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【关键词】 扶正方药 复发性念珠菌性阴道炎
念珠菌性阴道炎(candidal vaginitis)是妇女常见的阴道黏膜真菌感染性疾病,以白色念珠菌为主要致病菌。近年来,该病发病率呈上升趋势,部分患者反复发作,转变为复发性念珠菌性阴道炎(recurrent vulvo vaginal cadidiasis)。目前对复发性念珠菌性阴道炎的预防、治疗效果不理想。本研究通过建立复发性念珠菌性阴道炎小鼠模型,探讨了扶正方药对其的抗真菌作用。
1 材料
1.1 动物 清洁级,健康雌性ICR小鼠70只,鼠龄8~9周,体重(21±2)g,由河北医科大学实验动物中心提供。动物以标准饲料喂养,自然光线,自由饮食饮水。
1.2 药物 扶正方药煎液,处方由黄芪、党参、茯苓、苍术、山药各20g组成,取诸药加水共煎,共2次,合并煎液,浓缩、滤过,滤液加蒸馏水调至药物浓度为0.125 g生药/ml,4~8℃冰箱中保存备用。
1.3 菌液[1] 取新传代白色念珠菌(临床株,由河北省中医院检验科从念珠菌性阴道炎患者中分离并鉴定),接种于沙保氏液体培养基,37℃培养48 h,镜检证明念珠菌已产生假菌丝,将培养液2 000 r/min离心10 min,取沉淀加入适量PBS制成孢子液,血细胞记数仪进行孢子计数,调整菌液浓度为5.0×106个孢子/ml,4~8℃冰箱中保存备用。
1.4 试剂 苯甲酸雌二醇注射液,1 mg/ml,上海通用药业股份有限公司生产。伊曲康唑胶囊,100 mg/粒,西安杨森制药有限公司生产,临用前用蒸馏水配成浓度为0.25 mg/ml的混悬液。
2 方法
2.1 白色念珠菌初次感染[2]将所有动物进行雌激素化处理,每只小鼠后腿皮下注射(sc)苯甲酸雌二醇注射液(按4 mg/kg体重给予),1次/2 d,共3次。于雌激素化处理第7天(接种日),将真菌悬液10 μl(即白色念珠菌孢子接种量为5×104个)注入小鼠阴道深处,每只小鼠接种后倒置5 min防止菌液溢出,以感染后第2天阴道分泌物镜检和培养检查均有假菌丝和芽生孢子的白色念珠菌,证实初次感染成功。
2.2 复发性念珠菌性阴道炎模型建立[3~5]初次感染实验结束后第5周末,用无菌棉签蘸取小鼠阴道分泌物,逐只做涂片检查, 镜检阴性说明动物初次感染后恢复健康。选取镜检阴性小鼠36只随机分为模型对照组、常规治疗组和扶正方药组,每组动物12只。3组动物均于分组后第13天进行接种1次(方法同初次感染)。常规治疗组于接种当日开始灌胃伊曲康唑(按2 mg/kg体重,相当于临床常用剂量的6倍);模型对照组于接种当日开始灌胃以相应容量的生理盐水;两组灌胃均1次/d,连续3 d。扶正方药组于分组当日开始灌胃扶正方药煎液(按10g生药/kg体重,相当于临床等效剂量的6倍),1次/d,连续15 d。
2.3 指标观测[6] 于末次灌胃后第1天,各组小鼠行阴道涂片检查,观察白色念珠菌感染情况,计算病原体转阴率,根据白色念珠菌转阴率判断扶正方药对小鼠复发性念珠菌性阴道炎模型的影响。应用SPSS 12.0软件对数据进行统计分析,分析方法采用χ2检验。
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3 结果
模型对照组病原体转阴数为0;常规治疗组转阴数为8只,转阴率66.7%;扶正方药组转阴数为12只,转阴率100%。与常规治疗组比较,扶正方药组白色念珠菌转阴率明显提高,具有显著性差异(P
表1 扶正方药对复发性念珠菌性阴道炎小鼠模型抗真菌治疗的影响 (略)
与模型对照组比较,P
4 讨论
念珠菌性阴道炎属于中医“阴痒”“带下”范畴。中医认为该病尤其是复发性念珠菌性阴道炎与机体正气虚衰有关,主要涉及脾肾二脏。肾阳不足则气化失司,脾运失健则不能运化水湿,致湿邪久蕴,变生带下缠绵难愈或愈后即发。治疗原则须标本兼治,祛邪与扶正并举。现代医学认为复发性念珠菌性阴道炎的发病机理与自身免疫力低下、阴道抗病力下降有关。
笔者认为,体质是疾病产生的根本原因,且在疾病的发生、发展及转归过程中起主要作用, 体质差往往会导致多种疾病的发生,而决定人体正气盛衰又与脾肾功能有关。本研究自拟扶正方药,方中诸药合用可健脾、益气、补肾,扶正固本;现代药理研究证明,黄芪、党参、茯苓、苍术、山药均可增强体质,提高机体细胞免疫和体液免疫功能,有利于治疗阴道炎症,防止念珠菌性阴道炎复发。采用扶正方药灌胃,研究其对复发性念珠菌性阴道炎的动物实验尚未见报道,本研究结果显示扶正方药内服是有效干预复发性念珠菌性阴道炎的有效方法,可收到较好的远期疗效。
参考文献
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【关键词】菌体裂解法;检测;结核杆菌;药物敏感性;研究
自从结核病菌被人类发现以来,人类就一直致力于研究结核病的发病机理,以及寻求一种好的治疗方法,可以彻底根治结核病菌,免除患者的痛苦。随着科技的发展和医疗技术水平的稳步提高,越来越多的方法被人们发现,对于结核病菌的实验诊断来说,传统的诊疗方式不仅耗费时间长,而且诊断结果往往还差强人意。因此,对于结核病菌的检测和治疗,人们一直没有停止寻求新方法的脚步,医疗界需要一个快速且准确的诊断方法来彻底检测结核病菌。分支杆菌噬菌体恰恰迎合了人类的这一需求,其对于分支杆菌具有很强的特异性,常常被作为工具应用于结核杆菌的治疗中。本文运用菌体裂解法检测结核杆菌药物敏感性效果显著,现将实验过程陈列如下:
1资料与方法
1.1一般资料将我院2011年6月至2011年10月间收治的110肺结核患者作为实验对象,取患者清晨第一口痰液作为痰液标本,其中有92例患者从未接受医院治疗,18例患者则正在接受治疗。经过药物敏感实验得到分离菌株110株,这其中有敏感菌株37株,对异烟肼耐药性较好的为36株,对利福平耐药性较好的为37株。
1.2实验试剂将(法国维达莱勃公司)生产的TB-CHECK-1结核杆菌检测试剂盒作为本次实验试剂。
1.3试验方法①使用N-乙酰-L-半胱氨酸-NaOH法去除2毫升的痰液标本所受的污染,并用15毫升的PhageTek MB Medi Plus溶液洗涤,并将处理过的痰液标本放置于37℃的恒温环境中,搁置时间长度为一夜。②感染噬菌体的操作:将质量为100μL的噬菌体加入痰液标本里,在37℃的恒温条件下放置一小时。③消灭结核外部分散的噬菌体:将质量为100μL的强效病毒加入痰液标本里面,晃荡均匀,并将其放置5分钟。④将体积为5毫升的Medium plus与痰液标本混合,并放置一段时间。⑤将体积为1毫升的帮助细胞放入痰液标本中,并将混合液放置于培养器皿中,向器皿中放入体积为5毫升的液态琼脂胶,快速将容器转动,使二者混合均匀。将其放置于37℃的恒温环境中,静止一夜。
1.4判定标准①若在培养器皿中发现有0至20个菌斑,则说明结果呈阳性,代表痰液标本中结核杆菌已经全部死亡。②若在培养器皿中发现有21个或大于21个菌斑,则说明结果呈阴性,代表痰液标本中有未死的结核杆菌。
2结果
2.1将20例结核分枝杆菌放置于100、500、1000、10000、100000cFu/ml浓度的环境中,并运用噬菌体法来对结核菌的数量进行测定,测定结果见表1。
3讨论
结核病细菌学检查一直以来都是国内外医学关注的焦点。在国外,医疗技术水平较国内水平略高,对于结核杆菌药物敏感性的研究也就更为深入。目前,国外以分枝杆菌噬菌体为研究基础的细菌学主要有以下几个分类,结核杆菌分子生物学,结核病耐药性的检测,治疗结核疾病新药的研发及筛选等,其中对于结核杆菌药物敏感性的研究最为热烈。
本次试验研究主要使用菌体裂解法进行实验,其原理主要是裂解性噬菌体在宿主体内进行繁殖时,会裂解四周宿主,从而留下噬菌斑,因为噬菌斑的数量和未死的宿主菌数量成正比,因此可以以此为依据对结核菌进行培养和实验其对于药物的敏感程度。经过噬菌体裂解法检验可知,结核杆菌有很好的敏感性,当菌液的浓度为102cfu/ml时,即可进行实验。该法对于肺结核的检出概率为64.5%,而传统涂片对于肺结核的检出率则仅为30%上下,可见裂解法对于肺结核的检出率远远高于涂片法。正常情况下,涂阴培阴患者的阳性检出率为21.6%,可以更好的代表检查的真实结果。该法报告的时间为两至三天,远远小于培养痰液标本的时间。根据以上种种情况,可以判定菌体裂解法可以很好的节约时间,且检测结果准确,是一种很完美,且颇具研究前景的检测方式,该法对于细菌检查及治疗具有鲜明的指导性,同时,具有很高的应用价值,建议医学界广泛推广应用。
本次研究中有4例患者的涂阳培阳检测显示结果为阴性,调查发现,该两例病患均为在我院接受一个月治疗后的肺结核患者,之所以菌体数减轻,分析可能是经过短暂治疗后,致病菌的活力减退。本次试验,笔者总结出一些值得注意之处,总结如下:①菌体裂解法检测的阳性菌种有以下几种:结核分枝杆菌,牛分支杆菌,非洲分支杆菌。三种菌种在检测时显示均未死亡。②在进行实验时,要严格按照相关规定进行,设立阴、阳两性进行对比,且在操作时严格注意进行无菌操作你,严禁菌体遭受外界污染。③在对痰液标本进行处理时,方法要规范,尤其要注意彻底混合杀毒试剂。④在向平板中添加琼脂时,要严格控制琼脂温度,最好将其控制在50摄氏度到60摄氏度之间,以免伤害噬菌体。
参考文献
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细菌性感冒怎么办
1、细菌性感冒的治疗方法
对轻度感冒,仅有喷嚏,流涕及轻度咳嗽,则不需用药,可注意休息,多喝开水,保暖,往往可以不治而愈。如果症状仍不改善,可口服感冒清热冲剂或板兰根冲剂等中成药。
感冒较重有高烧者,除一般处理外,应尽快控制体温。可用物理降温法,如额,颈部放置冰块,湿毛巾冷敷,30%--35%酒精(或白酒加水冲淡一倍)擦颈部及两侧腋窝等方法;亦可选择用药物降温。
对感冒合并细菌感染,应加用抗生素治疗。
2、细菌性感冒吃什么好
2.1、细菌性感冒吃南瓜
功能特点:充饥、解毒。
南瓜既可以作为菜也可以当粮食,因为南瓜不仅可以充饥,而且还有一定的食疗价值。南瓜内含维生素和果胶,果胶有很好的吸附性,能粘结和消除体内细菌毒素和其他有毒物质,能起到解毒的作用。
2.2、细菌性感冒吃大蒜
功能特点:杀菌、杀虫、防流感、防感染。
大蒜是饮食中不可缺少的调味品,大蒜内含“硫化丙烯”的辣素,这种辣素的杀菌能力可达青霉素的十分之一,对病原菌和寄生虫都要很好的杀灭作用,可以起到预防流感、防止伤口感染、治疗感染性疾病和驱虫的作用。
2.3、细菌性感冒吃洋葱
功能特点:抗寒、杀菌、刺激胃肠、促进消化。
洋葱具有发散风寒的作用,气味辛辣,可抗寒,抵御流行感冒,且具有较强的杀菌作用。洋葱的营养丰富,能刺激胃、肠及消化腺分泌,增进食欲,促进消化,并能促进钠盐的排泄,从而降低血压,因此对高血压、高血脂和心脑血管病人有很好的保健作用。
3、细菌性感冒不能吃什么
3.1、细菌性感冒不能吃辛辣的食物
在感冒之后常会伴有身体发热的症状,辛辣的食物都是热性的食物,这样食用以后会增加身体的热量,不利于身体退热的。
3.2、细菌性感冒不能吃冷饮吃冰淇淋
感冒后身体的各个器官的功能都在下降,喝冷饮吃冰淇淋会使胃和肠道等消化器官的功能下降,影响对食物的吸收功能,这样就会加重病情。
3.3、细菌性感冒不能喝咖啡和浓茶
感冒之后需要多休息,喝了浓茶之后会使大脑处于兴奋状态,影响睡眠休息,这样会促使心跳加速血压升高,加重病情影响身体的恢复。同时浓茶水还会稀释分解药物,使药物失去功效。
3.4、细菌性感冒不能吃螃蟹等性寒的食物
性寒的食物会影响身体消化功能,是消化系统的功能下降,影响感冒病情的康复。
如何预防细菌性感冒
注意适量运动,锻炼身体增强体质,但不能运动过量,特别是重症肌无力病人运动过量会加重症状,所以病人要根据自己的情况选择一些有助于恢复健康的运动。病情较重的病人或长期期卧床不起的病人,应给予适当的按摩防止褥疮的产生。
起居有常,首先要按排好一日生活秩序,按时睡眠,按时起床,不要熬夜,要劳逸结合。
饮食要有节,痿证的病机与脾气亏虚关系密切,故调节饮食更为严重,不能过饥或过饱,在有规律,有节度,同时各种营养要调配恰当,不能偏食。
忌食生、泠、辛、辣性食物以及烟酒等刺激。
注意各种感染,生活保持有规律,饮食方面应多食富含高蛋白的食物如:鸡、鸭、鱼、瘦肉、豆腐、黄豆、鸡蛋、植物蛋白与动物蛋白以及新鲜蔬菜水果,营养搭配对病人来讲非常重要,注意食物的易消化性。
细菌性感冒症状
细菌性感冒起病可急可缓,而且全身症状相对病毒性感冒轻,上呼吸道症状,如打喷嚏、鼻塞、流鼻涕、咽干、咳嗽、声音嘶哑等通常不明显,但扁桃体或咽部红肿、疼痛较突出;还有脓涕、脓痰等脓性分泌物。血常规检查,细菌性感冒的患者白细胞计数通常都有升高。细菌性感冒通常不会在一定人群范围内同时出现,一般都是散发的,患者身旁少有或没有同时患上呼吸道感染的患者。
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2009年7~8月,我地陆续发生了雏鸡霉菌性肺炎病例,病雏死亡率为40%~70%,给养殖者造成了一定的经济损失。笔者对发病雏鸡进行了诊治,并实地跟踪调查病情及防治效果,现将该病的发生与诊治经过介绍如下。
1发病情况
笔者跟踪走访了11个养殖户,总计调查了6 509只雏鸡,发病雏鸡多为7~20日龄,其中出现临床症状的有3 030只,发病率高达40%以上,个别养殖户的鸡发病率高达70%。病雏出现临床症状后多于3d内死亡,发病从零星少数到逐渐增多,死亡数也逐渐增加。
2临床症状
病雏精神沉郁,多伏卧,蹲地,不愿活动,食欲减少甚至无,羽毛粗乱、脱落,双翅下垂似“抱窝”,张口呼吸困难,呼吸次数增加,伸颈张口,并时常发出音,张口吸气时颈部气囊明显胀大。部分病鸡出现面部肿胀,饮水、采食时频频甩头,鼻腔流出浆液性粘液,甚至有干酪样渗出物充塞,渴感增加,体温升高,迅速消瘦,生长缓慢。后期表现为下痢、吞咽困难,有的还出现神经症状。有的病例出现眼炎,轻者有浆性分泌物,重者眼皮下蓄积豆渣样物质,眼皮鼓起,角膜浑浊,眼球中央出现溃疡,以致失明。急性病例多在出现症状后2~3d死亡,且呈头颈角弓反张。慢性病程一般在1周左右。
3剖检病变
临床剖检时,主要症状表现为呼吸系统有明显的病变。气管内有浆液性渗出物,肺脏有黄白色结节,表面的结节一般呈球状,有时用手触摸,可感觉肺脏内部有粟粒大结节,切开后,可挤出黄白色干酪样渗出物。肝脏瘀血、肿大,呈脂肪肝,个别病例肝脏表面可见黄白色结节,有的病死雏有纤维素性肝周炎。少数病死雏有纤维素性心包炎,有的还出现腹膜炎。
4诊断
4.1初步诊断
根据临床症状和剖检症状即可作出初步诊断。
4.2实验室检查
取病死雏的少许肺部结节,置于载玻片上,滴2滴10%的氢氧化钾溶液,压盖盖玻片,在低倍显微镜下可见到呈放射状的分生孢子,孢子柄短,顶囊呈烧瓶状。用结节病灶接种于萨布罗培养基上,经37℃培养7d后可见圆形、白色丝绒状菌落。取菌落涂片镜检,见菌丝孢子形态与体内霉斑中的霉菌形态相同。
根据发病情况、临床症状和病理剖检以及实验室诊断,确诊为由曲霉菌感染引起的霉菌性肺炎。
5治疗
(1)隔离病雏,严重者淘汰。同时进行舍内环境、料槽、饮水器和饲养用具等的全面消毒。更换垫料,把发霉的垫料彻底清除,冲洗地面,用过氧乙酸或百毒杀消毒,对已污染的鸡舍用0.5%新洁尔灭溶液消毒或每平方米用福尔马林42mL和高锰酸钾21g熏蒸消毒。
(2)用1∶3 000的硫酸铜溶液饮水,连用3d,重症病雏可灌服1~3mL。
(3)制霉菌素拌料,每千克体重为2.5万IU,每天2次,连用3d。病重者可以直接灌服,每次5万IU,连用3d。
(4)克霉唑,按每天每只0.01g拌料喂服,连喂2~3d。碘化钾溶液,每1 000mL饮水中加入碘化钾5~10g,连用3~5d。
(5)中药疗法:鱼腥草60g,桔梗15g,蒲公英30g,筋骨草15g,山海螺30g,煎汁,饮水服用,供100只10~15日龄的雏鸡1d饮用,连用1~2周。
6体会
(1)2009年7~8月,我地连日多雨,气候潮湿,养鸡户存贮的玉米由于保管不善而致发霉,孳生霉菌,产生曲霉菌素,也有个别的养鸡户因贪图便宜,购买了发霉变质的玉米。虽然采取了在饲喂时添加一定量的制霉菌素或高温蒸煮等措施,但均无效果。这是因为常规的高温消毒法对这些致病的霉菌毒素无作用。用发霉变质的玉米饲喂雏鸡,极易发生霉菌性肺炎。
(2)2009年入夏以来,我地降雨过多,空气湿度大,使秸秆大多数生霉,以此秸秆做垫料,加之有的养殖户饲养管理不善,通风不良、潮湿,加剧了霉菌病的发生。据调查,这种情况是该病发生的辅助因素。因此,保持环境卫生,垫料经常翻晒,不使用发霉垫料并使之保持干燥对防治该病也尤为重要。
(3)此外,一次性添加饲料过多,剩料因舍内高温而发霉变质,部分雏鸡采食了这样的饲料而致发病。所以,添加饲料时,要做到少喂、勤添,以防饲料发霉变质。
(4)发生该病时,应马上停喂发霉的饲料(玉米)。同时,建议其他饲养户也不要使用发霉变质的玉米饲喂鸡。
(5)对出现明显临床症状的病鸡雏,采用上述治疗方案,效果不理想,大多数只能缓解病情,病死率仍达60%左右,对症状轻微或未发病的鸡有良好的治疗和预防作用。
(6)对部分出现纤维素性肝周炎的病雏,应同时用恩诺沙星或环丙沙星等药物控制继发细菌感染。
(7)实践证明,当饲养管理条件不良如育雏舍阴暗潮湿、通风不良、温度偏低和营养不良时,会使雏鸡机体抵抗力低下而易于发生该病,并可同时发生多种疾病,如大肠杆菌病、流行性感冒和链球菌病等,出现多种疾病共同发生的现象。本文中有的病例在诊断时,就发现多种疾病的综合症状,这给临床诊断带来一定的困难。因此,在临床中应结合具体情况,综合分析病情,科学地判断病因。
(8)在引进雏鸡前应对鸡舍及用具彻底消毒,选用新鲜干净垫草。引进雏鸡后要注意日常卫生消毒工作,勤换垫草,坚决不喂发霉变质的饲料,消除各种发病因素。
细菌性角膜炎是由细菌感染引起的,以角膜上皮缺损及缺损区下角膜基质坏死为主要特征的角膜炎症。中医认为,细菌性角膜炎也叫凝脂翳,是指黑睛生翳,状如凝脂,并常伴有黄液上冲症状的一种急重眼病,多因脏腑热盛,毒攻黑睛所致。此病患者的临床症状主要包括眼内沙涩刺痛、畏光流泪、哆多胶黏、视力障碍、白睛红赤、黑睛生翳、中间凹陷、上浮凝脂等。此病患者若不及时进行治疗,其眼部病变可迅速向纵深发展,导致头目俱痛、黑睛凹陷加大加深、甚至黑睛被穿破而出现蟹睛(角膜穿孔)等恶候。此病的病位在风轮,内应于肝胆。在临床上,笔者使用清肝胆之热、泻风轮火毒的方法治疗由风热邪毒夹肝火上攻于目而致的细菌性角膜炎,效果极佳。下面就介绍一则使用此法治疗细菌性角膜炎的病案,供参考:
赵先生今年35岁,是一位农民。两年前,他突然出现了右眼红肿、眼球剧痛、畏光流泪的症状,去医院检查后被诊断患了细菌性角膜炎。他曾使用氯霉素眼药水、利福平及疱疹净进行滴眼治疗,但效果不佳。来我院时,此患者的主要症状为:头目剧痛、面色红、发热口渴、形体肥胖、渴喜冷饮、大便秘结、小便短赤、舌红苔黄、脉弦滑、右眼眼睑浮肿、眼球内有明显的混合性充血水肿、角膜呈盘状、混浊的灰白色、表面粗糙不平、中心有米粒大的凹陷溃疡、患眼视力0.03。笔者认为他患的是风热邪毒夹肝火上攻于目型细菌性角膜炎,应使用清肝胆之热、泻风轮火毒的方法进行治疗,所用的处方为:桑叶、、蝉衣、黄芩、当归、丹皮、红花、夏枯草各10克,连翘、生地、蒺藜各15克,石决明、双花各30克,甘草3克。将上述药物用水煎煮后去渣取汁,每日服一剂,分早晚两次服下,连续用药9天为一个疗程。
在9天后,患者前来复诊,其患眼的红肿、畏光、流泪诸症减轻,但眼球仍胀痛,视力同前,脉弦滑,舌红苔黄根厚。笔者将原方中的黄芩、红花去掉,加入赤芍、茺蔚子、青箱子各10克,羚羊角粉(冲服)1克,嘱患者每日服药一剂,再继续用药20天。
20天后,患者再次来复诊,其患眼红肿的症状基本消退,眼球肿痛感明显减轻,但视物时眼球中央处仍如有异物遮挡,四周可见光亮。其角膜内的盘状混浊区域变小、表面光滑、中心仍有点状凹陷溃疡、脉弦细、舌红苔少。笔者改用清肝活血、滋阴去翳之法为其进行治疗,处方为:石决明、生地各20克,、蝉衣、当归、丹皮、赤芍、白芍、石斛、葳蕤、白蒺藜、木贼草、青葙子、红花各10克,甘草3克。患者使用此方十余剂后,其眼球胀痛感消失,眼中黑物缩小,感光范围扩大。此后,患者因工作需要返回单位,不久后来信告知笔者,其仍按原方继续用药治疗,患眼视力已达0.9,基本恢复正常。
在此患者初诊的处方中,笔者用、桑叶等轻清走上之品和黄芩、丹皮等苦寒泻下之品泻火清热、凉血明目治其标,用石决明、夏枯草、蒺藜、蝉衣清泻肝火治其本,并用活血凉血之品祛其瘀。在此患者的热毒症状明显缓解后,笔者使用多种平肝泻肝清肝类药物治其本,并使用润肺益胃养阴之品顾护其体内的阴液(恐热毒日久,伤及其体内阴液),取得了热祛、毒解、液还、目清的效果,从而治愈了此病。