桉树叶部病害鉴定

前言：本站为你精心整理了桉树叶部病害鉴定范文，希望能为你的创作提供参考价值，我们的客服老师可以帮助你提供个性化的参考范文，欢迎咨询。

本文作者：黄翠流1,2陈唯王1罗基同2谭学锋2杨秀好2韦继光1作者单位：1.广西大学农学院2.广西壮族自治区森林病虫害防治站

桉树Eucalyptusspp.属桃金娘科Myrtaceae桉属Eucalyptus植物，约上千种，自然分布在澳大利亚和塔斯马尼亚岛等地。桉树具有适应性强、生长快、轮伐期短、用途广泛等特点，联合国粮农组织推荐在全世界范围大力发展。现已有上百个国家引种，以印度、巴西、澳大利亚、中国为主要生产国。我国从1890年开始引种桉树，至今已有100多年的历史，目前以广西、广东、海南、浙江、福建和云南等省区为主，大力发展以速生桉为主的速生丰产林。广西栽培桉树开始于1965年，当时主要种植窿缘桉、柠檬桉和野桉等。20世纪90年代，随着桉树杂交种无性系大面积推广，广西速生桉人工林面积迅速增加，现已超过150万hm2。

1材料与方法

1.1病害标本的采集

2007—2010年在广西南宁、贵港、玉林、北海、崇左、来宾、河池、百色、桂林等速生桉种植地，广泛采集桉树叶部病害标本。

1.2病原菌鉴定

对不同症状类型进行病原菌的分离、培养、纯化及显微观察，对于非专性寄生菌通过柯赫氏法则验证，依据相关文献进行病原菌种类鉴定。对常规方法难以鉴定的病原菌，提取其DNA，对其ITS序列进行PCR扩增，扩增产物送到上海生物工程有限公司测序。在GenBank上用BLAST程序与已有菌物序列进行同源性比对，进行分子技术辅助鉴定。

2结果与分析

通过鉴定，初步探明了广西速生桉叶部真菌性病害10种，分别是:隐盘孢叶斑病、轮斑病、花斑病、黄紫斑病、焦枯病、紫斑病、圆斑病、灰斑病、炭疽病、灰霉病，其中前4种为我国新发现的病害。

2.1隐盘孢叶斑病

危害桉树叶片、嫩枝和顶梢，叶部病斑的大小、形状和颜色在桉树种间及种内都存在差异。例如，在广林9号桉上，至少出现4种不同的病斑:第1种，初为红紫色近圆形或不规则小斑，后不断扩大形成中间为红褐色，边缘黄褐色的病斑，病斑部分常增厚，有时病斑中央呈火山口状或溃疡状，条件适宜时，可在病斑上产生深褐色的子实体。第2种，病斑多数从叶缘开始发病，并向中间扩展，病斑浅黄褐色，这类病斑与焦枯病病斑很相似，但发病后期在病斑上可形成多轮浅褐色子实体。第3种，病斑发病初即出现不规则深褐色小斑，后不断扩大，病斑浅褐色至深褐色，病斑上可产生深色子实体。幼树顶芽受危害时可导致落叶或顶芽枯萎。第4种，初为近圆形或不规则小斑，后不断扩展，有些病斑产生子实体后似眼斑，多数叶缘病斑扩大并连接向叶中间扩展，也可形成与焦枯病相似的病斑，这类病斑可引起邓恩桉大量落叶。病原菌为Cryptosporiopsissp.。分生孢子盘暗色，厚壁，椭圆形到长椭圆形，突出;分生孢子梗简单，短或伸长;分生孢子无色，单胞，卵圆形到宽椭圆形，顶端钝圆，基部变小平截，分生孢子大小为(20.5～26.5)μm×(7～9.5)μm。PDA培养基上菌丝白色到乳白色，菌落生长较慢，近圆形，边缘气生菌丝茂盛，不整齐;后期菌落上可见从分生孢子盘内溢出的乳白色粘稠孢子堆［1－2］。

2.2轮斑病

主要危害叶片，感病叶片初期出现针头状紫色小斑，小斑逐渐扩大，中间淡黄褐色，边缘的病斑有一褪绿赤色晕圈;当条件适宜时，小病斑上可形成少量褐色至黑色子实体。多数叶缘病斑相连接后向叶片中间发展，形成的病斑类似焦枯病的病斑，但病斑有明显的轮纹，在每一轮纹上可形成一轮褐色至黑色子实体。病原菌是Pilidiella属的2个种，即:Pilidiellaeuca-lyptorumCrousetWingfield和P．diplodiella(Speg．)VanNiekerk。P．eucalyptorum的菌丝在PDA培养基上生长较快，菌落白色，接近中心常有一圈浅褐色菌丝;分生孢子器圆形或扁圆形，深褐色，有孔口，宽可达300μm，高可达240μm;分生孢子初为浅色，成熟后变深褐色，宽椭圆形，大小为(9～11)μm×(5～7)μm;P．diplodiella的菌丝在PDA培养基上生长快，菌落白色，分生孢子器球形或近球形，褐色，有孔口，宽可达375μm，高可达375μm;分生孢子无色或近无色，椭圆形，(11～14)μm×(4～5)μm［3］。两种病原菌经PCR扩增后，产物测序，得到两个ITS序列，其中一个共537bp，与桉小比利孢Pili-diellaeucalyptorum(收录号为AY339341.1)的ITS序列同源性最高，为99%;另一个序列共556bp，与P．diplodiella(收录号为GUO62317.1)的ITS序列同源性最高，为99%。经比较，形态鉴定和分子鉴定结果一致。

2.3花斑病

主要危害叶片，感病叶片多由叶缘开始发病，产生浅褐色、不规则形小斑，逐渐向叶片中部扩大，形成花边样病斑，病斑黄褐色，后期病斑上产生褐色子实体，病斑大面积枯黄时叶子脱落。该病常由植株基部开始发病，向上扩展。病原菌为Aureobasidiumsp.。该菌菌丝在培养基上一般不扩展，早期无色或淡色，以后变成暗色，在PDA培养基上生长时间较长时变黑色及光亮，且菌落稍微扩展;菌丝侧生茂盛的分生孢子，分生孢子初近无色，后变暗色，单胞，卵圆形，可芽殖产生新的分生孢子，大小为(2.3～6.5)μm×(2.5～4.0)μm［4］。

2.4黄紫斑病

危害叶片。感病叶片初期产生不规则淡黄绿色小斑，小斑不断扩展，后期小病斑连成大病斑，由淡黄绿色变为紫红色。在叶片背面病斑产生细密的黑色子实体，与煤污病的病症相似。在叶背病斑边缘常形成一圈愈伤组织状的突起，突起物初为绿色，后渐变成浅黄褐色，病斑后期扭曲可使病叶变形。病原菌为Phleosporasp.。分生孢子器生于叶片基质内，器壁不发达，大小为(91～130)μm×(103～140)μm;分生孢子细长，或两端尖削，常屈曲，有些卷曲如线虫，无色，成熟时有1～3个隔膜，大小为(33～68)μm×(1.3～1.5)μm［5］。

2.5焦枯病

主要危害桉树的叶片、嫩茎和枝梢。感病叶片初期出现针头状水渍小斑，当条件适宜时，病斑逐渐扩大，形成2种典型的病斑。第1种是变为灰绿色，中间淡黄褐色，病斑的边缘有一褪绿水渍晕圈;后期病斑中部变成浅色轮纹状或不明显，多数叶缘的病斑连接，然后向中间发展，病叶焦枯变脆易裂。第2种是变为黄褐色，病斑边缘有一退绿赤色晕圈，多个小斑连成大斑，使病叶呈现花斑状。病叶常卷曲皱缩，呈焦枯变脆易裂状。严重感病的苗木可导致叶片全部脱落、顶枯。茎部病斑表皮出现长条形或近圆形的浅色小褐斑，常凹陷，后期病斑变为深褐色，向四周扩展，环绕茎部，有些病斑表皮开裂。在高温高湿条件下，尤其靠近地面的病茎部或病叶上密布白色霜状物，是病原菌的孢子堆。病原菌在PDA培养基上生长迅速，气生菌丝丰富，绒毛状，初为乳白色，后变褐色，埋生菌丝淡褐色至暗褐色;分生孢子梗直立无色，有分隔，帚状分枝，多为3级分枝，典型的有细而伸长的不孕分枝，端生棒状、梨形、椭圆形、倒卵球形和近球形的泡囊;瓶梗桶形或肾形;分生孢子无色，双细胞或多细胞，圆柱形。根据形态学鉴定，病原菌为Cylindrocladium属的3个种，即C.quinqueseptatumBoed.etReit，C.scopariumMorgan，C.floridanumSobersetSey-mour，三者的主要区别见表1［6－7］。

2.6紫斑病

病叶背面先出现分散或较密集的多角形或不规则形黄绿色小病斑，叶面还呈正常绿色。但当条件适宜时，病斑背面产生大量的分生孢子器并大量产孢，暗褐色或近黑色卷须状的孢子角在叶背和叶面形成黑色煤烟状物，与煤污病的病症相似。通常情况下病斑由黄绿色变成紫色，病斑两面生，后期病斑可相连成片，形成灰褐色大病斑;在U6速生桉病叶上出现深紫色病斑，且病叶出现明显变形。病原菌是Phaeoseptoriaeucalypti。分生孢子器多数叶背生，暗色，球状，分开，有孔口，(100～138)μm×(88～128)μm;分生孢子简单，黄色到浅褐色，棒状、柱状拟纺锤形，常具(1－)3～5(－7)个分隔，大小为(40～72)μm×(3.8～5.5)μm，孢子壁略粗糙［8－9］。

2.7圆斑病

主要危害叶片，发病初期在叶片上形成针头状小圆斑，逐渐扩大成紫红色斑点，后期病斑相连并渐变为灰褐色，有时病斑边缘有较宽的紫红色圈;春季产孢时叶斑上常出现白色粉状物，即病菌的分生孢子堆;末期病叶变枯并从枝条上脱落下来，病害严重时可导致枝条枯死。病原菌是Pseudocercosporasp.。病原菌在PDA平板上生长较缓慢，菌落近圆形，边缘整齐，菌丝深绿色。菌丝体内生，无或有子座，褐色。分生孢子梗多根丛生于子座上面，浅褐色，无或有分枝，隔膜有或无，直立或弯曲，顶端变小，孢痕有时明显。分生孢子单生，倒棍棒形、圆柱形，近无色，浅黄色或淡褐色，正直或弯曲，具3～5隔膜，顶端略尖或钝圆，基部倒圆锥形，脐点不明显加厚，大小为(26.5～70)μm×(2.5～5)μm［4］。病原菌经PCR扩增后，产物测序，该菌的ITS序列长度为513bp，与桉树病原假尾孢Pseudocer-cosporachiangmaiensis(收录号为EU882130.1)的ITS序列同源性为99%。形态特征与泰国记载清迈假尾孢Ps.chiangmaiensis相符合［10］，故鉴定为清迈假尾孢Ps.chiangmaiensisCheewangkoonK.D.Hyde＆Crous。

2.8灰斑病

发病叶片初期产生浅褐色近圆型或不规则小斑，后病斑不断扩大，边缘病斑常连成大病斑，病斑边缘有一紫色晕圈。后期病斑上产生深色子实体，病斑渐变为灰褐色。病原菌属无性态真菌，叶点霉Phyllostictalin-dericola。分生孢子器暗色，有孔，两面凸到球形;分生孢子梗短，分生孢子近圆形、椭圆形、两端钝圆，单胞无色，内含多数细小颗粒，分生孢子大小为(5～9)μm×(4～5)μm［11］。

2.9炭疽病

感病叶片通常从叶缘开始发病，叶片大面积变为黄绿色，后渐变为浅褐色至褐色，病斑边缘出现红褐色晕环，但病斑上的侧脉呈浅褐色，当条件适宜时，斑面溢出粉红色粘稠分生孢子团。后期病斑扩大，导致病叶卷缩变形。病原菌是Colletotrichumgloeosporioides。病原菌在PDA培养基上菌落圆形，边缘整齐，气生菌丝浓密，初为白色，后为灰白色;分生孢子盘蝶形或垫形，近表生;分生孢子团呈橘红色;分生孢子梗简单，伸长;分生孢子单胞无色，卵圆或长圆形，两端钝圆，部分有1～2个油球，大小为(13.8～17.5)μm×(3～5)μm;附着胞椭圆形或不规则，大小为(6～15)μm×(4～8)μm［12］。病原菌经PCR扩增后，产物测序，该菌的ITS序列长度为558bp，与胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides(收录号为AY266387.1)的ITS序列同源性为99%。

2.10灰霉病

病菌危害速生桉苗的嫩梢、幼茎和嫩叶。发病组织初呈浅褐色，水渍状软腐，后期溃烂。叶片受害后出现透明黄色小点，可迅速扩展为灰色至褐色大斑块，后全叶变枯。茎部受害时，出现暗绿色水渍条斑，后变褐色，略凹陷，最后腐烂。幼苗多在2d内全株感病。感病苗木常在发病部位折倒，最后整株死亡。病原菌属无性态真菌，灰葡萄孢菌Botrytiscinerea。该菌分生孢子梗直立，粗大，淡褐色，分枝，近顶部常二叉状，顶部细胞扩大或圆形，在短梗上密生小梗，聚生大量分生孢子。分生孢子团呈葡萄穗状，分生孢子近无色或淡灰褐色，单胞，近椭圆形或卵圆形，大小为(7.5～16)μm×(5～9.5)μm［13－14］。

3讨论

据报道［13，15－17］，广西速生桉主要叶部病害有焦枯病、紫斑病、叶斑病、炭疽病、叶尖枯病、角斑病、灰斑病和黑斑病等。本文中Cylindrocladiumflorida-num是我国桉树焦枯病病原的新纪录，隐盘孢叶斑病、轮斑病、花斑病、黄紫斑病未见报道，为我国新发现病害。经调查发现，广西速生桉叶部病害种类在增加，发病面积和危害程度也在加剧，多种病害同时同地发生。隐盘孢叶斑病和花斑病的发生，严重影响桉树的生长，直接造成林分产值下降，因此，对这些病害应作更加详细地调查，以掌握其病害流行规律及进一步研究病原菌的特性，为病害的防治提供重要依据。