医学影像技术技能

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医学影像技术技能范文第1篇

（曲阜师范大学生命科学学院，山东 曲阜 273165）

【摘要】目的：研究急性应激对小鼠空间学习记忆的影响及其机制。方法：以足底电击来建立急性应激小鼠模型，采用Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力，以免疫组化方法检测神经营养因子-3（NT-3）在小鼠海马和前脑皮层的表达。结果：水迷宫实验中，急性应激组小鼠与对照组相比，空间学习记忆显著提高（P<0.01）。在海马CA1区、CA3 区、齿状回及前脑皮层NT-3的表达显著增强（P<0.05，P<0.01）。结论：急性应激所致小鼠空间学习记忆功能的提高可能与脑内NT-3表达上调相关。

关键词 急性应激；学习记忆；神经营养因子-3；海马；前脑皮层

Effects of Acute Stress on Ability of Spatial Learning-Memory and Expression of NT-3 in Mice Brain

CHEN Qian　DU Na　XIAO Jing-shan　LI Yang　HUO Pan　LI Ya

（College of Life sciences, Qufu normal University, Qufu Shandong 273165, China）

【Abstract】Objective: To study the effects of acute stress on the spatial learning-memory function of mice and its mechanism. Methods: Using acute stress model mice induced by foot shock. The ability of spatial learning-memory of mice were determined by Morris Water maze task, and the expression of nerve neurotrophic factor 3 (NT-3) in the hippocampus (HP) and prefrontal cortex (PFC) were detected by immunohistochemical method. Results: The ability of spatial learning and memory in stress group mice were significantly enhanced (P<0.01), compared with the control group mice. The NT-3 expression in CA1,CA3, DG of HP and PFC were significantly increased in stress group mice (P<0.05, P<0.01). Conclusion: The acute stress causes the improvement of spatial and memory function in mice which may be closely related to the up-regulation of NT-3 expression in brain.

【Key words】Acute stress; Learning and memory; NT-3; HP; PFC

应激（stress）是指机体受到内外环境多种不利因素刺激时，为适应环境所出现的非特异性综合应答反应[1]。机体在应激时产生适应性反应，免疫、神经、内分泌等系统共同参与调节，来应对应激的损害。研究表明，应激对机体的影响是双重的，适度应激提高机体抵抗力和适应力，对机体有利，过强的应激则产生负面效应。中枢神经系统中，海马、前额叶皮层、下丘脑、纹状体及杏仁体等脑区与应激关系密切[2]。应激可引起中枢神经元的形态和功能改变，进而影响学习记忆功能[3]。神经营养因子-3（neurtrophin-3, NT-3）是神经营养因子家族成员，在中枢神经系统广泛分布，其功能涉及神经系统分化及发育方面，参与损伤后修复，可维持神经元的存活和正常功能[4]。本实验研究急性应激模型小鼠空间学习记忆功能的变化以及海马和前额叶皮层NT-3表达的变化，探讨急性应激对小鼠空间学习记忆的影响及其机制。

1　材料与方法

1.1　实验动物与分组

2月龄昆明品系小鼠（清洁级），雌雄各半，体重20±2g，购自山东鲁抗医药动物实验中心。自然昼夜节律光照下，自由饮水，进食，实验人员每日抓捉小鼠使之适应操作。小鼠随机分为对照组和急性应激组，每组12只。

1.2　建立急性应激模型

急性应激组采用足底电击作为单一应激源（电压36V，15s/次，每次持续30s，共30次）。对照组不接受电击，正常状态饲养。

1.3　Morris水迷宫检测学习记忆能力

采用Morris水迷宫，检测两组小鼠的学习记忆能力。Morris水迷宫由圆形水池和池内一可移动平台组成，直径80cm，高50cm，水温26±1℃。测试程序包括定位航行和空间搜索两个实验步骤。水迷宫被均分为4个象限，平台置放于第一象限（目标象限），并在第三象限池壁做红色标记，使之于平台连线为水池直径。定位航行实验共2d，每只小鼠每天两个训练周期，每个周期内接受4次找平台训练，小鼠分别对应一个象限入水，每次训练120s。记录小鼠入水至找到水下平台的逃避潜伏期（escape latency）。第3d进行空间搜索试验，撤除平台，小鼠由第三象限入水点入水，记录小鼠120s内在4个象限的游泳时间，以检测小鼠对平台（目标象限）的记忆能力。在定位航行的每个训练周期前和空间搜索试验前对应激组的小鼠足底电击。

1.4　小鼠海马和前额叶皮层NT-3的表达

在完成水迷宫空间试验后，戊巴比妥钠注射麻醉小鼠，开胸腔暴露出心脏，快速经心先后灌注37℃生理盐水50ml及4℃的4%多聚甲醛溶液50ml，开颅取脑，然后再固定2h，经梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋后进行冠状切片（厚约5μm）。然后进行免疫组化实验，一抗及试剂盒均购自武汉博士德生物公司，按照试剂盒的要求操作。阴性对照选择PBS（磷酸缓冲液）代替一抗。选择每只小鼠相应海马部位和前脑皮层（PFC）切片3张，每张随机选取两个不相重叠的视野，用Motic Images Advanced 3.2图像处理系统对海马和前脑皮层的NT-3阳性细胞平均目标灰度值进行分析。

1.5　统计学处理

所有数据以平均数±标准差(x±s)来表示，水迷宫2d定位航行逃避潜伏期采用重复测量方差分析（repeated-measures ANOVA）；第3d空间搜索试验各象限游泳时间采用单因素方差分析（one-way ANOVA），组间比较以 Newman-Keuls法分析。其他数据组间比较用非配对t检验分析。P<0.05时说明有统计学差异。

2　结果

2.1　各组小鼠空间学习记忆功能的变化

统计数据显示，两天的定位航行试验中，对照组和应激组小鼠的逃避潜伏期迅速下降（表1）；有统计学显著性差异（F=6.172，P<0.01）；与对照组相比，应激组在第2、3、4训练周期的逃避潜伏期明显缩短，有显著性差异（P<0.05，P<0.01，P<0.01）。 结果表明，急性应激能明显增强小鼠的空间学习能力。

*P <0.05，**P <0.01：与对照组比较(ANOVA,N-K检验)；n=12.

在空间搜索实验中，在目标象限（第一象限）对照组和应激组小鼠均停留最长时间（表2）；对照组小鼠 （F=10.03，P<0.01）和应激组小鼠（F=20.61，P<0.01） 在目标象限停留的时间均显著长于在二、三、四象限的时间。与对照组比，在目标象限应激组小鼠的停留时间显著延长（P<0.05），而在目标象限的对面象限（第三象限）停留测时间显著减短 （P<0.05） 结果表明，急性应激后小鼠空间记忆保持能力增强。

*P <0.05，与对照组比较(ANOVA，N-K检验)；n=12.

2.2　各组小鼠海马和前脑皮层NT-3蛋白的表达

免疫组织化学染色表明，急性应激后，与对照组小鼠比较，应激组小鼠海马CA1 、CA3 区、 DG 区及前额叶皮层 NT-3的表达显著增强。与对照组比较（表3），应激组小鼠在各脑区的NT-3 阳性神经元平均目标灰度值显著减少（P<0.05）。

*P<0.05, 与对照组比较（非配对t检验）；n=12.

3　讨论

研究表明，应激对机体的影响具有双重性，适度的应激对机体起积极作用，而长久、强烈的刺激使中枢神经元形态改变及功能障碍，影响脑的认知功能，引起学习记忆能力的下降。海马在应激导致行为变化方面发挥重要作用，是学习记忆的关键脑区[5]。英国心理学家Morris设计水迷宫用于学习记忆脑机制研究，能对动物空间学习记忆能力作出较准确的反映。本实验结果显示，急性应激后小鼠在Morris水迷宫中的逃避潜伏期明显缩短，在空间搜索试验中，小鼠目标象限停留时间明显延长，说明急性应激能使动物的空间学习记忆功能显著增强。

NT-3在中枢和外周神经系统广泛分布，主要在海马、脑干、背根节、脊髓等[6]。NT-3的一级结构与NGF家族其他成员有一致的保守区，又有可变区。NT-3主要通过酪氨酸激酶受体（trkC）受体来发挥生物学效应。NT-3生物学效应广泛，在体内能够支持感觉的运动神经元存活，在神经系统发育早期，能够促进神经嵴细胞的发育，对外周感觉神经元的发生及数量起调节作用[7]。NT-3缺乏或表达降低会影响学习记忆等功能，并与神经退行性疾病密切相关。NT-3能阻止老年痴呆患者胆碱能神经元退变，对于基底前脑胆碱能神经元退变导致的学习记忆功能障碍有改善作用。NT-3选择性的结合 trkC受体而发挥生理效应。trkC是 trk受体家族的重要成员，作为NT-3的高亲和力受体，分布在海马的锥体细胞层、齿状回、大脑皮质的外层细胞簇及小脑颗粒细胞层，NT-3也在这些区域表达，提示NT-3与 trkC形成联合自分泌环路，对神经元存活起一定作用[8]。

我们先前的研究表明，急性应激引起小鼠空间学习记忆功能增强，脑内海马和前脑皮层GDNF的表达明显增加[9]。本实验结果表明，急性应激后，应激组小鼠的海马和前额叶皮层NT-3的表达显著增强。结果显示，急性应激使小鼠海马和前脑皮层的神经元活动发生明显变化。海马和前脑皮层与学习记忆功能密切相关，海马更是调节应激反应的高级中枢[10]。急性应激后，小鼠空间学习记忆功能的提高与海马和前脑皮层NT-3表达增强是一致的，结果提示NT-3可能参与调控急性应激对动物空间学习记忆功能的改变，其表达上调可能是导致空间学习记忆功能改变的机制之一。

参考文献

［1］Selye H. The stress of life[M].New York:McGraw-Hill,1956.

［2］夏国玲.应激损害大脑[J].国外医学精神病分册,2000,27:43-46.

［3］张亚楠,王玉其,陈亚静,等.慢性应激对小鼠空间学习记忆功能及脑内GDNF的影响[J].曲阜师范大学学报,2011,37:70-74.

［4］Chalazonitis A. N eurotrophin-3 as an essential signal for the developing nervous system[J]. Mol Neurobiol 1996, 12: 39-53.

［5］Gould E, Tanapat P, Rydel T, Hastings N.Regulation of hippocampal neurogenesis in adulthood[J]. Biol. Psychiatry, 2000, 48: 715-720.

［6］Ernfors P. Identification of cells in rat brain and perioheral tissues expressing mRNA f or members of the nerve growth factor family[J]. Neuron, 1990, 5: 511.

［7］Sheard PW,Bewick GS, Woolley AG, et al. Investigation of neuromuscular abnormalities in neurotrophin- 3- deficient mice[J]. Eur J Neurosci, 2010, 31: 29.

［8］Lamballe F, Klein R, Barbacid M,et al. A new member of the trk family of tyrosine protein kinases,is a receptor for neurotrophin-3[J]. Cell,1991,66:967-979.

［9］陈亚静,史建勋,张冠雄,李亚.急性应激对小鼠空间学习记忆功能及脑内GDNF表达的影响[J].信息科技,2012,6:53-54.

医学影像技术技能范文第2篇

【摘要】 目的 探究枸杞多糖对正常小鼠学习记忆能力的影响，为枸杞多糖在提高学习记忆能力方面的应用提供理论依据。 方法 选用SPF级昆明小鼠50只，雌雄各半，分为5组，分别为空白对照组、生理盐水对照组、LBP高、中、低剂量组，每组10只。LBP高、中、低剂量组给予LBP 2g/kg、1g/kg、0.5g/kg灌胃，分别配制为0.12g/ml、0.06g/ml、0.03g/ml的混悬液；生理盐水对照组则给予等量的生理盐水灌胃，空白对照组不作处理。第5周开始用Morris水迷宫对小鼠进行学习记忆测试。 结果 在定位航行试验中，前3天各组平均逃避潜伏期差异无统计学意义（p>0.05），第4～5天LBP中、高剂量组学习能力较其他组有显著提高（p

【关键词】 枸杞多糖，水迷宫，学习，记忆

枸杞子是我国的传统名贵中药材，它在我国传统医学中具有重要的地位，近代医学研究表明， 枸杞中含多种营养成分和微量元素， 其中主要有效成分为枸杞多糖（ lycium barbarumpo lysaccharides， LBP） [1]，近年来，枸杞多糖成为一个研究的热点， 国内对枸杞多糖的提取分离、化学分析、药理作用及临床应用等进行了大量的研究， 并形成了较广泛的研究基础[2]。 相关研究表明，枸杞多糖具有调节免疫、清除自由基、抑制肿瘤、延缓衰老、修复神经、调节免疫、降血脂、降血糖、降血压和抗疲劳等作用[2-3]。本实验旨在探究枸杞多糖对正常小鼠记忆能力的影响，研究枸杞多糖的保健作用。

材料与方法

1 动物 昆明小鼠50只，FPS级，体重25～30g，雌性各半，由广西医科大学动物实验中心提供，采取随机化原则将小鼠分为5组，即空白对照组，生理盐水阴性对照组，LBP高、中、低剂量组，每组10只。

2 试剂 枸杞多糖（L.barbarum polysaccharides，LBP）：购于上海康舟真菌多糖有限公司；

3 给药方法 LBP高、中、低剂量组给予LBP高、中、低剂量组给予LBP2g/kg、1g/kg、0.5g/kg灌胃，分别配制为O.12g/ml、O.06g/ml、O.03g/ml的混悬液；空白对照组与AD模型组则给予等量的生理盐水灌胃。昼夜交替环境下饲养，由取食及饮水，连续灌胃4周。

4 进行Morris水迷宫实验 于第5周开始进行水迷宫实验，包括定位航行试验及空间探索试验两个阶段。

5 数据统计学处理： 实验数据以（均数±标准差）表示， 使用SPSS19. 0 统计软件进行单因素方差分析（One.Way ANOVA）。

结果

1 各组空间学习能力比较 前3天各组平均逃避潜伏期差异无统计学意义（p>0.05），第4～5天LBP中、高剂量组学习能力较其他组有显著提高（p>0.01）〖XC53.JPG；%60%60〗

2 各组空间探索能力比较 在空间探索试验中，对照组小鼠穿越平台所在区域的平均次数为5.20±0.32 LBP高、中、低剂量组平均穿环次数分别为10.09±0.33、11.70±0.44，5.10±0.54，LBP高、中剂量组与其他各组相比差异显著（p0.05）。〖XC54.JPG；%60%60〗

讨论

近几年，相关学者在各种病理条件或非正常条件下就枸杞多糖对小鼠学习记忆能力的影响这方面进行了大量研究。这些研究分别探索了枸杞多糖对锰中毒小鼠、染铅小鼠、脑缺血再灌流小鼠及AD模型小鼠的影响，较为一致地得出枸杞多糖通过修复和影响小鼠海马区的神经发生，进而提高小鼠学习记忆能力的结论[4-7]。这些研究均准对枸杞多糖对小鼠各种病理或非正常条件下的记忆力提升的功效，主要涉及枸杞多糖的治疗功效研究，然而罕有涉及枸杞多糖保健作用的研究。本实验以枸杞多糖能否提高正常小鼠的学习记忆能力为中心开展研究，并取得初步研究成果。

结论

本研究使用正常动物模型，以其学习记忆的提高为切入点，给予LBP灌胃处理，对LBP与学习记忆能力之间的关系进行初步究，结果如下：LBP中、剂量高可提高正常小鼠的学习记忆能力。至于LBP通过哪些机制来提高正常小鼠的学习记忆能力，需要进行进一步形态学研究来证实。

参考文献

[1] 燕宪涛，路新国.枸杞多糖生物活性的研究进展.中国食物与营养2011，17（11）：73―75

[2] 魏永祥，商希礼.枸杞多糖的研究进展.安徽农业科学，2010，38（11）：5834―5836.

[3] 孙桂菊，左平国.枸杞多糖功效研究及应用状况.东南大学学报（医学版），2010，29（2）：209―215.

[4] 温静，杨伯宁，任丹.枸杞多糖对锰中毒小鼠神经发生和学习记忆的影响.中国中西医结合杂志2010年3月第30卷第3期CJITWM March 2010，Vol.30，No.3

[5] 蔡宇，余绍蕾，张荣华.枸杞多糖对染铅小鼠行为功能保护及脑细胞Fas抗原表达的影响.环境与职业医学2005年12月第22卷第6期j EnvironOeeupMed，Dee 2005 Vol22 No.6

医学影像技术技能范文第3篇

【关键词】 肺癌根治性手术

1对象和方法

1.1对象选择200502/200708宁波大学医学院附属医院收治肺癌根治性手术患者74（男61，女13）例，年龄28~72（57±9）岁. 按围手术期输血与否分为输血组（19例）和非输血组（55例）；以同期开胸探查并被证实为肺部良性病变行手术的患者16例作为对照组. 两组间在年龄，性别，病理分型，临床分期等方面差异无统计学意义(P>0.05).

1.2方法输血组术前1 d至术后5 d期间，给予红细胞悬液或全血. 所有患者均于术前和术后14 d，抽取静脉血，采用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群CD3+，CD4+，CD8+和自然杀伤细胞，并计算CD4+/CD8+比值.

统计学处理：采用SPSS11.50统计软件进行统计学分析，数据以x±s表示，组内比较采用方差分析，组间比较采用t检验. P

2结果结果显示，患者T淋巴细胞亚群CD3+，CD4+，CD8+，自然杀伤细胞含量和CD4+/CD8+比值术前：输血组分别为：58.34±9.25，34.87±8.47，28.86±6.72，26.12±7.92和1.21±0.24；非输血组分别为：59.14±9.44，33.75±6.27，27.04±5.23，28.25±8.21和1.25±0.17，两组相比较，差异无统计学意义(P>0.05). 术后14 d，输血组分别为：52.28±8.54，29.64±7.10，29.34±7.15，25.01±5.82和1.01±0.28；非输血组分别为：58.40±7.43，32.85±5.20，26.69±7.62，28.34±6.25和1.23±0.30. 术后14 d输血组CD3+，CD4+与术前相比较有所下降，差异具有统计学意义(P0.05). 术后14 d输血组与非输血组相比较CD3+，CD4+，CD4+/CD8+比值和自然杀伤细胞均明显下降，差异具有统计学意义(P

参考文献

［1］ Jagoditsch M， Pozgainer P， Klingler A， et al. Impact of blood transfusions on recurrence and survival after rectal cancer surgery［J］. Dis Colon Rectum， 2006，49(8):1116-1130.

医学影像技术技能范文第4篇

【摘要】 目的 探讨鹿皮胶对60Coγ照射小鼠造血功能及免疫功能的改善作用。方法 小鼠60Coγ照射前、照射后，分别对空白组、模型组及鹿皮胶不同剂量干预组测定外周血象，并观察对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。结果 对60Coγ照射后引起的白细胞、红细胞数量的减少，鹿皮胶高剂量有明显促进恢复作用，与模型组比较有显著性差异（P

【关键词】 鹿皮胶；60Coγ辐射；小鼠；造血功能；免疫功能

鹿皮胶是以梅花鹿或马鹿的皮为主料配制而成的，具有补肾阳、益精血之功效〔1〕。本实验通过60Coγ射线照射小鼠复制血虚动物模型，以白细胞（WBC）计数、红细胞（RBC）计数、血小板（PLT）以及吞噬指数K、吞噬活性α为指标，观察鹿皮胶对60Coγ射线所致血虚动物模型的影响。

1 材料与方法

1.1 动物 昆明小鼠，60只，雌雄各半。体重18～22 g。由长春高新医学实验动物研究中心提供。合格证号：SCXK（吉）20030004。

1.2 药品及试剂 鹿皮胶：烊化配制成浓度为45%、30%、15%备用，长春中医药大学附属医院新药中心提供。阿胶：烊化配制成浓度为15%备用，山东东阿阿胶股份有限公司，批号：070170。

1.3 仪器 血液分析仪：MEK6318K型（日本光电公司）。紫外可见光分光光度计：7550型（上海分析仪器厂）。

1.4 方法

1.4.1 实验分组、血虚模型复制及给药剂量 健康昆明种小鼠60只，随机分为6组，每组10只。实验前各组尾尖取血，测定外周血象正常值。除正常对照组外，其他各组随后均给予60Coγ照射，一次全身照射剂量为550 md，照射时间为2 min 36.8 s，照射距离为4 m。照射后24 h分组给药：鹿皮胶高剂量组：9 g/kg（45%×20 ml/kg）；中剂量组：6 g/kg（30%×20 ml/kg）；低剂量组：3 g/kg（15%×20 ml/kg）；阳性药对照组（阿胶）：3 g/kg（15%×20 ml/kg）；对照组、模型组：同体积纯净水。各给药组每天灌胃给药1次，连续给药2 w，最后1次给药后24 h以尾尖取血10 μl，放入预先盛有10 ml稀释液的烧杯中，测定外周血象指标。

1.4.2 24 h后进行碳廓清实验 7550分光光度计，波长选定675 nm，0.1%的Na2CO3调零。实验时按时间顺序，经尾静脉注射印度墨汁0.05 ml/10 g。注射后1、5 min用吸管(预先用肝素溶液湿润)分别从眶后静脉取血20 μl，溶于2 ml 0.1％的Na2CO3溶液中摇匀。测量各样本光密度（OD），处死动物，取肝脾称重。计算吞噬指数K、吞噬活性α〔2〕。

1.5 统计学处理 数据以x±s表示，组间差异采用t检验。

2 结果

2.1 鹿皮胶对小鼠60Coγ照射前后外周血象的影响 模型组小鼠经60Coγ照射后2 w，测定外周血各项指标均有所改变；给药组给予不同剂量鹿皮胶2 w后再测定外周血象，各项指标均有不同程度的恢复，对60Coγ照射后引起的WBC、RBC的减少，鹿皮胶高剂量组具有明显促进恢复作用，与模型组比较有显著性差异（P

2.2 鹿皮胶对单核吞噬细胞吞噬功能的影响 鹿皮胶给药组动物吞噬细胞吞噬指数与模型组比较有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01），吞噬活性也明显提高（P＜0.05，P＜0.01）。见表2。

表1 鹿皮胶对60Coγ照射小鼠外周血象的影响（略）

与空白组比较：1）P＜0.05，2）P＜0.01；与模型组比较：3）P＜0.05

表2 鹿皮胶对小鼠非特异性免疫功能的影响（略）

与模型组比较：1）P

3 讨论

阿胶的补血药效已得到大量研究证实〔3～5〕。鹿皮胶的相关研究较少，鹿皮胶主要含有胶质、磷酸钙，另外还含有氨基酸及微量元素。现代研究表明，鹿皮胶具有补气、补血作用，主治妇女白带，崩漏不止，肾虚滑精，外用治恶疮〔6〕。本实验研究表明，鹿皮胶可升高血虚小鼠的WBC和RBC，对单核细胞吞噬作用有一定的促进作用。鹿皮胶的补血作用不亚于阿胶，值得开发应用。

参考文献

1 陈富军，白克杰，方玉先，等.略述鹿皮胶的临床应用及现代研究〔J〕.光明中医，2002；17（5）：501.

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4 王志海，何秀敏.阿胶补血作用机理初探〔J〕.山东中医杂志，1992；11(3):35.

医学影像技术技能范文第5篇

[关键词] 腹腔镜胆总管切开取石术；肝功能；血黏度；免疫球蛋白

[中图分类号] R657.42 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2014）07（b）-0044-05

腹腔镜胆总管切开取石术（LCHTD）逐渐取代传统的开腹胆总管探查术，成为治疗胆总管结石的常用方法之一。研究证实，腹腔镜胆总管切开取石术取石效果好，具有创伤小、出血少、术后恢复快等优点。但作为一种创伤性手术，仍然会使机体遭受到手术性创伤，如腹壁的切口及CO2气腹的建立、术后腹压的迅速下降等创伤性操作，可能造成患者出现缺血再灌注样改变，甚至可能引起患者肝功能的损害，对患者的血黏度及免疫功能产生一定的影响[1]。本研究旨在对比研究腹腔镜胆总管切开取石术与传统开腹取石术对患者肝功能、血黏度及免疫功能的影响，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2012年7月～2014年1月在高州市人民医院行LCHTD患者50例为腹腔镜组，其中男28例，女22例，年龄32～78岁，平均（43.3±7.1）岁，术前伴黄疸12例、单发性结石21例、多发性结石26例。另选择同期行传统开腹取石术患者50例为对照组，其中男29例，女21例，年龄29～76岁，平均（45.2±7.3）岁，其中术前伴黄疸14例、单发性结石24例、多发性结石29例。两组患者性别、年龄、临床表现等一般资料比较，差异均无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。本研究获医院伦理委员会批准，入组前均签署知情同意书。

1.2 手术方法

对照组行开腹胆总管切开取石术。腹腔镜组行LCHTD，一期缝合治疗胆总管结石。气管插管全麻，建立CO2气腹，应用腹腔镜切除胆囊，显露胆总管，在胆总管前壁开一小口再以弯剪刀延长0.6～0.8 cm，将胆石收集袋置入腹腔，扩大肋缘下锁骨中线处操作孔，置入纤维胆道镜，中段结石挤压至切口处以取石钳取出，下段结石以套石篮伸至结石远端后张开、收缩，结石可进入套石篮后连同胆道镜一起退出至温氏孔处，将结石放入胆石收集袋内，镜检至Oddis括约肌处无明显结石后，置导尿管与胆总管内探通下段后冲洗出絮状物及细小结石；持针器钳夹自带线针“8”字缝合胆总管上下端后，再适当间断缝合1～2针，一期缝合关闭胆总管。

1.3 检测指标与方法

术前及术后第1、3、7天晨8：00取空腹静脉血3～5 mL，应用全自动生化分析仪测定谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、血清总胆红素（TBIL）、血清白蛋白（ALB）。采用美国贝克曼库尔特流式细胞分析仪检测全血黏度、全血还原黏度及血浆黏度检测（毛细管式测量方法），并计算血细胞比容（HCT）。采用免疫速率散射比浊法检测血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM。采用流式细胞术测定后外周血淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+的变化。

1.4 统计学方法

采用统计软件SPSS 12.0对数据进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，重复测量的计量资料比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者术前、术后各项肝功能指标比较

术后1 d，两组患者ALT、AST、TBIL均较术前显著升高且达顶峰，而ALB较术前明显降低，差异均有统计学意义（P < 0.05），但腹腔镜组术后1 d上述指标与对照组比较差异无统计学意义（P > 0.05）。术后3 d腹腔镜组患者ALT、AST水平明显低于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。而两组患者TBIL较术后1 d降低，而ALB较术后1 d升高，但分别与术前比较，差异无统计学意义（P > 0.05），且两组患者术后3 d的TBIL、ALB组间比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。术后7 d腹腔镜组患者ALT、AST、TBIL、ALB分别低于术前，但组内、组间比较差异无统计学意义（P > 0.05）。见表1。

2.2 两组患者术前、术后各项血黏度指标比较

两组患者血浆黏度术后1 d均较术前明显升高，而术后3 d较术后1 d明显降低，但腹腔镜组患者术后1 d的血浆黏度明显低于对照组，差异均有统计学意义（P < 0.05）。腹腔镜组术后3 d全血黏度高切、低切分别明显低于对照组，差异均有统计学意义（P < 0.05），而其余未见明显变化。见表2。

2.3 两组患者术前、术后免疫球蛋白变化情况

术后1 d，两组患者IgA、IgG、IgM水平均较术前明显降低（P < 0.05），且腹腔镜组患者IgA、IgG、IgM水平降低程度较小；术后1 d腹腔镜组患者IgA、IgG、IgM分别明显高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表3。

2.4 两组患者术前、术后T细胞亚群动态变化情况比较

术后1 d，两组患者CD4+及CD4+/CD8+均明显低于术前（P < 0.05），且腹腔镜组患者术后1 d的CD4+/CD8+水平明显低于对照组（P < 0.05）。术后3 d，腹腔镜组患者CD3+、CD4+与对照组比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。术后7 d，两组患者CD3+、CD4+及CD4+/CD8+较术后3 d明显升高，但组间及组内比较差异无统计学意义（P > 0.05）。见表4。

3 讨论

本研究表1结果显示，术后1 d，两组患者的ALT、AST、TBIL均显著升高且达顶峰，均分别明显高于术前，而ALB均较术前明显降低（P < 0.05）。以上数据显示，LCHTD术后患者出现短暂的、轻度的血转氨酶和TBIL的升高，其原因考虑可能与以下因素有关：腹腔镜建立的CO2气腹，其压力对内脏产生影响，术中牵拉胆囊造成对肝脏的直接挤压或导致肝外胆管扭曲而致肝内胆管压力升高，过度使用电刀烧灼胆囊床造成对肝组织的直接损伤，术中操作促使微小结石跌入胆总管等[2-5]。但LCHTD避免了胆汁胆盐大量丢失造成的水电解质及内环境紊乱，有助于恢复受损的肝功能。本研究表1结果显示，术后3 d，腹腔镜和对照组患者的ALT、AST水平均较术后1 d明显降低，也仍明显高于术前（P < 0.05），且腹腔镜组患者术后3 d的ALT、AST水平明显低于对照组（P < 0.05）。与索运生等[6]报道的观点相符。

研究发现，手术创伤和疼痛应激使患者术后机体纤维蛋白溶解能力减弱，纤维蛋白浓度增加，导致血浆黏度升高，红细胞和血小板的聚集性增加，导致全血黏度增加[7-10]。近来腹腔镜手术与血液流变学的研究较为广泛，腹腔镜手术在气腹条件下完成，本研究着重对比观察腹腔镜CO2气腹下及开腹取石术手术前后血液流变学的变化情况。表2结果显示，两组患者的血浆黏度术后1 d均较术前明显升高，与上述观点是相符的，但腹腔镜组患者术后1 d的血浆黏度明显低于对照组、腹腔镜组术后3 d全血黏度高切、低切也分别明显低于对照组（P < 0.05），与王建江等[11]报道的观点是一致的，说明LCHTD对患者血黏度影响较小。

正常情况下，血清中免疫球蛋白的浓度保持相对稳定的水平。当机体遭受手术创伤时，其血清免疫球蛋白浓度明显降低，张庆尧等[12]研究进一步证实，且血清中免疫球蛋白的降低幅度与创伤的严重程度密切相关。本研究表3结果显示，术后1 d，两组患者IgA、IgG、IgM水平均较术前明显降低，且腹腔镜组患者IgA、IgG、IgM水平降低程度较小，术后1 d腹腔镜组患者IgA、IgG、IgM分别明显高于对照组（P < 0.05），以上提示术腹腔镜与开腹取石术均能抑制机体的IgG、IgM、IgA水平，但腹腔镜对机体的IgG、IgM、IgA抑制作用明显小于开腹取石术[13-17]。

本研究表4显示，腹腔镜组患者术后1 d的CD4+/CD8+水平明显低于对照组（P < 0.05）。术后3 d，腹腔镜组患者的CD3+、CD4+明显高于对照组（P < 0.05）。术后7 d，两组患者的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+较术后3 d明显升高，提示腹腔镜手术对机体的免疫功能影响较小，而开腹取石术后出现免疫功能损害，考虑可能是由于腹腔镜手术中高压气腹刺激和高碳酸血症引起机体应激反应，使T淋巴细胞功能增强[18-19]。王草叶等[20]通过对比分析腹腔镜胆道探查取石术与传统开放手术对机体创伤及免疫的影响，证实腹腔镜胆道探查取石术对机体免疫功能影响小，能更好地减少机体创伤，保护机体免疫功能，这也与腹腔镜手术相关研究结论相似[21]。

综上所述，LCHTD较传统开腹取石术对患者肝功能损害小，能明显降低血黏度，保护机体免疫功能。

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