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【摘要】目的观察苦石莲不同提取物的抗炎镇痛作用。方法用二甲苯致小鼠耳肿胀法和角叉菜胶致大鼠足肿胀法研究抗炎作用,用热板法和扭体法研究镇痛作用。结果苦石莲醇提取物8g/kg、氯仿提取物4,8g/kg对小鼠二甲苯致耳肿胀及角叉菜胶致大鼠足肿胀有抑制作用;苦石莲醇提取物4,8g/kg、氯仿提取物4,8g/kg能减少冰乙酸致小鼠扭体次数和提高热板致痛小鼠痛阈值。结论苦石莲具有显著的抗炎和镇痛作用。
【关键词】苦石莲;抗炎;镇痛
苦石莲为豆科云实属植物喙荚云实(南蛇勒)CaesalpiniaminaxHance的种仁,性凉、味苦,有清热解毒、化湿、散淤止痛功效,主治风热感冒、痢疾、淋浊、痈肿、跌打损伤等症,主要分布于广西、广东、福建等省区,被广西、贵州等省区的中药材标准收载[1]。近年来,Ren等[2]从苦石莲中分离鉴定了多个二萜类化学成分。本实验首次评价了苦石莲乙醇和氯仿提取物对小鼠耳肿胀、大鼠足肿胀及小鼠疼痛的影响,并与阿司匹林、罗通定进行了比较,以期为进一步开发苦石莲奠定基础。
1材料
1.1实验动物
NIH小鼠,雌雄各半,18~22g,SPF级,由广东省医学实验动物中心提供,合格证号:2006A017。SD大鼠,雄性,160~180g,SPF级,由广东省医学实验动物中心提供,合格证号:2006A015。
1.2药物及试剂
苦石莲药材,采自广西省南宁市,经广西药用植物园袁经权副研究员鉴定为CaesalpiniaminaxHance的种仁。苦石莲药材分别以8倍量乙醇和氯仿加热回流提取3次,1h/次,合并提取液回收溶剂,即得供试样品,阿司匹林片:河北石家庄制药集团生产,批号061114;罗通定片,广州康和药业有限公司生产,批号:071001;二甲苯,广东光华化学厂有限公司生产,批号20050218;角叉菜胶,东京化工业株式会社生产,用生理盐水配成1%溶液;冰醋酸,广东光华化学厂有限公司生产,批号:20041214。
1.3仪器
PV-200足趾容积测量仪,成都泰盟科技有限公司产品;YLS-6A型智能热板仪:山东省医学科学院设备站提供。
2方法
2.1对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
[3]取NIH小鼠96只,雌雄各半,体质量18~22g,随机分为空白对照组,苦石莲醇提取物低、中、高剂量组,苦石莲氯仿提取物低、中、高剂量组,阳性对照药物(阿司匹林)组,共8组,每组12只,各组大鼠按0.2ml/10g体重灌胃给药,1次/d,共7d,其中空白对照组给予等体积蒸馏水。末次给药30min后,各组小鼠于右耳正反面涂上二甲苯20μl致炎,1h后将小鼠颈部脱臼处死,用直径7mm的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片,分析天平称重,求左、右耳片重量差值为肿胀度,比较组间差异。
2.2对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响
取SD雄性大鼠96只,体重180~220g,随机分为空白对照组,苦石莲醇提取物低、中、高剂量组,苦石莲氯仿提取物低、中、高剂量组,阳性对照药物(阿司匹林)组,共8组,每组12只,各组小鼠按0.2ml/10g体重灌胃给药,1次/d,共7d,其中空白对照组给予等体积蒸馏水。末次给药30min后,用1%角叉菜胶50μl/只皮下注射于左后足跖部致炎,于致炎后1,2,3,4h以鼠足容积测定装置分别测量肿胀足爪容积,计算肿胀率。
2.3对醋酸所致小鼠扭体反应的影响
取NIH小鼠96只,雌雄各半,体质量18~22g,随机分为空白对照组,苦石莲醇提取物低、中、高剂量组,苦石莲氯仿提取物低、中、高剂量组,阳性对照药物(阿司匹林)组,共8组,每组12只,各组小鼠按0.2ml/10g体质量灌胃给药,1次/d,共7d,其中空白对照组给予等体积蒸馏水。末次给药30min后,每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml,记录小鼠15min内扭体反应次数(以小鼠出现腹部内凹、躯干与后肢伸张,臀部高起为扭体反应)。
2.4热板法取NIH雌性小鼠,体质量18~22g,置于热板上,记录小鼠自热板上至出现舔后足反应所需的时间,即为痛阈值。凡小于5s或大于30s及跳跃者均淘汰。按上述方法筛选出96只小鼠,随机分为空白对照组,苦石莲醇提取物低、中、高剂量组,苦石莲氯仿提取物低、中、高剂量组、阳性对照药物(罗通定)组,共8组,每组12只,各组小鼠按0.2ml/10g体质量灌胃给药,1次/d,共7d,其中空白对照组给予等体积蒸馏水。末次给药后45min、1h分别测定痛阈值。
3结果
3.1对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
结果见表1。与空白对照组相比,苦石莲醇提取物高剂量组,氯仿提取物中剂量、高剂量组对二甲苯所致小鼠耳肿胀均有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01),肿胀抑制率随剂量递增而增强。表1苦石莲对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(略)
3.2对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响
结果见表2。苦石莲醇提取物高剂量组对角叉菜胶致大鼠足肿胀与空白对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),说明苦石莲醇提取物高剂量对角叉菜胶致炎后2、3、4h时大鼠的足肿胀有明显的抑制作用。苦石莲氯仿提取物中剂量、高剂量对角叉菜胶致大鼠足肿胀均有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01),且高剂量作用从致炎后1h开始,可持续至4h。表2苦石莲对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响(略)
3.3对醋酸所致小鼠扭体反应的影响
结果见表3。苦石莲醇提取物中、高剂量组,苦石莲氯仿提取物中、高剂量组小鼠的扭体次数与空白对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),说明苦石莲能减少醋酸所致的小鼠扭体反应,提示其有镇痛作用。表3苦石莲对醋酸所致小鼠扭体反应的影响(略)
3.4热板实验
结果见表4。苦石莲醇提取物中、高剂量组,苦石莲氯仿提取物中、高剂量组与空白对照组相比,给药后45min痛阈值和1h痛阈值均有显著性提高(P<0.05或P<0.01),提示苦石莲对热板致痛小鼠有镇痛作用。表4苦石莲对热板法小鼠痛阈值的影响(略)
4讨论
苦石莲是我国中医传统用药,具有广泛的药理活性,为进一步阐明其确切的药理作用,笔者对苦石莲采用不同的提取方法并进行相关实验研究,实验结果表明苦石莲乙醇和氯仿提取物均有明显的抗炎镇痛作用,为进一步开发苦石莲奠定了一定的基础,其作用机理有待进一步研究。超级秘书网:
【参考文献】
[1]国家中医药管理局.中华本草Ⅳ[M].上海:上海科学技术出版社,1998:374.
[2]RenWJ,ShuangCM,PaulPH,etal.NewantiviralcassanefuranoditerpenesfromCaesalpiniaminax[J].JNatProd,2001,64(10):1266.
[3]张大方.药理与中药药理实验[M].上海:上海科学技术出版社,2002:93