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按照中心《安全管理办法》的规定和要求,确保全体员工人身安全和单位财产不受损失,结合客服中心的实际情况,特制订以下消防管理制度。
一、消防安全宣传教育、培训制度
1、客服中心要制定对各科室消防安全责任人、消防安全管理人、专(兼)职消防员和自动消防设施操作人员及员工的年度消防安全培训计划并组织实施。
2、各科室应积极参加消防安全宣传活动,要通过多种形式开展经常性的消防安全宣传教育和培训,对员工应当至少每年进行不少于二次消防安全培训。宣传教育和培训内容须包括:
(一)消防法规、消防安全制度和保障消防安全的操作规程;
(二)本部门、本岗位的火灾危险性和防火措施;
(三)有关自动消防设施的性能、操作方法以及各类灭火器材的使用方法;
(四)报火警、扑救初起火灾以及逃生自救的知识和技能。
3、下列人员须接受消防安全专业培训:
(一)消防安全责任人;
(二)消防安全管理人;
(三)专(兼)职消防员;
(四)自动消防系统的操作人员,消防控制室的值班、操作人员(应持证上岗);
(五)易燃、易爆危险物品从业人员;
(六)电工、库工、焊工等具有火灾危险性的岗位人员;
(七)新上岗和进入新岗位的员工;
(八)进入中心的外来工作人员;
(九)火灾事故单位的相关责任人;
(十)其他应当接受消防培训的人员。
4、每年以创办消防知识宣传栏、开展知识竞赛等多种形式,提高本部门员工的消防安全意识。
5、定期组织学习消防法规和各项规章制度,做到依法治火。
6、针对岗位特点进行消防安全教育培训。
7、对消防设施维护保养和使用人员应进行实地演示和培训。
8、对新员工进行岗前消防培训,经考试合格后方可上岗。
二、防火巡查、检查制度
(一)岗位防火巡查制度
1、落实逐级消防安全责任制和岗位消防安全责任制,落实巡查检查制度。
2、消防工作归口管理职能部门每日对公司进行防火巡查。每月对单位进行一次防火检查并复查追踪改善。
3、检查中发现火灾隐患,检查人员应填写防火检查记录,并按照规定,要求有关人员在记录上签名。
4、检查科室应将检查情况及时通知受检部门,部门负责人应每日消防安全检查情况通知,若发现本单位存在火灾隐患,应及时整改。
5、对检查中发现的火灾隐患未按规定时间及时整改的,根据奖惩制度给予处罚。
(二)兼职消防员防火检查制度
1、兼职消防队主要由消防安保人员组成,统一由消防归口管理职能部门负责管理。
2、消防归口管理职能部门对兼职消防队员每季度进行一次培训。
3、消防归口管理职能部门每半年组织兼职消防队员进行一次灭火疏散演练。
4、兼职消防队员要服从消防归口管理职能部门的统一调度、指挥,根据分工各司其职、各负其责。
5、根据人员变化情况对兼职消防队员及时进行调整、补充。
6、培训主要内容包括:
(1) 防火、灭火常识,消防器材的性能及适用范围;
(2) 消防设施、器材的操作及使用方法;
(3) 火灾扑救、组织人员疏散及逃生方法;
(4) 火灾现场的保护。
(三)安全疏散设施管理制度
1、单位应保持疏散通道、安全出口畅通,严禁占用疏散通道,严禁在安全出口或疏散通道上安装栅栏等影响疏散的障碍物。
2、应按规范设置符合国家规定的消防安全疏散指示标志和应急照明设施。
3、应保持防火门、消防安全疏散指示标志、应急照明、机械排烟送风、火灾事故广播等设施处于正常状态,并定期组织检查、测试、维护和保养。
4、严禁在营业或工作期间将安全出口上锁。
5、严禁在营业或工作期间将安全疏散指示标志关闭、遮挡或覆盖。
(四)消防设施、器材维护管理制度
1、消防设施日常使用管理由专职管理员负责,专职管理员每日检查消防设施的使用状况,保持设施整洁、卫生、完好。
2、消防设施及消防设备的技术性能的维修保养和定期技术检测由消防工作归口管理部门负责,设专职管理员每日按时检查了解消防设备的运行情况。查看运行记录,听取值班人员意见,发现异常及时安排维修,使设备保持完好的技术状态。
3、消防设施和消防设备定期测试:
(1)烟、温感报警系统的测试由消防工作归口管理部门负责组织实施,保安部参加,每个烟、温感探头至少每年轮测一次。
(2)消防水泵、喷淋水泵、水幕水泵每月试开泵一次,检查其是否完整好用。
(3)正压送风、防排烟系统每半年检测一次。
(4)室内消火栓、喷淋泄水测试每季度一次。
(5)其它消防设备的测试,根据不同情况决定测试时间。
4、消防器材管理:
(1)每年在冬防、夏防期间定期两次对灭火器进行普查换药。
(2)派专人管理,定期巡查消防器材,保证处于完好状态。
(3)对消防器材应经常检查,发现丢失、损坏应立即补充并上报领导。
(4)各科室的消防器材由本科室管理,并指定专人负责。
(五)火灾隐患整改制度
1、各科室对存在的火灾隐患应当及时予以消除。
2、在防火安全检查中,应对所发现的火灾隐患进行逐项登记,并将隐患情况书面下发各科室限期整改,同时要做好隐患整改情况记录。
3、在火灾隐患未消除前,各科室应当落实防范措施,确保隐患整改期间的消防安全,对确无能力解决的重大火灾隐患应当提出解决方案,及时向中心安保部消防安全责任人报告,并由中心上级主管部门或当地政府报告。
4、对公安消防机构责令限期改正的火灾隐患,应当在规定的期限内改正并写出隐患整改的复函,报送公安消防机构。
(六)办公室用电安全管理制度
为提高办公环境的安全因素,进一步加强和深化中心办公区域内的用电管理,增强员工用电规范、安全意识、节能措施,共同营造一个安全、舒适的工作和办公环境,特制订本用电安全管理规定。
1、严禁在灯具、电扇、电脑机箱、显示器等电器上悬挂、覆盖装饰品等易燃物。
2、严禁私自改拉接室内线路,绝不在办公室私拉电线。
3、严禁在办公室内、外私拉、乱接电线、私接电源插座等个人行为。
4、严禁办公区域使用自带大功率电器和不利于安全管理的电器,主要包括但不限于电水壶、微波炉、电吹风、电熨斗、电暖器等。
5、不要用湿手接触带电设备,不用湿布擦带有电的电器。不要用湿手触摸电源的开关、插头、插座等。
6、灯具、电扇、空调、饮水机等电器使用完毕后应及时关闭电源,以免长时间开机过热引起火灾。
7、为了延长电脑主机、显示器、打印机等办公设备的使用寿命,员工下班离开办公室时要关闭计算机并关闭电源开关。
8、办公区域内如发现需维修的用电设施或存在用电安全隐患等问题,必须立即停止使用,并及时上报中心安保部,严禁自行处置。
9、因违反本用电安全管理规范引起的一切责任由个人承担。
(七)易燃易爆危险物品和场所防火防爆制度
1、易燃易爆危险物品应有专用的库房,配备必要的消防器材设施,仓管人员必须由消防安全培训合格的人员担任。
2、易燃易爆危险物品应分类、分项储存。化学性质相抵触或灭火方法不同的易燃易爆化学物品,应分库存放。
3、易燃易爆危险物品入库前应经检验部门检验,出入库应进行登记。
4、库存物品应当分类、分垛储存,每垛占地面积不宜大于一百平方米,垛与垛之间不小于一米,垛与墙间距不小于零点五米,垛与梁、柱的间距不小于零点五米,主要通道的宽度不小于二米。
5、易燃易爆危险物品存取应按安全操作规程执行,仓库工作人员应坚守岗位,非工作人员不得随意入内。
6、易燃易爆场所应根据消防规范要求采取防火防爆措施并做好防火防爆设施的维护保养工作。
(八)义务消防队组织管理制度
1、义务消防员应在消防工作归口管理部门领导下开展业务学习和灭火技能训练,各项技术考核应达到规定的指标。
2、要结合对消防设施、设备、器材维护检查,有计划地对每个义务消防员进行轮训,使每个人都具有实际操作技能。
3、按照灭火和应急疏散预案每半年进行一次演练,并结合实际不断完善预案。
4、每年举行一次防火、灭火知识考核,考核优秀给予表彰。
5、不断总结经验,提高防火灭火自救能力。
(九)灭火和应急疏散预案演练制度
1、制定符合本单位实际情况的灭火和应急疏散预案。
2、组织全员学习和熟悉灭火和应急疏散预案。
3、每次组织预案演练前应精心开会部署,明确分工。
4、应按制定的预案,至少每半年进行一次演练。
5、演练结束后应召开讲评会,认真总结预案演练的情况,发现不足之处应及时修改和完善预案。
(十)消防安全重点部位管理制度
1、依据法律法规的有关规定,确定变配电室、动力站、电梯机房为消防安全重点部位。
2、消防安全重点部位的消防安全管理应明确责任部门和责任人。
3、消防安全重点部位应设置禁烟禁火等各种文字、符号的警告标志。
4、消防安全重点部位应配备相应的的灭火器材、装备和个人防护器材。
5、消防安全重点部位应制定和完善事故应急处置操作程序。
6、消防安全重点部位应每二小时进行一次防火巡查,并填写《消防安全重点部位防火巡查工作记录》;服务大厅下班后应进行收尾工作检查,并记录备案。
7、各消防安全重点部位的管理规定
(1)防火重点部位,非工作人员严禁入内。
(2)严禁吸烟、严禁明火作业、严禁存放易燃易爆物品及其它杂物。
(3)定期对电器设备、线路进行检查、维护、清扫,确保正常供电。发现问题及时解决。
(4)人员必须严格遵守操作规程,避免发生事故。
(5)各种电器设备的安装、使用和管理,必须符合供电局的规定。
(6)安装的电器设备应采取防雨、防雷等安全措施。电器设备附近严禁堆放易燃易爆物品及其它杂物。
(7)移动的电器设备,应做好接地或安装自动断电装置,并设专人管理。
(8)配电箱或电器设备内,严禁存放工具或杂物。
关键词: 科研生产管理;信息化;均衡生产;定量化
0 引言
随着我国经济水平的迅速提高以及装备采购体制加速变革,航空企业面临的环境发生了剧烈的变化,用户需求瞬息万变,产品的生命周期越来越短,技术创新不断加速,市场竞争愈来愈激烈,此外更面临多阶段任务并行和多型号任务并举的复杂局面,航空企业急需提升科研生产管理的水平,从生产为导向转向以市场为导向,从粗放经营转向成本控制。
企业的科研生产管理进度优化及控制是企业管理中的重要内容,直接关系到科研生产的成本、质量和工期,是保证航空企业科研生产按期完成、节约成本以及合理安排和供应资源的重要措施。良好的进度控制可以实现在既定工期内编制出最优进度计划,在执行计划的过程中定期的检查科研生产管理的进度情况,并将其和计划进度进行比较,如果出现偏差,就分析这个偏差产生的原因以及对科研生产管理的影响程度,在此基础上修改原来的进度计划,如此循环直到实现合理的科研生产管理。本文优化航空企业科研生产管理的探讨从以下三个方面入手。
1 科研生产管理信息化建设
现在是世界处于信息化的时代,推进航空企业科研生产管理的信息化建设,有助于提高企业的竞争能力,促进航空企业的快速发展。
在企业管理的信息化建设中存在这样一些问题。第一,先进的信息技术手段尚且没有广泛而深入地运用到企业科研生产管理中去;第二,信息资源未做到有效地共享,存在信息孤岛现象;第三,科研生产管理的信息化建设顶层设计不合理,只关注于满足应急管理的需求。正是由于企业信息化建设中存在的这些问题,在航空科研生产管理方面凸显出以下这样四个问题,第一,科研生产的规范化、科学化、制度化管理相对不足,型号间和单位间的管理水平差异很大;第二,在科研生产的过程中跟踪和监控手段较落后,预防以及快速响应能力相对较弱;第三,在多种型号项目同时开展工作的状况下,型号之间的信息没有做到很好的共享与交流;第四,同一个型号项目的执行要素,如人财物和进度、质量等,在管理过程当中综合性体现的不强。
针对上述问题,科研生产管理信息化建设的思路在于充分的利用信息化手段来构建科研生产管理的一体化集成信息平台。一方面,增强对多型号项目集中控管能力,以保证企业总体目标的实现,另一方面,进一步规范并加强对单一型号的管理,提高精细化管理水平,切实利用好并努力实现人、财、物以及信息等各因素的有机结合,以保证各项科研生产的顺利完成。
信息化建设的方法对策主要有以下三个。第一,管理体系和工作流程。航空企业逐步建立起来的一整套科研生产管理制度通过两条指挥线组织指挥系统,推动和促进了我国航空科研项目的研制及发展。在传统的科研生产管理当中贯穿一系列的管理过程,主要包括有合同管理、技术状态管理、计划管理、质量可靠性管理、试验管理、风险管理、经费管理等。对于单一型号项目的科研管理模式已日趋成熟,为单一型号精细化管理提供了良好的条件。随着形势的发展和变化,急需引进多项目管理理念,来保证企业的整体目标的实现。现在企业应该不断地完善军品任务责任令以及军品综合调度的管理制度体系,真正的做好对科研生产任务的全阶段和全寿命周期的管理,实现全过程管控、信息化、规范化、多元化、系统化和全方位管理。管理体系要进一步细化为具体作业文件,实现复杂问题变得简单化,简单问题变得流程化,流程问题变得信息化。第二,信息系统集成方法。本方法是根据企业的科研生产管理的实际状况,通过集成开发来实现信息化的管理。基于面向服务架构的应用集成的开发方式可以解决传统集成方法的弊端和不能解决的问题,对于多个应用程序运行于不同平台上且必须互相通讯的状况,这种集成方法尤其适用。第三,是推进信息化建设工作。从大的方面来讲,首先必须克服的是由航空科研生产管理的难度大和复杂性高所带来的对信息化建设工作的畏惧情绪;其次是科学地推进企业组织变革,进一步地优化管理流程;最后是要结合科研生产管理的实际情况,充分论证需求、统筹策划和分布实施,以此稳步推进信息化建设。
努力将信息化作为推进技术和管理创新的科学手段,不断优化航空企业的科研生产管理,是航空企业履行强军富国使命的根本要求。
2 科研生产管理中的均衡生产
精神科患者因大脑无完全的发育或者因为外界刺激致使大脑正常功能产生紊乱,从而使其认知以及行为方面产生异常,和正常人进行交流时产生障碍[1]。然而为了患者的护理安全通常选择封闭式管理,此管理模式对患者的身心健康会产生一定影响。本次研究分析精神科封闭式管理病房实施关怀性管理制度对患者满意度的影响,现将护理内容进行如下汇报:
1.资料与方法
1.1 一般资料 纳入本次研究中的88例患者均为我院于2016年6月-2017年1月期间收治的精神科患者,年龄最大者为68岁,年龄最小者为24岁,平均年龄经计算为(52.4±1.2)岁。经不同护理管理模式将其均分为观察组和对照组,每组患者44例。两组患者的一般资料数据进行统计分析后提升了数据间的临床研究性,无统计学意义产生。
1.2 方法 对照组患者选择基础护理模式,依据患者的实际病情进行划分,并对其实施相应的管理,对患者的生命体征予以监测,患者的药品需要定期发放,并指导患者进行用药,随后记录患者用药后的病情变化情况,从而对治疗方案进行调整。
观察组患者选择关怀性管理,其护理内容大致:①创建护理小组,组长为护士长,对精神科患者患病率较高的疾病进行调查,同时探究患者就医过程中的需求,随后对患者实施针对性护理。②创建精神科常见疾病关怀性护理相关应急文件,将关怀性护理流程进行相应的设计,将护理管理措施予以相应的规范,从而将患者不良心理情况进行改善,获取相应的治疗以及护理时机,进而提升护理效果[2]。在对患者予以护理管理的过程中,需要将关怀性护理方法落实到每个环节中,然而此项护理模式则创建在医护人员熟练技术之上。为此,需要加大精神科护理人员的培训技能,从而将护理人员的操作失误事件进行减少。然而在提升护理人员自身水平以及提升工作责任心后能够将护理不良事件发生率进行降低,确保患者的安全[3]。③精神科患者进行关怀护理的过程中,因为患者病情具有特殊性,致使医患之间无良好的沟通,为此护理人员需要和患者家属进行交流以及沟通,从而对患者的实际病情予以了解,对患者病情的引发因素进行了解,对其生命体征和病情产生的变化进行观察,从而对患者实施针对性护理,从而将护理失误事件发生率降低[4]。与此同时,护理人员需要增加和患者及其家属的交流次数,进而提升患者及其家属对疾病的了解,进而对病情的发展以及预后做好相应的准备,以免出现医患纠纷事件。和患者及其家属进行沟通交流之后能够获得相应的理解,从而使得患者可以配合医护人员,有助于患者病情的恢复。
1.3 评估指标
选择自制护理满意度调查问卷对两组患者护理后的满意度进行评估,其评估指标包含非常满意、满意以及不满意,同时对两组患者护患矛盾事件发生率进行对比。
1.4 统计学数据计算 将SPSS17.0统计学软件包应用于本次研究中,并对涉及数据进行计算和整理,护理满意度以及不良事件发生率经统计计算后以计数资料进行呈现,在对数据进行检验时选择卡方,统计学意义呈现说明数据间P
2.结果
2.1 分析两组患者护理满意度 观察组44例患者进行关怀性管理制度后,29例患者对本护理管理制度非常满意,比例65.91%,15例患者对本护理管理制度满意,比例34.09%,无不满意患者,满意度统计计算为100%;对照组44患者进行基础护理后,20例患者对本护理管理制度非常满意,比例45.45%,16例患者对本护理管理制度满意,比例36.36%,8例患者对本护理管理不满意,比例18.18%,满意度统计计算为81.82%,两组数据进行统计对比后=8.8000,P
2.2 分析两组患者护患矛盾事件发生率 观察组中出现2例护患矛盾事件,发生率4.55%,对照组中出现10例护患矛盾事件,发生率22.73%,数据间经比对后=6.1754,P
3.讨论
将关怀管理制度应用于精神科封闭式管理病房中,其效果显著,但是需要护理人员具备相应的工作责任心,同时还应具有较高的疾病护理知识以及技术能力,然而关怀护理管理模式能够为患者提供良好的护理服务,同时可将护患矛盾事件发生率进行降低,确保患者治疗以及护理中的安全。并且此护理模式获得了患者及其家属的欢迎,具有临床应用价值。
参考文献:
[1] 温世萍.精神科封闭式管理病房实施关怀性管理制度对患者满意度的影响观察[J].当代医学,2015,(33):111-112.
[2] 李海双.实施人文关怀对精神科封闭式男病房患者满意度的影响[J].医学信息,2013(24):177-177,178.
[关键词]肝细胞生长因子;骨髓间充质干细胞;颗粒脂肪移植;血管形成;基因转染
[中图分类号]R62 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455(2014)15-1260-04
Experimental study of transplanted mesenchymal stem cells transfected with adenoviral ventor mediated HGF gene enhance angiogenesis of grain fat grafts
WANG You-hu1,LIU Yi2
(1.Department of Otorhionolaryngology,Nead and Neck Surgery,The First Hospital Lanzhou University,Lanzhou 730000,Gansu,China;2.PLA Center of Plastic Surgery,Lanzhou General Hospital of Lanzhou Command, Lanzhou 730050,Gansu,China)
Abstract: Objective To investigate the angiogenetic effect of transplanting mesenchyma stem cells (MSCs) transfected with HGF gene on fat grafts. Methods MSCs of male Wistar rats were collected and cultured in vitro,and were transfected with Ad - GFP or Ad-HGF.The transfection infectivity of Ad - GFP to MSCs was assayed by fluorescent microsopy and flow cytometry.150rats were randomly divided into 5groups: control group (group A,30rats),MSCs group (group B,30 rats),Ad-HGF group (group C, 30rats),MSCs transplanted with Ad-GFP group(groupD,30rats), MSCs transplanted with Ad-HGF group(groupE, 30 rats).Then free fat tissue from inguinal region,mixed with MSCs,Ad-HGF,MSCs transplanted with Ad-GFP and MSCs transplanted with Ad-HGF respective,were transplanted to rats back, but control group were only mixed with DMEM-LG. fat grafts were obtained on day 3,5,7,14,28,60 implantation,The expression of CD34 in fat grafts were detected by immunohistochemistry. Results Transfection efficiency was correlated with the multiplicity of infection (MOI)and a highest transfection efficiency (86.4)could be achieved at MOI of 100.MSC expressed HGF at a high level after being transfected with the Ad-HGF for 48h .The HGF expression could maintain for at least two weeks.Microvesselquantity in group E was much more than that in other group (P
Key words:HGF;MSC;Fat grafts transplant;angiogenesis;gene transfection
Traktueue等[1]预测脂肪移植将来在修复组织缺损中将扮演重要的角色,但是颗粒脂肪移植后存在最大问题是移植脂肪因缺血、缺氧后液化坏死,易被吸收或形成囊肿、纤维化,从而影响远期效果。因此,脂肪移植要取得进一步的进展,就要深入研究脂肪移植后的再血管化[2-3]。
骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一类重要的干细胞,可跨胚层分化为各类细胞。其容易分离和培养扩增,同时具有可移植性,易于外源基因转染和表达,是基因治疗理想的载体细胞。肝细胞生长因子( hepatic growth factor,HGF)是一种多功能的细胞因子,其生物学活性通过单一受体c-Met(c-met protoncogene product) 介导,引起细胞内一系列信号转导途径的级联激活,从而调节细胞的增殖、分化、运动和血管生成等。基于此,我们用腺病毒为载体,把HGF基因导入骨髓间充质干细胞,然后与颗粒脂肪混合移植,充分发挥MSCs多项分化潜能和HGF强大的血管效应,旨在为颗粒脂肪移植建立新生血管诱导生物组织工程模式。
1 材料和方法
1.1实验材料:Ad-GFP(携带绿色荧光蛋白的重组腺病毒)和Ad-HGF(携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒),兰州总医院哈小琴老师惠赠;Percoll试剂(Amersham Pharmacia Biotech公司);兔抗人CD34多克隆抗体及SP试剂盒(武汉博士德生物工程公司);DMEM-LG培养基(Gibco公司);OLYMPUS XT70型荧光倒置显微镜(OLYMPUS公司,日本);流式细胞仪(BD公司,美国);Imge-Pro Plus 图像分析软件(Version 4.1)(美国Media Cybernetics公司)。
1.2MSCs的分离、培养与扩增:应用Percoll(1.073g/ml)密度梯度离心法从健康雄性Wistar大鼠(体重120g)的骨髓中分离得到单核细胞,接种于含10%胎牛血清的DMEM-LG培养液中,置于37℃、5%CO2 条件下培养,72h后换液。原代培养6d左右形成细胞克隆,约10天形成贴壁细胞层。胰蛋白酶消化后传代扩增,第3~5代用于实验。
1.3重组腺病毒介导GFP基因/HGF基因转染MSCs:将细胞以1×106 接种于6孔板,贴壁后,弃去培养上清,加入含不同感染强度的Ad-GFP病毒颗粒的DMEM-LG培养基(0、25、50、100、200pfu/ cell)孵育2h,换含5%血清的培养基继续培养48h检测荧光。转染48h后在荧光显微镜下观察绿色荧光强度并用流式细胞仪检测转染效率。Ad-HGF感染采用Ad-GFP转染率最高的病毒强度。
1.4实验动物分组处理及指标检测
1.4.1实验动物分组处理:150只雌性Wistar大鼠(兰州总医院动物实验科提、供)随机分为:空白对照组(A组 n=30)、Ad-HGF组(B组 n=30)MSC组(C组n=30)、Ad-GFP感染MSC组(D组 n=30)、Ad-HGF感染MSC组(E组 n=30)。用3%的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(40mg/kg)取腹股沟区脂肪1ml,均匀剪成小块,用生理盐水冲洗。A组 颗粒脂肪1ml+0.4mlDMEM-LG;B组 颗粒脂肪1ml+0.4ml DMEM-LG+1х108pfuAd-HGF液;C组颗粒脂肪1ml+0.4mlDMEM-LG+1×106MSC;D组颗粒脂肪1ml+0.4ml DMEM-LG+1×106MSC(携带GFP基因);E组颗粒脂肪1ml+0.4mlDME-LG+1×106MSC(携带HGF基因)均匀震动5min,用注射器接12号针头注射于背部的皮肤与肌肉之间。3、5、7、14、28、60天每次各组取5只脱颈处死,并沿被膜分离出移植物,标本用10%富尔马林固定,规制成石蜡切片, HE染色进行组织病理学观察。
1.4.2 血管染色和血管计数方法:按照免疫组化SP法操作步骤进行,工作液浓度为1:150。每张切片分别在周边区和中央区各选3个高倍(×4OO)视野,每个视野中进行微血管计数,然后求其均值。凡是染成棕色单个内皮细胞或内皮细胞簇均作为1个血管计数。
1.5统计学分析:所有数据采用SPSS11.5统计学软件进行处理,数据用均数±标准差(x±s)表示, 并进行单因素方差分析和多个样本均数之间的多重比较,P
2 结果
2.1MSCs 的体外培养:从骨髓中分离获取的单个核细胞培养24h后逐渐出现贴壁细胞,换液逐渐除去未贴壁细胞,培养4天可见似分裂中的成纤维样细胞,6天可见多个细胞克隆形成似,12~14天细胞形态不一、多呈梭形,90%以上融合。传代细胞于24h内贴壁,10~12天融合。
2.2GFP基因/HGF基因在MSC中的高表达:Ad-GFP转染对数生长期MSCs 48h后在荧光显微镜下观察,在低倍的视野下呈“满天星”状,在高倍视野发绿色荧光的MSC,呈不规则形,有些细胞的轮廓清晰可见,有些融合成片(如图1)。当MOI=100时,用FCM检测GFP表达率89.6%,感染效率最高,说明重组腺病毒能够有效的感染MSC。ELISA检测HGF分泌量结果显示,感染MSC后HGF基因可在短期内高效表达,48h表达量最高(如图2)。
2.3 移植颗粒脂肪组织的病理学变化:所有移植体均被纤维被膜包裹。移植后5、7天,E组有大量的血管长入移植物(如图3)。镜下,早期脂肪移植物内及周围有单核细胞、淋巴细胞、浆细胞及中性粒细胞浸润,其中A、B、C、D中央液化坏死明显,只有周边脂肪组织结构完好;而E组坏死较少,且新生血管丰富,有些血管呈垂直状向移植物延伸移植物。移植后26、60天E组包裹纤维被膜厚,而间隔较薄,体积保持明显好于其他4组,细胞分化成熟。
2.4平均微血管密度记数:免疫组化染色后血管呈棕黄色,切片背景清晰,微血管形态不规则,管腔由染成棕黄色的内皮细胞围成(如图4)。腔内可见红细胞,部分血管无明显管腔呈条索状,有的只见到单个或成团的内皮细胞, Ad-HGF转染MSC组7天新生血管达到高峰,14天后趋于稳定。与其他4组相比较,在第3天无差异,但在术后5、7、14、28、60天时均有差异(P
3 讨论
随着目前分子生物学、基因转染等技术的发展,为加速颗粒脂肪移植后血管的重建提供了新的思路。
HGF是一种特异的促内皮细胞生长因子,具有很强促血管内皮细胞有丝分裂、增生,抑制凋亡作用。在兔与小鼠缺血模型中,HGF 能刺激新生血管生成,且不论在体内还是体外试验HGF 的血管生成活性比血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)更为强大[4]。但是,HGF半衰期短,费用高,局部给药困难等缺点而难以推广应用。而我们在HGF基因加速创面血管新生方面已取得了一定的进展[5]。
本实验以腺病毒为介导,将HGF基因导入体外培养的MSCs中,和大鼠自体颗粒脂肪混合移植到其背部,发挥HGF强大的血管作用和MSC多项分化作用,共同协同促进颗粒脂肪移植体的新生血管。实验结果显示,Ad- HGF转染MSC组新生血管生成7天达高峰,提前于其他四组和文献报道[6]的14天,且无论在早期还是长期移植体血管的数量明显多于其他4组(P
MSCs不仅免疫毒性很低,易于外源基因转染和表达等优点,而且移植后可促进新生血管的生成,其途径:①MSC产生VEGF、bFGF、PDGF血管生成素;②能分化成血管内皮细胞和平滑肌细胞[9]。实验结果也显示MSC组的新生血管平均数量多余空白对照组。至于MSC是否像文献报道那样能分化成血管内皮细胞和平滑肌细胞,有待进一证明。
本实验选用腺病毒为载体,该病毒有以下优点:安全、无致畸,致病及致癌性;对分裂细胞及癌细胞株的转染效率达到90%~100%;腺病毒感染细胞时DNA不整合到宿主细胞染色体中;腺病毒容易制备、纯化和浓缩,可达到较高滴度;腺病毒载体插入外原基因的容量较大。实验结果显示通过腺病毒介导,GFP基因/HGF基因成功导入MSCs,并高效表达。
综上所述,骨髓间充质干细胞经转染肝细胞生长因子基因后能持续的表达HGF,从而有效的促进自体颗粒脂肪移植后新生血管的生成,有望提高脂肪移植的远期效果。但是要将基因治疗与干细胞移植真正应用于临床,必须进一步研究这种促血管生物工程模式的安全性、稳定性和可控性。
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旅游饭店的经营决策是关系到企业总体发展方向和重要经营活动的决策,如投资方向和投资规模、价格水平、成本目标、盈利目标等。它牵涉到饭店的资金、成本和利润等重要的财务指标。如果决策正确,就能使饭店沿着既定的方向发展,取得预期的效果;如果决策失误,就会造成巨大的损失,甚至破产倒闭。饭店总经理在作出经营决策前,应由总会计师对各项决策方案的可行性进行经济分析,选择最优方案,保证经营目标的实现,提高决策经济效益。总会计师应充分发挥财务部门综合性强、联系面广和信息反馈灵敏的长处,建立起一套财务决策分析系统。
2、建立一套成本费用指标的归口分级管理系统
旅游饭店房间数目的固定性,决定了饭店销售量的有限的,在这种情况下,饭店要取得较好的经济效益,关键要降低各种成本费用的消耗,制定各种消耗定额,开展增产节约、增收节支活动,处处精打细算,减少各种各样的浪费,要实现这些功能,总会计师经建立一套成本费用指标的归口分级管理系统,旭仪器成本率指标由总厨师长负责管理,工资总额由营资部门管理,客房宾客用品消耗由客房部门负责管理,动力用电、空调用电和煤(煤气)由工程部门管理等等,建立健全饭店成本费用管理制度保证该系统的正常运行。
3、建立一套固定资产的归口分级管理系统
旅游饭店固定资产应由总经理亲自来抓,具体由总会计师负责,建立在套固定资产的归口分级管理系统,把固定资产日常管理的权限与责任落实到有关部门和使用单位,如将机器设备归口给工程部门管理,客房家具、电器归口给客房部门管理,餐厅桌椅归口给餐饮部门管理等,并在此基础上,按照固定资产的使用地点,由各门负责进一步落实到班组各个人,充分调动各部门、各班组及职工和积极性和主动性,建立使用单位和个人的责任制,,同时会同有关部门制定固定资产的管理办法,并监督有关部门执行,协助各归口分管部门做好固定资产的各项基础工作,组织财产清查,正确核定固定资金的需要量,组织固定资金的核算和分析。
4、建立一套流动资金的归口分级管理系统
目前财务部门对流动资金的管理不外乎是确定流动资金定额和制定流动资金计划,而怎样实施流动资金计划则显得无参为力。手者认为就在总会计师的领导下,建立流动资金的归口分级管理系统,如储备资金归口采购供应部门管理,在用餐具归口餐饮部门管理,在用棉织口归口洗衣房管理等,建立健全流动资金的管理制度,认真做好流动资金的统筹安排和平衡调节,加速流动资金周转,以保证完成流动资金定额和流动资金计划。
5、建立一套物资供应管理系统
旅游饭店是一个综合性的服务企业,它所需的原材料、物料用品、低值易耗口、商品等品种繁多、规格复杂、质量要求高;而且饭店为了保持其规格水准,大量的经营物资都要委托外单位特别制作,如客房用的毛巾、浴巾、地巾,餐厅用的瓷器等都标有店徽店名,需要从特殊的渠道采购供应。在这种情况下,总会计师应领导采购供应部门制定出切实可行的物资供应方案,建立一套适合本饭店和市场情况的为存模型,既要保证饭店经营所需要的材料物资按时供应,以避免增加库存费用和积压流动资金。