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动物的作用

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动物的作用

动物的作用范文第1篇

益生菌可以特异性的和病毒的某些蛋白区域相结合,对病毒起到中和作用从而减少病毒对机体的侵害。高长春[10]从健康仔猪肠道内容物中分离筛选的益生菌与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)在试管中作用,检测TGEV半数组织感染量(TCID50)。结果经益生菌处理后的病毒在ST细胞模型上测得TGEV的TCID50与未作处理组病毒TCID50比较,均有不同程度的降低,表明益生菌对病毒毒力具有显著的中和作用。魏萍等[11]也从健康仔猪肠道内容物中分离出了罗伊氏乳杆菌和发酵乳杆菌与定量的TGEV感作后取上清感染ST细胞,结果显示这两株益生菌均能够显著性的降低TGEV对ST细胞的感染。李伟娜[12]筛选出了11株益生菌均能够显著地降低新城疫病毒(NDV)的血凝价,2株致病菌对血凝价没有影响,这说明益生菌可能具有直接影响病毒或其血凝素的作用,并且存在菌种差异性。一些经修饰的乳酸杆菌可以合成一种单链抗体,这种单链抗体可以直接对抗轮状病毒衣壳蛋白,从而阻止轮状病毒的感染[13]。益生菌可以直接影响病毒对细胞的侵害,降低机体细胞的损害,直接的保护了动物机体。

2动物肠道益生菌抑制病毒对宿主细胞的吸附

病毒感染机体首先通过病毒吸附机体细胞,与细胞受体结合然后进入细胞,后脱壳、表达、复制、装配和释放。益生菌能够抑制病毒对细胞的吸附能力,对宿主细胞具有一定的保护能力,从而减轻病毒的感染状态。益生菌如果能结合细胞表面的病毒受体也可以通过竞争抑制作用阻止病毒吸附。另外,益生菌抑制病毒对细胞的吸附也可能是由于立阻或增加了黏液,多糖和细胞间结点的屏蔽作用[8]。益生菌对宿主细胞的保护作用恰恰就体现在其干扰了病毒对宿主细胞的感染过程,对病毒增殖传播起到了抑制作用。2010年Kumar[14]在ST细胞上对猪源肠道分离的植物乳杆菌和唾液乳杆菌上清抑制冠状病毒猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的作用做了研究,结果发现,作用后72h的细胞没有发现任何病变,表明植物乳杆菌和唾液乳杆菌的上清对TGEV吸附宿主细胞有显著的抑制作用。ByeongJooSeo等[15]于2010年将自己分离的罗伊乳杆菌Probio-16在非洲绿猴上皮细胞株TF-104上对猪轮状病毒的抗病毒活性进行了测试,结果表明,Probio-16上清液能抑制猪轮状病毒吸附宿主细胞。

3动物肠道益生菌对机体细胞的修复功能

近来的一些研究表明,益生菌通过对肠道屏障功能的修复作用来保护机体,修复病毒或细菌侵害机体导致的黏膜损害。Madseny[16]研究表明,口服复合益生菌VSL#3可以恢复IL-10基因缺陷小鼠受损的结肠屏障功能,并维持其上皮细胞的完整性。益生菌结合病毒受体邻近的分子也可以给细胞提供一些保护作用。Freitas[17]报道称,干酪乳杆菌DN114001和拟杆菌属的一株菌能够产生一种可溶性的复合物,这种复合物可以通过调整细胞糖基化模式的位点局部性的保护轮状病毒感染时的肠上皮细胞。Barrow等[18]和Fuller等[19]分别对猪胃和鸡嗉囊进行电镜观察,发现乳杆菌能很好地附着于上皮细胞表面。这意味着可以通过位点竞争排斥病原菌的粘附和定植,从而保护宿主免受侵害。

4结语

动物的作用范文第2篇

关键词:动物检疫;畜产品;质量安全;作用

对畜产品质量的影响因素比较多,其中最主要的就是动物疫病,一旦动物感染疫病,并且没有及时被检查出来,那么用这些感染疫病的动物生产出的食品携带有病菌,食用之后就会影响人们的身体健康[1]。面对疫病的危害,相关部门应该做好动物疫病检查工作,及时找出感染疫病的动物,以此来确保畜产品质量安全。

1动物检疫理论内容概述

1.1动物检疫概念

所谓的动物检疫,就是指动物卫生监督管理部门的检疫工作人员根据当前先进的技术以及兽医知识,按照规定的检疫程序来对动物进行检疫,并作出有法律效力的结论。

1.2执法依据

动物检疫工作的开展并不是盲目进行的,而是有一定事实根据的,我国出台的《动物防疫法》就是具有法律效力的依据之一。在此法律中,对动物检疫进行了明确的规定,同时在其他相关的法律中,也涉及动物检疫这一方面内容。所以说,动物检疫是有执法依据的,此检疫工作的开展属于强制性行政管理手段。

2动物检疫在保障畜产品质量安全的作用分析

2.1产地检疫作用分析

在进行动物检疫中,需要开展产地检疫。所谓的产地检疫,就是指检疫工作人员需要在畜禽出栏之前按照相应的规定以及规范的程序来开展检疫工作。在这一阶段的检疫工作中,工作人员可以将比较常见的动物疫病检查出来,当确定了动物疫病之后,就可以采取有效的措施来加以处置,这样就能够从源头上避免带病的动物进入到畜禽市场,从而实现源头动物疫病的控制。在产地检疫中,工作人员可以将口蹄疫、猪蓝耳病、猪瘟等常见疫病检测出来,在一定程度上保障畜产品的质量安全[2]。同时,开展产地检疫工作,还可以确保感染疫病的畜禽不会进入到下一个环节中,这样其他健康的畜禽感染疫病的几率就大大降低,畜产品的质量安全就会得到保障。

2.2屠宰检疫作用分析

将畜禽做成畜产品,需要经过多个工序,其中对畜禽进行屠宰就是非常关键的步骤之一,在进行畜禽屠宰之后,动物疫病检疫工作人员就应该进行检疫工作,此部分的检疫主要是病理检疫,通过严格落实的检疫工作,可以确保进入生产加工环节的畜禽是没有感染疫病的,畜产品质量就会提高。反之,若是此阶段的检疫工作草草了事,那么就会导致感染疫病的动物进入到加工环节,进而加工出带有病菌的产品,从而危害人们的身体健康。因此,做好畜禽屠宰环节的检疫工作是非常有必要的。在进行这一检疫中,需要对猪链球菌以及口蹄疫病菌进行着重检疫。一旦感染此病菌的产品被人们食用,那么就会导致人们出现眩晕、发热等症状,因此,在屠宰检疫过程中,必须严格检疫,把好每个关口,这样才能确保市面上出现的畜产品质量有保障。另外,针对屠宰环节的检疫工作,国家在相关法律规定中明确提出了不得屠宰有恶性传染病,或者是因病死亡的动物,对于这样的动物,必须要开展无害化处理,只有这样人们才能放心食用畜产品。

3做好动物检疫工作应采取的措施

3.1进一步宣传检疫工作

为了确保动物检疫工作可以更好地落到实处,政府部门就应该提高对动物检疫工作的重视程度,同时政府部门还应该进一步宣传检疫工作,让更多的人了解检疫的重要性,从而促使相关人员能够配合检疫部门的工作,共同来完成检疫工作。同时,政府部门除了要加强宣传之外,还应该给予更多的资金支持。检疫工作的开展若是没有充足的资金做后盾,是无法有效落实的。因此,政府部门应该在此方面投入更多的资金,帮助检疫部门购买更多先进的检疫设备,并协助检疫部门构建完善的市场机制,以此来确保动物检疫工作顺利地落到实处[3]。

3.2加强处罚力度

在检疫工作开展过程中,国家除了要为检疫工作提供有力的法律支持之外,还应该加强处罚力度,从而打消很多违法人员的侥幸心理,通过增加违法人员的犯罪成本,来促使更多的人认真履行自身职责,能够在法律的警示下改正自我,避免一些扰乱畜产品市场的不法行为出现。

3.3对检疫人员进行培训

要确保动物检疫的作用可以充分发挥,动物检疫部门就应该对检疫工作人员进行培训,通过培训工作的有效开展来促使检疫人员能够认识到自身肩负职责的重要性,能够在培训中学习到更多先进的检疫知识,提高自身的检疫水平。同时还应该对检疫人员进行职业素养的强化,只有这样检疫人员所开展的工作才能是高水平的、高效率的,检疫工作价值才能得以体现。

综上所述,在我国畜产品市场发展中,质量存在问题的畜产品不仅使得市场发展受到了阻碍,同时也危害了人们的身体健康,面对这样的情况,动物检疫部门就应该提高对自身工作的重视程度,并严格落实产地检疫以及屠宰检疫工作,以此来减少感染疫病的畜产品数量,维护畜产品的市场稳定,促使人们能够放心地食用畜产品。

作者:年梦 单位:甘肃省迭部县畜牧兽医动物检疫站

参考文献:

[1]王杰玉.动物检疫对保障畜产品质量安全的作用分析[J].甘肃畜牧兽医,2016,46(8):38-39.

动物的作用范文第3篇

本组资料采用SPSS13.0统计软件进行处理,分级数据以绝对数表示,连续性数据以均数±标准差表示。采用析因设计方差分析比较4种重建方法处理后所得的图像噪声、SNR、CNR的差异,两两比较采用Bonfferoni检验;采用Kruskal-WallisH检验比较4种重建方法处理后所得的图像主观评分的差异,两两比较采用两独立样本Mann-WhitneyU检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1.客观图像质量(主动脉根部的图像噪声、SNR、CNR)评价结果

FBP、iDose-2、iDose-4、iDose-6四种重建方法处理所得图像噪声、SNR、CNR的总体差异有统计学意义(P=0.000)。A、B、C、D各组内各重建方法之间分别行两两比较,结果显示FBP、iDose-2、iDose-4、iDose-6重建后图像的噪声依次降低,SNR及CNR依次升高,且差异均有统计学意义(P均=0.000)(表2;图1)。

2.2主观图像质量评价结果

用FBP重建,D组所有病例均不能满足诊断,经iDose重建后所有病例均满足诊断。用iDose-6重建后的图像主观评分得分最高,用FBP重建后得分最低,A、B、C、D各组内经iDose-6重建后的图像主观评分均明显高于经FBP重建后的主观评分(P均=0.000),见表3、图2。

2.3辐射剂量

A组有效剂量(ED)为(4.07-9.06)mSv,平均(6.81±1.92)mSv;B组ED为(2.84-6.33)mSv,平均(4.80±1.23)mSv;C组ED为(2.03-4.97)mSv,平均(3.57±1.06)mSv;D组ED为(1.38-2.73)mSv,平均(2.13±0.54)mSv。

3讨论

随着MSCT应用领域的日益拓展和广泛应用,其辐射剂量对人体的损害日趋凸显而受到重视,如何尽可能低的控制CT辐射剂量成为一个热门的话题。国际辐射防护委员会(TheInternationalCommissionOnRadiologicalProtection,ICRP)提出,x线诊断应遵循正当化、防护最优化的辐射防护原则[6]。婴幼儿对放射线的敏感程度远大于成人,采用低剂量扫描技术尤为重要。由于先天性心脏病患者大部分为婴幼儿,而CT对心血管系统的解剖结构显示及先天性心脏病术前、术后评估具有独特的优势,所以如何将心血管CT扫描的辐射剂量控制在尽可能低的水平,又达到诊断目的具有重大的临床意义[7]。随着研究深入,目前低剂量研究的重点从前期单纯改变扫描条件发展到改进图像重建算法,其中迭代重建技术是热点。迭代重建技术把CT影像数据重建分为两步,先在每个X线投影角度合成前向投影,经过探测器计数得到X线光子分布的预计值;而后将前向投影的预计值和探测器实测值间的差值进行反投影,多次反馈性迭代,不断更新前向投影的预计值,同时结合系统光学和噪声因素,使其最大程度地接近真实的X线光子分布。研究表明迭代重建算法可降低图像噪声,提高图像质量,间接地可在保持噪声不变的情况下降低辐射剂量[9]。目前迭代算法的相关研究虽已有大量报道,但多见于胸、腹、脑等部位[4,10,12,13],在心血管系统中的研究多见于成人冠状动脉[7,11],少见在心脏CT成像中的研究报道,iDose重建算法在心血管低剂量CT扫描中的应用价值及标准尚有待进一步研究。本研究基于保护婴幼儿患者健康利益的目的,鉴于家猪的心血管结构与人一致,因此以猪为研究对象,采用前瞻性对照研究,旨在探讨iDose在心血管螺旋CT成像的应用中对图像质量的影响及降低辐射剂量的程度,为临床应用于心脏低剂量CT扫描做参考。本研究A、B、C、D各组内各重建方法之间分别进行两两比较显示:各组内iDose-2、iDose-4、iDose-6重建后图像的噪声均比FBP重建后低(噪声呈iDose-6<iDose-4<iDose-2<FBP),而图像SNR,CNR及主观评分均比FBP重建后高,差异均有统计学意义(P<0.05),表明明同等条件下iDose与FBP相比确实可降低图像噪声,提高SNR、CNR,提高图像质量;而A、B、C、D各组内用iDose-6重建后的噪声均最低且SNR、CNR及主观评分最高,说明相同条件下各重建方法相比以iDose-6重建所得的图像质量最高。本研究中用FBP重建后,B组将近一半病例仅能基本满足诊断,C组所有病例仅能基本满足诊断,D组所有病例均不能诊断,说明如用FBP重建算法,在现有文献的推荐X线剂量基础上再降低剂量的空间已经很有限;但经iDose-6重建后,C组所有病例的主观评分均为4分或以上,即使是降低70%剂量的D组,所有病例的主观评分仍在3分或以上,说明在本研究中,用iDose-6重建降低辐射剂量的空间较大,在降低70%剂量时,经过iDose-6重建后所有图像仍能满足诊断要求。

动物的作用范文第4篇

关键词:植物胰岛素;壳聚糖;分离纯化

中图分类号:R285 文献标识码:A 文章编号:1673-7717(2011)04-0825-03

Seperation and Purification of Plant Insulin and Its Hypoglycemic Effect on the Experimental Animals

JUN Xu【sup】1【/sup】,WU Peng【sup】1【/sup】,HAN Lin【sup】1【/sup】,ZHANG Zhong【sup】1【/sup】,HUANG Zhu-qing【sup】2【/sup】

(1.Science Laboratory Center Shenyang medical college, Shenyang 110034,Liaoning,China;

2.Liaoning Vocational College of Pharmacy, Department of Health, Shenyang 110101,Liaoning,China)

Abstract:Objective: To explore a technical method to purify the plant insulin in the bitter melon.Methods:applying three-step methods to purify insulin from bitter melon these are salting out, ion exchange chromatography and gel filtration chromatography. And than using electrophoresis chromatography, animal experiments and chitosan envelopment methods to identify it.Results:The extracts appeared electrophoresis band at the 11000 molecular weight, and had the same relative mobility with insulin. The plant insulin from the bitter melons has the hypoglycemic effect significantly after the chitosan envelopment methods. Conclusion:To stabilized extract the plant insulin from the bitter melon can depend on this method mentiond in this paper.

Key words:Plant insulinChitosanPurifay

现代医学证明苦瓜作为一种功能食品,具有降低血糖,抗病毒、抗肿瘤,增强机体免疫力等作用,被认为是新一代疗效高、副作用小的降血糖天然药物的典范【sup】[1]【/sup】。同时,更因为苦瓜含有一种降低血糖的多肽――植物胰岛素,使人们对从中研制胰岛素的口服替代品充满了希望。目前,业已可通过有机酸、醇、丙酮沉淀、薄层层析、盐析、阳离子交换层析等传统或改良的实验室分离方法【sup】[2-3]【/sup】,从苦瓜中获得纯度较高的植物胰岛素。然而,程序繁杂、实验技术要求高、应用样品量小,仍是这类方法难以实现大量纯化苦瓜中植物胰岛素的瓶颈。我们经过研究与改进,建立了通过盐析、阴离子交换层析、凝胶过滤等技术大量纯化苦瓜中植物胰岛素的程序化制备过程,并形成壳聚糖包封的口服制剂,进而为苦瓜中植物胰岛素广泛、有效的应用奠定基础。

1 材料和方法

1.1 材料

新鲜苦瓜(市售)。A缓冲液:0.1M/L Tise-HCl pH7.0;B缓冲液:0.1M/L PB pH7.0(均为国药集团化学试剂沈阳有限公司提供)。

1.2 仪器

DEAE-Sepharose FF(美国GE公司);Sephdex G75(美国GE公司);FPLC(美国GE公司);核酸蛋白计算器(美国GE公司);四氧嘧啶糖尿病大鼠(北京军科院动物研究所);冷冻高速离心机(日本HITACHI公司);血糖测定仪(国产)。

1.3 方法

1.3.1 苦瓜中植物胰岛素的纯化 新鲜苦瓜500g去籽,-20℃冷冻8h以上,组织破碎仪粉碎,苦瓜粉末用100mL A缓冲液采用微波震荡15min溶解。溶解后12000r/min 4℃离心20min,收集上清。

取上清,测量体积,按最终浓度30%(0.176g/mL)加入硫酸氨,边加边搅拌,致完全溶解后,再4℃搅拌2h,静置1h。12000r/min 4℃离心20min,弃上清,沉淀用20mL A缓冲液溶解,5000透析袋对A缓冲液透析过夜,期间更换一次透析外液。透析后,收集透析内液12000r/min 4℃离心20min,收集上清。

透析后上清应用于DEAE-Sepharose FF柱,柱尺寸15cm×1.5cm,柱预先用150mL 缓冲液平衡。FPLC进行层析分离,上样后待基线稳定后,用A缓冲液(含0.5M NaCl)洗脱,馏分收集10mL/管,检测波长280nm,流速0.5m/min。馏分形成3个峰,10、11管(Ⅰ峰);13、14管(Ⅱ峰);16、17管(Ⅲ峰),SDS电泳检测,取Ⅱ峰样品浓缩至5mL,样品装入5000透析袋中对B缓冲液透析过夜,应用于Sephdexe G75凝胶柱,柱尺寸30cm×1.0cm,柱预先用200ml B缓冲液平衡,FPLC层析分离,流速1.0mL/min,馏分收集10mL/管,获得Ⅱa和Ⅱb 2个主峰。样品经冷冻干燥后密封4℃保存。

1.3.2 苦瓜中植物胰岛素的鉴定 分别收集凝胶过滤层析后2个主峰。采用纤维素薄膜层析方法进行层析分离,样品为Ⅱa主峰、Ⅱb主峰和胰岛素注射液,展开剂为正丁醇(V):甲酸(V)3:2。SDS电泳,浓缩胶3%,分离胶10%,电流100mV,电泳2h。

1.3.3 苦瓜中植物胰岛素壳聚糖纳米粒的制备 采用文献方法【sup】[4]【/sup】制备纳米颗粒,其药物包封率为75%以上。

1.3.4 降糖动物实验 取四氧嘧啶糖尿病大鼠分4组,每组10只。1组、2组为实验组,分别口服植物胰岛素壳聚糖纳米颗粒,3.5g/kg含植物胰岛素2.63g),1天1次。3组为对照组,口服壳聚糖,3.5g/kg,1天1次。4组为口服降糖药组,0.1mg/kg,1天1次。口服5天后,尾静脉取血,测血糖值。

2 结 果

经DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析纯化的样品,馏分后形成3个蛋白峰(见图1);经SDS电泳检测,仅峰Ⅱ于11000处出现一条带,峰Ⅰ和峰Ⅲ则未见(见图2);峰Ⅱ进行凝胶过滤层析后,获得Ⅱa和Ⅱb 2个主峰(见图3)。薄层层析检测,Ⅱa主峰、Ⅱb主峰和胰岛素注射液的相对迁移率分别为0.20、0.24和0.24,可见胰岛素注射液和Ⅱb主峰的迁移率相同。SDS电泳结果(见图4)为Ⅱa主峰的相对分子量为45000,Ⅱb主峰为11000。

降糖动物实验结果为,口服植物胰岛素组和降糖药物组5天后血糖值明显低于对照组(P<0.01),见表1。

表1 植物胰岛素壳聚糖纳米颗粒对糖尿病

小鼠血糖的影响(±s)

3 结 论

1981年,Khanna等【sup】[2]【/sup】从苦瓜果实中分离出一种多肽,并证实其具有降低血糖的作用,后被人们称之为植物胰岛素。大量研究显示,苦瓜中植物胰岛素可增强肌肉、肝脏对餐后血糖的贮存效率,减少肝内葡萄糖过量释放;可抑制葡萄糖的合成,加强葡萄糖的氧化利用;可促进胰腺β细胞更新及部分受损的β细胞修复,改善β细胞分泌胰岛素的能力【sup】[5-6]【/sup】。同时,与动物和化学合成类降糖产品相比,苦瓜中植物胰岛素具有基本无不良反应,降糖效果缓慢持久,长期服用不致过度降低血糖,停药后24h内血糖没有回升【sup】[7]【/sup】,以及无注射之苦等优点。

目前,有关苦瓜中植物胰岛素的分离和提取方法较多,但大多是以Khanna建立的有机酸、醇提取,薄层层析分离【sup】[2]【/sup】,Rp-高效液相法【sup】[8]【/sup】,结合阳离子交换层析方法【sup】[3]【/sup】作为基本框架和程序。虽然这些方法可获得95%以上纯度的苦瓜中植物胰岛素,且动物实验证实降糖效果确切,但此类方法却严重存在着因仪器设备的客观限制致使上样量较低,不适合大量制备进行规模化生产等问题,进而限制了植物胰岛素的广泛应用。

本研究采用盐析、阴离子交换层析、凝胶过滤层析三步制备技术,从苦瓜中提取植物胰岛素。其中,盐析可去除了大部分杂质,包括一些脂蛋白和一些甾类有机化学物质;阴离子交换层析后,一些高等电点的蛋白可被分离,而集中收集分子量为11000的蛋白峰;再经凝胶过滤层析后,可将分子量大的蛋白排阻出去。结果显示,本方法馏分后所获的峰Ⅱ于11000处可出现一条电泳带,与文献报道的苦瓜中植物胰岛素的分子量相近【sup】[9]【/sup】;Ⅱb主峰的相对迁移率与胰岛素的相对迁移率均为0.24;提取物的纯度在95%(电泳纯)以上。这提示,本方法的提取物在化学性质上与胰岛素相似,具有较为理想的纯度。为了验证提取物的作用和壳聚糖的包封效果,我们进行了动物降糖实验。结果表明,本方法的提取物具有较好的降血糖作用,壳聚糖包封可明显地提高植物胰岛素的降糖作用。

总之,我们通过盐析、阴离子交换层析和凝胶过滤层析三步制备技术所获得的苦瓜中植物胰岛素,在化学性质、纯度和降糖效果上均得到了良好的结果。更为重要的是,本方法实现了向大量纯化苦瓜中植物胰岛素的迈进,从而为苦瓜中植物胰岛素的广泛应用奠定了技术基础。

参考文献

[1] 王先远,金宏,许志勤,等.苦瓜皂甙降血糖作用及其机制初探[J].氨基酸和生物资源,2001,23(3):42-45.

[2] Khanna Pushpa,Jain S C,Panagariya A, et al. Hypoglycemic activity of polypeptide from a plant source[J]. J Nat Prod, 1981, 44(6):648-655.

[3] 徐军,吴鹏,韩林,等.苦瓜中植物降糖多肽的分离及其降糖作用的研究[J].中国医药导报,2007,64(2):148-149.

[4] McCarthy MF. Does bitter melon contain an activator of AMP-activated kinase[J]. Med Hypotheses, 2004, 63(2):340-343.

[5] Ahmed I, Adeghate E, Sharma AK, et al. Effects of Momordica charantia fruit juice on islet morphology in the pancreas of the streptozotocin-diabetic rat[J]. Diabetes Res Clin Pract, 1998, 40(3):145-151.

[6] 杭悦宇,周义锋,陈重明,等.苦瓜冻干粉对动物的降糖作用及急性毒性[J].植物资源与环境学报, 2000, 9(3):19-21.

动物的作用范文第5篇

【摘要】 目的 探讨促愈瘢痕消(70%)促愈瘢痕消对动物皮肤的毒理作用。 方法 40只新西兰大白兔,随机分为3组。①组12只兔子随机分为A、B、C 3组,每组4只,分别为赋形剂组、促愈瘢痕消临床用药剂量组(44%)、促愈瘢痕消大剂量组(70%)。进行双侧背部脱毛,左侧刀片搔刮至均匀出血,右侧用药7 d观察药物经完整皮肤的急性毒性作用;左侧用药7 d观察药物经损伤皮肤急性毒性作用。②组4只兔子每只背部对称脱毛各2块,药物分组同上,左侧均涂赋形剂,右侧头侧脱毛区涂促愈瘢痕消(44%),右侧尾侧区涂促愈瘢痕消(70%)。观察用药7 d后对完整与损伤皮肤刺激性。③组24只兔子随机分为A、B、C 3组,每组8只,分别为赋形剂组、促愈瘢痕消(44%)组、阳性对照组(1%2,4-二硝基氯代苯)组,进行左侧背部脱毛,各组外用药物进行初次接触及激发试验,观察药物对动物皮肤的过敏反应。结果 促愈瘢痕消经皮肤对动物完整皮肤及损伤皮肤无急性毒性、刺激性;药物对完整皮肤亦无激发过敏反应。 结论 促愈瘢痕消短期应用对动物皮肤是安全的。

【关键词】 促愈瘢痕消;经皮肤急性毒性;皮肤刺激性;皮肤过敏反应

【Abstract】 Objective To study the acute toxicity, irritation and sensitivity effect of Cuyubanhenxiao to New Zealand big white rabbit’s nomal skin and impaired skin.Methods Fourty New Zealand big white rabbits were pidesed into 3 groups.①12 rabbits were randomized into 3 groups, each group is 4 rabbits. The medicine is Vaseline,Cuyubanhenxiao(44%),Cuyubanhenxiao(70%).They were separately applied to A,B,C 3 groups. Each rabbit with 50 cm2 was molted on both sides of backbone to take the acute skin toxicity test. The right sides every group were used medicine(A,B,C) at 7 days, the nomal skin acute toxic effect was observed. The left sides were scratched to even hemorrhage and spreaded medicine on every group rabbit. At 7 days, the damaged skin toxic effect was observed.②4 rabbits were molted on both sides of backbone of every rabbit and there were 2 molted areas on each side of every rabbit.The medicine group was completely same with the first group.The left side of every molted area was spreaded by Vaseline. The right molted areas of near to the head were spreaded by B and the oher areas were spreaded by C 7 days later, the nomal and damaged skin irritation effect was observed.③24 rabbits were randomized into A, B,and C 3 groups, the number of each group was 8. The medicine was Vaseline, Cuyubanhenxiao(44%), 1%2,4Dinitrochlorobenzol. Each rabbit with 50 cm2 was molted on the left sides of backbone to take the the initial contact and the stimulation test. The sensitivity effect of medicine was observed.Results There were no acute toxicity, irritation effect, when Cuyubanhenxiao was spreaded on the rabbits’ normal and damaged skin and no sensitivity effect phenomenon to rabbits’ nomal skin.Conclusion It’s safe to appl to the skin of animals for shortterm.

【Key words】 Cuyubanhenxiao,acute skin toxicity,skin irritation,skin sensitivity effect

创伤、烧伤、外科手术等常引起不可避免的创面,然而创面的晚期愈合常常导致瘢痕的增生。创面的晚期愈合增加了感染机会,瘢痕增生给患者美观甚至功能造成严重影响。目前,国内外用于促进创面愈合及治疗瘢痕的药物种类繁多, 但经临床使用后,疗效好者甚少。本课题组研制的中药制剂促愈瘢痕消,经动物实验证明能促进创面愈合、预防瘢痕增生且无明显的毒性反应。本文仅就其动物毒理实验进行论述。

1 材料与方法

1.1 试剂 实验用促愈瘢痕消由山东大学第二医院美容整形烧伤外科研制。此中药制剂主要成分由土元、水蛭、莪术、蜈蚣、全蝎和五倍子(均由山东大学齐鲁医院中药房提供),采用超细微粉化新工艺精制而成。实验药物分临床用药剂量(药物浓度为44%)及大剂量(药物浓度为70%)。

对照用赋形剂为凡士林软膏(山东大学第二医院药剂室提供)、硫化钠、2,4二硝基氯代苯(济南泰瑞达药化有限公司提供)。

1.2 动物 实验动物为新西兰大白兔,雌雄不限,体质量2.5~3.0 kg,由山东省农科院提供(合格证号:scxk齿20040013)。

1.3 实验方法

1.3.1 促愈瘢痕消经皮肤急性毒性试验:将12只新西兰大白兔随机分为3组,每组4只,A组:赋形剂组;B组:促愈瘢痕消临床用药剂量组(44%);C组:促愈瘢痕消大剂量组(70%),用8%的硫化钠给白兔右侧背部脱毛50 cm2,用清水洗掉化学试剂,立即给脱毛区涂药,每日涂药使药膏保持浓度1周,期间观察动物的活动、皮毛光泽、饮食、体重、死亡情况。随后对白兔左侧脱毛50 cm2,并用手术无菌刀片在脱毛区进行搔刮至均匀出血,立即在擦伤部位涂药,用药7 d,观察指标同上,并与对照组比较。

1.3.2 促愈瘢痕消的皮肤刺激性试验:将4只新西兰大白兔背部对称脱毛4块,每块50 cm2。A:赋形剂,B:促愈瘢痕消(临床用药剂量组44%),C:促愈瘢痕消大剂量(70%)。脱毛后清水清洗脱毛区,左侧均涂赋形剂(A),右侧头侧脱毛区涂B,右侧尾侧区涂C。涂药后24 h温水清洗药物及赋形剂,观察局部皮肤红斑和水肿反应。连续用药7 d后,清洗掉药物观察24 h、72 h后的皮肤反应。随后脱毛区用手术无菌刀片搔刮至均匀出血,立即涂药物及赋形剂,观察指标同上。

1.3.3 促愈瘢痕消的皮肤过敏试验:将24只新西兰大白兔对称脱毛,每块50 cm2。随机分为三组,每组8只。A组:赋形剂,B组:促愈瘢痕消(44%),C组:阳性对照组(1%2,4二硝基氯代苯)。将药物分别涂于各组动物左侧脱毛区,持续6 h,在第7 d和第14 d以同样方法各重复一次。激发接触:B组于末次给受试物致敏后14 d,将促愈瘢痕消涂在动物右侧脱毛区,持续6 h后,用温水去除受试物。C组同样方法外用0.1%2,4二硝基氯代苯立即观察,并在24 h、48 h及72 h再次观察白兔脱毛区皮肤变态反应情况。

2 结果

2.1 ①组试验结果:3组在试验期间无1例死亡,“促愈瘢痕消”临床用药剂量和大剂量组对完整皮肤及损伤皮肤新西兰白兔活动、皮毛光泽、饮食、体重(见表1)无任何影响,未出现任何急性毒性反应。 表1 促愈瘢痕消外用于完整和损伤皮肤时对新西兰大白兔体重的影响

2.2 ②组试验结果:3组兔子无1例死亡,促愈瘢痕消临床用药剂量和大剂量组外涂于完整皮肤及损伤皮肤新西兰白兔,未见红斑与水肿。停药后1周观察,未见色素沉着、出血点、皮肤粗糙及皮肤菲薄等情况(见表2)。通过试验表明促愈瘢痕消对皮肤无刺激性。表2 促愈瘢痕消对动物完整及损伤皮肤刺激性作用观察药物完整皮肤(用药7 d后) 注:评分标准均按《中药新药研究指南》[1]统计,结果示皮肤刺激性强度平均分值均为0

2.3 ③组试验过程中,没有实验动物死亡。在初次致敏接触中,A、B组未见红斑及水肿,C组有明显红斑及水肿,随时间红肿与水肿减轻(见表3)。再次过敏激发试验中,A、B组未见红斑及水肿,实验动物无哮喘、站立不稳及休克现象。C组动物动物红斑及水肿比初次接触加剧并伴部分皮肤破溃。通过试验表明,促愈瘢痕消对皮肤无致敏及过敏反应。表3 促愈瘢痕消与阳性对照组对动物皮肤的过敏激发试验观察时间

3 讨论

促愈瘢痕消是在《赵炳南临床经验集》所介绍的治疗瘢痕验方——黑布药膏组成的基础上,从常用的200多种中药前12位微量元素锌含量高的中药中挑选出6种理血熄风,采用全微粉化技术精制而成。其方剂组成为土元、水蛭、莪术、蜈蚣、全蝎、五倍子、醋、冰片、蜂蜜及皮肤助渗剂丙二醇,用粉碎机将中药原料达到细胞级微粉化粉碎(10~20 μm),加入辅剂调合成膏剂,外用于皮肤。利用其锌含量高的特点,以促进创面的愈合;课题组相关研究亦已证明,促愈瘢痕消能够促进细胞的凋亡,明显抑制瘢痕的增生[2]。

处方中各种中药均符合《中国药典》标准,无毒性、刺激性材料,药物虽然外加皮肤助渗剂属化学试剂,但未见其对皮肤有毒性作用的报道[3,4]。然而,不能确定药物在制备过程中是否会产生毒性和致敏物质。所以药物在应用于临床前,按照国家食品药品监督管理局的规定,必须进行皮肤毒性试验研究。

通过毒理实验研究发现,促愈瘢痕消对实验动物完整皮肤及损伤皮肤无急性毒性及刺激性。实验期间无动物死亡,动物活动、饮食及其他身体状况未见异常。在药物过敏接触及激发接触实验中,动物皮肤无水肿及红斑,亦未出现哮喘、站立不稳及休克现象。通过一系列的皮肤毒性试验研究,可以初步证明促愈瘢痕消短期应用于动物皮肤是安全的,可以进行初步的临床试验。

参考文献

[1] 中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指南(药学、药理学、毒理学)[M].1992:209212. [2] 闫宏山,吕润华,王吉昌,等.“促愈瘢痕消”对兔耳增生性瘢痕作用的实验研究[J].山东大学学报(医学版),2007,45(9):914918.

[3] 李海鹰,杨文智,米海涛,等.不同渗透剂对水杨酸透皮吸收的影响[J].河北大学学报(自然科学版),2007,27(3):279282.