略说小鼠阴茎实验的方法与结果

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一、方法

1．分组

依据电凝时功率（W）／电凝持续时间（s）／电凝间隔时间（s）3个变量组合将100只KM小鼠随机分为七组（每只小鼠的电凝次数固定为5次）。组1－20W／0．5s／0．5s；组2－40W／0．5s／0．5s；组3－20W／1．0s／1．0s；组4－30W／0．5s／2．0s；组5－30W／1．0s／1．0s；组6－40W／0．5s／2．0s；组7为空白组。对除组7外的六组进行单极高频电凝对小鼠阴茎、肾脏、睾丸损伤的病理实验研究。空白组不做电凝处理，实验结束时与实验组同时取上述三脏器做病理检查。实验组每组16只，其中电凝后即刻处死4只，3d后处死8只，15d后处死4只。

2．小鼠阴茎、肾脏、睾丸电凝损伤动物模型的建立

将小鼠称重后按4ml／kg计算麻醉剂量，然后以10％水合氯醛腹腔麻醉。使用电动推及脱毛膏对小鼠阴囊及背部备皮，术者用无菌镊子夹持皮肤，眼科无菌剪刀将小鼠右侧阴囊纵行剪开一约0．5cm刀口，逐层分离阴囊壁各层直至鞘膜。助手置小鼠于右手掌，右手拇指轻轻挤压小鼠腹腔，借助腹腔压力及重力将右侧睾丸挤出。开启高频电刀机，调节功率，准备计时器，接着，以左手食指及拇指捏住小鼠双耳，小鼠仰卧位置于绝缘手术台，右手持电刀刀柄，开始电凝。电凝时，助手右手拇指同时接触电刀开关和秒表开关，观察秒表的时间显示，到规定时间同时放开拇指。统一电凝睾丸中1／3前部5次。电凝后术者将睾丸轻轻回纳入阴囊，以丝线将阴囊皮肤全层间断缝合。接着同样方式电凝阴茎侧面包皮，我们选择靠左上方。然后将小鼠翻过，背侧皮肤安尔碘消毒，术者于背部略靠右方横行切开小鼠皮肤，暴露皮下，切口约1cm，于紧靠脊柱附近横行剪开背部肌肉，此时可看到右侧肾脏埋于肝脏内下方，助手以右手食指轻轻将小鼠腹侧向背侧托起，使肾脏挤出，然后小鼠俯卧位置于绝缘手术台，左手捏双耳，右手持刀柄，以同样方式电凝肾脏的下极5次。回纳右肾，丝线分别间断缝合皮下肌肉及皮肤。手术完成后，立即将小鼠保温麻醉复苏。每组小鼠置于同一笼内饲养。

3．小鼠器官病理切片的切取及保存

造模后，分别于术后即刻、3d、15d，将小鼠断颈处死，3min内迅速取其脏器，打开阴囊，分离出睾丸，然后沿阴茎根部剪下阴茎，最后背部沿伤口处打开皮肤、肌肉，分离肾脏并取出，浸泡在10％的甲醛溶液中。4．病理切片的制作及电凝后显微镜下观察：观察切片结果后均请苏大附一院病理科两位主治以上医师进行核实，以确定观察结果。通过显微镜下的标尺精确测量坏死面积，以坏死区的长轴与短轴的乘积表示，在40倍物镜下，通过目镜内纵向及横向刻度测量坏死面积，计算时两者相乘，以mm2为单位。

二、实验病理结果

高频电凝小鼠阴茎、肾脏、睾丸即刻病理结果：小鼠的阴茎、肾脏、睾丸表面出现细胞消失，结构破坏；内部均出现了不同程度的血管扩张、淤血，但均未发现坏死。阴茎：电凝阴茎包皮后，病理表现烫伤部位呈空泡状，结构混乱。而阴茎海绵体内可见明显的血管扩张伴淤血。肾脏：肾脏表面出现电凝造成的机械损伤，表现为细胞结构消失，残余结构染色加深，实质内肾小球及肾小管无明显改变，深处血管轻度扩张伴淤血。睾丸：电凝部位呈现空泡状，结构混乱，伴出血，靠外层的曲细精管受到机械挤压，睾丸血管可见扩张淤血。

作者:李云龙叶章群李巧星何玮桂萌王伟录王勇郑红芳严春寅单位：苏州大学