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【摘要】目的研究肤痒宁软膏止痒和抗过敏的作用。方法观察肤痒宁对磷酸组胺所致豚鼠皮肤瘙痒的影响,对组胺所致小鼠毛细血管通透性以及2,4二硝基氯苯(DNCB)致小鼠迟发性过敏反应(DTH)的影响,探讨其抗过敏作用。结果肤痒宁软膏中剂量、高剂量组能明显提高组织胺所致豚鼠致痒阈,并能抑制磷酸组胺致小鼠皮肤毛细血管通透性增加和2,4-二硝基氯苯所致小鼠迟发性变态反应。结论肤痒宁软膏具有止痒作用,对致炎性物质所致毛细血管通透性增加和Ⅳ型变态反应有抑制作用。
【关键词】肤痒宁软膏;止痒;抗过敏
Abstract:ObjectiveTostudytheantipruriticandantiallergiceffectsofFuyangningointment.MethodsTheeffectsofFuyangningointmentonhistamineinduceditchinguineapigs,theinhibitoryactionsonhistamineinducedincreaseofcapillarypermeabilityinmice,andtheeffectson2,4dinitrochlorobenzol(DNCB)induceddelayedhypersensitivityreactioninmicewereobserved.ResultsTheapplicationofFuyangningointmentontheskinofguineapigssignificantlyloweredtheitchthreshold,inhibitedtheincreaseofskincapillarypermeabilityinmiceinducedbyhistamine.TheapplicationofFuyangningointmentonskinalsoinhibitedtheDNCBinduceddelayedhypersensitivityreactioninmice.ConclusionsFuyangningointmentcouldrelieveitching,inhibittheincreaseofcapillarypermeabilitycausedbyphlogogenicsubstances.ItalsohassignificantinhibitoryeffectsontypeIVhypersensitivityreactions.
Keywords:Fuyangningointment;itchingrelieving;antihypersensitivity
香鳞毛蕨是鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物,生长于海拔1000~1700m的山坡或岩石缝中,植物略具香味,故称香鳞毛蕨,分布于东北、华北各省。根据民间验方记载,其对多种皮肤病均有良好的治疗作用,尤其是对由真菌引起的脚气、脚癣治疗效果非常显著[1]。香鳞毛蕨的醇提液对真菌具有较好的抑制作用[2],对银屑病具有一定的治疗作用[3]。本研究将香鳞毛蕨的醇提液与适当基质混合制成肤痒宁软膏,进行止痒和抗过敏作用的研究,为进一步临床应用提供依据。
1材料
1.1药物与试剂
肤痒宁软膏(1g生药/g软膏):由广东药学院中药化学与分析教研室提供;新肤松软膏:广东顺峰药业有限公司生产,批号:050928;盐酸苯海拉明片:北京双桥制药公司生产,批号:000301;伊文思蓝:德国Serva公司进口分装,批号:871225;磷酸组胺:国药集团化学试剂有限公司,批号:62014032;丙酮(分析醇):广东汕头市西陇化工厂,批号:0601142。
1.2动物
NIH小鼠,SPF级,合格证号:2006A017,体质量18~22g;Hartley豚鼠,普通级,合格证号:2007A005,由广东省医学实验动物中心提供。
1.3仪器
低速离心机(北京医用离心机厂,型号LD42A),UV1800紫外-可见光光度计(北京瑞利分析有限公司)。
2方法与结果
2.1肤痒宁软膏对组胺所致豚鼠皮肤瘙痒的影响[4]
取豚鼠50只,雌雄均有,随机分5组,即基质对照组、新肤松软膏阳性药物对照组、肤痒宁软膏高、中、低剂量组。用8%(ρ)的硫化钠背部脱毛(约20cm2),24h后每天于背部脱毛区涂药1次,基质对照组给予等量的基质,1g/次,连续3d,末次给药后1h内造型致痒;在造型前24h,右后足脱毛,致痒时将脱毛处用细砂纸擦伤,以轻度渗血为度(面积1cm×1cm),每只动物于末次涂药后1h,开始在创面处滴0.01%磷酸组胺0.05mL/只,每隔3min依次滴质量浓度0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、……递增浓度,每次0.05mL/只,直至豚鼠出现回头舔右后足,以最后出现豚鼠回头舔右后足时给予的磷酸组胺总量为致痒阈。结果见表1。表1肤痒宁软膏对组胺所致豚鼠瘙痒的影响(略)
结果表明肤痒宁软膏涂药后,中、高剂量组致痒阈与基质对照组比较差异均有显著性,表明肤痒宁软膏能明显提高组织胺所致豚鼠致痒阈,有明显的止痒作用。
2.2肤痒宁软膏对磷酸组胺所致小鼠毛细血管通透性的影响[5]
取NIH小鼠75只,雌雄均有,随机分5组,即基质对照组、苯海拉明阳性药物对照组、肤痒宁软膏高、中、低剂量组。用8%的硫化钠背部脱毛,24h后每天于背部脱毛区涂相应的药物1次,基质对照组给予等量的基质,0.2g/次,苯海拉明阳性药物对照组ig给药,连续5d,末次给药1h后尾iv0.5%依文思蓝生理盐水溶液5mg/kg,立即于小鼠腹部正中已脱毛皮肤处皮内注射0.1%磷酸组胺0.1mL/只。3min后脱臼处死动物,剪下蓝斑皮肤,剪碎泡于丙酮生理盐水溶液(体积比7∶3)5mL中48h,离心取上清液,用UV1800紫外-可见光光度计于610nm波长比色,测定吸收度A。
从表2可见,肤痒宁软膏高、中剂量组对组织胺引起的小鼠毛细血管通透性增加有非常显著的降低作用。表2肤痒宁软膏对磷酸组胺所致小鼠毛细血管通透性的影响(略)
2.3对2,4二硝基氯苯(DNCB)致小鼠迟发性过敏反应(DTH)的影响[5]
取NIH小鼠60只,随机分为5组,即基质对照组、新肤松软膏阳性药物对照组、肤痒宁软膏高、中、低剂量组。用8%的硫化钠背部、腹部脱毛,24h后腹部用5%2,4二硝基氯苯(DNCB)丙酮溶液50μL致敏,每天于背部脱毛区涂相应的药物1次,基质对照组给予等量的基质,0.2g/次,连续7d。末次给药1h,各组将1%DNCB均匀涂于小鼠右耳进行攻击。攻击24h后,脱臼处死小鼠,用直径9mm打孔器于双耳对称部位打取耳片,精密称重,以左、右耳片重量之差作为肿胀度。同时取小鼠胸腺及脾称重,分别以每10g小鼠的脾重(mg)和胸腺重(mg)作为脾指数和胸腺指数。结果见表3。表3肤痒宁软膏对小鼠迟发型超敏反应的影响(略)
从表3可见,肤痒宁软膏能减轻小鼠耳肿胀度,免疫器官脾指数和胸腺指数也明显减小,表明肤痒宁软膏对DNCB所致小鼠Ⅳ型变态反应有非常明显的抑制作用。
3讨论
皮肤瘙痒症是皮肤科常见病,大量研究表明,组胺是一种可以引起皮肤瘙痒的介质,作用于H1受体,引起瘙痒。用低浓度的组胺涂于真皮表面即可引起瘙痒。因此,常用抗组胺类药物缓解临床症状[6]。本实验选用豚鼠皮肤磷酸组胺致痒模型来研究肤痒宁软膏的止痒作用,结果表明肤痒宁软膏中剂量、高剂量组能明显提高豚鼠对磷酸组织胺的致痒阈,并对组胺所致小鼠毛细血管通透性增加有显著抑制作用,说明肤痒宁软膏具有拮抗组胺的作用,可应用于皮肤瘙痒的对症治疗。同时其对DNCB所致小鼠Ⅳ型变态反应有非常明显的抑制作用,而Ⅳ型变态反应的迟发型超敏反应的机理与临床上接触性皮炎相似[7],说明其也可以用于接触性皮炎的治疗,本实验结果提示肤痒宁软膏有一定止痒、抗过敏作用,为其临床应用和进一步研究提供了理论依据。
【参考文献】
[1]徐冬英.药用蕨类植物的研究进展[J].中医药信息,1997,14(4):20-21.
[2]沈志滨,马英丽,江蔚新,等.香鳞毛蕨对真菌的抑制作用[J].中草药,2005,36(5):735-736.
[3]沈志滨,金哲雄,张德连,等.香鳞毛蕨治疗银屑病的药理作用研究[J].中草药,2003,33(5):448-449.
[4]徐建华,何亦溪,舒淑婷.一种筛选抗过敏药与止痒药的动物模型[J].药学学报,1996,31(6):420-424.
[5]徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].3版.北京:人民出版社,2002:1871-1885.
[6]唐续元,张开明,李秉煦.皮肤病学原理[M].北京:中国医药科技出版社,1993:2.
[7]陈东辉,罗雪芹,刘家玉,等.退疹止痒胶囊的药效学研究[J].中药药理与临床,2002,18(1):32-33.