HPLC法测定轻身消胖丸盐酸麻黄碱含量

前言：本站为你精心整理了HPLC法测定轻身消胖丸盐酸麻黄碱含量范文，希望能为你的创作提供参考价值，我们的客服老师可以帮助你提供个性化的参考范文，欢迎咨询。

【摘要】目的建立轻身消胖丸中盐酸麻黄碱的定量方法。方法采用RPhplc法，色谱柱：WatersXTerraC18(4.6mm×250mm,5μm)不锈钢柱；流动相:1%磷酸溶液(含0.4%三乙胺)乙腈(体积比91∶9)；流速：1.0mL/min；检测波长：207nm；柱温：35℃。结果盐酸麻黄碱的进样量在16.6～166μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系，盐酸麻黄碱的平均回收率为98.40%(n=6)，RSD为1.2%。结论方法简单快速、专属性强、重复性好、精密度高，可用于控制该制剂的质量。

【关键词】轻身消胖丸;盐酸麻黄碱;RPHPLC;含量测定

Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCmethodforcontentdetectionofephedrinehydrochlorideinQingshenxiaopangpills.MethodsThesamplewasanalyzedonaWatersXTerraC18(4.6mm×250mm,5μm)columnusing1%H3PO4（0.4%triethylamine）acetonirile(91∶9)asmobilephase.Thedetectionwavelengthwasat207nm.ResultsTheaveragerecoveryofthemethodwas98.4%withRSD1.2%.Thelinearrangeofphedrinehydrochloridewas16.6~166μg/mL.ConclusionThismethodissimple,quick,reproducibleandsuitableforthequalitycontrolofQingshenxiaopangpills.

Keywords:Qingshenxiaopangpills;ephedrinehydrochloride;RPHPLC

轻身消胖丸为中药复方制剂，由罗布麻叶、麻黄、山楂等19味药材研制而成。通过益气、降脂综合调整机体功能而达到减肥目的，使机体新陈代谢恢复正常平衡状态，轻松减肥。为了较全面控制制剂质量，本文以方中佐药麻黄中的麻黄碱为定量指标。因本品药味多，成分复杂，干扰严重，若按文献报道的HPLC方法［1～3］，提取和测定盐酸麻黄碱成分不理想。对样品处理方法考察，经色谱条件优化，本实验建立HPLC法测定了该制剂中盐酸麻黄碱。该方法专属性强，灵敏度高，重复性好，可作为本品质量控制指标。

1仪器与试药

Waters2695/2996，PDA二极管阵列检测器，Empower色谱工作站；盐酸麻黄碱对照品（批号：171241-200404）购自中国药品生物制品检定所；轻身消胖丸(广州王老吉药业有限公司,批号:20061206,20061210,20061212)；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：WatersXTerraC18柱(4.6mm×250mm,5μm)；1%磷酸溶液(含0.4%三乙胺)乙腈(体积比91∶9)；流速：1.0mL/min；检测波长：207nm；柱温：35℃。

2.2溶液的制备

2.2.1对照品溶液的制备精密称取盐酸麻黄碱对照品适量，加水制成含盐酸麻黄碱0.3320mg/mL。

2.2.2供试品溶液的制备精密称取本品10g，加水60mL使溶解，加氨水7.5mL，摇匀，用三氯甲烷充分振摇萃取5次，每次20mL，合并三氯甲烷液置于圆底烧瓶中，室温减压旋转至干［4］，加流动相溶解并定容至10mL，密塞，超声使其溶解，0.45μm滤膜滤过，即得。

2.2.3阴性样品溶液除不含麻黄外，其余按处方比例制备缺麻黄的样品，按“2.2.2”项下方法制备阴性样品溶液。

2.2.4药材对照液取麻黄药材按“2.2.2”项下方法制备，作为药材对照液。

2.3线性关系精密称取盐酸麻黄碱16.60mg，至50mL量瓶中，加流动相溶解至刻度，摇匀，得约0.3320mg/mL盐酸麻黄碱对照品储备液。精密吸取上述对照品储备液1、2、4、6、8、10mL分别置20mL量瓶中，并用流动相稀释至刻度，混匀后，分别进样10μL，记录色谱图。以色谱峰面积(A)为纵坐标，对照品质量浓度（ρ）为横坐标，进行线性回归，回归方程为A=21523ρ+21310，r=0.9997，盐酸麻黄碱在166～166μg/mL范围内呈良好线性。

2.4阴性试验按上述色谱条件，分别取对照品溶液、供试品溶液、药材对照液和阴性样品溶液各20μL，分别注入高效液相色谱仪，结果供试品色谱中，盐酸麻黄碱与其他色谱峰分离较好，阴性样品溶液在盐酸麻黄碱的保留时间范围内无干扰峰出现，而麻黄药材和轻身消胖丸样品中均含有盐酸麻黄碱峰，说明盐酸麻黄碱来源于麻黄药材中。见图1。

A.盐酸麻黄碱对照品;B.麻黄阴性空白;C.轻身消胖丸供试品;D.麻黄药材

图1轻身消胖丸的HPLC色谱图（略）

Fig.1ChromatogramsofQingshenxiaopangpills

2.5精密度试验取供试品(批号20061212）溶液，重复进样6次，每次20μL，测定峰面积值分别为1451487、1443701、1440687、1468314、1468913，1454920,结果RSD为0.83%。

2.6重复性试验取同一批样品（批号20061206），按“2.2.2”项下方法配制6份供试品溶液，分别测定盐酸麻黄碱含量，结果平均含量为33.92mg/g，其RSD为10%。

2.7稳定性试验取同一供试品（批号20061206)溶液分别于0、2、4、6、8、12、24h进样，分别测定麻黄碱的峰面积，结果其RSD为15%。表明供试品溶液在24h内稳定。

2.8回收率试验精密称取10g已知盐酸麻黄碱含量（33.88mg/g)的同一批样品6份，精密加入一定量盐酸麻黄碱对照品，按“2.2.2”项下方法制备，测定其含量，并计算回收率，测定结果见表1。

2.9含量测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μL，注入高效液相色谱仪,以上述色谱条件进行测定，按外标法以峰面积计算样品的含量。共测定3批样品,结果3个批号20061206、20061210、20061212的样品所测得的盐酸麻黄碱含量分别为33.88、33.62、34.17μg/g。

表1盐酸麻黄碱的加样回收率试验结果（略）

Tab.1Resultsofrecovery(n=6)

3讨论

3.1检测波长的选择取盐酸麻黄碱对照品适量，加流动相溶解后，经200～400nm紫外扫描，结果表明在207nm处有最大吸收，故选择207nm作为检测波长。

3.2流动相的选择由于盐酸麻黄碱的碱性基团极易受C18柱的硅胶键合相表面残留的硅醇基极性点的影响，而使峰拖尾。在流动相中加入0.4%三乙胺作扫尾剂，起到抑制和掩蔽固定相表面极性点的作用，使峰形尖锐且对称。

3.3色谱柱的选择实验中发现色谱柱对盐酸麻黄碱的分离起决定性作用，分别考察了HypersilODSC18(4.0mm×250mm，5μm)色谱柱，WatersSymmetryC18(4.6mm×150mm，5μm)色谱柱，WatersXTerraC18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱。结果WatersXTerraC18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱使用的pH范围宽，对盐酸麻黄碱具有柱效高，峰形优异，稳定性好的优点。

3.4提取方法的选择本文曾采用直接加1%盐酸甲醇超声处理的方法制备样品溶液［5］，但在盐酸麻黄碱峰前后，有干扰峰，不易与盐酸麻黄碱分离。利用麻黄碱能溶于水，加碱后游离的麻黄碱能被三氯甲烷、乙醚等有机溶剂萃取,加酸后成盐复溶于水［4］，样品经碱化萃取后，除去了干扰峰。将轻身消胖丸加水溶解并碱化后，分别用三氯甲烷萃取，三氯甲烷液在下层，处理较方便。对加氨水的量也进行了比较，加7.5mL氨水，药液pH值已达12，符合碱化的要求。对萃取次数比较的结果显示萃取5次已经提取完全。

【参考文献】

［1］毛颐晴，俞小陶.高效液相色谱法测定咳喘宁口服液中麻黄碱的含量［J］.江苏药学与临床研究，2001，9(1)：23-24.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部［M］.北京：化学工业出版社，2005：224.

［3］赵大成，曲婷丽.高效液相色谱测定止嗽定喘口服液中盐酸麻黄碱的方法研究［J］.肿瘤研究与临床，2005，17(6)：394-396.

［4］祝璇,黄吉吉裕.HPLC测定咳喘宁口服液中盐酸麻黄碱的含量［J］.中成药，2005，4(27)：474-476.

［5］熊慧林，郑茂鑫.HPLC法测定克咳胶囊中盐酸麻黄碱的含量［J］.中国药事，2006，20(12)：749-750