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邓明善,中科创意产业园董事长,政协委员,中国创业就业扶助工程发起人,中国扶贫开发协会理事,成功创业导师,感动中国十大创业人物,中国青年创业百强人物,65项国家专利持有人,CCTV年度三农人物创业典范……每次当邓总受邀参加电视等媒体节目时,主持人总是能够说出他一连串的荣誉、头衔,事实上,邓明善总裁之所以能够取得如此大的成功,在创意项目、公益扶助、创业指导等多领域涉足用他自己的话说就是“合适的人在合适的时间把合适的项目做成功”,事实证明的确如此。
邓总创富第一法则:当大家都疯狂地涌向热门行业时,我们不妨做个冷静的旁观者,悄悄向冷门进攻,往往会有意想不到的收获。全景奇画可以说是邓明善中科创意产业园中最具有代表性的一个项目,事实上,创始人邓明善在初次接触到这一创意项目的时候,国内市场出现的非常少,而传统平面的静态画已经显得相当乏味,代表动感、立体的全景奇画必将是一个趋势。因此适时切入这一全新的领域是个绝佳的机会。
第二法则:找到支点,巧借杠杠以小搏大。经过十年的稳定成长,中科创意产业园成为了集全景奇画、神奇石画等数十种产业模式的文化创意产业基地,邓明善从这些优势的项目中看到了新的机遇,实行以创意带动创业,用创业辅助创意。中科创意产业园与北京大学联手、吉利大学、华西大学、清华大学等多所大学共同探讨设立成功创业课程,并将中科创意产业园设立为多所大学的创业培训基地。同年,邓明善与中国扶贫开发协会共同成立了“中国创业就业扶助基金”,发起中国创业就业扶助工程,旨在帮助更多有识之士实现成功创业或再就业梦想,致力于传播公益文化,搭建公益平台,以推动公益事业的发展。
第三法则:强强联合,与狼共舞胜过在羊群独领。随着“文化大发展大繁荣”的战略部署以来,一股文化创意产业发展的热浪迅速席卷全国。邓明善对中科创意产业园进行了更大规模的技术升级和多项目孵化,通过产业链的延伸,打造成集创业学校、创业工场、创业扶助、创业研究院、创业园、创业传媒、创业工作站、创业服务中心等一站式创业服务的新版图,这一全新的运营模式迅速吸引了众多的风投机构及大型投资公司的青睐,获得了巨额资金的支持,以鳌头之势引领着创意产业的新发展。
邓明善用自己的成功经验完美诠释了机遇的重要性,也以这样的创业心经不断地鼓励和支持者后辈创业者继往开来。
ěr耳ear听力和平衡的器官。
ěr guō耳郭auricle又称“耳廓”。外耳道以外的整个耳壳。
ěr lún耳轮helix耳郭外边缘部分。
ěr zhuì耳坠ear lobule又称“耳垂”。耳轮之垂部。
wán gǔ完骨mastoideum耳后颞骨乳突部。
ěr gēn耳根ear root耳郭与头部连接部。
ěr mén耳门tragus耳屏。
ěr kǒng耳孔ear hole; external acoustic meatus外耳道。
ěr dǐ耳底ear bottom; bottom of external acoustic meatus外耳道深部直至鼓膜表面的部位。
ěr mó耳膜tympanic membrane又称“鼓膜”。为弹性灰白色半透明薄膜。
lóng cōng龙葱Longcong耳内感受听觉的部位。
bí鼻nose隆起于面部正中的呼吸、嗅觉器官。
bí zhǔn鼻准nasal apex鼻尖部。
bí kǒng鼻孔nostril鼻前孔,为呼吸出入的通道口。
bí dào鼻道nasal cavity又称“鼻隧”。呼吸出入之通道,即鼻腔。
bí gé鼻隔nasal septum分隔左右鼻腔的结构,即鼻中隔。
shān gēn山根nasal root两目内眦间的鼻根部分。
yān咽pharynx位于鼻腔与口腔的后方,是饮食和呼吸的共同通道。
xuán yōng chuí悬雍垂uvula软腭中部游离缘向下突出的部分。
huì yàn会厌epiglottis又称“吸门”。位于喉入口上方,舌部及舌骨之后,呼吸语言时开启,饮食吞咽时关闭。
hóu喉throat; larynx上通咽,下接气管,是呼吸出入之门户,也是发音器官。
háng sǎng颃颡nasopharynx软腭以上至鼻后孔间的空腔,即鼻咽部。
hóu guān喉关throat pass; fauce由喉核、悬雍垂和舌根共同组成,前是口腔,后为喉底。
yān lù咽路esophagus由咽至胃之通道,即食管。
hóu wō喉窝tonsillar fossa位于舌腭弓与咽腭弓之间的隐窝。
hóu hé喉核node of throat; palatine tonsil腭扁桃体。
hóu dǐ喉底posterior pharyngeal wall咽后壁。
hóu jié喉结laryngeal prominence颈前正中喉部甲状软骨突出的部位。
héng gǔ横骨hyoid bone舌骨。
kǒu口mouth cavity口腔。
chún唇lip嘴的边缘红色部分。
wěn吻labial commissure口角。
chún sì bái唇四白perilabial zone口唇四周。
shé舌tongue主味觉、帮助咀嚼和言语的器官。
shé gēn舌根tongue root舌之根部。
shé jiān舌尖tongue apex舌之尖端。
shé páng舌旁lateral side of tongue舌之两侧。
shé xì舌系tongue connector; sublingual vessel and ligament舌下静脉丛及舌系带。
jīn jīn yù yè金津玉液Jinjin and Yuye又称“华池金津、神水玉液”。位于舌系带两侧,左为金津,右为玉液。
è腭palate口腔的上膛,包括硬腭与软腭。
yìng è硬腭hard palate腭的前部,由骨和肌肉构成。
ruǎn è软腭soft palate腭的后部,由结缔组织和肌肉构成。
chǐ齿tooth牙齿。
zhēn yá真牙wisdom tooth又称“智齿”。第三磨牙。
bǎn chǐ板齿incisor teeth又称“门齿”。切牙。
hǔ yá虎牙canine teeth犬齿,即尖牙。
cáo yá槽牙bicuspid teeth双尖牙与磨牙。
chǐ gēn齿根tooth root又称“牙根”。牙齿埋于牙槽骨的部分。
yín龈gum牙龈。
dīng níng耵聍cerumen又称“耳垢”。外耳道耵聍腺分泌物。
chǐ gēng齿更dental transition换齿。
chǐ jiān齿坚firm tooth牙齿坚固的状态。
xié bì邪闭pathogen block外邪闭其耳窍而致听力下降的病理变化。
huǒ bì火闭fire block火邪上炎而致听力下降的病理变化。
qì bì气闭qi block气郁气逆而致听力下降的病理变化。
qīng qiào bù lì清窍不利blocked clear orifice各种病邪上扰耳鼻喉口齿等诸窍致其失常的病理变化。
jīn pò bù míng金破不鸣broken metal failing to sound肺脏虚损而致声音嘶哑的病理变化。
jīn shí bù míng金实不鸣muffled metal failing to sound外邪客于肺系,气机壅遏而致声音嘶哑的病理变化。
gān yù shī yīn肝郁失音dysphonia due to liver depression精神抑郁不舒而致突然不能发声的病理变化。
wàng ěr guō望耳郭inspection of auricle观察耳郭的形态、大小、色质、位置,有无畸形,两侧耳郭是否对称等的诊断方法。
wàng ěr zhōu望耳周inspection of periotic skin观察局部皮肤有无畸形、红肿、增厚、瘘口、赘生物、瘀斑、疤痕、破损、溃疡、糜烂、渗液、结痂等变化的诊断方法。
wàng ěr kǒng望耳孔inspection of external acoustic meatus观察外耳道有无红肿、瘘口、新生物、耵聍、异物、分泌物、狭窄及塌陷等的诊断方法。
wàng ěr mó望耳膜inspection of tympanic membrane观察鼓膜标志的变化、色泽的改变、活动度、有无凹陷、穿孔以及穿孔的位置、大小等诊断疾病的方法。
wàng wài bí望外鼻inspection of external nose观察外鼻是否有红肿、畸形、歪斜、缺失等形态改变的诊断方法。
wàng bí qián tíng望鼻前庭inspection of nasal vestibule观察鼻前庭有无红肿、糜烂、溃疡、皲裂、结痂、肿块等改变的诊断方法。
wàng bí qiāng望鼻腔inspection of nasal cavity观察鼻黏膜的色泽及形态改变;鼻甲是否有肿胀、肥大、息肉样变、萎缩等改变;鼻中隔有无偏曲、糜烂、出血、穿孔;鼻道有无异物、息肉、肿物及分泌物积留等的诊断方法。
wàng bí tì望鼻涕inspection of snivel观察鼻涕色、质、量;涕的来源及积留部位等的诊断方法。
wàng bí xuè望鼻血inspection of nose bleeding观察鼻出血的部位、色泽、出血量及出血缓急等的诊断方法。
wàng bí yān bù望鼻咽部inspection of nasopharynx观察鼻咽部、咽隐窝、咽鼓管开口、腺样体及后鼻孔等部位的形态、色泽变化等的诊断方法。
wàng kǒu yān bù望口咽部inspection of oropharynx观察口咽黏膜有无红肿、干燥、溃疡等;咽后壁有无颗粒突起;咽侧索是否肥厚;腭扁桃体有无肥大、红肿、脓点、异常分泌物、假膜、溃疡、新生物等;前、后腭弓及悬雍垂、软腭有无异常等的诊断方法。
wàng hóu yān bù望喉咽部inspection of laryngopharynx观察舌根部、会厌谷、梨状窝等部位有无异物、新生物等;会厌活动情况、有无囊肿、充血、水肿等的诊断方法。
wàng hóu qiāng望喉腔inspection of laryngeal cavity观察喉黏膜有无充血、肿胀、披裂、溃疡、白斑;室带、声带的活动情况及有无肥厚、增生、新生物等的诊断方法。
wàng hóu wài bù望喉外部inspection of external larynx观察喉部是否居于颈前正中,两侧是否对称,有无肿胀、畸形、疤痕等形态变化的诊断方法。
wàng hé miàn望颌面inspection of maxillofacial region观察口腔周围的颌面部是否对称,有无偏斜、红肿或肿胀、肿块、隆起、畸形、创伤、瘀斑等;腮部、下颌下有无红肿或肿胀的诊断方法。
wàng kǒu chún望口唇inspection of lip观察口唇色泽、形态有无异常,是否有红肿、皲裂、溃烂、渗液、结痂,口角是否湿白、肿裂、溃烂,口闭不开,或口开不闭等的诊断方法。
wàng yáchǐ望牙齿inspection of tooth观察牙齿的排列,色泽有无异常,是否有龋洞及龋洞深浅、大小,牙齿的咬合关系是否对称,牙间隙有无疏豁,牙根有无暴露,牙齿润泽与枯槁等的诊断方法。
wàng yín ròu望龈肉inspection of gum观察龈肉的色泽、形态有无异常,有无红肿、溃烂、溢脓、出血、瘘管、萎缩、增生及牙周袋等的诊断方法。
wàng shé tǐ望舌体inspection of tongue body观察舌体的形态、胖瘦,有无红肿、红色或白色斑块、溃烂,以及溃烂的部位、范围的大小、形态、表面有无假膜、周围有无红肿等,舌体表面有无裂沟、舌苔的分布是否均匀,有无花剥,舌体局部有无肿块,以及肿块的大小、范围,舌系带的长短等的诊断方法。
wàng kǒu qiāng nián mó望口腔黏膜inspection of oral mucosa观察颊、龈、腭、唇内等处的黏膜有无红肿、溃烂、斑纹、疱疹等的诊断方法。
bí bù wén zhěn鼻部闻诊auscultation and olfaction of nose嗅鼻呼气时有无腥臭等气味;听鼻息声音,了解有无闭塞性鼻音、开放性鼻音、鼾声及喷嚏等的诊断方法。
yān hóu bù wén zhěn咽喉部闻诊auscultation and olfaction of larynx and pharynx嗅咽喉有无腥臭、腐臭气味;听嗓音是否洪亮,有无清嗓或吭喀、毛、沙、嘶、哑等情况;听呼吸音有无喘鸣、咳嗽声是否清脆、有无犬吠声等的诊断方法。
kǒu qiāng bù wén zhěn口腔部闻诊auscultation and olfaction of oral cavity嗅口腔中有无异常气味,听患者语速、语音、语调变化等的诊断方法。
wèn ěr lóng问耳聋inquiry of deafness问耳聋的起病诱因、时间长短、程度、治疗经过及相关全身性疾病等的诊断方法。
wèn ěr míng问耳鸣inquiry of tinnitus问耳鸣的发作时间、响度、音调,诱发加重的因素以及有无听力下降等的诊断方法。
wèn xuàn yūn问眩晕inquiry of vertigo问眩晕发作的特点,眩晕发作时是否伴有耳鸣耳聋,过去有无类似的发作史等的诊断方法。
wèn ěr tòng问耳痛inquiry of earache问耳痛的时间长短、性质,是否伴有耳漏,有无挖耳、污水入耳、外感、外伤史等的诊断方法。
wèn bí sāi问鼻塞inquiry of nasal obstruction问鼻塞的发作时间、特点,鼻塞缓解及诱发加重原因等的诊断方法。
wèn xiù jué问嗅觉inquiry of olfactory sensation问嗅觉障碍发生的时间长短和诱发因素,有无嗅觉异常等的诊断方法。
wèn bí tì问鼻涕inquiry of snivel问流涕的时间长短,涕量的多少,鼻涕的质地、色泽,有无异味或带血丝,流涕方式等的诊断方法。
wèn bí tòng问鼻痛inquiry of nasal pain问鼻痛的部位、性质、时间规律,是否伴有头痛以及诱发因素等的诊断方法。
wèn yān hóu téng tòng问咽喉疼痛inquiry of sore throat问咽喉疼痛的时间及其规律,疼痛的部位及其性质,疼痛是否放射到耳部的诊断方法。
wènyānhóuyìwùgǎn问咽喉异物感inquiry of sensation of foreign body in throat问咽喉有无热感、干燥感、痒感、痰黏着感、阻塞感、吞咽及呼吸障碍等的诊断方法。
wèn tūn yàn问吞咽inquiry of deglutition问有无吞咽异常的感觉,注意空咽与进食吞咽有无不同的诊断方法。
wèn fā yīn问发音inquiry of phonation问声音变化的时间,声嘶加重或减轻的诱因,发音时是否伴有喉痛,患者是否从事与嗓音有关的职业等的诊断方法。
wèn ké sòu tán xián问咳嗽痰涎inquiry of cough and sputum问咳嗽的特点,咳嗽发作的时间规律,咯痰的色、质、量及是否带血(血的色、质、量)等的诊断方法。
wèn hū xī问呼吸inquiry of breath问有无气急、气促、气短,呼吸时有无喉鸣音,呼吸困难与活动、的关系等的诊断方法。
wèn kǒu qiāng nèi téng tòng问口腔内疼痛inquiryof oral pain问口腔内疼痛的部位、时间、性质、程度,喜恶冷热,疼痛原因或诱因等的诊断方法。
wèn kǒu wèi问口味inquiry of oral taste问口味变化的性质、时间、病程,与口腔疾病的关系,以及伴随症状等的诊断方法。
wèn kǒu gān问口干inquiry of dry mouth问口干的程度、时间的长短,是否有口渴、喜恶饮水,进干食需水伴下与否等的诊断方法。
wèn chǐ shé nǜ问齿舌衄inquiry of gum and tongue bleeding问齿舌衄血的时间、性质 、病程、出血量多少,以及伴随症状等的诊断方法。
ěr bù qiè zhěn耳部切诊palpation of ear牵拉耳郭,按压耳屏及耳周是否有疼痛反应,若有肿胀或新生物,应探查其软硬程度、活动度及是否有波动感或压痛的诊断方法。
bí bù qiè zhěn鼻部切诊palpation of nose触压颧、额、鼻根、眼内眦两侧,观察有无压痛;触扪鼻根、鼻背部有无骨擦音或凹陷;对鼻前庭囊肿、硬结进行触诊;对鼻甲肿大者,可探查其硬度,发现鼻腔有新生物,可用卷棉子轻轻触压了解其软硬程度、活动度的诊断方法。
yān hóu bù qiè zhěn咽喉部切诊palpation of throat触摸咽喉内肿块软硬程度及活动度,有无压痛;触摸腺样体,辨其大小、软硬等情况;按压喉核观察有无分泌物溢出;如咽喉有局限性红肿,可在局部触压以判断是否成脓的诊断方法。
jǐng bù qiè zhěn颈部切诊palpation of neck触摸颈部有无肿胀、包块、核及其大小、软硬度、活动度,是否有触压痛等的诊断方法。
kǒu qiāng bù qiè zhěn口腔部切诊palpation of oral cavity用手指或器械切按口腔黏膜、牙龈、舌体、口底及颌下等,用探针触探龋齿、牙周袋及瘘道,用口镜或镊子柄端垂直轻叩牙体切缘或牙合面,或向侧方轻叩牙齿的颊面、舌面等几个方面的诊断方法。
ěr míng耳鸣tinnitus外界无声源而病人自觉耳中鸣响的表现。
ěr lóng耳聋deafness不同程度听力减退的表现。
zhòng tīng重听hard of hearing程度较轻的听力减退的表现。
ěr tòng耳痛ear pain耳郭、耳周、耳道及耳底疼痛的表现。
ěr liú nóng耳流脓purulent ear discharge耳内流脓的表现。
ěr guō kū gǎo耳郭枯槁withered auricle耳郭干枯,失却荣润的表现。
ěr yǎng耳痒ear itching耳郭和外耳道及耳内作痒的表现。
ěr wàng wén耳妄闻acoasm; auditory hallucination耳中时有幻听的表现。
[关键词] 超高压液相色谱-二级质谱联用法;元胡止痛片;延胡索乙素;药物代谢动力学
[中图分类号] R927 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2017)03(a)-0036-04
UPLC-MS/MS determination and pharmacokinetic study of plasma concentration of Tetrahydropalmatine in Yuanhuzhitong Tablets
SHAN Wenjing1 XU Xinrui1 WU Jian2
1.Department of Pharmacy, the Fifth People's Hospital of Dalian City, Liaoning Province, Dalian 116021, China; 2.School of Science, Harbin University of Commerce, Heilongjiang Province, Harbin 150076, China
[Abstract] Objective To establish an UPLC-MS/MS determination method of Tetrahydropalmatine in rat plasma, explore pharmacokinetic process in rat after intragastric administration of Yuanhuzhitong Tablets. Methods The chromatography was eluted with mobile phase consisted of acetonitrile and 0.1% formic acid solution at the flow rate of 0.35 mL/min by gradient elution. Multiple-reaction monitoring scanning mode was employed for quantification with switching electrospray ion source polarity in positive mode. The pharmacokinetic parameters were calculated by using DAS 3.0 software. Results The linear ranges of Tetrahydropalmatine was 2.93-711 ng/mL. RSDs of inta-day and inter-day were all lower than 15%, and the average recovery was more than 87.6%. After intragastric administration of Yuanhuzhitong Tablets, AUC0-t of Tetrahydropalmatine was (11 359±3026) ng・min/mL, t1/2 was (342±36)min. Conclusion UPLC-MS/MS is a rapid, sensitive and specific method for the determination of Tetrahydropalmatine in rat plasma. This method is suitable for pharmacokinetic analysis of Yuanhuzhitong Tablets in rats.
[Key words] UPLC-MS/MS; Yuanhuzhitong Tables; Tetrahydropalmatine; Pharmacokinetics
元胡止痛片是比^典型的处方组成相对简单的中药复方制剂,该方剂是由延胡索(醋制)和白芷两味中药组成,具有理气、活血、止痛之功效,用于治疗气滞血瘀的胃痛、肋痛、头痛和痛经等。由于该方组方简单、疗效确切,被收载于1985年及以后各版《中国药典》。经研究发现,生物碱和香豆素类化合物是延胡索和白芷中的主要活性成分[1-3],且具有广泛的药理活性,如血管舒张、止痛、抗炎、抗焦虑及抗痉挛等[4-9]。其中延胡索乙素是延胡索中的异喹啉类生物碱,是元胡止痛片中的重要活性成分,具有较强的镇痛、镇静、催眠等药理作用,是元胡止痛片中的有效活性成分之一。处方中所用延胡索多经过醋制,因为游离的生物碱较难溶于水,经醋制后生成醋酸盐而易溶于水而发挥疗效[10-12]。
延胡索乙素既是元胡止痛片的物质基础,又是质量控制常用的指标物[13]。已有研究建立了元胡止痛片中延胡索乙素[14]及香豆素类成分[15-20]的质量控制方法,但未见药动学研究报道。本研究首次采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),研究元胡止痛片中代表性的延胡索乙素在大鼠体内的药代动力学行为,为该组方更深层次开发利用提供科学依据,为元胡止痛片的临床应用提供参考。
1 仪器、试药与方法
1.1 仪器
UPLC-MS/MS分析系统(由Agilent 1290高效液相色谱仪和Agilent 6460质谱检测器组成);LG16-B型高速离心机(北京雷勃尔离心机有限公司);Bandelin Sonorex RK 1208BH超声波清洗器(德国);HWS 24型电热恒温水浴锅(上海一恒科学仪器有限公司);Milipore超纯水机(美国Mililpore公司);METTLER Toledo AB265-S电子天平(瑞士)。
1.2 药品
甲醇、乙腈购于美国ACS恩科化学,乙酸、乙酸铵购于Sigma公司,均为色谱纯。水为超纯水,其余试剂均为分析纯。元胡止痛片购于哈尔滨人民同泰药房,生产厂家为河南宛西制药有限公司,生产批号:160102。延胡索乙素、柚皮苷购于中国食品药品检定研究院。
1.3 实验动物
清洁级雄性SD大鼠,体重(270±30)g,月龄为4个月,哈尔滨医科大学实验动物中心,许可证号:SCXK(黑)2013-001。
1.4 方法
1.4.1 标准溶液的配制 精密称取对照品延胡索乙素适量,用甲醇溶解并定容,得延胡索乙素(1.31 mg/L)的对照品储备液。
1.4.2 标准曲线血浆样品及质控样品的制备 精密吸取“1.4.1”项中延胡索乙素标准品溶液10 μL,加入空白血浆90 μL,涡旋30 s,配制成延胡索乙素2.93~659 ng/mL标准曲线血浆样品。延胡索乙素质控样品为4.35、47.9、527 ng/mL。
1.4.3 色谱条件 采用Waters ACQULTY UPLC C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)色V柱进行分析,以水(含0.1%甲酸溶液)为流动相A,乙腈为B,进行梯度洗脱。0~2 min,流动相A(%)为9580;2~3 min,流动相A(%)为8070;3~4 min,流动相A(%)为7050;4~5 min,流速为0.35 mL/min进样量为1 μL,柱温为30℃。
1.4.4 质谱条件 电喷雾离子源(ESI源),检测方式:正离子检测,扫描方式:多反应离子监测(MRM),对照品的选择检测离子质荷比为延胡索乙素:356.2192.1干燥气(N2)流速11.0 L/min,Nebulizer 0.10335 MPa,干燥气温度300℃,检测器电压4000 V。
1.4.5 血浆样品处理方法 取大鼠血浆50 μL,加入200 μL内标柚皮苷溶液(20.0 ng/mL)涡旋1 min,于4℃、15 000 r/min离心10 min,取上清液置离心管中,氮吹仪下氮气吹干,残留物用50 μL甲醇-水(50U50)溶解,于4℃、15 000 r/min离心10 min,取上清液1 μL进样。
1.4.6 药动学 实验大鼠6只,自由饮水,给药前禁食12 h,灌胃给药,给予元胡止痛片3.0 g/kg。分别于给药后0.083、0.25、0.5、1、1.5、2、4、6、8、12、24 h眼底静脉丛毛细管取血0.1 mL/只,肝素钠抗凝,4500 r/min离心10 min,分离上层血浆,-40℃保存备用。
1.4.7 数据分析 血药浓度-时间数据采用DAS 3.0药动学软件按非房室模型处理,计算药动学参数,所得数据以x±s表示。
2 结果
2.1 方法学考察
2.1.1 专属性考察 取大鼠空白血浆、空白血浆+内标溶液、空白血浆+对照品、血浆样品,按血样处理方法处理,进样,结果见图1~4,血浆的内源性物质不干扰各成分和内标的测定,表明液质行为及专属性良好。
2.1.2 标准曲线和线性范围 取大鼠空白血浆,每份90 μL,加入延胡索乙素对照品系列溶液10 μL,制得被分析物的血药浓度为延胡索乙素2.93、8.79、26.3、79.1、237、711 ng/mL;分别精密吸取各标准曲线血浆样品50 μL,按“1.4.5”项的方法处理,在“1.4.3”项条件下进样测定,记录色谱图。采用加权(1/X2)最小二乘法,以待测成分峰面积与内标峰面积的比值(Y)对样品质量浓度(X)进行曲线拟合回归,得工作方程,定量限以S/N≥10计,线性方程Y=0.0416X+0.361,R2为0.9959,线性范围为2.93~711 ng/mL,延胡索乙素在相应的范围内线性良好。
2.1.3 准确度和精密度 配制低、中、高3个质量浓度的对照品血浆样品,按“1.4.5”项下方法处理,每个质量浓度取6份样本,1 d内分别测定6份样品,并各取1份样品连续测定3 d,计算日内、日间精密度见表1。
2.1.4 回收率与基质效应 分别制备低、中、高浓度的含药QC样品,按“1.4.5”项下方法操作,进样分析,记录峰面积,每一浓度平行测定6份,记录待测物和内标的峰面积比值为A;另取空白血浆,按“1.4.5”项下方法操作处理后,加入对应的低、中、高浓度的系列对照品溶液进样分析,记录待测物和内标的峰面积比值为B,每一浓度平行测定6份;A/B×100%即得提取回收率。另用流动相将标准系列溶液配制成与上述理论浓度相同的低、中、高浓度溶液直接进样分析,每一浓度平行测定6份,记录待测物和内标的峰面积比值为C,基质效应的计算方法为B/C×100%。延胡索乙素低、中、高浓度的回收率和基质效应见表1。结果表明所建方法能够满足生物样品的测定要求。
2.1.5 样本稳定性考察 考察各成分低、中、高3个质量浓度的质控样品室温放置、自动进样器内、-40℃长期冷冻、冷冻-解冻3个循环等不同存储条件下的稳定性。结果表明,血浆样品室温放置4 h、血浆样品处理后在自动进样器内放置24 h、血浆样品冷冻-解冻循环3次、血浆样品长期冷冻于-40℃冰箱内30 d,各成分的RSD均< 15%。见表2。
2.2 药动学试验
取健康SD大鼠6只,实验前12 h禁食不禁水。按3.0 g/kg(按照元胡止痛片使用说明书每人每次用量为1.5 g,药动学研究采用其给药量20倍灌胃给药,即每人每次30 g,参照人体-大鼠给药量折算方法,得大鼠给药量为3.0 g/kg)灌胃元胡止痛片,分别于给药后5、10、15、20、30、45、60、90、120、150、180、240、360、480、720、1440 min经大鼠眼球后静脉丛采血约0.1 mL,置肝素化试管中,4500 r/min离心10 min,分取上清,血浆置于-40℃冰箱中保存待测。样品按“1.4.5”项下方法处理,取上清进行UPLC-MS/MS测定。延胡索乙素在大鼠体内的血药浓度数据采用DAS 3.0软件进行计算,t1/2为(342±36)min,达峰浓度(Cmax)为(49.3±1.25)ng/mL,达峰时间(Tmax)为180 min和药-时曲线下面积(AUC0-t)为(10 246±2735)ng・min/mL,平均驻留时间(MRT0-t)为(482±38)min。见图5。
3 讨论
中药药代动力学是借助于药代动力学的基本理论研究中草药活性成分、组分、中药单方和复方体内吸收、分布、代谢和排泄的动态变化规律及其体内时量-时效关系。中药药代动力学虽起步较晚,但新理论、新方法的涌现以及HPLC、LC-MS和LC-NMR等检测手段的出现,为认识中药体内过程中所产生的药物信息提供了有力技术支撑。中药药代动力学为研究中药各化学成分的体内代谢过程和各组分间在体内的相互作用提供了新途径,但由于中药复方中的化学成分相对复杂且微量,如何从整体上阐明中药的药效物质基础是目前所面临的问题之一。延胡素作为君药,是元胡止痛片中的重要组成部分,其化W成分是发挥药理作用的物质基础。本文通过分析这种有效成分在体内的药代动力学过程,为阐明元胡止痛片的药理作用提供参考。本文采用UPLC-MS/MS及内标法对延胡索乙素进行定量测定,保证了血药浓度结果的准确性。UPLC-MS/MS检测一个样品所需时间短,且所需的血浆样本量少,非常适合药代动力学等研究中的大批量样品研究。
在样品处理过程中,分别考察了甲醇沉淀蛋白法、乙腈沉淀蛋白法、乙酸乙酯萃取法,对各自所得回收率进行分析,结果显示,甲醇沉淀蛋白法提取回收率最高且处理方法较为简单。根据UPLC-MS/MS的分析结果,发现元胡止痛片灌胃给药后,延胡索乙素能迅速吸收入血发挥作用。
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【关键词】 中度高血压;依从性;固定复方制剂;单药联合
我国高血压的发病率呈上升趋势, 但血压达标率较低, 患者依从性差是重要因素之一。有研究显示, 选用固定复方制剂的降压药物较简单合用多种降压药物可以提高患者的服药依从性[1]。本文选择在本院门诊就医的中度原发性高血压患者116例, 随机分为复方组和单药组, 随访32周, 对比两组服药依从性, 现将研究结果报告如下。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 选择2012年8月~2013年8月在本院门诊就医患者中, 根据《中国高血压防治指南(2010)》符合原发性高血压诊断, 且160 mm Hg ≤收缩压≤179 mm Hg(1 mm Hg= 0.133 kPa), 和(或)100 mm Hg ≤舒张压≤109 mm Hg的中度高血压患者 [2];排除肝肾功能不全、用药禁忌、精神疾病患者, 生活自理困难等疾病的患者共116例, 其中男62例, 女54例, 平均年龄(42.5±11.2)岁。将符合条件的患者随机分为复方组60例, 单药组56例。两组性别、年龄、教育程度、经济状况、基础疾病等一般资料差异无统计学意义(P>0.05), 具有可比性。
1. 2 方法 复方组给予缬沙坦氢氯噻嗪片(缬沙坦80 mg/氢氯噻嗪12.5 mg, 商品名复代文, 北京诺华制药有限公司) 1片/次, 1次/d口服。单药组给予缬沙坦胶囊80 mg(商品名代文, 北京诺华制药有限公司)1片/次, 1次/d口服, 联合氢氯噻嗪片(25 mg/片, 常州制药厂)12.5 mg/次, 1次/d口服。每8周门诊随访1次, 采用药品计数法计算服药率(即实际服药数占理论服药数的百分率), 来判断患者服药依从性, 可分为4个等级:过度服药:服药率>100%;依从性好:服药率75%~100%;依从性中等:服药率25%~75%;依从性差
1. 3 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件进行统计分析, 计量资料用均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验, 计数资料用率(%)表示, 采用μ检验, P
2 结果
116例共有6例患者失访(占5.17%), 复方组4例, 单药组2例, 均因患者工作原因、联系方式改变等不能复诊所致。两组患者在不同随访阶段依从性统计结果见表1。单药组过度服药和依从性差例数明显高于复方组, 主要表现在氢氯噻嗪片过量服用, 或者两种药物只服一种造成漏服。将两组患者在不同随访阶段依从性好的患者比率进行统计学分析, 第8周随访时, 两组服药依从性好的比率差异无统计学意义(μ=1.630.05), 随着时间延长, 两组差异有统计学意义(P
3 讨论
高血压病的治疗在中国乃至世界都存在着治愈率低、达标率低的问题, 依从性差是一个重要影响因素。《中国高血压防治指南2010》指出对中度或高危以上的高血压患者, 起始即可采用小剂量两种降压药联合治疗, 其中包括固定配比的单片复方制剂[2]。联合用药可通过相互拮抗不利的反馈代偿机制增强降压效果, 同时各自所需的剂量一般低于二者单一用药的剂量, 有益于减少药物不良反应, 并且减少了服用不同药物的复杂性, 减少漏服和保证长期坚持用药。本文研究亦显示, 对于中度高血压患者, 复方组与单药组相比, 服药依从性好的等级患者比率在8周随访时, 两组差异无统计学意义(P>0.05), 但随着时间延长, 两组间差异具有统计学意义(P
总之, ARB/ HCTZ固定复方制剂具有优势互补、简化治疗、提高长期治疗依从性和有利于血压控制达标等诸多优点, 值得临床推广应用。
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[关键词] 药剂学;教学;责任意识;规范意识;创新意识
[中图分类号]G652 [文献标识码]C [文章编号]1673-7210(2009)03(a)-119-02
Discussion on the cultivation of three kinds of consciousness in pharmaceutics teaching
CAI Zheng, XIA Bi-jun, LIU Zhong-qiu
(Department of Pharmaceutics, School of Pharmaceutical Science, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China)
[Abstract] It is necessary to cultivate professional consciousness of students when imparting professional knowledge to them during pharmaceutics teaching. This paper discussed the three important consciousness that a pharmaceutical professional should posses, they are responsibility consciousness, standard consciousness and innovation consciousness.
[Key words] Pharmaceutics; Teaching; Responsibility consciousness; Standard consciousness; Innovation consciousness
药剂学是药学专业学生的一门必修课,是其由学校学习走向药物制剂研究、开发、生产及使用岗位的桥梁课程。从某种意义上说,它也是药剂专业的启蒙课,学生在学习过程中将逐渐形成一些对该专业的印象与观念。因此,在这门专业课的教学中,教师不仅需要向学生传授相关的专业知识,还有必要培养学生一些重要的专业意识,如责任意识、规范意识以及创新意识,既授之以鱼又授之以渔,这将对其日后从事这方面的工作产生积极深远的影响。
1 责任意识的培养
药品质量直接关系到人的身体健康与生命安全,特别是药物制剂,作为药物的最终给药形式直接供患者使用,其安全的重要性不言而喻。因此,药剂工作者责任重大,教学中需要强化学生做良心药、放心药的责任意识。教师在讲解各种剂型的制备与评价方法时,除了介绍正确、合理的流程与操作,还可采取以下两种方法从反面来谈不合格制剂的危害性,以加深学生的印象,并从专业角度剖析问题原因,帮助其理解一些影响药品安全的制剂因素,从而使责任意识更为具体化。
1.1 图示法
通过在课堂上展示一些相关的病理图片,可产生类似于吸烟者肺的照片给人们带来的震撼与警示效果。例如,在讲授注射剂的质量要求时可给同学们看一看在高渗液中发生皱缩的红细胞,低渗液中膨胀甚至破裂的红细胞,以及由于输液中的异物侵入组织而形成的肉芽肿的图片,给他们留下深刻印象,明白渗透压、澄明度等指标与注射剂的安全密切相关,应严格控制。
1.2 案例法[1]
例如,可结合安徽华源“欣弗”事件对湿热灭菌法的影响因素进行解析。导致该厂生产的克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液(商品名“欣弗”)集中出现不良反应的直接原因为:未按批准的工艺参数灭菌、降低灭菌温度、缩短灭菌时间、增加灭菌柜装载量,结果影响了灭菌效果,无菌与热原检查均未达标。通过“欣弗”事件能使同学们明白灭菌操作的严格性,丝毫不能马虎,并可进一步引导学生从中吸取教训,即未经验证、审批,不得随意改变药品的生产工艺,否则有可能酿成严重后果。
2 规范意识的培养
为保证药品的质量,国家制订了一系列法规,如:《中国药典》、《药品注册管理办法》、《药品生产质量管理规范》等,对药品的研发、生产等方面进行规范,这些法规对于药物制剂工作的开展具有重要的指导意义。在药剂学教材中也包含了一些法规(主要是《中国药典》、《药品生产质量管理规范》)的内容,例如对一些剂型的定义及其质量要求的描述,还有一些质检方法的介绍即源自《中国药典》。教师在讲授这部分内容时可以还原它的出处,并根据这些法规的修订情况及时更新教学内容,从而将教材与法规联系起来,引起学生对法规的重视。还可将《中国药典》、《药品注册管理办法》、《药物研究指导原则》等法规作为专业参考资料推荐给学生,并布置一些课后习题,如统计《中国药典》中缓释制剂的种类与数量,让学生通过查阅了解、熟悉这些法规,逐渐形成一种规范意识,实现表达与操作的规范化。
3 创新意识的培养
首先,应及时更新教学内容,增加信息量。近年来,药剂学的发展十分迅速,各类新型给药系统如缓、控释制剂、透皮制剂、靶向制剂层出不穷,新设备、新工艺、新辅料也不断涌现。显然,相对于药剂学的发展而言教材存在着明显的滞后性[2]。例如,《药剂学》(人民卫生出版社,第5版)“缓释、控释制剂”章节中提到:半衰期很短或很长的药物不适合制成口服缓释制剂,但事实上随着缓、控释技术的发展,一些半衰期很短或很长的药物已突破了这一限制,被制备成缓释或控释制剂。因此,在教学中有必要补充介绍一些研究进展、前沿理论,让学生了解药剂学科的发展动态,“知新”、“识新”才可能“创新”。
其次,可将教研室的科研成果有机地融入课堂教学[3,4]。单纯地讲述枯燥的书本理论知识,学生很难深刻理解,被动地、机械地接受知识,学生常常会产生厌烦和排斥心理。教研室的科研成果往往是药剂学科最前沿的研究内容,并代表了教研室的学科特色和水平,也是教师们多年的科研积累和总结,其科研思路与历程容易激发学生的求知热情与创新意识。
再之,采用以问题为中心,通过设定问题,引导同学积极思考,并找出解决问题的方法,从而提高创新意识。例如,选定一个模型药物,让学生通过查阅文献资料了解其临床应用情况以及有关理化性质与生物学性质,据此选择合理的剂型,并对处方与工艺进行设计。这样让学生带着问题去学习,在解决问题的过程中将知识转化为能力,同时也培养了一种探索精神。此外,除了有答案的问题,还可在课堂中提出一些尚不成熟的科研问题,给予学生充分想象和探索的空间,可以调动学生的主动思维,培养学生思考和质疑的习惯。借助图书馆、网络等丰富的学习资源,再加上大学生较强的自学能力,他们不难掌握专业课中的那些知识点,但专业意识的培养则更需要教师的引导。在教学过程中,教师应结合个人的科研及其他相关工作经验,逐步培养学生从事药剂专业所应具备的各种意识,使其今后在专业发展的道路上走得更加顺畅。
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