沙棘与浆果协同抗老研究

前言：本站为你精心整理了沙棘与浆果协同抗老研究范文，希望能为你的创作提供参考价值，我们的客服老师可以帮助你提供个性化的参考范文，欢迎咨询。

本文作者：焦岩1常影1王振宇2作者单位：1.齐齐哈尔大学食品与生物工程学院2.哈尔滨工业大学食品科学与工程学院

沙棘又名醋柳、酸刺子，为胡颓子科沙棘属多年生落叶灌木或小乔木[1]。据报道，沙棘中含有维生素类、糖类、氨基酸类、不饱和脂肪酸、多酚类、黄酮类、SOD、5-羟色胺以及各种微量元素等，具有抗氧化、抗衰老、提高免疫等多种作用[2-4]。蓝莓、蓝靛果、山葡萄中都含有大量的花色苷类物质，抗氧化、降血脂、抗衰老等多项生理功能[5-7]。本研究利用大果沙棘乙醇提取物分别和蓝莓、蓝靛果以及山葡萄的乙醇提取物进行复配，比较复配后各组间的抗衰老效果及各有效成分间的协同抗衰老作用，为营养保健食品开发和抗衰老药物的筛选提供了参考。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1主要原料与试剂

大果沙棘鲜果、蓝莓果：黑龙江省孙吴县林业局；蓝靛果、山葡萄：吉林长白山地区。4种浆果分别经低温烘干后，粉碎至40目，70%乙醇超声波浸提30min，提取3次后，过滤、浓缩成一定体积的提取物水溶液，放入4℃冰箱备用。SOD、GSH-PX和MDA试剂盒：南京建成生物工程研究所；其他试剂：市售AR级。

1.1.2实验动物

昆明种小鼠，雌雄各半，体重(22±3)g，共112只，黑龙江省兽医研究所提供。1.1.3主要仪器与设备离心机，水浴锅，游泳箱，电子天平，756PC紫外/可见分光光度计，超声波提取器等。1.2方法

1.2.1动物分组与衰老动物模型制备

动物分组：将喂养1个月小鼠随机分为7组，生理盐水(CTL)组、D-半乳糖衰老模型(Ⅰ)组、大果沙棘(Ⅱ)组、大果沙棘+蓝莓(Ⅲ)组、大果沙棘+蓝靛果(Ⅳ)组、大果沙棘+山葡萄(Ⅴ)组、大果沙棘+蓝莓+蓝靛果+山葡萄(Ⅵ)组。动物模型的建立：将小鼠适应性喂养1个月后，衰老模型组和各复合制剂组皮下注射25%的D-半乳糖溶液125mg/kg•d，连续28d；空白组每日皮下注射等剂量0.9%生理盐水1次，连续28d。给药方法：大果沙棘、蓝莓、蓝靛果、山葡萄提取液每天分别按3.0g/kgbw等体积灌胃，衰老模型组和对照组灌胃等体积的生理盐水。实验组灌胃不同剂量的受试物水溶液。动物自由摄食和饮水，每鼠日灌胃量0.15mL/10gbw，连续灌喂28d。

1.2.2指标测定

末次给药2h后眼眶采血于试管中，低温冷藏备用。取血后处死动物，取脑和肝脏制成匀浆，4000r/min离心15min，取上清液用Bradford法测蛋白质含量[8]。血清和组织中的SOD、GSH-PX的活性及MDA的含量测定均按试剂盒方法进行。

1.2.3数据分析

采用SPSS10.0统计软件进行方差分析和t检验。

2实验结果

2.1大果沙棘复合制剂对小鼠体重的影响

小鼠连续灌胃28d以后，与生理盐水(CTL)组相比，D-半乳糖衰老模型(Ⅰ)组小鼠的体重增加缓慢。大果沙棘各复合制剂组实验组和生理盐水(CTL)组相比体重增加也比较缓慢，但增加量要高于D-半乳糖衰老模型组，结果见表1。说明大果沙棘复合制剂可抑制D-半乳糖衰老模型小鼠体重的增加，具有一定的减肥功能。

2.2大果沙棘复合制剂对小鼠血清和组织匀浆SOD活性的影响

与生理盐水(CTL)组相比，D-半乳糖衰老模型(Ⅰ)组小鼠血清和肝、脑器官组织中的SOD活性显著低于生理盐水(CTL)组(P<0.01)；和衰老模型(Ⅰ)组相比，灌服大果沙棘各复合制剂组(Ⅱ-Ⅵ)小鼠的血清、肝脏和脑组织中SOD活性的明显增强(P<0.05)；且复合制剂各组小鼠体内SOD活性和沙棘(Ⅱ)组相比均有所升高，Ⅵ组SOD活性最高且差异显著(P<0.05)，结果见表2。说明大果沙棘和与之复配的各复合制剂可提高半乳糖衰老小鼠血清、肝脏和脑中SOD活性，并抑制模型小鼠体内SOD活性的下降，且各复合制剂具有协同增效的作用，Ⅵ组作用最强。

2.3大果沙棘复合制剂对小鼠血清和组织匀浆GSH-Px活性的影响

与生理盐水(CTL)组相比，D-半乳糖衰老模型(Ⅰ)组小鼠血清和肝、脑器官组织中的GSH-Px活性显著低于生理盐水(CTL)组(P<0.01)；与衰老模型组相比，各复合制剂组小鼠血液、肝脏和脑中的GSH-Px活性均有显著升高(P<0.05)，Ⅵ组小鼠的GSH-Px活性升高极其显著(P<0.01)；各复合制剂组和沙棘(Ⅱ)组相比，小鼠血液、肝脏和脑中的GSH-Px活性都较高，Ⅵ组差异显著(P<0.05)，结果见表3。实验结果表明，大果沙棘和与之复配的各复合制剂可提高半乳糖衰老小鼠血清、肝脏和脑中GSH-Px活性，沙棘与其他制剂配伍后能协同抑制模型小鼠体内GSH-Px活性降低的作用，Ⅵ组协同效果最好。

2.4大果沙棘复合制剂对小鼠血清和组织匀浆MDA含量的影响

与生理盐水(CTL)组相比，D-半乳糖衰老模型组小鼠(Ⅰ)血清、肝脏和脑中MDA含量显著升高(P<0.01)，而灌而灌服大果沙棘各复合制剂组(Ⅱ-Ⅵ)的小鼠血清、肝脏和脑中MDA含量均明显低于半乳糖衰老模型(Ⅰ)组(P<0.05)，且各复合制剂组MDA含量均和沙棘(Ⅱ)组相比均有所降低，Ⅵ组降低差异显著(P<0.05)，结果见表4。说明大果沙棘和与之复配的各复合制剂均有降低半乳糖衰老小鼠血清、肝脏和脑组织中MDA含量作用，Ⅵ组复合制剂产生的协同效果最佳。

3讨论

衰老(Aging)是多因素协同引起的生命渐趋弱化的过程，可引起生理功能相应减弱、适应能力和抵抗力下降等综合表现。关于衰老的机制解释很多，其中起主导地位的自由基学说认为：体内许多物质代谢中产生过氧化的自由基，使机体内的自由基处于不平衡状态，过量的自由基就会引起机体损伤，会引起不饱和脂肪酸氧化成超氧化物，形成脂褐素，氧自由基过多会破坏细胞膜及其他重要成分，使蛋白质和酶变性，当自由基引起的损伤积累战胜了机体的修复能力，导致细胞分化状态的改变、甚至丧失，从而导致和加速衰老[9-12]。SOD是体内清除自由基的重要抗氧化酶，可以保护细胞免受损伤，随着年龄的增长，体内SOD活性逐渐降低，故SOD活力的高低与衰老密切相关。GSH-Px是动物体内一种具有抗氧化作用的酶，保护细胞膜不受脂类代谢副产物、氧化自由基的破坏。MDA是机体脂质过氧化作用产生的脂质过氧化物，它可能引起细胞代谢及功能障碍甚至死亡，其含量与细胞损伤的程度呈正相关，可间接反映出机体受自由基攻击的严重程度[13]。国内外已经有大量的研究证明了沙棘、蓝靛果、蓝莓、山葡萄在清除自由基、抗氧化、延缓衰老等方面的显著作用，但都是对单一成分功能的报道。根据传统理论：配伍用药优于单味药，多靶点优于单靶点。而无论是单味中药或复方，它们的物质基础是生物活性物质群，这些活性物质群按一定要求配伍组合，作用于多个靶点，经多途径的整合而发挥作用，才能呈现多效性[14-15]。本研究通过实验结果证明，大果沙棘及其复合制剂能显著提高D-半乳糖衰老模型小鼠的血液、肝脏和脑中的SOD和GSH-Px活性，降低衰老模型小鼠体内血液、肝脏和脑中过氧化脂质产物MDA的含量(P<0.05)，进而说明大果沙棘及其复合制剂具有较好的清除氧自由基，防止脂质过氧化作用而产生的脂质过氧化物，对细胞代谢及功能具有保护作用，抗衰老作用明显。对各复合制剂抗衰老效果进行综合比较，各组大小依次为Ⅵ>Ⅳ>Ⅲ>Ⅴ>Ⅱ。其中，大果沙棘+蓝莓+蓝靛果+山葡萄(Ⅵ)组和沙棘组相比抗衰老效果极其显著(P<0.01)，究其原因，可能是由于复合制剂中的各组分作用靶点和强度不同，几种作用靶点不同的功能制剂组合后能以协同、整合方式对抗衰老的多个作用靶点发挥增强作用，所以产生更好的抗衰老效果。但其作用机理还不明确，还应从细胞及分子水平进一步研究。