脑出血病患免疫变化规律

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本文作者：周路球马真石小峰尹夕龙贾军纠智松陈国昌孙大勇作者单位：广东省深圳市龙岗中心医院神经外科

脑出血是脑外科情况最危急、预后也较差的疾患之一，若出血破入脑室还会形成血肿，造成梗阻性脑积水，引起急性颅内压增高，使患者症状迅速恶化，出现脑疝死亡，经抢救存活的患者也常常遗留肢体和语言功能障碍，严重威胁着患者的身体健康及生命质量［1］。创伤后免疫功能的改变可以影响机体的防御功能和康复效果。红细胞除了具有其基本的生理功能外，在机体免疫及防护方面也起到极为重要的作用。本次研究通过观察脑外伤后患者血液中红细胞免疫促进因子、免疫抑制因子及T淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+）免疫黏附功能的变化及规律，了解其与预后的关系，为今后临床病情判定、预后的预测提供依据。

1对象与方法

1.1研究对象

选取2010年1月～2011年9月到我院就诊的脑出血患者64名作为病例组。所有患者的诊断依据第四届脑血管病学术会议制定的诊断标准［2］，同时配合CT或MRI检查结果，由两名主治医生及以上的医师确诊。病例组脑出血部位分布情况：基底节38例（59.38%）、脑叶15例（23.44%）、脑干6例（9.37%）、小脑5例（7.81%）。神经功能的损伤程度划分标准依据《脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准》［3］，分为轻度20例（31.25%）、中度26例（40.63%）、重度18例（28.12%）。以年龄、性别为匹配条件，选择健康家属60例作为对照组。所有的研究对象均签署知情同意书，并且调查前2周未使用免疫增强剂及免疫抑制剂，排除有可能引起免疫异常的疾病。

1.2方法

1.2.1仪器与试剂

采用美国Beckman-coulter公司的EpicsImmunologyWorkstation流式细胞分析仪。试剂也采用美国Beckman-coulter公司的三色单抗、生物标记抗小鼠IgG及标准荧光微球。

1.2.2检测方法

取研究对象清晨空腹静脉血2ml置于干燥管及抗凝管中混匀，将干燥管中的标本参照文献［4］提供的方法对红细胞C3b受体花环率（RBC-C3bRR）、红细胞免疫复合物花环率（RBC-ICR）、红细胞免疫促进因子（RFER）、红细胞免疫抑制因子（RFIR）进行检测。对抗凝管中的标本进行T细胞亚群的检测，方法参考文献［5］：每50μl标本加入5μl的单克隆抗体，打开流式细胞仪及氩离子激光光源（488nm），预热20min，仪器自动初始化，用标准荧光微球进行光路与流路标准，所有荧光信号的变异系数（CV）均小于2%，在前向散射光（FS）和侧向散射光（SS）散点图中圈定细胞群，选择淋巴细胞为分析对象，去除细胞碎片，用阴性对照确定荧光阴性范围及PMT电压标准，颜色补偿，每份标本测定5000个细胞，全部数据用流式细胞仪和软件SYSTEMⅡ获取和分析。

1.3统计分析

采用SPSS16.0软件进行统计分析，计量资料两组间的比较采用t检验，多组间采用方差分析，计数资料的比较采用χ2检验。

2结果

2.1研究对象一般情况分析

病例组平均年龄（38.78±11.56）岁，男女性别比为2.76︰1；对照组平均年龄（37.16±10.74）岁，男女性别比为3︰1。两组的平均年龄及性别分布差异无统计学意义（P﹥0.05）。见表1。

2.2红细胞免疫黏附功能及红细胞免疫调节因子比较

病例组与对照组RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差异有统计学意义（P﹤0.001）见表2；按照神经功能损伤程度分层后比较，不同损伤程度RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差异也有统计学意义（P﹤0.01）见表3。

2.3T细胞亚群比较

病例组与对照组CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差异有统计学意义（P﹤0.01）见表4；按照神经功能损伤程度分层后比较，不同损伤程度CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差异也有统计学意义（P﹤0.01）见表5。

3讨论

脑出血在脑外科较为常见，常威胁患者生命，出血破入脑室还会形成血肿，造成梗阻性脑积水，引起急性颅内压增高，使患者症状迅速恶化，出现脑疝死亡，经抢救存活的患者也常常遗留肢体和语言功能障碍，因此对病情及预后尽早判断有非常重要的意义。脑出血后导致细胞免疫功能变化，其机制一般认为是由于脑出血可引起下丘脑-垂体-肾上腺轴功能活动增强，产生大量的促肾上腺皮质激素，通过其对外周血红细胞或T淋巴细胞上的高亲和力受体直接抑制免疫功能，促肾上腺皮质激素能增强皮质醇的生成，是免疫细胞活化的抑制剂，可以抑制细胞免疫［6］。

红细胞最主要的免疫功能是免疫黏附作用，红细胞表面存在C3b受体，可黏附循环中的抗原-抗体-补体复合物（IC），旁路激活黏附补体的抗原，使IC不易在组织中沉积，从而失去了沉积于血管内皮细胞或基底膜所产生的致病性。红细胞被认为是对异物和IC起免疫黏附作用的主要细胞，红细胞也参与机体免疫功能的调控［7］。本研究结果发现，病例组与对照组RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差异有统计学意义；按照神经功能损伤程度分层后比较，不同损伤程度RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差异也有统计学意义，属于继发性红细胞免疫功能低下，其原因这可能是因为脑出血患者血液中出现大量循环免疫复合物（CIC）。脑外伤出血部位释放的抗原产生抗体、病原体等进入血液，与红细胞上的补体受体相结合，从而导致红细胞清除免疫复合物能力下降，这些抗原抗体复合物也可沉积在脑血管网中，释放血管活性物质，引起脑血管痉挛，或激活补体系统加重脑血管的损害［8］。

此外，病例组与对照组CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差异有统计学意义，按照神经功能损伤程度分层后比较，不同损伤程度CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差异也有统计学意义，脑出血患者CD3+、CD4+、CD4／CD8低于对照组，并且随病情加重下降趋势更加明显，提示脑出血患者细胞免疫功能随病情的加重也逐渐下降。

综上所述，脑出血患者的红细胞免疫功能及T细胞免疫功能均出现降低，这些指标对判断病情严重程度及预后有一定的临床意义。