联系人意见

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联系人意见范文第1篇

为认真贯彻实施国务院《工伤保险条例》，进一步提高工伤认定的准确性，有效落实法律监督制度，做好工伤认定及其行政复议、行政诉讼工作，根据市政府办公室《关于建立市工伤认定工作联席会议制度的通知》要求，经区政府同意，建立区工伤认定工作联席会议制度。现就有关问题通知如下：

一、联席会议的主要职能

联席会议由牵头部门召集成员单位学习、交流工伤认定有关法律、法规、规章和政策规定，分析研究复杂和疑难工伤认定案件，探讨有共性的工伤案例，就成员单位需要配合的事项进行沟通。通过对工伤认定及其行政复议、行政诉讼案件的沟通协商，总结执法、司法实践中的经验做法，形成指导性意见，指导工作开展。在工伤认定及其行政复议、行政诉讼的调查处理过程中，对律师等法律工作者的从业行为和当事人行为进行引导约束。

二、联席会议成员单位及其职责

联席会议成员单位由区人力资源和社会保障局、区政府法制局、区法院、区公安分局、区司法局、区安监局、区卫生局组成。联席会议办公室设在区人力资源和社会保障局，具体负责联席会议的牵头召集及日常工作。

区人力资源和社会保障局负责工伤认定复杂和疑难案件的整理，对有关法律、法规和规章规定不具体或对条文理解不一致的情况进行汇总分析，提交联席会议讨论，对联席会议研究确定的意见及时反馈有关部门。

区政府法制局负责对适用行政法规有关内容的解释，在审理工伤认定行政复议案件提出拟办意见前，及时与区人力资源和社会保障局进行沟通。

区公安分局负责对工伤认定中涉及交通事故、人身伤害、刑事案件等情况给予协助，依法出具相关证明材料；对有关法规条文提出指导性解释。

区司法局负责对有关工伤认定案件的律师等法律工作者进行管理考核；会同区人力资源和社会保障局通报律师等法律工作者工伤案件的从业情况，规范律师等法律工作者的从业行为。

区安监局负责协调督导全区安全生产行政执法工作，依法行使综合监督管理职权，组织查处职业危害事故和违法违规行为；综合管理全区生产安全伤亡事故和安全生产行政执法统计分析工作；指导全区安全生产宣传教育、安全生产监督管理人员的安全培训、考核工作。

三、工作规则

联系人意见范文第2篇

关键词:未成年人;学校与社区;思想道德

当前加强未成年人思想道德建设是每个学校的重中之重。众所周之，未成年人能否健康成长直接关系到一个国家、一个民族的兴衰，未成年人是国家的未来、民族的希望，党和国家历来都非常重视对未成年人的教育、引导和保护，并为未成年人的健康成长创造良好的条件和环境。今年我市教育局也提出:让德育回归生活，培养有文化有素养的文明公民。因此，要把未成年人思想道德建设放在学校的首要位置上来抓，将文化育人作为学校德育的最高境界和目标，以校园文化建设为突破口，更新教育教学观念，打造一支高素质的教师队伍，提高教育教学质量，营造一个良好的育人环境，为教师发展和学生成长创造适合的文化氛围。

一、加强学校与社区的联系

社区是以家庭和各个单位为细胞的组织体，是学校和家庭存在的生活空间，更是学生成长和发展的宝贵资源库。社区环境直接影响着家庭和学校的教育教学质量，社区环境是以一定区域内社会共同体所反映出来的有关人的行为方式、社会习俗、生活方式、价值观念、思维定式、地域形态等文化现象的总和。社区文化环境建设水平的高低、质量的好坏是衡量一个民族文化教育素质高低的重要标志。而学校的基本社会功能是专门从事教育的机构，有传递社会文化、促进个体社会化的责任与义务。可见学校与社区在文化上的同一性受到重视，学校被看成是社会文化层次中的一个亚单元。学校在传递某种理想的背后，其组织方式、人际互动方式、价值取向和传播方式都与它所在的社区具有相同的一面，社区上各种影响都会在学校中得到反映。

二、加强教师与家长的联系

众所周之，家长是孩子的第一任教师、是孩子的启蒙教师，父母在子女面应该是宽厚的长辈、渊博的老师、亲密的朋友，并且家庭是孩子成长的摇篮，是最直接的道德实践的地方，家庭道德教育的作用是其他渠道无可替代的。首先家长要有必备的基本知识，因为父母是孩子的第一任老师;其次，家庭中的成年人尤其是未成年人的父母亲要为未成年人做出道德表率和模范作用，因为父母亲的一言、一行、一举、一动都在影响着孩子，对孩子有着潜移默化的作用。

诚然，学校、教师与家庭的合力关系也是不能忽视的，前苏联著名的教育家苏霍姆林斯基就说过:“学校和家庭是一对教育者。”这就道出了在教育中教师与家长的合力关系。素质教育是一个合力效应，学校、教师、家庭三者缺一不可。因此，必须加强家长与学校、与老师的沟通，争取家长对学校教育的理解与支持，让家长了解学校，融入学校，信任学校，最终实现学校教育的和谐化，使学校教育和家庭教育同步协调，促进学校发展朝着“让社会放心、让家长满意、让学生喜欢”的目标迈进。

三、加强家长与孩子联系

亲子关系是一种最先存在于孩子与父母之间的一种人际关系，这种关系是其他关系无可取代的。而和谐的亲子关系是每个家庭的幸福。父母与孩子间关系的融洽是家庭和谐的表现，也是社会和谐的基础，亲子关系的好坏，不仅直接影响孩子的身心发展与健康，而且也将影响到孩子以后形成的各层次的人际交往关系。

四、加强教师与学生之间的联系

俗话说得好:“理解万岁”。师生之间的理解是校园和谐的根本，而构建和谐校园是构建和谐教育的重要组成部分，这就要求师生之间要加强联系与沟通。当前，素质教育正在我国全面铺开与深入，师生之间的角色也在转变。新型的师生关系是一种亲密的和谐的朋友关系，师生和谐是校园的根本，是学校和学生发展的共同基础。师生和谐是学生得以健康成长和良好发展的前提和关键，也是帮助教师树立正确的学生观、质量观，实现专业化发展的理想境界。因此，这就要求我们要加强“师德师风”教育、加强教师职业道德规范教育，通过这些活动促使教师角色的转变，促使教师遵守职业道德、提升师德水平和业务素质，不断增强“教书育人、管理育人、服务育人”的使命感和责任感，在育人过程中不断增进师生之间的和谐情谊。

总之，未成年人思想道德建设的教育是一项十分复杂的工程，未成年人思想道德教育不是单方的教育，单靠学校是不行的，单靠家庭也是不够的，单靠社会也远远不足，我们必须形成一个合力，需要多方面的共同努力，构建一个德育网络，齐抓共管，发挥一切能够发挥的力量，这样教育才能够发挥应有的作用。相信只要我们家长、学校、社会和教师不懈地努力，未成年人的思想道德教育将会取得更大的成效。

联系人意见范文第3篇

“岗树一念”，树立起符合科学发展观要求的岗位理念

要求每个工作岗位都要按照科学发展观的要求，创新岗位理念，使每名工作人员在先进理念指导下做好本职工作。综合调研工作确立了“说真话、说实话、敢说话，谋难点、谋突破、谋创新”的理念；信息工作确立了“参谋决策助手，党和群众纽带”的理念；督查工作确定了“铁面无私，雷厉风行”的理念；干部工作确立了“忠诚服务，凝心聚才”的理念；值班工作确立了“准确到位，第一时间”的理念，保密工作确立了“国家秘密忠诚卫士”理念，机要工作确立了“党的忠诚传令兵”的理念等等。在此基础上，办公厅综合归纳了四个理念，作为对全厅同志的统一要求：一是以人为本，抓班子、带队伍，关心人、培养人、成就人，充分调动全厅党员干部职工的积极性、主动性和创造性；二是超前谋划，变被动为主动，参谋在前、策划在前、行动在前；三是改革创新，创新服务方式，创新思路举措，创新工作方法；四是快捷高效，第一时间获得真实信息，第一时间做出反应，第一时间谋划出方案，第一时间推动落实。

“人练一招”，练就在本职岗位上服务科学发展的过硬本领

按照提高效率、优质服务的要求，强化岗位练兵，打牢基本功，熟练掌握过硬的业务本领。如文字工作人员着力提高迅速成稿能力和核稿改错能力；事务工作人员着力提高准确复述领导交办事项、电话内容等，迅速做出拟办意见，熟记电话号码、传真号、车号等方面的能力；资料工作人员着力提高迅速提供上情下情，各种数据的能力。通过“人练一招”活动的开展，在办公厅全体同志中兴起了“学业务、长本领”的热潮，大家比、学、赶、超，业务素质有了明显提升，在本职岗位上服务科学发展的本领得到了进一步增强。

“处谋一策”，积极为推进全市科学发展出谋划策

联系人意见范文第4篇

【摘要】 目的: 建立一种高效扩增人T细胞受体（TCR）β链可变区（Vβ）基因的方法。方法: 根据TCR Vβ26个亚家族基因序列特点设计扩增Vβ基因的上游内引物34条、 上游外引物37条， 并将内、 外上游引物各分为8个简并组。在恒定区（C区）设计下游内、 外和测序引物各1条以及扩增Cβ基因的上游引物1条。提取细胞RNA， 用PolyA介导反转录后， 采用巢式PCR扩增正常人CD8 T细胞TCR Vβ26个亚家族基因， 并用Jurkat T淋巴瘤细胞作为对照。用Teasy载体克隆RTPCR 产物， 对克隆基因进行测序。结果: 从正常人的CD8 T细胞中扩增到所有TCR Vβ亚家族基因， 克隆后测序与相应的参考序列同源。从Jurkat细胞扩增出TCR Vβ8基因， 经测序验证与文献报道一致， 且最少可从10个细胞提取的RNA模板中扩增成功。结论: 建立的巢式RTPCR方法可以高效、 广谱地扩增人TCR Vβ基因， 为进一步进行抗原特异性细胞毒T淋巴细胞的TCR克隆和功能研究打下了良好基础。

【关键词】 CD8 T细胞; T细胞受体（TCR）; 反转录PCR; 基因克隆

［Abstract］ AIM: To develop an effective assay for amplifying human Tcell receptor (TCR) variable region of β chain (Vβ)encoding genes. METHODS: Based on the property of the 26 subfamilies of human TCR Vβencoding gene sequence， 34 sets of outer and 37 sets of inner sense primers were pided into 8 degenerate primer groups， and a set of outer and inner antisense primers located in conserved region β chain (Cβ) was designed for the amplification of the TCR Vβencoding genes. In addition， a sequencing primer and a sense primer for amplifying Cβencoding genes were designed. CD8 Tcell RNA was extracted and subjected to reverse transcription mediated by poly A， followed by a nested polymerase chain reaction (PCR) to amplify the 26 subfamilies of human TCR Vβencoding genes. Jurkat T lymphoma cells were used as control. Teasy vector was employed to detect DNA sequencing of the cloned target genes. RESULTS: All the subfamilies of the Vβencoding genes were obtained from CD8 T cells of a healthy donor， except the subfamily of Vβ8 ， was obtained from Jurkat cells. The results were confirmed by DNA sequencing of the cloned genes. CONCLUSION: The nested RTPCR assay can effectively amplify human TCR Vβencoding genes with broad spectrum， which is helpful for the cloning and functional study of the TCR expressed by antigenspecific cytotoxic T lymphocytes.

［Keywords］CD8 T cell; Tcell receptor (TCR); RTPCR; gene cloning

T细胞受体（Tcell receptor， TCR）是T细胞表面特异性识别抗原和介导免疫应答的分子， 可分为TCRα/β和TCRγ/δ两种类型， 外周血T细胞主要为TCRα/β的T细胞， 是介导机体特异性细胞免疫反应的主要细胞。TCRβ基因由可变区（V）、 多变区(D)、 结合区（J）和恒定区（C）四部分基因片段组成。在T细胞发育过程中V区、 D区和J 区进行重排而形成具有功能的TCR编码基因， 重排的过程中VD和DJ 之间可有不同数量的核苷酸随机插入或删减的现象， 这种基因片段连接的不准确性使TCR的表达呈多样性， 以识别各种不同的抗原［1］。因此， 分析TCR Vβ亚家族的表达和利用情况， 对阐明肿瘤、 自身免疫性疾病以及病毒感染等疾病的致病机制十分重要［2-4］。然而由于TCR Vβ的多样性， 采用已往报道用的RTPCR方法在T细胞数量很少以及TCR表达很微量的情况下扩增TCR基因灵敏度不高或代表性不够。本研究通过优化引物设计和应用巢式RTPCR使TCR Vβ的扩增具有很高的灵敏度和广泛的代表性。PCR产物进一步做DNA克隆， 挑取单克隆菌落测序， 了解TCR Vβ链的表达和分布情况， 为进一步研究病毒感染时特异性T细胞TCR的偏性取用（bias usage）和克隆性增殖的情况提供了方法学基础。

1 材料和方法

1.1 材料 用于分选CD8 T细胞的外周血单个核细胞（PBMC）来自1例男性健康成年人， Jurkat 淋巴瘤细胞为本室保存， MACS（Magnetic activated cell sorter）磁珠分选CD8 T细胞的试剂与分离柱和分离器购自德国Miltenyi Biotec公司， 荧光标记的抗CD3和抗CD8抗体购自美国BDPharmingen公司， 提取细胞RNA的RNessy mini盒、 PCR产物回收和凝胶电泳产物回收试剂盒均购自德国Qiagen公司， 反转录试剂盒和pGEM Teasy 载体均购自美国Promega公司。

1.2 方法

1.2.1 PBMC分离和CD8 T细胞分选 按照常规方法分离PBMC， CD8 T细胞的MACS磁珠分选操作方法按说明书进行。分选后的CD8 T细胞用荧光标记的抗CD3和抗CD8抗体染色、 流式细胞术（FCM）检测CD8 T细胞的纯度和数量， 用RPMI1640液调整细胞密度至 2×109/L备用。

1.2.2 引物 根据文献资料［5， 6］和从GenBank下载的257条人TCR Vβ基因序列进行分析， 根据Vβ各个亚家族的基因序列特点， 在相对保守的信号肽区设计出相应的25个亚家族特异性上游引物(Vβ26亚家族基因为假基因， 故不设计实验)， 因为有些TCR Vβ亚家族内部还分为几个不同的分家族， 故共设计了上游外引物34条和上游内引物37条; 在Cβ区设计下游外引物down1、 下游内引物down2、 测序引物down3各1条， 以及扩增Cβ基因的上游引物C1（表1）。引物由上海生工公司合成。表1 扩增TCR Vβ和Cβ编码基因的引物设计

1.2.3 RNA提取和巢式RTPCR反应 CD8 T细胞或Jurkat细胞RNA的提取按照文献［7］的方法进行。应用(oligo)dT引物反转录合成cDNA第1链， 反转录反应条件为40℃ 1 h。以cDNA为第1轮PCR反应模板， 将上游外引物分为8组简并引物分别与down1进行8个PCR反应， PCR扩增总体积为25 μL/管， 反应条件为94℃ 5 min; 94℃ 30 s， 59℃ 30 s（每个循环递减1℃）， 55℃ 30 s， 72℃ 1 min， 30个循环; 72℃ 5 min; 68℃ 5 min。第2轮PCR反应以第1轮PCR产物为模板， 将对应的8组简并上游内引物分别与down2加入各反应管中， 反应体积为50 μL/管， 反应条件为94℃ 3 min; 94℃ 30 s， 60℃ 1 min， 72℃ 1 min， 40个循环; 72℃ 5 min; 68℃ 5 min; Jurkat细胞RNA模板扩增基因片段长度为578 bp。一些实验中， 第2轮PCR反应使用单一上游引物分管反应， 以确定各亚家族引物的扩增效率。同时扩增βactin和TCR Cβ编码基因做为质控对照。RTPCR反应扩增TCRβ链编码基因的步骤示意见图1。

1.2.4 DNA克隆 PCR产物于10 g/L琼脂糖凝胶（溴乙锭染色）中进行电泳分析， 挑取Vβ14亚家族基因的PCR产物做DNA克隆， 切取目的基因片段， 回收PCR产物， 与pGEM Teasy 载体连接。将重组质粒转入细菌JM109， 氨苄青霉素和Xgal 蓝白斑法筛选阳性菌落， 挑取15个单克隆白色菌落于10 μL H2O中 94℃加热10 min以裂解菌体后， 按第2轮PCR体系进行PCR反应， PCR经电泳鉴定后提取重组质粒进行测序， 测序引物为down3。

1.2.5 序列对比 根据文献报道的标准序列号， 应用Vector NTI 软件的AlignX组件以及Virusblast软件， 将本实验所测的TCRVβ编码基因序列与已知各种TCR Vβ编码基因参考序列进行比对。

2 结果

2.1 RTPCR扩增TCRβ链编码基因 经反转录和用8组简并上游引物和下游引物介导二轮PCR扩增后， Jurkat细胞样本只有在含Vβ8亚家族引物的4B组扩增到了目的条带， 测序结果与文献报导一致， 为Vβ8; CD8 T细胞在分选后纯度为95.9%， 样本在8组中均扩增出目的条带（图2B）; 用各种单一引物进行第2轮PCR反应时所有亚家族引物均可获得扩增条带， 图2B显示了以第1组上游简并引物介导的第1轮PCR产物为模板， 第2轮中采用同组5种单一上游引物扩增的结果。βactin和Cβ编码基因经一轮PCR扩增即可获得目的条带（图片未显示）。图2A显示用含Vβ8亚家族引物的第4组简并PCR引物， 分别以1 000个、 100个、 10个Jurkat细胞提取RNA的为模板， 经巢式RTPCR扩增的结果。

2.2 基因克隆和序列分析 Vβ扩增产物经与Teasy载体连接后转化感受态受体菌， 经含氨苄青霉素、 Xgal和IPTG的平板筛选后， 随机挑出了15个克隆提取质粒进行菌落PCR和DNA序列分析。本研究的15个克隆序列与Vβ14参考序列的同源性均达到75%以上， 15个克隆的序列差异均主要在CDR3高变区， 保守区的序列均一致。

3 讨论

T细胞的特异性由TCR决定， 参与特异性细胞免疫应答的CD8 T细胞主要是TCRα/T细胞 ， 其多样性和特异性产生于TCR受体α和 链基因的VDJ重排。TCRα、 链的V区约含102～109个氨基酸， 由二个半胱氨酸形成链内二硫键， 组成约含50～60氨基酸残基的环肽， 是特异性识别外来抗原的结构域［8］。根据核苷酸序列同源性 75%的原则， α链分属32个亚家族， 链分属26个亚家族， 一些亚家族内还包括若干个分家族。TCRα 的种类约有107， 是从大约108个不同的TCRα异质双聚体天然前体池（pool of naive precursors）中选择出来的， 估计其代表的多样性>1018［3， 9］。正常情况下PBMC应能表达所有Vβ亚家族基因， 不同的Vβ亚家族T细胞所执行的功能有所不同， 在一些疾病中CD8 T细胞中的细胞毒T淋巴细胞（CTL）TCR Vβ表达谱可发生特有改变。我们曾对中国人群流行的乙型肝炎病毒（HBV）特异性CTL的表位特点进行了分析［10］， 如能进一步解析特异性CTL的TCR取用特点， 对阐明机体抗HBV特异性免疫应答机制将有重要意义， 同时克隆特异性CTL的优势TCR编码基因可用于抗HBV感染的基因治疗研究。

本研究拟在建立一种高效灵敏的TCR Vβ编码基因扩增方法。有报道采用24条引物介导RTPCR反应扩增24个TCR Vβ亚家族编码基因， 观察到TCR Vβ亚家族表达的不均衡性。但该方法要求用于扩增的细胞模板量较高， 扩增的各种Vβ亚家族编码基因片段大小差异较大， 且有少数TCR Vβ亚家族编码基因未能检出［11， 12］。为了能更广泛地覆盖Vβ各亚家族/分家族基因的差异序列， 同时获得长片段的各个Vβ亚家族编码基因， 我们设计了两组上游引物分别为34条外引物和37条内引物， 采用巢式RTPCR技术， 保障了方法的序列兼容性和敏感性; 采用8组简并上游引物（每组含45个引物）进行反应， 再根据情况在第2轮PCR中采用单一引物， 有利于提高工作效率。研究结果表明所建立的方法可有效扩增各个Vβ亚家族编码基因， 最少可从10个Jurkat细胞提取的RNA中扩增成功。我们设计的PCR引物有很好的亚家族特异性， 但分家族特异性不高， 难以完全区分各分家族特异性， 因此即使用单一引物扩增到的Vβ编码基因在序列上仍有较大异质性， 用PCR产物直接测序效果较差， 但通过克隆测序可以准确分析优势表达基因的序列。在分析的Vβ14亚家族基因的PCR产物克隆基因中， 15个克隆序列与Vβ14亚家族基因的同源性均大于75%， 序列差异主要在CDR3高变区。我们下一步将建立高效敏感的扩增TCR Vα方法， 并通过综合分析抗原特异性CTL TCR的α链和β链的表达谱特点， 深入了解疾病状态下的细胞免疫应答机制。

参考文献

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联系人意见范文第5篇

姓 名

性 别

学 号

学 院

专业名称

实习单位

单位地址

联系人

电话

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位

对

学

生

实

习

的

评

价

评价人： （单位盖章）

年 月 日

实 习 证 明

兹有________ 学校__________学院______专业_________ 同学于 _________年___月____日至_____年 ______月 日在 实习。

该同学的实习职位是 _____________。

该学生在实习期间工作认真，脚踏实地，虚心请教并且努力掌握工作技能，善于思考,能够举一反三。善解人意，积极配合领导及同事的工作，虚心听取他人意见。在时间紧迫的情况下，能够加时加班完成任务。能够将在学校所学的知识灵活应用到具体的工作中去，保质保量完成工作任务。同时，本公司将要求该学生严格遵守我公司的各项规章制度，实习时间，服从实习安排，完成实习任务，尊敬实习单位人员，并能与公司同事和睦相处。与其一同合作的员工都对该学生的表现予以肯定。

特此证明。