炫耀的幸福

前言：想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗？我们特意为您整理了5篇炫耀的幸福范文，相信会为您的写作带来帮助，发现更多的写作思路和灵感。

炫耀的幸福范文第1篇

口述/易嘉慧 整理/奕晨

小家碧玉，我成了下岗父母骄傲的资本

我叫易嘉慧，是广州人。父亲原是一家化工厂保卫科的科长，母亲原是一家公司的会计，我们一家三口蜗居在父亲单位分的只有60平方米的二居室里。为了让我得到最好的教育，父母把大多数收入用在我身上，家中的日子过得很拮据。

在我刚上小学时，为了培养我的艺术特长，妈妈花高价送我上了舞蹈培训班。当时她和爸爸每个月的工资加起来只有500多元，而舞蹈班一个月的学费就要200元，几乎占了他俩月收入的一半，可是，妈妈却毫不心疼。后来，妈妈又陆续给我报读了英语速成班、绘画班……

1999年，我的父母先后下岗，在小区门口开了一家士多店，惨淡维持生计。

2000年8月，我如愿以偿地收到广州中山大学的录取通知书。进入大学后，我突然发现世界变得好大。我勤奋地学习，积极参加社会活动，很快就在系里崭露头角，成为一些男生追逐的对象。我将这种情况告诉妈妈，妈妈一听有男孩子追我，就如临大敌，三番五次地警告我，千万不能跟那些没有一点经济基础的“毛孩子”谈朋友。从小听话的我，因此对那些热烈的追求者总是冰冷地拒之千里。

大三开学，我在主持“迎新生联欢会”时认识了中文系一个叫胡霖的同学，后来的交往中，他总是默默地为我占好自习室的位子，宁愿一个星期不吃早餐，也要省下钱给我买我爱吃的牛奶蛋挞。在我所有的追求者都知难而退后，他依然紧紧相随……在这些春风化雨的细节里，冷若冰霜的我慢慢被他的执着感动了。毕业前夕，我接受了他。

胡霖来自广东河源，父母都是普通的中学教师，还有一个妹妹，家境很一般。我知道他这种条件一定过不了我父母这一关，所以我始终没敢在父母面前走漏一点风声。

2004年9月，大学毕业后，我在一家外企做管理，胡霖应聘进一家生物制品公司做销售。工资虽然不高，但工作富有挑战性，他打算做上一两年，积累了经验就自己成立公司。我们常常一起憧憬未来，沉浸在爱情的柔情蜜意里。

一天晚上，胡霖送我回家，妈妈从楼上看见了。我刚一进家门，父母就如临大敌地问我那个男孩是谁，我壮着胆子如实相告。妈妈听完脸色变得极为难看，许久，才说：“连房子都没有，家里负担又重，这样的男孩子哪里配得上你，趁早跟他断了！”爸爸也在一旁极力附和。我一下子懵了，第一次发现自己的父母竟如此势利。

亿万富翁征婚起风云，我的校园爱情摇摇欲坠

2005年6月的一天，我刚刚回到家里，妈妈就拿出一份当天的《广州日报》，兴致勃勃地让我看她打开的那一页。原来，在报纸的生活情感版面上有一则醒目的征婚启事。我没有兴趣仔细看，半开玩笑半生气地说：“妈，难道您怕女儿嫁不出去吗？”妈妈把报纸塞到我手上，说：“小姑奶奶，你再仔细看看！”

那则征婚启事约占1/4版面，以红玫瑰为背景图案，四个紫色大字“征婚启事”，旁边还有漫画式的“LOVE”、丘比特神箭等图案。征婚者自称“资产过亿，海龟一派，气质儒雅，经商多年，虽离异但深知感情对人生珍贵无比……要求女孩在22―26岁之间，品行优良，气质高雅，纯洁未婚……”

看完后，我哑然失笑。妈妈却神秘兮兮地说我最符合条件，应该去应征。“我才不去！”不屑地说。

僵了一会儿，妈妈歆羡地说：“这人条件那么好，如果成了，一辈子都有享不尽的荣华富贵啊！”我气极了：“妈妈，你真无聊！”

我赌气回了公司宿舍。

第二天，我找到胡霖，把心中的郁闷一古脑儿地说给他听。谁知他一下子勃然大怒，吼道：“你的父母在把你当商品卖，他们怎么这么势利！”我不但没得到胡霖半句安慰，还被他羞辱了一番，委屈之下，我哭着跑开了……

很快到了周末，妈妈打电话说她煨了一锅滋补羊肉汤，叫我回去喝。我以为父母改变了初衷，就回了家。喝完汤，妈妈笑眯眯地对我说：“我们一家三口好久没有出去玩了，今天一起去逛逛街吧。”我高高兴兴地随父母出了门。走到天河城附近的佳华大厦时，妈妈突然对我说：“那个征婚的事……我们已经给你报了名，就在这里……”“什么？你们怎么可以这样！”我觉得受到了莫大的侮辱，气得手脚发凉。

妈妈见我死活不愿意上楼应征，就使出了“杀手锏”，一把鼻涕一把泪地说：“爸妈把你养大容易吗？咱家穷，看看别人家孩子过得那么好，妈妈觉得对不住你。如今你也出息了，这是个好机会，你为什么不试试啊……”听着妈妈的哭求，我心烦意乱，但还是不肯同意。看我这么固执，妈妈厉声说：“你要是不听话，我今天就死给你看！”我的泪水夺眶而出，不明白这样的征婚究竟有多大的魔力，能让50岁的老妈变得如此歇斯底里！

走进佳华大厦的大厅，我才发现已有100多名女孩在这里等待面试了，有不少女孩子也像我一样是被大人“押”着来的。这时，妈妈才告诉我，几天前，她来这里交了我的照片和简历，对方从数千个应征者中选出了100多名进行初试；她接到初试电话时，心情跟当年接到我的大学录取通知书一样激动。正在这时，胡霖打来电话，说要约我一起去参加同学的生日party，问我在哪里，我嗫嚅着说出了自己所在的地方。

一刻钟后，胡霖打的赶过来，一看这场面，他就明白了是怎么回事。他抓过我的手便往外走，母亲拦住他，上下打量了一下，说：“嘉慧是来应征的，请你不要打扰她，以后也别来烦她了，你没有资格！”胡霖静静地盯着我好一会儿，才一字一句地说：“易嘉慧，咱俩的关系到此为止！”说完，他头也不回地冲出了门外。我的心剧烈地疼痛起来，没想到我的初恋结束得如此惨烈……

尴尬收场，在征婚闹剧中我落荒而逃

在父母的软硬兼施下，我走进了富豪设在这幢大厦的面试点1808房。这是一间豪华套房，大约有100多平米。会客厅里除了一套欧式古典沙发外，最显眼的就是两样东西：一台测量身高和体重的电子测量仪、一部摄像机。应试的女孩子要先在电子秤上站一下，如果身高低于160厘米、体重超过50公斤，就要被淘汰；这一关过了，接着就要在摄像机前走两圈，让摄像镜头看清身体上有无缺陷。如果这两关都过了，才能进入里面的套间参加面试。

征婚富豪如此折腾人，叫我心生厌恶，几次想拂袖而去，可是想到父母还堵在门外，只好硬着头皮往下走。两关过后，进入里间面试的就剩下20多人了。

在里间负责面试的是一个染着金发的时尚女人。排在我前面的是一位皮肤白皙的女孩，只听时尚女人不停地发问：“有没有谈过男朋友？有没有过性经历？结婚后会如何对待你的老公……”时尚女人的提问相当尖刻，咄咄逼人。那个女孩像被人扒光了衣服似的，被问得红着脸跑了出去。

轮到我了，也许金发女人意识到什么，对我没再进行过多的刁难，只问了一些很简单的问题：工作经历、爱好特长等。由于半个小时前胡霖刚与我分手，我的情绪很低沉，对她的问题只是机械地回答着。

没想到，下午我就接到了“征婚小组”的电话。他们说通过观察以及在场的心理学专家分析，我和另外9个女孩没有拜金主义的倾向，符合条件，可来领取体检表，由他们出资为我们做体检。

妈妈听说我接到了体检通知，激动不已，不由分说就把我硬拉到大厦征婚处去领表。体检表上除了一些常规项目外，居然还有一项妇检。妈妈在去医院的路上有意套问我：“你和胡霖没做什么出格的事吧？”我气不打一处来，说：“这项检查无非是看我们是不是处女！仗着自己有几个臭钱，就可以肆意侮辱别人的人格吗？”妈妈无语，我也仅仅是出了一口恶气。

做完常规检查，最后一关是妇科。这时，一位40多岁的女士对我们说：“妇科检查主要是看各位有无性史，如果有，肯定是通不过的……”听了这话，有三个女孩子气呼呼地离开了。

我也想离开，但妈妈在一旁监督，我插翅难飞，只好忍着巨大的屈辱，硬着头皮进去做了检查。结果马上出来了，我和另外四个女孩子顺利通过了这一关。

2005年6月30日那天，如父母所愿，我见到了征婚的主角――曹董事长。他看起来有40多岁，矮矮胖胖的，保养得很好，鼻梁上虽然架着一副眼镜，但看不出来有何儒雅气质，说话时喜欢夹杂一两句英语，似乎在显示自己的“海归”身分……由于心不在焉，我对曹董的提问只是机械地应答。只听他说：“你觉得我们合适吗？我有哪些地方吸引你？”我连想都没想就说：“不合适。”“那你来干什么？”“是我爸我来的。”说这话时，我还用厌恶的目光狠狠地剜了他一眼……由于我的不配合，会面不欢而散。走出屋子后，我如释重负，看着等在门外的父母那急切的样子，我突然觉得他们是那样的陌生。

我以为自己从此可以回归平静的生活了，便决定去找胡霖道歉，希望能重归于好。可是，我想错了。

胡霖没有原谅我，他抑制不住悲愤，在同学中间公布了我去应征富豪女友的事。同学们很震惊，许多人对我表示了不齿。上网时我怎么也难以登陆校友录，后来才知道，我被“踢”出了班级校友录。

父母看我郁郁寡欢，非但没有安慰我，还怪我不争气。我伤心欲绝，趁他们出门，打开了煤气想结束自己的生命。谁知爸爸回来了，把已经昏迷的我送到了医院抢救……

经此一闹，左邻右舍都知道了我的事，流言蜚语压向我，我不敢出门，怕别人在背后指指点点。由于精神恍惚，我在工作中也出现重大失误，被公司辞退了。

炫耀的幸福范文第2篇

一、制度范式:服务型政府应然功能和实然构建的契合点

(一)实践偏差引起的反思

近年,服务型政府的理念不断深入领导干部和公众的心中,政府服务的行为方式不断创新,但由于民主观念、公众参与意识和传统体制等方面的制约,服务型政府的应然追求与实然构建之间存在着诸多反差甚至是背离的现象。一些急功近利的服务作秀,使公众普遍感到一种欺骗,影响了服务型政府的实际效果,也使服务型政府的正当性遭受质疑。因此,必须找到连接应然与实然的关节点,缩小理论与实际之间的差距。从学理上看,制度范式是服务型政府应然功能和实然构建的契合点。

(二)制度范式的角色定位

根据库恩的范式理论,服务型政府可分为三种不同层次的范式。观念范式:基于特有的价值观念和标准所形成的理念,即基于在民,政府是代议机构的标准,在政府与社会的价值关系中,恪守社会作为价值主体与价值评价主体,政府相对于社会只具有工具价值的信念;规则范式:基于服务理念而衍生的一整套规则与程序,也即制度范式;操作范式:实现观念范式与规则范式的手段与工具。制度范式与价值观念有双向互动关系,价值观念规范着制度范式的基本模式,而制度范式的正常运转强化着人们的价值观念。就服务型政府而言,为确保政府权力基于公仆身份运作,克服权力的私人性对服务型政府造成的损害,必须要发挥制度的功能,实行权力的制度化配置。服务型政府的客观存在必然是一种制度形态的政府。制度范式成为服务型政府的应然追求与实然构建的契合点,是基于服务型政府价值理念具体化的必然诉求和最终得以实现的必要保证。否认制度范式的作用,服务型政府必然停留在意识抽象和观念层面。

二、制度供给:转型期制度需求与服务型政府服务的根本点

(一)社会转型期对制度供给的强烈要求

一方面社会结构变迁所引起的新旧价值体系并存要求尽快完成过渡型社会形态的价值整合;另一方面社会运行机制的转换带来的利益格局调整,利益主体多元化与利益群体关系复杂化,都要求政府通过有效的制度安排,促进各种利益关系的调整、社会利益的再分配以及社会阶层的合理流动。上述两方面需要并孕育了对制度有效供给的强烈诉求。然而制度短缺和制度失灵是转型期我国制度运行的基本特点之一,不完善的制度和淡漠的制度意识难以为服务型政府提供有效支撑。制度需求与制度供给之间存在着时间滞延、内涵错位等失衡问题。

(二)政府在制度供给中的优势地位

一是因为制度作为一种公共物品所具有的非排他性特征,使得个人和非政府组织在制度创新过程中面临高昂的制度供给成本,并且利益容易被他人窃取的困境,难以克服搭便车的问题,而政府可以通过强制使制度变迁得以继续。二是因为政府拥有比个人与非政府组织无以比拟的动员能力和资源配置权力,政府决定着制度供给的方向、形式、进程及战略安排。中国长期处于中央集体制下,个人和地方组织制度创新缺乏动力,难以形成一个多层次的制度供给主体系统。因此,任何重要的制度变动只有得到政府的认可,或是由政府来发动,才能在更大范围内得到实施。并且中国渐进式的改革隐含着转型――制度变迁――政府主导的内在逻辑。政府是中国制度变迁的第一推动力和实践主体,是中国经济转型的初始条件和逻辑起点。

(三)服务型政府最大的最好的服务就是提供制度供给

服务型政府的基本职责是,给社会制定一个人人必须遵守的制度框架或模式;制定政策以维护社会稳定和促进经济发展;提供公共产品和公共服务以满足公众对利益和劳务需要。政府作为在民的机构,首先必须根据人类最基本的价值要求如平等、公正、和谐、全面发展等来为社会提供制度、执行制度、纠正制度和创新制度。

处于转型时期的中国,解决当前社会冲突、实现政府职能转变、摆脱制度失衡困境,其实质问题都是制度安排问题,其基本底蕴就是规范的制度供给。

三、制度公正:服务型政府制度建设工具维度和伦理维度的统一点

(一)制度工具的局限性

以工具主义和实践理性取向为主导的制度分析范式,习惯于将侧重点集中在转型过程的描述和如何转型等操作层面的问题,注重制度的技术性、实用性和效力,它映射到国家制度导向上必然导致增长主义以及对效率的片面追求,从而使得政府作为制度变迁的实践主体介入制度安排时忽视甚至否认了制度本身的价值含义、合理性及对行为主体的公正性。现实社会经济生活中政府权力的异化、社会利益的集团化、社会组织博弈实力的差异性等产生社会不公正的因素如果融入到制度之中并在制度中定格,那么将是制度形成不公正现象的深层本质根源。构建制度价值维度的制度公正分析框架,有助于我们拓展制度工具理性分析中的缺陷和不足。

(二)实现制度公正是服务型政府制度建设的基本取向

炫耀的幸福范文第3篇

关键词：良性阵发性位置性眩晕；耳石复位法；药物治疗

良性发作性位置性眩晕（BPPV）是一种常见的内耳前庭疾病，约占所有眩晕的25%[1]。其主要特征是患者头部运动到某一位置，出现短暂的旋转性眩晕与眼震，偶或伴有漂浮感或翻转感，不伴有其他神经系统症状。该病患者多就诊于神经内科、普通内科、耳鼻喉科、急诊科等。常因就诊科室不同，患者接受到的治疗有所不同。本文旨在研究BPPV患者治疗方案，为临床治疗提供参考依据。

1资料与方法

1.1一般资料 选取患者均为2011年4月～2012年4月收住于新疆医科大学第五附属医院神经内科的81例BPPV患者，均为汉族。81例患者中男性30例，女性51例，年龄在18～74岁，平均年龄（56.67±11.2）岁，病程1d～3w。

1.2诊断标准 均符合中华医学会耳鼻咽喉分会2007年的BPPV诊断标准[2]：①头部运动到某一特定位置出现短暂性眩晕病史，②变位眼震实验阳性，③具有短暂潜伏期 、（

1.3方法 将纳入本研究的81例患者随机分为药物治疗组及手法复位组。药物治疗组41例，平均年龄（55.43±12.3）岁，男性14例，女性27例，病程（4.9±1.8）d。手法复位治疗组40例，平均年龄（54.43±10.9）岁，男性16例，女性24例，病程（4.6±2.1）d。

两组一般资料比较无统计学差异。药物治疗组给予天麻素注射液600mg，静脉输液，1次/d；倍他司汀片6mg，口服，3次/d；共14d。手法复位组根据患病类型选择复位方法，后半规管BPPV采用Epley管石复位法，水平半规管BPPV采用Barbecue翻滚法治疗。Epley管石复位法[3]：①患者坐于诊断床上，头向患侧转45°，治疗者手扶患者头部，迅速使患者由坐位变为平卧位，头向下垂30°。②将头向健侧转90°。③将患者头部连同身体继续向健侧转90°，此时身体由平卧位改变为侧位，头与地面呈45°。④坐起，头向前略倾。Barbecue翻滚法[4]：①患者坐于诊断床上，让其变为平卧位，头向健侧扭转90°，身体向健侧翻转180°，头转90°鼻尖向下，继续向健侧方向翻转，使侧卧于患侧。②坐起，头向前略倾。以上每个步骤均停留足够时间，一般维持至眼震消失，或旋转感消失后再保持1min左右。如此反复操作，直到在任何头位都引不出眼震，或直到连续3个治疗循环结果完全相同为止。14d后结束治疗。

1.4疗效评估 分别在结束当日、第3d、第7d、第14d对两组患者进行评估，评估标准参照中华医学会耳鼻咽喉科学分会2007年的BPPV疗效[2]，评估标准：①痊愈：眩晕完全消失或位置性眼震完全消失，②有效：眩晕或位置性眼震减轻，但未消失，发作次数减少50%以上，③无效：眩晕和位置性眼震无变化，加剧或转为其他类型的BPPV。有效例数为痊愈及改善例数之和。

1.4统计学处理 用SPSS13.1统计软件进行统计分析，数值变量采用t检验，分类变量采用χ2检验。计量资料用均数±标准差表示。P

2结果

两组各评定时间点疗效比较，见表1。

于治疗第1、3、7，14d评定两组疗效，并对比分析，耳石复位法疗效在各评定时间点均优于药物治疗组，其差异有统计学意义（P

3讨论

良性发作性位置性眩晕（BPPV）是一种常见的内耳前庭疾病，发病率约为64/100000[5]，男性与女性性别比约为1：2，发病高峰期在40～50岁。BPPV的病因尚不清楚，多数与老年退行性改变、头部外伤，基底动脉供血不足，内耳血循环障碍、耳部疾病如中耳炎、乳突炎、迷路炎，耳硬化症等[6-8]。BPPV的治疗主要采用耳石复位法；药物治疗，包括血管扩张剂、营养神经药物、抗胆碱药物，抗眩晕药物等[9，10]，包括后壶腹神经切断术、半规管堵塞术等。复位法主要通过对耳石浮游颗粒进行溶解、消散作用而实现治疗作用。天麻素、倍他司汀可改善扩张脑血管，改善脑及内耳血流，后者还可以影响前庭神经核，抑制神经冲动向前庭外侧核多突触神经元传导，从而有抗眩晕作用。

本研究可看出，手法复位治疗在各评定时间点均取得明显效果，有效率高于药物治疗组，其差异有统计学意义；使用血管扩张剂、抗眩晕药物能够减轻眩晕及植物神经症状，但不能改变疾病的自然病程，此结论与国内外报道相似。本研究为良性发作性位置性眩晕治疗方案选择提供一定参考价值，提示与药物治疗相比较，手法复位起效快，疗效确切，简便经济，易被患者接受，值得推广。

参考文献：

[1]Pames LS， Agrawal SK， Allas J. Diagnosis and management of benign paroxysmal positional vertigo （BPPV）[J]CMAJ.2003.169（7）：681-683.

[2]中华医学会耳鼻咽喉头颈外科杂志编辑委员会，中华医学会，耳鼻咽喉科学分会，良性阵发性位置性眩晕的诊断依据和疗效评估[J].中华耳鼻咽喉头颈外科杂志，2007，42（3）：163-164.

[3]Eplpy JM. The canalith repositioning，procedure for treatment of benign paroxysmal positional vertigo[J]Head Neck Surg，1992，107：399-404.

[4]Lempert T， Tiel-Wilck K. A positional maneuver for treatment of horizontal cananl benign paroxysmal positional vertigo[J]Laryngoscope.1996，106：476-478.

5、Froehing DA， Bowen TW， Mohr DN， et al. The canalith respositioning procedure for the treatment of benign paroxysmal positional vertigo：a randomizad controlled trial[J]Mayo Clin Proc.2000，75（7）：695-700.

[6]张淑珍.良性阵发性位置性眩晕的发病机理、临床诊断和治疗[J].继续教育医学.2006，20（20）：16-22.

[7]钱淑霞，胡兴越，张晓玲，等.特发性良性阵发性位置性眩晕的诱因研究[J].现代实用医学，2010，22（3）：286-287.

[8]Von Brevern M， Seeling T， Nevhavser H， et al. Benign paroxysmal positional vertigo Predominantiy affects the right labyrinth[J]Neur Surg Psyc.2004，75（10）1487-1488.

炫耀的幸福范文第4篇

【摘要】

目的对几种中药进行了植物雌激素的活性筛选。方法采用人乳腺癌细胞增殖法与酵母菌雌激素筛检实验法对9种中药进行了植物雌激素活性的研究。结果成功地建立了E-SCREEN法与Yeast Estrogen Screen实验法，此两种方法均可检测到1×10-13 mol/L的雌二醇。在这两种体外雌激素活性筛选实验条件下，当归、泽泻、川芎、牡丹皮、桂枝均有雌激素活性；而茯苓、桃仁则无雌激素样活性。结论E-SCREEN法敏感性高，并有快速、简便等优点，适用于大量化合物的初选。

【关键词】 人乳腺癌细胞增殖法 酵母菌雌激素筛检实验 雌激素活性

Abstract：ObjectiveTo evaluate the estrogenic activity of several kinds of Chinese herbal medicines. MethodsE-Screen and Yeast Estrogen Screen technology were used to study the estrogenic activity of nine Chinese herbal medicines. ResultsThe two methods detected estradiol at very low concentration as 1×10-13mol/L. It was found that Angelica acutiloba Kitagawa var.sugiyamae Hikono.，Alisma orientale Juzepczuk.，Cnidium officinale Makino.，Paeonia suffruticosa Andr.，Cinnamomum cassia Blume. had estrogenic effects， while Poria cocos wolf.and Prnus persica Batsch. lacked estrogenic effects at this assay.ConclusionThe E-SCREEN test is sensitive， rapid and easy to perform.It's suitable for large-scale screening for estrogenicity of environmental chemicals.

Key words：E-SCREEN; Yeast Estrogen Screen; Estrogenic activity

植物雌激素（phytoestrogen，PE）根据分子结构的不同主要包括5类:黄酮类、木脂素类、香豆素类、二苯乙烯类、真菌等［1］。通过人乳腺癌细胞系MCF-7［2］检测雌激素活性的方法及酵母菌雌激素筛检试验法（Yeast Estrogen Screen）［3］对茯苓是否具有植物雌激素作用进行了研究。

MCF-7人乳腺癌细胞是最常用的检测雌激素样活性的细胞株，Soto最早从雌激素依赖的转移性乳腺癌分离并建株。在此后的研究中，发现该细胞含有雌激素受体，在雌激素作用下增殖，而且只对雌激素样物质产生效应，对其它非雌激素样化学物无效，Soto等把它检验雌激素的方法，并称为E-screen实验。酵母菌雌激素筛检实验目前最常见的是应用转染了hERcDNA和与编码β-半乳糖苷酶的LacZ基因相连的雌激素反应元件（ERE）的S.cerevisiac菌株。当经过E2或外源性雌激素处理后，YES系统中β-半乳糖苷酶活性显著增加。本研究中应用E-screen实验和酵母菌雌激素实验法对茯苓等中药进行了雌激素活性筛选研究。

1 材料

1.1 药物 当归Angelica acutiloba Kitagawa var.sugiyamae Hikono.(日本北海岛);川芎Cnidium officinale Makino.; 桂皮 Cinnamomum cassia Blume.; 桃仁 Prnus persica Batsch.;泽泻 Alisma orientale Juzepczuk.;茯苓Poria cocos wolf.白术Atractylodes japonica Koidzumi ex Kitamura.; 芍药Paeonia lactiflora Pallas.; 牡丹皮Paeonia suffruticosa Andr.（购于日本药局方）。各药材分别用10倍量水煮提两次，过滤，合并滤液并减压浓缩，真空干燥后配制成1mg/ml的水提液。

1.2 试剂 EMDM培养基、无酚红EMDM培养基、17β-雌二醇、β-半乳糖苷酶、S.cerevisiac酵母菌株、SD培养基、Zymolase试剂（为Sigma公司产品），邻硝基苯-β-D-半乳吡喃糖苷（ONPG，日本和汉药研究所提供），胎牛血清（FBS，日本和汉药研究所提供），其余试剂均为日本产分析纯。

1.3 仪器电子读数分析天平(日本 Shimaduz 公司)；二氧化碳培养箱(日本SANYO公司)；倒置显微镜(日本Olympus)；台式高速低温离心机(美国Becton Dickinson公司)；全温振荡培养基(美国Becton Dickinson公司)；BIO-RAD Model 3550-UV紫外分光光度仪(日本SANYO公司)；25 mm2培养瓶、96孔培养板（美国Becton Dickinson）。

转贴于

2 方法

2.1 细胞株及培养条件 雌激素敏感的MCF-7人乳腺癌细胞由日本和汉药研究所提供。以含5%胎牛血清（Hyclone）的DMEM培养基培养传代。培养条件：37℃，5%CO2，相对湿度95%。

2.2 人血清中甾体激素的去除成年人血清购于Sigma公司，按E-screen法去除其中的甾体激素［4，5］。

2.3 细胞增殖实验按E-screen法［5］并稍作修改，普通培养的MCF-7细胞经胰蛋白酶消化后以104个细胞/ml接种于96孔细胞培养板中，每孔100 μl，贴壁24h后去除原培养基，换成实验用培养基：无酚红的DMEM基加10%热灭活的无雌激素人血清。继续培养5 d，此时加入阳性（雌二醇）对照组设10-13～10-9mol/L 5个浓度，不同浓度的受试物和阴性（溶剂）对照组，每个浓度设6个复孔。6 d后弃上清液，每孔加5 mg/ml的四唑盐（MTT）30 μl，继续培养4 h。吸去孔中的培养液，每孔加入150 μl的DMSO，在540 nm波长测定吸光度并计算增殖率，结果见表1。

2.4 酵母菌株和培养基的建立 过夜培养的酵母转种至新的SD液体培养基中，加入不同浓度的植物提取物，于30℃恒温振荡器中培养4h，然后在595 nm测定吸光度。

2.5 β-半乳糖苷酶活性的测定 测定并记录培养液的OD595，离心，弃取上清液，加入Zymolase 溶液，置37℃水浴中培养15 min，再加入ONPG溶液，置30℃水浴中培养30 min，加入1MNa2CO3100 μl终止反应。在450，540 nm波长测定吸光度，并计算β-半乳糖苷酶活性（U）值。结果见表1。

（U）值=1000×（A450－1.75×A540）(ONPG反应时间t×0.05×A595)

2.6 统计处理 所有数据均为3个重复的平均值，并表示为平均值(±s)。利用Dunnett′s 进行统计处理。

表1 9种中药对MCF-7细胞增殖与酵母菌筛检实验的影响（略）

3 结果

3.1 9种中药对MCF-7细胞的增殖阳性对照(雌二醇)从浓度10-13～10-9mol/L对MCF-7人乳腺癌细胞增殖力与对照组相比均有显著性，并在10-10mol/L组实验对MCF-7细胞增殖力最强，与其它各组相比差异有显著性。说明本次实验结果是可靠的。各剂量组结果显示，高剂量川芎和牡丹皮对细胞的增殖率与空白组相比有显著性差异（P﹤0.01），当归和泽泻有差异；高剂量和低剂量芍药和白术对细胞的增殖率与空白组相比有差异（P﹤0.05）；低剂量川芎和牡丹皮有差异。

3.2 酵母菌雌激素筛检实验结果显示当归、泽泻在高剂量和低剂量使β-半乳糖苷酶活性与空白组相比有显著性差异（P﹤0.01）；高剂量川芎、桂枝使β-半乳糖苷酶活性与空白组相比有差异（P﹤0.05）；低剂量牡丹皮使β-半乳糖苷酶活性与空白组相比有差异（P﹤0.05）。

3.3 茯苓等9种中药的体外雌激素活性被检样品中当归、泽泻、川芎、牡丹皮、桂枝中均有体外雌激素活性，芍药和白术在MCF-7细胞增殖实验中有活性，茯苓和桃仁均未检出有体外雌激素活性。至于何种成分具有植物雌激素作用，需进一步进行化学成分的研究。

4 讨论

本实验成功地引入了人乳腺癌细胞（MCF-7）体外增殖法快速筛检中药雌激素的方法。实验中雌二醇的最低检测浓度为1×10-13mol/L，在1×10-10mol/L可引起MCF-7细胞的明显增殖，增殖率为255%，与酵母菌雌激素筛检实验相比，该实验的敏感性更高。建立稳定的方法后，检测周期只需要6 d，且操作简便，不需要复杂的仪器设备，适合于大量化合物的初选。实验所用的细胞和血清都来自人类，结果可能更好地外推至人类。

有机体是一个复杂的体系，体外实验结果最终仍需整体动物实验加以验证，结果才能更加准确可靠。

国内外文献中植物雌激素活性检测的方法主要采用经典动物实验法(子宫增重、阴道细胞角化法)，受多种因素影响，结果较粗糙，且不同研究者会得出不同的结论，如丹参、川牛膝、鹿茸等中药有的学者认为含雌激素活性而另一些学者却认为不含植物雌激素活性，因此在目前尚无灵敏度高和特异性强的检测方法的情况下，可以考虑多种方法的联合使用，以免得出错误的结论。

参考文献

［1］ 唐传核，杨晓泉，彭志英. 植物雌激素研究概况（Ⅰ）——化学结构，分类以及在食品中的含量［J］.中国食品添加剂，2002，3：43.

［2］ Zava DT. Estrogenic bioactivity of phytoestrogens in human breast cancer in monolager cluturre［J］. J Nutr， 1995， 125: 807.

［3］ Routledge EJ，Sumpter JP. Estrogenic activity of surfactants and some of their degradation products assessed using a recombinant yeast screen ［J］.Environ Toxicol Chem， 1996， 15: 241.

炫耀的幸福范文第5篇

关键词：骨髓增生异常综合征；青黄散；雄黄；砷；克隆选择性；线粒体膜电位

doi：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.06.004

中图分类号：r259.513 文献标识码：a 文章编号：1005-5304（2013）06-0008-03

本院血液科应用含砷中药复方青黄散治疗恶性血液病已有50余年的历史[1-2]。目前，国内广泛应用砷制剂治疗恶性血液病，取得令人满意的效果[3]。砷在体内持续发挥作用，需要维持有效的血砷浓度。巯基是砷剂发挥作用的重要化学靶点，而线粒体是对砷剂作用最敏感的细胞器，砷剂与巯基结合后，导致线粒体通透性转运孔道开放，线粒体跨膜电位（membrane potentials，ψm）下降或消失，诱导细胞凋亡[4]。

近年来，我们应用小剂量青黄散治疗骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，mds）亦取得了很好的疗效[1，5]。mds是一组起源于造血干（祖）细胞的克隆性异质性疾患，高风险向白血病转化[6]。细胞克隆类型在mds治疗选择与预后判断中具有独立的意义[7-8]。我们的既往研究显示，青黄散治疗mds的疗效与mds的克隆类型有关，正常核型与+8克隆异常者对青黄散反应较好，而其他克隆异常者反应较差[9-10]。本研究通过测定不同克隆类型的mds患者治疗前后血液砷的含量、线粒体ψm的改变，分析青黄散在不同克隆类型mds患者的体内效应状况，探讨含砷中药复方青黄散治疗mds克隆选择性的可能机理，为mds的遗传学分型治疗提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2010年2月-2012年4月于本院接受青黄散治疗的mds患者40例，为治疗组，男性23例，女性17例，年龄9～81岁，平均（42.2±18.1）岁。30例未接受青黄散治疗的mds患者作为未治疗组。10例正常人为本院职工，作为健康对照组。

1.2 治疗方法

治疗组：给予青黄散胶囊[本院制剂室提供，每粒含雄黄（as2s2）0.16 g]1粒/d，晚饭后立即服用。所有mds患者加用补肾健脾中药汤剂（熟地黄30 g，山药10 g，山萸肉10 g，茯苓10 g，泽泻10 g，补骨脂15 g，菟丝子15 g，桑葚30 g，制何首乌20 g，党参20 g，炒白术10 g等），每日1剂，水煎，分2次服。就诊前服用雄激素治疗者仍继续服用，司坦唑醇2 mg/次，或十一酸睾酮40 mg/次，2～3次/d，口服，葡醛内酯100 mg/次， 3次/d，口服。其他西药如环孢菌素a、沙利度胺、促红细胞生成素等入组前均停用。若血红蛋白<50 g/l，血小板计数<20×109/l，输注成分血。3个月为1个疗程，2个疗程后判断疗效。

未治疗组：mds初诊或就诊前服用雄激素或/和环孢菌素a，不使用青黄散以及其他含砷制剂。

1.3 疗效标准

参照2000年国际工作组指定的mds疗效标准[11]，分为有效（包括完全缓解、部分缓解、血液学进步）和无效（治疗失败）。

1.4 砷浓度检测

血样标本采集时间在服药后10～12 h，采用高效液相色谱（hplc）与电耦合等离子体质谱（icp-ms）联用技术对全血及血浆进行砷浓度的检测，检出限：总砷0.03 ?g/l。

1.5 线粒体膜电位测定

取edta抗凝骨髓液2 ml，分离单个核细胞，取1×106个细胞，按照jc-1试剂盒说明，

标记jc-1荧光，用流式细胞仪测定。fl1（绿色荧光）的pmt值为525 bp，fl2（红色荧光）的pmt值为575 bp。用fl2/fl1的荧光强度比值反映线粒体ψm。

1.6 克隆类型的确定

骨髓细胞经24～48 h培养，g-显带，根据《人类细胞遗传学国际命名体制（iscn，2005）》判定核型异常[12]。

1.7 异常克隆类型鉴定

主要异常克隆应用荧光原位技术（fish）进行鉴定，荧光探针（cep8、d5s23-egr1、d7s522-cep7以及d20s108）均为vysis产品，并采用hybrite变性/杂交系统。应用nikon全自动显微镜及ai全自动fish自动分析系统分析荧光信号。每个样本计数200个以上间期细胞。

1.8 统计学方法

采用spss18.0统计软件进行分析。计量资料用—x±s表示，各期血砷水平之间的比较，两样本均数比较用t检验，多样本均数比较采用方差分析法。血砷浓度和服药时间的相关性，用相关性分析和线性回归分析。全部统计方法均采用双侧检验。p<0.05表示差异有统计学意义。

2.1 青黄散总体疗效及其克隆选择性

治疗组40例中，有效30例（75.0%），包括完全缓解10例（25.0%）、部分缓解4例（10.0%）、血液学进步16例（40.0%），无效10例（25.0%），有效率为75.0%。

经过常规染色体分析确定，并经过fish鉴定，40例治疗组患者中，正常克隆24例，+8异常克隆6例，其他异常克隆10例，异常克隆检出率40%。将治疗组患者按照克隆类型分为2组，a组为正常核型和+8克隆异常，共30例，有效24例；b组为其他异常克隆类型，共10例，有效6例。a组疗效优于b组（p<0.05）。

2.2 青黄散克隆选择性与砷体内效应相关性

2.2.1 青黄散治疗后血砷浓度 全血、血浆砷浓度测定结果显示，未治疗组与健康对照组比较差异无统计学意义（p>0.05）。治疗组全血及血浆砷浓度明显高于未治疗组（p<0.05）和健康对照组（p<0.05）。提示mds患者口服青黄散后，砷被人体少量吸收。同时发现，治疗组的全血砷浓度明显高于血浆砷浓度（p<0.05）。提示mds患者服用青黄散后，大部分砷进入血液细胞内。见表1。

2.2.2 青黄散服药时间与血砷浓度的相关性 对治疗组患者的服药时间长短和全血砷浓度、血浆砷浓度进行相关性分析，两变量的皮尔逊相关系数分别为0.061、-0.195，双侧检验概率p值分别为0.703、0.223，差异无统计学意义。提示口服青黄散时间的长短和血砷浓度没有明显相关性。见图1。

2.2.3 青黄散疗效与血砷浓度的关系 青黄散治疗有效患者的全血砷浓度明显高于治疗失败的患者（p<0.05）。而青黄散治疗有效患者的血浆砷浓度与治疗失败患者相比，差异无统计学意义（p>0.05）。提示mds患者服用青黄散后，砷进入血液细胞内发挥作用。见表2。

2.2.4 青黄散的克隆选择性与全血砷浓度的相关性 40例治疗组患者，以疗效好的正常核型和+8异常患者为a组，疗效较差的其他异常核型患者为b组，2组全血砷浓度差异无统计学意义（p>0.05），提示青黄散治疗mds对克隆的选择性与血砷浓度没有相关性。见表3。

2.2.5 青黄散治疗后骨髓细胞线粒体膜电位变化 治疗组28例患者检测了骨髓单个核细胞线粒体ψm，为10.83%±8.47%，未治疗组30例患者的线粒体ψm为10.61%±9.31%。2组比较，线粒体ψm的变化差异无统计学意义（p>0.05）。提示口服青黄散后mds患者的线粒体ψm没有明显变化。青黄散治疗前后线粒体ψm情况见图2。

图2 青黄散治疗前后线粒体ψm的变化

2.2.6 青黄散治疗后线粒体膜电位与血砷浓度的相关性 对治疗组28例患者的线粒体ψm与血砷浓度的相关性进行了分析，结果显示，相关系数为-0.262，p=0.89，提示mds患者口服青黄散后的线粒体ψm与全血砷浓度没有相关性。见图3。

3 讨论

3.1 骨髓增生异常综合征克隆类型以及对治疗方法的选择性

mds是一组起源于造血干（祖）细胞的克隆性异质性疾患，大约40%～60%的mds患者具有染色体异常克隆，而大约50%的患者为正常核型。本组40例患者中，16例患者伴随染色体克隆异常，异常克隆发生率为40%，其中+8克隆是mds最常见的染色体异常，与文献[13]以及我们的既往报道[9]一致。

遗传学分型是一种能反映mds疾病本质的分型方法[14]，细胞克隆类型在mds治疗选择与预后判断中具有独立的意义[7-8]。不同治疗方法对不同

隆类型mds患者的疗效差异明显，如+8核型患者对免疫抑制剂反应较好、免疫调节剂已成为5q-核型患者的首选药物、细胞因子适宜于正常核型患者等，表明mds不同克隆类型对治疗方法具有选择性[8]。

3.2 砷制剂在骨髓增生异常综合征治疗中的应用及体内效应

砷制剂包括砒霜提取物三氧化二砷（as2o3）以及雄黄（as2s2，as4s4）已在国内外广泛应用于mds的治疗，无论是as2o3单药还是联合用药、雄黄单药及其复方在mds治疗中具有独特的地位，安全有效[3，5]。

砷在体内持续发挥作用，需要维持有效的血药浓度。正常人全血砷水平低于5.0 ?g/l[4]。雄黄中as2s2含量大于90%，在水中溶解度很低，少量可被人体吸收。本组患者治疗后全血砷含量明显高于未治疗患者（p<0.05）与健康对照者（p<0.05）。有研究者给予患者每日口服as4s4 3.0 g，砷的吸收率约为日服量的0.2%[4]。本组患者每日口服1粒青黄散（含雄黄0.16 g），砷的吸收率约为日服量的0.05%。治疗有效患者的全血砷浓度明显高于治疗失败的患者（p<0.05），提示全血砷浓度及临床疗效之间存在一定的相关性。同时发现，mds患者服用青黄散后的全血砷浓度明显高于血浆砷浓度（p<0.05），提示砷被人体吸收后，进入细胞内发挥效用。

砷在细胞内发挥作用最敏感的细胞器是线粒体，重要化学靶点是巯基[4]。砷与巯基结合后，线粒体通透性转运孔道开放，线粒体跨膜电位下降或消失，导致细胞凋亡级联反应，一旦线粒体崩溃，则细胞凋亡不可逆转[4]。本组患者经青黄散治疗后线粒体ψm没有明显变化（p>0.05），提示青黄散每日1粒（含雄黄0.16 g）不会破坏细胞线粒体跨膜电位，也不引起细胞凋亡。

3.3 青黄散治疗骨髓增生异常综合征的克隆选择性及其与砷体内效应的相关性