大一学习计划书

前言：想要写出一篇令人眼前一亮的文章吗？我们特意为您整理了5篇大一学习计划书范文，相信会为您的写作带来帮助，发现更多的写作思路和灵感。

大一学习计划书范文第1篇

活动对象：**师大在校大学生

主办单位：**师范大学团委

承办单位：**师范大学青年志愿者指导中心

活动主题：用笔尖肆意挥洒，尽显当代大学生风采

活动目的：通过征文的形式，为热爱文学的同学们提供一个学习交流、展现自我风采的大舞台，让自信青春的同学们来传播精彩。

活动准备：

1、宣传部联系校广播站、师大报、传播人等校内影响力较大的媒体，协助我们共同宣传此次征文活动。

2、下发“‘托起梦想，激扬青春’系列征文比赛”文件给各个学院，由班级宣传委员通知到每位同学。

活动排期：

奖项设置：

奖品设置：

1、所有奖项均有奖状，金、银、铜奖全场大奖均有奖金，优秀奖均有纪念品。

2、金奖奖金300元、银奖奖金200元、铜奖奖金100元。

注奖励办法依据本期策略单，若有调整，解释权归广告社所有。

注意事项：

1、参赛作品必须原创，不得抄袭，一经发现抄袭现象，立即取消比赛资格，并在学校内通告批评。

3、所有参赛作品概不退还。主办单位有权对参赛作品巡展、结集出版、。

4、最后附有报名表。

活动经费预算：

奖金：1000元

纪念品：50元

奖状：10元

总计：1060元。

**师范大学青年志愿者指导中心策划部

附二心理咨询活动策划

活动时间：11月16日至11月18日

活动地点：青年文化广场

活动对象：**师大在校大学生

主办单位：**师范大学团委

承办单位：**师范大学青年志愿者指导中心

活动背景：

“心理健康教育”是大学生德育的基础。同时，社会转型期出现的一些问题，也成为影响大学生心理健康的重要因素。特别是刚进校的大学生，面临适应大学生活的巨大挑战，特别是心理方面出现诸多的不适应，有针对性的做好大一学生心理健康教育尤为重要。

大一学习计划书范文第2篇

【关键词】 川芎嗪注射液;黏附分子;信号转导;血管平滑肌细胞

【Abstract】 Objective To investigate the Tetramethylpyrazine (TMP)mediating antiproliferation effect，and define its molecular mechanism in cultured rat aortic vascular smooth muscle cells (VSMC). Methods Cultured cells proliferating model of rats VSMC were established by plateletderived growth factor (PDGF). Cultured cells were randomly pided into three groups: control， PDGF (20 ng/ml)and TMP treatment (20， 40， 80 μmol/L) groups. The number of VSMC were accounted under microscope. The expression of intercellular adhesion molecular1 (ICAM1) and integrinlinked kinase (ILK) were analyzed by Western blotting respectively. Results The proliferation of rat VSMC induced by PDGF could be inhibited by TMP significantly in a dosedependent manner. A remarkable decrease of ICAM1 and ILK expression were demonstrated in the TMP group compared with the PDGF group.Conclusions The antiproliferation effect of TMP associates with suppression of adhesive molecules.

【Key words】 TMP;Adhesive molecules;Signal transduction;Vascular smooth muscle cells (VSMC);Rat

川芎嗪是从具有活血化瘀作用的中药川芎中分离得到的一种生物碱，化学组分为四甲基吡嗪，目前已在临床上广泛用于心脑血管疾病的治疗。我们前期研究证明，川芎嗪通过作用于血管平滑肌细胞(VSMC)而发挥活血化瘀的作用〔1〕，但缺乏在分子水平上阐明其机制的研究。细胞间黏附分子(ICAM)是一类介导细胞与细胞间或细胞与细胞外基质间相互作用的膜表面糖蛋白，在单核细胞及血小板的黏附聚集过程中发挥着重要的作用，与细胞增殖密切相关〔2〕。本研究用血小板源性生长因子(PDGF)刺激体外培养的大鼠VSMC复制细胞异常增殖模型，从抑制黏附分子信号传递角度探讨川芎嗪抗VSMC增殖的机制，为从分子水平上阐明其活血化瘀作用机制提供实验依据，明确其作用靶点。

1 材料与方法

1.1 材料 健康雄性5周龄SD大鼠，体重(100±10)g，由河北省实验动物中心提供。川芎嗪注射液 (40 mg/2 ml)由北京第四制药厂提供。DMEM培养基、胎牛血清FBS由Gibco公司提供。PDGF、小鼠抗ICAM1单克隆抗体、小鼠抗整合素耦联激酶(ILK)单克隆抗体、兔抗GAPDH单克隆抗体、HRP标记的羊抗小鼠IgG二抗、发光试剂等均购自美国Santa Cruz公司。其他化学试剂均为进口或国产分析纯。

1.2 VSMC的培养 5周龄雄性SD大鼠用25%乌拉坦按照0.4 ml/100 g体重进行腹腔注射麻醉，于无菌条件下取大鼠的胸腹主动脉。用0.01 mol/L PBS洗净管腔内血液并剥脱血管外膜后，按贴块法分离培养VSMC。待细胞爬满培养瓶底后，用0.25%胰蛋白酶消化传代。倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况，用光镜及免疫组化的方法进行细胞鉴定。取3～6代细胞进行实验。

1.3 细胞分组 取传代培养的VSMC接种于细胞培养瓶中。待VSMC在含10%胎牛血清的DMEM培养液中生长至60%～70%融合时，换无血清培养基饥饿培养24 h，使细胞同步化于静止期。实验随机分为对照组、PDGF刺激组和川芎嗪组。对照组单纯加入培养液5 ml;PDGF刺激组添加PDGF使其终浓度为20 ng/ml;川芎嗪组先用不同浓度 (20、40、80 μmol/L) 的川芎嗪注射液预孵育1 h，然后再加PDGF(20 ng/ml) 刺激24 h。收集各组细胞进行实验。

1.4 Western印迹分析 提取各组细胞的蛋白，用改良的Lowry法测定浓度。取各组等量蛋白提取液经8% SDSPAGE电泳分离后，半干式电转至PVDF膜上，5%脱脂奶粉封闭，分别与鼠抗ICAM1单克隆抗体 (1∶300)、ILK单克隆抗体(1∶400) 在4℃条件下封闭反应过夜。用HRP标记的羊抗兔IgG二抗(1∶10 000) 室温反应2 h，经TTBS、TBS充分洗涤后采用化学发光法显影。用美国Kodark公司ID数码成像分析系统分析结果。

1.5 统计学处理 采用SPSS10.0 统计软件包处理，数据以x±s表示，多样本均数比较采用单因素方差分析，组间均数比较采用t检验。

2 结 果

2.1 川芎嗪呈剂量依赖性抑制VSMC的增殖 细胞计数后发现，与对照组比较，PDGF刺激组细胞数量显著增多，增加约3.8倍。20 μmol/L川芎嗪实验组对细胞数目增加的抑制作用不明显，40 μmol/L川芎嗪组具有抑制细胞数量的作用，此时细胞数量约为PDGF刺激组的48%(P

2.2 川芎嗪抑制ICAM1的表达 Western印迹结果经过灰度值对比处理后发现，正常对照组ICAM1的灰度值表达量很小，PDGF刺激组ICAM1的表达量显著增加。川芎嗪组ICAM1的表达量与刺激组相比明显减少，仅相当于其的44%(P

2.3 川芎嗪抑制ILK的表达 Western印迹结果显示，对照组仅有少量ILK表达;PDGF刺激组ILK的表达量明显增加。川芎嗪组ILK的表达量虽然仍旧比对照组多，但与PDGF刺激组相比降低明显，仅相当于其62%(P

3 讨 论

川芎嗪是伞形科植物川芎的主要成分，具有活血化瘀的作用，因可与其他中药组成方剂，故广泛应用于心脑血管疾病的救治。大量研究表明川芎嗪可抑制VSMC的异常增殖，但对其确切的分子机制目前尚不很清楚。现已明确，动脉粥样硬化等血管增殖性疾病的主要病变特征是血管平滑肌细胞向内膜下迁移与增殖、血小板的黏附聚集、单核/巨噬细胞浸润等，黏附分子及其受体的相互作用是引发这一系列慢性炎症过程的主要生物学机制。因此，如何抑制黏附分子的表达或阻断其功能已经成为研制抗血管增殖性疾病的新靶标〔3〕。

单核细胞在血管内皮黏附并向内皮下迁移和泡沫化被认为是动脉粥样硬化的早期病理过程。ICAM1是单链跨膜糖蛋白，属免疫球蛋白超家族成员，分子量为80～110 kD，其受体为整合素家族的黏附分子白细胞功能相关抗原1(LFA1)。已经发现ICAM1/LFA1的相互作用在淋巴细胞与内皮细胞的相互作用、淋巴细胞介导的细胞毒反应过程中具有至关重要的作用〔4〕。ICAM1可分布于白细胞、内皮细胞、平滑肌细胞及某些肿瘤细胞上，正常情况下很少或不表达，在炎症、内皮损伤等病理生理条件下表达增加，从而促进炎症的发生与发展〔5〕。所以阻断黏附分子的作用可能会抑制细胞的迁移与增殖。本研究结果显示，对照组ICAM1很少表达，这可能是由于此时 VSMC 正处于分化状态不具有增殖活性，PDGF刺激组由于细胞异常增生活跃，故 ICAM1 的表达量明显增多，川芎嗪组 ICAM1 的表达量与比PDGF刺激组相比显著减少，提示川芎嗪可能通过抑制ICAM1的表达而发挥抗VSMC增殖的作用。

ILK是1996年Hannigan等〔6〕用酵母双杂交的方法研究整合素β1结合蛋白的过程中被发现的。它具有Ser/Thr蛋白激酶结构，是一个59 kD的细胞内信号蛋白，广泛分布于多种细胞中，对黏附分子信号跨膜转导至细胞内起者关键性的介导作用。ILK可以与整合素β1、β2、β3亚基胞浆区域及细胞骨架相关蛋白结合，以依赖于PI3K的方式被激活。活化后的ILK可以磷酸化蛋白激酶B (PKB) 的Ser473和糖原合成酶激酶3 (GSK3)，进而发挥生物学效应。ILK在调节细胞黏附与生长、肿瘤形成等过程中均起重要作用，是保证黏附信号进一步向下游传递的重要调节分子。为了探讨川芎嗪抑制ICAM1表达的生物学意义，本研究进一步观察了ILK在增殖细胞中的表达变化。Western印迹结果显示，作为黏附分子信号传递关键性调节激酶的ILK在各个实验组中的变化趋势与ICAM1的改变基本相同。以上结果提示，川芎嗪可能通过下调ILK的表达得以阻断细胞黏附与迁移的信号在VSMC内的传递;通过减少ICAM1的表达减弱炎细胞的黏附与聚集，从而削弱局部的炎症反应，起到抑制细胞异常增殖的作用。

总之，本研究结果提示川芎嗪可逆转由PDGF刺激导致的VSMC异常增殖，其分子机制与阻断黏附分子信号传递、抑制黏附分子表达有关。由于中药具有多层次多靶点作用的特点，川芎嗪是否还通过其他途径抑制VSMC异常增殖还需做进一步的探讨。

参考文献

1 狄柯坪，常立功.川芎嗪对家兔肠系膜微血管运动的作用机理与一氧化氮的关系〔J〕.中成药，2003;25(1)：4951.

2 高 岩，夏 蕾，白 明.实验性大鼠肺血栓栓塞症中ICAM1，P选择素的变化及当归注射液的影响〔J〕.中国微循环，2007;11(3)：1769.

3 Shimizu N，Suzuki H， Wakabayashi K，et al.Expression of intercellular adhesion molecule1 and vascular cell adhesion molecule1 in the pig coronary artery injury model：comparison of plain old balloon angioplasty and stent implantation〔J〕.J Cardiol，2004;43(3)：1319.

4 Smith LA，Helim AE.Interplay between shear stress and adhesion on neutrophil locomotion〔J〕.Biophys J，2007;92(2)：63240.

大一学习计划书范文第3篇

关键词：艺术教育；文化素质；人文素养

中图分类号：G42 文献标识码：A 文章编号：1005-5312（2012）05-0238-01

教育的根本任务在于“育人”。所谓“育人”就是要促进个体的身心发展，实现个体的社会化。不论是基础教育还是高等教育，都应把全面提高青年一代的文化素质作为首要目标。而作为文化摇篮的高等学府，更应把构建人文修养和人文精神作为最基本的职能。

加强文化素质教育的探索与实践，是我国高等教育教育思想和观念改革的“催化剂”。在提高人才的整体素质的过程中具有重要的基础性的地位和作用。艺术教育作为人文教育之中坚,其发挥的作用不可低估。但遗憾的是，很多高校都陷入了“智育第一”的误区，长期忽视学生全面素质，特别是人文素质的培养，艺术教育依然只是专业教育的“点缀”。大家普遍认为，艺术教育只适合艺术类或文科学生，学理工的去学艺术没有任何意义，这是教育的功力倾向和实用主义不断蔓延泛滥的结果。事实上，专业教育只是全面发展教育的一项内容，它虽然对拓宽人的认识、启迪人的智慧等方面有重要作用，但主要功能还是使学生获得专门的知识和技能。如果大学生只重视可以带来实际效益的专业知识的学习，而轻视艺术修养方面的教育和熏陶，学校只重视智育不重视人文教育，教师只教书不教人，这种情况，长此以往，将会造成人类素质和文明的倒退，必将引发很严重的社会问题。

所以，艺术教育应该是面向全体学生的审美教育,它通过情感、形象、审美等教育活动,引导学生进行艺术鉴赏与表现,提升自己的文化品位与创新思维能力，而创新思维能力，就是理工科学生应具备的必不可少的能力之一。理工科学生主要运用抽象思维，忽略了人的情感作用，而艺术范畴则侧重形象思维。如果能把抽象思维与形象思维完美的结合起来，便可如虎添翼。从古至今，许多科学家不仅在自己的学科领域卓有成就，而且在人文科学、艺术方面也具有良好的修养。说“音乐成就了爱因斯坦”这话一点不为过。 读过爱因斯坦传记的人，也许都不会轻易忘记这位科学巨匠的另一种生活：他常常陶醉在美妙的旋律中，并在美的和谐中触摸宇宙的“神经”。当他体验到演奏莫扎特的奏鸣曲所带来的那种无法言喻的快乐时，音乐就成为他一生的至爱。用莫斯考夫斯基的话说，扶摇直上的巴赫音乐使爱因斯坦不仅联想到耸入云端的哥特式教堂的结构形状，而且还联想到数学结构的严密逻辑。弹钢琴，是爱因斯坦工作之后的消遣，亦是他工作之前的娱乐或激励。当然，爱因斯坦不是为娱乐而娱乐，而是借助音乐深入那个“广漠无垠的宇宙”，获得超个人的体验。有时，一支乐曲进行到途中，爱因斯坦会突然停下，也许是一段优美的旋律触动了灵感，爱因斯坦又开始了他的科学独白。量子论创始人普朗克家也弹得一手好钢琴，他常与爱因斯坦一起演奏贝多芬的作品。这两位理论物理学大师心心相印，无论在科学领域，还是在艺术领域，他们都用亲密的“语言”互相交流，共同描绘一幅壮丽的蓝图。还有我国著名的地质学家李四光，他年少时就喜欢音乐，小提琴也拉的很不错，并且他还是中国第一首小提琴的作曲者，早在1920年，他在巴黎的时候就创作了小提琴独奏曲《行路难》，全曲有头有尾，层次清晰，最难能可贵的是乐曲立意深邃。毫无疑问，音乐是他们心灵的天堂，他们可以随时摒弃人世间的一切喧嚣，自由自在地漫步于美妙的音乐王国，沉浸于浪漫的遐思和深邃的思想之中。

可以说，音乐是作为一种精神催化剂，悄然渗透到这些科学家的思维中去的。他们对事物有着卓越的直觉能力，这种令人叹为观止的直觉能力，实则与艺术家的想象有异曲同工之妙,所以他们可以被称之为“科学的艺术家”。 诚如郭沫若对科技工作者的忠告：“科学也需要创造，需要幻想，有了幻想才能打破传统的束缚，才能发展科学”。所以在大学生文化素质提高与完善的重要时期，尽管学生所学专业不同，都应有选择地开设艺术课，让他们接受良好的艺术教育。

艺术教育是实施人文教育的基本途径，对于提高大学生文化素质的积极作用是其他教育方式不可替代的。艺术教育能培养人深刻的关怀精神、流畅完美的表达能力以及丰富的想象力、创造力。它不仅能够净化心灵，陶冶情操。而且能活跃思维，激发创造力。是一个发展个性，完善人格，美化人类自身、提高人文修养的重要学科。

大一学习计划书范文第4篇

[关键词] 动物模型；腹泻；细菌感染；淋巴细胞因子

[中图分类号] R574.62 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）07（a）-0037-03

感染性疾病在儿童疾病谱中仍占首要位置，在胃肠道感染疾病中，EPEC在发展中国家儿童中的发病率较高[1-2]，尤其是3岁以下的幼儿，且疾病的危害性大。在儿童胃肠感染性疾病中，近年来有关轮状病毒性腹泻疾病中CD4+T淋巴细胞亚群及其代表因子的研究较多，细菌性腹泻病例散发、不易收集，国内外文献关于细菌性腹泻病例的CD4+ T淋巴细胞亚群代表因子研究少有报道。Th1、Th2、Th17淋巴细胞是CD4+T淋巴细胞的三个亚群，在感染性疾病和免疫相关等疾病中发挥着重要作用。本研究以小鼠细菌感染性腹泻为疾病模型，探索小鼠经口感染EPEC后外周血浆中的Th1、Th2、Th17淋巴细胞代表因子水平的变化以了解小鼠的免疫反应特点。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 普通健康昆明小鼠40只，雌雄各半，体重18～22 g（5～6周龄，购自军事医学科学院实验动物中心，检验检疫合格），于军事医学科学院实验动物中心屏障实验室进行实验。将40只昆明小鼠随机分成生理盐水对照组（20只）和实验组（20只）。

1.1.2 主要实验试剂与仪器 致病性大肠杆菌（EPEC-E2348/69）（军事医学科学院实验动物中心惠赠），小鼠T淋巴细胞因子CBA组合试剂盒（BD美国），血细胞分析仪（NIHON KOHDEN日本），离心机（德国KENDRO公司），-80℃冰箱，涡旋混匀器（IKA公司），流式细胞仪（美国BD公司）。

1.2 感染性腹泻小鼠模型制备

1.2.1 实验组 所有小鼠均单笼饲养，实验前禁食24 h、禁水1 h。①实验开始前对每只小鼠进行眼眶静脉采血，放置于经EDTA钾盐溶液浸润过的容器中，留作血细胞分析。②给每只小鼠灌胃3%碳酸氢钠溶液0.3 mL。③配制浓度为5×108 cfu/mL的致病性大肠杆菌混悬液，灌胃碳酸氢钠溶液半小时后，对实验组每只小鼠灌入细菌混悬液0.5 mL；4.8 h后更换空鼠笼，不添加垫料，观察小鼠的大便性状。

1.2.2 对照组 对照组不作血常规检测，处理因素将致病性大肠杆菌混悬液更换为生理盐水0.5 mL，余处理过程同实验组。

1.2.3 实验中观察及检测指标 ①灌胃8 h后，观察小鼠的大便性状、精神状态、行动动作。②灌胃后第24小时，对实验组所有小鼠采血进行血细胞分析。小鼠精神萎靡、少动或激惹躁动，大便性状为黏液、稀便，血细胞分析白细胞计数结果差异有统计意义则视为造模成功。

1.3 感染性腹泻小鼠外周血T淋巴细胞因子检测

1.3.1 外周血采集及血浆分离 在第24小时对实验组、对照组小鼠行摘眼球法取血，取部分血行血细胞分析，余下经过离心10 min（3000 r/min，离心半径16.5 cm），收集血浆，冻存于-80℃冰箱中以备统一检测。

1.3.2 T淋巴细胞因子检测 上述血浆在37℃孵化箱中解冻， 细胞因子检测具体步骤按试剂盒说明书进行，经过流式细胞仪上机处理后可获得各细胞因子的荧光强度值，通过标准曲线换算成相应浓度（自动换算），结果以ng/L表示。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0软件进行统计学分析，非正态分布及未知分布形态总体采用秩和检验Wilcoxon W检验，数据以M（P25，P75）中位数、四分位间距表示。以P < 0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 感染性腹泻小鼠模型的建立

细菌灌胃后约6 h小鼠出现倦怠、精神萎靡、行动迟缓，部分小鼠出现黏液便、稀便，部分小鼠出现松软大便（较正常粪便含水多）。灌胃前后分别取小鼠血液进行血细胞分析，结果表明实验组小鼠灌胃前后白细胞计数（WBC）水平差异有统计学意义（P < 0.05），中性粒细胞百分比（N%）、淋巴细胞百分比（L%）虽有改变，但差异无统计学意义（P = 0.076 > 0.05，P = 0.086 > 0.05）。见表1。

2.2 血浆中Th1、Th2、Th17淋巴细胞因子水平检测

实验组小鼠在胃肠感染后外周血浆中淋巴细胞因子：IL-2、IL-6、IL-10、IL-4、IL-17A较对照组水平升高，与对照组比较有统计学差异（P < 0.05）。TNF、IFN-γ两细胞因子水平与对照组比较差异无统计学意义（P > 0.05）。见表2。

3 讨论

有关动物细菌性腹泻模型的报道较少，主要是大肠杆菌诱导动物腹泻模型，且多为经腹腔注射诱导动物腹泻，但此类方式与传统的人类经口感染方式不同。本实验采用经口灌喂细菌感染小鼠，与传统的运用中草药及腹腔注射制作小鼠腹泻模型原理不同，模仿人类胃肠感染主要诱发途径（经口感染）。通过主观的观察指标（大便性状、行动动作）和客观实验数据（血细胞分析结果）分析判定小鼠感染，更能模拟人类肠道感染时状态。本次实验开始前采取禁食水以及灌胃碳酸氢钠溶液，目的是为了减少肠内容物及营养物、减少胃酸分泌 ，降低胃肠的屏障功能使得细菌得以存活继而繁殖、黏附，造成肠道组织损伤及其免疫反应以达到腹泻的效果。人类细菌感染一般情况下白细胞计数是升高的，但实验过程中小鼠白细胞计数表现为降低（重复两次），或许是重度感染所致，中性粒细胞及淋巴细胞百分比变化符合人类细菌感染时情况但差异无统计学意义，具体有待进一步研究（但考虑为唯一处理因素，且处理后有统计意义，处理有效）。

细菌肠道感染后，鼠模型的肠黏膜完整性及上皮细胞受损、细菌毒素侵入及局部体液分泌使小鼠出现黏液稀便、精神萎靡等炎性反应的表现，血细胞的组成比例也发生变化。肠道黏膜免疫系统和全身的免疫系统产生应答，有多个细胞因子参与，其中包括Th1类淋巴细胞代表因子：IL-2、TNF、IFN-γ，Th2类淋巴细胞代表因子：IL-6、IL-10、IL-4，Th17类淋巴细胞代表因子：IL-17A，它们在适应性免疫应答过程中起着重要作用。

有研究指出儿童感染性腹泻病发病时体内IL-6水平升高[3-4]，包括细菌性和病毒性腹泻，本实验小鼠在细菌感染后血液中IL-6水平也呈升高趋势。IL-6是多功能炎症细胞因子，升高后可促进B细胞增殖分化和分泌抗体，促进抗体与抗原（病原）结合进而清除病原。

IL-2在T细胞介导的细胞免疫应答中起到促进、维持T细胞活化增殖的重要作用，促进所有亚型T淋巴细胞活化增殖及产生细胞因子。IL-4促使活化的B淋巴细胞分泌IgE和IgG1，促进IgG向IgE类型转换，以自分泌方式促进Th2细胞分化但抑制Th1细胞增殖及其应答等，在变态反应疾病发病过程中有重要作用。关于IL-2、IL-4这两个因子在感染性腹泻病（尤其是细菌性）中少有报道，在一项旅行者腹泻研究中[5]诺瓦克病毒感染组IL-2、IFN-γ升高，主要由Th1细胞介导免疫反应，诺瓦克病毒和产毒性大肠杆菌混合组呈现Th1/Th2双重免疫反应。本研究提示IL-2、IL-4都高于正常对照组，IL-2在疾病过程中促进了各亚型T细胞活化，促进炎症的发展，IL-4的升高一定程度上抑制了Th1介导的免疫反应，同时也促进了Th2介导的免疫反应。

IL-10是一类重要的抑制性细胞因子，抑制IL-2、IFN-γ等促炎细胞因子产生，抑制Th1细胞应答。IL-10作为抗炎介质对脓毒症有一定保护作用，Florquin等[6-7]报道BALB/C小鼠经注射葡萄球菌肠毒素（SEB）4 h后血液中IL-10水平明显高于对照组，IL-10单抗可将SEB攻击小鼠的死亡率提高30%，该作用可被IFN-γ抗体抑制，IL-10是黏膜免疫应答的重要调节因子。本实验提示EPEC肠道感染小鼠血中IL-10水平升高，与上述研究结果类似，对炎症的放大和扩散起到限制作用，避免了炎性连锁反应及无限扩大，具有抑制全身炎性反应综合征、脓毒症的发生发展的作用。

IL-17A主要由Th17淋巴细胞产生，是重要的促炎因子，诱导炎症因子和趋化因子释放，如IL-6、IL-8等，募集、活化中性粒细胞并抑制其凋亡。在儿童感染性腹泻病研究中[8-9]，IL-17A参与疾病的免疫反应，且在迁延性感染中IL-17A水平高于急性期组和正常对照组。本次实验小鼠急性期出现感染性腹泻后IL-17A水平与对照组相比升高且有明显统计学差异，与报道不完全相同。IL-17A在急性期促进炎症反应，使机体产生免疫应答，但若长期高于正常水平存在将导致机体的慢性炎症或相关免疫性疾病发生。动物实验显示[10]，Th17细胞在肠道慢性炎症的维持中发挥重要作用，中和IL-17A后模型小鼠肠道炎症明显减轻。

本研究显示EPEC肠道感染模型中外周血TNF、IFN-γ水平均有不同程度升高，但与对照组比较无统计学差异。IL-2、IL-6、IL-17、TNF、IFN-γ为促炎因子，IL-4、IL-10为抗炎因子，但多个因子同时具有抗炎和促炎两种作用。本研究显示在出现胃肠道感染后，小鼠体内炎性反应并非单纯的促炎或抗炎细胞因子水平升高，也不是表现为单纯Th1类细胞因子或单纯Th2类细胞因子水平升高，呈现Th1/Th2混合免疫状态。虽然Th1细胞因子有一定程度升高，但IL-4以及IL-6、IL-10的明显升高表明在急性期以Th2细胞介导的体液免疫应答占优势，Th1/Th2下降，失衡的Th1/Th2是否能恢复、何时恢复、如何恢复有待进一步研究。如果调高的Th2、Th17细胞因子水平持续存在，那么推测EPEC肠道感染存在诱导慢性免疫性疾病的可能。

促炎因子反应过强则造成机体组织损伤加重，抗炎因子反应过强则对机体抗病原体免疫反应产生一定程度抑制效应，这种抑制效应在一定程度上能够减少或避免组织更大的损伤，但同时可造成慢性迁延性感染及相关免疫疾病的发生。促炎反应、抗炎反应、Th1/Th2细胞介导的反应是一个动态平衡过程，一旦失衡将导致相关疾病的产生如慢性炎症或免疫相关疾病。多种免疫相关性疾病与感染相关，可由感染直接或间接诱发，本研究表明EPEC肠道感染小鼠模型体内Th2、Th17细胞相关性淋巴因子增高为主，Th1/Th2降低，提示肠道细菌感染可能与某些病原体呼吸道感染[11]（合胞病毒等）一样，有增加变应性疾病发生的倾向。有关于非致病性大肠杆菌（Nonpathogenic E. coli ATCC 25922）抑制小鼠气道过敏疾病动物模型体内的特异性IgE、IL-4的水平的报道，且呈时间和剂量依赖性[12]，但本研究使用的是致病性大肠杆菌和健康小鼠，结果和研究方式有所不同。鉴于Th2、Th17细胞在变态反应性疾病发病机制中的重要作用，儿童感染性腹泻病（细菌感染）与变态反应疾病是否有一定相关性尚需进一步深入研究。

[参考文献]

[1] Chandra BK，Singh G，Taneja N，et al. Diarrhoeagenic Escherichia colias a predominant cause of paediatric nosocomial diarrhoea in India[J]. J Med Microbiol，2012，61（Pt 6）：830-836.

[2] Alikhani MY，Sedighi I，Zamani A，et al. Incidence of diarrhoeagenic Escherichia coli isolated from young children with diarrhoeain the west of Iran [J]. Acta Microbiol Immunol Hung，2012，59（3）：367-374.

[3] 杨立华，傅小凤，潘传四，等.细胞炎前因子测定对感染性腹泻诊断的价值[J].实用儿科临床杂志，2007，22（1）：15-16.

[4] 熊文虹，杜华，李柳青.急性感染性腹泻患儿血清细胞因子测定的临床意义[J].临床儿科杂志，2002，20（7）：439.

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大一学习计划书范文第5篇

【关键词】  海洛因；p38丝裂原活化蛋白激酶；前额叶皮层；海马；伏核；杏仁核

    0引言

    近年来，女性滥用者增多，且大多属于育龄期妇女［1-2］. 研究表明，子宫内海洛因暴露不但可引起新生儿宫内窘迫和发育迟缓，还可导致子代成年后长期的认知行为缺陷和社会行为障碍［3-4］，但其细胞、分子机制未完全阐明. p38是mapk(mitogenacti vated protein kinase) 超家族的重要成员之一，属于应激活化激酶，p38 mapk不但与其他信号传递途径共同介导细胞应激诱发的基因表达和酶活性的改变，还在细胞凋亡、细胞因子的合成释放、细胞骨架重排等机制中发挥重要作用［5-6］. 本研究旨在探讨p38 mapk 通路是否参与了海洛因导致后代神经、行为异常的机制.

    1材料和方法

    1.1材料标准品海洛因（heroin），学名二乙酰吗啡，纯度98.5%，由中国药品生物制品检定所（国家麻醉品实验室）提供，批号171206-200614. 兔抗鼠磷酸化p38 mapk mab，山羊抗βactin pab （美国cell signalling 公司）；辣根过氧化物酶(hrp)标记的抗兔或山羊二抗（博奥森公司）；ecl化学发光试剂盒、pvdf 膜及hyperfilm 胶片（德国merck 公司）；蛋白质提取及浓度测定试剂盒（美国biorad 公司）. fs600超声波粉碎仪(上海生析超声仪器有限公司)；离心机（德国eppendorf公司）；电泳仪（德国whatman biometra公司）；紫外成像扫描仪及分析系统（美国biorad公司）.

    1.2方法

    1.2.1动物分组及模型建立选健康活泼balb/c 小鼠60只(第四军医大学实验动物中心)，雌雄各半，2 mo龄，体质量(25±5)g. 自由饮食饮水，昼夜12 h交替光照，室温25℃，湿度60% 左右. 每日21∶00 雌雄合笼，次日晨查精栓或阴道涂片，以精栓或阴道涂片查到做为受精标志，记为e0d. 将体质量相近的实验动物随机分为海洛因组和盐水组. 从e0～e8 各组动物自由进食, e9～e18 d，盐水组于21∶00在小鼠大腿外侧皮下注射生理盐水20 ml/（kg·d），1/d，海洛因组组给予海洛因10 mg/（kg·d） 注射，1/d，将药物溶于生理盐水中，0.5 g/l. 子代分组同亲代孕鼠.

    1.2.2蛋白印迹实验仔鼠30 d龄时在各脑区取材，0.16 mol/l戊巴比妥钠腹腔麻醉，速断头、开颅、分离各脑区，即刻入液氮，冻存管分装，-80℃贮存. 用时加入4℃胞质蛋白提取液裂解，20∶1 加入蛋白酶抑制剂pmsf，高速分散器组织匀浆，冰浴1 h，12000 g 4℃离心10 min，沉淀加入4℃预冷核蛋白提取液，震荡混匀，冰浴1 h，再12000 g 4℃离心30 min，取上清为核蛋白，其蛋白浓度经考马斯亮蓝法定量，取上清加等体积2×sds 样品缓冲液，煮沸5 min 使蛋白变性. 取50 μg待测蛋白加入等体积2×上样缓冲液煮沸5 min，行sdspage 电泳，蛋白半干转至pvdf膜. 100 v 恒压转移2 h后，将pvdf 膜在含5%脱脂奶粉的tbst中室温下封闭1 h，与1∶1000一抗pp38 mapk 兔多抗4℃孵育过夜，pbst 缓冲液洗膜3次，每次10 min；随后加入羊抗兔 igghrp 37℃孵育1 h，洗膜3次，每次10 min. ecl化学发光试剂显影，胶片曝光，uvp 凝胶成像系统扫描目的条带，labworks 软件测量各阳性条带的光密度，将pp38 mapk阳性条带与相应的βactin 条带吸光度比值作为其蛋白的相对表达量.

    统计学处理：所有数据均采用spss12.0进行处理，多样本均数比较采用单因素方差分析.

    2结果

    分析各组间相应蛋白带的平均吸光度值，以βactin作内参蛋白，调整后进行半定量分析. 与盐水组相比，海洛因组动物的前额叶皮层、海马、伏核和杏仁核4个脑区组织的p38 mapk磷酸化蛋白表达均明显增加（p< 0.05，图1，2）.

    3讨论

    mapk信号系统作为真核细胞内各种信息传递的最后通路和共同通路，能够将细胞外的各种刺激信息转移到细胞核内，是神经细胞发生一系列可塑性变化的分子基础. p38 mapk 多见于促炎和促凋亡的途径中，它在细胞分化、凋亡、迁移和增殖等基本生理过程中也发挥着不可忽视的作用［5］，许多细胞外刺激如应激刺激、炎性细胞因子、细胞因子、脂多糖、生长因子等通过细胞内信号转导通路激活p38 mapk，进而磷酸化激活 mapk apkinase2 等，并最终激活atf2，max 和mef2 等转录因子而产生生物学效应［6］，但其具体调制及与其他信号通路之间的关系尚未明了.

    海洛因暴露导致的行为异常与海洛因作用的时间、时程、剂量和给药方式等有密切关系，作用方式不同可导致的行为学损伤不完全相同. 我们采用的模型已报道动物有成年后迷宫学习记忆行为缺陷［7］，海马胆碱能系统及pkc 细胞学定位的改变［8］. 海洛因可迅速通过胎盘和血脑屏障，直接作用于发育中的神经细胞，导致子代成年后的神经行为损伤，但其细胞、分子机制未完全阐明. 我们的结果显示，发育早期海洛因暴露，上调了小鼠前额叶皮层，海马，伏核，杏仁核脑区中p38 mapk 磷酸化蛋白的表达，提示在这些与成瘾和学习记忆相关的脑区里，存在着p38 mapk 信号通路可能参与的生理病理学过程的改变，提示海洛因对子代动物成年后神经行为异常的长期影响，至少是部分源于海洛因在动物的神经系统发育早期，作用于神经行为相关的靶区，使该靶区的神经活动异常或作用于相关基因，使海洛因的致畸作用持续到生后，如海马损伤导致海马依赖的空间学习记忆损伤.

    p38 mapk在疾病发展的不同阶段，发挥的作用有所不同. 在细胞应激反应或炎症反应的早期，p38 上调发挥脑保护作用，但随着反应进程的加深，上调的p38 可以通过加强细胞的炎性反应，介导其他胞外信号引起的炎性细胞因子或炎性产物的表达和释放，以介导凋亡性细胞死亡的方式损伤神经细胞［6, 9］. p38 蛋白在成瘾和学习记忆相关脑区的持续表达上调，是损伤神经发育，或是激发了损伤后的神经代偿机制，需要进一步研究.

    我们结果的提示，p38 mapk 通路可能参与了海洛因对胚胎脑发育的毒性作用，进而影响动物成年后的行为，为进一步探讨子代神经行为的损伤机制及后期临床干预中靶蛋白的确定提供了有意义的资料.

【参考文献】

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