藏药提取工艺
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【摘要】目的优选独一味水煎煮提取工艺。方法采用正交试验法，采用出膏率和总黄酮含量为指标，优选工艺条件。结果独一味水煎煮提取工艺的最佳参数为：加水煎煮3次，每次1h，第1次加水量为11倍，第2、3次加水量为8倍量。结论优选的独一味提取工艺能较好地保证制剂的质量。
【关键词】独一味；总黄酮；出膏率；正交试验；综合评分
【Abstract】ObjectiveTofindouttheoptimumparametersusedboilingwaterextractionfromtheHerbaLamiophlomis.MethodsUsedtheorthogonaldesignmethod,investigatedtheeffectsoftheratioofextractionandthecontentoftotalflavones.ResultsTheoptimumconditionwasobtained:addedelevenfoldsofwaterforfirsttime,andedeightfoldsofwaterforothertwicetimes,onehoursindurationforeachtime.ConclusionTheextractionprocessshowsstabilizationandfeasibility,canbeavailableforindustrialproductionatlargescale.
【Keywords】Herbalamiophlomis；Ratioofextraction；Contentoftotalflavones；Orthogonaldesign；Compositescoremethod
独一味为藏族习用药材，为唇形科植物独一味Lamiophlomisrotata（Benth．）Kudo的干燥全草，具有活血止血，祛风止痛，干黄水的功能，用于治疗跌打损伤，外伤出血，风湿痹痛，黄水病[1]。独一味在藏药应用历史悠久，《月王药诊》、《四部医典》、《晶珠本草》等藏医典籍均有记载[2]。
独一昧胶囊为《中国药典》2000年版[3]及2005年版[4]收载品种，为独一味经水煎煮加工制成，在临床用于治疗妇科和神经外科疾病所致的疼痛[5]、治疗三叉神经痛[6]等疼痛性疾病有较明显的止痛效果，而且同时具有止血、抑菌、提高特异性和非特异性免疫、明显提高人体痛阈等作用，尤其在治疗肿瘤性疼痛时可作为第一阶梯使用的辅助用药，无明显毒副作用及药物成瘾性[7-8]。
总黄酮是独一味胶囊的有效部位之一，化学研究表明独一味中黄酮类成分主要是芹菜素、木犀草素、槲皮素及其苷类[9]，《中国药典》2000年版[3]及2005年版[4]该品种项下收载了水煎煮提取的制法和总黄酮的含量测定方法。独一味片采用单因素考察法以总黄酮含量作为不同提取工艺研究的质量检测方法[10]，考察因素和指标不够全面，为提高独一味制剂的质量，降低生产成本和优化提取工艺。
林天慕等[11]比较溶剂萃取法及大孔吸附树脂梯度洗脱分离法两种方法制备样品，通过小鼠醋酸扭体法及热板法筛选镇痛有效部位，认为独一味镇痛作用的药效物质基础与黄酮及其苷类有一定关系，本文以出膏率和总黄酮含量为考察指标，采用正交试验法研究独一味水煎煮提取工艺。
1材料与仪器
独一味药材由成都安多贸易有限公司提供，经成都中医药大学民族医药研究所鉴定，为唇形科植物独一味Lamiophlomisrotata(Benth．)Kudo的干燥全草，按《中国药典》2005年版独一味胶囊项下制法规定进行粉碎，粉碎成粗粉。
仪器：Spectrumlab22PC（上海棱光技术有限公司，编号：20010143）；BP121S电子天平（德国Sartorius公司）
试剂：乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等试剂均为分析纯
对照品：芦丁（中国药品生物制品检定所提供，含量测定用，0080-9705）
2方法与结果
2．1药材吸水率的测定取独一味粗粉150g，加8倍量水浸泡过夜，滤过，测得吸水率为326．9%，即应考虑增加吸水量3倍。
2．2正交试验设计采用正交设计表（L34）安排试验，因素水平表见表1，各试验号使用独一味粗粉均为150g，进行回流煎煮提取，第1次提取增加吸液量3倍，用200目滤布滤过，合并滤液，作为正交试验中所得的提取液。
2．3总黄酮含量测定[4]对照品溶液的制备：精密称取经120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品适量，加70%乙醇制成浓度为0．64mg/ml的对照品溶液。
标准曲线的制备：精密量取上述标准溶液1．0、1．5、2．0、2．5、3．0ml至25ml量瓶中，加水至6ml，加入5%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6min，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6min，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15min；以相应的溶液为空白，照紫外-可见分光光度法（2005版药典一部附录VA），在500nm的波长处测定吸光度，以吸光度（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线。测定法：精密称取正交试验中所得的提取液1ml于25ml量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加水至6ml”起依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算，即得。
2．4出膏率测定将正交试验中所得的提取液，减压浓缩至500ml，精密吸取50ml，分别置干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，80℃以下减压干燥8h，称定重量，计算出膏率。
2．5正交试验结果及结果分析正交试验结果见表2。
出膏率评分＝（出膏率／出膏率最大值)×0．3×100；总黄酮含量评分＝（总黄酮含量/总黄酮含量最大值）×0．7×100；综合评分＝出膏率评分＋总黄酮含量评分。
采用SPSS软件对综合评分结果进行多元逐步回归分析，得到回归方程：
Y=42．608+14．970×C
相关系数R=0．817；显著水平p=0．007
回归方程有显著性意义。
通过SPSS软件对综合评分结果进行多元回归分析，得到各因素对综合评分影响的显著水平顺序为：C（P=0．010）>A（P=0．084）>D（P=0．388）>B（P=0．533）
以上结果表明对综合评分影响最大的因素为提取次数（C），其次为加水量（A）。
综合考虑降低生产成本和优化提取工艺，结合独一味胶囊项下制法规定，确定独一味的提取工艺参数为：取独一味，加水煎煮3次，每次1h，第1次加水量为11倍，第2、3次加水量为8倍量，合并煎液，滤过。
2．6验证试验称取独一味粗粉3份，每份150g，确定的提取工艺进行工艺验证试验，结果见表3。
结果表明：验证试验结果表明独一味的水煎工艺基本稳定、可行。
3讨论
试验研究结果表明独一味胶囊制法有一定合理性。通过试验研究，采用综合评分的方法，避免单纯采用出膏率或单纯采用总黄酮带来的工艺偏差，为独一味胶囊工艺改进及其相关产品的开发提供了试验研究基础，能较好地保证独一味制剂的质量。
参考文献
［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典一部.化学工业出版社,2005:184.
［2］《中华本草》编委会.中华本草.上海：上海科学技术出版社,2007：555.
［3］国家药典委员会.中华人民共和国药典一部.北京：化学工业出版社,2000:533.
［4］国家药典委员会.中华人民共和国药典一部.北京：化学工业出版社,2005:541.
［5］尹永举，张玉荣，张红瑾，等.独一味胶囊镇痛疗效观察.中国乡村医药杂志,2004，11（11）：50.
［6］童永碧.独一味胶囊治疗三叉神经痛的临床观察.贵阳中医学院学报,2002，24（2）：12.
［7］秦万龙.独-味胶囊治疗癌性疼痛128例.中国中医药信息杂志,2001，8（10）：65.
［8］李洪亮，都民安，王宝太，等.藏药独一味对癌痛的镇痛作用.河北医药,2002，24（2）：146.
［9］刘长余，姚雪芳.独一味的化学成分与临床应用研究概况.海峡药学,2005，17（1）：82.
［10］赵文昌，苏光华.独一味片提取工艺研究.河南中医药学刊,1996，11（2）：8.
