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[关键词]妊娠相关血浆蛋白A;固相时间分辨荧光免疫;亲和素—生物素—聚乙烯胺—4,7二氯磺苯基1,10啡罗啉2,9二羧酸—铕复合物;唐氏综合征
DevelopADirectSolidPhaseLanthaneTimeresolvedFluoroimmunoassayReagentofPAPPAutilizingPVA
Abstract:ObjectiveTodevelopadirectsolidphaselanthanetimeresolvedfluoroimmunoassayreagentofPAPPAbysynthesizingacomplexof(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+.MethodsPolyvinylamine(PVA)waslabeledwithbiotinstreptavidinandeuropiumchelateof4,7bis(chlorosulfophenyl)1,10phenanthroline2,9dicarboxylicacid(BCPDA).UsinglabeledPVAcomplex,WedesignedtwositesandwichtimeresolvedfluoroimmunoassayofPAPPAandevaluatedassaycharacteristicsofPAPPAkit.ResultsWesuccessedsynthesizingaconjuageteof(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+andareagentofPAPPA.Detectionlimitsachievedwere0.7mIU/L.Thecalibrationcurvewaslinear010000mIU/L.Intraandinterassayimprecision(CV)was3.89%4.96%and7.35%9.27%.Recoverywas95.8%104.2%.ConclusionsTheconjugateof(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+synthesiziedwasreactive,highlyfouorescent.Asortsofkitcouldbesynthesized,takingadvantageofit.ThereagentofPAPPAwaspotentiallysuitedforuseinclinicalwithhighlyanalyticalsensitivity.
Keywords:PregnancyassociatedplasmaproteinA;Directsolidphaselanthanetimeresolvedfluoroimmunoassay;StreptavidinbiotinPolyvinylamineeuropiumchelateof4,7bis(chlorosulfophenyl)1,10phenanthroline2,9dicarboxylicacid;Down''''sSyndrome
妊娠相关血浆蛋白A(PregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPPA)是一种高分子α2糖蛋白,20世纪70年代在孕妇血清中被发现[1]。在孕妇血中主要PAPPA是胎盘滋养层组织分泌,它是一种异源四聚体,由两个分子量为200000~250000亚基构成。PAPPA亚基和两个嗜红细胞主要基础蛋白(Proformofeosinophilmajorbasicprotein)以二硫键结合而成[2],在孕妇血中只存在微量游离单体PAPPA。PAPPA亚基由1547个多聚核苷酸构成,包括1个拉长的锌指结构,3个Lin—notch重复序列,以及5个短一致重复序列[3]。在体内PAPPA是一种蛋白酶,主要针对胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)和胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)起作用。胰岛素样生长因子I(IGFI)在促进细胞分裂和增殖起重要作用,它主要通过IGF1受体起作用,IGFI、II的生物活性受6个高亲和性IDFBP调节[4,5]。PAPPA主要用于产前筛查唐氏综合征(Down''''sSyndrome,DS),迄今医学上对此病尚无有效的治疗和预防措施,只能通过产前筛查防止DS儿的出生,但目前开展的绒毛活检,羊水穿刺及脐带血穿刺均为侵入性检查,有1%~3%的流产率,且方法繁琐,出报告时间长,不适宜大范围孕妇的普查,仅限于高危人群的诊断。大量报道认为PAPPA可作为DS胎儿产前筛查的的标志物。在15周~20周通过结合孕妇孕周、超声诊断和FreeβHCG可以鉴别65%~75%,但要在3个月~6个月结合AFP、游离E3以及抑制素上述成分可鉴别85%~90%[6]。有文献[7]报道PAPPA在急性冠状动脉综合征(ACS)的早期诊断有一定的意义,PAPPA在ACS患者血清含量<30mIU/L,同时结构不同于孕妇体内的PAPPA且存在动态变化,必须利用超灵敏的方法进行检测。国内PAPPA的诊断试剂大多为ELISA和PerkinElmer公司生产的解离增强时间分辨荧光免疫分析(dissociatedenhancelanthanetimeresolvedfluoroimmunoassay,DELFIA)试剂,无国产PAPPA时间分辨荧光试剂。我们利用PVA(聚乙烯胺)作为载体结合BCPDA镧系螯合物合成一种高灵敏的固相时间分辨荧光免疫分析(directsolidphaselanthanetimeresolvedfluoroimmunoassay,DSLFIA)试剂。为提高检测灵敏度和克服BCPDA标记抗体使抗体失活的问题,我们引入了生物素亲和素(biotinstreptavidinsystem)系统。
1材料和方法
1.1材料
1.1.1试剂4,7二氯磺苯基1,10啡罗啉2,9二羧酸[4,7bis(chlorosulfophenyl)1,10phenanthroline2,9dicarboxylicacid,BCPDA自制];纯化亲和素(Streptavidin,SA,Sigma公司);硫代琥珀酰亚氨6生物素氨基己酯类[Sulfosuccinimidyl6''''(biotinamido)6hexanamidohexanoate,SulfoNHSLCLCBiotin,pierceChemicalCompany];聚乙烯胺氢氯化物(Polyvinylaminehydrochloride,PVA,ChemicalDynamicsCorp);硼酸钠、二甲亚砜(天津化学试剂有限公司);单克隆抗体根据文献[5]选择Hyb234—5(StatensserumInstitut)作为检测抗体,mAb10E1(HyTestOy,Finland)作为捕获抗体;PAPPA标准品和质控品购于PE公司(质控血清:Control1508mIU/L,Control22325mIU/L,Control3为4952mIU/L);鼠IgG(晶美公司)。
1.1.2仪器Wallac1420多标记计数仪(WallacOY,Finland);HPLC硅柱TSK250尺寸排阻柱(BIORAD公司);96白色微孔板(NUNC公司)、亲和素包被板(InnotracDiagnosticsOy公司);Amicon可浓缩离心管(Amiconmicroconcentrationunits,MW30000Cutoff)
1.2方法
1.2.1BCPDA的制备参见文献详细步骤[8~10]。
1.2.2生物素聚乙烯胺BCPDA[(Bio)xPVA(BCPDA)y]复合物的构建[11]用0.5M的碳酸盐(pH9.1)缓冲液配制浓度为10mg/ml聚乙烯胺(PVA)溶液,将200μgNHSLCLCBiotin溶于20μl碳酸盐缓冲液中,取200μl上述PVA溶液加入20μl上述NHSLC—LCBiotin溶液中,振荡混匀,室温反应1.5h(PVA∶Bio=1∶15),用0.5M碳酸盐缓冲液将混合液稀释到1ml,将固体BCPDA研磨成粉末状,先在上述1ml混合液中加入5mgBCPDA,用力搅拌,直到溶解,重复加3次BCPDA,5mg/次,共计20mgBCPDA,在室温放置5h~6h,直到溶液澄清,转移到透析袋中,用0.1MNaHCO35L透析、过夜、重复透析2次,尽可能除去没反应的BCPDA和生物素。
1.2.3HPLC纯化(Bio)xPVA(BCPDA)y复合物离心浓缩上述(Bio)xPVA(BCPDA)y复合物到0.3ml~0.5ml(用Amiconmicroconcentrationunits,MW30000Cutoff)。流动相0.05MTris缓冲液(pH7.70),控制HPLC流速0.8ml/min,在325nm处监测层析液(325nm为BCPDA最大吸收峰),上样后,马上收集,(Bio)xPVA(BCPDA)y在10管~16管约5ml左右,取10μl(Bio)xPVA(BCPDA)y层析液加入90μl水滴入亲和素包被板微孔中,温育30min,洗板,加入用Tris缓冲液配制的10M~5MEuCl3100μl,反应10min,洗板、干燥,用Wallac1420检测Eu3+的荧光强度,没结合复合物的被洗去了,没结合BCPDA的复合物因无法结合Eu3+而没有荧光,计算标记的PVA,大约每分子结合50个~100个BCPDA分子。
1.2.4构建亲和素生物素PVABCPDA[(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+]复合物[11]用0.1MTris缓冲液(pH7.8)配制小牛血清白蛋白(BSA溶液)60g/L,同时加入EuCl3,使Eu3+浓度为10-6mol/ml,用双蒸水配制亲和素溶液浓度为1mg/ml,取上述BSA溶液1ml,加入10μl亲和素溶液,再加入50μl的(Bio)xPVA(BCPDA)y复合物(通过固相免疫分析,棋盘滴定法确定最佳用量比,步骤略,结果见后),混匀,55℃温育1.5h,4℃保存备用。
1.2.5(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物反应活性用生物素化的各种浓度(0ng/50μl,0.5ng/50μl,5ng/50μl,50ng/50μl,100ng/50μl)鼠IgG包被96孔微板(同第7步),用60g/LBSA和0.1mol/LTris缓冲液(pH7.8)10倍稀释(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物,在板的微孔中加入100μl稀释后的(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物,室温反应30min,洗板、干燥,测量荧光强度(cpm)。本实验是验证复合物的反应活性。
1.2.6生物素标记10E1抗体[12]用二甲亚砜制备硫代琥珀酰亚氨6生物素氨基乙酯溶液(10mg/ml),将抗体10E1溶于0.1mol/L硼酸钠溶液(pH8.8),每1mg抗体中加硫代琥珀酰亚氨6生物素氨基己酯类溶液210μg混合,室温放置4h,在上述溶液中加入20ml1mol/LNH4Cl,室温反应10min,将反应液进行透析,除去未结合的生物素,将抗体浓度用分析缓冲液配置成8ng/μl,-20℃保存备用。
1.2.7单克隆Hyb234—5抗体包被96孔微滴定板将抗体溶于0.1M磷酸盐缓冲液(pH4.9),配置成5μg/ml抗体溶液,在每一孔中加入80μl抗体溶液,室温反应20h,然后用生理盐水洗3次,然后每孔加120μl0.05MTrisHcl缓冲液(pH7.4含0.9%生理盐水、0.05%NaN3、0.5%小牛血清白蛋白BSA)浸泡2h。吸干缓冲液,干燥,密封4℃保存。
1.2.8样本收集、定标、灵敏度、精密度和回收实验分析过程选取怀孕8周、9周、11周妇女血清各一份,经PE公司的DELFIA试剂和D&G公司的ELISA试剂多次精确测定,值分别为:P1863.27mIU/L;P21273.63mIU/L;P32727.23mIU/L。用标准品稀释液(6%BSATSA缓冲液:150mmol/LNaCl、60g/LBSA、50mmol/LTrisHCl,pH7.8)将标准品稀释浓度为:S00mIU/L(稀释液)、S120mIU/L、S2200mIU/L、S31000mIU/L、S45000mIU/L、S510000mIU/L。标准品定标根据WHOIRP78/610(WHOInternationalLaboratoryforBiologicalstandards,StatensSeruminstitut,Denmark),单位换算:1000mIU/L=4.5μg/ml。在单克隆Hyb234—5抗体包被96孔微滴定板,每孔加入定标液10μl,作8次平行测量,加入50μl生物素标记10E1抗体50μl,混匀,36℃,室温反应20min,洗板6次,加入100μl10倍稀释的(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物,室温反应25min,洗板6次,吹干,Wallac1420测量荧光强度(cpm),取均值,作标准曲线。将S00mIU/L做20次重复测试,计算均值(X)和标准差(s),以X+2s为试剂的最小检测限。将Control1,Control2,Control3依据定标分析过程,同批测量20次,批间测量12次,用于评价精密度。对收集样本(P1、P2、P3)依据定标分析过程进行测量,然后将Control1、Control2、Control3分别等体积加入P1、P2、P3中进行测量,用于评价回收实验。
2结果
2.1用HPLC纯化(Bio)xPVA(BCPDA)y复合物在10min~16min出现(Bio)xPVA(BCPDA)y的吸收峰,没有结合BCPDA的吸收峰在17min~24min出现,见图1。
图1净化(Bio)x-聚乙烯醇(BCPDA)y在高性能液化色谱(TSK-250过滤柱)上的变化图。(略)
流速控制在0.8ml/min,吸光率325nm
2.2用滴定法确定亲和素和(Bio)xPVA(BCPDA)y最佳配比SA量恒定0.01mg/ml,生物素标记的抗体包被分别浓度为0ng/孔、0.5ng/孔、5ng/孔、50ng/孔,缓冲液为pH7.8TrisHcl0.1M,Eu3+10-5M,(Bio)xPVA(BCPDA)y用量从40μl~55μl选择最佳值,50μl复合物荧光强度值(cpm)最佳,如图2。
图2滴定链球菌,(Bio)x-聚乙烯醇(BCPDA)y在10-3MEu3+,0.1MTris-Hclbuffer(pH7.8)缓冲液中的变化,0.01mg/ml链球菌,容积变动范围40μl~55μl,观察到最佳容积为50μl(略)
2.3验证活性用生物素化的各种浓度(0ng/50μl,0.5ng/50μl,5ng/50μl,50ng/50μl,100ng/50μl)鼠IgG包被96孔微板验证(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物的反应活性,在测定范围内成线性分布,见图3。
图3IgG维生素定量法标定曲线(略)
2.4PAPPA定标曲线及灵敏度在0mIU/L~10000mIU/L范围内定标曲线为线性分布,见图4。S0标准重复20次检测均值加2个标准差值代入标准曲线,计算出检测限为0.7mIU/L(数据没显示)。
图4PAPP-A标定曲线(略)
2.5批内、批间精密度对质控血清批内进行20次分析,批间进行12次分析,得到批内变异系数3.89%~4.96%,批间变异系数在7.35%~9.27%之间,见表1。
表1批内、批间变异系数比较(略)
2.6回收实验对收集样本(P1、P2、P3)依据定标分析过程进行测量,然后将Control1、Control2、Control3分别等体积加入P1、P2、P3中进行多次测量,分别计算回收率95.8%~104.2%,见表2。
表2回收实验结果比较(略)
3讨论
临床化学家最关心的问题是分析技术灵敏度,这也是临床诊断试剂的核心。近来,在临床化学检测物质的浓度的范围10-3mol/L~10-16mol/L。PCR以及其他的体外扩增技术使DNA、RNA检测方便、高效、特异。不幸的是蛋白不能复制,最敏感的定量方法是依靠蛋白之间的特异性结合如抗原抗体反应。一个提高蛋白检测灵敏度的方法就是信号放大,即在蛋白上标记可以检测的标记物,通过标记物的信号放大而达到更容易检测的目的。时间分辨免疫学技术是80年代迅速发展起来的的一种公认的最有发展前途的非放射免疫标记技术,其中荧光镧系螯合物具有较大的Stokes位移(275nm),较窄的发射光谱(10nm),较长的荧光寿命(10us~1000us),而被广泛构建时间分辨荧光免疫试剂。临床运用最广泛的是PE公司生产的解离增强镧系时间分辨荧光免疫分析(dissociationenhancedlanthanidefluoroimmunoassay,DELFIA)试剂,它必须使Eu3+与螯合物分离,由于其信号较弱,必须加入增强液来发大信号,操作烦琐且在加样的过程中可能引起外源性的污染,这些弊端影响了它的应用。在1987年,Evangelista和Diamandis合成一种新的螯合物BCPDA,开创了固相时间分辨免疫荧光技术,解决了DELFIA上述问题[8,9],但是BCPDA的较大分子量、表面特性和直接标记蛋白容易引起蛋白的失活对它应用带来一些问题,解决的办法就是连接一个载体。我们实验中引入了PVA作为载体,连接BCPDA和生物素亲和素。PVA直接连接蛋白技术难度较大,而生物素标记蛋白技术比较成熟,同时亲和素有4个生物素结合位点,可以起到信号放大作用,而提高检测灵敏度。我们实验中成功的合成了(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物,用它去识别生物素标记的抗体(见图3),结果显示亲和力非常高。实验关键问题是选择SA和(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物最佳比,我们实验中做了7个浓度梯度,选取结合后荧光强度最大的(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物浓度。利用HPLC层析纯后的(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物回收率是68%。通过实验选择最佳检测抗体浓度、生物素化抗体浓度和标本用量。Jackson[13]分析了提高灵敏度的因素即两个关键的因素与最终的结合分析灵敏度相关:我们监测标记分子(放射性同位素、化学发光剂、荧光团)的能力;结合试剂的质量和实验条件,在临床化学存在一种误导是特别敏感的监测方法(化学发光、时间分辨荧光)能获得好的结果。其实这是错误的,如果实验试剂和条件(抗体的亲和性和特异性,固相结合物的自然特性以及清洗效率)不被选择,很难达到理想的检测效果。为达到较高的灵敏度,需要选择高灵敏度的标记技术、高亲和力的试剂和最好的分析条件(可将试剂的非特异性结合降到最小)。利用镧系螯合物的时间分辨荧光免疫分析是一种高灵敏的标记技术,关键是实验条件的选择,我们验证不同孵育时间下,(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物产出率,以及和生物素化抗体的结合能力(数据不能显示)。经过大量的实验选择了Eu3+的浓度,使其能和BCPDA形成最佳比例(数据不能显示)。反应条件的建立中,我们筛选实验反应温度(18℃~56℃,每5℃选择一次)和反应时间(10min~24h),考虑到临床结果的报告时间,选择了20min(数据不能显示)。经过实验条件选择,形成了PAPPA的定标曲线,通过定标曲线确定最低检测限(见图3)。我们构建的(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物可以用于多种像PAPPA这样利用双抗体夹心法检测的试剂,如AFP等。我们选择构建PAPPA主要考虑到我国产前筛查项目的自产试剂较少,而且DS筛查尤为重要,由于科研经费的问题,没有进行最佳单抗配对实验,只是参考了国外的相关文献。不过我们实验的核心是构建(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物,为以后构建其他试剂做一定的前期工作。我们构建的PAPPA试剂,回收实验和精密度试验显示,完全满足试剂盒要求。在今后的工作中,我们主要验证(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物和成品试剂盒的稳定性,以及进一步和PE公司的PAPPA的DELFIA试剂做大量的临床对比实验。总之,我们成功构建了(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物和PAPPA的成品试剂,它有较高的灵敏度、准确度和精密度,又克服了DELFIA试剂的缺点。
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因为建筑机电安装时间段的特殊性,其进度会影响整个建筑工程的施工进度,所以控制其施工的进度的管理水平是反映整个施工队伍组织水平高低的风向标,除此之外,团队的反应能力的快慢,施工设备的利用率等方面也是否能实现机电一体化管理的决定性条件。建筑机电一体化安装工程的施工进度管理总筹划需要将施工总计划中的各个小部分目标和控制点按施工工程的进度安排具体分解到每一项、每一天的工程目标中,并严格按照计划编制详细的日计划、周计划、旬计划、月计划,并在每天的第二天召开施工总结、协调会议,总结当天的工作完成情况,安排接下来的工作开展计划。项目管理者必须不定时检查施工进度,督促施工者按照计划完成相应工作。保证机电一体化安装工程按期竣工。
二、施工准备阶段
作为任何一个建筑项目的机电总承包商,都必须同时具备过硬的专业水准以及足够的综合施工经验。不但要能够漂亮完成分内专业任务,还要能很好地组织统筹安排其他所有参与机电系统工程安装的公司有条不紊地进行配合施工工作。特备是做好整个机电系统的规划以及施工监督很重要。对于整个系统内部的参数设置校核,材料设备的选型优化,各系统管线的流量、流速、温度的控制,水泵、冷机、风机等设备的选择参数,安装的位置,施工的顺序,等等方方面面都要进行详尽的准备性规划,讲具体详细的任务制定成本,发放到每个参与进来的机电专业公司手中,同时送到土建公司、甲方、监理的手里进行备份。总承包商承担了机电系统的核心部分,是整个系统中的重中之重,要尽职扮演带头人的作用,充分发挥自身的专业优势,晚上并深化所负责专业的深化设计,如各系统管道设备综合支架体系的设计校核、综合廊道、设备才呢过、各机房的专业施工详图的设计等等。在争取圆满完成本职工作的同时,也要承担起从承包商的责任,组织指导非承包范围内的其他专业承包商完成本专业的深化设计,如自动化控制系统的深化、消防系统的深化,电路系统的深化,输气系统的深化,并组织进行方案审核。总而言之,机电系统的一体化的关键在于总承包商的发挥,在统筹讨论各专业的设计图的基础上,进行设计的优化,协调各专业的安装标高、空间位置,减少系统的交叉放工情况,推进支架公用的问题,提升机电系统的实体美观性、减少空间占用率。提升建筑的整体实效。
1.施工进行阶段
在施工阶段,各专业公司包括总承包商根据各自的具体任务,参考相应的图纸以及详细进程表,有条不紊地进行施工。因为机电系统的安装过程是一个极其复杂的技术活,所以仅仅靠前期的准备是远远不够的,所以有必要有总承包商成立一个施工调解组,负责施工期间个的施工监督、调节,发现问题,解决问题,协调矛盾,同时保持与土建部门的紧密联系,掌控现场的施工状况,总领全局,承上启下,上至土建总包、业主、监理,下至个承包商,施工组。同时定时召开工作总结会议,总结之前工作,要求之后工作。总之,总要有良好的调控能力,控制机电系统的安装施工过程能够有条不紊地进行下去。
2.施工调试阶段
在施工过程中,部分系统完成安装后,首先先进行这个部分的调试,保证部分系统的运行参数达到要求后在进行;然后在机电系统整体完成安装后,就要进行整体系统的调试。这些调试都需要总承包商进行组织,严格按照施工前的设计方案进行参数对比,保证系统各方面的运行参数达到要求,安全性能得到保障,表面装饰完成后,方可确认系统完成安装,可以交付。
三、总结
【关键词】中心摆药;医院药品管理;具体作用;改进工作
对于医院来讲,住院患者的每日用药发放一直是一项比较复杂的工作。为了解决这一难题,随着世界医药事业的发展以及众多医药工作者的不断实践,医院设立专门部门负责中心摆药模式应运而生。我国从上世纪70年代开始在国内各大医院进行推广中心摆药模式,目前中心摆药已成为医院药品管理中的惯例,成为药品管理的重要环节之一,在医院每天日常工作中占据重要地位。本文拟从中心摆药对于加强医院药品管理的具体作用、改进工作角度来进一步认识中心摆药这一药品管理模式在加强医院药品管理方面问题。
一、中心摆药对于加强药品管理具体作用
随着中心摆药工作在各大医院的实践与推广,这一工作的作用与必要性也得到大多数医疗工作者的认可,在某种程度上已经达成共识。具体归纳起来,主要可以表现为以下几点:
(一)有利于减少药品使用失误。未推广中心摆药之前,各医院的药品从仓库发送到患者手中需要多个环节,中间需要工作人员几易其手,难免中间会出现纰漏,从而导致药品使用不当或者失误。1采用中心摆药模式之后,药品的发放由专门的摆药中心进行管理,减少了中间环节,内部人员也多为专业药学工作者及具有丰富经验并懂得药学原理的专业护士组成,不仅能一定程度上避免药品在传递过程中出现失误,同时也能在药品的医嘱方面加强监督。
(二)有效减少药品库存积压与流失现象。药品库房是药品存放和供应的主要场所,为了能够有效、合理利用药品,避免药品积压,实现医院药品的有计划采购与供应,需要及时厘清库房内各类药品实用及库存情况。但在中心摆药室之前,库房与各科室内负责医护工作人员之间的联系较为分散,不能及时反馈信息,同时各科室部门人员可以直接从药品库房取药,从而难免会发生药品特备是贵重药品流失现象。2只有设置中心摆药室后,取消各科室的药房等部门,减少药品库房与科室之间的联系距离,实现药品库房与摆药室内专业药学工作人员之间的科学互动,将库房药品积压与流失现象比例降低。
(三)有利于推动临床医学与药学的领域之间相结合。虽然中心摆药室出现之前,各科室药房也有药学工作者,但是只是简单发放药品,本专业知识并没有得到发挥。建立中心摆药室后,由其负责全面全院各科室药品使用,实际上无形之中加强了专业药学工作者与患者之间的联系,同时通过各科室医生在开药过程中的医嘱等活动实现与药学工作者的交流。在新药品推广与宣传过程中,中心摆药室能够及时得到药品回馈信息,从而接触到药品的不良反应、感染等第一手资料,从而推动临床医药学的进一步发展。
二、当前中心摆药改进工作
虽然,目前我国各医院中心摆药工作已取得众多管理经验与成果,在药品管理工作中的作用十分明显,但是,不可否认的是,中心摆药工作仍存在诸多不足与缺陷,简单可以归纳为以下几点:
(一)摆药过程使药品的存储条件发生变化,不仅影响了药品的质量,同时也为控制药品的使用期限增加难度。药品对于环境依赖性较强,特别是对于潮湿的空气和光较为敏感,摆药过程中将药品拆除后置于磨口瓶中,片剂药品容易变潮,外观和性能都会或多或少受到影响。另外,摆药室的药品种类繁多,拆除包装后摆放时核对困难增加,容易混淆使用期限,不利于药品的科学使用,药效大打折扣。
(二)药品及器材的污染问题。根据笔者的调查发现,目前部分医院的中心摆药室人员为了所谓的节省时间,在摆药时有时会直接用手接触药品,核对师在倒药时也习惯用手,这种接触都不可避免地造成药品污染。同时,部分医院在摆药时并没有采用一次性塑料性口服药杯,药匙也没有做到定期消毒,在工作者与患者之间的多次循环利用后,造成这类器材交叉感染现象。
(三)先进技术与设备没有得到及时更新与应用。从上世纪80年开始,国外开始引进自动药品摆放机,随着这项技术的推广,给手工单剂量摆药工作带来巨大改变,不仅仅大大减轻了相关工作人员的工作量,节省了人力,还能从摆药和倒药这两个关键环节上减少和杜绝药品错误的发生。虽然机器不能完全保证零失误,且需要大量成本投入,但是从目前的相关使用情况来看,结合该类机器出现之前的摆药失误,成本远远小于收益。然而要想科学引进自动药品摆放机,需要医院自身已实现病区医嘱的电子录入和信息传递。这就需要诸医院首先要完善自己的中心摆药室的电子信息系统,为实现与自动化设备的链接做好充分准备。但是从目前的情况来看,能具备这一能力的医院屈指可数,先进技术与设备的引进与推广仍需要时间。
以上三点仅是目前我国各大医院中心摆药工作过程中发现的几个主要问题,为了更好地推广中心摆药模式,发挥其作用,加强医院的药品管理工作,就必须要求各大医院针对自己具体情况进行改进。首先要加强药品摆放室的药品管理,针对不同药品对于环境的不同要求进行不同的摆放与管理,避免混放与药品使用期限不明问题。其次要加强医护工作人员的职业道德和技能培训,特别是针对《药品管理法》、《护士法》和《医疗事故处理法》的学习,明确自己的职责和义务,严格按照药品保护的卫生规范,杜绝对药品的违规操作。同时,为了避免药品污染和器材的感染,一次性药品器材的使用要进一步推广。
参考文献
论文关键词:学校对青少年开展预防性病艾滋病健康教育研究现状
性病艾滋病已成为一个严重的公共卫生和社会问题,目前控制性病艾滋病流行的重要策略之一就是加强对广大人群尤其是青少年进行健康教育[1]。世界各国防治艾滋病的经验表明,在尚无完全有效治愈艾滋病的药物和免疫疫苗问世的情况下,通过健康教育提高人群对该疾病的认识,特别是对青少年进行大范围的健康教育被公认为是预防和控制性病艾滋病最有效的手段[2]。为更有效地对在校青少年开展预防性病艾滋病健康教育,现对我国学校对青少年预防性病艾滋病健康教育的有关现状作一综述。
1. 学校开展对青少年预防性病艾滋病健康教育的重要意义
目前,中国的性病艾滋病正进入一个快速增长期。随着社会和经济的发展,青少年对婚前性行为的认同和发生率逐年升高,国内近年来多次流行病学调查的结果表明,青少年中普遍存在生殖健康知识严重匮乏,意外妊娠和非婚生育者明显增加,性病生殖道感染发病人数上升等问题,使青少年成为潜在的艾滋病感染的高危人群。1999年全国性病流行病学分析已发现的艾滋病感染人群中15~29岁的青少年感染者占77.60%[3]。世界卫生组织报告表明,到2007年底,我国现存艾滋病病毒感染者和病人约70万人,全人群感染率为0.05%。其中艾滋病病人约8.5万人;新发艾滋病病毒感染者约5万人教育管理论文,因艾滋病死亡约2万人;而新增加的艾滋病感染者中50%是10-24岁的青少年。因此,处于性活跃阶段的青少年已经成为了预防性病艾滋病的重点人群[4]。
随着青春期性发育的开始,青少年性机能也逐步趋于成熟,心理状态也发生较大的变化。如果不加以正确引导,就很有可能感染性病艾滋病。原因主要是由于:(1)青少年缺乏必要的性与生殖健康的科学知识、正确态度和相应的防御技能怎么写论文。(2)中国人的性成熟年龄普遍提前,从而出现性行为开端的低龄化、无保护措施的性行为、增多的趋势。(3)由于自身条件限制,使其性行为多为随意性,容易遭受性病艾滋病感染的侵袭。以上原因证实,青春期容易遭受健康危险因素影响生命阶段,特别是不安全的性行为和相关生殖健康的结局。因此,开展并加强对青少年人群的性健康教育,预防性病和艾滋病已成为当务之急。
2.学校对青少年开展预防性病、艾滋病健康教育的概况
我国20世纪90年代开始试行预防性病艾滋病的学校教育。在原国家教委体卫艺司和卫生部疾控司及国际组织的联合支持下,在全国建立了预防性病艾滋病学校健康教育师资培训的有关网络,建立了“预防性病艾滋病学校健康教育师资培训基地”。国务院下发了《国务院关于切实加强艾滋病防治工作的通知》,教育部门要将艾滋病防治和无偿献血知识纳入普通中学、中等职业学校和高等学校教学计划,落实教学课时,每年有2h的艾滋病健康教育,并对高校新生发放《艾滋病健康教育处方卡》,深入持久地开展艾滋病防治和无偿献血知识宣传活动。马迎华等[5]等对全国28个省(自治区、直辖市)6924名大学学生的调查显示,有93.10%大学生赞成在学校开展预防性病艾滋病的健康教育。与其他国家的实践证明,学校的性与生殖健康教育可显著提高青少年的性和生殖健康知识水平[6],经教育和生殖健康服务可有效地降低年轻人性相关的健康危险[7]一致。认为学校是对青少年进行健康教育的最佳场所,青少年学生则是艾滋病健康教育的重点对象。总之,健康教育正越来越受到人们的关注和重视,在预防性病艾滋病中发挥着日益重要的作用。
3.学校对青少年预防性病、艾滋病健康教育的方式及效果
3.1学校教育 在20世纪90年代初期,近四分之三的发达国家和60%的发展中国家就已经实施了以学校为基础的艾滋病干预计划。将学校健康教育作为最重要的手段和有效策略,并把学校作为国家预防艾滋病的重点。我国在1998年印发的《中国预防艾滋病中长期规划》提出把预防性病、艾滋病知识纳入我国大、中学生的健康教育课,认为在学校预防STD/AIDS健康教育中,校医肩负着重要责任。学校能确保学生通过正规渠道学习有关性健康、预防性病、艾滋病方面的知识和技能,使年轻人避免HIV/AIDS感染,减少他们的过分恐惧和偏见,并将他们在学校学到的知识和技能传播给家庭、社区及他们的同伴教育管理论文,值得推广和普及[8,9]。
3.2同伴教育 同伴教育是指具有相同背景、共同经历或由于某些原因使其彼此有共同语言的人在一起分享信息、观念和技能,并决定自己行为,以实现教育目标的一种教育形式。目前,同伴教育在青少年预防性病艾滋病健康教育中正扮演着非常重要的角色,而且广泛地被证明是一种行之有效地方法。国外研究显示,青少年乐意与同伴教育者讨论与性病艾滋病相关的话题,寻求有关预防性病艾滋病的相关信息。通过同伴教育后,青少年普遍提高了预防艾滋病、性传播疾病和安全性行为的知识水平;对艾滋病患者和艾滋病病毒携带者的态度变得比较同情;初次性行为的发生有延迟,安全套的使用率增加[10,11]。同伴教育者起到了榜样作用。国内研究也显示,同伴教育是一种青少年乐于接受而又有确切效果的健康教育方式,在提高青少年对艾滋病的认识、正确对待艾滋病病人、在自我保护及安全性行为中具有非常重要的作用[12,13]。如叶利贞[14]等研究还表明,同伴教育对提高大学生防治性病艾滋病的知识水平效果显著,对树立大学生防治性病艾滋病正确态度具有重要影响,对大学生防治艾滋病相关行为的正向转变具有一定作用。
3.3网络或录像教育 网络或录像在性病艾滋病健康教育信息传播上扮演着重要角色,是宣传预防和控制艾滋病信息的重要途径之一。特别在信息量急剧增加的今天,网络易于检索、信息易于保存、个性化和私密性的优点,网络媒体的出现极大地扩展了社会信息的传播,并为健康教育改善传播效果提供了极好的渠道怎么写论文。徐钟谓[15]等利用网络(论坛)对艾滋病防治知识宣传的实践研究发现,网站的开设与网络宣传和咨询在防治艾滋病宣传中可以起到独特而显著的效果。王左卿等研究结果提示,艾滋病健康教育讲座对提高学生的艾滋病知识水平相当有效。讲座后大学生相关健康观念形成率提高,尤其是在对待艾滋病病人的态度上有所改善[16]。
3.4其它健康教育 其它健康教育如采用以学生为主体,以问题为中心,师生互动的参与式互动式教学模式[17]。在掌握知识、转变态度的基础上,帮助他们提高分析问题和解决问题等方面的能力,为形成健康的行为,从根本上预防艾滋病的传播打下基础。其中家庭教育、社会参与、电视、报纸、期刊等传统媒体、出版社、专业咨询组织和机构等建立健全,使青少年掌握性病艾滋病性病的危害、传播途径和预防方法等知识,对性病艾滋病的预防起到了积极的推动作用。
4.学校开展青少年预防性病、艾滋病健康教育的建议
学校在开展青少年预防性病、艾滋病健康教育活动中,取得了一定的成效教育管理论文,但也存在不足。在今后的工作中,我们应采取:(1)切实可行的措施,加强领导,进一步落实国家及教育部有关预防性病艾滋病健康教育的工作要求,不断推动青少年预防性病艾滋病健康教育的全面开展。(2)建立健全各项规章制度,使有关性病、艾滋病健康教育合理化。(3)加强性病艾滋病健康教育力度如师资培训活动等;增加性病、艾滋病健康教育方式如网络教育、家庭教育等。(4)根据有关部门和教育部要求,制定青少年预防艾滋病健康教育工作检查评估办法和检查的量化指标,通过科学评估、加强督促指导、加大奖惩力度等,以引起各级教育行政部门和学校的重视,促使青少年预防艾滋病健康教育各项措施的落实。
综上所述,学校加强对青少年性病艾滋病的健康教育等一系列宣传活动,取得了一定的成效。但面临性病艾滋病以惊人的速度在全球范围内蔓延,日益增多的趋势下,对广大人群特别是青少年如何有效地开展健康教育,如有效地预防和控制性病艾滋病,是一个新的课题,新的挑战。
参考文献
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【关键词】畜牧业;发展;经济战略
要发展畜牧业经济,其战略重点应放在哪里?根据资源、人才、技术、资金等诸多经济条件,并考虑到经济、社会、生态三方面效益,在新的形势下我国畜牧业的发展依然面临着严重的挑战和危机。一方面,原有的不适应市场经济的一些顽症依然在,困扰着畜牧业的正常发展。另一方面,我国加入WTO后对畜牧业尽快与国际接轨提出了最迫切的要求。正视现实、认清形势、充分了解我国畜牧业在新形势下寻求发展的优劣势,结合实际情况,制定出适用的、可行的以及可接受的我国畜牧业发展战略,是当前我国畜牧业所面临的必然选择。新形势要求我国畜牧业发展要按照世贸组织规则进行市场竞争,尽快提高总体发展水平和国际竞争力。我认为,应该走农牧结合的路子,逐步建立起一个有畜牧和农业的良性循环的结构模式。而要建立这种模式,非以农区作为突破口不可,即大力发展以牛羊为主的草食性动物。
1 秸秆过腹转化
把畜牧业作为发展经济、富民强家,对畜牧业的高度重视是我国畜牧业得以健康发展的一项兴国战略来抓,特别是自改革开放以来,稳步发展,并从容应对入世挑战的根本保证。随着我国畜牧业产业结构的不断调整和市场庞大的消费群体为我国畜牧业的发展提供消费空间,市场经济体制的逐步建立,畜牧业在我国的国民经济中形成了广阔的市场,农业经济中越来越起着重要的作用。中国已发展成一个畜牧业大国,更是畜牧业消费大国。是以满足人民群众日益增长的对肉食品需求的一项重要内容,在整个世界的肉类消费品的不断需求提供发展基础。以廉价的农副产物(玉米秸)转化为动物性蛋白质,满足人们日益增长的膳食需要是必经之路。秸秆过腹转化还可以转变人畜争粮的现状,减少粮食的消耗。
2 加工销售
通过食草牛羊的养殖、深度加工出售。这是一项潜力大、见效快、有前途、划得来的开发项目。我们要按照国际市场的要求,不断增强商品意识和竞争意识,努力把养殖牛羊业搞上去,树立品牌、精深加工,拉长产业链条,提高产品附加值,做到利益最大化。
3 以农区作为突破口
不仅是玉米秸秆资源丰富,而且科技人才数量大。农区的交通便利,经济十分活跃,对产品流通十分有利。
发展秸秆养牛羊业,不仅是个发展顺序问题,而且是畜牧业创汇问题。总之,发展外向型畜牧业,参与国际经济大循环,是发展秸秆畜牧业经济的战略构想。需要加大政府引导和扶持力度各级地方政府要把发展规模养殖作为加快畜牧养殖生产方式转变的突破口来抓,研究发展措施,制定实施规划和具体方案,明确发展目标和战略重点,有计划、有步骤地组织实施。农业、畜牧、财政、土地、交通、电力等部门要切实加大政策扶持力度,为发展规模养殖创造宽松、良好的外部环境。
4 规模养殖
多年来我国畜牧业得到了不断发展,这种经济表现形式又客观反应了我国畜牧业发展形成的规模小、形式单一、饲养管理粗放、效益低,这就要求畜牧业发展成为产业化、集约化,破解依赖行政或行业的特点,严重制约了加入WTO的重重阻力。为了推进畜牧生态健康养殖进程,并通过向广大养殖户积极宣传各级政府颁布的各项惠农政策,充分调动广大农民养殖户和相关企业老板投资创办生态健康畜禽规模养殖的积极性,积极创办畜牧生态健康养殖示范基地,给农民树立样板。便于履行服务和相关监管监测职能工作,如帮助制定合理而科学的畜禽免疫程序,认真做好重大动物疫病免疫工作和场地圈舍等消毒设施的规范完善,农业投入品的安全监测和对周边环境有否污染情况监管等,指导农户建立健全生态健康养殖档案等服务工作,在认真做好配套服务工作的同时,还方便惠农扶持政策及各级政府和相关部门的政策宣传。
5 养殖牛羊的经济效益
以养殖1头母牛为例,一年可产一头犊牛,犊牛经过一年的饲养出售,即可获利250kg×24元/ kg =6000元,母牛饲养一年需要一晌地的玉米秸秆400元,精饲料200 kg×2.5元/kg =500元,即投入900元;犊牛饲养一年的费用与母牛相当,也在900元左右;则饲养一头母牛一年获利在4000元左右。如果再将犊牛育肥半年,则可再获利600元。
养一只母羊,一年可产仔成活3只,每只羔羊断奶即可卖550元,3只羔羊出售1650元,饲养一只成年母羊的成本是秸秆750kg×0.2元/kg =150元,精料100 kg×2.5元/kg =250元,总支出为400元。年收入为1250元,效益十分可观。
从畜牧业发展形势看,食草牛羊的养殖数量逐年增加,市场需求量越来越大,与人们生活水平提高密不可分,膳食需求量大。牛羊皮张制品需求量也十分巨大。
由此看来,牛羊肉加工、皮张加工、都是促进养殖牛羊业发展的有效技术手段和进行产品流通的宽阔领域。必须搞系列开发,向集约化、社会化、商品化和现代化的方向迈进。
6 搞好服务
做好牛羊饲养管理、繁殖改良、防疫灭病等服务工作,提高个体牛羊的产品产量与产值。为养殖户提供市场信息、产品营销、技术咨询、人力培训等方面的服务,解决养殖户科学饲养水平不高、养殖信息不灵、畜禽产品流通不畅等问题。在技术推广中,探索既加快出栏又增加效益、降低成本的新途径。特别是综合配套技术的应用,把良种、良料、良舍、良法有机的结合,发挥整体功能的作用。在秸秆加工制作,冷配改良等方面,完善基础设施,做好服务,应该是一项脱贫致富、发展产业广阔的大项目。