仙鱼汤对小鼠Lewis肺癌作用

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表1各组Lewis肺癌小鼠的瘤体质量及抑瘤率比较（略）

Table1Comparisonoftumormassweightandtumorinhibitoryrateindifferentgroups

统计方法：单因素方差分析；①P＜0.05，②P＜0.01，与模型组比较

2.3各组细胞凋亡率及细胞周期分析仙鱼汤高、中、低剂量组及CTX组小鼠lewis肺癌细胞凋亡率均高于模型组（P＜0.05或P＜0.01），各仙鱼汤组随着剂量的增大，凋亡率亦逐渐增加。仙鱼汤高、中、低剂量组及CTX组处于G0/G1期细胞的比例均高于模型组，其中仙鱼汤高剂量组、CTX组与模型组比较，差异有显著性意义（P＜0.01）。仙鱼汤高、中、低剂量组及CTX组处于S期细胞的比例均显著性低于模型组（P＜0.05或P＜0.01），呈现明显的G0/G1期阻滞现象。仙鱼汤高、中、低剂量组及CTX组处于G2/M期细胞的比例与模型组比较，差异无显著性意义（P＞0.05）。结果见表2、图1。

2.4光镜观察模型组癌细胞大小和形态很不一致，可见瘤巨细胞；癌细胞核体积增大，细胞核和细胞浆比例增大，核的大小、形状、染色不一，可见巨核、多核，核染色深，核染色质呈粗颗粒状，分布不均匀；核仁肥大，数目增多，核分裂相增多，可见不对称性、多极性及顿挫性等病理性核分裂相，间质内淋巴细胞少见（图2-a）。CTX组可见大片坏死，间质见较多的淋巴细胞等炎细胞浸润，纤维组织反应性增生（图2-b）。仙鱼汤各剂量组可见癌巢内坏死面积增大，间质可见淋巴细胞等炎细胞浸润，可见较多的细胞凋亡小体（图2-c、d、e）。

2.5各组bcl2染色强度指数凋亡相关基因bcl2的阳性产物主要位于细胞浆，可见大量的细胞浆棕黄色颗粒染色。仙鱼汤各剂量组bcl2的染色强度指数均显著低于模型组（P＜0.01），并呈剂量依赖性，而CTX组与模型组比较差异无显著性意义（P＞0.05）。结果见表3、图3。

表2各组小鼠Lewis肺癌组织的细胞凋亡率及细胞周期分析（略）

Table2Comparisonofcellapoptosisratioandcellcycleanalysisindifferentgroups

统计方法：单因素方差分析；①P＜0.05，②P＜0.01，与模型组比较

a.模型组b.CTX组c.仙鱼汤低剂量组d.仙鱼汤中剂量组e.仙鱼汤高剂量组

图1各组凋亡率检测流式细胞图谱比较（略）

Figure1Resultsofcellapoptosisratiodetectedbyflowcytometerindifferentgroups

a.模型组b.CTX组c.仙鱼汤低剂量组d.仙鱼汤中剂量组e.仙鱼汤高剂量组

图2各组肿瘤组织形态比较（HE染色，×400）（略）

Figure2Morphologicalchangesoftumorcellsunderlightmicroscopeindifferentgroups（HEstaining，×400）

a.模型组b.CTX组c.仙鱼汤低剂量组d.仙鱼汤中剂量组e.仙鱼汤高剂量组

图3各组bcl2阳性表达比较（免疫组化，×400）（略）

Figure3Positiveexpressionofbcl2indifferentgroupsdetectedbyimmunohistochemicalmethod

表3各组bcl2染色强度指数比较（略）

Table3Comparisonofstainingintensityindexofbcl2indifferentgroups

统计方法：单因素方差分析；①P＜0.01，与模型组比较

3讨论

多数学者认为，肺癌发生发展的中医病机可以用"痰、瘀、虚"3个字高度概括。其中正虚是肺癌发生的基础，《医宗必读》云："积之成者，正气不足，而后邪气踞之。"正虚又以脾虚为主，"脾为生痰之源，肺为贮痰之器"。正是脾虚导致痰浊内生，进一步血停成瘀，瘀血内生，痰瘀内阻，蕴积肺部，日久而发为本病。

广州中医药大学陈锐深教授从肺癌病因病机出发，以健脾清肺、化痰祛瘀为治疗大法，自拟了治疗肺癌的经验方"仙鱼汤"。方中君药为党参，具有补中益气、健脾益肺、生津养血的功效，为补益肺脾气之要药。黄芪配合党参，以补肺脾之气；浙贝母清热化痰、开郁散结；猫爪草散结消肿；三七片化瘀散结止痛，共为臣药。仙鹤草收敛止血、解毒抗癌；鱼腥草清热解毒、消痈排脓；天冬养阴清肺生津；山海螺解毒消肿、排脓祛痰；山慈菇清热解毒、化痰消肿散结；守宫散结止痛，共为佐药。炙甘草调和诸药，为使药。综合全方，扶正祛邪，攻补兼施，使祛邪而不伤正，共奏健脾清肺、化痰祛瘀之功效。

肿瘤的发生和发展不仅与肿瘤细胞的增殖、分化异常有关，而且与细胞凋亡的调控失常有关。人类细胞的凋亡机制十分复杂，目前已鉴定出了构成凋亡途径的多种成分，揭示出凋亡是受多种基因调控的，例如p53、p16、cmyc、bcl2、bax等相关基因均参与了细胞凋亡的调控［7］。bcl2是一种凋亡相关基因，被激活的bcl2基因的主要作用是抑制细胞凋亡，下调bcl2基因的表达，对肿瘤细胞有显著的生长抑制作用。bcl2可能通过阻断凋亡的公共信号传递通路（如抑制线粒体释放细胞色素C）达到抑制或阻断多种细胞及细胞系的细胞凋亡过程。随着该基因蛋白产物的过度表达，使得细胞增殖与凋亡的平衡发生紊乱，从而阻断细胞凋亡的最后共同通道，从而抑制细胞凋亡，导致癌变［8－11］。

本研究通过动物移植性肿瘤实验法探讨仙鱼汤对Lewis肺癌生长及肿瘤细胞凋亡的作用。结果表明，仙鱼汤具有一定的抗肿瘤作用，而且其抑瘤作用随着剂量的增加而增强。从HE染色的病理切片中发现，不同剂量仙鱼汤组可见癌巢内坏死面积增大，间质可见较多的淋巴细胞等炎细胞浸润，可见较多的细胞凋亡小体。进一步采用流式细胞仪检测凋亡率，结果表明仙鱼汤具有促进小鼠Lewis肺癌细胞凋亡的作用，并且随着剂量的增加作用也逐渐增强。仙鱼汤各剂量组处于G0/G1期细胞的比例均高于模型组，处于S期细胞的比例均低于模型组，呈现明显的G0/G1期阻滞现象，提示仙鱼汤可能使G1期细胞不能通过细胞周期检测点进入S期，从而发生G0/G1期阻滞，阻断DNA复制，干扰肿瘤细胞周期正常进行，以起到抑制肿瘤的作用。免疫组化检测结果显示，仙鱼汤各剂量组bcl2蛋白表达均显著低于模型组，并随着仙鱼汤剂量的加大，肿瘤组织bcl2的染色强度指数也逐渐降低。本研究实验结果提示仙鱼汤可能通过降低bcl2表达的途径促进肿瘤细胞凋亡，从而发挥抗肿瘤作用，对临床用药具有一定的指导意义。

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