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【关键词】 表面增强拉曼散射; 标记免疫检测; 再生性
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2013.15.071
拉曼光谱是在分子水平上研究物质结构的一种重要的工具,已广泛应用于分析科学领域[1],表面增强拉曼光谱克服了普通拉曼光谱检测灵敏度低的缺点[2],是灵敏度较高的研究界面效应的技术之一,能最大限度地应用于研究吸附分子在表面的取向及吸附行为、吸附界面表面状态、生物大分子的界面取向及构型、构象和结构分析[3]。在商品化的实际应用中,需要强调产品的可再生利用性,需采用真正可行的抗体抗原分离方式,同时不影响抗体抗原的活性与特异性[4]。
在以上理论的基础上,本实验在SERS检测中引入合适的生物洗脱体系——甘氨酸-HCI缓冲体系,以探究本方法的洗脱效果、稳定性和重复使用性。
1 材料与方法
1.1 材料 用Frens法制备得的金溶胶,粒径大约30~40 nm。
浓度1 mmol/L的苯硫酚和浓度1 mmol/L的4,4’-联吡啶分子溶液。3.34 mg/L的羊抗人IgG。小牛血清白蛋白(BSA)(5%p)。pH 9的硼砂缓冲溶液。美国Full Moon BioSystems公司的生物芯片。TBS/0.1%Tween、TBS和三次水。
1.2 方法
1.2.1 制备金溶胶作免疫标记 用Frens法制备得到紫红色浑浊的金溶胶,粒径大约30~40 nm。将浓度1 mmol/L的苯硫酚1 μl和浓度1 mmol/L的4,4’-联吡啶0.4 μl两种标记分子溶液分别加入金溶胶中做标记,同时对标记溶胶进行多次离心,之后重新悬浮,以去掉多出来的标记分子。把3.34 mg/L的羊抗人IgG 5 μl加进标记溶胶中,在室温下充分反应后,对标记溶胶再次离心,使其悬浮。选择5%p的BSA即小牛血清白蛋白把表面的空位进行封闭,然后离心,在硼砂缓冲溶液(pH 9)的作用下,再实现溶胶的悬浮。
1.2.2 制作固相抗体 抗体使用的稀释液是硼砂缓冲溶液(pH 9),稀释的浓度以每毫升200~500 μg为宜,之后把稀释好的液体滴在美国Full Moon BioSystems公司的生物芯片所做的固相基底上,形成拉曼光谱的采集点。环境湿度维持65%~75%,把上面所制作好的芯片放入,12 h后拿出,然后放在普通室温中,干燥0.5 h。
1.2.3 组装三明治结构的复合物和进行SERS检测 把之前制得的抗体分别在BSA溶液(5%)中、人抗原的缓冲溶液中和标记免疫金溶胶溶液振荡0.5 h、2~4 h和2 h,在每次震荡后分别用三次水以及TBS/0.1%Tween、TBS和三次水依次冲洗,再分别用氮气吹干。制得“固相抗体-待测抗原-标记免疫金溶胶”,它是三明治结构的复合物,可以用该抗体来进行SERS检测。
1.2.4 仪器 使用的仪器与设备有LEO-1530型扫描电子显微镜、法国Jobin Yvon公司的HR800共聚焦激光拉曼散射仪、He-Ne激光器、电荷耦合检测器和100倍的长焦镜头物镜。
1.2.5 选择洗脱体系 先用人抗原和羊抗人抗体制备抗原和抗体的复合物,第一次选择强酸的盐酸溶液(pH 2)进行洗脱,让基底在强酸溶液中震荡,震荡2 h,把4,4’-联吡啶作为免疫标记分子,第二次组装三明治结构的复合物,用来进行SERS检测,观察SERS谱图。在看到生物缓冲体系的作用后,采用甘氨酸-HCI(0.2 mol/L)生物缓冲体系,调节体系的pH 值,使pH为2,再把已制备好三明治夹心结构的基底浸入其中。观察洗脱之前、洗脱5 h、洗脱10 h、洗脱24 h后测得的SEM图。
1.2.6 洗脱后基底的稳定性 选择羊抗人抗体抗原和苯硫酚,把后者作为标记分子,制备抗原抗体复合物。然后再用用甘氨酸-HCI体系对复合物洗脱,分别在暗处放置在10 d、1个月、2个月后,第二次制备三明治结构。分析经过静置再次组装的三明治结构SERS谱图。
1.2.7 观察载体的重复使用性 洗脱基底1、5、10次,再分别进行组装,第二次抗原检测以苯硫酚作为免疫检测标记分子,通过分析之后的SEM图来研究基底的可重复使用次数。
2 结果
首先通过改变pH值来试图解离抗体抗原复合物,把洗脱2 h之后第二次组装的三明治夹心结构复合物进行SERS检测,谱图上显示有3个样点有明显的标记分子信号。洗脱后预期目的已基本达到,但是在少部分区域出现与标记分子4,4’-联吡啶特征峰不一样的杂峰和比较复杂的谱峰。该结果提示,只有强酸体系解离复合物并不利于维持生物环境。因此,分离的高选择性和彻底性和保护体系生物活性的重要性是SERS检测可再生性的关系因素,而使用生物缓冲体系后,既能防止pH变化对提取效果的影响,又能防止因pH值变化过度而导致的某些活性物质的变性。
之后采用甘氨酸-HCI(0.2 mol/L)生物缓冲体系进行洗脱,通过洗脱之前、洗脱5 h、洗脱10 h、洗脱24 h后测得的SEM图进行分析得知,洗脱时间的选择与抗体抗原分离的彻底性密切相关,且在洗脱时间为24 h时,抗原和抗体能充分分离,因此清除了抗体上的标记免疫溶胶和抗原,洗脱效果较好。
把洗脱后的基底分别静置在阴暗处10 d、1个月、2个月后,第二次制备抗原抗体复合物。通过分析处理后二次制备的复合物SERS谱图,可见a1振动模式特征谱峰在999和1 573 CTn-1的位置,而具有苯硫酚特征的峰值清晰。
洗脱基底重复1、5、10遍,然后再分别组装,这一过程的SEM图中,基底上的纳米粒子和洗脱基底再组装的次数呈反比,这与基底活性点被洗脱次数增加有关。基于上述结果,第二次抗原检测以苯硫酚作为免疫检测标记分子,基底洗脱后再组装的次数增加,可达10次左右。在这一过程的SERS谱图上,挑选重复1、5、10次的谱图,这些图谱在1000~1600/cm处具有分辨率不良的、较复杂的杂质峰。
3 讨论
自从1974年Fleisehmarm发现吡啶的表面增强拉曼散射光谱(SERS)以来,SERS已经逐渐成为一种研究物质结构性质的快速有效的手段[5]。SERS标记免疫检测是将SERS与标记免疫学相结合,利用SERS的高灵敏度和光谱选择性,结合抗体抗原的特异反应作用而进行的纳米标记免疫分析技术[6],能避免溶液中类似物质的信号干扰,从而轻易获取高分辨的表面分子信号[7],由于具有高灵敏度、快捷、方便等特点[8],SERS标记免疫检测已被广泛用于表面科学相关的领域,其应用领域的有效拓宽直接与活性基底的制备和增强机理的研究密切相关[9],SERS免疫检测已逐渐有成为新的免疫技术的趋势[10]。
本次研究中,对抗原抗体复合物采用的洗脱的方式选择的是甘氨酸-HCl缓冲体系,在洗脱1 d后,抗原和抗体能充分分离,因此清除了抗体上的标记免疫溶胶和抗原。优良的再生效果体现在复合物在经过重新组装后,识别标记分子从而进行SERS检测的能力不变,仍能使用的次数大约为10次。经过本研究的实验结果证明,通过甘氨酸-HCI生物缓冲体系洗脱是一种洗脱基底再生效果好和稳定性强的方法。
参考文献
[1]汪佳俐,曹晓卫,李欣然,等.胱氨酸与半胱氨酸混合体系拉曼光谱的化学计量学解析[J].光谱学与光谱分析,2010,30(11):243-244.
[2]鲍芳.过渡金属核壳纳米粒子的制备及其表面增强拉曼光谱研究[D].苏州大学博士学位论文,2009.
[3]韩洪文,闫循领,班戈,等.皮疹病人血清的表面增强拉曼光谱[J].光谱学与光谱分析,2010,30(1):102-104.
[4]葛明,姚建林,孙如,等.基于SERS标记免疫检测的再生性研究[J].光谱学与光谱分析,2010,30(7):1785-1788.
[5]苏永波,司民真,张德清,等.三种致病性细菌的SERS光谱研究[J].光谱学与光谱分析,2012,32(7):1825-1828.
[6]韩三阳.磁性复合纳米粒子的制备,性质及其应用研究[D].苏州大学学位论文,2010.
[7]卢军军.新型SERS纳米探针的制备及其应用[D].湖南大学硕士学位论文,2011.
[8]康颐璞,司民真,刘仁明,等.氯霉素在电解法制备纳米银膜上的表面增强拉曼光谱的研究[J].光散射学报,2009,21(1):25-28.
[9]沈红霞.铁氧化物/金核壳粒子的制备及表面增强拉曼光谱研究[D].苏州大学博士学位论文,2009.
[10] 钟亮.表面增强拉曼光谱学理论研究及其在免疫检测中的应用[D].华南师范大学学位论文,2010.
(收稿日期:2012-12-10) (本文编辑:王宇)
最近我在读十年砍柴的《自由与宽恕:曼德拉传》,在这之前我读过曼德拉写的《与自己对话》,因为是写自己,所以这本书难免掺杂了一些曼德拉的主观感情,显得不够客观,加之翻译过来的中文版和原著也会有一些出入。
相比之下,十年砍柴的这本书以第三者的角度简洁有力地解读曼德拉的一生,里面一些评论比较有见解。让我印象最深的是,书中引用了曼德拉说过的一段话,“我永远不会对在监狱中摧残我肉体的人怀恨在心,因为他们也只是这个错误体制下的工具。”曼德拉看到的是体制的弊端,而不会把他所受的伤害归结到个人的身上。
由此也让我想到,生活中人们往往会抱怨别人的刁难,而当我因为一些事情和别人发生矛盾和冲突的时候,我会思考这是否是大的社会环境和体制所造成的,而那些刁难你的人本身也只是大环境中一个无奈的角色,这么想的话就会宽容很多。
对于我喜欢的一些作家和作品,我有阅读不同版本的习惯,比较原著和中文版也是一种乐趣。沃尔特·艾萨克森是我很欣赏的一位美国传记作家,他写的《史蒂夫·乔布斯传》、《爱因斯坦传》都能以一种非常客观的态度来还原传主的人生。同一个人的传记,我一般会选择真实、客观的“他传”来阅读,因为“自传”往往有自我美化的倾向。
经典人物的成功不可能完全复制,但你可以通过阅读传记学习他的思想与理念。对我帮助最大的是《史蒂夫·乔布斯传》。乔布斯是一个敢于打破行规的人,从他的身上我学到的是一种创造性思维,在工作中我不会随波逐流,选择大家都会去做的商业模式。他严谨的工作态度和处理问题的方式也对我产生了影响,私下里我和下属会是很好的朋友关系,但工作上我绝不含糊。
作者:(南非)德克勒克
出版社:上海社会科学院出版社
德克勒克是南非前总统,曾与曼德拉一起荣获1993年诺贝尔和平奖,理由是二人密切协作,最终拆除了种族隔离藩篱。但鲜为人知的是,因曼德拉曾出语伤人,让德克勒克怀恨在心,始终对曼德拉怀有敌意。但作为伟大的妥协者,德克勒克最终还是迈出了退让的一步。事实证明,创造历史不仅需要道德勇气,更需要克制、温存与包容,而后者是尤其难得的品质,因为它要割除自己人性中的缺点,只有真正的勇者才能修炼成功。
《背影:我的父亲柏杨》
作者:郭本成
出版社:广西师范大学出版社
柏杨是当代著名作家,因《丑陋的中国人》《中国人史纲》等著作风靡一时。在他的作品中,有一种浓烈的“愤怒感”,这既是其作品的魅力所在,也是缺陷之一。这种写作风格究竟是如何形成的?从本书中不难得到解释:柏杨幼年丧母,历尽艰辛终于混出了一点名声,却又遭近十年“黑狱”,家庭破裂,朋友尽成陌路。独特的经历给了柏杨独特的眼睛,所以他能参透温温脉脉背后的虚伪。愤怒出诗人,柏杨即为其一。
《柳青传》
作者:刘可风
出版社:人民文学出版社
柳青是中国当代著名小说家,他的《创业史》轰动一时,他笔下的“梁生宝”因被选入中学课本而尽人皆知。柳青是少有的、肯扎根基层的写作者,长期与农民们生活在一起,得到稿费,往往捐给当地乡村。正是这种浸入式的体验,使柳青写农民特别鲜活,堪称是“人民的作家”。由于种种原因,柳青在“”中遭到非人待遇、含冤而死,这让这本传记蒙上了一层悲怆的色彩。
《文章皆岁月》
作者:萧乾
好感人啊。请问,我能骂你吗?
我们重视家族、重视血缘、重视宗亲,但很多时候,又在潜意识里崇尚为了出人头地而六亲不认。不带小孩、不理亲情,不仅不受批判,反而成了成功人士炫耀自己受了多大委屈和牺牲的资本。看看西方,哪怕你是美国总统奥巴马,也时不时会秀秀天伦之乐,奥巴马谈起自己的女儿,至少显得是真情流露。
我是一个非常狭隘的人,在我看来,所谓成功,就是你身边的人,因为有你而感到快乐。倘若你赢得了天下而输了家人,那你的成功不过是一场泡沫。纳尔逊・曼德拉是圣人吧,是英雄吧?但他的传记《曼德拉的礼物》里说,曼德拉所有温暖笑容,只会给陌生人,对家人、对子女,他板着脸孔、漠不关心。曼德拉直接说,亲切是可以装出来的。如果不能说圣人的坏话,我就什么也不说了。
我认识一位外企女强人,非常上进,读MBA、EMBA,在职场中节节高升,风头无二,而她的小孩,长期寄存在内地,由爷爷奶奶照看,多年来保持母子二人一年见一次的频率,她以为自己是圣诞老人么?
我采访过不少名人,牛逼艺术家、牛逼摄影师、牛逼艺人,问及什么时候陪小孩呢,其中一些人给出的答案是:没空陪小孩,孩子还小,懂什么,我现在努力打拼,多赚点钱,给孩子打基础,也是为了孩子的将来好。但是,他们知道孩子们怎么说吗,我们做过几次调查,孩子们的心声是:爸爸妈妈,我希望你们不那么成功,我不要昂贵玩具和高价培训班,我只要你们陪我。
我还认识一对夫妇,双双博士毕业、现在都是副教授,花了3年时间用尽各种心思和手段才得以怀孕,为保胎,妻子在床上躺了整整8个月,我还挺感动,不容易啊。结果月子刚坐完,他们就把孩子跟快递一样送回内地老家,什么时候去接呢?至少三五年之后吧。原因?“本来我们都不喜欢小孩,生小孩只是为了堵住长辈骂我们断了香火的嘴,老人喜欢带让他们带去呗。”请问他们读那么多书的目的就是让自己不说人话吗?
畅销了好几年的育儿书《好妈妈胜过好老师》里有句话我深刻认同:不亲自带自己的孩子就是渎职。
在中国,不负责的父母舆论环境真是太宽松了,以工作忙为由,把孩子堂而皇之推给爷爷奶奶、外公外婆带,请个保姆替代自己来带,相关调查显示,文化程度越高的父母自己带孩子的比例越低;经济状况越好的父母自己带孩子的比例越低。而隔代带小孩,成功率不高于30%,因为祖父母辈带小孩,用的大多是传统方式,以撒谎敷衍小孩;用“小心点”、“不要去”等口头禅妨碍小孩的创造力和冒险精神;贪小便宜;当着孩子的面讲孩子父母的坏话等……
中国文化里,过多强调生育是一种权利,甚至是一种义务(不孝有三,无后为大),而忘了最最重要的一点,生育是一种责任。在你不能确定可以给孩子足够的时间陪伴时,请不要草率地生下孩子。《穷爸爸、富爸爸》里就有一句,所谓成功,就是有时间照顾自己的小孩。
当然,不是说夫妻一方必须辞职全职带小孩,这在中国也不现实,但当父母的,有没有竭尽自己所能,给孩子最高质量的亲子陪伴呢?双方都要上班的情况下,有没有把下班后的时间、整个周末拿来陪小孩,关注他想做的事,带他一起去认识世界、享受人生呢?
我总以为,衡量你是否在意一个人,最显要的参数,不是金钱,而是时间。对一个人而言,时间比金钱可有限多了,你口口声声说爱孩子,愿意为孩子去死,但是你连每天几小时的亲密相处都保证不了,你爱个屁啊。
我一个朋友,成天跟我抱怨,孩子跟他不亲,就爱自己外公外婆,每次都能准确收获我的谩骂―我说你纯粹是咎由自取,你自己陪孩子的时间不够,和老婆到处去旅游不带孩子去,在家也是打电玩不理孩子,你不付出光想要结果,想得美!早教专家说了,孩子才是研究大人的专家,谁对他有诚意,人家一目了然。
很多人又说了,我忙啊,我没空啊,有好多会要开、好多应酬推不掉。忙是不在意一个人、一件事的借口,像早教专家小巫说的,没有任何一份工作能把人24个小时都赔进去,只有重视与不重视。如果你把孩子当成最重要的会议,再忙都能抽出时间。
家庭教育和心理专家都指出,孩子0到12岁,尤其0到6岁之间是成长的关键时期,父母不应与孩子分离,不要以任何借口和孩子两地分居,或者放在身边也置之不理。能否跟父母尤其是母亲建立亲密的依恋关系,关乎孩子一生安全感和幸福感的建立。教育专家公认的一点是,孩子0到6岁跟父母相处一分钟,顶得上之后跟父母一年。所以,请别说那种“孩子还小,谁陪都一样”的蠢话了好么?
我的宝宝罗唯唐2岁半时,因为外婆特别想见他,我把他送回四川老家待了3周。开始还好,他还基本适应,到了第三周,在电话里,我们母子两人完全琼瑶附体,电话里双双痛哭。他说:“妈妈,我想你。”我说:“儿子我也想你,妈妈马上来接你。”我发现,短短21天的分别,罗唯唐的眼神里,居然多了些卑微和胆怯,语言表达也大大退步―并不是外婆对他不好,而是这种陌生的环境让孩子没有安全感。从此之后,我再也不敢跟宝宝分开这么久了。
我曾在海边租了间房子,打算每周花两三天去那里看书和写作,因为平常在家,我所有的工作都得等宝宝睡着了才能做,每天都从晚上10点钟开始看书写稿,每天熬夜。结果,我租了房子之后一个月也去不了一两天,因为只要我连续两三天没有陪唯唐,就会被巨大的犯罪感包围。
Banana Kick――A kick that curves such that it take the shape of a banana. This is usually attempted on a corner kick to curve the ball from the corner directly into the goal.(香蕉球――球在运行过程中划过一道曲线,呈现出类似于香蕉的形状。常常有球员试图在角球点开出弧线球直接吊门。)
Bicycle Kick――When a player kicks the ball in mid-air backwards and over their own head, usually making contact above waist level. Not too frequent at the youth level.(倒钩球――球员腾空将球向身后踢,高过头顶,着力点通常在腰部。这种动作一般不会让青年队球员来做。另一种说法为“Scissors Kick”。)
Cut Back――Dribbling the ball backwards in the reverse way of the goal in an attempt to keep possession of the ball.(回切――带球向与球门相反的方向跑,以求保住本方的控球权。)
Cut Down the Angle――When the goalie comes out of the goal several feet to make themselves closer to an attacker. The effect is to leave the attacker less open net to shoot at.(封角度――守门员离开球门区域几英尺,使自己更加接近进攻者,这样一来后者就少了对射门角度的选择。)
Instep Drive――A shot taken with the instep of a player's foot; usually the most powerful and accurate of shots.(脚背射门――球员用脚背发力来完成射门;这样的射门往往力量很大,而且比较精准。)
Offside Trap――A play by the defense to catch the attacking team offside. The rear defenders will quickly pull up past the attackers to put the attackers in an offside position.(越位陷阱或反越位――进攻方有意让一名球员跌入防守方的越位陷阱,然后把球直接传到该名球员的位置,而该名球员并不直接参与进攻,而是由后面不处于越位位置的球员高速插上,突破对方防线。)
小广播
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你知道吗
职务互换
在刚刚过去的一个赛季里,法甲的勒芒俱乐更换了多名主教练。赛季初担任主教练的伊夫・贝尔图奇在被解职后,成为了球队的助理教练,可有意思的是,曾在他手下担任过助理教练的阿诺・科米不久后被提拔为主教练,两人戏剧性地调换了身份。
同样的情况以前也发生过,布鲁斯・里奥克和斯图尔特・休斯顿就曾进行过角色互换。1995-1996赛季,休斯顿在阿森纳队担任里奥克的助理教练,不过后者于1996年8月离开了海布里,休斯顿成为了球队的临时主教练,但他并不成功。离开阿森纳一个月后,休斯顿成为了女王公园巡游者的主教练,他的助手是谁呢?没错,就是布鲁斯・里奥克。
政界偶像
本届联合会杯,东道主南非队与巴西队的半决赛之前,南非的民族英雄、前总统曼德拉接见了全体队员、教练和其他工作人员,并为他们加油打气。主教练桑塔纳说:“曼德拉先生给了我们灵感,我们见到他时,激动得鸡皮疙瘩都起来了,在我们心中他就是神!”球员们也纷纷表示:“这对我们来说是非常具有历史意义的时刻,曼德拉是世界民主运动的象征。”
即将满26岁的“荷兰飞侠”范佩西以美国总统奥巴马为偶像。他坦言:“奥巴马是十分冷静的人,无论竞争对手如何造势,他总是一副一切尽在掌握中的样子,如果有人试图激怒我,我会学着像他那样,而不是动手还击。主教练温格一直尝试着将奥巴马的‘Yes we can’哲学引进阿森纳的更衣室。”虽然阿森纳已经四年没有尝过冠军滋味了,但温格从来没有放弃过努力。
范佩西还揭秘:“温格对其他体育界人士和政治人士很有兴趣,在激励球员时,他总会拿一些新闻举例,首先是奥巴马,其次是篮球巨星乔丹,然后是比利时网球明星海宁。”
杰拉德“偷听”
自从卡佩罗上任后,英格兰队更衣室就形成了一套严明的纪律,英国媒体甚至为卡佩罗的治军纲领取名为“法比奥十诫”――类比《圣经》中的“摩西十诫”。着装、饮食,集训时使用手机他都要管,甚至还禁止球员在更衣室内听音乐,对球员来说卡佩罗的政策可谓是无孔不入。但这些也被意大利人看作是球队成功的法宝。
不过在严格的纪律下,还是有人敢冒险,中场大将杰拉德就常躲在更衣室的角落里听自己的iPod。他透露:“其实大家都会偷偷地在角落塞上iPod的耳机,比如我喜欢听Kings of Leon的歌。”但他也一直强调:“卡佩罗是世界上最好的主教练之一,英格兰队很幸运,他虽然很严肃,但我觉得还没到让人害怕的地步。他是个赢家,能给英格兰带来成功。”
喜欢足球的女孩
余心怡
一个女孩,爱上了足球,她的生命轨迹也开始与众不同。
喜欢足球的女孩,喜欢素面朝天的脸,因为足球本身就是真实,不需要任何东西的修饰。也许偶尔的淡妆会更迷人一点,但还是喜欢纯粹、真实的自己。
喜欢足球的女孩,爱在逛街时寻找着与足球相关的东西,发现目标,果断出击,丝毫不含糊。于是,一个粉色的公主房却成了足球的“展览馆”。
喜欢足球的女孩,平时很安静,也许你会为看到一个恬静的女孩而欣喜,然而当你提到足球,她的反应会让你不相信自己的判断力。
喜欢足球的女孩,不喜欢矫情,总是展现出最真实的自己。
喜欢足球的女孩,会在男朋友比赛之前为他准备好球衣、球鞋,会安静地站在球场边看着他全场飞奔,即使下大雨场边没有观众,依旧会不打雨伞地站着,抱着他的衣服,等着中场时递给他那握了很久的水杯……
喜欢足球的女孩,不会要求男朋友为她买礼物,她所要的就是和男孩一起为心爱的球队加油,一起实现去国外看球的梦想。
喜欢足球的女孩,是用心爱着这项运动,足球占据了她们内心大部分的位置,她们拼命地保护着,因为一个女孩喜欢足球会比男孩遇到的困难更多。家长总是希望女孩文静、贤淑,但她们要为自己的爱好辩护,在球迷的世界里人人平等。
喜欢足球的女孩,其实并不是像有些男孩说的那样是“稀有动物”。她们的宣言是:“我只是在用心爱着我所喜欢的足球,一切都是纯粹的。”
喜欢足球的女孩,在她们的世界里尽情地享受着足球带来的一切感动!
喜欢足球的女孩,会将爱足球进行到底,一生不变!
向天王致敬
6月25日,伟大的“流行音乐之王”迈克尔・杰克逊永远地离我们而去,令世界震惊。原定于7月13日在伦敦举行演唱会的计划已经无法实现,给全世界的歌迷留下一个永久的遗憾。十年前迈克尔在伦敦演出时,曾到访过富勒姆俱乐部的克拉文农舍球场,与球迷和歌迷们一起分享激情和喜悦,与流行天王亲密接触的瞬间一定会让富勒姆球迷永生难忘!
唱响诺坎普
6月30日,著名的U2乐队在巴塞罗那的诺坎普球场举行了一场声势浩大的演唱会。当晚共有九万名观众到场,一睹这支爱尔兰最成功的摇滚乐队的风采。
绚丽的金属结构舞台占据了大半个诺坎普体育场,歌迷们戏称它为“爪子”,看起来还像一个巨大的蜘蛛,横跨50米,重达390吨。为了向刚刚去世的“流行天王”迈克尔・杰克逊致敬,U2乐队此次现场翻唱了两首他的歌曲《Man In The Mirror》和《Don't Stop 'Til You Get Enough》。
巴塞罗那是U2乐队世界巡回演唱会的首站,而他们的下一站是米兰的圣西罗球场,接下来还将前往法国、德国和荷兰开唱。