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【关键词】 急性白血病;髓过氧化物酶;毛细管电泳
白血病(leukemia)是累及造血干细胞的造血系统恶性肿瘤。由于白血病亚型不同,诊断标准也有不同,治疗方案及预后亦不尽相同。所以白血病的分型诊断在临床工作中具有重要的指导意义。髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)被认为是髓系特征中最具特异性的标志,在各型白血病的分型诊断中具有重要意义。目前通过细胞化学染色、流式细胞术[1,2]或电镜[3]对MPO的检测及应用Northen、RTPCR等技术对MPOmRNA的检测已有诸多报道[46]。但以上均为定性检测,对MPO的定量检测尚未见文献报道。本研究采用毛细管电泳法 ( capillary electrophoresis,CE)定量检测MPO在不同类型ANLL中的表达,力争为MPO的检测找到一种更为灵敏的方法。
1 材料和方法
1.1 临床资料
36例初发及复发急性非淋巴细胞白血病(acute nonlymphocytic leukemia,ANLL)患者均来自我院2005年6月至2006年1月门诊及住院病人,其中FAB分类M1 4例、M2 7例、M3 9例、M4 6例、M5 8例和M6 2例,男19例,女17例,年龄15-70岁。全部病例均与化疗前采集骨髓制备标本,并常规进行细胞化学染色。对照组30人,男17人,女13人,年龄22-34岁,均为健康 体检者,经询问病史、体检、实验室及影像学检查无异常者。
1.2 试剂及主要仪器
PBS缓冲液(pH=7.4,武汉博士德生物工程有限公司);淋巴细胞分离液(密度=1.077,济南爱博有限公司);过氧化氢(H2O2,含量30%,分析纯,江苏徐州试剂二厂,徐州,江苏);氢醌(H2Q,分析纯,中国医药集团上海化学试剂公司);辣根过氧化物酶(HRP,活性>250 u/mg,上海丽珠东风生物技术有限公司);弹性石英毛细管(内径25 μm,外径375 μm,河北永年光导纤维厂,河北);碳纤维(直径6 μm,山东大学碳纤维研究中心,山东);10412普通台式离心机(上海手术器械厂);高压电源(9323HVPS,北京市新技术应用研究所,北京);CHI化学分析仪(CHI800型,CHI仪器公司,Austin,TX,USA);微型电解池(自制);三电极体系:碳纤维束微盘电极(工作电极),铂丝电极(辅助电极),饱和甘汞电极(SCE,参比电极);781型磁力加热搅拌器(上海南汇电讯器材厂);超声清洗机(Branson200型,中美合资必能信超有限公司,上海)。
1.3 实验方法 单个核细胞的分离:所有病例均在无菌条件下抽取骨髓2 ml注入EDTA抗凝试管中,加入4 mlPBS(pH7.4)缓冲液稀释。采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离单个核细胞。分离好的单个核细胞中加入2 ml PBS液,混匀,制成悬浮液,用细胞计数器计数并求出细胞的密度。
细胞提取液的制备:采用冷冻复融法和超声波溶膜法。将已计数的1 ml在PBS溶液中的细胞悬浮液放到20 ℃冷冻,在37 ℃融化后,置于冰浴中在超声波中溶膜,得到细胞提取液。在实验时,直接将细胞提取液用PBS稀释一定倍数后使用。
细胞提取液中MPO的测定采用毛细管电泳电化学检测法,实验中以PBS为电泳缓冲液。将细胞提取液在5.0 kV进样10 s后,在20 kV的电压下运行60 s。再在毛细管中与底物氢醌(H2Q)和过氧化氢(H2O2)柱上孵育10 min,H2Q和H2O2与MPO发生催化反应,反应方程式示于式[1]。生成的苯醌(BQ)又随着压力向检测端移动,到达检测器时,用碳纤维盘束电极检测。在电极上的反应示于式[2]。
H2Q+H2O2MPOBQ+2H2O(1)
BQ+2H++2e-H2Q(2)
由于过氧化物酶催化底物的反应为专一反应,电化学检测到的是BQ,所以电泳峰便对应于细胞提取液中的MPO活性。细胞提取液中MPO的活性是根据已知的辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)的标准曲线定量的。不同浓度的标准HRP溶液在相同检测条件下进行毛细管电泳电化学检测,可以得到HRP的标准曲线。由于MPO和HRP都是过氧化物酶,在催化过氧化物的性能以及活性的表征和测量方面是相同的。而酶的活性大小,是用酶的活性单位(u)来度量。即使酶的来源不同,其活性测定方法是相同的,因为它们都是转化相同的过氧化物(底物)。所以可以用标准HRP的活性定量MPO的活性。
根据多次测定细胞提取液的结果计算得到细胞提取液中MPO的平均活性浓度(u/ml),再根据细胞悬浮液中细胞浓度(cell/ml),可以计算出每个细胞中MPO的平均含量(u)。
1.4 统计学处理 用SPSS12.0统计软件将所有检测数据及病例相关资料建立数据库,对照组与ANLL组间的比较采用两样本均数的t检验;ANLL各亚型间的比较采用方差分析F检验,(P
2 结果
MPO在ANLL中的表达结果及其与ANLL各亚型之间的关系见表1、表2和表3。
将M1- M5型MPO平均值进行方差分析结果示:M3病例的MPO平均值最高,与其他4组比较差异有统计学意义(P0.05),但与其他3组比较差异有统计学意义(P
7例M2为M2a 5例,M2b2例;6例M4 为M4a 4例,M4b2例;8例M5为M5a 3例,M5b5例。因各亚型病例数限制,未对其两两之间的比较进行统计学分析,但检测其细胞中MPO值的结果(如表3),符合M2b>M2a、M4a>M4b和M5b>M5a趋势。
对于日用洗涤剂这种同质化非常严重的产品,企业间的竞争很大程度上体现在企业的营销能力和策略水平。白猫是怎么打好自己的营销牌,在洗洁精市场独占鳌头的呢?
“前有狼后有虎”
至今已有50年历史的上海白猫,在计划经济年代是中国洗化行业的一艘旗舰。白猫眼看着身边的诸多日化业同行,纷纷倒在宝洁、联合利华、花王、德国汉高等世界日化业巨头凌厉的市场广告攻势之下,式微于新近崛起的雕牌、奇强、立白等日化新锐强大的市场宣传促销之中。目前,上海白猫有限公司在承担着2000多名退休工人退休金的同时,还要负担着其作为国有企业所应负担的其他各项费用。
自上世纪90年代以来,国内日化企业与跨国日化巨头的竞争硝烟就遍布中国。无论是从规模上还是程度上看,中国民族日化工业正在遭受史无前例的冲击。
跨国日化巨头最重要的手段之一便是高密度的广告宣传和巨额的市场投入。高强度、高密集、高质量的广告投入是其进入市场的首选策略。仅宝洁公司在中国一年的广告投入就近10个亿,这几乎相当于几个中小厂家一年的销售额。
自上世纪90年代前期始,民营日化企业开始崛起。首先是浙江纳爱斯公司的“雕牌”和山西南风集团的“奇强”发难,由奇强洗衣粉挑头,雕牌洗衣皂紧随其后,发起了一场从农村包围城市的洗化市场争夺战,以当时市场上最低的价格,以最优惠的促销政策,从最边远的乡村集镇零售终端铺货开始,从下游狙击白猫、汉高、活力28等洗涤产品市场。他们的产品质优而价廉,基本上占领了中低档洗涤剂市场。
在这种情况下,对上海白猫而言,只能用“前有狼后有虎”来形容。如何在市场推广费用极其有限的情况下,进一步研究市场特点,摸清消费者的消费习惯,更有效地拓展市场,成了摆在白猫高层经营管理者面前的首要问题。公司总经理马立行带着经营决策层的全体人员,从中国最南边的海南岛,到最北边的东北三省,实地调查中国日化市场的通路、终端运转状况以及竞争对手的实际措施和经营手段。
在回上海不到一周的时间内,白猫在汇集公司主要经营团队的研究结论后,提出要靠三个字去开拓市场——“抢、拼、搏”:抢就是抢市场、份额和时间;拼就是拼实力,表现在资本、网络、人力等方面;搏就是搏智力,“靠脑子做市场”,体现在竞争战略、市场策略上。
搭建深度分销机构——经营分公司
于是围绕着“抢、拼、搏”的经营方针和理念,白猫推出了当时在中国日化业具有开创意义的省级分公司模式。
针对上海白猫产品的高、中、低档较为全面的情况,从中间向两头扩展是其最佳的市场策略。而搭建旨在进行深度分销的经营机构——各省级分公司,可以一方面充分地向农村乡镇市场渗透,进行深度分销,以弥补白猫传统上较为薄弱的市场环节;另一方面利用各省级分公司所在地的优势,在省辖的主要城市里充分做好自己的品牌。这样可以最大限度地避免当时几乎置许多民营、国有日化企业于死地的严重问题——坏呆帐,还能够控制住扰乱日化企业正常盈利能力的经销商窜货现象。白猫的这一重大决策可谓一举四得。
上海白猫(集团)有限公司在两年的时间里,投资约3000万元建立了29家省级销售分公司,遍布全国各地,构成覆盖全国城市、乡镇和农村市场的完善的营销网络。公司直属的营销人员已达到1000余人。如果没有这样迅速建立的销售网络,白猫产量和销售额出现大幅增长是不可想象的。在搭建完成经营分公司后的几年间,上海白猫的销售量几乎每年呈30%以上的速度增长,从设立分公司前销售额约为2亿元,到成立当年就达到3.4亿元,五年后的今天已达到18.7亿元。
白猫认为虽然从短期情况看,用3000万元搭建省级销售分支机构,投入的费用好像是大了点,但是,相对于其他日化厂家存在的经营风险来讲,实在算不上大。事实也是如此,上世纪90年代初曾经叱咤于日化行业的国内某著名品牌,到1994年坏呆帐已达到近1个亿!白猫凭借其分公司策略,得以跳出坏呆帐的死亡陷阱,得以独善其身。而当初同属占有全国洗化市场70%以上的诸多上海日化同行们,却由于坏帐缠身等原因而被迫退出了日化市场。
深度分销继续拓展——经营部
从1998年始,上海白猫又开始着手新一轮的渠道创新,在各地的二、三线城市相继建立紧密结合型的经营部。
白猫在各地的经营部通过科学有效的考核,在实现经营部、经销商、终端商各方应得利益的情况下,进一步夯实经销渠道,加强对各级终端的控制力,杜绝坏帐和窜货现象。目前,白猫的经营部里坏呆帐已为零,并通过具体的考核来防止窜货现象,提高各地县级城市经销商经营白猫品牌的积极性。
原来由经销商经营白猫产品在大连地区的销售,经销商财务帐上应付白猫货款最多时达到五六百万元,而且是长期拖欠,而大连经销商的年销售额却只有二三百万元。在白猫大连经营部建立的当年,其销售量就猛窜至800万元,却没有出现一分钱坏帐。当地的沃尔玛、家乐福等现代终端的产品出样率达到73%以上,而原来花费更多的费用,出样率也不到20%。现在大连经营部已成为白猫北方现代终端的总洽谈商,以期在现代终端商处获得更多的谈判价码。
在一条叫做“黄色街”的街上有一幢房子非常老,那里所有的住户搬走已经有一年了。这幢房子现在是空空洞洞,一点声音也没有。它看上去像是被封闭了,再也不会有人要搬进去住了。但有些孩子却跑到那里去瞧了一下。
“怎样拆掉它呢?”罗茜妮问。
“第一步从屋顶开始。把那些瓦堆在院子里,留待以后再用——那时人们将会再建一座新房子。”维克多解释着说。
“我们进去瞧瞧,看里面有些什么东西!”波布说。他们于是便都涌进屋里去,涌进楼梯间去,他们跑进一些房间里,大声叫喊。他们所能听到的只是那些空洞的房间所发出的回音。在厨房里,罗茜妮发现了一只白猫。它在眨着眼睛,伸着懒腰。
“只有你住在这里吗?”大家问它。
“喵。”它回答说。
“那么你就算是我们的猫了!”罗茜妮说。
这只猫儿又喵喵地叫了几声。
但是在市政厅里,人们给工人下达了这样一个指示:
“到黄色街去把那里的三号老房子拆除掉。”
工人们坐着卡车出发了。他们穿过了五个十字路口,然后他们就向左拐。黄色街上来往的汽车不多。钻进那幢老房子的孩子们都跑到窗口边来。卡车在三号门口停下了。工人们抬起头来向这房子瞧了瞧,不知道怎么办才好。他们喊:
“这不是要拆除的那幢房子!它里面住满了孩子呀!”
他们于是便离开了。他们在城里各处去找另一条黄色街和另一座三号房子。但他们什么也没有找到。
在厨房里,孩子们围着那只猫儿坐下来。他们要做一些计划:在回到自己家里去吃早饭以前,他们都答应午后一定要在这三号集合。这座老房子现在已经是属于他们的了。他们将要在这里过有趣的生活!
瞧他们是怎样安排这幢房子的——他们从自己父母家的地窖和储藏室里带来了一些旧木匣子,然后把匣子又改装成为桌子、椅子和小柜。每人都有一个小柜子,里面摆设着他们自己心爱的一些东西:金纸和银纸啦、玻璃球啦、从杂志上剪下来的一些彩色画啦、一些有趣的书啦、小镜子啦、颜料管啦、一把锤子啦、弹弓啦,等等。
孩子们用彩色纸剪出一些擦嘴用的餐巾。他们还用罐头瓶子做出一些漂亮的花瓶。他们还从家里搬来一些花钵子,现在也摆在窗台上。这座房子现在又变得年轻了。
但是市政厅又把工人们喊去,向他们传达了关于这个城市的计划,说:“就在今天,黄色街上的那座三号房得拆除掉!”
工人们在那个三号房面前经过了好几次。每次他们都停下来,对自己说:
“但这并不是一个老房子呀。它里面住着人。每个窗台上还放着花!”
他们又离去了。这整天他们寻找那另一条黄色街和那另一座三号房子,但是毫无结果。
孩子们也把院子布置了一下。他们在这里种了欧芹菜、胡萝卜、萝卜和草莓。他们还给这个院子修了一个篱笆。接着他们又在大门上公布了一个住户名单。
他们的父母现在发现,要劝说他们的孩子每晚回到家里,回到自己床上去睡觉,倒成了一件相当困难的事了。那只白猫已经对他们宣誓,要效忠于这些孩子。它每天夜里迈开它那天鹅绒般柔软的步子,在这幢房子的周围巡逻。它不让其他人进屋。
有一天气温变得冷起来了。罗茜妮在炉子里生起火,给大家煮可可茶吃。十个孩子围着一张大桌子坐下来。这儿确实很舒服,很温暖。
载着工人的卡车又在这座房子面前停下了。孩子们跑到窗口那儿,喊:“叔叔们好!叔叔们好!”
工人也回答说:“你们好!”接着波布也走下楼来了。他和他们交涉,他们是否可以运点白沙子来,把院子里的那些小径铺上沙子。
“当然可以,我们将搬运一些来。”工人们表示同意。他们接着就离开了,说:“这是我们第三次被派来拆除黄色街三号的房子!不过这并不是一座老房子呀。每次它显得更年轻。它的烟囱甚至还在冒烟。这里住满了孩子,院子也料理得很好,而且门槛上还坐着一只漂亮的白猫。”
洗衣粉是中国本土品牌最早面对国际品牌竞争的行业之一,也是竞争最激烈的行业之一,到目前为止,其品牌格局的演变大致经历了四个阶段。
第一阶段:( 1983 年以前)白猫独秀
计划经济体制下,厂家只负责生产,销售则由国家统一实行配给。 " 白猫 " 洗衣粉则成了这一阶段国家在洗衣粉配给中的主要产品,从而也奠定了它在消费者心目中的重要地位。
第二阶段:( 1984-1993 年)活力 28 开创新纪元
上世纪 80 年代初期, " 活力 28" 超浓缩无泡洗衣粉的问世,开创了中国洗衣粉历史的新纪元,同时 " 活力 28" 也敢为天下先,在当时企业广告意识不强的情况下,在中央电视台不间歇的播放 " 活力 28" 的广告,一时间 " 活力 28 、沙市日化 " 的广告语和 " 一比四、一比四 " 的广告歌走进千家万户。 " 活力 28" 从此天下扬名,一跃成为国内洗衣粉行业的大哥大。同时,海鸥、熊猫、桂林、天津等地方品牌开始雄踞一方。
第三阶段:( 1994--1997 年)外资四大家族主导
这一时期,外资洗衣粉开始在中国控股合资或直接设厂生产。凭借丰富的促销手段、高密度的广告宣传、不断的技术革新,它们在市场上取得节节胜利,在强大的外来攻势下,许多国内品牌要么选择了与外国洗衣粉厂合资,要么无奈的退出市场。市场基本由联合利华、汉高、宝洁、花王四大外资集团所主导。
第四阶段:( 1997- 今)本土品牌成功阻击四大家族
由于成本过高,外资洗衣粉一直未在中国市场有好的盈利表现,所以广告、促销力度渐渐减弱,再加上国内一段时间内消费低迷,消费者也渐渐转向购买价格低廉的国有品牌。而一些国内品牌借此机会,凭借价格和广告优势,确立了自己的地位,如奇强、立白等,而雕牌纳爱斯更是在中低端市场独霸天下。
二、 2002-2003 年度品牌竞争格局
(一)总体竞争格局
洗衣粉是中国快速消费品市场充分竞争的领域。洗衣粉行业品牌众多,产品林立。有以量取胜的雕牌、立白,有跨国巨头宝洁、联合利华、日本花王等,也有盘踞一隅的地方性品牌,整个行业充满了变化与变革的契机。
(二)市场竞争深度分析
1 .市场渗透率分析
进入 21 世纪后,雕牌在洗衣粉市场上演了一出从北到南,由西向东横扫天下的好戏。
全国 30 城市市场渗透率变化图洗衣粉作为家庭日常必需品,其市场渗透率近乎100% ,市场容量已经基本饱和。另一方面,尽管人们的洗衣频次似乎有所增加,但趋势依然不明显。所以任何品牌的增长都以蚕食其他品牌的地盘为代价。全国洗衣粉市场竞争中,只有两个品牌在增长:雕牌一枝独秀,大幅上升;立白避其锋芒,小幅上涨,其他品牌均呈败退之势。
截止 2003 ,洗衣粉市场大盘已定:
( 1 )华北区雕牌急剧增长, 2001 攻下华北。奥妙勉力坚守第二阵营,活力28一落千丈,与其它品牌共同据守第三阵营。
( 2 )华东区奥妙一直雄霸第一,白猫第二。但 2003 年,雕牌一举攻下华东,坐上华东区头把交椅。
( 3 )华南区品牌竞争尤酣,立白、汰渍、雕牌均全力攀升,甚至 2002 已呈颓势的奥妙也在奋力上扬。尽管雕牌依然表现出最强劲的上升幅度,但鹿死谁手?犹言过早。
( 4 )雕牌 2002 攻下华西,奥妙和汰渍在第二阵营竞争,但似乎汰渍率先开始动作。
( 5 )东北区雕牌一马当先,其他品牌一泻千里,溃不成军。汰渍微弱地反抗成功。
2 、品牌忠诚度分析
雕牌较高的忠诚度为其一马平川奠定了坚实的基础,或者说,雕牌之所以能在全国范围内所向披靡,得益于其较高的品牌忠诚度。
三、主要品牌手段分析
1 .雕牌
雕牌的成功,除在区域市场的运筹帷幄、各个击破外,其对于自身的品牌定位及对核心消费人群的诉求,是其制胜的另一法宝。
作为家庭必需品的洗衣粉,价格不能不是一项考虑的因素。尤其是洗衣频次高、洗衣粉消费多的家庭,对价格越敏感。雕牌采取了走中低端路线、瞄准家庭主妇的方法,不仅瞄准了最核心最大量的消费人群,而且为自己开辟了一块广阔的天地。
此外,从雕牌消费者的心理定位看,雕牌依然瞄准比较传统、保守,具有奉献精神的那部分家庭主妇的心理,而她们,是家庭主妇的主流和主体。相反,象奥妙的消费者,则倾向于追求自我,具冒险精神,更具职业女性的态度。而职业女性,注定不会成为洗衣粉市场的消费主力。
2 .奥妙
1999 年,经过多年摸索后的联合利华,向宝洁发起总攻,当年11月,联合利华将两款新推出的 " 奥妙 " 洗衣粉 --- 奥妙全效和奥妙全自动洗衣粉全面降价,降幅分别达40% 和30% ,400 克奥妙洗衣粉的价格从近 6 块钱一下落到 3.5 元,这个价格当时仅相当于宝洁产品价格的一半左右。由于奥妙精心营造的高档形象已深入人心,老百姓突然能够买得起以前买不起的高档洗衣粉了,市场由此洞开,奥妙也得以超越宝洁的汰渍。这种局面维持到今天。
3 .汰渍
作为宝洁旗下的主打品牌,在进入中国市场之初,凭借丰厚的财力及自己准确的产品诉求,在短时间内成为市场的领导品牌,虽然这几年由于营销力度减弱而出现市场分额下降的情况,但它在消费者心目中还是有较强地位的。
4 .立白
1994 年进入洗衣粉行业的立白,在一开始,就选择了农村包围城市的策略,在每个县找经销商,和每个经销商探讨立白的销售与经营,在双方的共同努力下,立白站稳了根基。
〔摘要〕
〔关键词〕 新古典经济学;
罗尔斯曾指出,“在一个组织良好的社会里,即一个由一种共同的正义观有效调节的社会里,对何为正义非正义也有一种公开的理解”。〔8〕但是,当前正义不确定论充斥社会。而且,尽管西方学术界已经发展了相当成熟的有关社会公平正义的理论,但某些主流经济学家却不甚了了乃至故意视而不见,想当然地以评价标准的主观性宣称,使其制度好坏没有一个直接而一致的评价标准。与此同时,歪曲地利用“不管黑猫还是白猫,只要捉住老鼠的就是好猫”的“尚方宝剑”为目前这种现状辩解:只要经济还在高速增长,就意味着这个社会制度是好的,并且是在不断改进的。但是,大量的历史证据表明,短期内社会制度的健全程度与经济增长之间并不成明显的正向关系,且经济的快速增长往往是发生在旧制度已经崩溃而新制度还没有建立起来,即社会制度还没有完善的时期。关于这一点,剑桥大学的张夏准在《踢掉梯子:历史视角的发展战略》一书中作了较为详细的剖析。〔9〕一个明显的事实是,在北洋军阀控制的1914-1922年,
需要指出,尽管制度的相对无序在一定时期内可以促进经济的高速增长,甚至无序中的经济高速增长似乎成为人类社会的常态,但是,这种无序式增长方式具有严重的缺陷,从而难以长期维持高速增长态势。在理论上,我们可以从两方面加以分析。 一方面,无序的增长主要靠资源粗放式投入所促动,是无发展式的增长,这种增长动力必然是有限的,如果不实现从无序到有序的转变,那么社会发展最终将趋于停滞。世界上许多中等发达国家当人均gdp达到4000美元左右时,经济增长后劲便跟不上了,问题就在于粗放型的发展耗竭了资源。克鲁格曼指出,传统社会主义的产出增长是没有什么值得宣扬和推崇的,因为这主要是粗放式投资的结果,正因如此,“简单地用它们过去的增长速度预测未来,很可能大大地高估了它们真正的前景”,因为“通过投入扩张、而不是通过提高单位投入的产出来促进经济增长,不可避免地会受到报酬递减的约束”。〔14〕其实,不仅传统计划经济的社会主义国家如此,20世纪50年代到80年代东亚新兴国家的发展也是如此,工业革命时期的西方经济起飞也是如此,网
特别是,一些经济学者对人类社会发展理论几乎一无所知,却又热衷于基于所谓的历史主义观点,将