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保护眼睛的感悟

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保护眼睛的感悟

保护眼睛的感悟范文第1篇

在哪

【关键词】  槲寄生生物碱;P53;RT-PCR;人肝癌细胞株SMMC-7721

   

Abstract  Objective:To examine the effects of mistletoe alkali on P53 expression in Human Hepatocarcinoma cell SMMC-7721. Methods:MTT assay was used to evaluate the inhibitory effects of mistletoe alkali on the proliferation of human Hepatocarcinoma cell SMMC-7721. RT-polymerase chain reaction (RT-PCR) technique was used to evaluate P53 mRNA expression in human Hepatocarcinoma cell SMMC-7721. Results:Mistletoe alkali significantly inhibits the growth of SMMC-7721 cells in a time and dose-dependent manner. After exposure of SMMC-7721 cells with mistletoe alkali at 0.100mg/mL for 24 hours, the relative intensity of P53 mRNA expression level as determined by RT-PCR increases markedly (P<0.01). Conclusion:The stimulation of the expression of anti-oncogene P53 by mistletoe alkali may underlie the molecular basis for it to inhibit tumor growth

  

Key words  Mistletoe alkali; P53; RT-PCR; Human hepatocarcinoma cell line SMMC-7721

原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,其死亡率居恶性肿瘤的第二位[1],且原发性肝癌具有起病隐匿、进展迅速、高度恶性、易转移复发、治疗难度大、生存期短等特点,被称为“癌中之王”[2]。目前肝癌以外科手术为首选治疗方案,但术后5年生存率并不理想,总体只有62.9%,大肝癌术后5年生存率仅34.6%。近年来应用传统的中药治疗日益受到重视。槲寄生为桑寄生科植物槲寄生[Viscum coloratum(Komar)Nakai]的干燥带叶茎枝,其味苦、平,归肝、肾经,有祛风湿、补肝肾、强筋骨、安胎作用[3] ,且槲寄生有较好的抗肿瘤效果[4] 。本文从分子水平探讨槲寄生抑制肝癌的机制。

1  材料与方法

在哪

1.1  材料

1.1.1  细胞株  人肝癌细胞SMMC-7721,购于中国科学院上海细胞研究所。

1.1.2  主要试剂和仪器  RPMI1640(GIBCO),胎牛血清(杭州四季青公司),二甲基亚砜、MTT(Amersco),RNA提取试剂盒、RT-PCR试剂盒(宝生物公司),琼脂糖(Promega),引物(上海生工)、Forma CO2培养箱(美国),ELX-800酶标仪(美国),Enpddorf低温离心机(德国),PCR仪(美国),紫外分光光度计(日立),倒置显微镜、凝胶成像系统(上海康乐)。

1.1.3  药物  槲寄生购于包头益仁堂中药房,山西医科大学药学系扬官娥教授鉴定该中药为槲寄生并非其他寄生。槲寄生生物碱由本校化学教研室予以提取。将提取物以碘-碘化钾试剂、碘化汞钾试剂检验呈阳性反应,证明提取物为槲寄生生物碱。

1.2  方法

1.2.1  体外细胞培养  细胞培养于含10%胎牛血清、100mg/L青霉素、100mg/L链霉素的RPMI1640培养基中, 37℃、5%CO2培养箱中培养,每2天换液1次。

1.2.2  MTT法测定槲寄生生物碱对肝癌细胞增殖的影响  取对数生长期的肝癌细胞调整至1×105/mL,取0.200mL接种于96孔板,置37 ℃、5%CO2培养24h后弃原培养液,加入浓度为0.200mg/mL、0.100mg/mL、0.050mg/mL、0.025mg/mL槲寄生碱培养液各0.200mL,每个浓度设6个复孔,分5次重复,并设阴性对照、5-Fu阳性对照(10μg/mL)和空白对照孔,同时作3个板。分别作用 24h、48h、72h后倾去上清液,用D-Hanks洗涤2次,各孔加入5%MTT 0.020mL,37℃4h后吸去上清液,加入DMSO 0.150mL,振荡10min使结晶充分溶解后上酶标仪490nm处测吸光度A值。抑制率(%)=(对照孔A值-实验组A值)/对照孔A值×100 %。依据MTT结果用改良寇氏法计算IC50。

1.2.3  槲寄生生物碱对人肝癌细胞SMMC-7721P53 mRNA表达影响的测定  (1)细胞给药:取对数生长期的SMMC- 7721细胞调整至2×105/ mL,2.500mL接种于6孔板,置37℃、5 %CO2培养箱,培养24h后弃原培养液,对照组加入不含药物的培养基2.500mL,试验组依据MTT结果加入含浓度为0.100mg/mL槲寄生生物碱培养液2.500mL培养24h(抑制率为38%)。(2)总RNA的提取:用RNAiso Reagent提取试剂,经氯仿抽提、异丙醇沉淀,分别提取实验组和对照组细胞总RNA。提取的总RNA用紫外分光光度计在260nm和280nm下检测其吸光度值,以A260nm/A280nm比值表示其纯度。(3)引物设计:参考文献[5-6] 及GenBank中基因序列设计引物。P53上游引物:5′-TGTCCCCGGACGATATTGAAC-3′,下游引物:5′ -TTCCTTCCACTCGGATAAGATGC-3′;β-actin上游引物:5′-GTGGGGCGCCCCAGGCACCA-3′,下游引物:5′-CTCCTTAATGTCACGCACGATTTC-3′。(4)RT-PCR反应:逆转录取总RNA 1μL按反转录试剂盒要求配成10μL反应体系,实验组和对照组分别进行逆转录PCR反应。转录条件为30℃ 10min、50℃ 20min、99℃ 5min、5℃ 5min,共一个循环。(5)PCR反应:β-actin扩增条件: 94℃预变性2min,94℃ 30s,55℃ 30s,72℃ 1min,35个循环,72℃延伸8min。P53扩增条件:94℃预变性2min,94℃30s,56℃30s,72℃1min,35个循环,72℃延伸8min。

1.2.4  半定量分析  将扩增的RT-PCR产物在2%琼脂糖凝胶中电泳45min。电泳结束后在紫外透射仪下观察电泳条带,于凝胶成相仪上进行目的条带的密度定量,以目的基因条带的密度与内参β- actin的密度之比作为该目的基因的mRNA的相对含量。

1.2.5  统计学处理  实验结果用SPSS 11.5统计分析软件处理,数据用x±s表示,行t检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。

2  结果在哪

2.1  槲寄生生物碱对细胞增殖的影响  槲寄生生物碱对SMMC-7721细胞有显著生长抑制作用,且呈剂量和时间依赖方式,0.100mg/mL和0.200mg/mL浓度组在24h、 48h、72h均表现出抑制SMMC-7721细胞生长作用,抑制率分别为38%、52%、75%和52%、74%、93%,且作用强于5-Fu。 0.050mg/mL组及0.025mg/mL组也表现出抑制SMMC-7721细胞生长作用,在3个时间点抑制率分别为9%、21%、49%和0%、5 %、23%,但作用弱于5-Fu。

2.2  RT-PCR结果

2.2.1  总RNA抽提结果  所提取RNA经紫外分光光度计检测A260nm/A280nm比值为1.8,说明提取的样品为较纯的RNA。

2.2.2  槲寄生生物碱对人肝癌细胞SMMC-7721 P53 mRNA表达的影响  0.100mg/mL槲寄生生物碱作用24h后能增强人肝癌细胞SMMC-7721 P53 mRNA表达,差异有统计学意义(P<0.01)。电泳及P53 mRNA/β-actin mRNA半定量见图1及表1。

图1  槲寄生碱对肝癌SMMC-7721细胞P53 mRNA表达的影响(略)

M为Marker,1、3为对照组,2、4为药物组,1、2为P53,3、4为β-actin内对照

表1  槲寄生碱对肝癌SMMC-7721细胞P53 mRNA表达的影响(略)

*与对照组比较P<0.01

3  讨论在哪

  

槲寄生是我国传统中药,分布广泛,在我国主要分布在东北、华北地区,资源丰富。为了开发利用天然资源,国内外的学者作了大量的工作。目前证实槲寄生有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、免疫调节、抗氧化、抗衰老等作用。目前研究较多的是槲寄生苷类的结构及槲寄生毒肽的抗肿瘤作用,对生物碱的研究不多。彭海燕等[7]的研究表明槲寄生生物碱在120mg/kg计量时对小鼠肝癌H22 的抑瘤率可达73.8%。肿瘤抑制基因是肿瘤遗传学及分子生物学的研究热点。P53基因与肿瘤关系最为密切。野生型的P53基因产物监控基因组的完整性,当DNA受到损伤时,野生型P53产物通过转译后的稳定作用,蓄积、促进细胞周期停留在G1期,用这额外的时间进行修复[8]。野生型P53基因的结构和表达异常是肝癌中最多的基因改变之一[9]。

  

本实验从分子水平探讨槲寄生生物碱的作用机理与基因表达的关系。我们选择了与肿瘤发生关系密切的基因P53作为研究对象,检测其mRNA的表达。研究发现,槲寄生生物碱0.100mg/mL作用于肝癌细胞株SMMC-7721 24h后,野生型P53表达增强。这表明槲寄生生物碱可能激活抑癌基因P53而使癌细胞死亡从而发挥其抗肿瘤作用。对于槲寄生生物碱作用后其他浓度及时间点基因表达的改变有待继续研究。

【参考文献】

 

[1] 中华人民共和国卫生部.1995中国卫生统计提要[C].中华人民共和国卫生部,1995:73.

[2] 张健,赵秀丽,翟玉萍.原发性肝癌中医药治疗进展[J].内蒙古中医药,2004,(6):35-36.

[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].一部.北京:化学工业出版社,2005:258.

[4] 王庆瑞,刘梅筠,王东阳,等.槲寄生总生物碱的抗肿瘤作用[J].中国中药杂志.1994,19(1):45-47.

[5] Khan ZA,Jonas SK,Le-Marer N,et al.P53 mutations in primary and metastatic tumors and circulating tumor cells from colorectal carcinoma patients[J].Clin Cancer Res,2000,6(9):3499-3504.

[6] Selvakumaran M,Lin HK,Miyashita T,et al.Immediate early upregulation of Bax expression by p53 but not TGF beta 1: a paradigm for distinct apoptotic pathways[J]. Oncogene,1994,9:1791-1798.

[7] 彭海燕,章永红,韩英,等.槲寄生碱抗肝癌作用试验性研究[J].实用中医药杂志,2004, 20(5):227-228.

[8] Vaziri H,Benchimol S.From telomere loss to p53 induction and activation of a DNA-damage pathway at senescence: the telomere loss/DNA damage model of cell aging[J].Exp Gerontol,1996,31(1-2) :295-301.

保护眼睛的感悟范文第2篇

关键词:美术  课堂   观察  生活

教师应当加强美术与其他学科的联系,与学生生活经验紧密联系在一起,使学生在实际生活中领悟美术的独特价值,从学以致用的角度激发学生的学习动力,促使学生努力追求生活的艺术。那么,如何使小学美术教学走向生活化呢?

一、 引导学生观察生活,体验生活。

    如苏教版小学美术《亮眼睛》这一课属于观察技法课,孩子对人的眼睛很熟悉,但平时却没有意识、积极地去表现和了解。在本课的学习中教师要让学生自己收集有关资料,体会美术和生活的渗透关系,并且通过欣赏、观看、讨论交流、表演体会感受眼睛所表达出的人的精神内涵和保护眼睛的意义。为此,我在本课的教学环节中多次加入观察环节,如:

一、  创设情境 引起关注

    1、小游戏:猜猜看(课件播放图片)让孩子通过观察,感受从他们的眼中猜到他们看到了什么。孩子看图片讨论。

   (设计意图:与孩子的实际联系交流自己的所见、在小游戏中猜猜他人眼中的事物,可以进一步提高大家的学习情趣,更为在表现阶段画眼中的事物打下基础。)

    二、观察发现,引导想象

    1 请孩子们互相观察一下周围同学的眼睛,再来说说自己都看见了什么。

    2 教师引导学生发现眼睛各方面的细节,如轮廓,高光等。

    (设计意图:学生互相有目的地观察眼睛,有目的的感受眼睛的自然形态,为表现亮眼睛的形状、色彩、特征和神态做准备。)

    3、 学生观看课件,了解眼睛的结构与简单的视物原理。

   (设计意图:利用卡通动画形象介绍眼睛的知识,生动形象,易于接受,让学生能够很生动的了解到眼睛视物的原理)

     4、小游戏:请大家观察一下屏幕上的几双眼睛,猜猜他们分别是什么人的眼睛?能说出原因吗?

   (设计意图:学生初步体会眼睛的神态,让学生通过选择游戏比较了解不同年龄、不同性别人的眼睛的不同特点。)

    三、观察交流、表达审美感受

学生以小组为单位表演互相作出不同的表情,其他学生观察眼神与眼形的变化。

   (设计意图:艺术是相同的,让学生在歌曲中感悟人类心灵的窗口,学生在自己的眼神的表演中加深对眼神的理解。)

    二 创设生活化的情境,激发兴趣。

    生活化情境教学是一种教学方法,就是教师在美术课上根据教学目标,利用各种教学手段,创设一种符合学生心理年龄特点的环境和条件,使学生自觉地全身心地投入到美术活动中来,从而激发学生的学习兴趣。

    如在上《亮眼睛》课件播放“山区学生” 照片,通过观察山区孩子的眼睛,让孩子谈谈自己的感受,教师引导学生联想:“他们渴望什么?” 学生体会渴望读书的眼睛。

    教师引导学生关心穷苦的孩子,珍惜自己的美好生活。

三 及时即兴创作,表现生活

    孩子的感受源于对生活的体验,是他们心灵的反映,作为美术教师,我们认为应该及时、正确地引导和激励学生乐于动笔、勤于动笔,及时创作,表现生活。如:

     1教师示范

    学生观看教师表现的过程,想象与教师交流眼中看到的内容。

(设计意图:此环节体现了美术课中教师的示范性,学生从中体会刻画的过程,知道刻画的重点,这是解决重点的必要环节。)

     2、学生创作、绘画

     1、可以画自己的眼睛,也可以话别人的眼睛。比比谁观察的最仔细,谁画的眼睛亮! 学生选择自己喜欢的美术工具和方法,画一幅“亮眼睛” ,表现出眼睛的形状、颜色、神态等。

     四 巧妙运用美术,美化生活。

    将美术应于生活是美术教育的最终目的。学以致用,让学生获得创造的满足感与成就感。教学中教师可以根据学校的活动,为学生创设运用美术的生活环境。如:

    1、教师:眼睛对我们这么重要,我们要不要保护他们呀?那怎样保护呢?

    学生讨论自己怎样保护眼睛。

     2、教师:同学们,每年的6月6日是全国的爱眼日。每年爱眼日的主题。

学生说说自己对爱眼日的了解

保护眼睛的感悟范文第3篇

有一双辨别七彩的锐眼,借助不同色彩所传达的情感,而很好的抒发自己的感情,不免有事倍功半的效果。用心爱惜自己的眼睛,爱惜这一心灵的窗户,不让其受一丁点的伤害。设想,倘若眼睛失去观看色彩的能力 ,又何以能想象出百花的娇艳、宝石的璀璨和凤凰的色彩斑斓……

眼睛是心灵的使者,通过从眼睛中“放射 ”出的光泽,传递着人的思绪,也传达着人的情感。温情脉脉的人,总流露出柔和的目光,使人神魂颠倒;凶神恶煞的人,总发射出凶恶的“利箭”,让人毛骨悚然。没有感情的人眼眸黯淡无光,失去光明的人的眸子无法表达他的心绪,因此人们不理解他的心事,渐渐地变得郁郁寡欢,对生活抱怨,对人冷漠,封闭自己。他的生活从此失去色彩,他的生活从此失去意义。

何不让眼睛成为情感的代言人,让它更好地传递你的千恩万绪,那就必须细心的呵护它,千万不可小视对它的保护,它才能真正为你效劳,将你交予它的任务完美的表现出来。

世间万物只有通过眼睛看才能将其美与独特显示得恰到好处。“春游芳草地,更赏绿荷池。秋饮黄花酒,冬吟白雪诗。”多美的季节韵律,没有眼睛的洞察,能品味到吗?

保护眼睛,它是人类拥有最宝贵的财富,用心地去呵护它,不一定要有最好的待遇。眼睛从不攀比,它从不在乎别人对它的付出是否超众,只要有用它就欣然接受。只要你有心并用心去爱护,做好眼保健操,就是对眼睛最好的保护。

有时,偶尔的一个眼神,已胜过千言万语。

我相信眼睛是心灵的使者,因为眼睛在“会当凌绝顶”时,才会看见“一览众山小”的雄伟泰山,进而感受诗人的心胸气魄;因为有眼睛看才有“不畏浮云遮望眼,自缘身在最高层”登高览胜的独特感受……由此看来眼睛是心灵的功臣呢!

眼睛几乎是人全部灵感和感悟的来源!不起眼的事物经过眼的审视和新的判别与理解而具有独特的启示,使人的心灵更充实,内涵更丰富。

多亏了眼睛,心灵才能有更多的启示引导我们,不至于在道路上迷失方向;

多亏了心灵,眼睛才能充分欣赏一切美好的事物,从而陶醉心灵;

多亏了眼睛,心灵才得以将自己那独有的才华向世人展现得那么精妙绝伦;

……

保护眼睛的感悟范文第4篇

不久,我俩确定了恋爱关系,很快坠入了爱河,常常在夜幕降临后,牵手漫步在幽静的田间路边,有时我轻声唱歌,他口琴伴奏。看电影,逛公园,彼此倾吐衷肠,加深着感情,也加深着了解。40多年后的今天,每每回忆起那段美好的时光,依然感觉甜蜜而温馨。

我出生几天母亲就撒手西去,他很小被卖离家园,这近似的经历,让我们彼此更珍爱也更呵护对方。没有海誓山盟的承诺,只有我精心剥出了100粒瓜子仁,看着他一粒粒吃完。我暗自发誓,今生今世百分之百地善待他。

在那特殊困难时期,我们没有举行婚礼,拜见了双方老人,被褥一合结凤鸾。废木堆里挑了块木板做菜板,旧铁桶做成了炉子,温馨火焰做三餐。我们先后生育三个儿女,没有老人照管,全靠夫唱妇随,齐心协力,日子再苦再累心里也是甜的。

然而,天有不测风云,21年前他意外遭遇车祸,至今我想起仍心惊胆战。当时,他不省人事,血迹满面,颈椎挫伤,上肢瘫痪。当时孩子们都还很小,我没有惊动任何亲人,日日夜夜守护在他身边,给他讲故事、唱歌、说笑话。爱情有着无坚不摧的力量,他奇迹般地康复了。这些年来,他在爱的滋养中身体强壮不减当年。

进入暮年的我多了不少生活的感悟。年轻时,我性子急,稍不如意就发脾气。随着时光的日积月累,我变得成熟,我感激老伴对我的宠爱与包容,所以无微不至地关心他的衣食住行。为老伴添欢乐,我自有妙招妙语:每当他帮别人修好电灯或家电,我便夸他是“及时雨”“活雷锋”。还常幽默地捧他:心平似水,与世无争,天下难得的好老公。我曾在给他的情书中写道:“……你少吃一口饭似饿我几天,你手上扎个刺如疼我心尖。”我在赞美他的歌词中充满激情地唱道:“……你似珍珠藏我心间,你似神仙伴我身边。咱们的幸福甜蜜,因为有你理解宽容、无私奉献。”我对老伴用歌声赞,话语捧,张张纸上抒真情,怎不让他笑盈盈?

不善言表的老伴在“甜言蜜语”的“激励下”下对我更是体贴入微。我打个喷嚏或咳嗽一声,他又催我喝水又让我添衣。我写文章时,他一会儿提醒我保护眼睛,一会儿把水果放在我桌边;我学声乐,他不厌其烦地教我识乐谱,为我一遍又一遍地伴奏,我常幸福而感慨地说:“我是掉进蜜罐里的人呀!”

保护眼睛的感悟范文第5篇

教师要凭借各种教学手段,根据教学目标和学生存在的问题,通过具体、有趣的发散性问题创设真实有效的问题情境,营造出积极主动、积极探究的过程,让学生在真实或模拟问题情境中,学会选择和判断;让学生在道德冲突中探寻和建构;让学生对善恶作出自己的评价,形成自己的观念,践行正确的道德准则。

笔者在《让我们学会合作》教学时,从学生的角度出发,选择贴近学生生活的内容去设计教学活动。这节课围绕“什么是合作―合作的意义―怎样合作―合作的乐趣”这一主线展开活动。以学生感兴趣的活动贯穿课堂的始终,引导学生自主体验,达到了人人在活动中获得“合作”的真实感受。笔者一开始就以学生喜欢的表演形式走进课堂,让学生萌发急于想探索“合作”的奥秘。同时注意创设宽松、有趣的活动环境,并掌握“合作”的技能,便于指导今后的学习、生活。同时通过游戏“同舟共济”的开展,让学生真正地感受到了合作的重要性与合作的乐趣。

2.践行生活德育,深化情感体验

生活是品德课程的基础。我们要求学生用自己的眼睛观察生活,用自己的心灵感悟生活,用自己的方式探究生活,提高生活的价值。只有源于儿童实际生活的教育活动才能引发他们内心而非表面的道德情感、真实而非虚假的道德体验和道德认知。教师要关注学生现实的生活和未来可能的生活,把不同的生活场景搬进课堂,让学生提炼生活场景,引导学生回归到生活的本源中去。

在上《争当“护牙小卫士”》课时,笔者用小蓝脸和小红脸的动画,形象地让学生明白细菌在牙齿中“安家”会给生活带来什么样的不便,并将视频中的内容拉近到学生自己的生活,让他们回忆自己或家人牙疼时不舒服的情景。接下来进行“谁是护牙小博士”的环节,让孩子们懂得一些牙齿的小知识,了解换牙时的注意事项,了解正确的护牙方式,就能养成良好的护牙习惯。

3.开发课程资源,丰富品德课堂

鲁洁教授说:“品德教学是实现人类经验结晶的智慧与学生的经验、智慧的融合,要在教材的普适性与学校所在场域的特殊性之间找到平衡点。”课程资源是开放性的、生成性的、多样性的。教师要结合当地气候特点、风土人情以及学生的学习准备等情况开发运用地方课程资源,丰富品德课堂。

教授《乡音乡情》时,笔者立足家乡的实际情况,充分挖掘地方资源,引导学生通过聆听乡音,感受乡情,品味民间文化当中体现出来的家乡人的思想、情感和性格。在了解了家乡人的智慧、家乡传统与进步的变革,见识了来自不同家乡的文化瑰宝之后,笔者引导学生转向厦门民间文化的探索,让学生体验乡音乡情与形成家乡人独特性格之间的关系,进而使学生从心灵深处,自发地产生一种作为家乡人的自豪之情及热爱家乡、热爱家乡人的积极情感。

4.关注生命成长,直面学生心灵

苏霍姆林斯基说:“在每个孩子心中最隐秘的一角,都有一根独特的琴弦,拨动它就能发出特有的音响,要使孩子的心同教师讲的话发出共鸣,教师自身就需要同孩子的心弦对准音调。”从生命成长的高度看,我们的品德课堂应该是在人本精神的指引下,通过构建适合学生生命成长的教学方式。根据孩子的个性特征,努力营造一个平等和谐的氛围,进而帮助学生达到至善、立真、求美的境界。

眼睛是我们身体的重要器官。笔者在教学《保护眼睛》时,为了让学生了解自己身体的基本特征,通过引导学生游戏、活动、观察、思考、交流和小组讨论,结合生活实际来表达自己的感受和想法。用家长、学生填写评价表的方式督促学生,让学生意识到眼睛对自己生活的重要作用,从中体会到爱护自己的身体,养好良好生活与卫生习惯的重要性。

5.关注活动品质,体现教育价值

有效的教育必须采用学生乐于和适于接受的生动活泼的活动方式。在注重活动方式的生动趣味时,要更多地去关注活动的内在品质,加深学生的情感体验,提升学生的道德认知,深化学生的思维和认识水平。教师要设计丰富多样的活动形式,吸引学生积极主动地参与交流、参与探索、参与汇报,从而有所收获。