头吸尽Cell AmpTM Washing Buffer,后向各孔中加50 ?L Processing溶液,反复吹打Processing液后,移至微量离心管中。③75 ℃水浴5 min,分装得到的细胞裂解液。将提取出的总RNA进行完整性分析及纯度测定。

反转录反应:根据RT反应体系(见表1),于PCR管中相应体积的5×PrimeScriptTM Buffer,PrimeScriptTM RT Enzyme Mix Ⅰ,Oligo dT primer(50 ?mol/L)×1,Random 6 mers,RNase Free dH2O分装,再加入RNA样品,迷你离心机混匀,进行PCR反转录反应:37 ℃、15 min,85 ℃、5 s,反转录所得产物为模板cDNA,-20 ℃保存以备后续扩增用。此过程均在冰上操作。

PCR扩增反应:根据PCR反应体系组份(见表2),于PCR管中加入相应体积的SYBR Premix Ex TapⅡ(2×),PCR Forward Primer(10 ?mol/L),PCR Reverse Primer(10 ?mol/L),dH20和cDNA模板,迷你离心机混匀。两步法PCR扩增程序:预变性95 ℃、31 s;95 ℃、5 s,64 ℃、40 s,50个循环。上述组份在冰上配置。

β-actin作为对照,荧光实时PCR反应结束后,由系统分析软件确定阈值,进而确定各反应样本的CT值,采用相对定量的2-CT法分析PCR结果,确定各样本之间基因的表达差异。

3 统计学方法

采用SPSS13.0统计软件进行分析。结果用―x±s表示,数据符合正态分布,采用方差分析。P

4 结果

HK-2细胞经TGF-β110 ng/mL作用24 h后,促纤维化细胞因子CTGF、PAI-1 mRNA的表达显著增强,抗纤维化细胞因子MMP-9 mRNA表达减弱,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P

5 讨论

现代医学针对肾间质纤维化的防治措施主要有应用血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)、血管紧张素受体拮抗剂、TGF-β1中和抗体或天然拮抗剂、基因治疗等诸多方面。但其抗肾纤维化效果并不理想。近年来, 中医药从扶正固本、活血化瘀、清热利湿、化浊排毒等多个角度,由单味中药、中药有效成分及中药复方制剂多方面进行抗纤维化的实验及临床研究,取得了一定的效果[3-4]。

目前研究发现,CTGF作为TGF-β的下游因子,是TGF-β活性的重要调节者,它与其受体结合诱导成纤维细胞增生、基质蛋白质合成及整合素的表达。在人活检标本组织损伤严重区域CTGF表达增加。研究发现,CTGF抗体或反义寡核苷酸可减少TGF-β刺激成纤维细胞和肾小球系膜细胞产生细胞外基质[5]。PAI-1是血液中纤溶酶原激活剂最有效的生理性抑制剂,可由肾小管上皮细胞和肌成纤维细胞产生,TGF-β可促进它的表达,增加PAI-1的量可以明显减少纤溶酶的产生,而纤溶酶可以降解多种基质蛋白――Ⅳ型胶原、纤维结合素、层黏素、蛋白多糖以及纤维蛋白;它可以激活MMPs及胶原蛋白降解酶[6]。因此,PAI-1可以调节肾小球膜内基质的量,在促肾间质纤维化过程中发挥重要作用[7]。MMPs是一族锌、钙依赖肽链内切酶。MMPs以酶原形式分泌,体内被激活的机制不清楚,体外可被纤溶酶原、激肽释放酶、组织蛋白酶G及尿激酶激活。MMPs具有降解基质蛋白沉积的作用[8-9]。

糖耐康是治疗糖尿病的临床经验方。既往的研究表明,糖耐康具有调节糖尿病小鼠糖代谢、提高胰岛素敏感指数、减轻胰岛素抵抗、促进胰岛β细胞的修复和再生、调节脂代谢异常等作用[10]。我们以往的研究发现,糖耐康能够抑制高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞的增殖,并能降低糖尿病GK大鼠尿蛋白量[11-12],表明糖耐康对DN的发生和发展具有一定的治疗作用。

本实验主要探讨了糖耐康对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化过程中促纤维化细胞因子CTGF、PAI-1和抗纤维化细胞因子MMP-9的作用。结果显示,人肾小管上皮细胞HK-2经TGF-β1诱导后,其纤维化促进因子CTGF、PAI-1 mRNA的表达显著上升,而纤维化抑制因子MMP-9 mRNA的表达逐步减弱,再次证实了TGF-β1与肾间质纤维化发生的相关性。经糖耐康药物血清干预后,CTGF、PAI-1 mRNA的表达逐步下降,而MMP-9 mRNA的表达逐步上升,说明糖耐康在肾间质纤维化过程中具有调控纤维化细胞因子网络的作用,在一定程度上可以抑制纤维化的发展。

参考文献:

[1] 李能娟,李红.肾小管上皮细胞表型转化与糖尿病肾病[J].国际内分泌代谢杂志,2006,26(4):277-279.

[2] Fan JM, Ng YY, Hill PA, et al. Transforming growth factor-beta regulates tubular epithelial-myofibroblast transdifferentiation in vitro[J]. Kid Int,1999,56:1455-1467.

[3] 郭丽萍,袁发焕,张耀全.延肾胶囊对部分肾切除大鼠肾脏CB表达的影响[J].中国中西医结合肾病杂志,2006,7(3):143-145.

[4] 杨丽霞,黄宗涛,刘铜华,等.中药复方防治肾纤维化的试验研究概况[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(9):211-213.

[5] Wahab NA, Yevdokimova N, Weston BS, et al. Role of connective tissue growth factor in the pathogenesis of diabetic nephropathy[J]. Biochem J,2001,359:77-87.

[6] Ogata Y, Ishidoya S, Fukuzaki A, et al. Upregulated expression of transforming growth factor-beta, type Ⅳ collagen, and plasminogen activator inhibitor-1 mRNA are decreased after release of unilateral ureteral obstruction[J]. J Exp Med,2002,

197(3):159-168.

[7] Oda T, Jung YO, Kim HS, et al. PAI-1 deficiency attenuates the fibrogenic response to ureteral obstruction[J]. Kidney Int,2001,

60(2):587-596.

[8] Mujumdar VS, Smiley LM, Tyagi SC. Activation of matrix metalloproteinase dilates and decreases cardiac tensile strength[J]. Int J Cardiol,2001,79(2/3):277-286.

[9] Martin J, Eynstone L, Davies M, et al. Induction of metalloproteinases by glomerular mesangial cells stimulated by proteins of the extracellular matrix[J]. J Am Soc Nephrol, 2001,12(1):88-96.

[10] 王芬,何华亮,江南,等.糖耐康对自发性2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素信号转导的影响[J].中国实验方剂学杂志,2008,14(1):46-49.

[11] 王志程,牛洁,杨丽霞,等.复方中药糖耐康对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响[J].北京中医药,2009,28(2):134-136.

转身的微笑范文第4篇

——题记

开门

我推开门,就面对着一个陌生的世界——我看见像黑夜那样模糊的黑板跳跃在墙角上,她的黑,很黑很黑,那种黑,是盲人的黑,她告诉我,一切就要开始;我还看见像阅兵那样整齐的课桌暗笑的躲藏在角落,那种笑,是很蓝很蓝的浅笑,是欢迎的笑,她告诉我,一切就会结束。于是,我推开门,我就哭了,我的眼睛很透彻,一哭,就把我的心照了个干净,我第一次感到——泪水就是咸的,他就是咸的,让人哑然的咸,这样,我就不敢再哭了,我只能无助的回首,看那个迟迟不肯久退的妈妈,我无助的看,又无助的转身,因为妈妈,她用她更加透彻的眼睛告诉我——转过身,面对。

我一次次推门,又一次次转身,直到我看见我的妈妈渐渐渐渐的消失在大门口,并且我还知道,在拐弯处,她转了一次身。

我转身,勇敢的面对课堂。

敲门

我来到门前,端起手——我才终于知道为什么很多人说,这道门这么难叩响,它一点也不像法拉姐妹的城堡,古老,阴森,也一点都不貌似童话故事里的皇宫那么富丽堂皇,可是我面对它,还是好像面对着一座难以移开的山,我忍不住回首,又转身仰望,我知道它是那么的高,那么的宽阔,它无不热情的欢迎着前来敲门的人,可我又在一次次转身企盼之间漏掉了我的自信,像漏掉一粒粒沙。它五彩斑斓,又不乏古老,在它底下,我终于感到自己的渺小,在时间的隧道里,我不只一次的望见失望的影子,我总是被他打到,然后鼻青脸肿的爬起来,翘首企盼那一场大雨,我想,我不能再这样了,因为这样,我会感到自己的不争气,我不再回首,不再转身,我擦干眼泪,我了解:一切都将开始。

我再次不舍的转身,因为我知道我将敲响我永远永远不可能再转身的——那一扇青春之门。

关门

我面对着你们,你们叫我怎么??我怎么?,都不会两全其美。我就这么傻傻的望着你们么?你们渴望我像开门时的不舍和转身,渴望我像敲门时的企盼和留念,渴望我的回首和泪流满面,不,我说,不,因为路灯都灭了,因为鸟儿都归巢了,因为天都黑了,夜都深了,因为我现在有一扇将要关上的门了。

我还是傻傻的面对你们么?我的父母,我把这扇隐形之门关上之后,在我转身了,回首了,企盼了,不舍了,留念了之后,我所能做的就是关门,关上这扇让你们永远疼爱的大门,我就可以独立,可以自己承担风雨和责任,可以不时的关心你们,可以从你们嘴里听到的,不是宝贝,是我的名字了!

我面对着你们,我看到了我,我的不舍的泪——正在消失。

于是,我微笑着关上了门,你们看见我迈步向中学走去,我看见你们在微笑!可我不再转身。

转身的微笑范文第5篇

看着雪白的梨花,沉默地思考着我此时的心情。“姐,梨花漂亮不?今年的梨花开的好早,很漂亮很漂亮!”你眼中跳跃着的光,一瞬间穿越的一切。那样天真的笑,那样简单的喜欢,没有那么多的杂念,没有那么多的束缚,因为想到了,因为喜欢,便可以开心的去做,即便是在清明雨下。

扬起头看着灰白色的天空,站在清明雨下。那时有个女孩不知清明的来历,不懂扫墓所谓何意……因为简单的感觉雨是那样的清爽,便离开了正在前进的人群,转身奔向身后没有石碑的地方,因为那里可以更自由的跑着,笑着!

低下头收敛了思绪,我笑了。“好漂亮的梨花,姐姐好喜欢,走带姐看看那片梨园,姐好久都没有去过了。”瞬间发现弟弟的微笑有着那样强的魔力,那样迷人。你转身,带我再走入那片自由的曾经……

清明。青的柳,清的雨,轻的风。轻描了曾经的微笑;冥的伤,明的眸,命的泪。命中了逝去的悲伤!

花开清明,是纪念

纪念曾经的天真,

纪念逝去的美好,

花开清明,是思念

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