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居住在泸沽湖边的摩梭人,至今保留着母系制度的社会形态,他们也是中国仅有的母系社会。随着现代化进程的加快,摩梭母系文化面临前所未有的挑战。如何保护摩梭文化?如何维护中国和世界文化的多样性?如何澄清对摩梭文化保护存在的一些认识误区?针对这些问题,本刊记者特别邀请到赴盐源参加“摩梭家园暨摩梭文化建设与保护国际学术论坛”的三位著名学者严汝娴、施传刚、李锦,共同探讨摩梭家园的建设问题。
(一)
记者:我们提出要建设摩梭家园和保护摩梭文化,此举的重大意义体现在哪里呢?
严汝娴:摩梭人以母系大家庭为主,特别重视母系的亲属血源关系,母方的亲属被认为是骨肉血亲。摩梭文化是一种世界文化遗产,这种纯粹的母系结构制社会在世界上也不多见了。但是摩梭这种母系制又不是亘古不变的,它又在动态的变化中保持了平衡。再者,现在大部分人了解的摩梭文化可能都是对其本身的误读,尤其是有的商家为了招揽生意,杜撰了很多根本不存在的故事,这是对摩梭文化的亵渎。
施传刚:为什么要保护摩梭这个文化遗产?要是全世界都是摩梭人,摩梭文化还需要保护吗?正是摩梭文化与汉族文化、彝族文化等有不同,才有必要保护。文化多样性的价值就在于人类所创造的每一种文化都对其他文化有借鉴的意义。保护文化遗产的意义就在于保持世界文化的多样性并使现在生存的每一个人及其后裔都不会丧失自己的文化归属感。摩梭文化和世界的其它文化一样,生存环境的变化和改善生存条件的愿望会不可避免地导致文化变迁。
(二)
记者:对不了解摩梭人和摩梭文化的人来说,确实是抱着猎奇的心态去的。那开放式的开发和保护是否会导致摩梭母系文化的消失呢?
施传刚:文化保护与旅游开发是有悖论的,摩梭人向外宣扬自己的文化,这本身是好事,可以让文化传承,吸引更多的人来了解摩梭文化。但要明白杜撰不是真正的摩梭文化。摩梭人想要推销自己这个文化产品,可能也会在其中有些妥协,但旅游开发要适度,经济开发要服从文化保护,摩梭文化中最本质的以家户为中心的结构、母系制文化、异居走访制以及体系、节庆人生礼仪等仪式过程应该是不会变化的,否则就不是摩梭文化了。
李锦:摩梭母系文化所在的泸沽湖周边,是一个相对封闭的区域。但是,纵观摩梭历史,外来文化如藏文化、中原汉文化的影响一直就没有间断。特别是在摩梭地区社会发展进程与中国社会进程同步后,一些行政力量开始推进其向父系制家庭发展,直接干预摩梭文化的核心母系制家庭。而到了上世纪80年代以后,由于落实党的民族政策,地方自治条例明确规定不干预摩梭人的婚姻形式,摩梭人立即在居住形式和两性关系上都回归了母系社会。可见,摩梭母系文化有着强大的涵化力。
(三)
记者:既然要保护,在保护过程中,最核心的问题是什么?专家们都提到了要建设摩梭家园,应该如何建设?
严汝娴:其实与外界隔绝的保护是违反历史潮流的,重要的是我们应该在保护中注意哪些方面。我只说两点,第一,摩梭文化中最核心的母系家户要保护。这种生活的形态,不仅是古文化的一种,而且符合现代和谐社会的理念。现在的有些小家庭个人主义膨胀,他们都应该来了解摩梭文化,看看他们四世同堂、五世同堂是怎样和睦相处的。第二,搜集代表摩梭人和摩梭文化的典型。像以前我们搞摩梭调查,和那些摩梭老人们交流,就挖掘了很多第一手资料。每一位老人都是一座博物馆,现在不少摩梭老人都过世了,这对摩梭文化来说损失太大了,所以我们要将调查继续下去。
至于摩梭家园如何建设,他们自己说了算,摩梭人自己选择未来的发展道路,我们只能提供建议。摩梭人是文化建设的主体,他们有权利享受文化的收益,比如以后旅游业发展好了,首先要保证他们能充分享受到其中的好处。建设摩梭家园,一定要合理规划,注意泸沽湖山水旅游和摩梭文化民俗旅游并重,发展健康的旅游业。
李锦:摩梭母系文化的保护,必须以摩梭人为主体,要尊重摩梭文化的价值观及其内聚力。文化保护的关键是保护这个文化内生的传承机制。摩梭文化在漫长的历史过程中,形成了自己抗拒文化冲击的独特机制,使自己的母系文化可以灵活应对不同的文化冲击。尊重摩梭文化强大的内聚力,需要我们摆脱文化进化论的单线思维,充分认识摩梭文化对环境的适应能力;尊重摩梭文化的价值观,需要我们放弃现代的男权思想和性别角色概念,放弃个人拥有的财产才是私有财产的财富观,让摩梭人自己选择他们对现代化的适应方式。要尊重摩梭人的文化自觉和文化选择。
必须弘扬摩梭文化传统,提高摩梭人的发展能力。摩梭的文化传统中,民主、互助、注重母系大家庭整体竞争力等优秀民族文化传统,都可以在提高摩梭人发展能力方面发挥作用。
必须指出的是,任何传统的生活方式都是可以保留的,但同时也必须付出代价。关键是应该由这个社会本身来决定他是否采取行动,采取怎样的行动来保留旧的生活方式,并承担为此必须付出的代价。
(四)
记者:建设摩梭家园,我们要达到什么样的目标呢?
严汝娴:我们要建立多民族多文化和谐共居的保护机制。摩梭家园的居民不仅有摩梭人,还有彝族、纳西族、藏族、汉族等其他民族的居民。在保护摩梭文化的同时,也要尊重其他民族的文化,使他们可以共享摩梭家园建设的成果。
【关键词】 媒体 现代教学 原则
教学中我们常将两种以上的媒体组合使用,因为各种教学媒体都有各自不同的特点和长处,使用两种以上的媒体来传递信息,可以使媒体之间互相补充。另外,一个教学点的总目标一般是由多级目标组成的,通过多个教学环节实现,教学目标和教学策略不同,适应的教学媒体也就不同。多种媒体的恰当组合,能更好地调动学生的多种感官参与活动,有效地提高学习效率和记忆水平。同时,多媒体教学信息量大,信息来源广泛,有利于开阔学生的视野、拓宽知识面。通过现代教学媒体的适用时机及考虑其主要因素,在选择与组合现代教学媒体时应遵循以下原则。
1 目标性原则
要根据课堂教学目标和教学内容选择现代教学媒体。比如一堂语文课,如果教学目标是着重培养学生的听说能力,就应考虑选用录音媒体;如果教学目标是通过看图让学生造句或作文,提高观察能力,那就应选择投影或幻灯。不管选用哪种教学媒体,都是为达到课堂教学目标服务的,都是服从于教学任务这个大局,决不能想用哪种媒体就用哪种媒体。
2 最优化原则
多媒体组合教学的研究与实践表明:围绕教学目标选择教学媒体时,必须根据不同媒体的功能特性,充分发挥各种教学媒体的特长,选择使用最能表现相应教学内容的媒体种类,同时还要对多种媒体进行优化组合。
2.1 多种感官配合这是依据媒体的功能和属性去组合媒体的重要原则。教育心理学研究表明:在人类的5种感官学习中,视觉、听觉的学习最重要(分别占83%、11%),而视、听觉组合对知识的记忆率远远高于视、听觉分别记忆之和,可见调动多感官学习意义很大。对人脑功能的研究还表明:单一持续的刺激,会诱导抑制效应,大脑迅速出现疲劳现象;而多种感官的交替刺激(如讲解20分钟、看录像5分钟、再演示实验等),可充分调动大脑的功能,使之处于兴奋激活状态,提高学习效率。因此,多种媒体的组合应用,应根据多感官的配合原则来设计,使之协调统一,交替轮换,相互补充。如视觉媒体与听觉媒体的组合、视听媒体与实物媒体的组合、传统媒体与交互计算机媒体的组合等,但并不是说媒体用得越多越好,还要考虑教师的操控能力、学生接受能力,因此,在考虑多感官媒体组合时,还要注意媒体运用的适度性。
2.2 传输大信息量现代教学媒体的组合必须有利于增加教学信息量,这是现代教学媒体内容组合的基本原则。如果所组合的两个媒体的教学信息是等值的,就不应将之组合在一起使用。一般来说,把在信息表达特性方面互补的媒体组合在一起应用,可提高教学信息量。
3 适度性原则
在教学过程中应适当多采用些教学媒体,因为多种媒体传递的教学信息量,一般会比只用一种媒体传递的教学信息量要大,但这并不是说媒体用得越多越好,因为课堂信息大了,还要考虑学生能不能接受,如果不能接受,再多的信息有什么用呢?因此不该放录音一定不放录音,不该放录像坚决不放录像。
4 反馈互动原则
反馈是课堂教学结构不可缺少的部分,是检测学习效果、了解学习动态的重要途径,也是体现以学生为中心,发挥学生主体作用的重要方法。应用现代教育技术提高教学效果,必须通过多种途径和多种形式建立最佳反馈渠道,既要让学生及时准确地获取反馈信息,以便将更多的知识内化为自身素质;又能使教师及时了解学生的学习态度、智力因素及非智力因素发展程度,以便调整自己的教学方式和策略。
5 经济与实效相结合的原则
一般来说,媒体组合不宜过于复杂,而以简洁实用、少而精、省时省力、易于操控为佳。要讲究教育经济学原理,以较小的代价取得较大的效果。能用传统教学媒体讲清楚的则不用现代教学媒体,能用简单媒体的则不用复杂媒体,能用低成本媒体的则不用高成本媒体。现代教学媒体操作总要占用一定的教学时间和资源,因此教师课前要熟练掌握所使用媒体的功能和操作方法,各种附件和软件要准备齐全。就我国目前国情来说,经济实效尤为重要,要提倡因陋就简,勤俭节约,就地取材,用有限的经费迅速发展和推广多媒体教学。
总之,现代教育是一个十分复杂的系统,若不协调好其与媒体技术和教学艺术的关系,单从媒体设备、技能培训、教学资源建设等要素入手,难有根本性突破。要真正实现现代教学媒体在教学中的有效应用,必须以人为本而不是以媒体技术为本;从实际的教学需要出发而不是从媒体技术出发。只有将教育教学过程中各方面的因素结合起来,才能充分、合理、有效地发挥它的功能效益和优势,从而达到优化教育的目的。
参考文献
1 张文兰.对教学系统设计理论的思索与浅探[J].中国电化教育,2003(5)
2 凌以民.从数字技术发展现状谈教育技术的相应对策[J].中国电化教育,2009(5)
3 杨开城.论教育的技术学本质与教育技术学的历史使命[J].中国电化教育,2010(5)
基于多媒体教学的校园网建设与规划,不是一个简单的多媒体网络教室的建设,而是一个涉及从规划设计到工程建设实践以及信息资源建设的系统工程。一般从以下四个方面入手:制定系统网络建设规划;构筑合理网络平台;确定功能实现手段;解决多媒体信息源。下面进行简要介绍。
制定系统网络建设规划
校园网的规划设计,是实现网络多媒体教学的基础环节。在规划设计中,应该重点考虑以下几个方面。
本院校特点,明确网络多媒体教学的需求。
每个院校无论从专业构成上,还是从地理分布上都有自己的特点,对于多媒体教学功能实现的需求也不相同。因此,在校园网建设的规划中,应明确具体的要求,以此作为制定校园网建设规划的前提。但总的来讲,在需求方面与一般的计算机局比,也有一些共性的需求可以借鉴。
利用Internet/Intranet技术组网,实现Intranet网的基本功能和服务,比如,WWW、FTP、E-mail等;
采用Web/Server或Clint/Server技术实现以下功能。视频广播、视频点播、视频会议、实时视频监控、远程实时多媒体教学;
建设开发以下网络多媒体制作使用环境:多媒体课件制作管理平台、网络多媒体教室、网络虚拟实验室等等。
调查研究,掌握基础规划资料
在明确需求的同时,要通过调查研究,重点收集以下几个方面的资料:
用户分布情况:重点调查多媒体教学场所,办公应用场所和实验、实习室、教学楼的用户分布情况。掌握各场所的信息点密度。
物理布局:通过调查用户信息点的物理布局,为校园网的布线提供地理分布资料,便于合理确定校园网的主干、分支到桌面的布线方案,计算主干、支干网的流量。提供给方案设计者参考。并对需要重点实现的功能,提出具体详细的技术要求。
用户编制序列:用户的编制序列是将来合理进行IP规划、网段划分、网络配置和邮箱分配等技术规划的依据。将来对重要多媒体教学、视频传输场所的IP分配数量、网段用户的归属、传输路由的确定有重要意义。
制定网络工程建设方案
在明确需求的前提下,设计校园网的工程建设方案。方案应重点考虑多媒体教学的需要,通常情况下,满足了多媒体教学的需求,网上的其它功能都可以得到充分的满足。一个完整的校园网建设方案通常包括以下几个方面的内容:
校园网的建设概述
其中包括建设的总体目标;实现的基本功能;网络层次结构;标准与协议;IP、域名及设备命名规则;通信信道;设备选型原则等。
网络工程建设方案
网络工程建设方案中一般包括各期工程建设目标;网络设计技术要求;主干网技术选择;网络布线方案;校园网拓扑结构;网络设备选型;网络操作系统选择;工程建设实施计划等内容。
4、应用系统开发和信息资源建设规划
在应用系统开发和信息资源建设中,多媒体教学系统的实现,是其核心内容。一般应包括以下几个方面:
网络服务功能
主要用于开通WWW服务、FTP服务、E-MAIL服务和数据库服务
应用系统
引进或开发以下应用系统。视频广播、视频点播、视频会议、实时视频监控、远程实时多媒体教学。
建设开发以下网络多媒体开发制作使用环境:多媒体课件制作管理平台、网络多媒体教室、网络虚拟实验室。
3)信息资源
主要是指支持多媒体应用系统运行的数据源。它主要包括视频点播音像库、多媒体课件、电子教材、电子题库、电子图书等。
构筑合理的网络平台
网络平台的建设主要由四部分组成:主干技术、网络布线、系统平台、设备选型。
1、主干技术选择
采用具有高服务质量(Qos)的网络主干技术。目前,校园网主干主要采用四种技术,FDDI、ATM、交换式快速以太网和千兆以太网。ATM和千兆以太网对于多媒体有较高的服务质量,但从性能价格比上看,千兆网已经成为构成网络主干的主流技术,它有足够的带宽和交换能力,可以兼容异构网的接入,保留原有网络建设投资,并满足多媒体教学的需要。
网络布线
网络布线是在园区内建筑物间或建筑群内,布设网络传输线路,在园区网建设中,要求布线系统均采用符合国际标准的综合布线系统,园区网中采用光纤、双绞线的混合布线方式。
考虑到多媒体信号的传输,在布线系统的设计上,网络主干、分支到用户端有足够的带宽。带宽的计算可以采取由桌面带宽、分支带宽到主干带宽的估算方法,估算的依据可以参见附件2:(常用网络通信业务的带宽要求一览表)
鉴于目前千兆网络已经广泛地运用在校园网中的实际情况,考虑到发展的需要,主干采用千兆主干已经是发展方向。需要说明的是,随着网络用户的不断增加,线路带宽只能是越来越紧张,因此,应该留有足够的余量。建议有30--50%的富裕量。
网络系统平台的选择
构建校园网的网络系统平台通常有三种,UNIX、Netware和WindowsNT。
UNIX在支持应用服务器方面功能最强,适合在已有众多的局域网的情况下整合构建校园网,由它构建的局域网性能可靠最好,能够提供不间断的长时间的正常服务,安全性强,几乎不感染病毒。该系统的缺点是,系统命令众多、操作界面众多,技术管理比较复杂。
Netware的操作命令酷似DOS,在DOS环境下的多媒体应用程序可以不加修改地进入网络,具有多级容错技术和安全保密措施,作为支持应用服务的系统则不理想。
WindowsNT在应用服务器方面略逊色于UNIX,其内嵌的网络功能使连网方便,管理方便,用户界面友好,能与多种网络系统互连,但其连续工作的可靠性较UNIX差一些。
用户应该根据自己的应用情况,选择合适的网络系统。
4、设备选型
设备选型主要包括交换设备、服务器、路由器选型、为了在校园网上顺利地实现多媒体教学,对设备的选型通常应该掌握以下原则。
交换设备
采用高速网络交换设备;选择同一公司的产品集成方案;与已有局域网的交换设备兼容;采用具有二、三层交换功能的系统配套网络设备;有组播功能的灵活配置。
服务器
作为校园网的关键设备,服务器应该具备速度高、存储容量大、吞吐能力强、性能可靠、扩展性强、连网和管理功能强等特点。
按照结构分为单处理机、多处理机服务器;按照用途分为网络服务器、数据库服务器、文件打印服务器和专用服务器。用于多媒体教学的服务器大多属于专用服务器。
从多媒体服务角度考虑,主要应对WWW服务器、视频点播服务器、视频监控服务器、课件库服务器进行合理的选配。
WWW服务器:是网络运行的核心服务器,通常兼作域名服务器、FTP服务器。访问量大,根据学院规模大小,采用适合自己规模的服务器。通常,对于综合性大学(3000-5000信息点)应该使用企业级的服务器。对于中型校园网(1000-3000信息点),可以采用部门级服务器和支持多CPU的顶级PC服务器。对于小型校园网(100-1000信息点)用户,可以采用支持多CPU的顶级PC服务器。
视频点播服务器:是用于网上用户点播视频节目的服务器,这种服务器要求速度快、容量大、可扩充能力强。实践证明,目前视频点播的速度瓶颈由两个方面因素制约,一个是硬盘读写速度(请参照附件3,硬盘存储介质所能支持的并发用户一览表),从表中看出,普通的IDE、SCIS,乃至磁盘阵列,所能支持的并发用户最多不超过50个。为了解决这个问题,不同的厂家利用了纹理化技术研制出不同的点播软件。有的软件可以支持并发用户达到300个甚至更多。由此可见,第二个瓶颈在于系统软件本身;另外,服务器的内存容量要足够大,条件允许的情况下可以考虑插满服务器内存;硬盘速度要快、容量要足够大最好采用磁盘阵列。就CPU的速度来说,普通顶级PC服务器可以满足需要。实践证明,对于点播用户不多的局域网,利用速度较快、内存较大、硬盘较大的普通PC机做视频点播服务器也是可行的。
视频监控服务器、主要用于连接摄像头和遥控云台,通过网络连接,监控重要的教学场所、进行网上广播式的教学使用。一般情况下,监控服务器所处场所环境较差,为了提高工作的可靠性,通常采用工控机进行视频信号采集,做视频监控服务器使用,其配置要求不高(满足监控系统软件要求即可),但要求可靠性要好,最好配备ATX电源和UPS电源,方便进行远程启动计算机,和维持系统正常工作。
多媒体课件数据库服务器,主要用于存储多媒体课件,实现网上多媒体课件的资源共享,目前,用于存储管理多媒体课件的数据库应用最多的是SQLServer和Lotus/Domino数据库。这两种数据库要求服务器的内存要足够大,硬盘空间也要足够大,运行速度要求高,适合多用户的访问需求。因此,大、中、小型院校,应该配备企业级、部门级或多CPU的PC服务器。考虑到备份和发展的需要,应该留有足够的内外存扩展空间。有条件的单位,还可以采用双机热备份和磁盘镜像,以确保数据的安全和可靠性。
路由器的选型
由于目前中心交换机提供了二、三层交换功能,局域网内子网间的路由通过三层交换实现。路由器多用于广域网的连接,有广域网多媒体教学需求的校园网,在选择路由器的时候,应该考虑其对于多媒体传输的支持,如对于先进的服务质量(QOS)的支持。对多服务语音/数据集成的支持。
确定实现功能手段
基于浏览器的开放式的INTRANET网络技术,为多媒体(超文本)在网络上的传输提供了丰富的实现手段。也为诸多网络多媒体应用系统的运行,提供了可靠的工作平台,因此,建议要在校园网上实现多媒体教学系统,必须在开发利用网络系统平台本身的多媒体功能前提下,开发引进应用系统。
充分利用网络平台的多媒体功能
WEBserver功能
WWW是信息检索和超文本技术的结合,WEB服务器把图文信息组织成分布式的超文本,并用信息指针指向存有相关信息的服务器,使用户可以方便地访问这些信息。这些信息可以是视频、音频、图象和文本文件,
2)利用浏览器/服务器结构,还可以开发出用于师生双向交流的专题讨论组,在讨论组中可以通过WEB界面传递文本、图象、声音文件
3)E-MAIL、FTP功能
通过开发简单的操作界面,将通用的邮件收发程序嵌入到有关的网络应用软件中,也可以为双向多媒体教学和交流,提供便捷的交互手段。
4)NETMEETING功能
NETMEETING功能是通用WIN98操作系统中携带的双向视频会议组件,利用这一组件,双方可以通过摄像头和麦克风,实现两人之间的可视通话,它还提供了在通话同时的白板交流功能,具有典型的网络多媒体教学功能。
应用系统
应用系统是实现网路多媒体教学功能的核心组成部分,通常,用于多媒体教学的应用系统由如下系统组成:
多媒体课件制作管理平台
该平台应该囊括以下几部分内容:多媒体信息源及录入;对视频信息源的非线性编辑;硬件视频压缩与传输;动画、图文的制作与编辑;多媒体课件的制作与存储;对以上内容的综合系统管理。
网络多媒体教室
网络多媒体教室内,可以使教员、学员通过校园网或内部子网,实现教室内部多媒体课件的广播、点播和师生间的双向交流,多用户同时调用多媒体课件库中的电子读物和课件,
网络虚拟实验室
网络虚拟实验室与以上具体的多媒体教室不同,学生在网络上,通过计算机中的应用系统所显示的实验环境,进行各种模拟实验系统可以自动判断学生的实验成绩,虚拟实验室的建设是通过网络虚拟实验室开发平台来进行的,它要求开发人员具有较高的专业知识和开发水平,是多媒体教学手段的较高境界。
视频广播系统
该系统可以在INTERNET和INTRANET上提供高品质的实时MPEG流技术。实现一点广播,多点实时观看的能力,无须添加任何视频传输系统硬件,可以将录象、电视节目乃至摄象机拍摄的内容通过计算机网络传输,适应范围广泛,能够实施于异种网络环境。任何一网终端可以实时观看播出的内容,它可以将录象节目、教学讲座、研讨会等节目,通过校园网实时地传输到联网终端上。在视频广播的同时,可以进行节目录制,供以后视频点播使用。
视频广播系统与视频点播系统可以无缝地集成,提供统一的视频广播和视频点播用户界面。软件通常支持多个实况视频流的选择观看能力,并提供非常好的基于WEB浏览器的WEB用户界面。
视频点播系统
VOD(Videoondemand)是今年来新兴的传媒方式,该技术是计算机技术、网络通信技术、多媒体技术、电视技术和数字压缩技术等多学科、多领域融合交叉的产物,它可以使您根据自己的兴趣,通过联网计算机,自由地点播异地点播节目库中视频节目和信息,使可以对视频库内容进行自由选择的交互式系统。该技术在校园网上的应用,无疑为多媒体教学提供了一种非常便利的手段。
解决网络多媒体教学信息源
多媒体教学信息源是发挥网络建设效益和实现网络多媒体教学的关键因素和基础条件。网络建设的规划、前期和后期,要对多媒体教学的信息源建设给予足够的重视。
前期要有规划。
高等院校的层次多、学科专业复杂,规划多媒体基础建设设施的同时,应该首先从公共基础学科、专业基础学科和专业课程的网络多媒体课件作起。其次,在整合原有各部系局域网的同时,把其已有信息源统一规划进全院资源建设与配置的范畴,从平衡数据流量、提高应用系统运行效率的角度,合理分布数据库资源。第三,确定开发和引进信息源的建设手段。
中期要有开发
建立一套完善实用的多媒体开发平台,是进一步建立的多媒体教学信息源的前提。多媒体开发平台可以采用引进的办法,也可以自行建设。关于多媒体课件制作管理平台,应该包括的内容,在前面已经有介绍。通常,该平台应该满足对视频点播素材、多媒体课件、电子教材、电子题库、电子图书的制作需求,对于网络虚拟实验室课件的制作,同样需要与本系统配合紧密的开发平台。
后期要有制作
开发平台和多媒体教学应用系统具备后,课件库的充实是一件长期不懈的工作。为了加快课件的制作进度,可以考虑适当引进已有课件,避免重复劳动。也可以师生共同开发制作多媒体课件和信息源。
课件制作的技术问题
传统的多媒体课件制作的手段一般有以下几种:
利用VB开发的多媒体课件
利用ATHWARE开发的多媒体课件
利用DIRICT制作的多媒体课件
利用专业多媒体课件开发平台,如“方正奥思”等
利用POWERPOINT
【关键词】美术学院;计算机教学;实验中心
四川师范大学美术学院由美术学和艺术设计两个系组成,其中艺术设计系包含了平面设计、环艺设计、动画设计三个方向,而计算机教学贯穿了艺术设计整个专业课程的学习过程。从计算机文化基础课程的教学到计算机应用软件教学,熟练的掌握计算机应用能力能为专业课程的学习打下良好的基础。因此建立计算机教学实验中心能更好的开展有美术学院特色的计算机课程教学,从而提高计算机课程的教学质量。
一、美术学院计算机课程教学现状
(1)计算机应用软件课程师资较为欠缺。同一门课程往往由不同专业教师担任教学,还包括不少兼职教师和在职研究生。并且部分艺术专业教师对计算机软件应用方面并不熟练擅长,也对计算机软件课程教学缺乏足够的重视。这样既不利于教学工作的稳定开展,也不利于计算机课程教学质量的提高。
(2)计算机应用软件课程在教学管理上较松散混乱,任课教师间缺乏交流,同一门课程往往在教学内容、教学方式上各不相同,并且最终的考核方式、评分标准上也都没能形成统一标准。这导致目前学院学生对计算机软件课程的教学存在较大的意见。
(3)从2010-2011学年开始,计算机基础课程中增加了Photoshop的教学要求,同时该课程也是美院学生需要深入学习的计算机应用软件课程。这必将导致教学内容上的冲突。因此在计算机基础和计算机软件应用的教学上需要展开思考教研,注重教学的相互结合,保持计算机教学的连贯性。
(4)学院在计算机相关课程的科研领域很是空白,目前相关任课教师不愿把精力和重心放在计算机应用领域,因此没有很好的开展科研教改工作,这对美术学院计算机课程的教学和发展很是不利。
二、美术学院计算机教学实验中心的构建和实施
计算机教学实验中心是美术学院计算机课程教学实验机构,主要承担学院计算机文化基础课程和计算机软件应用课程的教学和上机实验任务。结合美术学院的各专业特点进行计算机课程教学,使计算机教学更好的与艺术设计课程相融合,培养学生的计算机实际应用能力,以适应社会发展的需要
教学实验中心的硬件组成:目前学院有12间计算机机房,学生实验用微机共计约600台。(其中包含苹果机房1间,60台苹果电脑)已能基本保证学院师生的教学实验要求,如在条件允许的情况下可对部分电脑硬件逐步升级,以更好的满足计算机教学实验需要。
教学实验中心的师资组成:计划由学院计算机课程教师、计算机课程实验员和熟悉计算机软件教学的艺术教师共同构成,各系部可在课程开课前推荐擅长计算机软件教学的教师,实验中心将根据每门课程的具体情况协调组织教师展开教学工作。
三、美术学院计算机教学实验中心的主要任务
(1)逐步改变计算机应用软件教学师资欠缺的现状,以计算机教师和艺术教师共同组织建立较为稳定的教学团队,结合学院实际情况开展计算机课程教学。并在条件成熟的情况下展开教师技能培训,提高教师软件操作技能和教学能力。要求教师在计算机应用知识外掌握多方面多领域的知识结构,如色彩、构成、辅助设计、影象处理等。注重扩展自身知识领域,不断学习和提高,展开跨专业知识交流。
(2)提高学院计算机课程教学质量。每门课程开课前就课程教学大纲,教学计划,教学内容进行统一的制定,使教师对每门计算机课程的教学有更清晰的理解。在教学中注重把控每位老师的教学内容和进度,召开教研会加强教师间沟通交流。在课程结束前制定统一的考核方式和评分标准,使学生能更好的完成课程学习并有更加统一量化的成绩来体现学习水平。
(3)针对计算机应用方向展开科研教改工作。准确地把握住美术学院中各专业的特点和需求,掌握学生学习兴趣和学习意向。结合美术学院计算机教学的特点,探索计算机基础—计算机应用软件—艺术设计三者之间的更好融合,通过论文、专著、教材编写等形式展开科研,并争取教改科研立项工作。促进学院计算机相关课程的教学工作。
(4)注重计算机课程教学的连贯性,结合计算机基础中增加了Photoshop等软件教学的情况,在教学内容上,教学方式上进行探索。保持教学的整体连贯,从而提高学生的学习兴趣和动力。并且根据学生的实际需要更好的开展跨专业的计算机选修课程,真正提高学生的计算机操作应用能力。
(5)逐步健全完善计算机教学实验中心的软硬件条件,更好的维护管理学院硬件设备,提高设备的利用率、精心设置实验项目,为学院师生提供更好更稳定的计算机理论教学和上机实践环境。
在计算机教学中注重实验教学、强调动手能力,促进理论和实验的更好结合,这是现阶段计算机课程教学的必然趋势。美术学院计算机教学实验中心会以注重学生的实践创新能力为核心,培养学生的操作能力和实验技能,并结合学院实际情况开展计算机课程的教研教改工作,进行有针对性的科研探索,从而大幅提高学院的计算机相关课程的教学质量。
关键词:羧肽酶原B;甲醇酵母;表达;多克隆抗体制备;蛋白质印迹
中图分类号:Q556文献标识码:A文章编号:1672-979X(2008)11-0005-03
Construction and Secreted Expression of Recombinant Procarboxypeptidase B in Pichia pastoris
LI Su-xia, YUAN Qin-sheng
(State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China)
Abstract:Objective To construct the recombinant procarboxypeptidase B in Pichia pastoris. MethodsThe yeast plasmid containing procarboxypeptidase B coding gene was constructed, and then transferred to Pichia pastoris. The positive clone was obtained by G418 resistance selection in His- medium. The rabbit anti-rat recombinant procarboxypeptidase B serum was prepared with recombinant procarboxypeptidase B expressed in E. coli. Western-blotting analysis was used to determine the expressed protein with the prepared antiserum after fermentation and methanol induction of recombinant yeast. Results The rabbit anti-rat recombinant procarboxypeptidase B serum with higher antibody titer was got. The result of Western-blotting analysis showed that the supernatant was positive with the antiserum after methanol induction of recombinant yeast. ConclusionThe recombinant procarboxypeptidase B in Pichia pastoris can be constructed with the successful secretion of recombinant procarboxypeptidase B.
Key words:procarboxypeptidase B; Pichia pastoris; expression; polyclonal antibody preparation; Western-blotting
羧肽酶B(carboxypeptidase B,CPB,EC 3.4.17.2)是一种含锌的胰外肽酶,特异性水解肽链C端的碱性氨基酸:精氨酸、赖氨酸或鸟氨酸,CPB含307个氨基酸,Mr约35×103。天然CPB由前羧肽酶原B(preprocarboxypeptidase B)产生,其N端包含108个氨基酸(其中13个氨基酸为信号肽序列,95个氨基酸组成活性肽部分)片段,并与C端的CPB相连,前羧肽酶原B在转运到内质网的过程中,信号肽被切掉,得不具有酶活性的羧肽酶原B(procarboxypeptiedase B,pCPB)从细胞中分泌,然后通过胰蛋白酶将其酶解为具有酶活性的CPB和活性肽部分[1]。目前,商业及研究所用的CPB均从动物胰腺提取,价格昂贵,且不能完全去除其他蛋白酶。重组CPB与生物提取的CPB相比,具有无动物源性、无其他蛋白酶混杂等特点。
pCPB可在大肠杆菌中表达,但是以包涵体形式存在,需经过超声波破碎细胞及包涵体复性等过程[2]。所以,我们尝试用甲醇酵母(Pichia pastoris)表达pCPB。甲醇酵母具有高等真核表达系统的许多优点,如蛋白质加工,蛋白质折叠和翻译后修饰等,并且能像大肠杆菌一样便于控制。目前许多蛋白质都可用甲醇酵母表达,例如阳离子依赖的甘露糖-6-磷酸受体、内毒素中和蛋白、马乳铁蛋白等在甲醇酵母中均得到了很好的表达[3]。本研究构建了pCPB重组酵母工程菌株,并用自制抗体对上清表达pCPB进行了蛋白质印迹检测。
1实验材料
1.1菌株与质粒
酵母菌株(Pichia pastoris)GS115(Invitrogen公司)。
质粒pPIC9K(Invitrogen公司);p473-pCPB(中科院生物工程中心构建,本室保存)。
1.2培养基及相关试剂
1.2.1试剂蛋白胨,酵母提取物,酵母氮源(YNB)等购自Difco公司;各种氨基酸购自生工公司。
1.2.2培养基YPD培养液:2 % 蛋白胨,1 % 酵母提取物,2 %葡萄糖;SD培养基:1.34 %YNB,氨基酸,2 %葡萄糖;MM培养基:1.34 % YNB,4×10-5 %生物素,0.5 % 甲醇;MD培养基:1.34 % YNB,4×10-5 %生物素,2 %右旋糖酐;BMGY:1 %酵母提取物,2 %蛋白胨,100 mmol/L磷酸钾,pH 6.0,1.34 %YNB,4×10-5 %生物素,1 %甘油;BMMY:1 %酵母提取物,2 %蛋白胨,100 mmol/L磷酸钾,pH 6.0,1.34 %YNB,4×10-5 %生物素,0.5 %甲醇;10×混合氨基酸用量表(组氨酸缺陷):L-缬氨酸(1 500 mg/L),L-异亮氨酸(200 mg/L),L-精氨酸(200 mg/L),L-赖氨酸(300 mg/L),L-甲硫氨酸(200 mg/L),L-苯丙氨酸(500 mg/L),L-苏氨酸(2 000 mg/L),L-酪氨酸(300 mg/L),L-尿嘧啶(200 mg/L),L-腺嘌呤半硫酸盐(adenine hemisulfate salt,400 mg/L),L-色氨酸(200 mg/L),L-亮氨酸(1 000 mg/L)。
1.3引物
pCPB-s3:5’-GCGGAATTC CAT GCT TCC GAG GAG CAC TTT GAT GGC-3’(含EcoR I 酶切位点和编码N端9个proCPB氨基酸)。
pCPB-a:5’-CGC AAG CTT TCA CTA ATA TAG ATG TTC TCG GAC ATA ATT-3’(含Hind III酶切位点和编码C端10个氨基酸)。
2实验方法
2.1pPIC9K-pCPB的构建
以本室构建的重组质粒p473-pCPB为模板[2],用引物pCPB-s3和pCPB-a对模板进行PCR,胶回收后以Not I 和EcoR I 位点酶切将pCPB连接入同样酶切的质粒pPIC9K,测序鉴定pCPB基因以正确读框插入pPIC9K。
2.2pPIC9K-pCPB多拷贝重组子的筛选
用Sal I 酶切pPIC9K-pCPB线性化,用YPD培养甲醇酵母GS115至A600nm至1.2~1.5,按酵母质粒转化方法电击转化线性质粒pPIC9K-pCPB,于SD(His-)平板筛选,第2天至第3天可见含重组基因菌落出现。然后用含不同浓度G418的YPD平板筛选多拷贝重组子。
2.3GS115 pPIC9K-pCPB的诱导表达
选取2个较大的菌落分别接种至BMGY培养基中,第2天离心后倾去培养基,用无菌水洗涤1次,离心去上清,将菌体接入BMMY培养基,此后每天补加0.5 %甲醇,96 h中每12 h取1 mL培养液离心,留取沉淀和上清样品。
2.4pCPB多克隆抗体的制备与滴定
溶解大肠杆菌表达的pCPB,加入免疫佐剂混匀后免疫家兔,于颈背部皮下、足垫点状多点注射,2周后加强1次,1月后再加强1次。1月后心脏取血,离心,得血清,即为兔抗鼠CPB抗体,将抗血清稀释至不同浓度,与二抗结合,显色,进行抗体滴定。
2.5蛋白质印迹检测pCPB在酵母中的诱导表达
将诱导后96 h的保存样品,破碎菌体后离心上清,与酵母诱导后的培养基同时电泳,转膜后进行蛋白质印迹检测。
3结果与讨论
3.1pPIC9K-pCPB的构建及pPIC9K-pCPB多拷贝重组子的筛选
SD(His-)平板筛选含有插入基因的重组甲醇酵母,第2天至第3天后可见含重组基因菌落出现。挑取较大的菌落至含0.25 mg/mL G418的YPD平板上,第2天再将能生长的菌落挑至含0.5 mg/mL G418的YPD平板上,依次挑取至含0.75,1.0,2.0 mg/mL G418的YPD平板上,最终选取2个菌落做诱导表达。
3.2兔抗大鼠重组pCPB的抗血清制备
用自制的标准重组CPB检测制备的抗血清,结果见图1。由图1可见,抗体稀释1∶5 000,可以得到清晰的明显特异显色的蛋白质印迹条带,表明抗体制备成功,而且抗体滴度较高。
M. 蛋白Marker;1,2,3分别为重组CPB的SDS-PAGE的结果(分别为5,10,15 μL CPB样品);4,5,6分别为对应1,2,3的蛋白质印迹结果(所用抗体为自制兔抗重组大鼠pCPB抗血清,稀释梯度1∶5 000)
3.2酵母表达pCPB的蛋白质印迹检测
将2株重组酵母培养诱导后检测上清及对菌体行蛋白质印迹检测,结果见图2。由图2可见,4个样品经过蛋白质印迹验证(抗体1∶10 000稀释),在2号菌株诱导后培养液上清中杂出条带,45×103,为pCPB条带的位置,其余3个样品都没有杂出条带。因此,此菌株即为筛选到的阳性菌株。
M. 蛋白Marker;1. 酵母菌株1号菌体;2. 酵母菌株1号发酵后培养液;3. 酵母菌株2号菌体;4. 酵母菌株2号发酵后培养液;5,6,7,8分别对应于1,2,3,4的蛋白质印迹结果(所用抗体为自制兔抗重组大鼠pCPB抗血清,稀释滴度1∶10 000)
图2蛋白质印迹检测pCPB在酵母中的分泌表达
2002年以来,本实验室一直从事重组CPB的研究。利用重组大肠杆菌,分别从包涵体表达和可溶性表达两方面进行研究,包涵体表达蛋白经进一步复性、激活得活性CPB[2, 4],上清表达的pCPB经激活、纯化后也得活性CPB[5]。本研究进行了pCPB酵母表达的尝试,得到了pCPB的重组酵母菌,为进一步利用该重组酵母制备重组CPB奠定了基础。
参考文献
[1]Burgos F J, Salva M, Villegas V, et al. Analysis of the activation process of porcine procarboxypeptidase B and determination of the sequence of its activation segment[J]. Biochemistry, 1991, 30(16): 4082-4089.
[2]Li S X, Zhang Y J, Tian L P, et al. Cloning, expression of a new procarboxypeptidase B gene in Escherichia coli and purification of recombination carboxypeptidase B[J]. Protein Pept Lett, 2003, 10(6): 581-590.
[3]王黎明,王琦,梅汝鸿.巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展[J]. 微生物学杂志,2004,24(2):42-45.