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生物细胞作用

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生物细胞作用

生物细胞作用范文第1篇

【关键词】 骨髓细胞;成骨细胞;生长物质;组织工程

0引言

骨骼损伤、肿瘤等导致的骨缺损是骨科每天都要面临的问题,临床医生通常是通过自体或异体骨移植方法来解决缺损问题,但这种方法存在着来源有限、增加创伤、排斥反应及疾病传播等问题. 由于利用组织工程学原理与方法再生的骨组织植入体内无免疫排斥的危险且来源充足,因此它的优势逐渐得到认同[1] . 近年来,组织工程迅猛发展并且是目前公认的最有可能在临床取得实际效益的研究领域之一[2]. 但是要真正广泛应用于临床,还必须解决好组织工程的三大关键问题即种子细胞、可降解的生物支架及生长因子. 骨髓来源的骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells, MSCs)由于取材容易,易于体外培养和诱导,是目前最有前途成为组织工程种子细胞来源的细胞[3-4]. 组织工程是将细胞与材料复合,从而构建植入人体的活材料. 在此过程中,目的细胞的生长调控是十分重要的一环,因此对生长因子的作用及其机制的研究是组织工程的重要内容. 生长因子是通过细胞间信号传递影响细胞活动的一类多肽因子,它对细胞具有促进或抑制其分裂增殖、迁移和基因表达的作用. 生长因子对目的细胞作用有利于在体外构建与体内更为相似的模拟环境,从而为体内试验奠定基础.

1骨髓基质干细胞及成骨诱导

目前,骨组织工程种子细胞的分离主要有三种来源:骨髓来源、骨膜来源和松质骨来源[5]. 种子细胞的培养是骨组织工程的前提与基础. MSCs 由于其强大的增殖能力与多向分化潜能成为骨组织工程的种子细胞之一[6].

骨髓是由造血系统和基质系统组成的复合组织,它除了是造血干细胞的主要来源外,同时成人的骨髓组织中还存在着骨髓间质干细胞. 20世纪70年代中期,Friedenstein等[7]报道,骨髓标本中小部分贴附细胞在培养过程中能够分化形成类似骨或软骨的集落,这部分贴壁的细胞就是骨髓基质干细胞,也叫间质干细胞. 这种间质干细胞具有多方向的分化潜能,可以分化成为骨、软骨、肌肉、韧带、肌腱和脂肪等组织[8-9]. 间质干细胞的多向分化特性使之成为组织工程的理想细胞来源,是目前骨组织工程普遍选用的细胞. 近年来的许多组织工程研究均采用了人或动物的骨髓间质干细胞,其结果十分令人满意[10-11].

现有的MSCs培养方法主要为应用诱导剂 (地塞米松、β甘油磷酸钠、抗坏血酸) 和生长因子进行诱导,但诱导效果均不甚理想. 国内外研究者发现, MSCs的分化具有位点特异性,即在何种微环境中培养MSCs,就倾向于向这类环境中的细胞分化. 根据MSCs分化的位点特异性,在骨组织工程中欲把MSCs诱导分化为成骨细胞,采用模拟成骨微环境来诱导MSCs的增殖与成骨分化可能也是一种有效的诱导方法[12-13].

2骨组织工程相关因子

生长因子的合理应用对构建骨组织工程起着关键的作用. 骨组织拥有一个庞大的生长因子库,目前在骨组织中发现了十几种生长因子,已经发现有多种细胞因子对成骨过程具有重要的调节作用,可以诱导成骨、促进细胞增殖和胶原合成、促进成骨和血管生长以及在骨吸收改建方面发挥作用,因此在构建组织工程骨时对成骨因子合理使用或调控成骨细胞的适时适量表达十分重要.

2.1血管内皮生长因子VEGF又称血管通透因子(VPF)或(VAS),是近年来发现的一种高度特异性的促血管内皮细胞生长因子,对胚胎发育及切口修复等生理功能有重要意义. VEGF是一种糖蛋白,其相对分子量为34~45 ku由两个相对分子量各为17 ~22 ku的不同亚单位组成的二聚体,VEGF就是由于该基因的剪切方式不同所形成的系列产物. 人至少有4种VEGF,分别为VEGF121, VEGF165, VEGF189和VEGF206. 近年来研究表明,血管内皮生长因子对中胚层细胞分化有作用,可以使骨髓基质干细胞向成骨分化. Midy等[14]发现,外源性VEGF能使体外培养的成骨细胞碱性磷酸酶(ALP) 活性及cAMP浓度提高4倍. VEGF诱导成骨细胞迁移,增加ALP活性,同时成骨细胞自身合成VEGF. PGE1, PGE2, 1, 25(OH)维生素D3及IGFⅠ能增加成骨细胞VEGF mRNA的表达.

2.2肿瘤坏死因子TNF是一种糖蛋白的低聚物,分子量为39~70 ku,是多功能的细胞因子,主要由活化的巨噬细胞和T细胞产生. TNF是迄今为止所发现的直接杀伤肿瘤细胞作用最强的生物活性因子之一. TNF分两大类:由活化的巨噬细胞产生的称为TNFα,由活化的T细胞产生的TNF称为TNFβ,它们共同作用于同一受体. TNF可刺激培养的成骨细胞和骨器官合成RNA和PGE2,TNF可以抑制胶原和骨钙素的合成以及1, 25(OH)维生素D3刺激的ALP活性,但它可刺激Ι型胶原mRNA表达,这说明TNF的这种胶原合成抑制作用受翻译后产物的调节[15].

2.3骨形成蛋白BMP是广泛存在于骨基质中的一种酸性糖蛋白,是目前唯一被确认具有异位成骨能力的生长因子,它能在体内、外诱导骨髓基质细胞转化为成骨细胞,使高分化的骨细胞群体数量保持稳定. Okubo等[16]用支架材料与不同剂量的BMP复合后植入兔下颌骨的骨缺损中,3 wk后ALP和组织学检查发现新骨形成,证实BMP诱导成骨系软骨内化骨形成过程,且成骨量随BMP剂量增加而增加,有明显的剂量依赖性. 陈克明等[17]认为: BMP与纤维蛋白制成的复合物,具有良好的骨诱导活性. 载体包容BMP等诱导因子可有效缓慢的释放,以发挥其诱导作用. 余家阔等[18]认为,在BMP诱导下,无论是幼稚软骨细胞还是成熟软骨细胞都有表达成骨细胞表型的趋势. 目前认为BMP是骨组织工程中促进成骨作用最重要的一种,近年来BMP作为一种有价值的生长因子越来越受到人们的重视,然而其诱导成骨的机制目前却并不完全清楚. 但由于BMP在骨组织中含量极少且在体内扩散很快,容易被蛋白酶所分解,因而不能在局部发挥持续刺激和诱导成骨作用,其诱导活性难以得到充分的发挥[19].

2.4转移生长因子TGFβ是一种有多种功能的单链多肽,分子量为25ku,具有对骨组织、结缔组织及免疫系统等细胞的调节功能,其调节作用包括细胞生长调节和分化诱导两方面. 目前发现有5种亚型,分别为TGFβ1~TGFβ5. TGFβ广泛存在于多种组织及转化细胞中,其中以骨组织、血小板、软骨组织中含量最丰富,而TGFβ受体在成骨细胞表达最多,表明TGFβ的主要作用是调节骨代谢. 有实验表明TGFβ对胶原基因表达和胶原的合成具有促进作用. TGFβ可促进细胞增殖与分化,促进细胞外基质合成,也是多种免疫细胞的自分泌或旁分泌的调节因子[20].

TGFβ为主要成骨因子之一,它诱导间充质细胞合成软骨特异性蛋白聚糖和Ⅱ型胶原,刺激成骨细胞的增殖及胶原合成. TGFβ在体外对成骨细胞的作用很复杂,部分取决于TGFβ的浓度、细胞密度、种系和成骨细胞的分化阶段. 多数研究认为TGFβ能抑制成骨细胞游离钙的合成、增加成骨细胞分化以及成骨细胞胶原和ALP的表达. TGFβ对成骨细胞生长有调控作用,这种作用在一定程度上表现为双相性. 研究表明,含血清培养的成骨细胞,低浓度的TGFβ可以刺激细胞DNA和胶原合成,抑制ALP活性,刺激细胞生长;而高浓度则抑制胶原合成,对DNA合成无作用. 无血清培养的成骨细胞,高浓度TGFβ抑制ALP生成. 此外,也有研究表明,TGFβ促进骨髓源性和骨膜源性骨前体细胞趋化到骨软骨损伤部位,进而增生、分化形成成骨细胞和软骨细胞 [21].

2.5成纤维细胞生长因子FGF是一种对中胚层和神经外胚层细胞具有促有丝分裂作用的多肽生长因子. 它对成骨细胞具有促增殖作用,并且通过增殖骨细胞数目促进骨形成. FGF分为酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和碱性成纤维细胞生长因(bFGF)两种. aFGF存在于骨细胞浸出物中,bFGF存在于牛和人的骨骼中,前者较后者低10倍. FGF是毛细血管增殖刺激剂,能够促进毛细血管向断端内以及骨移植物中长入,使骨修复早期的组织中软骨岛数量增加,并使骨折断端骨痂血管重建的时间提前,而且可以增加BMP的成骨量. 目前虽然FGF的作用机制还不是很清楚,但是可以肯定的是局部和全身应用FGF可以促进骨形成. bFGF是一种内源性多肽生长因子,有试验表明它能有促进中胚层和神经外胚层细胞有丝分裂的作用 [22].

2.6血小板源性生长因子PDGF 首先在血小板中发现,分子量为28~35 ku,由两个多肽键A和B组成异二聚体,在体外具有促进纤维细胞生长的作用,对所有起源于间叶细胞包括成骨细胞既能促进骨形成,又能刺激骨吸收,起双向调节作用[23]. PDGF还对中胚层细胞有促有丝分裂作用,它对人和鼠成骨细胞及其细胞系均有促有丝分裂作用. 同时它还是一个强力趋化因子,对人和鼠组织中的成骨细胞有强烈的趋化作用. PDGF 是由血小板、巨噬细胞和骨细胞合成,贮存于骨基质中. 它在创伤愈合中起重要作用,称为“创伤因子”. 其主要功能是诱导成骨细胞和骨祖细胞分裂,对于培养的成骨细胞有强烈的趋化作用,能刺激胶原合成. Canalis等[24]发现: PDGF有与IGFⅠ同样的作用,能刺激鼠骨DNA及胶原合成,但是PDGF也具有促使胶原降解的性能.

2.7类胰岛素生长因子IGF家族由两种相关多肽组成,即IGFⅠ和IGFⅡ. 它们是骨基质中最富含的生长因子,两者有相似的结构和体外作用,但在体内生物学效应不同. IGFI 在细胞增殖及细胞外基质合成代谢中具有重要作用. Throp等[25]研究证实了IGFⅠ和TGFβ具有相互作用以促进细胞增殖、胶原及蛋白聚糖合成的作用.

IGFⅡ是重要的细胞内调节剂,能刺激骨细胞的增生、增加骨细胞的分化和I型胶原合成. Strong等[26]发现IGFⅡ能在正常人骨细胞培养中24 h 内增加原胶原mRNA 2~4 倍.

综上所述,细胞因子不过是众多因子中研究较为成熟的几个,如何把这些因子的作用应用于组织工程中,才是我们研究生长因子的目的. 什么样的方法才能使细胞因子的活性在组织工程中发挥最好的作用还要进一步探讨.

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生物细胞作用范文第2篇

目的 探讨莱菔子水溶性生物碱对ApoE基因敲除小鼠内皮细胞抗氧化保护作用。方法 将50只ApoE基因敲除小鼠随机分为5组:模型组、莱菔子水溶性生物碱高、中、低剂量组、血脂康组,每组10只;另取10只C57BL/6J作为空白组。8 w后,眼球取血处死,随机选取6个样本检测指标。结果 与模型组相比,莱菔子各剂量组均能明显提高ApoE基因敲除小鼠血清NO含量(P<0.05);提高血清SOD的活性(P<0.05);降低血清MDA(P<0.01)含量。结论 莱菔子水溶性生物碱通过提高ApoE基因敲除小鼠血清NO含量、提高SOD活性、降低MDA含量,发挥抗氧化作用,从而保护内皮细胞。

【关键词】 莱菔子水溶性生物碱;ApoE基因敲除小鼠;抗氧化

莱菔子是十字花科植物萝卜(Raphanus sativus L.)的干燥成熟种子,在《日华子本草》中记为萝卜子。其性味辛、甘、平,归肺、脾、胃经,主要功效为降气化痰,消食除胀。《本草纲目》记载:“莱菔子长于利气”。莱菔子水溶性生物碱以芥子碱(Sinapine)为主要成分,广泛存在于十字花科植物中的一种季胺盐物质。本实验通过观察莱菔子水溶性生物碱对载脂蛋白E(ApoE)基因敲除小鼠血清一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)影响来探讨莱菔子水溶性生物碱抗动脉粥样硬化(AS)作用的机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 药品制备

莱菔子水溶性生物碱,由吉林省中医中药研究院新药中心制备。

1.1.2 实验动物

北京维通利华公司提供雄性ApoE基因敲除小鼠75只,雄性C57BL/6J小鼠15只,13周龄,体重(22±2)g,清洁级。

1.1.3 主要仪器及试剂

电子记重秤AWH(SI)-2.5 kg:国产;BD/BC518 -20℃冰箱:国产;4℃冰箱:国产;Q/IFGM0182000低温高速离心机:德国;HH·W21·600电热恒温水浴箱,小型台式离心机:上海医疗器械厂;PERLONG;pus2018 半自动生化分析仪:北京普朗新技术有限公司。

1.1.4 基础饲料

玉米粉26.0%,面粉29.0%,豆粕28.0%,磷酸氢钙1.4%,石粉1.6%,鱼粉5.0%,骨粉5.0%,盐1.0%,多种维生素1.5%,多种微量元素1.5%。

1.1.5 肥甘饲料

由10.0%猪油,2.0%胆固醇,20.0%蔗糖,5.0%蛋黄粉,0.2%胆盐,0.2%甲基硫氧嘧啶,62.6%基础饲料配制而成。

1.2 方法

1.2.1 分组及给药

将ApoE基因敲除小鼠(高脂饮食)随机分为5组,每组15只。模型组,每日灌服饮用水;莱菔子水溶性生物碱高剂量组90 mg·kg-1·d-1,莱中剂量组60 mg·kg-1·d-1,低剂量组30 mg·kg-1·d-1(分别相当于生药60、40、20 g/kg),血脂康组0.2 g·kg-1·d-1,另取10只C57BL/6J大鼠作为空白对照组。空白对照组及模型组给等体积蒸馏水灌胃。给药时间为8 w。

1.2.2 样本的采集及检测

给药8 w后,于末次给药后摘眼球取血处死动物。分离血清后,随机选取6个样本进行检测。NO试剂盒、SOD试剂盒、MDA试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。

1.3 统计学方法

运用SPSS13.0软件进行计算,实验数据均采用x±s表示,组间比较采用方差分析。

2 结果

治疗8 w后,各组小鼠血清NO、SOD及MDA变化比较,见表1。表1 各组治疗8 w后各项指标变化比较(略)

3 讨论

在AS的发生发展过程中伴随着机体氧化应激反应增强,氧自由基(OFR)产生增加,而机体具有抗氧化能力的SOD、谷胱苷肽过氧化物酶(GPX)活性及NO含量等明显降低,即抗氧化酶系的保护作用减低。OFR对血管内皮恭能的影响主要表现在〔1〕:①损伤内皮依赖的血管扩张。由于O-2灭活NO、GPX缺失等造成血管内皮功能障碍。②诱导内皮细胞凋亡。内皮损伤或暴露于O-2和H2O2诱导的细胞凋亡,以致AS发生和促凝血状态。③诱导内皮细胞黏附分子表达。④血管新生。除了对胚胎发育和创伤修复发挥生理作用外;在病理方面其可参与内皮细胞迁移、增殖和血管形成;此外,还参与血管VSMC的生长,迁移。

NO能够与脂氧化自由基直接反应而干扰低密度脂蛋白(LDL)的氧化过程,从而阻止氧化LDL(oxLDL)的生成及对内皮细胞的破坏。SOD是一种广泛存在生物体内的金属酶类。以O2为底物,是清除超氧离子自由基的特效酶类。脂质氧化应激的产物为MDA。本实验结果表明,各治疗组均能增加小鼠血清NO含量;提高血清SOD活性,降低MDA的含量,其调节作用随着剂量的增加而增强,呈剂量依赖性。莱菔子高剂量组

与血脂康组比较无显著差异。

NO是一种理想的抗AS因子,提高NO浓度可以改善血管内皮功能〔2〕。SOD又是清除氧自由基的专一酶,因此,莱菔子水溶性生物碱可能通过这一机制而发挥抗氧化和保护内皮细胞的作用。

参考文献

生物细胞作用范文第3篇

[摘要] 目的:探讨藤梨根正丁醇提取物对培养的人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用。方法:MTT比色法检测藤梨根正丁醇提取物在不同浓度(1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml)及不同时间(24 h、48 h、72 h)对Eca-109细胞生长抑制作用, TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应。结果:①藤梨根正丁醇提取物对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强。②提取物对瘤细胞有明显的凋亡效应。结论:藤梨根正丁醇提取物能有效抑制人食管癌Eca-109细胞生长。

[关键词] 藤梨根/猕猴桃根;食管肿瘤;抑制;凋亡

Abstract:Objective To evaluate the inhibitory effect of extracts from Actinidia arguta by n-butyl alcohol on human carcinoma of esophagus cells(Eca-109).Methods MTT colormetric assay was used to examine the growth inhibition of extracts from Actinidia arguta by n-butyl alcohol on Eca-109 cells, TUNEL test was performed to observe the apoptosis induced by the extracts (1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml)on Eca-109 cells. Results ① The inhibitory effect of the extracts on Eca-109 cells was increased in a dose-and time-dependent manner. ②The extracts could significantly induce apoptosis of Eca-109 cells. Conclusion The extracts from Actinidia arguta by n-butyl alcohol could effectively inhibit Eca-109 cell growth.

Key words: Tengligen/actinidia arguta; Esophagus tumor; Inhibitory effect; Apoptosis

细胞凋亡是由基因编码控制的一种细胞的程序性死亡,是机体维持正常生理活动所必需的。近年发现细胞凋亡在许多疾病尤其在肿瘤的发生、发展及转归中起着重要作用,这为肿瘤病人的治疗提供了新的思路。随着中医药对肿瘤治疗的大量临床观察及实验研究的深入,人们逐渐肯定了它对肿瘤治疗方面的疗效。其抗肿瘤作用机制有多方面,如抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,抑制蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)活性等[1-4]。藤梨根又称阳桃根,为植物猕猴桃科藤梨(软枣猕猴桃)Actinidia arg-uta(Sieb.teZucc.)Planch.或猕猴桃A.chinensis Planch.的根。研究表明,藤梨根对多种肿瘤细胞有生长抑制作用,采用不同方法所得的提取物其抑制作用存在一定的差异[5-6]。本文通过观察藤梨根对培养的人食管癌Eca-109细胞生长的作用,以探讨藤梨根对人食管癌细胞的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料人食管癌细胞Eca-109细胞株购于上海市中科院细胞库,RPMI-1640培养基购于武汉天源生物技术有限公司,为Gibco公司产品(货号31800-022);超级新生牛血清为杭州四季青生物工程有限公司产品(批号050126);实验用1∶250胰酶购于武汉天源生物技术有限公司,为Difco公司产品(批号020411);四甲基偶氢唑蓝(MTT) 购于武汉天源生物技术有限公司,为Duchefa分装(货号BS0880);二甲亚砜(DMSO) 购于武汉天源生物技术有限公司,为Sigma公司产品。TUNEL试剂盒(编号ZK-8005) 购于北京中杉生物技术有限公司。

1.2 细胞培养细胞在含10%小牛血清的RPMI 1640培养液中,37 ℃、5%CO2条件下培养,24 h换液一次。

1.3 药物制备将藤梨根1 kg粉碎成粗粉,烘干备用。取藤梨根500 g,加入3 000 ml正丁醇中浸泡12 h;回流提取1 h,过滤;药渣再加2 000 ml正丁醇回流提取1 h;合并两次滤液,减压回收正丁醇至稠膏状,真空干燥;干燥品加蒸馏水500 ml,旋转加热溶解,制成饱和水溶液;灭菌;原液(500 ml,1 g/ml,pH=3.8)。将原液稀释成1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml三个药物浓度;过滤;灭菌;分装,置4 ℃冰箱备用。

1.4 MTT法将贴壁细胞用0.25%的胰蛋白酶消化后计数,调整细胞浓度为4×104/ml,接种于96孔板,待24 h细胞贴壁后加入藤梨根正丁醇提取物药液。实验组分别加入终浓度为1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml 3个药物浓度的药液,对照组加入等体积溶剂的培养液,每组l2复孔,分别于加药后第1、2、3 d测定各孔的吸光度值(A值)。测定前每孔加5 mg/ml的MTT 20 μl,温育4 h,弃上清液,加入二甲基亚砜(DMSO)150 μl /孔。同时振荡至结晶完全溶解,用酶联免疫检测仪在490 nm波长下测定A490值。用各组的平均A值计算细胞生长抑制率。生长抑制率=(对照组A值-实验组A值)/对照组A值×100%。

1.5 TUNEL法检测凋亡细胞将浓度为4×104/ml的Eca-109细胞接种于经多聚赖氨酸包被的干净盖玻片上,用RPMI 1640培养基于37 ℃、5%CO2条件下在24孔板中培养24 h后取出盖玻片,PBS冲洗3次。0.1%Triton-100破膜、4%多聚甲醛固定,H2O2阻断。用TDT法将生物素标记的d-UTP在末端转移酶的作用下,标记到DNA的5′端缺口上,再用亲和素标记的HRP与之结合,然后加入底物DAB显色,苏木素复染,从而使凋亡细胞核呈现棕褐色,未凋亡细胞核呈蓝色。在光学显微镜下随机计数5个高倍视野约1 000个细胞中的凋亡细胞数, 计算凋亡细胞所占比例。

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2 结果

2.1 MTT法检测生长抑制率结果表明藤梨根正丁醇提取物对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强。用1 μg/ml的正丁醇提取物作用24 h,细胞生长抑制率为18.5%;当延长至72 h时,抑制率上升至45.3%;而100 μg/ml的药物作用72 h时,可使85%以上的细胞生长受到抑制(见表1)。

表1 藤梨根正丁醇提取物对Eca-109细胞的生长抑制率(略)

2.3 TUNEL法检测细胞凋亡当用1 μg/ml藤梨根正丁醇提取物处理Eca-109细胞24 h时,可检测到形态尚未发生改变的早期凋亡细胞;当药物作用时间延长至72 h时,可见凋亡细胞变圆,体积明显缩小,核染色质浓缩,变成新月形,此为晚期凋亡细胞,随时间的推移,凋亡细胞比例逐渐增加(见图1)。而对照组,未见有明显凋亡现象(见图2)。

3 讨论

肿瘤是危及人类生命的首要顽疾,药物治疗为中西医肿瘤治疗中的一个重要模式,包括化学药物和天然药物。中医药的抗肿瘤作用已得到广泛的肯定,其机制有多方面,如抑制DNA合成、抑制肿瘤血管形成、诱导细胞分化、促进细胞凋亡、调节机体免疫功能、抑制蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)活性等[1-4]。关于藤梨根的研究已有报道,其对消化系统肿瘤有良好的抗肿瘤作用,可用于消化系统肿瘤的治疗[5],但其抗肿瘤作用机制还不清楚。初步研究发现,同种猕猴桃根不同提取方法所得的提取物其抗肿瘤作用可能不尽相同。有学者用甲醇、水、乙酸乙酯、正丁醇等溶剂回流提取, 观察提取物对同种肝癌细胞株的作用, 结果表明正丁醇、乙酸乙酯提取物对瘤细胞的生长有较好的抑制作用, 但各组量效关系不明显[6]。关于藤梨根提取物中抗肿瘤作用的成分, 曾有人报道主要为三萜类化合物, 分别为乙酸乙酯提取物熊果酸、β-谷甾醇及正丁醇提取物2α,3α,24-三羟基-12-烯-28-乌苏酸、2β,3β,23-三羟基-12-烯-28-乌苏酸、24-hydroxytormentric acid[7]。研究表明,藤梨根对多种肿瘤细胞生长均有抑制作用。钟振国[8]等采用MTT比色法、集落形成法等方法对藤梨根作用的宫颈癌细胞株Hela、神经肿瘤细胞株NG108-15、胃癌细胞株SGC7901等进行了研究,结果藤梨根对不同瘤细胞的生长均有不同程度的抑制作用。李昊[9]等研究了藤梨根对人胃低分化腺癌BGC-823细胞的作用,发现其浓度在1.3 mg/ml时抑瘤率最强(88.19%),随着药物浓度的降低,抑瘤率随之下降;藤梨根对胃癌细胞作用24 h抑制作用最强(87.6l%),48 h回落,72 h再次上升, 其对胃癌细胞有明显杀伤作用。卫培峰[10]等在动物实验中证明藤梨根能有效诱导鼠胃癌细胞的凋亡, 与对照组细胞的凋亡率和死亡率有显著的差异。 近几年来,国内外对细胞间隙连接通讯与癌变的关系进行了大量的研究,发现多数肿瘤细胞无此功能,其间隙连接少或无,而邻近的正常组织或良性肿瘤的间隙连接正常,少数肿瘤细胞有脆弱的连接通讯,但很容易受到破坏,其间隙连接数量很少,藤梨根可以通过上调细胞间隙连接通讯功能来抑制某些肿瘤细胞如高转移性人肺癌细胞的生长[11]。本研究结果证实:藤梨根正丁醇提取物三个药物浓度1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml作用于Eca-109细胞24 h、48 h、72 h后,显示出明显的凋亡特征。TUNEL法可检测到不同时期的凋亡细胞;MTT法也发现随药物浓度升高和作用时间的延长,其抑制率明显升高。因此推测,诱导肿瘤细胞凋亡可能是藤梨根抗肿瘤作用的机制之一。但细胞凋亡的调控及信号传导极其复杂,有多种分子参与。故抗肿瘤作用的真正机理及体内抑瘤实验尚需进一步深入研究。

(文中图1~2见封四)(略)

[参考文献]

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Ohno S,Tachibana M,Shibakita M,et al.Prognostic significance of Fas and Fas ligand system-associated apoptosis in gastric cancer[J].Ann Surg Oncol,2000,7(10):750-757.

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Nio Y,Iguchi C,Yamasawa K,et al.Apoptosis and expression of Bcl-2 and Bax proteins in invasive ductal carcinoma of the pancreas[J].Pancreas,2001,22(3):230-239.

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韦金育,曾振东,吕 琳,等.中越猕猴桃根提取物抗肿瘤作用的实验研究[J].广西中医药,2003,26(6):49-50.

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覃益民,黄初升,陈希慧,等.中越猕猴桃根三萜成分的研究[J].中草药,1999,30(5):323-326.

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钟振国,张雯艳,张凤芬,等.中越猕猴桃根提取物的体外抗肿瘤活性研究[J].中药材,2005,28(3):215-218.

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李 昊,杨慧萍,杨 凡,等.藤梨根对胃癌细胞抑制作用的实验研究[J].河北中医,2004,26(4):314-315.

[10]

卫培峰,焦晨莉,张 英,等.藤梨根对实验性大鼠胃癌抑制作用的实验研究[J].陕西中医,2005,26(8):850-851.

生物细胞作用范文第4篇

据统计,患牙周病的孕妇,出现胎儿生长障碍的危险约为无牙周病孕妇的两倍。因此,孕妇的口腔健康关乎两个人的健康。

孕妇保持口腔健康,须做到以下几点:

孕前进行口腔检查和保健治疗。孕妇在孕前应到正规医院进行全面的口腔检查和保健治疗,其中包括治疗龋齿,治疗牙周疾病,彻底洁治(洗牙),拔除不应保留的牙齿及无保留价值的残牙根、残牙冠等。

孕期注意口腔保健。孕妇要坚持早晚刷牙,饭后漱口。妊娠期的妇女因口腔局部敏感,刷牙时可选用刷头小的保健牙刷;定期使用牙线清洁牙齿邻面上的牙菌斑;少吃可致龋齿的食物并遵循科学的进糖原则。 (李丽)

生活中被忽视的钙

我们平时吃的补钙食物一般是牛奶、酸奶、豆类等,其实生活中有不少被我们忽视的补钙“边角料”,都可以为我们很好地补钙,也更为有效和安全。

蛋壳 蛋壳含有极高的钙,可以把蛋壳磨成粉末后放进白开水中饮用,这样人体可以更好地吸收钙。

骨髓 骨髓是动物体内的造血工具,对人体钙质的补充有很好的作用。做骨头汤时,把骨头敲碎,让骨髓溶入汤中,能有效地帮助钙质被人体吸收。

鱼骨 鱼骨含钙很高,干炸鱼、焖酥鱼都能使鱼骨酥软,更方便人体对钙质的吸收。

(安子)

手脱皮吃点胡萝卜

有的人手和脚一到冬天就脱皮,开始时刺痒、起小疱,接着脱皮,脱皮面积逐渐加大,并向深层扩展,最终露出鲜色。由营养缺乏引起的手脚脱皮一般与缺乏维生素A有关。维生素A属于脂溶性的,对皮肤的表层有保护作用,如果缺乏的话,就会引起皮肤干燥和脱皮等现象。为了防止手脱皮,手要保持干净,尽量少沾水,洗手最好用温水;平时多吃富含维生素A的食物,如动物肝脏、蛋黄、牛奶、奶酪、鱼类、贝类、胡萝卜等。这些食物中的胡萝卜素可在体内转化为维生素A。此外,每天洗手后应涂抹护手霜,或用维生素E丸擦手,可一边抹一边按摩。(美华)

午餐吃红薯钙质吸收好

红薯是最近几年最热门的养生食物,它富含蛋白质、淀粉、果胶、氨基酸、膳食纤维、胡萝卜素、维生素A、B、C、E以及钙、钾、铁等十余种微量元素,是世界卫生组织评选出来的“十大最佳蔬菜”的冠军,营养学家也称赞红薯为“营养最均衡食品”。红薯除了具有减肥、抗癌等功效外,还可以有效地防止骨钙流失,是一种非常好的营养食品。

红薯中除了含有一定的钙质外,还含有大量的钾和镁,这两种物质可以维持人体内的离子平衡,减缓因年龄增长而造成的钙质流失。

营养学家建议,红薯最好在午餐这个黄金时段吃。因为吃完红薯后,其中所含的钙质需要在人体内经过4~5小时进行吸收,而下午的日光照射正好可以促进钙的吸收。在午餐时吃红薯,钙质可以在晚餐前全部被吸收,不会影响晚餐时其他食物中钙的吸收。 (刘铭)

做菜加点酒,可减少油脂摄入量

中餐用酒烹调的传统源远流长,如啤酒鸭、绍兴醉鸡、香糟毛豆等,都别具风味。做菜时加点酒,好处远远不只是调味,还能减少人体对油脂的摄入,更有益于人体健康。

中国营养学会建议,每人每天油脂摄入量最多不应超过30克,但做菜时油如果放得太少,做出的菜肴口感较差,炒菜时也易粘锅。如果做菜时加点酒,就能解决这些问题。炒素菜加些味道清淡的酒,不仅可以提味,还可减轻某些蔬菜的苦涩味,如苦瓜、菠菜、西兰花等。

炒肉、炖肉时加点酒,去腥的同时,还可减少肉本身的油脂。因为酒与肉会产生脂化反应,可以帮助脂肪溶解,同时生成一种具有特殊香气的酯,使菜肴香而不腻。

用酒做菜还会使菜肴更有营养。因为比起油,很多食材的营养更容易溶解在酒精中,有利人体吸收。此外,从中医角度来看,适时适量摄入点酒,能健脾补胃、帮助消化。 (刘铭)

常用电脑的人吃什么好

常用电脑的人会经常感到眼睛不适,视力下降,还易有疲劳的感觉。常用电脑的人在饮食方面应注意以下几点:

多吃对眼睛有益的食品,如鸡蛋、鱼类、鱼肝油、胡萝卜、菠菜、地瓜、南瓜、枸杞子、、芝麻、萝卜、动物肝脏等。

多吃含钙质高的食品,如豆制品、奶酪、骨头汤、鸡蛋、牛奶、瘦肉、虾等。

注意维生素的补充:多吃含有维生素的新鲜水果、蔬菜等。

注意增强抵抗力:多吃一些能增强机体抗病能力及能够排毒的食物,如香菇、蜂蜜、木耳、海带、苋菜等。

吃一些抗辐射的食品:银杏果及黑色食品。

吃一些养颜的食品:如樱桃、美肤水果等。

注意酌情多吃一些豆芽、西红柿等富含维生素A、C和蛋白质的食物。(小光)

喝豆浆八项注意

1. 忌不彻底煮开:生豆浆里含有皂素、胰蛋白酶抑制物等有害物质,未煮熟就饮用,会出现恶心、呕吐、腹泻等中毒症状。

2. 忌冲入鸡蛋:鸡蛋中的黏性蛋白(鸡蛋清)会与豆浆里的胰蛋白酶结合,产生不易被人体吸收的物质,使鸡蛋和豆浆均失去原有的营养价值。

3. 忌空腹饮豆浆:豆浆里的蛋白质大都会在人体内转化为热量而被消化掉,营养成分不能被人体充分吸收。

4. 忌放红糖:红糖里有机酸较多,如醋酸、乳酸等,它们能与豆浆里的蛋白质和钙质结合,产生变性物及醋酸钙、乳酸钙等块状物,这不仅有损豆浆的营养价值,而且影响豆浆里所含营养素的吸收。

5. 忌用保温瓶储存豆浆:把豆浆装在保温瓶内,会使瓶内的细菌在温度适宜的条件下大量繁殖,3~4小时后,豆浆就会变质。

6. 忌与药同饮:有些药物如红霉素等抗生素类药物会破坏豆浆里的营养成分,甚至产生副作用,危害健康。出于安全考虑,喝豆浆与服用抗生素的间隔时间最好在1个小时以上。

生物细胞作用范文第5篇

【关键词】高考;生物;复习;解析

进入高考阶段,很多同学都感到惶恐不安,对于生物学科无法进行有效学习。如何取得高分,成为同学们的一大难题。现在,笔者就为大家分析下生物学科高考考查项目和题型及知识点。

一、高考考查项目和题型

生物科要考查的项目:

1.理解能力。(1)能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构。(2)能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。(3)能运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确的结论。

2.实验与探究能力。(1)能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验,包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。(2)具备验证简单生物学事实的能力,并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。(3)具有对一些生物学问题进行初步探究的能力,包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。(4)能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订。

3.获取信息的能力。(1)能从课外材料中获取相关的生物学信息,并能运用这些信息,结合所学知识解决相关的生物学问题。(2)关注对科学、技术和社会发展有重大影响和意义的生物学新进展以及生物科学发展史上的重要事件。

4.综合运用能力。理论联系实际,综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题。

生物命题:

1.总命题思路以学科能力为主导,全面考查考生对基础知识的理解能力;运用生物学基本知识和技能设计实验、分析实验结果、评价实验方案的能力;综合运用获取的信息和所学的生物知识,解决自然界和社会生活中有关生物学问题的能力。

2.试题重点考查了新陈代谢、遗传变异、生物与环境等学科主干知识。考生高考生物复习中的几点建议:1.高考一轮复习即将结束之际,考生应针对复习中所出现的易错知识点进行梳理,回归教材。2.建议考生在考前最后的复习阶段,把答题常用的专业词汇和短语做一个整理,包括那些在平常训练中虽得分但不确切的。也可以在网上直接下载“高中生物生物学术语”帮助记忆。3.关注热点问题:(1)“三大”工程。(2)与生产、生活相联系的内容,如动物生理、植物生理的相关知识。(3)与人类的健康相关的知识。例如:免疫、调节等。4.注重有关生物实验设计:首先注重对高中生物课本中的验证性实验、探究性实验、课文中的相关实验的复习,其次了解实验设计的程序及相关原则。5.近几年来生物试题编排比较合理,难度适中。生物部分试题均为容易题和中等难度试题,可能通过适当调整容易题、中难度试题和难题的分值比例,使试题的难度分布更为平衡,逐渐的与新课标接轨。

二、高考知识点重点分析

1.光合作用

光合作用的场所:叶绿体。

光合作用的条件:光照。

光合作用的原料:CO2和水。

光合作用的产量:产量什么意思?是产物吧?产物是氧气和有机物(葡萄糖)。

光合作用的能量变化:光能转化为ATP中活跃的化学能再转化为有机物(葡萄糖)中稳定的化学能。

呼吸作用的场所:主要在线粒体(有氧呼吸第一阶段是在细胞质基质)。

呼吸作用的条件:有氧呼吸的条件:氧气 无氧呼吸的条件:无氧环境下。

呼吸作用的原料:有机物。

呼吸作用的产量:有氧呼吸是二氧化碳,水。无氧呼吸是酒精和二氧化碳或者是乳酸。(由于参与反应的酶不同,在动物体内,葡萄糖转化为乳酸,在植物体内,葡萄糖转化为酒精和二氧化碳。)

呼吸作用的能量变化:有机物中的稳定化学能一部分转换为ATP中活跃的化学能,一部分转换为热能。

2.细胞分裂

细胞分裂是活细胞繁殖其种类的过程。通常包括核分裂和胞质分裂两步。在核分裂过程中母细胞把遗传物质传给子细胞。在单细胞生物中细胞分裂就是个体的繁殖,在多细胞生物中细胞分裂是个体生长、发育和繁殖的基础。现在除细胞分裂外还没有证据说明细胞繁殖有其他途经。细胞分裂之前先应该生长成熟,有一个合适的大小。然后会有一个短暂的休眠,也就是所谓的控制细胞增殖的限制点。之后可能由于外界刺激或是细胞内各种因子的刺激突破限制点,进入分裂期。绝大部分细胞的分裂方式都是有丝分裂;

无丝分裂常出现于高度分化成熟的组织中,如蛙的红细胞的分裂,在某些植物的胚乳中胚乳细胞的分裂等,无丝分裂分裂后遗传物质不一定能平均分配给子细胞;

减数分裂仅出现在生殖细胞的形成过程中,即精原细胞,卵母细胞卵细胞;

受精卵卵裂一定是有丝分裂。总体来讲,单细胞生物的增殖取决于营养是否足够,多细胞生物细胞的增殖取决于机体是否需要。

多细胞生物的细胞分裂调控是个相当复杂的问题,受机体内外因素的影响,外因也即环境因素,而内因则是相关基因在时空上的有序表达,是调控细胞分裂的主要因素。细胞分裂素是调节植物细胞生长和发育的植物激素。

在促进细胞分裂中起活化作用,也包含在细胞生长和分化及其他相关的生理活动过程中,如激动素、玉米素等。