前言:想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗?我们特意为您整理了5篇见习论文范文,相信会为您的写作带来帮助,发现更多的写作思路和灵感。
实验诊断指临床医师根据病情选择检验项目,实验室根据医嘱对患者标本进行检验所得到的检验结果对疾病预防、治疗和预后的评价,特别是对疾病诊断的临床过程。实验诊断学应根据培养对象不同而选择适合的教学方法;教学对象是未来临床医师,教学应紧密结合临床。通过病例分析、检验项目选择,特别是检验结果分析和应用,进一步提高学生的解决临床实际问题的能力。以前的教学均以标本类型或检验方法及检验项目的介绍为教学主线,而相对于临床医学生来说在检验项目选择、检验结果与疾病关系的综合分析方面的教学内容相对欠缺。因此在教学上应该教会学生如何选择合适的检验项目来解决和判断临床问题,以及利用检验结果为临床诊断提供科学依据。所以改变传统的以标本类型及检验项目为重点的教学模式,进行以人体系统和主要脏器为主线的病例分析及实验项目的教学实践非常必要。
2实验诊断学见习课程设置
实验诊断教学课程在五年制临床医学专业一般安排在大三后半学期,学生基本完成医学基础课的学习,将要进入临床医学课的中间阶段。实验诊断对临床医学生来讲是熟悉医学检验中基本理论和临床应用方面内容,基本了解检验方法的实验原理,课程设置以尚红等主编的《实验诊断学病案与实习指导》为蓝本,根据教学要求适当取舍,教学重点是实验项目的临床应用。其目的是通过病例分析体现和落实到实验项目的选择及其应用,提高学生对疾病诊断的综合判断能力,
2.1新老实验诊断学教学见习课程设置比较
现行见习课的设置除增加病例讨论外,还增加了肝功能、肾功能、糖代谢及电解质检验等生化检验内容。血型鉴定及交叉配血课程由输血科老师讲解。将以前重点讲授的实验方法、原理转变为了解实验过程,重点在病例讨论及实验项目的选择。今后计划在课时保证的情况下,适度增加免疫学和微生物学检验的相关内容,使学生更加全面地了解实验诊断学涉及的领域。
2.2见习课教学内容
2.2.1课堂病例讨论
选择1至2例与本节实验内容相关联的病例,给出简要病史、体格检查结果,让学生模拟选择检验项目并以检验单形式提供检验结果。通过病例分析初步考虑疾病的诊断,重点为如何分析检验结果,为明确诊断还需做哪些检验项目。通过课堂病例讨论体现和落实实验诊断项目的选择、应用及临床意义。在病例讨论的基础上,告诉学生为什么选择此项检验,然后安排相关的实验操作、示教与见习,让学生了解实验过程及原理。如在血细胞形态学教学中,病例讨论选取“贫血”病例,给出简要病史、体格检查结果后,由学生模拟开具医嘱并选择检验项目。学生通常选择“血常规”、“细胞形态”等诊断贫血的实验室项目,教师则以检验单形式给出血红蛋白、细胞形态等检验结果供学生讨论。
2.2.2实验课理论教学
和以前教学方式相同,理论课仍由一位具有副高以上职称、既掌握理论知识且操作技能熟练的资深教师承担。用播放幻灯片的形式讲解实验基础理论、实验过程、临床应用等基本知识;介绍实验项目所用仪器、设备的操作,实验中的注意事项及生物安全等。如在血细胞形态学教学中,病例讨论选取“贫血”病例,以讨论细胞形态为主线,进行形态学教学,以播放幻灯片的形式展示各种细胞形态;介绍与病例相关的检验新项目,如网织红细胞血红蛋白含量及铁蛋白等,同时介绍可用于贫血鉴别诊断的检验项目等,以及各项目检测新技术、新设备等。
2.2.3实验内容
实验课由两位中级或中级以上职称教师承担。实验课教师首先准备好做实验需要的标本、试剂、器材,并完成设备调试。首先严格按实验操作规程给学生示教。在示教过程中再次简要讲解实验目的、原理等。然后指导学生完成实验,并再次强调注意生物安全。实验标本尽量选择与讨论病例实验结果一致或相近的标本,保证既有阴性标本,也有阳性标本。在指导学生完成实验时,如发现学生实验中的不当操作应及时指出、令其改正,并及时回答学生提出的问题,保证学生基本熟悉或了解常规检验项目的操作过程,能独立完成基本检验项目检测,如血细胞计数、红细胞形态分析、白细胞形态分析、黏蛋白实验等。关键是掌握检验项目的选择依据、临床意义及目的。要求学生书写实验报告,并对讨论病例进行分析,包括讨论病例的初步诊断及诊断依据、为明确诊断还需要做哪些其他检查、应与哪些疾病进行鉴别诊断等。学生交回实验报告及病例分析后,由教师对典型病例分析进行点评。示教对于一些高、难、精的实验及贵重仪器,教师需给学生示教,使学生进一步了解检验医学的现状和发展趋势,了解检验设备操作过程和测试原理,了解实验诊断的质量保证体系及影响实验诊断的相关因素;告知学生标本采集和送检的重要性及注意事项,强调特殊标本(如脑脊液)的采集适应证和禁忌证;了解标本分析前、中、后整个检验过程,使学生理论结合实践,将所学理论知识应用到临床工作中。
3转变教学模式的意义
[关键词]新建地方本科院校 导师制 毕业论文 梯级培养
[作者简介]李强(1973- ),男,重庆人,重庆文理学院材料与化工学院,副教授,博士,主要从事环境科学专业科研和教学工作。(重庆 402160)
[基金项目]本文系2008年重庆市市级特色专业建设重点项目“环境科学特色专业建设”(项目编号:200825)、2009年重庆文理学院人才培养模式创新实验区项目“环境科学应用型人才培养模式创新实验区”(项目编号:200904)、2010年重庆文理学院特色项目“环境科学专业毕业论文(设计)培养体系研究”(项目编号:201029)的阶段性研究成果。
[中图分类号]G643.8 [文献标识码]A [文章编号]1004-3985(2013)26-0054-02
本科毕业论文(设计)(以下简称“毕业论文”)既是高等院校实现人才培养目标的综合性实践教学环节,也是综合性创新实践活动,是将所学知识进行综合运用的具体实践过程,是专业学习深化与升华的重要过程,是综合素质与实践能力全面提升的阶段①。近年来,高等院校,特别是新建地方本科院校本科毕业论文的必要性受到较多的质疑,甚至有部分教育专家认为本科毕业论文弄虚作假和形式主义倾向严重,与其让掺水论文泛滥,不如取消②。但是,这种观念与我国人才培养的规划和要求存在显著的矛盾。实际上,本科毕业论文教学不仅是大学教学的最终环节,还是大学四年所学知识的综合运用阶段,这一特质决定了该教学环节是培养创新型人才的关键环节③。在建设创新型国家的背景下,重新审视高等院校,特别是新建地方本科院校本科毕业论文教学的现状,构建科学、合理的本科毕业论文培养体系,不仅涉及对教育战略目标的认识,而且还关系高等教育人才培养模式的改革。
一、课程支撑体系的构建
一般来说,毕业论文可分为选题、实验、结果分析和论文撰写四个阶段,具体包括文献查阅、开题、实验设计、实验实施、论文撰写等多个环节。这其中就检验考查了学生的各种综合能力,如分析与解决问题的能力、分析和总结归纳能力、创造性思维能力以及资料收集整理、论文写作、答辩技巧等。虽然本科毕业论文的实质是对本科教育质量的考核和评价,但是并不意味着本科毕业论文能够独立承担系统培养学生研究能力、实践能力、创新能力和综合素质的任务,实际上本科教育阶段的各门课程对培养学生综合素质与能力都是必要的④。因此,应跳出现有本科毕业论文的阶段局限,将培养学生相关能力和综合素质的任务贯穿于本科教育的全过程,适当调整课程设置。一方面,开设有助于学生从事科学研究和社会实践的基础性、工具性课程,如文献检索、调查方法、实验设计、数据分析方法等;另一方面,通过课程论文、学年论文等强化论文写作实训环节教学,构建相应的课程体系,为本科毕业论文工作提供基础性支撑,从而进一步改进课堂教学模式,以能力培养为核心组织教学,为本科毕业论文工作提供环境与思维保障。
二、运行体系的构建
1.建立学术导师制。目前,多数新建地方本科院校实行了选课导师制,着重于帮助学生制订适合自身特点和发展的学习计划⑤,但是未涉及学生的专业学术指导。在毕业论文培养体系构建上,可以借鉴研究生导师制,融合选课导师制、科研导师制和全程导师制的优点,建立本科学术导师制。首先,学院根据教师的职称、科研经历、项目和论文的状况,选择科研能力较强的教师作为指导教师。其次,每年定期安排指导教师为学生作学术报告,以便于学生了解指导教师的研究方向和水平,选择自己感兴趣的指导教师。最后,在学生完成基础课程学习,了解本专业特点与培养目标后,根据自愿和调配相结合的原则,于大一下学期组织学生选择指导教师。大一阶段,指导教师主要指导学生学习方法和阅读书籍,见习创新实践活动,做好人生规划,并结合学年论文的撰写,熟悉文献查阅。大二阶段,在高年级学生的带领下参与教师或学生创新实践课题,进一步熟悉研究方向,通过课程论文和学年论文的撰写,掌握文献综述的撰写方法,明确自己的兴趣爱好,选择适宜的研究内容,申报学生科研课题和创新课题。大三阶段,完成教师创新实践课题的部分研究内容或学生创新实践课题,结合课程论文和学年论文的撰写,完成毕业论文综述部分或研究论文的撰写,参与各种科技竞赛活动。大四阶段,完成毕业论文的撰写和答辩。
2.构建梯级培养机制。多数新建地方本科院校没有硕士学位点,教师没有指导硕士研究生的任务。但是,可以借鉴研究生教育中的助教理念,形成以指导教师为龙头,高年级学生为骨干,低年级学生为辅助的团队,采用以老带新方式,实行梯级培养,使学生能尽快融入导师的科研工作中,经过系统、长期的科学研究训练,培养学生踏实严谨的科研态度与精神,让学生提前进入毕业论文教学环节,为高质量完成毕业论文奠定基础。
3.建立有效的沟通联系制度。本科阶段,学生初次接触整体性和实践性较强的毕业论文,需要一定时间适应,有效的沟通联系制度有利于发挥指导教师的导向作用。首先,应建立指导教师与学生讨论的例会制度,坚持每周至少一次例会,发挥学生的主动能动性,提高学生的自主创新能力,以形成良好的学习氛围和科研氛围。其次,利用现代通信和教育技术手段,构建学生与指导教师的交流平台。除了传统的面对面的指导方式外,也可以通过电话、短信、电子邮件和QQ等通信工具进行交流。目前,部分学校也开始尝试建立多媒体联系平台,以进一步克服师生见面机会少的困局。
4.建立科技创新竞赛制度。为了更好地提升学生的创新实践活动热情,营造创新实践氛围,首先,需要建立校级论文(设计)创新竞赛制度,每年组织二年级至四年级学生开展科技创新竞赛活动,激发学生参与科研实践的热情和兴趣,促使学生尽早接触科研实践程序和方法,及早打好论文基础,早定研究方向,减轻对论文的畏惧心理,防止毕业论文东拼西凑。其次,通过校级竞赛活动,为更高层次的学生科技竞赛活动提供人才和项目储备,以利于学生的分层培养。
三、质量控制体系的构建
1.完善毕业论文管理制度。毕业论文工作是一项系统教学工作,必须纳入科学化、规范化管理,才能取得持久的效果⑥。新建地方本科院校的教学管理部门应制定从选题、开题、中期检查、答辩细则、成绩评定标准等一系列规章制度,明确责任,理顺关系,使管理科学化、规范化;特别是要建立选题限制制度、毕业论文抽查外审制度、匿名答辩和回避答辩制度,完善政府主导下的本科毕业论文复检制度。
2.根据能力培养目标,改革考核方式。相对于老牌院校的精英教育来说,新建本科院校更趋向于大众教育。因此,新建本科院校学生的毕业论文不应固守一定的模式,将其作为评价学生创新能力和学术水平的唯一手段。实际上,虽然经过科研团队培训的学生能力均会有所提升,但是多数学生并不适于从事高水平的科研,特别是少数学生动手能力很差,因此应及时根据学生的发展前景和就业意愿调整培养目标,适当提高课程论文和学年论文的撰写要求,强化这部分学生综合能力的培养,可以将高水平的文献综述作为评价学生创新能力和学术水平的另一手段。此外,在公开刊物发表学术论文和市级以上科技竞赛获奖的学生也无须撰写毕业论文。这样不仅可以分流部分学生,减轻教师指导毕业论文的压力,将更多的精力用于需要的学生,也可激励学生主动规划自己的学习、科研、升学和就业,力争在大学四年及时完成学业,获得更多的升学或就业机会。
3.完善毕业论文质量跟踪机制。毕业论文程序性很强,是一个循序渐进的过程,建立毕业论文质量跟踪机制,在各环节过程实行有效监控,从指导教师资格认定―论文选题―论文写作过程监控―评分标准确定―结果评价―总结分析等流程进行全程跟踪管理⑦。具体实施包含自检和抽检两种方式。自检为指导教师对学生毕业论文的检查和教研室对本系学生毕业论文情况的检查了解,抽检可以由学校、学院组织毕业论文质量监控机构成员分阶段进行检查等。全程跟踪管理应由学院主抓,其主要任务是根据学校有关规定,制定和完善切合专业实际的毕业论文组织管理规章制度,并进行科学分工、跟踪管理。
4.构建奖惩制度。为激励师生将主要精力投入毕业论文,应制定大学优秀毕业论文评选实施办法及优秀指导教师奖励办法,建立毕业论文评优制度。同时,建立导师考核制度。考核以导师自评、学生评议、学院考评相结合的方式进行。根据各年级学生的培养目标,综合学生的毕业论文、文献综述、课程论文、学年论文和学术论文完成质量、科技竞赛获奖情况,以及毕业前学生对导师的评价,建立指导教师考核标准,考核导师的指导成效,作为教师年度考核、评奖评优和津贴发放依据,与其岗位绩效挂钩,形成奖惩制度,促进教师加强过程管理。
四、条件保障体系的构建
1.时间保障。对于新建地方本科院校来说,不仅存在毕业论文与就业、考研复试冲突的问题,也存在毕业实习时间短、实习单位不愿接收的问题。结合前述的毕业论文梯级培养机制和考核方式改革,新建本科院校可以将毕业论文完成时间从第八学期调到第七学期,并可以适当缩短后期毕业论文的完成时间,使学生能安心完成毕业论文和实习,保证毕业论文和实习的质量。
2.师资保障。目前,新建地方本科院校不仅面临指导教师总量不足的问题,也面临教师队伍结构不合理――“双能型”教师严重短缺的问题。因此,需要加大教师国内国外的培训和引进力度。特别是应用型学科专业,应采用重点引进、专业教师顶岗工作、教师专业技能培训、聘请企业技术骨干等办法大力加强“双能型”教师队伍建设,并且需要建立“双能型”教师培训激励机制。
3.实验条件保障。毕业论文所需经费的投入,是确保毕业论文质量的必备条件。因此,新建地方本科院校一方面应切实重视毕业论文的重要性,加大经费投入,保证毕业论文所需的基本实验设备,以确保学生综合能力和科研实践能力的提高;另一方面应寻求国家、地方、企业和科研院所的支持,探索院院(科研院所)、院企、院地联合共建模式,积极利用各种渠道(如中央和地方共建、各类发展援助项目等)和资源,完善教学和科研实验平台的建设。此外,学校也可联合学院、教师,采用经费配比的方式,引导学院、教师将科研运行或配套经费用于实验条件的改善,共同参与科研实践平台建设。
[注释]
①韩润林,张龙龙.浅谈新建本科院校化工毕业设计改革与实践[J].广州化工,2012,40(3):133.
②④徐建邦.对本科毕业论文工作的几点思考[J].东北财经大学学报,2007,52(4):85,85.
③张庆华.当前我国本科毕业论文的质量现状及其对策分析――以国家中长期教育改革和发展规划纲要的实施为背景[J].长春工业大学学报:高教研究版,2011,32(3):85.
⑤唐丹,肖毅,郭莉.提高地方高校本科毕业设计(论文)质量策略研究[J].教育与教学研究, 2011,25(11):66.
一、“企业文化”之理解
何为“企业文化”,我们理解为用以规范企业人多数情况下行为的一个强有力的规则体系。说起企业文化,就要从企业文化系统的主要组成说起,即理念识别系统(MIS)、行为识别系统(BIS)、视觉识别系统(VIS)三个部份。l、理念识别系统(MIS)。这一系统,是企业经营管理的指导思想,是企业文化的灵魂,强调的是“共享的价值观”(Sharedvalue),这也就是企业文化的核心,尤其是指企业精神;2、行为识别系统(BIS)。包括:组织结构、企业规章制度、作业流程、公关策略、员工培训、团队修炼等等,是一套完整的企业行为识别和活动规范系统;3、视觉识别系统(VIS),视觉识别系统是指只要是看得见的带有企业标志和文字的,都整齐统一,决不走样,并制订了一套严格的视觉形象规范制度。将企业的经营理念、文化精神(MI)透过企业对内、对外的行为话动(BI)以及系统化的视觉识别设计(VI)传达给社会大众,具有塑造、完善和提升企业形象,强化市场竞争能力的功能,是现代企业经营发展必备的利器。现代企业文化建设是一项大的系统工程,准确的说,它是中国电信企业观念更新、体制变革、战略整合等最重要的支持。
二、中国电信建设企业文化需要解决的问题
中国电信推行企业文化建设首先要解决的问题是:为什么要建设企业文化。需要肯定的是建设企业文化并不是思想政治工作,而是带有明确的功利目的性。作为一个企业,必须最大减少其内部的管理成本,而且这也决定着企业的竞争优势。企业文化作为一种资源,通过塑造具有共同理想信念、明确的价值指向、高尚道德境界的企业工作群体,可以换得管理成本的降低。简单地说,就是某个企业或集团的全体员工在共同的价值观的指导下,遵守共同的行为规则,按照各自的职责开展工作,为了实现一个共同的目标。很多企业的成功,都可充分说明这一点。比如,日本企业“内协外争、亲和一致”的“家”意识和氛围,即是生动的体现。可以试想,在一个人心涣散、任人唯亲、“窝里斗”的环境中,必然导致企业最终的崩溃。不管是资本主义还是社会主义,所有的企业文化的最终目的就是通过塑造某种文化,使自己能够获取更高的市场价值。比如在许多国际先进企业文化中表面是一种文化的渗透,一种文明的传播,实际它所流露的魅力就是让你无法拒绝为它的产品或服务付出高额的费用,这就是为什么明明是国内企业加工的产品,标上国际著名商标后,就身价百倍的原因。这就是企业文化。也就是企业文化最终的功利性。
其次是中国电信要建设什么样的企业文化?是保守传统的,还是创新进取的;是面向国内的,还是放眼全球的;是追求利益的最大化,还是创造优质服务、追求利益的合理化;是自由式的,还是科学、规范的等等。不解决这些认识上的问题,中国电信是很难以建设登大雅之堂的具有国际水准的企业文化的。
再次要解决中国电信企业文化应由谁为主导去进行建设的问题。对于企业文化,我一直认为,这个问题不是某个地市级的电信企业就能从根本上解决的;我坚持认为,中国电信要大规模搞企业文化建设,就必须是从上而下的,而非自下而上的。因为地市级、甚至于省级电信企业都没有如此经济实力、魄力,更没有长远的全球政治、经济战略,所以不可能筹划真正达到国际水准的企业文化建设,就算搞好了只是某个地市或省市电信企业的特色文化,而绝非规范化、系统的中国电信企业文化,反而给中国电信的整体文化建设带来不必要的影响和内耗。比如以前“北京电信”的企业视觉识别形象,虽然有特色,但很让人不理解,我一度以为这是一家区别于各省市区中国电信集团下属企业的独立的一家电信公司。当然,企业文化建设绝不是一个下面各级电信企业被动接受的过程,而是上级与下级双方互动的一种进行状态。
起码解决了以上三个问题,中国电信企业文化才可以进入实质性操作阶段。
如何建设中国电信企业文化
中国电信企业文化应该由中国电信集团公司(下面简称“总司”)统一筹划部署,下发具有全面指导性的企业文化建设方案,这个方案自然也包括了三个主要方面,即理念识别系统、行为识别系统和视觉识别系统。首先从理念系统说起。这是建立中国电信企业文化的重中之重,这个系统的建立直接决定了中国电信企业文化成功与否。这是统筹全国电信员工的核心价值的体现,是深入铭刻在每一个电信员工思想的信念,是中国电信的企业之魂。对于这个问题,本人自觉才疏学浅,不敢在此妄言。但这个系统起码要经得起历史的考验和时代的变迁。其次是行为识别系统。这才是大量的、具体的,甚至是极其繁琐的工作,但也是支撑中国电信企业文化大厦的基础,是实实在在的东西。本人认为,由于中国电信是自上而下实行垂直管理,省一级电信公司基本是延袭“总司”的机构及其职能,对本省区内电信企业进行相类似的垂直管理,而地市分公司在机构及职能上很大程度也是类似延袭,所以从机构和职能来看,这是自上而下的一条线,这在很大程度上给中国电信规范各种职能和行为提供了直接的方便。所以建立统一科学的行为规范系统是必要的,如《中国电信集团机构职能规范手册》、《岗位职能规范》、《中国电信企业员工行为规范手册》以及外勤、对外服务、员工培训等等规范文本。这些“手册”从总经理职能,到普通员工的每天上班举手抬足,都有十分明确的界定。有了这些规范,才能保证全国、全球的中国电信员工都是统一的、科学的行为。如果“总司”能解决这些规范问题,对于整体提高中国电信集团的“行为素质”将起到决定性的作用。第三就是视觉识别系统。这一系统已经具有一定基础,但仍欠完善和规范,还需要在广度和深度上拓展,现在中国电信的很多新业务都缺乏统一科学的形象识别体系,比如ISDN业务、800业务等,不仅各地宣传召径不统一,而且缺乏通俗易懂的品牌策划。所以要制订包括《中国电信企业形象识别系统手册》、《中国电信集团下属企业形象识别手册》、《中国电信集团产品品牌识别系统手册》等等规范文本都需要不厌其繁地落实.到此,中国电信集团企业文化建设才初具雏形。在此指导基础上,各省区市结合本地域文化、民族风俗等具体情况,进行进一步细化和实际操作。到了地市一级也必须有常规性的企业文化建设中心,有员工日常培训基地,有电信发展历程展厅等等,逐渐才能形威,既鲜明生动又统一和谐的中国电信企业文化氛围。
加强法律监督能力建设,必须正确处理好检察机关法律监督工作中的事后监督与主动监督的关系。对于法律赋予检察机关的法律监督职责和权力,检察机关应当依法、全面、主动、充分地履行。
一、相对于已经发生的犯罪行为、诉讼活动中已经发生的违法情况,以及已经作出的或生效的判决和裁定,检察机关的法律监督是一种事后监督。
从现行法律赋予检察机关的职权范围看,目前我国检察机关的法律监督职权不是笼统地对任何国家机关或公民的活动进行监督,而只能是在法律规定的范围内对特定的案件或者事件进行监督。换言之,检察机关的法律监督主要是针对具体的案件和事件,在法律授权的范围内,按照法律规定的程序,对已经发生的具体违法行为进行监督,并且检察机关的监督必须遵守一定的法律规则。
从检察机关法律监督职权的内容看,检察机关的法律监督主要是针对已经发生的犯罪行为、诉讼活动中已经发生的违法情况,以及已经作出的或者生效的判决和裁定。相对于此,检察机关的法律监督主要是一种对于具体案件和事件的事后监督。只有当法律规定应当由检察机关实施法律监督的情形出现之后,检察机关才能启动法律监督程序,行使法律监督职权。而且,检察机关的法律监督活动,主要集中在司法领域,一般情况下检察机关不能也不应当直接纠正违法行为或者作出最终裁决,而主要表现为程序启动权和请求建议权。
如果换一个视角,将检察机关法律监督活动置于整个司法过程中考察,检察机关的法律监督活动就不仅限于事后监督,而是根据具体法律监督活动内容的不同,既有事后监督,也有事中监督和事前监督。例如,检察机关的职务犯罪侦查活动,虽然是在国家工作人员实施的与其职权相关的犯罪之后进行,但是,相对于整个刑事诉讼程序而言,检察机关对职务犯罪的立案和侦查,又是处于刑事诉讼程序的起始和基础阶段,是一种事前或者事中的活动。再如,检察机关的批准逮捕及审查、提起公诉,都是刑事诉讼程序必不可少的组成部分,虽然相对于犯罪人的犯罪及公安机关的侦查活动,处于事后的地位,但是在刑事诉讼程序中却处于事中地位。所以,判断检察机关的法律监督活动是否属于事后监督,关键在于“参照物”的选取。相对于法律监督的事由,可以说法律监督是一种事后监督,相对于整个司法程序或者司法活动,则法律监督既有事后的,也有事前和事中的监督。
二、在法律监督中应当发挥主观能动性,积极、主动监督,充分行使法律授予检察机关的职权。
事后监督与主动监督之间并不矛盾。这是因为,事后监督与主动监督并非是非此即彼的相对关系。前者是从方式和时间上对法律监督进行的界定,与之相对的,是事前监督、事中监督;后者则是从工作态度和积极性上对法律监督进行的界定,与之相对的,是被动监督和消极监督。所以,事后监督并不等于被动监督,主动监督也并非仅限于事前监督、事中监督。
从检察理论的角度看,事后监督与主动监督更是相辅相成、并行不悖的。与人民法院“不告不理”的审判权相比,我国检察机关的法律监督职权明显具有主动性。这种主动性在检察机关履行职务犯罪侦查、公诉、诉讼监督等职能方面都有所体现。检察机关作为追诉机关,其职责就是主动运用检察权发现和证明犯罪行为,代表国家追诉犯罪,并且通过检察业务工作,积极参与社会治安综合治理,预防和遏制犯罪。所以,法律监督虽然相对于监督的事由而言,是事后监督,但又是一种主动查究的法律行为。
从国家权力配置的角度看,法律监督作为检察机关的法定职责,是国家通过法律授予人民检察院的权力,具有公权力的性质,公权力与私权利相比,其特点之一就在于行使公权力的机关和人员不可放弃行使公权力,亦不可消极、被动行使公权力,否则即有失职、渎职、之嫌。作为国家权力的分支和组成部分,对于检察机关来说,法律监督权既是权力,也是职责。职责所系,不容消极、被动地进行法律监督工作。
毋庸讳言,当前检察机关的法律监督工作存在着监督不力的情况,有的地方的检察机关仍存在不敢监督、不愿监督、不善监督的问题。造成这一问题的原因是多方面的。一方面,制度安排和制度设计上有缺陷。我国宪法及其他法律明确规定了检察机关对于某些特定的事项有权进行法律监督,但没有规定人民检察院对具体事项进行法律监督的具体制度和程序以及被监督者不接受监督应当承担的法律后果,致使有关法律监督的一些原则和规范落空。检察机关的职权与法律监督的使命之间存在着一定的距离,这是当前检察改革中亟待解决的重大课题。另一方面,在检察理论上,关于法律监督的范围、手段和程序仍然存在一些不确定因素,远未达成共识,也有待于学界的研究。
因此,必须特别强调检察机关在日常法律监督工作中,要充分发挥主观能动性,积极、主动开展法律监督工作,对于法律授予检察机关的法律监督职责和权力,检察机关应当依法、全面、主动、充分地履行。首先,实施法律监督是宪法和法律赋予人民检察院的神圣职责。开展法律监督工作,履行法律监督职责,是人民检察院的立身之本。只有积极主动地进行法律监督,才能真正地完成法律赋予检察机关的任务和职责。其次,当前,人民群众迫切企盼司法公正,企盼惩治腐败,企盼检察机关介入重大侵权案件、重大违法案件、重大安全事故案件的调查,以惩恶扬善,伸张正义。这一切都需要检察机关主动地履行法律监督职责。再次,只有检察机关在检察实践中,依法、积极、主动地进行法律监督,不断积累监督经验,总结教训,才能提高自身的法律监督能力,并且为检察改革和理论研究提供生动的素材和源泉,以自身的行动促进检察改革的发展,促进检察机关法律监督程序、手段的完善,促进法律监督外部环境的改善。
三、加强法律监督主动性的主要着力点。
加强法律监督的主动性,既是一个工作态度问题,也是一个工作策略和工作措施问题。当前,应当注意以下几点:
一要做到依法监督。检察机关进行法律监督,应当严格按照法律规定的检察机关的职权、程序和规则对已然发生的案件或者事实开展监督工作。强调法律监督的主动性,并不意味着检察机关的法律监督工作可以超越法律授权的范围进行。
二要做到充分监督。检察机关进行法律监督,应当充分运用现行法律赋予检察机关法律监督的职权,按照法律规定的职权和程序,理直气壮地开展法律监督工作。
贴壁细胞需待细胞贴壁后,再收集各时间点细胞进行检测。收集各个时间点的细胞(0h、24h、48h、72h)加入CCK-8溶液或cellTi-ter96AQ单溶液细胞增殖检测试剂(Promega,Cat.No.G3582),比例为1/10。即100μl培养液加入10μl检测液。在孵育4h后,酶标仪读板,MTS检测读取OD490数据,CCK-8检测读取OD450数据。流式细胞仪检测细胞周期:细胞转染后72h后每样收集1×106细胞,细胞固定,离心收集细胞,弃上清,用预冷PBS洗细胞两次,加入预冷70%乙醇,于4℃固定过夜,或-20℃长期固定。细胞染色:离心收集细胞,以1ml的PBS洗细胞一次,加入500μlPBS含50μg/ml溴化丙锭(PI),100μg/mlRNaseA,0.2%TritonX-100,4℃避光孵育30min。流式分析:以标准程序用流式细胞仪检测,一般计数2~3万个细胞,结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。
2、流式细胞仪检测细胞凋亡
细胞转染后72h后每样收集1×106细胞,细胞固定:离心收集细胞,弃上清,用预冷PBS洗细胞两次,加入预冷70%乙醇,于4℃固定过夜,或-20℃长期固定。将0.5ml细胞悬液从细胞培养板中(5×105个细胞)转移到一个干净的离心管内。加入1.25μlAnnexinV-FITC。室温(18~24°C)避光反应15min。室温1000r/min离心5min,去除上清。将细胞用0.5ml预冷的1×结合缓冲液轻轻重悬。加入10μlPropidiumIodide。将样本放置在冰上避光保存。立即用流式细胞仪检测分析。
3、Westernblotting检测
CD14蛋白表达:在细胞中加入RNA裂解液提取总蛋白,BCA法定量蛋白。将提取好样品的蛋白进行SDS-PAGE,电泳结束后电转移至PVDF膜上,5%脱脂奶粉溶液室温封闭1h。加入合适的一抗稀释浓度4℃温育过夜(CD14按1∶500稀释,GAPDH按1∶1000稀释),加入1∶4000倍稀释的二抗,37℃孵育1h。温育结束后,ECL底物发光法进行曝光。洗涤PVDF膜,剥脱后加入1∶10000内参抗体,4℃温育过夜,曝光成像。Real-timePCR检测TNF-α、IL-8基因表达:收集细胞,用TRIzol法提取各细胞总RNA,采用cDNA第一链合成试剂盒反转录成cDNA。按照引物设计原则设计PCR引物,TNF-α、IL-8的上、下游引物序列如表1所示。
4、统计学分析
用SPSS11.5软件进行数据处理与分析。实验数据以x±s表示。One-wayAnalysisofVariance(One-wayANOVA)进行各组间方差分析,方差齐时用LSD法,方差不齐时用Tambane’sT2法,P<0.05为差异有统计学意义。
5、结果
5.1感染细胞最佳MOI的测定
MTT法检测慢病毒转染SGC-7901后细胞增殖转染后24h,正常组细胞增殖率为218.18%,阴性对照组为216.27%,CD14shRNA组为211.63%,各组间相比,差异无统计学意义(P>0.05);转染后48h、72h正常组细胞增殖率为427.49%、479.22%,阴性对照组为417.84%、473.37%,CD14shRNA组为345.54%、362.64%,经比较,CD14沉默后细胞增殖率下降(P<0.05)。流式细胞仪检测慢病毒转染SGC-7901后细胞凋亡CD14shRNA组细胞早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡率均高于正常组、阴性对照组,经比较,差异有统计学意义(P<0.05,见图4)。流式细胞仪检测慢病毒转染SGC-7901后细胞周期结果显示,CD14shRNA组细胞G1期42.57%、S期38.65%、G2期13.22%;正常组细胞G1期35.91%、S期52.60%、G2期11.49%;阴性对照组细胞G1期36.78%、S期51.49%、G2期13.67%,经比较,差异有统计学意义(P<0.05)。由此推断,CD14沉默后,主要影响细胞S期,干扰细胞合成。
5.5Westernblotting检测慢病毒载体转染
SGC-7901细胞后CD14蛋白表达Westernblotting检测结果显示,在转染胃癌细胞后,CD14shRNA慢病毒载体组细胞CD14蛋白表达相对于正常组及阴性对照组明显减少,从灰度值分析显示看出,CD14shRNA慢病毒组灰度值(0.01)远远小于正常组(1.0)及阴性对照组(0.83),正常组及阴性对照组的灰度值基本相当,由此推断CD14shRNA慢病毒载体转染胃癌细胞SGC7901后使CD14蛋白的表达量降低,同样以WB的灰度值为纵坐标作图也反映了这样的结果(见图5)。注:RelRatio:相对比。图5CD14Westernblotting检测Fig5CD14WesternblottingdetectionReal-timePCR检测慢病毒载体转染SGC-7901细胞后TNF-α、IL-8表达结果显示,CD14shRNA转染胃癌细胞后,TNF-α、IL-8mRNA表达较正常组、阴性对照组呈下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。由此推断,CD14沉默后使TNF-α、IL-8表达下降(见表2)。
6讨论